预先电刺激小脑顶核对缺血心肌神经生长因子基因表达的影响

目的:观察预先电刺激小脑顶核对心肌梗死大鼠心脏神经生长因子mRNA表达的影响.方法:实验于2003-03/06在重庆医科大学附属第一医院心血管疾病研究所完成.选用Wistar大鼠98只.将其中90只随机分为3组,每组30只:①心肌梗死组,结扎左冠状动脉前降支.②电刺激小脑顶核组,预先电刺激小脑顶核1 h再予以左冠状动脉前降支结扎.③毁损小脑顶核组,毁损小脑顶核5 d后电刺激小脑顶核1 h,再行左冠状动脉前降支结扎.又分左冠状动脉前降支结扎后1,7,21 d 3个时间点,各10只.另设假手术组(n=8).各组于相应时间点处死大鼠后,取心肌梗死区和非梗死区组织标本,用反转录-聚合酶链反应技术检测标本神经生长因子mRNA表达.结果:去除死亡、心肌未梗死、小脑顶核电刺激或毁损失败的大鼠,终54只大鼠资料完整,心肌梗死组、电刺激小脑顶核组、毁损小脑顶核组、假手术组分别为13,20,13,8只.①结扎左冠状动脉前降支后1,7,21 d,梗死区神经生长因子mRNA表达量:心肌梗死组明显低于假手术组(q=10.047,13.869,7.044,P＜0.01);电刺激小脑顶核组明显高于心肌梗死组(0.42±0.07,0.46±0.07,0.51±0.08;0.26±0.08,0.19±0.06,0.36±0.07,q=5.358,9.888,4.822,P＜0.01);毁损小脑顶核组与心肌梗死组比较无明显差异(P＞0.05).②心肌非梗死区1,7,21 d神经生长因子mRNA表达:心肌梗死组均明显低于假手术组和电刺激小脑顶核组(0.36±0.07,0.30±0.07,0.36±0.07;0.56±0.07,0.56±0.07,0.56±0.07;0.49±0.09,0.46±0.08,0.59±0.09,q=4.099～8.947,P＜0.01);毁损小脑顶核组神经生长因子mRNA的表达量与心肌梗死组比较无明显差异(P＞0.05).结论:大鼠心肌梗死后梗死区与非梗死区神经生长因子mRNA表达下调,电刺激小脑顶核可上调神经生长因子mRNA表达,起到神经保护作用.

三种腺苷受体mRNA表达与哮喘发病及第1秒用力呼气值的相关性

目的:通过诱导痰技术检测3种腺苷受体mRNA的表达与哮喘发病及第1秒用力呼气值的相关性.方法:实验于2003-10/2004-06在南京大学医学院附属鼓楼医院中心实验室完成.选择该院呼吸科门诊及住院患者9例(哮喘组),女7例,男2例;均无吸烟史,至少1个月内未用过糖皮质激素类药物.选择南京大学医学院研究生和职工9例为正常组,皆为健康正常人,无吸烟及过敏性疾病史.实验经本院伦理委员会批准,并与受试者签定知情同意书.取两组对象的诱导痰;贴壁法分离和纯化巨噬细胞及炎性细胞,并计算相对构成计数的百分比;利用反转录-多聚酶链反应技术和图像分析半定量法检测诱导痰肺泡巨噬细胞腺苷受体mRNA的表达;计算第1秒用力呼气量占预测值百分比与腺苷受体mRNA的相关性.结果:按意向处理分析,18例均进入结果分析.①哮喘组诱导痰肺泡巨噬细胞表达A1及A2b和A3腺苷受体mRNA吸光度积分扫描相对比值均明显高于正常组(0.44±0.11,0.48±0.07,0.48±0.11;0.29±0.06,0.30±0.10,0.36±0.09,t=2.8,4.63,2.85,P＜0.05～0.01).②哮喘组嗜酸性粒细胞、淋巴细胞相对计数构成比明显高于正常组(P＜0.01),而巨噬细胞相对计数构成比明显低于正常组(P＜0.01).③第1秒用力呼气量占预测值百分比在哮喘组与A2b腺苷受体mRNA呈正相关(r=0.49,P＜0.05).而与A1及A3腺苷受体mRNA表达无相关性(P＞0.05).结论:A1,A2b,A3腺苷受体可能参与哮喘发病过程,且在哮喘患者诱导痰巨噬细胞与外周血单核细胞表达均高于正常人.但腺苷受体亚型与第1秒用力呼气量占预测值百分比的相关性并不一致,对气道阻塞程度的影响可能不同,有待于进一步证实.

老年心功能障碍患者的性别差异与血清C反应蛋白变化

目的:探讨不同心功能级别老年患者血清C反应蛋白水平与左室射血分数及心脏解剖结构的关系,以及性别因素差异.方法:选择2002-10/2004-01解放军解放军总医院老年心血管病研究所内住院治疗的老年心功能不全患者41例,男21例,女20例;年龄65～82岁.心功能Ⅰ级9例,心功能Ⅱ级10例,心功能Ⅲ级13例,心功能Ⅳ级9例.应用速率散射比浊法定量测定患者血清C反应蛋白水平;采用超声心动图测量心脏解剖参数(左右心房内径、左右心室内径)及左室射血分数.分析血清C反应蛋白水平与心功能分级、心脏解剖参数和左室射血分数的相关性.结果:按意向处理分析,进入结果分析心功能不全患者41例.①心功能Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ级患者的血清C反应蛋白水平呈逐渐升高趋势[(0.34±0.21),(0.69±0.17),(1.44±0.59)和(2.93±0.81)mg/L,F=4.812,P=0.006].受试者心房、心室内径随心功能下降而升高(F=3.137～7.070,P＜0.05～0.01).左室射血分数随心功能下降而下降(F=5.016,P＜0.01).多因素偏相关分析显示血清C反应蛋白水平和左室射血分数呈显著负相关(r=-0.475,P＜0.01),与左室内径呈显著正相关(r=0.328,P=0.014).②老年男性(n=21)和老年女性(n=20)心功能不全患者的血清C反应蛋白水平相似(P＞0.05).结论:心功能不全发生过程中左室心肌重塑过程可能和血清C反应蛋白水平的升高有关联;在老年心功能不全患者中,血清C反应蛋白水平随着心功能不全分级的恶化而升高;血清C反应蛋白做为判断心功能状态的客观指标无性别差异.

肺保护性机械通气对急性肺损伤家兔血氧合指数及支气管灌洗液细胞因子和酶的影响

目的:观察不同机械通气模式对实验家兔血氧合指数和支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶的影响,探讨保护性机械通气减轻机械通气相关肺损伤的生物学机制.方法:2003-05/2004-02在解放军总医院动物实验中心完成动物实验,细胞因子的测定在解放军总医院呼吸内科实验室完成.实验选用清洁级健康雄性家兔30只,随机分为5组,每组6只.①油酸对照组:油酸注射、仰卧位、呼气末正压0 kPa、潮气量13～15 mL/kg.②小潮气+呼气末正压组:油酸注射,仰卧位,呼气末正压0.78 kPa,潮气量8 mL/kg.③单纯俯卧位组:注射油酸,俯卧位,呼气末正压0 kPa,潮气量13～15 mL/kg.③俯卧位+小潮气+呼气末正压组:油酸注射、俯卧位、呼气末正压0.78 kPa,潮气量8 mL/kg.⑤空白对照组:不注射油酸,仰卧位,呼气末正压0 kPa,潮气量13～15 mL/kg.通过将家兔油酸型急性肺损伤模型应用4种不同模式机械通气,比较支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β,白细胞介素6和乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶的变化.结果:终进入结果分析家兔30只.①5个实验组家兔基础氧合指数无明显差异,置管对氧合指数无影响(P＞0.05),4个注射油酸1.5 h后的实验组家兔,氧合指数明显低于空白对照组.②油酸对照组和单纯俯卧位组家兔支气管肺泡灌注液肿瘤坏死因子α水平[(15.523±6.884),(9.038±4.737)μg/L]明显高于小潮气+呼气末正压+俯卧位组和空白对照组[(0.985±0.538),(0.357±0.151)μg/L,P＜0.05];油酸对照组肿瘤坏死因子α水平明显高于小潮气+呼气末正压组[(0.982±0.357)μg/L,P＜0.05].③单纯俯卧位组白细胞介素1β水平[(2.208±0.828)μg/L]明显高于小潮气+呼气末正压+俯卧位组和空白对照组[(0.596±0.399),(0.472±0.200)μg/L,P＜0.05].④油酸对照组和单纯俯卧位组家兔支气管肺泡灌注液白细胞介素6水平[(1 491.212±549.590),(1 102.14±477 368)μg/L]明显高于小潮气+呼气末正压+俯卧位组和空白对照组[(177.803±53.914),(295.855±86.609)μg/L,P＜0.05];油酸对照组白介素6水平明显高于小潮气+呼气末正压组[(229.332±54.418)μg/L,P＜0.05].⑤小潮气+呼气末正压组、小潮气+呼气末正压+俯卧位组、空白对照组家兔支气管肺泡灌注洗液碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶活性明显低于油酸对照组[碱性磷酸酶:(0.48±0.18),(0.44±0.15),(0.59±0.39),(1.19±0.37)μkat/L;乳酸脱氢酶:(0.07±0.05),(0.06±0.05),(0.05±0.01),(0.25±0.18)μkat/L,P＜0.05].结论:肺保护性通气不仅可以改善氧合,同时可以抑制支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6和乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶的释放,减轻血管内皮细胞损伤及降低通透性,减少渗出,减少呼吸机相关肺损伤.

卡维地洛对自发性高血压大鼠左室心肌肥厚作用的细胞和分子水平研究

目的:观察基础和卡维地洛干预条件下,高血压大鼠和Wistar大鼠心脏成纤维细胞增殖细胞核抗原蛋白表达及脱氧核糖核酸合成变化对心肌纤维化的影响.方法:实验于2001-10/2002-12在解放军空军总医院临床试验中心及解放军第四军医大学唐都医院高血压实验室完成.实验选用12周龄血压176～190mmHg(1 mm Hg=0.133kPa)的高血压大鼠10只,培养心脏成纤维细胞,按随机数字法将其分为空白对照组和0.01,0.10,1.00,10.00μmol/L卡维地洛干预72 h组;选择血压120～132 mm Hg的Wistar健康大鼠10只,培养心脏成纤维细胞为正常对照组.消化法培养大鼠心脏成纤维细胞,采用免疫组化法观察增殖细胞核抗原蛋白在心脏成纤维细胞细胞核表达的变化,3H-胸腺嘧啶核苷掺入法测定脱氧核糖核酸合成.结果:在基础条件下培养72 h,高血压大鼠空白对照组的心脏成纤维细胞增殖细胞核抗原含量[(131.2±11.0)A·mm2]及3H-胸腺嘧啶核苷掺入量[(606.0±54.7)min-1]明显高于正常大鼠空白对照组[(107.2±16.3)A·mm2,(495.2±49.8)min-1,t=2.725,3.348 9;P＜0.05].0.10,10.00 μmol/L卡维地洛分别干预72 h,高血压大鼠心脏成纤维细胞增殖细胞核抗原含量显著低于高血压大鼠空白对照组[(96.6±9.78),(87.0±12.5),(69.2±11.3)A·mm2t=5.258,5.926,8.770,P＜0.01];1.00,10.00μmol/L卡维地洛分别干预72 h时,Wistar大鼠心脏成纤维细胞增殖细胞核抗原含量分别为(81.4±10.6),(72.2±10.8)A·mm2显著低于正常大鼠空白对照组[t=2.956,P＜0.05;t=3.994,P＜0.01].0.10,1.00,10.00μmol/L卡维地洛分别干预72 h时,高血压大鼠心脏成纤维细胞3H-胸腺嘧啶核苷掺入量分别为[(452.0±35.9),(317.2±36.2)和(279.6±24.7)min-1]均显著低于高血压大鼠空白对照组(t=5.261,9.838,12.153,P＜0.01);Wistar大鼠组3H-胸腺嘧啶核苷均明显低于正常大鼠空白对照组[(388.2±35.0),(322.6±32.7),(277.8±25.3)min-1,t=3.931,6.478,8.705,P＜0.01].在不同浓度卡维地洛作用下,高血压大鼠心脏成纤维细胞的3H-胸腺嘧啶核苷掺入量随增殖细胞核抗原蛋白表达的增强而增高,两者呈显著正相关(r=0.856,P＜0.01).结论:卡维地洛不仅能抑制与脱氧核糖核酸合成密切相关的胸腺嘧啶核苷酸的活性,而且也能抑制增殖细胞核抗原的表达,直接影响了脱氧核糖核酸的复制,进而抑制心脏成纤维细胞增殖后的左室重构.

大鼠压力负荷性心肌肥厚与氯沙坦及赖诺普利的预防作用

目的:探讨心血管重构的结构、生化改变及氯沙坦与赖诺普利对心血管重构的作用.方法:实验选用雄性SD大白鼠60只,随机将其分为6组:假手术组,模型组,赖诺普利20 mg/(kg·d)组(大剂量赖诺普利组),赖诺普利2 mg/(kg·d)(小剂量赖诺普利组),氯沙坦30 mg/(kg·d)(大剂量氯沙坦组),氯沙坦5 mg/(kg·d)组(小剂量氯沙坦组),每组10只.采用膈下腹主动脉缩窄法建立大鼠心肌肥厚模型.假手术组、模型组、降压.和非降压剂量氯沙坦与赖诺普利在术后第2天用药至30 d后,检测平均动脉压,心脏肥厚程度及局部心肌组织一氧化氮、一氧化氮合酶和胶原蛋白含量的变化.结果:模型组大鼠颈动脉平均动脉压、心脏质量、左室质量、心脏质量/体质量、左室质量/体质量,心肌细胞横径,胶原蛋白含量明显高于或大于假手术组(t=6.009～13.308,P＜0.01);而局部心肌一氧化氮、一氧化氮合酶含量[(7.04±4.11)μmol/g,(4.00±0.67)μkat/g]明显低于假手术组[(15.28±2.50)μmol/g,(8.17±1.00)μkat/g,t=5.416,10.966,P＜0.01].大剂量赖诺普利组,大、小剂量氯沙坦组大鼠心肌胶原蛋白含量与假手术组比较,差异无显著性意义(P＞0 05);但均明显低于模型组(t=13.011,12.206,3.302,P＜0.01);大剂量氯沙坦组大鼠心肌胶原蛋白含量明显低于大剂量赖诺普利组和小剂量氯沙坦组(t=3.651,P＜0.01,t=2.473,P＜0.05);小剂量赖诺普利组大鼠心肌胶原蛋白含量明显低于模型组(t=4.42,P＜0.01),高于假手术组(t=6.725,P＜0.01).心脏质量指数与平均动脉压呈显著正相关(r=0.784 1,P＜0.01);心脏质量指数与一氧化氮呈显著负相关(r=-773 0,P＜0.01);心脏质量指数与心肌胶原含量呈显著正相关(r=0.817 7,P＜0.01).结论:心血管重构与血压、心脏间质成分及一氧化氮有密切关系;赖诺普利预防心肌肥厚可能是血流动力学和非血流动力学因素共同作用的结果;氯沙坦可能主要依靠非血流动力学因素抗心肌肥厚.

新增空腹血糖受损切割点下冠心病患者的代谢紊乱特征

目的:探讨美国糖尿病学会建议空腹血糖正常值由6.1 mmol/L下调至5.6 mmol/L后增加的空腹血糖受损者代谢紊乱相关因素的特征.方法:选择北京安贞医院综合科2002-01/2003-12收治的265例经冠状动脉造影确诊为冠心病患者.根据患者血糖水平分为3组,分别为①血糖正常组131例(空腹血糖＜5.6 mmol/L).②新增空腹血糖受损组39例(5.6 mmol/L≤空腹血糖＜6.1 mmol/L).③糖调节受损及糖尿病组195例(空腹血糖≥6.1 mmol/L).以冠状动脉造影显示累及血管支数及Gensini冠状动脉病变积分评价冠状动脉病变的严重程度(Gensini冠状动脉病变积分越高,表明病变程度越重),并计算体质量指数[体质量(kg)/身高(m2)].并采用全自动生化分析仪测定空腹血脂、肝肾功能等生化指标、氧化酶法测定空腹血糖及餐后2 h血糖,化学发光法测定空腹胰岛素水平,色谱分析法测定糖化血红蛋白.计算胰岛素抵抗指数[(空腹胰岛素×空腹血糖)/22.5],根据病史描述评价患者吸烟情况及心肌梗死发生情况.结果:按意向处理分析,进入结果分析冠心病患者265例.①体质量指数、空腹血糖、胰岛素抵抗指数、尿酸、三酰甘油水平和心肌梗死发生率:新增空腹血糖受损组与糖调节受损及糖尿病组明显高于血糖正常组,而高密度脂蛋白胆固醇明显低于血糖正常组(t=4.659～12.744,X2=5.345,P＜0.05).②空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油水平:糖调节受损及糖尿病组的明显高于新增空腹血糖受损组,高密度脂蛋白胆固醇则明显低于新增空腹血糖受损组(t=6.120～12.034,P＜0.01).③冠状动脉多支病变发生率和冠状动脉病变总积分:新增空腹血糖受损组与糖调节受损及糖尿病组均明显高于血糖正常组(58.8%,62.8%,40.0%;28.7±8.40,39.6±7.3,41.2±9.0,X2=5.21,7.56;t=6.30,8.380,P＜0.01),而新增空腹血糖受损组与糖调节受损及糖尿病组上述指标基本一致(P＞0.05).④相关分析结果:体质量指数、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、空腹胰岛素以及收缩压与冠状动脉病变程度(Gensini总积分)呈显著正相关(r=0.41,0.51,0.47,0.32,0.30,0.14,P＜0.01).结论:在新的空腹血糖分割点下所增加的空腹血糖受损状态的冠心病患者与血糖正常者相比,具有明显的代谢紊乱特征,作为心血管病的危险因素它们聚集在一起具有乘积效应,终导致心血管事件.患者的心肌梗死发生率显著增加,更证实了这一点.其冠状动脉病变程度更严重,并且与糖调节受损及糖尿病患者相似.而多因素分析显示空腹血糖并不是冠状动脉病变程度的独立影响因子,这提示可能轻度增高的血糖与其他代谢紊乱共同加速了冠状动脉硬化的进程.

持续气道正压通气对慢性阻塞性肺疾病合并睡眠呼吸暂停综合征患者血液流变学的影响

目的:探讨持续气道正压通气对慢性阻塞性肺疾病合并睡眠呼吸暂停综合征患者血液流变学的作用.方法:选择2001-06/2004-06河南省南阳市第一人民医院呼吸内科收治的30例慢性阻塞性肺疾病合并睡眠呼吸暂停综合征患者(年龄45～68岁)作为观察组,30例慢性阻塞性肺疾病缓解期患者(年龄47～66岁)作为对照组.观察组给以持续气道正压通气治疗,治疗观察期为6个月.观察组治疗前、后及对照组患者就诊时分别测定血液黏度,并对所测数据进行对比分析.结果:按意向处理分析,60例患者均完成治疗观察.①观察组患者治疗前全血低切、中切、高切黏度、血浆黏度及红细胞压积[(12.8±1.7),(6.52±0.65),(5.6±0.6),(1 68±0.08)mpa·s和(56.2±5.1)%],显著高于对照组[(9.2±1.4),(5.30±1.40),(4.4±0.5),(1.57±0.10)mpa·s,(41.8±6.5)%和P＜0.01].②观察组患者治疗后全血低切、中切黏度、血浆黏度以及红细胞压积较治疗前显著降低[(9.5±1.2),(5.54±0.22),(1.63±0.09)mpa·s,(45.1±4.9)%,P＜0.01).结论:慢性阻塞性肺疾病合并睡眠呼吸暂停综合征患者的血液黏度较慢性阻塞性肺疾病缓解期患者增高,持续气道正压通气治疗可显著降低慢性阻塞性肺疾病合并睡眠呼吸暂停综合征患者的血液黏度,改善其血液流变学异常现象.

高血压患者左心室肥厚与昼夜血压变化的性别差异

目的:探讨高血压患者血压昼夜节律变化对左心室肥厚的影响与性别的关系.方法:选择2000-01/2004-06大庆市第四医院心内科住院的原发性高血压病Ⅱ期患者93例.行24 h动态血压监测和超声心动图检查.采用动态血压分析系统自动测压,白昼间隔每15分1次,夜间每30分1次.24 h测压78次.统计分析24 h、白昼、夜间平均收缩压与舒张压.由计算机处理打印血压明细表,绘制血压曲线图.超声心动图采用美国HP5500型,测量室间隔厚度、左室舒张末期内径、左室后壁厚度.计算左室质量.以左室质量男≥125 g/m2,女≥120 g/m2诊断为左室肥厚.血压昼夜节律判定采用动态血压正常值协作研究所规定的标准,既夜间血压平均值比日间下降10%以上称之为杓型改变,夜间血压平均值比日间下降＜10%称之为非杓型改变.结果:93例均进入结果分析.①昼夜血压呈杓型改变41例,男25例,女16例;非杓型改变52例,男33例,女19例.②杓型与非杓型组相比,偶测血压和白昼平均血压均无显著差异(P＞0.05).女性非杓型组24 h平均收缩压比杓型组明显升高[(154.13±15.23),(135.21±9.71)mm Hg,t=2.541,P＜0.05];夜间平均收缩压明显升高[(147.36±18.65),(124.49±8.89)mmHg,t=2.812,P＜0.05];睡眠时低平均收缩压明显升高[(130.89±18.78),(109.89±11.57)mm Hg,t=3.203,P＜0.05].而男性高血压患者杓型与非杓型组各血压指标间均无显著性差异(P＞0.05).③女性非杓型组的室间隔厚度与杓型组相比明显增厚[(1.45±0.42),(1.01±0.12)cm,t=2.421,P＜0.05];左室后壁厚度明显增厚[(1.26±0.19),(0.96±0.13)cm,t=2.902,P＜0.05];左室质量明显增大[(329.32±95.29),(229.32±27.31)g/m2,t=3.104,P＜0.05].男性患者非杓型组与杓型组的室间隔厚度、左室后壁厚度、左室质量参数比较均无显著差异(P＞0.05).结论:女性高血压患者昼夜血压非杓型改变较杓形改变者左室肥厚程度显著,而男性患者这种改变不明显,监测昼夜血压非杓型与杓型变化规律,对女性高血压患者左室肥厚的评估有实际应用价值.

大连地区类风湿关节炎遗传易感性与人类白细胞抗原-DRB1基因的相关性及相关因素分析

目的:探讨人类白细胞抗原-DRB1基因与类风湿性关节炎遗传易感性的相关性,类风湿性关节炎患者红细胞沉降率、类风湿因子、C反应蛋白的变化与人类白细胞抗原-DRB1是否存在关联.方法:随机(隐匿分配)选择2000-02/06在大连医科大学附属第一医院住院及门诊类风湿性关节炎患者41例作为实验组.对照组为同地区的92名健康体检者.利用微量聚合酶链反应-序列特异性引物技术对人类白细胞抗原-DRB1基因进行检测;应用免疫透射比浊法对类风湿因子、C反应蛋白进行检测;应用常规魏氏法检测红细胞沉降率.结果:两组均按实验要求进入结果分析.实验组人类白细胞抗原-DRB1基因的等位基因DRB1*0405的发生频率59%明显高于正常对照组人群26%,相对危险度为4.00,而其他等位基因的发生频率在两组基本相似.而人类白细胞抗原-DRB1*0405+类风湿性关节炎患者(n=24)的类风湿因子水平明显高于人类白细胞抗原-DRB1*0405(n=17)[(73.4±20.3)U/mL,(14.0±7.2)U/mL,t=10.25,P＜0.01];前者的C反应蛋白水平也明显高于后者[(29.1±6.5)g/L,(3.2±1.5)g/L,t=5.66,P＜0.01].结论:大连地区类风湿性关节炎患者易感基因亚型为人类白细胞抗原-DRB1*0405,类风湿性关节炎患者类风湿因子、C反应蛋白指标的变化与人类白细胞抗原-DRB1*0405的表达有关.

血氧深入图像对室间隔缺损术后患者肺氧摄取及组织氧利用的评估

目的:探讨血氧深入图像分析在室间隔缺损术后评价肺氧摄取、血氧运输、组织氧利用中的价值.方法:采用深入图像血气分析方法对2004-01/06解放军沈阳军区总医院住院治疗的室间隔缺损肺动脉高压患者50例和室间隔缺损无肺动脉高压患者50例术后2,12,24 h进行动脉血气分析,比较两组术后的深入图像血氧值.结果:每组50例进入结果分析.肺动脉高压室间隔缺损组术后2,12和24 h氧分压和肺泡动脉氧分压差值与无肺动脉高压室间隔缺损组无明显差异(P＞0.05);组内各时间点比较差异不明显(P＞0.05).两组血红蛋白总量、氧合血红蛋白水平组间及组内比较,差异均无显著性(P＞0.05).肺动脉高压室间隔缺损组血红蛋白半饱合度和组织耗氧量各时段低于无肺动脉高压室间隔缺损组,差异有显著性(P＜0.01).结论:深入图像血气分析可提供肺氧摄取、血氧运输、组织氧利用等指标,并可反映出室间隔缺损肺动脉高压术后在氧分压正常的情况下组织氧利用不良.

冠状动脉粥样硬化斑块稳定性与超敏C反应蛋白和妊娠相关血浆蛋白A及基质金属蛋白酶组织抑制剂1表达的关系

目的:探讨冠心病患者血清非特异性炎性因子高敏C-反应蛋白、动脉粥样硬化稳定斑块中的妊娠相关血浆蛋白A及参与斑块破裂活动的基质金属蛋白酶3与冠状动脉粥样硬化斑块稳定性的关系.方法:选择2003-10/2004-03在解放军总医院住院治疗的70例冠心病患者为冠心病组,其中稳定心绞痛12例,不稳定心绞痛20例,发病6 h内急性心肌梗死38例.对照组20人为健康体检者.均清晨空腹采肘静脉血5 mL,离心分离血清后分为2份置-80℃,检测冠心病组和对照组的外周血血清高敏C反应蛋白、妊娠相关血浆蛋白A、基质金属蛋白酶3水平并进行相关性分析.结果:冠心病组70例及对照组20名均进入结果分析.①妊娠相关血浆蛋白A浓度比较:对照组低于稳定心绞痛组[(0.7,1.1)mIU/L,(P＜0.05)].②血清高敏C反应蛋白浓度比较:对照组明显低于不稳定心绞痛组[(2.0,6.0)mg/L,(P＜0.01)].③基质金属蛋白酶-3浓度比较:对照组明显低于急性心肌梗死组[(48.5,63.6)ng/L,(P＜0.01)].④冠心病患者3种不同类型的3项指标相关分析显示:血清高敏C反应蛋白水平与基质金属蛋白酶-3水平无相关性(r=0.099,P=0.539),与妊娠相关血浆蛋白A水平无相关性(r=0.017,P=0.210),血清基质金属蛋白酶3水平与妊娠相关血浆蛋白A水平有显著相关性(r=0.250,P=0.046).结论:冠心病的发生与血清高敏C反应蛋白、妊娠相关血浆蛋白A、基质金属蛋白酶-3水平的变化相关联,而动脉粥样硬化斑块的不稳定只与妊娠相关血浆蛋白A及基质金属蛋白酶-3相关.

阿司匹林对骨髓间充质干细胞生长的影响及可能的作用途径

目的:观察阿司匹林对骨髓间充质干细胞生长和参与细胞信号传导的β-连环素表达的影响.方法:实验于2003-08/2005-01在阜外心血管病医院再生医学中心完成.选用体质量80 g左右SD大鼠24只.体外分离培养SD大鼠的骨髓间充质干细胞,应用3H-胸腺嘧啶核苷掺入法观察不同浓度(1,5,10 mmol/L)的阿司匹林作用24 h后对骨髓间充质干细胞DNA合成的影响.以免疫印迹法观察上述浓度的阿司匹林作用24 h后骨髓间充质干细胞表达总β-连环素的情况和β-连环素的磷酸化水平.结果:①不同浓度(1,5,10 mmol/L)的阿司匹林作用于骨髓间充质干细胞24 h后,其3H-胸腺嘧啶核苷掺入值明显降低.1,5和10 mmol/L的阿司匹林作用后的细胞3H-胸腺嘧啶核苷掺入的每分钟脉冲数明显低于对照组[(11 061.83±1 004.37),(6 609.33±1 432.60),(133.33±51.56),(13 080.83±1 869.96)min-1,P＜0.05～0.01].说明阿司匹林抑制了骨髓间充质干细胞的DNA合成.②3H-胸腺嘧啶核苷掺入能力与阿司匹林浓度(1～10 mmol/L)呈显著负相关(r=-0.95,P＜0.05).在10 mmol/L浓度下,骨髓间充质干细胞的3H-胸腺嘧啶核苷掺入几乎全部被抑制.③免疫印迹法结果表示,阿司匹林浓度与骨髓间充质干细胞33位丝氨酸磷酸化的β-连环素表达呈正相关(r=0.89,P＜0.05).说明阿司匹林的作用使β-连环素的磷酸化水平增高,即促进其降解.④3个浓度的阿司匹林作用24 h后骨髓间充质干细胞总β-连环素的表达水平与对照组比较,无明显差异(P＞0.05).因此结合③可知阿司匹林使胞浆内未磷酸化的β-连环素降低.结论:阿司匹林对骨髓间充质干细胞的生长有明显抑制作用,这种作用可能是通过提高骨髓间充质干细胞中β-连环素磷酸化,促进其降解,进而抑制β-连环素参与的Wnt/β-连环素信号通路所致,其抑制作用的发生与阿司匹林的药物浓度相关.

2型糖尿病大鼠心肌病变模型的制备

背景:糖尿病心肌病变的结局与糖尿病患者的高心力衰竭发生率密切相关,建立良好的糖尿病心肌病变动物模型为其改善心功能研究极有意义.目的:通过建立2型糖尿病的大鼠及糖尿病心肌病变模型,了解高血糖状况对心肌的影响.设计:以实验动物为研究对象,完全随机分组设计,随机对照研究.单位:一所大学医院内分泌科.方法:实验选用新生雄性Wistar大鼠99只,随机将其分为实验组75只和对照组24只.对照组腹腔注射柠檬酸钠缓冲液,实验组一次性腹腔注射链脲佐菌素90 mg/kg,10周后检测糖耐量以确定糖尿病模型的建立;处死后电镜检查其心肌的超微结构.主要观察指标:观察糖尿病大鼠心肌细胞肌原纤维以及线粒体是否改变.结果:实验组空腹血糖[(8.87±0.76)mmol/L]轻度高于对照组[(5.88±0.45)mmol/L];实验组餐后2h血糖[(12.71±0.53)mmol/L]明显高于对照组[(6.42±0.4)mmol/L],糖耐量异常;电镜下出现肌原纤维呈局灶性变性、肌丝排列紊乱,心肌细胞线粒体肿胀、局灶性增生等改变.结论:该模型是研究2型糖尿病及其心肌病的一种理想载体,为研究其心功能奠定了实验学基础.

冠心病合并与不合并2型糖尿病患者的冠状动脉病变特征60例配对对照

目的:观察冠心病合并2型糖尿病患者的冠状动脉造影特点.方法:选择2003-01/2003-10在锦州医学院附属第一医院心内科冠心病合并2型糖尿病的住院患者60例(合并糖尿病组).所有患者均自愿参加.选择本院同期心内科住院性别、年龄、体质量指数、血压与合并糖尿病组患者相匹配的不合并糖尿病的冠心病患者60例为不合并糖尿病组.采用Judkins冠状动脉造影法对合并糖尿病组和不合并糖尿病组的患者进行常规多体位照射,观察冠状动脉病变支数、范围及程度.结果:按意向处理分析,终进入结果分析冠心病合并2型糖尿病和未合并2型糖尿病患者各60例.①两组的病变血管分布情况相似,但合并糖尿病组右冠状动脉病变例数明显高于未合并糖尿病组(48,37.例,X2=4.88,P＜0.05).②合并糖尿病组和未合并糖尿病组患者单支、双支、三支病变例数比较基本相似(10,17,33例;17,15,28例,P＞0.05).③两组的弥漫性病变血管数量(89/74,X2=0.94,P=0.33)以及平均累计支数比较无明显差异[89条,(2.38±0.85)支;74条,(2.18±0.76)支,P＞0.05].④合并糖尿病组和未合并糖尿病组患者在冠状动脉50%～74%狭窄,75%～90%狭窄,91%狭窄至完全闭塞的血管病变程度的数量比较无明显差异(88,89,45条;71,78,47条,P＞0.05).结论:合并与不合并糖尿病的冠心病患者的血管病变,除了在右冠状动脉累及数量有差异外,在冠状动脉病变的严重性和范围等方面基本一致.

不同胎龄人胎脑皮质额叶神经干细胞发育规律

背景:神经干细胞已被应用于治疗成人颅脑损伤及其他神经系统退行性疾病中.体外培养的神经干细胞脱离了体内正常的生理环境,所产生的反应是否与在生理条件下一致?诱导内源性的神经干细胞增殖分化可能是为实践开辟出另一条更有前程的途径.目的:探讨不同胎龄胎脑皮质额叶神经干细胞的发育规律.设计:随机实验观察.单位:南方医科大学附属珠江医院儿科.对象:收集2003-10/2004-03南方医科大学附属珠江医院妇产科胎龄16～36周的自愿水囊引产胎儿90例,取其皮质额叶脑组织作为实验材料.胎儿母亲均查体健康,水囊引产胎儿经家属及胎儿母亲签字同意、并经南方医科大学主管部门同意后进行实验.按胎龄16,20,24,28,32,36周分为6组,每组15例.方法:水囊引产胎儿娩出后在无菌条件下进行处理,打开头皮及颅骨,撕除脑表面被膜,切取皮质额叶脑组织,进行固定后切片,采用免疫组织化学及光镜技术对人胎脑皮质额叶神经干细胞的分布、形态、种类、生长方式以及数量进行检测.光学显微镜下观察细胞的形态及阳性表达情况.用替代法作阴性对照实验.在光学显微镜×400下观察,Nestin阳性细胞胞浆染成棕黄色,判定为神经干细胞,每组每个样本取2张载玻片,每张载玻片选10个视野,每组计算镜下300个视野的总细胞数和阳性细胞数.计算每组神经干细胞阳性检出率.主要观察指标:不同胎龄组人胎脑皮质额叶Nestin蛋白阳性神经干细胞的形态学及数量发育特征.结果:人胎脑皮质额叶存在神经干细胞,主要分布在锥体细胞层及内颗粒细胞层,呈小圆形及椭圆形,以前者多,胞核相对较大,空泡状,1～3个核仁不等,大部分细胞染色质疏松,胞浆表达明显,有的圆形细胞呈僧帽状,僧帽细胞可见短突起,椭圆形细胞有2个突起,神经干细胞呈明显的区域性分布,其中有由数个细胞形成的神经干细胞集落,似体外培养形成的神经干细胞克隆球,偶见对称性分裂的神经干细胞.不同胎龄组16,20,24,28,32,36周组人胎脑皮质额叶Nestin蛋白阳性神经干细胞检出率逐渐减少(15.59%,13.48%,11.62%,10.52%,9.87%,6.68%,X2=1265.152,P＜0.01).结论:不同胎龄人胎脑皮质额叶神经干细胞在分布、形态、种类、生长方式及数量上存在一定的差异和自身的发育特征,其数量随着胎龄的增加而减少.

动脉粥样硬化家兔血管内皮功能与乐卡地平的影响

目的:观察动脉粥样硬化兔血管内皮功能及乐卡地平的干预效果.方法:实验于2003-03/10在中国医科大学完成.选择日本大耳白兔32只,随机分为4组,正常对照组,高脂对照组,低剂量乐卡地平组,高剂量乐卡地平组.各组按照不同的饲料喂养,正常对照组喂饲普通颗粒饲料,高脂对照组喂饲高脂饲料(100g普通饲料中加入1 g胆固醇粉+7.5 g蛋黄粉+2 g猪油),低剂量乐卡地平组喂饲高脂饲料+乐卡地平1 mg/(kg·d),高剂量乐卡地平组喂饲高脂饲料+乐卡地平10 mg/(kg·d)共喂养12周.在实验前及喂养4,8,12周后采集耳静脉血,测定家兔血清脂质、一氧化氮及血浆内皮素含量.实验12周后腹腔麻醉动物,记录血压,随后处死动物,取降主动脉进行苏木精-伊红染色观察病理形态学变化;免疫组化染色观察血管细胞黏附分子1的表达分布.结果:实验过程中有2只动物死亡,30只进入结果分析.①病理形态学改变:正常对照组主动脉未见异常改变,高脂对照组动物动脉管壁呈弥漫性隆起,内膜明显增厚,可见斑块环管腔大部甚至全周,斑块内可见大量泡沫细胞及多层排列,内皮细胞缺失或不连续,平滑肌细胞排列紊乱.低剂量乐卡地平组内膜增厚程度及病变范围较高脂对照组略有减轻,高剂量乐卡地平组仅见局限性病灶隆起,内膜下可见3～4层泡沫细胞,其余动脉内膜光滑完整.②血脂水平:实验12周后各组高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油水平基本一致.③内皮素和血清一氧化氮水平:实验后12周高剂量乐卡地平组血浆内皮素低于高脂对照组,血清一氧化氮高于高脂对照组;低剂量乐卡地平组与高脂对照组比较无显著差异.④血管细胞黏附分子1表达:低剂量乐卡地平组、高剂量乐卡地平组血管细胞黏附分子1阳性细胞面积明显低于高脂对照组[(19.93±6.69)%、(12.80±4.09)%,(30.12±9.95)%,P＜0.05].⑤实验12周后进行有创伤血压测定,高脂对照组及高、低剂量乐卡地平组血压较正常对照组有所下降,但组间比较无明显差异.结论:乐卡地平抑制动脉粥样硬化的进展,且高剂量时作用明显,与降压、降脂作用无关,其抗动脉粥样硬化作用可能与抑制动脉壁局部血管细胞黏附分子1表达,改善血管内皮功能有关.

2型糖尿病心血管并发症风险因子与血管紧张素Ⅰ转换酶等位基因和基因型频率的关联

目的:探讨血管紧张素Ⅰ转换酶基因多态性与2型糖尿病心血管并发症风险因子的相关性.方法:实验于2001-02/2002-06在华北煤炭医学院分子生物学实验室完成.对象均为华北煤炭医学院附属医院门诊及住院的2型糖尿病患者,符合1985年世界卫生组织2型糖尿病诊断标准,心肌梗死诊断根据MRI确诊,均知情同意.根据是否合并心肌梗死分为心肌梗死组68例和非心肌梗死组190例.按常规酚/氯仿法提取基因组DNA,血管紧张素Ⅰ转换酶基因扩增产物用20 g/L琼脂糖凝胶电泳分析.对不同患者组等位基因(I,D)和基因型频率(DD,DⅠ,Ⅱ)进行比较.相对风险＞1为等位基因和基因型与疾病有肯定关联(风险因子).结果:两组患者全部进入结果分析.2型糖尿病心肌梗死组DD纯合子频率明显高于非心肌梗死组[41.2%,33.2%(X2=0.833,P＜0.05)],D等位基因频率也较非心肌梗死组显著增高[64.7%,55.0%(X2=3.849 1,P＜0.05)].DD基因型及D等位基因的相对风险分别为1.33和1.50.结论:D等位基因和DD基因型是2型糖尿病心肌梗死发生的风险因子.

中国北京市区健康人群白细胞介素6基因启动子区基因的多态性及与亚裔和高加索人群的比较

目的:动脉硬化、老年痴呆、糖尿病、骨质疏松等均有循环中炎症介质持续升高的表现.观察北京市区健康人循环中炎症介质白细胞介素6启动子区基因多态性与循环中白细胞介素6、超敏C反应蛋白和纤维蛋白原的关系,并评价白细胞介素6基因多态性的种族差异.方法:采用随机整群抽样的方法于2003-03/2004-03筛选中国北京地区30岁以上自我评价健康的汉族居民662人,男365人,女297人.通过身体检查及血液学及血生化学检测,了解调查对象健康状况;测定入选人群白细胞介素6、超敏C反应蛋白和纤维蛋白原;检测白细胞介素6启动子区174(G/C),597(G/A),572(G/C)基因多态性,观察其与循环中炎症指标白细胞介素6、超敏C反应蛋白和纤维蛋白原的关系.结果:按意向处理分析,进入结果分析662人.①入选健康成人662人,174位均为GG型,未发现GC和CC型;597位GG型占99.24%,仅有5人为GA型,未发现CC型;572位存在GG,CC,GC 3种基因型,G和C等位基因频率分别为0.22和0.78,基因型和等位基因频率均无性别差异.②G等位基因(GG+GC型)携带者循环中白细胞介素6、超敏C反应蛋白和纤维蛋白原水平明显高于CC基因型[(2.91±2.21)ng/L,(2.43±2.31)mg/L,(3.05±0.71)g/L;(2.44±1.47)ng/L,(1.41±1.57)mg/L,(2.70±0.64)g/L,P=0.03,0.01,0.01].③中国北京地区汉族人群白细胞介素6启动子区174(G/C),597(G/A)、572(G/C)的基因型分布与日本、韩国亚裔人群相似(174位和597位几乎均为GG型,572位G等位基因频率分别为0.28,0.23,0.25,P＞0.05),而明显不同于德国、瑞典高加索人群(174位存在GG,GC,CC,597位存在GG,GA,AA3种基因型,572位G等位基因频率分别为0.95,0.93,P＜0.01).结论:白细胞介素6启动子区174(G/C),597(G/A),572(G/C)基因多态性存在种族差异,亚裔人群不存在174(G/C),597(G/A)基因多态性,572位基因型频率也明显不同于高加索人群.572(G/C)位存在基因多态性并影响循环中白细胞介素6的表达从而影响机体炎症状态,G等位基因为少见基因,其携带者白细胞介素6和超敏C反应蛋白水平明显高于CC型个体.

血管平滑肌细胞增殖与转化生长因子β/smads的表达

目的:观察增殖和分化两种血管平滑肌细胞表型改变与转化生长因子β/smads信号传递的关系.方法:实验于2003-09/10哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成.取体质量200 g左右的健康雄性SD大鼠,常规胶原酶消化法原代培养大鼠血管平滑肌细胞.用体积分数为0.2和0.05(去血清培养)胎牛血清和的Dulbecco改良的Eagle培养基,37℃,体积分数0.05 CO2进行培养,2.5 g/L胰酶消化传代.血管平滑肌细胞经锥虫蓝染色,存活细胞数在98%以上.形态学上出现典型的"峰和谷"样生长状态,抗平滑肌特异α-肌动蛋白免疫组织化学染色阳性.取3～8代细胞用于实验.流式细胞分析检测不同表型血管平滑肌细胞增殖能力,蛋白质印迹分析方法检测血管平滑肌细胞分化相关基因平滑肌特异性肌动蛋白表达变化,反转录聚合酶链反应和细胞免疫荧光方法检测转化生长因子βⅠ型受体,smad2,smad3,smad4和smad7的表达变化.结果:①流式细胞分析及蛋白印迹分析方法检测发现,去血清培养后,原代培养大鼠血管平滑肌细胞增殖能力下降;DNA合成前期细胞明显增加[(52.42±2.35)%],细胞分化基因平滑肌特异性α-肌动蛋白明显表达.体积分数为0.2胎牛血清培养后,大鼠血管平滑肌细胞增殖旺盛,DNA合成前期细胞数相对较少[(17.23±1.58)%],细胞分化相关基因平滑肌特异性肌动蛋白表达明显下调.②反转录聚合酶链反应和细胞免疫荧光方法检测发现,去血清培养后的分化表型平滑肌细胞中,转化生长因子βⅠ型受体表达增加,smad2和smad3表达无明显变化,smad4表达增加,smad7表达下降.而高血清培养诱导平滑肌细胞转化为增殖表型后,转化生长因子βⅠ型受体表达下降,smad4表达下降,抑制型smad7表达增加,smad2和smad3表达无明显变化.结论:转化生长因子β/smads表达与血管平滑肌细胞表型状态密切相关.血管平滑肌细胞分化时,可能通过转化生长因子βⅠ型受体/smad4调控细胞分化功能;而血管平滑肌细胞增殖时,细胞则可能通过smad7信号传导通路发挥作用.提示转化生长因子β/smads在血管平滑肌细胞由合成表型逆转为分化表型的分子调控中发挥作用.

临床常用量水平氨氯地平稳定动脉粥样硬化斑块的实验

目的:观察动脉粥样硬化斑块稳定性与氨氯地平对巨噬细胞基质金属蛋白酶9及其组织抑制物1 mRNA表达和分泌的影响.方法:实验于2003-11/2004-07在解放军总医院动物中心完成.选择BALB/C型雄性小鼠26只,收集小鼠腹腔冲洗液中的巨噬细胞与不同浓度的氨氯地平(5,15,30μg/L)共同培养,采用反转录聚合酶链反应检测不同浓度的氨氯地平对细胞基质金属蛋白酶9及基质金属蛋白酶组织抑制物1 mRNA的表达.结果:①低浓度的氨氯地平(5 μg/L)对基质金属蛋白酶9的表达和分泌几乎没有影响,中等浓度(15 μg/L为临床常用量水平)和高浓度(30μg/L)时可以完全抑制基质金属蛋白酶9的表达.②氨氯地平药物浓度为15,30μg/L时,基质金属蛋白酶组织抑制物1的表达均有所增加,药物浓度为15μg/L时明显高于药物浓度为30μg/L时的表达(t=3.74,P＜0.05).结论:实验结果提示中等浓度的氨氯地平(15μg/L为临床常用量水平)可以明显抑制巨噬细胞基质金属蛋白酶9的表达,增加基质金属蛋白酶组织抑制物1 mRNA的表达,发挥稳定动脉粥样硬化斑块、减少斑块破裂的作用.

高血压左室肥厚发病中细胞间黏附分子1的表达及丹参酮ⅡA的抑制效应

背景:细胞间黏附分子1作为炎症反应的可靠标志物在动脉粥样硬化发病中具有重要的作用.近年来研究认为其介导的慢性炎症反应可能参与高血压左室肥厚的发病过程,但也有报道持相反观点.丹参酮ⅡA是丹参的一种脂溶性提取性,动物实验证明其具有抑制高血压左室肥厚发生的作用.目的:探讨细胞间黏附分子1在高血压左室肥厚发生中的作用及丹参酮ⅡA对其表达的影响.设计:随机对照观察.单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院.材料:实验于2002-10/2004-01在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成,选用12周龄雄性WKY大鼠10只、自发性高血压SHR大鼠20只,分为对照组(WKY大鼠10只)、高血压组(SHR大鼠10只)、丹参酮ⅡA组(SHR大鼠10只).方法:丹参酮ⅡA组经尾静脉注射丹参酮ⅡA 1.5 mg/(kg·d)治疗,其他两组分别注射等量的蒸馏水.12周后断头处死所有大鼠留取心肌标本,应用苏木精-伊红染色、VG染色,免疫组化染色及心肌ED1标记检测心肌巨噬细胞浸润数,心肌细胞间黏附分子1 mRNA及蛋白的表达应用反转录-聚合酶链反应及酶链免疫吸附实验等方法.主要观察指标:各组大鼠心肌巨噬细胞浸润数,心肌细胞间黏附分子1mRNA及蛋白表达.结果:20只SHR和10只WKY大鼠被纳入实验,并全部进入结果分析,无脱失值.①与对照组比较,高血压组大鼠肥厚心肌中细胞间黏附分子1的mRNA及蛋白表达显著增加(0.176±0.087,0.537±0 195;0.104±0.011,0.173±0.027,P＜0.01或P＜0.05),巨噬细胞浸润明显(0.62±0.07,1.85±0.23,P＜0.01).②与高血压组比较,丹参酮ⅡA组大鼠心肌细胞间黏附分子1的mRNA及蛋白表达水平显著下调(0.537±0.195,0.291±0.106;0.173±0.027,0.125±0.014,P＜0.01或P＜0.05),巨噬细胞浸润数减少(1.85±0.23,1.16±0.17,P＜0.05),心肌细胞肥大和间质纤维化程度明显减轻.结论:心肌细胞间黏附分子1的过度表达及其介导的炎性细胞浸润在高血压左室肥厚的发病过程中具有重要作用.丹参酮ⅡA抑制左室肥厚的效应可能与其下调细胞间黏附分子1表达,减少炎性细胞的心肌浸润有关.

类风湿关节炎伴发周围神经病变5例特征分析

背景:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)以慢性、对称性多关节炎为主要表现的系统性疾病.RA并发周围神经系统病变不常见.设计:以患者为观察对象的回顾性病例分析.目的:分析5例RA患者伴发周围神经病的临床和实验室特点.单位:北京协和大学医院的风湿免疫科.对象:北京协和医院自1983-01/2002-12收治RA患者567例,其中5例伴发周围神经病变,全部病例均符合美国风湿病学会分类诊断标准.其中5例并发神经系统损害不能以其它疾病解释.5例均处于疾病活动期,实验室指标符合RA活动性核心标准.方法:分析5例RA患者病案资料,所记载的周围神经病变症状及电生理学检测记录和实验室检查指标.主要观察指标:性别、年龄、病程、肌力障碍及感觉障碍程度、肌电图、肌活检及神经活检、相关实验室指标.结果:5例中男2例,女3例,年龄42～60岁,平均52岁.病程1～14年,平均5.4年.以神经系统为主诉就诊的4例,占80%(4/5),另1例入院后查体肌力下降,痛觉减退.四肢无力麻木、肢体远端痛觉减低4例,感觉异常3例,足下垂2例,腕下垂1例,肌萎缩3例,肌力下降5例,腱反射消失3例.出现周围神经病变或病变加重时4例伴关节肿痛,5例均有血沉增快,C反应蛋白升高,类风湿因子高滴度阳性,X射线示关节间隙变窄、关节面侵蚀破坏.伴血管炎3例,类风湿结节2例.肌电图显示4例周围神经源性损害,另1例肌活检证实为神经源性损害.1例神经活检示慢性中度轴索性神经病.结论:本组RA患者伴多发性周围神经病发生率为1%(5/569),发生于RA活动期或在活动期有所加重,100%(5/5)肌力下降,并有60%(3/5)出现肌萎缩.80%(4/5)肌电图有周围神经损害表现,有助于早期诊断.

运用抑制性消减杂交技术构建2型糖尿病肾阴虚证的相关基因文库

目的:运用抑制性消减杂交技术构建2型糖尿病肾阴虚证DNA消减文库,为制定2型糖尿病的一、二级康复预防提供理论参考.方法:选择2004-08南方医科大学南方医院内分泌科就诊的汉族2型糖尿病患者1例,符合中医肾虚证诊断标准中关于典型肾阴虚证的诊断,肝肾功能正常,无急慢性感染.以同时期、同性别、年龄相当的自愿者1名作为正常人对照.参照Maxim方法采用硅胶法抽提2例观察对象血白细胞DNA,用RsaI酶切基因组DNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应,将聚合酶链反应产物与U/A载体连接,经蓝白斑筛选及菌液聚合酶链反应筛选出阳性重组质粒,构建糖尿病肾阴虚证DNA消减文库.测定抽提基因组DNA的纯度及含量;基因组DNA RsaI酶切产物;消减杂交产物扩增结果;蓝白斑筛选阳性克隆;聚合酶链反应方法筛选重组质粒.结果:用抑制性消减杂交技术筛选出了糖尿病肾阴虚证的差异DNA片段,基因组DNA经过RasI酶切消化后,所得DNA片段主要集中在200～2 000 bp;消减杂交产物经两次聚合酶链反应扩增后,产物明显增多,内含数条隐约可见的条带,主要集中在0.2～1.5 kb;蓝白斑α互补筛选出含有外源插入片段的阳性克隆,结果正向消减杂交产物得到286个克隆,反向消减杂交产物得到262个克隆;随机挑取92个阳性克隆,经聚合酶链反应分析证实86个克隆的质粒内均载有差异性DNA片段,大小为200～1 000 bp,从而成功构建了糖尿病肾阴虚证特异的DNA消减文库.结论:抑制性消减杂交技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建糖尿病肾阴虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆糖尿病肾阴虚证相关基因奠定了基础.

组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞的特征

目的:采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞,并应用光镜、电镜和免疫组织化学方法观察细胞各生长时期的形态变化.方法:实验于2004-02/08在中国医科大学基础医学院药理实验室完成.选择健康清洁级Wistar大鼠30只,体质量150～180 g,无菌条件下取全段主动脉中膜组织修剪成1 mm×1 mm大小的组织块直接贴壁于一次性塑料培养皿中,组织块间距0.5 cm,保证细胞从组织块游出后有足够的生长空间并保持局部细胞密度的均匀,发现漂起的组织块及时清理,于37℃孵箱内放置1.5 h左右使组织块与壁贴附后,缓慢加入改良Eagle培养液培养3～5 d,待有细胞从组织块周围游出后换液.当细胞长满培养皿时即可传代.采用倒置相差显微镜和透射电镜及抗α-平滑肌肌动蛋白免疫组织化学方法观察主动脉平滑肌细胞的形态.绘制主动脉平滑肌细胞生长曲线,观察各生长时期的变化,并评估其培养方法的优点.结果:30只大鼠全部进入结果分析.①技术方法优点:贴块方便,直接一次性贴壁使污染机会少,随组织块生长随时清理漂起的组织块,可减少对其他组织块的毒性作用,并增加已游离出的细胞生长空间.②原代培养血管平滑肌细胞:光镜观察形态多样,大小略有差异,胞体较小,胞质折光性强.③传代血管平滑肌细胞:光镜下观察呈现特征性"峰"、"谷"状生长.电镜下观察:细胞形态不规则,胞浆内有肌丝,纵向平行排列,有密区,具备平滑肌细胞特征.免疫组织化学染色后可见细胞浆中大量平行条状棕黄染色、胞核不着色,所有细胞均染色,呈阳性.④主动脉平滑肌细胞生长曲线:血管平滑肌细胞生长曲线近似"S"形,传代后第1天细胞数有所减少,经过2 d潜伏适应期后进入对数生长期,持续两三天进入平台期.结论:组织块贴壁法培养技术具有操作简便,污染机会少,有足够细胞生长空间的优点,经光镜和电镜观察培养出新的主动脉血管平滑肌细胞具有平滑肌细胞特征,免疫组织化学染色也显示所有细胞均呈阳性.传代培养后第2天进入对数生长期,持续两三天进入平台期,可产生纯度高及数量多的平滑肌细胞.

寻找一种诊治心肌损伤的新方法:鼠抗人cTnI单抗Fab段基因克隆和序列分析

背景:为将鼠抗人cTnI单克隆抗体应用人体进行体内诊断或作为治疗心肌损伤的药物载体,必须降低鼠源性抗体的免疫源性,克服其人抗鼠抗体反应,需要对其进行人源化改造.目的:克隆鼠抗人cTnI单克隆抗体Fab段基因并进行序列分析.设计:单一样本研究.单位:一所医科大学附属医院的心血管病研究所.材料:本实验于2003-01/2004-05在南京医科大学第一附属医院心血管病研究所完成.分泌鼠抗人cTnI单克隆抗体的杂交瘤细胞株(JS200202)由南京医科大学第一附属医院心血管病研究所提供.方法:设计扩增鼠IgG重链Fd段及κ轻链引物,从分泌cTnI单抗的杂交瘤细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增,对扩增产物进行分子克隆、测序及序列分析.主要观察指标:重链Fd段和κ轻链基因序列及其所属亚型.结果:重链和轻链引物分别扩增出一约700 bp和800 bpDNA片段.经序列分析,与已发表的鼠IgG基因序列对比,其核苷酸及其所推导的氨基酸序列符合鼠IgG1Fab段特征.在GenBank登录,登录号为AY484430(重链),AY484431(轻链);氨基酸序列登录号为AAR83243(重链),AAR83244(轻链).结论:本实验室获得了完整的鼠源性抗人cTnI单克隆抗体Fab段基因,为鼠抗人cTnI单克隆抗体的人源化改造奠定了基础.

纳洛酮对急性心肌梗死再灌注后梗死面积和肌酸激酶同工酶活性的影响

目的:通过制造大鼠急性心肌梗死再灌注损伤模型,探讨纳络酮对大鼠急性心肌梗死再灌注损伤的保护作用.方法:实验于2003-05/10在兰州医学院解剖教研室实验室完成.成年SD大鼠30只随机分为手术对照组、单纯缺血再灌注组、缺血加纳络酮组,每组10只.用戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,从根部结扎左冠状动脉前降支制备心肌缺血-再灌注模型.单纯缺血再灌注组在结扎左冠状动脉前降支心肌缺血30 min后,剪断结扎线恢复心肌再灌注4.5 h.缺血加纳洛酮组在术前10 min及结扎后0.5 h,4 h,静脉注射纳洛酮0.517 mg/kg.其余两组注射同体积的生理盐水.处死大鼠后迅速摘取心脏,经处理后氯化三苯基四氮唑法染色和数码照相计算机图象分析系统计算心肌梗死面积,测定血清中肌酸激酶同工酶含量.结果:30只大鼠全部进入结果分析.缺血加纳洛酮组与单纯缺血再灌注组比较,心肌梗死面积明显缩小[(37.53±5.77)%,(26.73±3.67)%,P＜0.01],血清中肌酸激酶同工酶活性明显降低[(210.59±17.87)kat/L,(153.12±22.16)kat/L,P＜0.01].结论:纳洛酮可明显缩小缺血再灌注心梗面积,降低血清肌酸激酶同工酶含量,改善心功能.

体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为肝细胞样细胞的特征及功能

目的:观察人骨髓间充质干细胞体外培养定向分化为肝细胞样细胞的过程及其特征.方法:实验于2003-12/2004-05在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心实验室完成.人骨髓取自髂后上嵴骨髓穿刺的健康供者,来源于中山大学附属第二医院儿科患儿健康家属.全骨髓贴壁筛选法分离出骨髓间充质干细胞,体外扩增后以流式细胞仪鉴定其表面标志.取扩增5代的骨髓间充质干细胞,分为2组,分化组于加入20 μg/L肝细胞生长因子和10 μg/L成纤维细胞生长因子4的opti-MEMI低血清培养基中诱导分化,空白对照组则不加任何细胞因子.2周后,行细胞形态学观察,并检测成热肝细胞的糖原合成和尿素分泌功能(免疫细胞化学法检测甲胎蛋白、白蛋白及细胞角蛋白18,19表达,反转录-聚合酶链式反应检测甲胎蛋白、白蛋白基因mRNA转录水平,高碘酸-Schiff染色检测糖原及紫外分光光度法测定尿素氮合量).结果:①流式细胞仪显示第5代骨髓间充质干细胞高表达表面抗原白细胞分化抗原29,不表达白细胞分化抗原34,11b.②分化组骨髓间充质干细胞至第14天,部分细胞分化为多角形的肝细胞样细胞.③免疫细胞化学法检测到细胞特异性表达甲胎蛋白、白蛋白及细胞角蛋白18,19,反转录-聚合酶链式反应显示有甲胎蛋白和白蛋白mRNA转录.④高碘酸-Schiff糖原染色可见胞浆内存在红色颗粒,呈阳性反应,培养液内尿素氮含量亦明显升高.⑤空白对照组骨髓间充质干细胞则未见上述各项变化.结论:在低血清培养体系中,采用成纤维细胞生长因子4和肝细胞生长因子联合诱导,证明人骨髓间充质干细胞在体外能定向分化为肝细胞样细胞,诱导后的骨髓间充质干细胞上有了成熟肝细胞的糖原合成和分泌尿素的特征性功能,表明骨髓间充质干细胞可作为肝细胞移植和人工肝的新型种子细胞.

脊髓后角神经元蛋白激酶C活化与哮喘及地塞米松的关系

目的:探讨蛋白激酶C在哮喘豚鼠C7～T5段脊髓后角的表达及地塞米松的抑制作用.方法:实验于2003-03/06在中国医科大学神经生物实验室进行,健康白色豚鼠40只,随机分为4组:①生理盐水组8只,腹腔注射生理盐水1 mL,10 d后雾化吸入生理盐水,隔日1次,共20 d.②单纯致敏组8只,腹腔注射100 g/L卵蛋白(含等量氢氧化铝凝胶)1 mL,10 d后雾化吸入生理盐水,隔日1次,共20 d.③哮喘组12只,腹腔注射100 g/L卵蛋白(含等量氢氧化铝凝胶)1 mL,10 d后雾化吸入10 g/L卵蛋白溶液(不含氢氧化铝凝胶),隔日1次,共20 d.④地塞米松组12只,操作同哮喘组,从激发哮喘后第6天起,每天于哮喘后腹腔注射地塞米松[2 mg/(kg·d)],1次/d,共5次.利用免疫组织化学和免疫蛋白印迹观察哮喘豚鼠C7～T5段脊髓后角蛋白激酶C(参与支气管平滑肌增殖)蛋白变化.结果:40只豚鼠均进入结果分析.C7～T5段脊髓后角蛋白激酶C的表达变化:生理盐水组与单纯致敏组豚鼠表达基本相近(0.113±0.009,0.116±0.007,t=1.554,P＞0.05);哮喘组豚鼠表达比生理盐水组明显上调(0.176±0.010,t=23.033,P＜0.01),地塞米松组表达则明显低于哮喘组(0.128±0.009,t=17.359,P＜0.01).结论:哮喘豚鼠内脏感觉传入部位C7～T5段脊髓后角蛋白激酶C呈过表达,应用地塞米松可抑制蛋白激酶C表达的增加.此结果进一步揭示了哮喘发病过程中有神经免疫机制的参与.

辛伐他汀对大鼠肺成纤维细胞功能及其抑制通路的影响

背景:他汀类药物可以通过阻断甲羟戊酸的合成,抑制某些膜联结蛋白的翻译后修饰,从而阻断某些细胞内信号传导通路,抑制多种细胞的增殖.目的:探讨辛伐他汀对肺成纤维细胞的增殖、胶原合成及基质金属蛋白酶2分泌的影响.设计:完全随机设计,对照实验.单位:中国协和医科大学阜外心血管病医院器官移植研究室.材料:实验于2004-06/2004-10在中国协和医科大学北京协和医院心内科实验室完成.培养的新生SD大鼠的肺盛纤维细胞,根据培养液中加入的干预药物浓度不同而分为辛伐他汀0,1,5,10,50μmol/L及辛伐他汀50 μmol/L+甲羟戊酸200 μmol/L组.方法:用消化法培养新生SD大鼠的肺成纤维细胞,给予不同浓度的辛伐他汀干预.四氮唑蓝比色法检测细胞增殖,细胞免疫组化法测定细胞胶原的合成,酶联免疫吸附法测定细胞培养上清液基质金属蛋白酶2的含量.主要观察指标:不同浓度辛伐他汀及辛伐他汀加甲羟戊酸干预后肺成纤维细胞增殖和胶原合成能力,以及基质金属蛋白酶2分泌量.结果:①辛伐他汀5,10,50 μmol/L组四氮唑蓝比色A490值,肺成纤维细胞表达Ⅰ,Ⅲ型胶原的平均吸光度值(A值)及培养上清液中的基质金属蛋白酶2含量明显低于辛伐他汀0 μmol/L组(0.520±0.010,0.334±0.011,0.260±0.012,0.111±0.011;0.508±0.011,0.324±0.014,0.232±0.015,0.083±0.015;0.445±0.017,0.305±0.015,0.216±0.015,0.068±0.012;0.561±0.013,0.361±0.012,0.289±0.012,0.140±0.013,t=3.359～8.111,P＜0.05～0.01).②辛伐他汀50 μmol/L+甲羟戊酸200 μmol/L组四氮唑蓝比色A490值,肺成纤维细胞表达Ⅰ,Ⅲ型胶原的平均吸光度值(A值)及培养上清液中的基质金属蛋白酶2含量明显高于辛伐他汀50 μmol/L组(0.567±0.015,0.354±0.014,0.283±0.012,0.138±0.011,t=4.715～10.950,P＜0.01).结论:辛伐他汀能抑制肺成纤维细胞增殖和胶原合成,并可减少基质金属蛋白酶2的分泌,抑制肺成纤维细胞黏附迁移功能,并可通过影响甲羟戊酸通路而具有抗细胞增殖作用.

孵育温度对丁二醇改性处理戊二醛鞣制的牛心包生物瓣膜防钙化性能及热皱缩温度的影响

目的:探讨2,3-丁二醇不同孵育温度改性处理戊二醛鞣制的牛心包对其防钙化性能及热皱缩温度的影响.方法:实验于2003-06/12在中南大学湘雅二医院胸心外科实验室完成.收集1～3岁新鲜黄牛心包8个,将每个牛心包均分成5份,共分成5组,分别置入4℃,20℃,30℃,40℃的纯2,3-丁二醇溶液孵育改性60 d,对照组置入4℃的3 g/L戊二醛Hepe缓冲液中,每组8份试片.选择刚离乳SD雄性大鼠8只,SD大鼠背部作两个纵形切口,将经过处理的同一牛心包来源的5份心包试片植入切口,第1个纵形切口两侧各1片,第2个纵形切口两侧及下部各1片,相距≥2 cm,植入牛心包试片60 d后,取出各组试片,用原子吸收火焰法检测组织钙含量,并观察牛心包试片热皱缩温度.结果:8只SD大鼠所获全部标本进入结果分析.①组织钙含量检测结果:20℃,30℃和40℃丁二醇组组织钙含量相似,但明显低于对照组和4℃丁二醇组[(8.18±7.22),(21.56±26.53),(3.24±2.57),(138.36±69.23),(192.83±2.86)mg/g,(P=0.002～0.016)].②热皱缩温度检测结果:20℃,30℃及40℃丁二醇组明显低于对照组及4℃丁二醇组[(83.31±0.46)℃,(82.96±0.33)℃,(82.44±0.42)℃,(83.75±0.46)℃,(83.67±0.41)℃,(P＜0.05)];40℃丁二醇组明显低于20℃丁二醇组(P＜0.001).结论:2,3-丁二醇的不同孵育温度改性处理戊二醛鞣制的牛心包,其中4℃组防钙效果差,20℃,30℃,40℃组均具有明显的防钙化效果,三者之间无明显差异.热皱缩温度随着孵育温度的升高而降低.但改变幅度不是很大.均高于80℃,改性后的牛心包在生理温度下不会发生组织热皱缩.

骨髓干细胞动员与缺血心肌血管再生

目的:探讨动员急性心肌梗死大鼠骨髓干细胞归巢于梗死心肌后实现血管再生的能力.方法:实验选用10～12周龄的雄性Wistar(清洁级)大鼠60只,随机分为3组:急性心肌梗死+动员组、急性心肌梗死组及对照组,每组20只.结扎Wistar大鼠左冠状动脉制作心肌梗死模型,用骨髓干细胞动员剂粒细胞集落刺激因子动员自体骨髓干细胞释放并归巢于心肌梗死灶,于造模后24,48h和4周杀死大鼠,取出心脏,通过免疫组化方法观察心肌梗死灶、边缘区和正常心肌组织CD34阳性细胞、血管内皮生长因子及其受体的表达,以及Ⅷ因子表达,并应用流式细胞术比较动员前后外周血中CD34阳性细胞数量的变化.结果:急性心肌梗死+动员组大鼠造模24 h,4周后外周血CD34细胞数量分别为(0.919±0.187)%,(0.834±0.110)%,明显高于造模前[(0.043±0.023)%]及心肌梗死组大鼠造模24 h,4周后[(0.071±0.104)%,(0.062±0.296)%](t=2.697,2.354,2.492,2 195,P＜0.05).急性心肌梗死+动员组大鼠心肌梗死区可见CD34阳性细胞浸润;制模后4周,急性心肌梗死+动员组微血管新生数明显多于急性心肌梗死组和对照组(t=3.125,3.308,P＜0.01).急性心肌梗死+动员组大鼠梗死灶及周围组织中血管内皮生长因子及其受体的表达量均明显高于急性心肌梗死组及假手术组(t=2.099～3.398,P＜0.05).结论:骨髓干细胞动员的方法在大鼠急性心肌梗死模型中,能通过动员内皮干细胞归巢于梗死灶内,有效促进微血管形成;还通过上调血管内皮生长因子及其受体的表达,促进血管再生,促进缺血心脏功能恢复.

怀化侗族高血压高发人群G蛋白β3亚单位825C/T多态性与血脂水平的关系舷

目的:探讨湖南怀化侗族高血压高发人群原发性高血压与G蛋白β3亚单位825C/T多态性与血脂水平以及频率分布和地域及人种差异的关系.方法:实验于2003-06/2004-12在怀化医学高等专科学校分子生物研究室进行.高血压高发人群为湖南怀化地区通道侗族自治县1个独立自然村落30岁以上人群,均为侗族,共185人,其中原发性高血压96人,血压正常者89人;另外选择怀化地区汉族30岁以上的227人作为对照组,其中原发性高血压76人,血压正常者151人.采用聚合酶链反应结合限制性内切酶片段长度多态分析方法,检测被试者的G蛋白β3亚单位825C/T等位基因频率和基因型频率,同时测定血脂和相关的生化指标,并进行病例对照分析.结果:按意向处理分析,怀化侗族人群185人和汉族人群227人的资料全部进入结果分析.①G蛋白β3亚单位825C/T基因型频率和等位基因频率:怀化侗族人群中原发性高血压患者和血压正常人的基因型频率比较无差异(CC:0.188,0.247,CT:0.594,0.528,TT:0.218,0.225,P＞0.05),等位基因频率比较也无差异(C:0.484,0.511;T:0.516,0.489,P＞0.05);汉族人群中原发性高血压患者和血压正常人的基因型频率比较无差异(CC:0.211,0.245,CT:0.605,0.642,TT:0.184,0.113,P＞0.05),等位基因频率比较也无差异(C:0.513,0.556;T:0.487,0.434,P＞0.05).②G蛋白β3亚单位基因825C/T多态与各生化指标的关系:怀化侗族高血压高发人群G蛋白β3亚单位825C/T基因型与血糖、血脂和电解质水平无相关性(P＞0.05),但是侗族原发性高血压患者与血压正常者比较低密度脂蛋白、总胆固醇和血钠偏高而血钾偏低(P＜0.05).③G蛋白β3亚单位825C/T基因型与不同地域人群的比较:其等位基因频率与中国北京人、东北人及日本人群接近,显著高于白种人(P＜0.01)结论:怀化地区侗族与汉族人群原发性高血压和正常人之间G蛋白β3亚单位基因825C/T基因频率和基因型频率均无明显差异,且与日本和中国北方人群接近,而与白种人群有较大差异.怀化地区侗族原发性高血压患者低密度脂蛋白、总胆固醇和血钠偏高而血钾偏低,但是这些生化指标的异常与825C/T基因型无关,而该人群较高的原发性高血压患病率可能与血清低密度脂蛋白、总胆固醇、血钠增高、血钾降低以及钠/钾比值增高有关.

转染抗凋亡bcl-xL基因抗大鼠急性缺血心肌细胞凋亡

目的:探讨抗凋亡基因bcl-xL治疗大鼠急性心肌梗死的可行性.方法:实验于2004-02/2005-02在中山大学第二附属医院医学实验中心完成.建立大鼠急性心肌梗死模型,大鼠随机分为实验组和对照组各10只,实验组用腺病毒介导的方法将bcl-xL基因导入急性缺血大鼠的心肌,对照组仅用生理盐水代替;用免疫组化法半定量分析显示大鼠心肌抗凋亡基因bcl-xL蛋白表达水平,采用缺口末端标记技术和流式细胞仪评估大鼠心肌细胞是否发生凋亡及凋亡的程度.结果:16只大鼠进入结果分析.①4周后取心脏梗死区标本免疫组化检测bcl-xL蛋白表达,发现对照组心肌只有少数着色,而实验组的心肌组织大多数呈深棕色.半定量分析显示,实验组的心肌组织内bcl-xL蛋白表达阳性单位值明显高于对照组(19.66±4.62,8.89±2.16,t=-5.98,P＜0.01).②两组心肌组织中均检测到缺口末端标记技术阳性染色的凋亡细胞.③显微镜下计数,对照组心肌细胞凋亡指数明显高于实验组[(18.19±4.15)%,(7.25±2.09)%,t=6.65,P＜0.01].④流式细胞仪检测结果为实验组心肌缺血后转染bcl-xL基因细胞凋亡率为(6.79±1.98)%,面对照组的细胞凋亡率为(20.15±6.04)%,实验组出现明显低于对照组的凋亡峰.结论:转染bcl-xL基因后在心肌组织内有高效的bcl-xL蛋白表达,心肌细胞凋亡指数明显减少,流式细胞仪检测到的细胞凋亡峰明显降低,而未转染bcl-xL基因的心肌细胞因缺血缺氧出现大量的凋亡细胞,细胞凋亡峰显著增高,表明心肌细胞通过转染bcl-xL基因,虽然没有完全阻断细胞凋亡,但大大提高了抗凋亡能力.同时心肌细胞的抗缺血、缺氧和抗损伤能力明显增强,提示转染bcl-xL基因通过其抗凋亡作用能明显提高心肌细胞在缺氧条件下的生存能力.

慢性阻塞性肺疾病患者血小板活化及纤溶功能的变化与炎症反应

目的:观察慢性阻塞性肺疾病患者急性发作期血液高凝状态的变化.方法:选择2003-01/2003-10上海市扬浦区中心医院呼吸内科住院慢性阻塞性肺疾病急性发作期患者30例为患者组,男20例,女10例.选择同期本院健康体检自愿者25名为对照组,男15名,女10名.均自愿参加.给予慢性阻塞性肺疾病急性发作期患者常规治疗.患者组在入院当天及病情稳定出院前取动脉血1 mL作血气分析,包括氧分压、二氧分碳分压和血pH值.取静脉血1 mL送检白细胞、中性粒细胞.采用酶联免疫吸附反应检测两组对象静脉血中P-选择素、D-二聚体、血管性血友病因子、组织纤溶酶原激活剂、纤溶酶原激活抑制物1的水平.结果:按意向处理分析,慢性阻塞性肺疾病急性发作期患者30例,健康人25人均进入结果分析.①检测动脉血P-选择素水平反映血小板活化程度:患者组治疗前后明显高于对照组(t=9.17,4.02,P＜0.01),患者组治疗前明显高于治疗后(t=7.66,P＜0.01).②检测D-二聚体、血管性血友病因子水平反映血液是否处于高凝状态及内皮细胞功能:患者组治疗前明显高于对照组和治疗后(t=3.92～10.42,P＜0.01).③检测纤溶酶原激活抑制物1水平反映人体纤溶功能:患者组治疗前后明显高于对照组(t=8.59,8.69,P＜0.01).④检测组织纤溶酶原激活剂水平反映人体纤溶功能:患者组治疗前后明显低于对照组(t=18.33,18.42,P＜0.01).治疗后恢复不明显.⑤慢性阻塞性肺疾病急性期患者动脉血氧分压、二氧化碳分压、pH值、白细胞、中性粒细胞与血小板活化因子及纤溶功能的相关性:氧分压与纤溶酶原激活抑制物1、血管性血友病因子呈显著负相关(r=-0.364,-0.410,P＜0.05);二氧化碳分压与D-二聚体呈显著正相关(r=0.442,P＜0.05),与组织纤溶酶原激活剂呈显著负相关(r=-0.481,P＜0.01);pH与P-选择素、纤溶酶原激活抑制物1、血管性血友病因子呈显著负相关(r=-0.367,-0.387,-0.404,P＜0.05),与组织纤溶酶原激活剂呈正相关(r=0.659,P＜0.01);白细胞、中性粒细胞均与P-选择素呈显著正相关(r=0.413,0.351,P＜0.05).结论:①P-选择素参与慢性阻塞性肺疾病急性发作期的炎症反应过程,急性发作期时血液处于高凝状态,血管内皮细胞受损,纤溶功能受损.②缺氧、酸碱失衡、炎症影响血小板功能.

广西南宁地区人群与动脉硬化发病相关的对氧磷酶2基因C311S多态性观察

目的:调查广西南宁地区人群是否存在对氧磷酶2基因C311S多态性,并与其他地区或人种进行比较.方法:实验于2003-11/2004-05在广西医科大学第一附属医院和实验中心完成.随机抽取在广西医科大学第一附属医院体检中心体检者123人,均为无血缘关系南宁地区健康汉族及壮族人.用酚/氯仿法提取白细胞中的基因组DNA,应用聚合酶联反应-限制性片断长度多态性技术检测血DNA的对氧磷酶2基因C311S多态性,同时检索国内外部分文献中对氧磷酶2基因位点基因型频率后与之比较.结果:按意向处理分析,123人全部完成测试进入结果分析,其中男90人,女33人.①广西南宁地区人存在对氧磷酶2基因C311S多态性,SS基因型频率为0.61,CS+CC基因型频率为0.39,C/S等位基因频率为0.203/0.797,男女组间差异无显著性(基因型频率X2=0.000,P=0.997 5;等位基因频率X2=0.000,P=0.997 7).②广西南宁地区与广东地区比较C等位基因相对较多而S等位基因相对较少,但差异无显著性(基因型频率X2=3.075 5,P=0.079 5;等位基因频率X2=2.789 8,P=0.094 9).③与印度人的基因型频率及等位基因频率分布有显著差异(基因型频率X2=21.724 4,P＜0.01;等位基因频率X2=23.161 8,P＜0.000 1),与白种人亦有明显差异(等位基因频率X2=12.738 3,P=0.000 4);而与日本人相近(基因型频率X2=0.016 5,P=0.897 8;等位基因频率X2=0.016 5,P=0.897 8).结论:广西南宁地区多人群存在对氧磷酶2基因C311S多态性,该基因多态性可能存在一定的地域性差异.

肾上腺髓质素对缺血再灌注大鼠心肌血管细胞黏附分子1表达的抑制作用

背景:降钙素基因相关肽可减轻心肌缺血再灌注损伤.肾上腺髓质素与降钙素基因相关肽有一定的同源性,因此,一些研究推测肾上腺髓质素也可能对心肌有保护作用.目的:探讨肾上腺髓质素对缺血再灌注大鼠心肌组织血管细胞黏附分子1表达的抑制及其对心肌缺血的保护作用.设计:实验对象为SD大鼠心脏缺血再灌注模型,完全随机分组,随机设计.材料:本实验于2003-12/2004-05在咸宁学院医学院实验动物中心完成.实验选用健康雄性SD大鼠24只.方法:24只雄性SD大鼠心脏制成离体心脏缺血再灌注模型,随机分为对照组和肾上腺髓质素1-50(1×10-9),(1×10-8),(1×10-7)mol/L组.心脏缺血60 min,对照组用氧合KHB液再灌注60min,其他3组分别用氧合KHB液加肾上腺髓质素1-50(1×10-9),(1×10-8),(1×10-7)mol/L再灌注15 min,再用KHB液灌注45 min.收集冠状动脉流出液,检测肌酸激酶同工酶含量.留取左室心尖部心肌进行总RNA提取,采用RT-PCR法测定血管细胞黏附分子1mRNA的表达.主要观察指标:对照组及不同浓度肾上腺髓质素1-50组心肌组织VCAM-1 mRNA的表达.结果:电泳后,各组在194 bp处均可见一明显的扩增条带,此为甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA扩增片段,各组间甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA的表达基本一致.对照组、肾上腺髓质素1-50(1×10-9)mol/L组在334bp处可见亮度强、边界明显清楚的条带为血管细胞黏附分子1 mRNA扩增片段.肾上腺髓质素1-50(1×10-8)mol/L组血管细胞黏附分子1 mRNA扩增条带亮度明显减弱.肾上腺髓质素1-50(1×10-7)mol/L组仅为亮度微弱且模糊的扩增条带.肾上腺髓质素1-50(1×10-8),(1×10-7)mol/L组扩增的血管细胞黏附分子1mRNA与甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA的灰度值比值(0.6±0.31,0.5±0.36)明显低于对照组(1.2±0.52)(P＜0.05).结论:心肌缺血再灌注时,肾上腺髓质素1-50可呈浓度依赖性地抑制心肌组织血管细胞黏附分子-1mRNA的表达.

骨髓间充质干细胞的体外趋化与单核细胞趋化蛋白1的作用

目的:观察单核细胞趋化蛋白1对骨髓间充质干细胞体外增殖和迁移的作用,及单核细胞趋化蛋白1抗体对该作用的影响.方法:实验于2003-12/2004-02在军事医学科学院野战输血研究所干细胞生物实验室完成.取10只健康雄性Wistar大鼠骨髓,体外分离、培养骨髓间充质干细胞,选择第2代作为实验细胞.观察0,5,25,50,75,150 μg/L单核细胞趋化蛋白1对大鼠骨髓间充质干细胞的生物学作用;通过细胞迁移实验,观察0,5,25,50,75,150 μg/L单核细胞趋化蛋白1对骨髓间充质干细胞的体外趋化作用,以及加入单核细胞趋化蛋白1抗体中和后其对骨髓间充质干细胞趋化作用的变化;应用反转录多聚酶链反应方法,检测大鼠骨髓间充质干细胞有无单核细胞趋化蛋白1相关受体细胞趋化因子受体2的表达.结果:①二甲基偶氮唑盐法测定细胞增殖实验结果:在体外,单核细胞趋化蛋白1以浓度梯度(0,5,25,50,75,150 μg/L)依赖方式促进大鼠骨髓间充质干细胞的增殖,但作用较温和.②细胞迁移实验结果:单核细胞趋化蛋白1以浓度梯度(0,5,25,50,75,150 μg/L)依赖方式促进大鼠骨髓骨髓间充质干细胞的定向迁移,该作用显著(P＜0.05).③抗体中和后的迁移实验:75 μg/L质量浓度单核细胞趋化蛋白1对骨髓间充质干细胞的促迁移作用可被单核细胞趋化蛋白1中和抗体明显减弱(P＜0.05).④反转录聚合酶链反应方法证实骨髓间充质干细胞表达单核细胞趋化蛋白1的相关受体细胞趋化因子受体2.结论:在体外,单核细胞趋化蛋白1以浓度梯度依赖方式引起骨髓间充质干细胞的定向迁移,而且该作用可被单核细胞趋化蛋白1中和抗体减弱.单核细胞趋化蛋白1可能通过与细胞趋化因子受体2结合后发挥作用.本实验为了将影响因素相对简单化,便于观察其中的相互关系,并非将体外实验结果完全等同于在体情况.

不同实验浓度补肾中药血清对人成骨细胞增殖及分化的促进作用

目的:采用补肾中药(鹿茸及骨碎补等)血清在体外培养人成骨细胞,观察其对成骨细胞分化增殖以及骨钙素水平的影响.方法:实验于2004-06/12在南方医科大学南方医院完成.SD系雄性大鼠4只,分为4组.分别灌服(以生药量计量)高浓度7.08 g/mL、中浓度3.54 g/mL、低浓度1.77 g/mL的补肾中药,2次/d,每次2 mL/只,对照组灌服等量生理盐水,连续灌胃3 d,末次灌胃后2 h在无菌条件下抽取分离大鼠血清,标记为补肾中药高、中、低浓度血清和对照血清.成人髂骨松质骨取材于南方医院脊柱骨科知情同意手术者.采用胰蛋白酶和胶原酶消化法,分离培养后取第3代人成骨细胞,分别加入含有高、中、低不同浓度补肾中药的大鼠血清培养48 h.成骨细胞增殖及分化状况以流式细胞仪检测;成骨细胞分化的早期标记碱性磷酸酶活性以化学比色法检测,反映骨吸收及骨形成指标的骨钙素含量以放射免疫法检测.结果:进入统计分析的大鼠保持为4只,无缺失值.①成骨细胞细胞增殖指数:经高、中、低浓度补肾中药血清干预组明显高于对照组(27.96±5.43,30.78±5.05,23.91±5.75,18.53±3.91,P＜0.01),以中浓度补肾血清作用更明显.②成骨细胞的碱性磷酸酶活性(金氏单位):高、中、低3种浓度补肾中药血清干预组明显高于对照组(42±0.8,38±1.1,31±0.9,13±1.2,P＜0.01),以高浓度补肾血清作用明显,且呈剂量依赖性.③骨钙素检测显示:高、中、低3种不同浓度的补肾中药血清组含量显著高于对照组[(4.7±0.5),(4.4±0.7),(3.2±0.4),(1.9±0.2)mg/L,P＜0.01],且呈剂量依赖性.结论:补肾中药血清能促进成骨细胞增殖分化,提高碱性磷酸酶活性,增强骨钙素分泌而促进骨形成,在实验浓度内呈剂量依赖性.

2型糖尿病及糖尿病肾病的发生与对氧磷酯酶2S311C基因多态性的关联

目的:探讨对氧磷酯酶2S311C多态性与2型糖尿病及糖尿病肾病发生的关系.方法:选择2003-05/2004-09解放军第四军医大学唐都医院内分泌科住院的2型糖尿病患者94例(糖尿病组),其中包括糖尿病肾病患者29例(剔除有尿蛋白和高血压而无视网膜病变患者17例),未伴发糖尿病肾病患者42例(剔除了尿白蛋白阴性但同时有糖尿病视网膜等微血管病变患者6例).选择同期本院体检中心体检健康自愿者45人为对照组.运用荧光偏振-模板依赖的染料掺入反应法技术检测3组对象对氧磷酯酶2 S311C基因多态性的等位基因和基因型分布频率.结果:按意向处理分析,进入结果分析糖尿病患者94例,健康体检者45人.为了分析糖尿病肾病与对氧磷酯酶2C311等位基因,进入结果分析的糖尿病肾病患者29例,未伴发糖尿病肾病患者42例.①糖尿病组对氧磷酯酶2C311等位基因频率显著高于对照组(43.6%,31.1%,X2=3.981,P＜0.05,OR=1.713,95%CI:1.007～2.914).②糖尿病肾病与未伴发糖尿病肾病患者C311等位基因及基因型分布无明显差异(P＞0.05).③Logistic回归显示,收缩压、三酰甘油升高是2型糖尿病发生的危险因素,而对氧磷酯酶2C 311等位基因(P=0.106)未进入回归方程.结论:对氧磷酯酶2 C311等位基因与2型糖尿病患病相关联,为其微效基因,而与糖尿病肾病并发症的发生无关.

心肌梗死患者心室重构演变及内分泌激素变化与神经内分泌拮抗剂的作用

目的:心肌梗死后交感神经系统和肾素-血管紧张素-醛固酮系统激活所导致的血浆中内分泌激素水平升高是促进心室重构发生的决定因素.观察联合应用神经内分泌拮抗剂对急性心肌梗死患者心室重构和血浆内分泌激素水平的影响.方法:选择2002-02/2003-02解放军总医院心血管内科住院的急性心肌梗死患者121例为观察对象.其中67例患者获得完整的资料,男58例,女9例,年龄38～75岁.入选患者病情相对稳定,无急性左心功能不全.均给予神经内分泌拮抗剂β受体阻滞剂+血管紧张素转换酶抑制剂联合治疗,分别在出院后3,6个月,1年时对患者进行超声心动图检查,测定左室舒张期末内径、左室收缩期末内径、左室舒张期末容积、左室收缩末期容积和左室射血分数;并于出院后6个月复查血浆内分泌激素水平.结果:进入结果分析急性心肌梗死患者67例.①出院后6个月急性心肌梗死患者血浆肾素、血管紧张素Ⅱ和去甲肾上腺素水平明显低于治疗前[(2.03±2.07),(45.34±26.47),(0.40±0.29)ng/L;(1.22±1.79),(30.99±15.52),(0.48±0.32)ng/L,t=2.74.4.54,2.01,P＜0.05～0.01].②患者出院后6个月及1年左室收缩期末内径明显小于治疗前[(34.00±5.04),(34.31±4.89),(36.18±5.05)mm,t=3.32,2.02,P＜0.01,0.05];出院后6个月左室收缩期末容积明显小于治疗前[(53.48±22.67),(59.23±19.87)mL,t=2.51,P＜0.01];出院后3,6个月,1年左室射血分数明显高于治疗前[(55.90±8.72)%,(55.55±8.40)%,(55.05±7.57)%,(52.16±8.77)%,t=-2.95,-2.79,-2.01,P＜0.05～0.01].结论:联合应用神经内分泌拮抗剂能有效降低血浆肾素、血管紧张素Ⅱ和去甲肾上腺素水平,这可能正是拮抗神经内分泌激素药物能够逆转和抑制心室重构的作用途径.

人胰岛细胞移植中胰岛细胞活性研究

目的:器官联合切取中的不同胰腺获取方法是否对于胰岛细胞的活性有影响.方法:实验于2001-08/2004-08在南方医科大学珠江医院器官移植中心和南方医科大学解剖教研室完成,12例自愿捐赠器官供者,采用高渗枸橼酸盐嘌呤溶液经过腹主动脉进行原位灌注后,进行胰腺、肾脏联合切取,肝脏、胰腺、肾脏联合切取及各器官的单独切取.取后采用胶原酶P消化胰腺,分离并纯化胰岛细胞,进行胰岛细胞活性染色,然后对比不同切除方法对于胰岛细胞活性率的影响.结果:胰腺、肾脏联合切取,肝脏、胰腺、肾脏联合切取及各器官的单独切取,如顺利、无污染、在冷却血时间5 h以内,胰岛细胞活性率都在80%,经原位灌注后各方法之间无明显差别.结论:经腹主动脉进行原位灌注后,各种方法切取都符合无污染,冷却时间5 h以内,不会影响胰岛细胞的活性.

构建中国汉族人亚健康状态肾阴虚证的DNA消减文库

目的:采用抑制性消减杂交技术构建汉族人亚健康状态肾阴虚证DNA消减文库.方法:实验于2004-02在南方医科大学南方医院糖尿病分子实验室完成.样本来源于南方医科大学南方医院汉族亚健康且中医辨证为肾阴.虚证的患者1例及健康自愿者1名作为其对照组.用硅胶法抽提血白细胞DNA,用RsaI酶切基因组DNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应,将聚合酶链反应产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用聚合酶链反应方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建亚健康肾阴虚证DNA消减文库.结果:用抑制性消减杂交方法筛选出了亚健康肾阴虚证的差异DNA片段,得到680个白色克隆,随机调取96个白色克隆,再经聚合酶链反应方法快速筛选出阳性重组质粒91个,从而成功地构建了亚健康肾阴虚证的DNA消减文库.结论:抑制性消减杂交技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建亚健康肾阴虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆亚健康肾阴虚证相关基因奠定了基础.

蛋白激酶C活化对大鼠缺血再灌注心肌细胞核三磷酸肌醇受体结合活性的影响

目的:观察具有抑制心肌细胞凋亡作用的蛋白激酶C活化对缺血再灌注心肌细胞核三磷酸肌醇受体结合活性的影响,以探讨其对心肌的保护作用.方法:实验于2003-04/07在解放军第三军医大学药理教研室完成.选用SD健康大鼠12只.随机分为2组,缺血再灌注组及假手术对照组,每组6只.缺血再灌注组:冠状动脉结扎30min,再灌注3 h.假手术对照组:只埋线不结扎冠状动脉.采用蔗糖密度梯度离心法提纯心肌细胞核,将分离纯化的两组心肌细胞核分别平等进行2个亚组:磷酸化组和非磷酸化组,磷酸化组进行蛋白激酶C激动剂12-o-十四烷酰佛波醋酸酯-13磷酸化干预后,与非磷酸化组同时进行氚-1,4,5三磷酸肌醇的放射受体分析,比较两组细胞核经磷酸化后细胞核三磷酸肌醇受体结合活性变化.结果:进入结果分析大鼠12只.①心肌细胞凋亡指数:缺血再灌注组明显高于假手术对照组(9.88±0.33,0.6±0.0,P＜0.01).②大鼠心肌细胞核膜三磷酸肌醇受体的结合活性:缺血再灌注组与磷酸化组明显低于非磷酸化组[(88.27±0.08),(136.05±0.05)pmol/g,P＜0.05].③大鼠心肌细胞核膜三磷酸肌醇受体的结合力:磷酸化组和非磷酸化组无明显差异[(102.83±0.09),(106.24±0.26)pmol/g,P＞0.05].结论:大鼠心肌缺血再灌注时,蛋白激酶C可能是通过抑制心肌细胞核膜三磷酸肌醇受体的结合活性,进而参与了抑制缺血再灌注性心肌细胞凋亡的发生与发展.

军队社区老年人冠心病8项危险因素的分布及其集聚

目的:探讨军队社区老年人冠心病8项危险因素的流行率及集聚特点.方法:于2004-05/06集中对军队社区离退休干部2 319人进行健康查体,同时填写总后勤部卫生部制定的干部健康体检及问卷调查表.选择资料完整、年龄≥60岁且自愿参加本项目的男性1 728人,作为军队老年组,年龄60～94岁;将已在国内正式发行刊物上发表的北京医院资料中60～92岁男性5 197人作为地方老年组,30～44岁男性3 993人为中青年组.统计军队社区老年人的吸烟、高血压、高胆固醇、高三酰甘油、高空腹血糖、超重及肥胖等冠心病危险因素的流行率及其集聚率,并与中青年对照组和地方老年组进行对比分析.结果:军队老年组1 728人、地方老年组5 197人及中青年组3 393人全部进入结果分析.①军队老年组冠心病危险因素流行率分别为年龄100%、高血压43.8%、吸烟率15.8%、总胆固醇46.3%、高三酰甘油32.8%、高空腹血糖13.0%、超重40.0%及肥胖5.0%.②军队老年组三酰甘油流行率显著高于地方老年组[31.5%,(x2=29.78,P＜0.01)],高血糖及超重显著低于地方老年组[15.7%,43.8%,(X2=7.62,7.44,P＜0.01)].③无论是在军队社区还是地方社区,老年人冠心病多种危险因素集聚率明显高于中青年对照组(x2=6.54～2 770.32,P＜0.01).④2项危险因素集聚军队老年组显著低于地方老年组[73.0%,84.2%,(X2=107.98,P＜0.01)].⑤在8项危险因素的调查中,≥3项危险因素集聚现象两组比较数据基本接近(P＞0.05).结论:军队社区老年人冠心病的主要危险因素流行率依次为年龄、高胆固醇、高血压、超重、高三酰甘油、吸烟、高血糖及肥胖.军队社区老年人高三酰甘油流行率明显高于地方社区老年人,高血压、高血糖及超重的流行率显著低于地方社区老年人,而军队社区老年人冠心病≥3项危险因素的集聚与地方社区老年人大致相同.

再发性心肌梗死患者的相关危险因素

目的:分析再发性心肌梗死的相关危险因素.方法:选择2000-05/2004-10阜新地区阜新市中心医院、阜新市第二人民医院、阜新矿务局总医院心内科住院的再发性心肌梗死患者47例为再发性心肌梗死组,男33例,女14例.选择同期在3家医院住院确诊为急性首发心肌梗死患者271例为对照组,男169例,女102例.两组患者均知情同意,并分别接受了下面内容调查和检测:①心血管病危险因素调查表(包括吸烟、饮食习惯、生活方式、是否参加体育锻炼、血糖、血脂等).②症状自评量表,分值越高,代表精神状况越差.③生活事件量表中生活事件精神紧张值评分越高,遭遇负性生活事件越多,精神状况越差.④生物学和血生化指标检查.结果:按意向处理分析,进入结果分析再发性心肌梗死和急性心肌梗死患者分别为47和271例.①再发心肌梗死组的平均年龄、吸烟指数、未参加体育锻炼例数、平均症状自评量表总分和遭遇生活事件精神紧张值平均值均明显高于对照组[(59±15)岁,(36.3±13.4)年支,68.1%(32/47),166.4±44.8,18.6±5.2;(56±11)岁,(25.0±9.3)年支,50.9%(138/271),141.6±39.6,10.2±3.3,t=2.249～4.131,X2=4.092～4.550,P＜0.05～0.01].②再发性心肌梗死组的平均收缩压、平均舒张压、体质量指数、平均静息心率、空腹血糖、总胆固醇和三酰甘油浓度均明显高于对照组(t=2.147～3.383,P＜0.05～0.01),高密度脂蛋白胆固醇浓度明显低于对照组(t=3.126,P＜0.01).结论:首发性心肌梗死后行为因素及遭遇均为再发的危险因子,具有多项高危因子累积者是再发性心肌梗死的主要危险人群.

99Tc亚甲基二膦酸盐改善类风湿性关节炎患者晨僵时间及肿胀和压痛指数的效果

背景:目前治疗类风湿性关节炎药物众多,99Tc亚甲基二膦酸盐利用微量元素锝的价态变化中电子得失而刺激镇痛消炎作用的产生,是治疗类风湿性关节炎的一种新药.目的:观察99Tc亚甲基二膦酸盐治疗类风湿性关节炎.设计:随机对照实验.单位:解放军第三军医大学新桥医院的中医科.对象:2000-03/2001-12新桥医院被确诊的住院类风湿性关节炎患者85例,纳入者66例,晨僵至少1 h、3个或3个以上关节受累、对称性关节炎、有类风湿结节、血清类风湿因子阳性、血沉增快、X射线表现,具备以上4项或以上,并至少持续6周.男23例,女43例,年龄18～62岁,平均42.23岁.病程2月～12年,短者,将受试者随机分为试验组和对照组,每组各33例.方法:分为治疗组和对照组,治疗组用静脉滴注、99Tc亚甲基二膦酸盐加口服安慰剂,对照组用静脉滴注,安慰剂加口服奈普生,12 d为一疗程.观察两者的晨僵改善时间、关节压痛数、关节肿胀数及血沉、C-反应蛋白、类风湿因子及总有效率,以此进行疗效评价.主要观察指标:99Tc亚甲基二膦酸盐对风湿病患者晨僵时间、关节压痛数、关节肿胀数、血沉、类风湿因子、C-反应蛋白等指标变化的影响,药物的副反应,并与奈普生的效果相比较.结果:按意向处理分析,66例进入结果分析.①试验组在缩短晨僵时间(70.39±40.32)min、减少关节压痛数(3.27±2.21)个及肿胀数(3.20±2.38)个方面明显优于对照组[(35.82±24.65)min,(3.12±2.08)个,(2.02±1.25)个],(P＜0.01～0.05).②试验组治疗前后血沉差值与对照组治疗前后差值比较基本相似、试验组治疗前后C-反应蛋白差值与对照组治疗前后比较基本相似,试验组治疗前后类风湿因子差值与对照组治疗前后差值比较基本相似.③试验组的有效率85%(28/33)明显高于对照组64%(21/33)(x=4.89,P＜0.05).结论:99Tc亚甲基二膦酸盐治疗类风湿性关节炎时,可改善患者的关节肿胀和压痛症状以及晨僵时间,其治疗作用优于奈普生对照组,而对血沉、C-反应蛋白及类风湿因子的影响同奈普生相似.

血脂代谢紊乱与维持性血液透析患者的心血管并发症

目的:分析血脂主要成分与维持性血液透析患者心血管并发症的关系.资料来源:应用计算机检索Medline数据库1997-01/2004-12与血脂代谢紊乱及终末期肾功能衰竭血液透析心血管并发症相关的文章,检索词"lipid,cardiovascular disease,chronic renal failure",并限定文章语言种类为English.计算机检索清华全文数据库2001-01/2004-12关于血脂代谢紊乱及终末期肾功能衰竭血液透析心血管并发症相关的文章,限定文章语言种类为中文,检索词"血脂,血液透析,心血管并发症". 资料选择:对资料进行初审,选取包括处理组和对照组的文献,筛除明显不随机的研究,对剩余的文献开始查找全文.纳入标准为①随机对照研究.②实验或临床研究包含平行对照组.排除标准:重复性研究.资料提炼:共收集到329篇关于血脂代谢紊乱及终末期肾功能衰竭血液透析心血管并发症的随机和未随机研究文章,35个实验或临床研究符合纳入标准.排除的294篇文章,211篇为未随机研究或重复性研究,83篇为综述类文章.资料综合:35个试验包括约10 521例患者,证实了高三酰甘油、低高密度脂蛋白胆固醇是并发心血管疾病的维持性血液透析患者血脂特点,而血脂异常与老龄、糖尿病等因素一起诱发冠状动脉缺血、动脉粥样斑块形成或动脉硬化等,加速血液透析患者心血管并发症的发生发展.积极的综合康复治疗及药物降脂治疗等可有效纠正血脂异常,并减少终末期肾功能衰竭患者心血管并发症的患病率.结论:血脂代谢紊乱是维持性血液透析患者心血管并发症的主要致病因素之一,通过对血液透析患者采用合适的透析处方、并长期辅以综合康复治疗及药物治疗等措施积极纠正血脂代谢紊乱,可有效降低血液透析患者心血管疾病患病率,提高其生活质量.

自由基伤害衰老学说的辩证认识

目的:辩证地认识和评价自由基伤害衰老学说在解释衰老机制中的科学价值.资料来源:应用计算机检索Medline和Embase 1976-04/2004-10期间的有关自由基伤害衰老学说的文献,检索词"free radical,aging,dialectical",并限定文章语言种类为English.观察对象为老年人和衰老动物.资料选择:选取关于自由基伤害衰老学说的文献,进行初审.质量评价主要考察资料的真实性,调查设计是否严密,实施过程是否严格,统计学处理是否合理.资料提炼:共检索30篇关于自由基伤害衰老学说在解释衰老机制中价值的文章,18个试验符合纳入标准.排除的12篇试验中,7篇是因重复的同一研究,5篇是Meta分析研究.资料综合:对自由基伤害衰老学说解释衰老本质和延长大寿限的试验结果进行比较分析.结论:自由基伤害衰老学说有重要的生物医学学术价值,但没能成功地解释引起衰老的根本原因及衰老过程的本质.

冠心病临床表型与凝血纤溶指标的关系

目的观察不同临床表型冠心病患者血清纤维蛋白原水平和血浆组织型纤溶酶原激活物、纤溶酶原激活物抑制物活性及血浆D-二聚体水平变化分析其意义.方法选择2001-07/2004-04沈阳医学院沈洲医院心五科收治的急性心肌梗死患者28例;不稳定型心绞痛患者24例,;稳定型心绞痛患者30例.选择同期辽宁省血液中心沈阳中心血站体检健康献血者20名为对照组.用发色底物法测定各组对象血浆组织型纤溶酶原激活物、纤溶酶原激活物抑制物活性,反映人体纤溶功能;用酶联免疫吸附双抗夹心法测定血浆D-二聚体水平,用凝固法测定血清纤维蛋白原水平,反映机体血液是否处于高凝状态.结果急性心肌梗死患者28例、不稳定型心绞痛患者24例、稳定型心绞痛患者30例、健康人20名均进入结果分析.①血浆组织型纤溶酶原激活物活性:急性心肌梗死和不稳定型心绞痛患者均明显低于稳定型心绞痛和对照组(t=2.88～3.41,P＜0.01).②血浆纤溶酶原激活物抑制物活性:急性心肌梗死和不稳定型心绞痛患者均明显高于稳定型心绞痛和对照组(t=23.65～28.54,P＜0.01).③血浆D-二聚体水平:急性心肌梗死和不稳定型心绞痛患者均明显高于稳定型心绞痛与对照组(t=4.24～35.01,P＜0.01).④血清纤维蛋白原水平:急性心肌梗死和不稳定型心绞痛患者均明显高于稳定型心绞痛和对照组(t=2.96～8.01,P＜0.01).结论组织型纤溶酶原激活物、组织型纤溶酶原激活物、血清纤维蛋白原和D-二聚体的测定有助于了解冠心病患者的病情变化和判断预后.

体能和呼吸肌锻炼对慢性阻塞性肺疾病患者运动耐受能力和生活质量的影响

目的探讨体能锻炼和呼吸肌锻炼对慢性阻塞性肺病患者运动能力和生活质量的影响.方法选择2003-07/12中国医科大学-院呼吸科门诊慢性阻塞性肺疾病缓解期患者49例,随机分成肺康复组(n=26)与对照组(n=23).肺康复组进行药物治疗同时给予体能锻炼和呼吸肌锻炼,对照组仅在门诊取药治疗.两组均坚持治疗及锻炼24周.分别在治疗前及治疗后进行运动耐力和生活质量的评定.运动耐力采用6 min步行距离评定,生活质量采用生活质量评分方法评定.生活质量评分方法根据质量高低依次为1,2,3,4分.1分为好,分数越高则生活质量越差.结果①治疗后肺康复组患者6 min步行距离较治疗前明显延长[(412.53±58.12),(328.73±52.13)m,P＜0.01].②治疗后肺康复组生存质量评分的总均分较治疗前有所降低(2.19±0.35,2.64±0.42,t=5.64,P＜0.01);对照组治疗前后评分相似(2.60±0.36,2.62±0.41,t=1.64,P＞0.05).结论体能锻炼和呼吸肌锻炼改善了慢性阻塞性肺疾病患者的运动耐受能力和生活质量.

手法按摩预防孕产妇下肢肌肉痉挛发作的效果观察

目的观察采用手法按摩方法预防孕产妇下肢肌肉痉挛的效果.方法选择2003-01/12在辽宁省人民医院建卡检查并在本院分娩孕产妇121人,随机分为2组,观察组56人和对照组65人.2组均补充钙剂,观察组在其基础上采用下肢部自我手法按摩.结果进入结果分析孕产妇121人.观察组9人(39次)发生下肢肌肉痉挛,平均每例发作(4.33±0.78)次,明显少于对照组[26人,159次,(6.12±0.54)次,t=2.89,P＜0.05].结论手法按摩可有效预防孕产妇下肢肌肉痉挛.

抗抑郁治疗对胃肠功能紊乱症状患者的干预效应

目的观察抗抑郁干预对胃肠功能紊乱症状的改善作用.方法选择2002-01/2002-12沈北铁路医院内科门诊和住院的胃肠功能紊乱患者36例.治疗组患者常规口服马丁啉10 mg和谷维素30 mg,3次/d,在此基础上加用米氮平30 mg,1次/d,口服,疗程6周.采用症状自评量表进行治疗前后的心理健康水平评定,以国内常模为参照.结果按意向处理分析,36例全部进入结果分析.抗抑郁药物干预6周后症状自评量表各因子评分均比国内常模下降(P＜0.001),以抑郁、焦虑、恐惧评分下降明显.结论抗抑郁药可明显改善胃肠功能紊乱患者的症状,改善其心理健康水平,尤其明显降低胃肠功能紊乱患者躯体化症状.

实施家庭氧疗30 d慢性阻塞性肺疾病患者的运动功能和生活自理能力

目的观察长期家庭氧疗对慢性阻塞性肺疾病患者运动能力和生活自理能力的影响.方法选择2002-01/2004-12中国医科大学附属第一医院呼吸科慢性阻塞性肺疾病28例患者,随机(隐匿分配)为2组,对照组12例,实验组16例,做长期家庭随访观察对象.对照组行抗炎、平喘、化痰等常规治疗;实验组除上述治疗外,在家庭内应用双鼻导管氧气筒吸氧,氧流量1～2 L/min,每天吸氧少18 h.两组疗程均为30 d.于治疗第2,10,20,30天家庭随访时观察其病情状况及生活自理能力的变化.并治疗前后于医院呼吸研究室行运动功能检查,内容包括:大运动能力,无氧阈,氧耗量,6min步行实验.结果 28例患者均完成治疗和运动功能检查.治疗后第2,10,20,30天进行随访,随访率100%.①实验组的生活自理能力改善的速度及程度明显好于对照组,第20天时能够室内步行,第30天除洗衣外日常生活自理,可院内步行.②实验组大运动能力明显高于对照组(111.7±14.3,82.1±14.5,t=2.962,P＜0.01),实验组无氧阈、氧耗量、6 min步行实验的检测结果均优于对照组(t=2.857,2.275,2.215,P＜0.01).结论长期家庭氧疗可提高慢性阻塞性肺疾病患者的运动能力和生活自理能力.

运动后踝臂指数评价糖尿病下肢动脉病变

目的对比分析运动前后的踝臂指数变化,评价糖尿病患者下肢动脉血管病变的程度.方法于2002-03/2004-05以辽东学院教学医院丹东市第二医院门诊及住院患者中考虑有下肢动脉血管病变的糖尿病患者为观察对象.行肢体血管超声及造影检查后将符合诊断的144例患者分为2组,血管正常组(n=20)和狭窄组(n=22).分组测定静息及运动后踝臂指数,对比分析静息与运动后踝臂指数与血管超声及造影检查结果的一致性,用以判定其病变程度.结果按意向处理分析,144例患者全部进入结果分析.①静息踝臂指数＞0.96并运动后踝臂指数＞0.9的20例中经血管造影及超声检查证实有狭窄8例,40%病变者未被发现.②静息踝臂指数＜0.9并运动后踝臂指数＜0.8的108例中经血管造影及超声检查证实狭窄104例,诊断正确符合率96.3%.③静息踝臂指数＞0.96并运动后踝臂指数＜0.8的16例经血管造影及超声检查证实狭窄.④静息踝臂指数狭窄符合率81.3%;运动后踝臂指数狭窄符合率93.8%.运动后踝臂指数诊断狭窄率显著高于静息踝臂指数(X2=5.67,P＜0.05).结论当运动后踝臂指数＜0.8即有严重动脉狭窄时,血管造影与超声检查的检出符合率较高,提示无创伤性运动后踝臂指数可有效评估糖尿病下肢动脉血管功能状态及病变严重程度和预后.

自行车运动及游泳对2型糖尿病患者周围神经病变的改善作用

背景:糖尿病周围神经病变发生缓慢,其机制目前尚不完全清楚,近年普遍认为本病与代谢紊乱、血管障碍、神经营养因子减少、氧自由基损伤等多种因素共同作用有关.有氧运动可增加热量的消耗,调节神经内分泌激素,减轻体质量,提高胰岛素的敏感性,进而控制血糖,改善脂质代谢,增加纤溶作用,增强神经细胞营养,起到促进其生长,增强神经传导功能的作用,从而改善周围神经病变.但糖尿病周围神经病变患者适合何种运动方式和运动量?有待在实践中进一步摸索.

中老年吸烟与不吸烟者对血脂的影响:1:1 配对比较

目的观察吸烟对中老年人血脂的影响.方法收集2004-05/10在鞍山市中心医院门诊进行健康体检者270人,根据有无吸烟情况分组后再按相同性别、年龄、身高、体质量、职业1:1配对,分为吸烟组85人和不吸烟组85人;然后再根据吸烟指数将吸烟组健康体检者分为大量吸烟组(吸烟指数≥100年支,n=39)和小量吸烟组(吸烟指数＜100年支,n=46).体检期间做总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇检查.结果吸烟组总胆固醇、三酰甘油浓度和总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇比值均明显高于不吸烟组,而高密度脂蛋白胆固醇浓度明显低于不吸烟组(t=2.041～2.142,P＜0.05～0.01).大量吸烟组三酰甘油浓度和总胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇、比值均明显高于小量吸烟组,而高密度脂蛋白胆固醇浓度明显低于小量吸烟组(t=2.041～2.142,P＜0.05～0.01).结论 吸烟可引起中老年人血清脂质紊乱,且大量吸烟的中老年人更易发生血脂紊乱.

性格差异与急性冠状动脉综合征患者血浆内皮素的关系

背景:有关人的性格和情绪应激在急性冠状动脉综合征的危险分级中所起的作用尚无定论.A型性格的人普遍表现出高度竞争性,不满足现状,不断与所处环境进行斗争;B型性格情绪沉着稳定,较少受环境改变影响情绪.

儿童反射亢进型神经原性尿失禁的手术治疗及术后排尿训练

背景:脊柱裂引起的脊髓发育不良是儿童常见的神经系统发育畸形之一,由此而引起的神经原性尿失禁可严重影响患儿的生活质量.目的:观察反射亢进型神经源性尿失禁的手术治疗及术后排尿训练效果.设计:前后对照,随访观察.单位:郑州大学第一附属医院的小儿外科.对象:于1992-01/2000-10治疗81例反射亢进型神经原性尿失禁患儿,男54例,女27例,年龄4～14岁,术前检查均证实盆底肌松弛,膀胱容量小.所有患者均为神经原性尿失禁患者并经尿流动力学结果证实为反射亢进型神经原性膀胱.方法:对81例患者采用双侧髂腰肌加强盆底肌,回肠去黏膜带血管蒂浆肌层补片的基础上,行膀胱扩大术进行治疗,其中5例行锥状肌膀胱颈悬吊.术后3周,伤口愈合良好后,进行康复协调训练.随访患者术后尿失禁症状改善情况.结果:81例术后2周拔除尿管后,40例患儿尿前有尿意,尿流呈线状,两次排尿间隔在60 min以上,膀胱大容量、残余尿量、膀胱压力接近正常或正常,视为明显改善.23例患儿有尿意,尿流呈线状,两次排尿间隔时间在40 min左右,膀胱大容量、残余尿量较术前减少,膀胱压力增大,视为改善.18例无效,经过正规排尿训练后较前有改善.对9例进行膀胱尿道测压,膀胱压平均1.2 kPa,尿道压平均1.15 kPa,剩余尿30～50 mL,大容量300～600 mL.81例患儿有63例得到严格随访,完整随访期6个月,其余部分随访资料不完整.63例被随访者中56例控尿明显改善,5例改善,2例无效,总有效率达到97%.结论:双侧髂腰肌加强盆底肌,回肠去黏膜带血管蒂浆肌层补片加强膀胱逼尿肌基础上行膀胱扩大术是治疗小儿反射亢进型神经原性尿失禁的较好方法,配合术后排尿反射及控制训练对治疗效果影响明显.

新生儿期干预对早产儿神经系统发育效果的评价

目的:观察新生儿期干预对早产儿神经系统发育的影响.方法:选择2003-06/2004-01解放军总医院及其309临床部病房及门诊收治的早产儿27例及足月健康儿10人.将1岁以内接受早期干预和定期随访的早产儿分成3组:出生后即开始接受干预早产儿设为.新生儿早期干预组(n=10),生后1个月～1岁开始接受干预早产儿设为婴儿早期干预组(n=12).将1岁后才就诊的早产儿(n=5)设为非早期干预组;正常健康足月儿设为足月儿组(n=10),生后即接受指导和随访.在新生儿期和婴幼儿期采用不同有针对性的康复干预措施.在生后1周及4周即新生儿期采用新生儿20项行为神经测定法评价新生儿神经运动发育情况,包括5部分内容,即行为能力、被动肌张力、主动肌张力、原始反射和一般评估.1个月后采用52项神经运动检查法检查幼儿的大运动发育建立时间.结果:按意向处理分析,进入结果分析早产儿27例,足月儿10人.①20项行为神经测定法评分中5部分内容评分:新生儿早期干预组在生后4周均明显高于生后1周(t=-4.12～-6.82,P＜0.05).足月儿组在生后4周虽较生后1周时有所进步,但无明显差异(P＞0.05);生后4周时新生儿早期干预组与足月儿组无明显差异(P＞0.05).②4组婴儿神经运动发育存在差距,但随着干预指导的进行,早期干预组可翻身、抬头、独坐时间晚于足月儿组[(3.7±0.25),(4.3±0.34),(6.7±0.35)个月;(3.0±0.27),(3.5±0.13),(6.1±0.19)个月,t=6.16,6.99,4.70,P＜0.01];可爬、站、走时间接近足月儿[(8.7±0.68),(10.2±0.74),(13.0±1.28)个月;(8.2±0.22),(9.8±1.07),(12.9±0.84)个月,P＞0.05].婴儿期干预组和非早期干预组在大运动发育时间明显落后于足月儿组(t=4.89～8.91,P＜0.01).结论:新生儿早期干预较婴儿早期干预及1岁以后干预可更好地促进早产儿神经系统发育,使早产儿神经系统发育接近足月儿.

邳州市小儿麻痹后遗症评估分析报告

背景:15年前国内在江苏省与山东省交界地区大规模爆发脊髓灰质炎流行,15年后存活患儿日常生活能力以及功能概况如何?目的:明确残存患儿的功能状态,提出适合的康复医学建议.设计:以患者为对象的横断面的调查.单位:南京医科大学第一附属医院康复医学科.对象:1989年发病的邳州小儿麻痹后遗症患者共545例,以当地希望之家为中心随机化选取能够接受调查与评估的患儿333例小儿麻痹后遗症患者,采用集中方式在一周内完成评估.方法:邳州市进入康复项目的333例小儿麻痹后遗症患者集中至希望之家,由2位康复医师和1位治疗师为一个评估小组,共5组同时进行肢体功能与肌力、生活自理能力、手术矫治和辅助具配置的评定.肌力评定、肢体功能情况采用积分评定.关节活动检查用关节角度计方式.肢体长度测量采用皮尺测定髂前上棘至内踝和脐至内踝的距离,分别测定解剖长度和功能长度.肢体畸形分析主要采用目测和体检的方式.主要观察指标:主要结局包括足的形态、骨盆位置、髋关节、膝关节和踝关节的外形、肢体围度等. 结果:按意向处理分析,333例小儿麻痹后遗症患者进入结果分析,年龄主要集中在15～17岁,占总例数的97%.独立行走135例(40.5%),使用双拐148例(44.4%).双下肢功能长度差距小值0.5 cm,大值13.0 cm.双下肢累及(112例,33.6%)少于单下肢累及(211例,65.8%),四肢累及3例,上肢累及仅2例.另外已有46例患者已经行脊柱侧弯矫正术.使用矫形器的患者共计254例,其中双长腿矫形器110例,单腿131例.其中单左腿62例,单右腿79例.踝足矫形器3例.结论:除了肌力的因素外,导致步行能力障碍的重要原因是肢体畸形,多数肢体畸形可以通过手术、矫形器和康复训练得到显著改善,所有接受调查患儿存在进一步康复治疗的必要.建议成立多学科合作的团队,建立集体讨论制度,使这批小儿麻痹后遗症患者的康复功能达到好的水平.

认知应物测验/临床语言、听力里程量表及年龄和发育进程问卷对中国婴幼儿发育评估的应用

目的:以盖泽尔发育诊断量表为效度标准,检测认知应物测验/临床语言、听力里程量表及年龄和发育进程问卷2种儿童发育筛查量表评估国内正常婴幼儿发育的有效性及其与效度标准的相关性.方法:选择2003-12/2004-04在上海市2家医疗保健机构的儿童保健门诊就诊的健康儿童100人,年龄4,6,12,18,30个月健康儿童各20人,男女各半.入选儿童均为足月儿且监护人同意参加.排除双胎或多胎、产时窒息、明显畸形及智力低下的婴幼儿.①于儿童就诊同一天分别应用认知应物测验/临床语言、听力里程量表(由认知应物测验及临床语言、听力里程量表两部分组成,分别评估应物能及语言能,总量表评估认知能力)及年龄和发育进程问卷(对应于4～60个月年龄儿童的19套家长问卷,每套问卷从语言能、大动作能、精细动作能、应物能、应人能5个领域评诂儿童的发育状况.每个领域6题,共30题.每题的答案在"是"、"有时"或"还没有"中选择)及盖泽尔发育诊断量表(包括语言能、动作能、应物能、应人能4个领域)对健康儿童进行测试,评估儿童的发育状况.②认知应物测验/临床语言、听力里程量表及盖泽尔发育诊断量表由专门人员按照说明书操作,年龄和发育进程问卷由两家儿童保健门诊的儿童保健医师与家长共同完成.③计算认知应物测验/临床语言、听力里程量表的语言能、应物能及总量表即应物能/语言能发育商[总量表发育商=(语言能发育商+应物能发育商)/2];年龄和发育进程问卷的语言能、大动作能、精细动作能、应物能、应人能分值(相当于发育商);盖泽尔发育诊断量表的语言能、动作能、应物能、应人能发育商.为便于比较分析,用与认知应物测验/临床语言、听力里程量表的应物能/语言能发育商同样的计算方法计算年龄和发育进程问卷及盖泽尔发育诊断量表的应物能/语言能发育商[应物能/语言能发育商=(语言能发育商+应物能发育商)/2],将年龄和发育进程问卷的大动作能、精细动作能发育商合并为动作能发育商[动作能发育商=(大动作能发育商+精细动作能发育商)/2 ].④采用皮尔逊相关分析总结3个量表发育商的相关性.结果:按意向处理分析,健康儿童100人均进入结果分析,并完成量表和问卷调查.①认知应物测验/临床语言、听力里程量表与兽泽尔发育诊断量表应物能/语言能发育商伯相关性:4～30个月儿童之间存在显著正相关r=0.613,P<0.01),第个年龄组都存在显著正相关(r=0.532～0.708,P<0.05～0.01),但以4个月儿童的相关性低(r=0.532,P<0.05).②年龄和发育进程问卷与兽泽尔发育诊断量表应物能/语言能发育商的相关性:4～30个月儿童之间存在显著正相关(r=0.754,P<0.01),每个年龄组也都存在显著正相关(r=0.549～0.848.P0..5～0.01),县4个月儿童也存在较高相关性(r=0.747,P<0.01).③认知应物测验/临床语言、听力里程量表与年龄和发展进程问卷应物能/语言能发育商的相关性:4～30个月童之间存在显著正相关(r=0.646,P<0.01),每个年龄组也都存在显著正相关(r=0.607～0.803,P<0.01).结论:对于4～30个月儿童,认知应物测验/临床语言、听力里程量表、年龄和发育进程问卷及盖泽尔发育诊断量表之间的相关性很好,表明认知应物测验/临床语言、听力里程量表与年龄和发育进程问卷亦能有效地评估国内婴幼儿的发育状况.

氰基丙烯酸辛酯粘合剂与可吸收缝线对儿童皮肤创伤修复作用的比较

目的:观察氰基丙烯酸辛酯粘合剂(多抹棒())与可吸收缝线在儿童外科领域对皮肤伤口的修复作用.方法:2004-02/2004-04期间在上海新华医院,上海儿童医学中心手术的30例患者随机平均分成两组,分别在手术结束关闭伤口时采用皮肤粘合剂粘合伤口或可吸收缝线缝合伤口的方法.其中,粘合剂组15例共有30个伤口,可吸收缝线组15例共有31个伤口.术后14 d评价两种方法的治疗效果.结果:按意向处理分析,30例患者均进入结果分析.伤口愈合过程中出现的局部红肿渗出现象,及术后3 d内伤口出现疼痛率在两组患者中差异无显著性意义.术后伤口的甲等愈合率两组分别为14,8例,第三者对伤口美观程度的评价等级好的方面,两组分别为13,7例,粘合剂组都较可吸收缝线组高(P＜0.01).结论:氰基丙烯酸辛酯粘合剂在愈合率及第三者对伤口美观程度的评价等级方面均好于可吸收缝线,说明其对皮肤伤口的愈合有良好的促进作用.

胎儿窘迫与孕妇静脉血及脐血中内源性阿片肽水平的关系

背景:内源性阿片肽是一类重要的介质与调质,参与机体多种生理和病理过程,其与新生儿脑病的关系受到广泛关注.目的:探讨内源性阿片肽与胎儿窘迫发生的关系.设计:以健康孕妇为研究对象,病例-对照的对比观察.单位:解放军第二军医大学长征医院妇产科病房.对象:选择在第二军医大学长征及长海医院住院分娩并符合纳入标准的正常妊娠健康孕妇40例(对照组)及发生胎儿窘迫的健康孕妇43例(胎儿窘迫组).方法:采用放射免疫法测定40例对照组孕妇及胎儿窘迫组孕妇静脉血及其新生儿脐血中阿片肽(β-内啡肽、强啡肽A1-13和亮啡肽)的水平,同时行脐动脉血血气分析.主要观察指标:两组孕妇静脉血及脐血中内源性阿片肽的水平及相关性.结果:胎儿窘迫组新生儿脐血中β-内啡肽、强啡肽强啡肽A1-13和亮啡肽水平[(453±68),(242±33),(498±68)ng/L]明显高于对照组[(251±39),(103±22),(322±40)ng/L](t=2.713,2.762,P＜0.01;t=2.132,P＜0.05).脐动脉血血气分析:pH为7.0±0.1,氧分压为(1.7±0.6)kPa,二氧化碳分压为(8.9±0.7)kPa;其中β-内啡肽水平与脐血pH,氧分压呈显著负相关(r=-0.418,-0.437,P＜0.01),与二氧化碳分压呈显著正相关(r=0.442,P＜0.01);强啡肽A1-13水平与脐血pH及氧分压呈负相关(r=-0.337,-0.383,P＜0.05),与二氧化碳分压呈显著正相关(r=0.346,P＜0.05).两组血浆中3种肽水平比较,差异无显著性意义(P＞0.05).结论:内源性阿片肽参与了胎窘的病理过程与胎儿窘迫的发生发展密切相关,对胎儿出生后早期康复干预具有量化数据参考价值.

有限度选择性脊神经后根切断术联合内收肌松解改善下肢痉挛型脑性瘫痪儿童的运动能力

背景:选择性脊神经后根切断术(selective posterior rhizotomy,SPR)作为痉挛型脑性瘫痪解除痉挛和改善功能的有效手段已被逐渐公认和推广,但标准的SPR手术后脊柱失稳、肌力减退等并发症已成为人们观注的课题.有限度的选择性脊神经后根切断术(limited selective posterior rhizotomy,LSPR)联合内收肌松解术有效解除下肢痉挛畸形同时,在减少上述并发症方面有良好效果.目的:探讨LSPR联合内收肌松解术治疗下肢痉挛型脑性瘫痪对解除下肢痉挛畸形、改善步态、提高患者运动能力的作用.设计:以痉挛性脑性瘫痪患儿为研究对象的自身前后对照、随访性观察.单位:大连医科大学附属第一医院骨科病房.对象:病例来源于2001-01/2002-12吉林大学第一医院骨科病房住院治疗的痉挛性脑性瘫痪患儿.双下肢表现为不同程度的剪刀步态、屈膝及尖足行走.腱反射亢进,踝阵挛阳性18例,Babinski征阳性15例.所有患者躯干与四肢均有较好的运动功能,均能独立行走、下蹲或在单手或双手扶持下行走,无固定的软组织挛缩畸形.干预:本组患者均采用选择性L5、S1脊神经后根切断术,同时联合双侧内收肌松解术治疗.术后评定患者下肢肌张力、肌力、膝及跟腱反射、病理症及踝阵挛变化;腰椎、骨盆X射线片及物理检查了解畸形改变;根据手术前后立姿、步姿、下蹲起立等评分,评价运动功能改善情况.随访方法通过查阅原始病历,回院复查及书信联系,填写表格并详细记录,了解手术前后运动功能、肌张力、肌力、膝及跟腱反射、踝阵挛等改变.主要观察指标:痉挛性脑性瘫痪患儿有限度的选择性脊神经后根切断术治疗前后痉挛解除和下肢功能评分情况.结果:本组30例均获随访,随访时间6个月～3年,平均11个月.所有患者的痉挛程度较术前有明显降低,平均下降2.5级.术后步态明显改善,剪刀步态及尖足消失,屈膝改善,足跟可着地行走.踝阵挛及病理反射消失率100%,12例术前膝腱反射亢进的患者,术后膝反射减弱.术后双下肢无肌力减退及感觉的永久性缺失.术后随访2年以上的9例摄腰椎及骨盆X线片未见畸形出现.同时8例术前有上肢痉挛或流涎、语言障碍的患者术后上述症状也不同程度缓解.患者手术后立姿(4.25±0.91)、步姿(3.92±0.65)、蹲、立姿势变换能力(4.02±0.74)较术前明显改善,差异均有显著性意义(t=2.04～2.98,P＜0.05～0.01).结论:LSPR结合内收肌松解术,在减少手术创伤的同时,可有效的解除脑性瘫痪患者下肢痉挛畸形,提高其运动能力.

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