银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤的保护作用

目的:探讨以黄酮类和内酯类化合物为主要成分的具有拮抗血小板活化因子、清除氧自由基、减少炎性介质生成和保护脑缺血再灌注损伤等多种药理作用的银杏叶提取物对急性失血性休克家兔肺损伤模型的保护作用. 方法:实验于2004-10/2005-06在潍坊医学院麻醉学研究室进行,选取健康家兔36只,随机分为对照组、模型组、银杏叶提取物干预组,每组12只.除对照组外,其余动物以"Wiggers改良法"制备家兔急性失血性休克肺损伤模型:模型组,低血压60 min后,经静脉回输失血和等量乳酸林格氏液,在30 min内进行复苏;银杏叶提取物组,建立休克模型后,由静脉回输失血和等量林格氏液(内含银杏叶提取物25 mg/kg,银杏叶提取物由潍坊医学院应用药理学实验室提取,加生理盐水配制成25g/L的乳剂)进行复苏;对照组,仅分离股动静脉,静脉输入等量乳酸林格氏液.分别于休克前、复苏成功时、治疗1 h、2 h取动脉血1.0 mL,放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子α含量.复苏2 h末,迅速处死各组动物取肺组织,计算肺组织的含水率[(湿质量-干质量)/湿质量×100%].免疫组化法检测缺血肺组织核因子κB阳性细胞率并进行光镜病理观察.结果:实验动物健康家兔36只全部进入结果分析.①模型组、银杏叶提取物组急性失血性休克复苏成功率分别为66.7%(8/12只)、75.0%(9/12只),无明显差异(P＞0.05).对照组无死亡病例.②复苏后,模型组与银杏叶提取物组肺组织的含水率均较对照组升高,且模型组升高程度明显高于银杏叶提取物组[(83.59±3.09),(76.37±3.45),(72.26+3.14);F=31.52,P＜0.01].③在休克复苏时、复苏1 h、复苏2 h模型组和银杏叶提取物组家兔血清肿瘤坏死因子α的含量均较对照组升高,且同一时间模型组升高程度较银杏叶提取物组明显[(162.38±22.33),(163.46±21.83),(74.64±14.29);(280.63±23.29),(259.72±17.22),(75.41±14.46);(512.44±23.56),(338.99±20.26),(75.98±14.26)μg/L;q=3.538～69.923,P＜0.01].④复苏2 h末,组与银杏叶提取物组家兔肺组织中核因子κB阳性细胞率均升高(F=3615.20,P＜0.01),模型组升高的程度尤为明显(q=62.721,P＜0.01).⑤苏木精-伊红染色和免疫组化光镜病理检查显示肺组织、肺间质水肿、肺泡隔增宽、中性粒细胞浸润.应用银杏叶提取物组家兔肺组织损伤和炎性细胞浸润较轻.结论:银杏叶提取物对家兔失血性休克肺损伤具有一定的保护作用,机制可能与减少肿瘤坏死因子α的生成,抑制缺血肺组织核因子κB活性有关.

桂皮醛抗肿瘤活性及对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:观察传统中药肉桂挥发油中桂皮醛的细胞毒作用,并以小鼠S180移植性肿瘤为模型,进行其体内外抗肿瘤活性及对S180荷瘤小鼠免疫功能影响的实验.方法:实验于2005-03/06在解放军第四军医大学药学系药物研究所实验室完成.取BALB/c小鼠60只,雌雄各半,体质量18～22 g.先设1组不接种瘤株的生理盐水正常对照组,10只,雌雄各半.余50只小鼠每只右腋皮下接种0.2 mL,24 h后随机分成5组,即生理盐水荷瘤对照组,卡铂阳性药对照组,桂皮醛25,50,100mg/kg 3个剂量组,每组10只,雌雄各半.用四甲基偶氮唑蓝法观察桂皮醛对6种人癌细胞的体外抗肿瘤作用;对25,50,100mg/kg 3个剂量组分别腹腔注射相应剂量用含0.5%土温80生理盐水溶解的桂皮醛(购自中国医药集团上海化学试剂公司),正常对照组和荷瘤空白对照组腹腔注射生理盐水,阳性药对照组腹腔注射卡铂5 mg/kg.接种第2天开始全部腹腔注射给药,10 mL/kg,每天1次,连续给药10 d,于后1次给药后次日处死动物,测定肿瘤抑制率、免疫器官质量、血常规、NK细胞活性、T淋巴细胞转化率,分析其对小鼠体内抗肿瘤作用及与免疫凋节的关系.结果:参加实验的动物60只全部进入结果分析,没有脱失.①桂皮醛对体外培养的6种人肿瘤细胞有直接细胞毒作用,其IC50的范围为12.3～37.1 mg/L.②桂皮醛50,100mg/kg剂量组对S180荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,抑瘤率分别为33.08%和46.92%;同时能有效保护荷瘤小鼠胸腺和脾脏指数.③桂皮醛25,50 mg/kg剂量组可以升高白细胞,与生理盐水荷瘤对照组比差异有显著性意义(11.13±1.49,11.25±2.18,8.78±1.33,P＜0.01).④桂皮醛25,50 mg/kg剂量组的T淋巴细胞增殖能力显著或非常显著高于生理盐水荷瘤对照组(P＜0.05～0.01);桂皮醛50 mg/kg剂量组NK细胞杀伤活性明显高于生理盐水荷瘤对照组(P＜0.05).⑤桂皮醛100mg/kg剂量组显著降低白细胞(P＜0.01);抑制T淋巴细胞增殖能力和NK细胞杀伤活性,与荷瘤空白对照组比较差异有显著性意义(P＜0.01).结论:桂皮醛对体外培养的肿瘤细胞增殖具有良好的抑制作用,在适当剂量范围内可以保护和恢复荷瘤小鼠的免疫功能.

黄芪、大黄复方制剂对培养大鼠系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响

背景:糖尿病肾病是糖尿病严重的血管并发症之一.中药制剂黄芪、大黄组成复方在临床用于防治糖尿病肾病多年,具有确切的保护糖尿病患者肾脏的作用,但其作用机制需观察探讨.目的:观察以黄芪、大黄复方组成的中药制剂肾康丸对高糖培养大鼠系膜细胞增殖及细胞外基质分泌的影响.设计:随机对照观察.单位:南方医科大学珠江医院中西医结合肾病中心和南方医科大学南方医院药局. 材料:血清药理学实验于2005-04在南方医科大学实验动物研究中心完成.细胞培养实验于2005-04/07在南方医科大学细胞培养室完成.选择健康雄性Wistar大鼠16只,体质量190～220 g.方法:16只大鼠随机分为4组,正常血清组、开搏通组、肾康丸大小剂量组(肾康丸主要由黄芪、大黄、水蛭、芡实、玉米须等组成,由南方医科大学珠江医院药剂科生产,制剂号20031214).①开搏通及肾康丸高低组分别按5 mg/kg,2.4 g/kg和1.2g/kg体质量灌服相应药物混悬液.正常血清组灌服等容积生理盐水.连续灌胃7 d,麻醉,分离药物血清.②体外培养大鼠系膜细胞,用不同浓度葡萄糖(10,20,30和40 mmol/L)分别刺激24,48,72和96 h后,四甲基偶氮唑盐法测增殖.③培养的系膜细胞随机分为6组,低糖组(10 mmol/L),高糖组(30 mmol/L),正常血清组(30 mmol/L葡萄糖),开搏通(50g/L开搏通药物血清)组(30 mmol/L葡萄糖)及肾康丸高低高糖(30 mmol/L葡萄糖).培养72 h后,采用四甲基偶氮唑盐法测定各组细胞增殖,酶联免疫法测系膜细胞分泌纤连蛋白水平,反转录-聚合酶链反应法测系膜细胞重纤连蛋白mRNA的表达.主要观察指标:①不同浓度葡萄糖对大鼠系膜细胞增殖的影响.②各组系膜细胞增殖及分泌纤连蛋白和纤连蛋白mRNA表达情况.结果:①不同浓度的葡萄糖对系膜细胞增殖的影响:与低糖组(10mmol/L)比较,20mmol/L葡萄糖在实验的96 h里能促进系膜细胞增殖,但仅在72 h和96 h具有统计学意义(P＜0.05).30 mmol/L葡萄糖在实验的24 h至96 h里均能显著促进系膜细胞增殖(P＜0.05或P＜0.01),72 h内随着作用时间的延长,促进增殖作用越明显,72 h后作用减弱,但仍有统计学意义;40 mmol/L浓度的葡萄糖在48 h内对系膜细胞增殖有促进作用(P＜0.05),48 h后作用减弱,甚至转为抑制.②药物血清对系膜细胞增殖的影响:高糖组吸光度值明显高于低糖组(P＜0.01).与高糖组比较,开搏通、肾康丸高低剂量组吸光度值均明显降低(P＜0.01或P＜0.05).正常血清组与高糖组比较差异无显著性(P＞0.05).③药物血清对系膜细胞分泌纤连蛋白的影响:高糖组细胞上清中纤连蛋白含量显著高于低糖组(P＜0.01).与高糖组比较,开搏通及肾康丸高低剂量组纤连蛋白含量均显著降低(P＜0.01或P＜0.05),而正常血清组纤连蛋白含量变化无显著性差异(P＞0.05).④药物血清对系膜细胞中纤连蛋白mRNA表达的影响:高糖组纤连蛋白条带明显比低糖组明亮,且其与β-actin条带吸光度比值明显升高(P＜0.01).与高糖组比较,开搏通及肾康丸高低剂量组纤连蛋白条带亮度显著降低,与β-actin条带吸光度比值也显著减少(P＜0.01),而正常血清组上述变化无显著性差异(P＞0.05).结论:高糖可以促进系膜细胞增殖,增加系膜细胞分泌纤连蛋白,提高系膜细胞中纤连蛋白mRNA的表达.肾康丸能明显抑制上述作用.肾康丸可以抑制高糖诱导的系膜细胞增殖及细胞外基质分泌.

大豆异黄酮对氧化损伤血管内皮细胞的抗氧化作用

背景:大豆异黄酮具有多种生物活性,其抗氧化作用成为近年来研究的热点.目前,对大豆异黄酮的研究多注重于动物实验和临床观察,缺少人体细胞水平的研究.目的:观察大豆异黄酮对氧化损伤血管内皮细胞的影响. 设计:对照实验观察.材料:实验于2002-01/07在天津医科大学公共卫生学院中心实验室完成.实验材料包括人脐静脉血管内皮细胞株、低密度脂蛋白、大豆异黄酮及维生素E等.方法:体外培养血管内皮细胞,实验分为6组,即空白对照组、氧化损伤对照组(丙二醛含量为1μmol/L)、氧化损伤+维生素E对照组(维生素E50μmol/L)、氧化损伤+大豆异黄酮10,50,100μmol/L组.将氧化低密度脂蛋白作用于预先加入维生素E及不同浓度大豆异黄酮孵育24 h的内皮细胞,继续培养24 h,测定细胞外及细胞内各抗氧化指标.主要观察指标:各组内皮细胞内外丙二醛含量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性、乳酸脱氢酶释放情况及一氧化氮生成量. 结果:①各组内皮细胞丙二醛含量、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活力的比较:氧化损伤对照组丙二醛含量显著高于空白对照组(P＜0.01),而超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著低于空白对照组(P＜0.01);氧化损伤+维生素E对照组、氧化损伤+大豆异黄酮10,50,100 μmol/L组的丙二醛含量显著低于氧化损伤对照组(P＜0.01),而超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于氧化损伤对照组(P＜0.01).②各组内皮细胞乳酸脱氢酶释放情况及一氧化氮生成量的比较:氧化损伤对照组乳酸脱氢酶释放百分比明显高于空白对照组(P＜0.01),产生的一氧化氮含量明显低于空白对照组(P＜0.01);氧化损伤+维生素E对照组、氧化损伤+大豆异黄酮10,50,100 μmol/L组的乳酸脱氢酶释放百分比显著低于氧化损伤对照组(P＜0.01),一氧化氮的生成量显著高于氧化损伤对照组(P＜0.01).结论:大豆异黄酮可以减轻氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的氧化损伤,可能通过丙二醛含量、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性、乳酸脱氢酶释放情况及一氧化氮生成量等抗氧化指标起作用.

大鼠全脑缺血再灌注损伤后脑内白细胞介素1β变化及红景天苷的影响

目的:观察红景天属植物红景天的主要有效成分红景天苷对全脑缺血再灌注大鼠脑组织内白细胞介素1β含量的影响,探讨其对脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法:实验于2004-04/2005-04在武装警察部队医学院中心实验室完成.①选用健康成年Wistar雄性大鼠24只.随机将大鼠分为3组:红景天苷组、模型组及假手术组,每组8只.红景天苷组:红景天苷[由华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物分离研究室提供(生产批号:20040112,纯度＞95%)]36mg/(kg·d)灌胃.模型组和假手术组:按给药组相同体积每日蒸馏水灌胃.各组连续灌胃7 d后,用改良的Pulsinelli 4-血管阻断法,复制大鼠急性全脑缺血30 min再灌注60 min损伤模型,造模成功后即刻断头取脑.②采用酶联免疫吸附法测定大鼠脑组织匀浆中白细胞介素1β含量.③计量资料差异比较采用LSD方差分析.结果:大鼠24只均进入结果分析.大鼠脑匀浆液中白细胞介素1β含量:模型组明显高于假手术组、红景天苷药物组[(85.00±24.05),(43.90±22.67),(45.1±17.02)ng/g,P＜0.01].红景天苷药物组与假手术组比较,差异不明显(P＞0.05).结论:红景天苷可抑制大鼠缺血再灌注所引起的白细胞介素1β表达的增加,对缺血再灌注损伤鼠脑具有保护作用.

大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞ATP酶活力的影响

目的:观察大枣多糖对血虚大鼠全血细胞及红细胞膜ATP酶活力的影鞍响,分析大枣的补气血作用的可能途径.方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成.①选用Wistar大鼠60只,体质量170～190 g,雄性.随机选用50只采用以下方法造成气血双虚模型:分别于实验第1,3,5,7,9天,尾部放血1 mL/180 g,于第2天腹腔注射环磷酰胺生理盐水溶液40 mg/kg,于第4,6,8,10,12天腹腔注射环磷酰胺20 mg/kg,造气血双虚模型;其余10只大鼠为空白对照组(仅注射同体积生理盐水).②将50只气血双虚模型大鼠随机分为5组:大、中、小剂量大枣多糖组[灌胃大枣多糖溶液,由河南中医学院药物化学学科提供.本品为鼠李科植物枣干燥成熟果实的提取精制物(经乙醇回流脱脂、水提取、浓缩、醇沉、除蛋白、透析、醇沉、真空干燥等程序,得大枣多糖)溶液剂量为200,100,50 mg/kg,灌胃体积为10 mL/kg],当归补血口服液组[灌胃当归补血口服液(郑州市协和制药厂生产,剂量为2次/d,10 mL/次,批号010301)3.3 mL/kg,原药液稀释1.5倍]及模型组(灌胃等体积生理盐水).空白对照组仅灌同体积生理盐水.每天给药1次,连续给药14 d.③于第14天给药后2 h,用库尔特细胞全自动分析仪测定血中红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白和血小板计数.ATP酶测定用定磷法,按南京建成生物工程研究所提供的ATP酶试剂盒说明书测定红细胞Na+-K+-ATP酶和Ca2-Mg2-ATP酶活性.④量资料组间比较采用t检验,方差不齐者采用t'检验.结果:大鼠60只均进入结果分析.①空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数及血红蛋白含量明显高于模型组(P＜0.05～0.01).②空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Na+-K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活力明显高于模型组(P＜0.05～0.01).空白对照组,大、中剂量大枣多糖组、归补血口服液组大鼠红细胞Ca2+-ATP酶活力明显高于模型组(P＜0.05),小剂量大枣多糖组大鼠Ca2+-ATP酶活力与模型组相近.结论:大枣多糖可以改善气血双虚大鼠的造血功能和红细胞能量代谢,从而起到补血作用.

二陈汤方加减对2型糖尿病并发脂肪肝模型大鼠血糖、血脂、胰岛素抵抗以及肝功能和肝脏脂肪变的影响

目的:观察具有化痰利湿、活血化瘀功效的二陈汤方加减干预2型糖尿病并发脂肪肝大鼠血糖、血脂、胰岛素的抵抗状况,以及脂肪肝模型病理形态学的变化.方法:实验于2004-04/11在厦门大学医学院动物实验中心完成.①选用健康Wistar大鼠40只,7周龄,雌雄各半.随机抽取12只为正常对照组,喂以普通饲料(其中各成分质量分数如下:碳水化合物0.6、蛋白质0.22,脂肪0.1,其他0.08,脂肪以豆油为主),其余则喂养高热量饲料(其中各成分质量分数如下:碳水化合物0.4,蛋白质0.13,脂肪0.4,其他0.07,脂肪以动物油脂为主).2个月后,正常对照组的大鼠一次性腹腔注射0.1 mol/L pH 4.2枸椽酸缓冲液,其余28只大鼠则一次性腹腔注射链脲佐菌素25mg/kg.72 h后查血糖≥16.7mmol/L为糖尿病大鼠,造模成功24只.②将24只糖尿病大鼠随机分为2组:模型组和二陈汤方加减组,每组12只.正常对照组喂以普通饲料,其余2组均喂养高热量饲料.二陈汤方加减组大鼠按8 mL/(kg·d)剂量灌胃二陈汤方加减药物,由陈皮、半夏、茯苓、僵蚕及地龙等组成(上述中药由本院中药房提供),由本院药剂科制备成浓缩液(含生药2g/mL),1次/d;正常对照组和模型组灌胃等量的自来水,均连续干预16周.③然后采用ELISA法测血胰岛素水平,计算肝指数(肝湿重/体质量×100%)和胰岛素敏感指数ln{[1/(空腹血糖×空腹胰岛素)]};光镜下评估肝脂肪变性和炎症坏死程度.炎症活动度计分[慢性肝炎炎症活动度及纤维化计分方案炎症活动度计分分为汇管区(P)、小叶内(L)、碎屑坏死(PN)及桥接坏死(BN)4项,每项依病变轻、中、重程度分别计以1,3,4分,计分公式为P+L+2(PN+BN)].按照上海九强生物技术有限公司提供相应试剂盒说明书测定血清三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、白蛋白及总蛋白水平.分别于造模前、造模后8周及造模后16周采用氧化酶法测定空腹血糖.④计量资料、等级资料、率差异比较分别采用两样本均数t检验、秩和检验、两样本率差别的统计意义检验.结果:由于造模失败脱失4只,终进入结果分析36只.①肝指数:造模后16周模型组和二陈汤方加减组明显高于正常对照组(P＜0.01).②空腹血糖水平:造模后8和16周模型组及二陈汤方加减组均明显高于造模前和正常对照组(P＜0.01).造模后8和16周二陈汤方加减组明显低于模型组(P＜0.05).③血胰岛素水平:造模后16周模型组明显高于正常对照组和二陈汤方加减组(P＜0.01).④胰岛素敏感指数:造模后16周模型组明显低于正常对照组和陈汤方加减组(P＜0.01).⑤血清三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平:造模后16周,模型组和二陈汤方加减组明显高于正常对照组(P＜0.01),二陈汤方加减组明显低于模型组(P＜0.05).⑥血清高密度脂蛋白胆固醇水平:造模后16周,模型组和二陈汤方加减组明显低于正常对照组(P＜0.05),二陈汤方加减组明显高于模型组(P＜0.05).⑦血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性:造模后16周,模型组和二陈汤方加减组明显高于正常对照组(P＜0.05～0.01),二陈汤方加减组低于模型组,但差异不明显(P＞0.05).⑧肝脏炎症活动度计分:造模后16周,模型组及二陈汤方加减组明显高于正常对照组(P＜0.01),但模型组与二陈汤方加减组差异不明显.⑨肝脏病理学形态变化:造模后16周,正常对照组大鼠肝脏无异常病变.模型组及二陈汤方加减组均出现弥漫性肝细胞脂肪变性,且两组肝脂变情况无区别.结论:二陈汤方加减可在一定程度上能改善糖尿病并发脂肪肝大鼠的血糖、血脂水平,胰岛素抵抗状况及肝功能指标,但不能减轻肝脏组织学病变.

川芎嗪在骨骼肌缺血再灌注损伤中的作用

目的:观察川芎嗪对兔缺血再灌注骨骼肌相关生化指标含量的影响以及超微结构的改变,探讨川芎嗪对骨骼肌缺血再灌注损伤的作用.方法:实验于2004-06/2004-08在潍坊医学院显微解剖学实验室完成.取清洁级成年新西兰白兔30只,建立后肢骨骼肌缺血再灌注损伤模型.实验随机分为对照组、缺血再灌注组和川芎嗪组,每组10只.缺血后4 h,川芎嗪组自耳缘静脉注射盐酸川芎嗪注射液(含川芎嗪20g/L,山东潍坊制药厂有限公司生产,批号:030618)5 mg/kg,对照组及缺血再灌注组注射等量生理盐水.注射完毕后立即撤去血管夹和橡皮带以恢复供血,再灌注后2 h 3组分别自术侧股静脉采集血样3 mL,制备血清,测定天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、丙二醛和超氧化物歧化酶含量;取术侧胫前肌,常规制备超薄切片,行电镜观察.结果:30只动物均进入结果分析.①缺血再灌注组血清天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶、丙二醛含量明显高于对照组[(142.2±8.1),(27.3±3.5) U/L;(318±35)(153±21)U/L;(3141±271),(1783±289)U/L;(5.86±0.59),(3.77±0.43)μmol/L;t=47.237～8.856,P＜0.01],川芎嗪组与对照组比较除天冬氨酸氨基转移酶外均无明显升高[(59.7±3.3)U/L,t=13.320,P＜0.01].②缺血再灌注组超氧化物歧化酶活性明显低于对照组[(325.51±30.62),(443.49±38.13)NU/mL,t=8.404,P＜0.01],川芎嗪组与对照组比较无明显降低[422.37±23.77),(443.49±38.13)NU/mL,t=1.504,P＞0.05].③电镜下观察可见缺血再灌注组显示线粒体空泡样变,嵴断裂,毛细血管内皮细胞微绒毛减少,三联体异常,双侧终池宽大,横小管粗细不等;川芎嗪组三联体完整,糖原颗粒较多,毛细血管内皮细胞内有吞饮小泡,内皮细胞可见轻微损伤,肌纤维基本正常.结论:川芎嗪可减轻缺血再灌注对骨骼肌造成的损伤,对缺血再灌注骨骼肌具有保护作用.

电针干预急性脊髓损伤大鼠神经生长因子及其受体的表达变化

目的:观察电针治疗后急性脊髓损伤大鼠脊髓组织神经生长因子及其受体TrkA的变化,试图发现该种变化与神经功能恢复的关系.方法:实验于2005-07-10在汕头大学医学院第二附属医院外科实验室完成.①选用2月龄SD大鼠30只,雌雄不拘.随机将大鼠分为2组:对照组和电针治疗组,每组15只.两组大鼠均采用自制的Allen装置将10 g的物体从2.5 cm高处落下(打击量25 g·cm)致伤脊髓.对照组只造模,不进行电针治疗.电针治疗组:采用G6805-2多用治疗仪于损伤节段上、下棘突间隙,相当于第10～11胸椎和第1～2腰椎部位,各刺入一毫针,深度达硬膜外,疏密波,频率0.5 ms,每天治疗30 min,6 d为1个疗程,间隔2 d,共4个疗程.②于造模前,造模后第1天,治疗结束时采用Basso,Beattie,Bresnahan行为功能评定量表(Basso,Beattie,Bresna-han Locomotor Rating Scale,BBB)评分法(0～21分,0分:不可观察到后肢运动;21分:始终有持重的跖步,前后肢运动协调,向前时脚趾与地面之间始终保持间隙,开始触地和离地时,爪的位置与身体平行,尾巴始终上翘,躯干稳定.)评价动物运动和感觉功能.采用免疫组化方法检测两组大鼠脊髓神经元胞浆神经生长因子及其受体TrkA变化.③计量资料差异比较采用t检验.结果:大鼠30只均进入结果分析.①治疗结束时,电针治疗组神经生长因子和TrkA阳性细胞数明显多于对照组(t=3.539,2.622,P＜0.01,0.05),神经生长因子和TrkA阳性细胞的平均灰度值明显低于对照组(t=6.089,6.967,P＜0.01).②造模前所有动物BBB评分均为21分,造模后第1天对照组和电针治疗组评分均为0～1分,治疗结束时,电针治疗组BBB评分明显高于对照组(t=3.847,P＜0.01).结论:电针治疗促使急性脊髓损伤大鼠脊髓神经生长因子及TrkA表达增多,促进急性脊髓损伤大鼠后肢运动和感觉功能的恢复.

地龙和水蛭复方制剂干预后大鼠脑缺血耐受和基质金属蛋白酶9的表达

目的:观察地龙和水蛭复方制剂对缺血预处理诱导的脑缺血耐受的干预作用及对基质金属蛋白酶9表达的影响.方法:于2004-09/2005-02在四川大学华西医院外科实验室完成动物实验部分;于2005-03/05在华西医院移植免疫中心完成图像采集和分析部分.①选用健康雄性SD大鼠48只.随机分为3组:假手术组、预缺血组、预缺血+地龙和水蛭复方制剂组,每组16只.采用二次线栓法制备大鼠脑缺血耐受模型.预缺血+地龙和水蛭复方制剂组:缺血预处理10 min,腹腔注射地龙和水蛭复方制剂(主要成分为地龙、水蛭,含生药1 g,由牡丹江友搏药业有限责任公司提供,2 mL/支,批号:040413-1)10 mL/(kg·d),连续3 d,3 d后给予2 h大脑中动脉阻塞,再灌22 h后处死大鼠;预缺血组:不给药,余处理同预缺血+地龙和水蛭复方制剂组;假手术组:仅暴露解剖结构,不予10 min缺血预处理,余同预缺血组.②各组取8只大鼠于术后清醒2 h进行神经功能评分(0～4分,0分为无神经系统功能缺失;4分为不能自发行走,意识丧失).③每组随机取5只大鼠,取脑,计算脑含水量[(湿重-干重)/湿重×100%].④每组随机取5只大鼠,取脑,制切成.计算脑梗死体积(mm3)(各层梗死面积之和×层间隔).⑤采用免疫组化染色和图像分析比较各组基质金属蛋白酶9蛋白表达.⑥计量资料差异比较采用方差分析.结果:预缺血组和预缺血+地龙和水蛭复方制剂组术后各死亡1只,剔除后随机补充,终有48只大鼠进入结果分析.①神经功能评分和脑含水量:预缺血组和预缺血+地龙和水蛭复方制剂组大鼠两项指标均明显低于假手术组[神经功能评分:(2.01±0.21),(1.76±.36),(2.31±0.68)分;脑含水量:(82.01±0.83)%,(78.92±0.76)%,(85.23±1.08)%,P＜0.05].预缺血+地龙和水蛭复方制剂组明显低于预缺血组(P＜0.05).②脑梗死体积和基质金属蛋白酶9蛋白表达:预缺血组和预缺血+地龙和水蛭复方制剂组明显低于假手术组[脑梗死体积:(142.79±17.84),(103.00±12.46),(198.32±19.56)mm3;基质金属蛋白酶9蛋白表达:12 473 18±398.47,9 185.00±176.32,15 687.21±259.49,P＜0.05].预缺血+地龙和水蛭复方制剂组明显低于预缺血组(P＜0.05).结论:缺血预处理可诱导脑缺血耐受作用,基质金属蛋白酶9表达降低是其机制之一;地龙和水蛭复方制剂可进一步下调基质金属蛋白酶9表达,与缺血预处理具有协同作用,减轻再缺血后脑损伤.

黄芪多糖对高脂血症大鼠血脂的调节

目的:观察黄芪多糖对高脂饲料诱导的高脂血症大鼠血脂水平,肝脏脂质沉积以及机体抗氧化能力的影响,与疗效确切的降脂药非诺贝特作用结果进行比较.方法:实验于2004-9/2004-12空军总医院实验动物中心完成.①选用健康雄性Wistar大鼠60只.按体质量随机分为6组,每组10只:正常对照组(饲喂普通饲料),高脂模型组[饲喂高脂饲料(主要成分:普通饲料0.788、猪油0.1、蛋黄粉0.1、胆固醇0.01和胆酸盐0.002),黄芪多糖高、中、低剂量组[分别将黄芪多糖(颗粒剂型,国食健字G20040383,生产批号20040301,由解放军总医院科技开发中心提供)以16.68,8.34,3.52 g/kg的剂量加入高脂饲料进行喂养],非诺贝特组[将非诺贝特胶囊(由法国利博福尼制药公司制造,200mg/粒,批号78879)以0.067g/kg的剂量加入高脂饲料进行喂养].6组动物均连续喂养12周,每周测体质量.②喂养12周后,取肝组织称质量,计算肝指数(肝指数=肝质量/体质量×100%).用酶法测定血清和肝组织总胆固醇、三酰甘油水平和含量;用免疫比浊法测定血清高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平;用硫代巴比妥酸反应测定血清和肝组织丙二醛水平和含量;用微弱化学发光方法测定血清和肝组织超氧化物歧化酶活力;用速率法测定血清和肝组织谷胱甘肽过氧化物酶活力.③计量资料差异比较采用方差分析,两两比较采用LSD检验.结果:大鼠60只均进入结果分析.①非诺贝特组,黄芪多糖高、中、低剂量组大鼠血清总胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇和非诺贝特组三酰甘油均明显低于模型组(P＜0.05).而高密度脂蛋白胆固醇均明显低于正常对照组(P＜0.05),但与模型组比较,差异不明显(P＞0.05).非诺贝特组,黄芪多糖高、中、低剂量组体质量增长值低于高脂模型组,但差异不明显(P＞0.05).②黄芪多糖高、中、低剂量组大鼠肝脏总胆固醇和黄芪多糖高剂量组的三酰甘油含量明显低于模型组(P＜0.01);黄芪多糖中、低剂量组大鼠肝脏三酰甘油含量低于模型组,但差异不明显(P＞0.05).黄芪多糖高、中剂量组肝指数明显高于正常对照组(P＜0.01,0.05),但明显低于模型组(P＜0.05).非诺贝特组的肝脏总胆固醇明显低于模型组(P＜0.05),但三酰甘油含量和肝指数与模型组相近(P＞0.05).③黄芪多糖高、中剂量组大鼠肝组织丙二醛含量明显低于模型组(P＜0.01,0.05),超氧化物歧化酶活力明显高于模型组(P＜0.05).黄芪多糖低剂量组大鼠肝组织丙二醛含量和超氧化物歧化酶活力与模型组相近.黄芪多糖各剂量组肝组织谷胱甘肽过氧化物酶活力与模型组差异不明显(P＞0.05).非诺贝特组大鼠肝脏丙二醛含量,超氧化物歧化酶活力无显著变化(P＞0.05),但谷胱甘肽过氧化物酶活力明显低于模型组(P＜0.05).④黄芪多糖高、中剂量组大鼠血清丙二醛水平明显低于模型组(P＜0.01),谷胱甘肽过氧化物酶活力明显高于模型组(P＜0.01);黄芪多糖低剂量组大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶活力明显高于模型组(P＜0.05),丙二醛低于模型组,但差异不明显(P＞0.05);而各组超氧化物歧化酶均与模型组相近(P＞0.05).非诺贝特组大鼠血清丙二醛水平明显低于模型组,谷胱甘肽过氧化物酶活力明显高于模型组(P＜0.01).结论:黄芪多糖可降低高脂血症大鼠的血脂,减少肝脏脂质沉积,提高肝脏和血液的抗氧化能力,减轻高脂饮食导致的氧化损伤.非诺贝特虽可降低血脂,但因促进脂质的肝脏代谢,而加重肝脏的损伤.

三七袋泡茶对正常及糖尿病模型小鼠血糖的影响

目的:探讨以具有增强免疫力、保护酒精性肝损伤、提高缺氧耐受力、抗疲劳等功效的三七为主要成分,以茶作为载体的三七袋泡茶对正常小鼠和2型糖尿病模型小鼠血糖及体质量的影响.方法:实验于2005-01/02在广西区疾病预防控制中心保健食品功能学检验鉴定国家认可实验室完成.选用SPF级昆明种雄性小白鼠150只.①随机选取124只小鼠禁食24 h后给予四氧嘧啶(65 mg/kg)一次腹腔注射造模,6 d后100只小鼠造模成功(空腹血糖10～25 mmol/L).②降低空腹血糖试验:取造模成功52只鼠做降低空腹血糖试验,随机分为4个组:三七袋泡茶低、中、高剂量组和模型组,每组13只.三七袋泡茶低、中、高剂量组:分别灌胃375,750,1 500mg/kg剂量(分别相当于小人体推荐用量的5,10,20倍)的三七袋泡茶[由云南某(集团)有限公司提供,有效成分为三七皂甙,含量为10%;批号:20040801,规格为1.5g/袋;人体推荐用量为75 mg/kg].实验前每次称取100g样品加入1 L(85℃)蒸馏水浸泡,过滤后取滤液后再用1 L(85℃)蒸馏水浸泡,然后将2次浸泡液合并,于沸水浴中低温(60℃)减压浓缩至100mL,用蒸馏水将其分别配成供试液],灌胃量0.002 mL/kg.模型组:灌胃等量蒸馏水.1次/d,连续30 d后检测禁食4 h后的空腹血糖.比较各组动物空腹血糖及血糖下降百分率.血糖下降百分率=(实验前血糖值-实验后血糖值)/实验前血糖值×100%.③葡萄糖耐量试验:将其余48只造模成功小鼠随机分为4组:分组情况同"降低空腹血糖试验",每组12只.小鼠分组后禁食4 h,各组干预措施同"降低空腹血糖试验",20min后各组灌胃2.0g/kg葡萄糖,测定给葡萄糖后0,0.5,2 h血糖值,观察各组灌胃葡萄糖后各时间点血糖曲线下面积的变化,血糖曲线下面积=0.25×(0 h血糖值+4×0.5 h血糖值+3×2 h血糖值).④正常小鼠空腹血糖测定实验:将未造模的正常小鼠26只随机分为2组:三七袋泡茶高剂量组(灌胃三七袋泡茶1 500mg/kg,灌胃量0.002 mL/kg)和对照组(灌胃等量蒸馏水),每组13只.灌胃1次/d,连续30 d后测定其禁食4 h后的血糖值.⑤各实验均于实验开始及结束时称体质量.⑥计量资料差异比较采用单因素方差分析.结果:小鼠126只均进入结果分析.①各组小鼠实验结束时体质量均有所增加,但与实验前比较,差异不明显(P＞0.05).②实验开始与实验30 d后,三七袋泡茶高剂量组与对照组的正常小鼠的空腹血糖比较,差异不明显(P＞0.05).③给药30d后各剂量给药组小鼠空腹血糖明显低于模型组(P＜0.05),且三七袋泡茶高剂量组的血糖下降百分率明显高于模型组(P＜0.05).④三七袋泡茶高、中剂量组小鼠血糖曲线下面积明显低于模型组(P＜0.01,0.05).结论:①三七皂甙袋泡茶对2型糖尿病模型和正常小鼠体质量无明显影响.②三七皂甙袋泡茶可降低2型糖尿病模型小鼠血糖,但对正常小鼠空腹血糖无明显影响.

加味补肝汤对糖尿病大鼠坐骨神经结构和功能的影响

目的:观察加味补肝汤对糖尿病大鼠坐骨神经结构和功能的影响,验证其治疗糖尿病周围神经病变的疗效并分析可能的机制.方法:①实验于2004-11/2005-08在中南大学湘雅医院中西结合研究所实验室进行.选用8周龄的健康雄性Wistar大鼠30只.②30只雄性Wistar大鼠被随机分为3组:模型组、加味补肝汤组和正常对照组,每组10只.模型组和加味补肝汤两组大鼠禁食12 h后,一次性腹腔注射1%链脲佐菌素(50 mg/kg,pH 4.2～4.5,0.1 mol/L柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液配制)诱导糖尿病大鼠模型,72 h后尾静脉采血测定血糖,凡血糖＞16.7 mmol/L者纳入实验;正常对照组大鼠则禁食12 h后一次性腹腔注射相应容积即0.1 mol/L的柠檬酸缓冲液.造模后1周加味补肝汤组按13.6g/(kg·d)剂量灌胃,加味补肝汤(由枸杞15.g,木瓜15 g,当归10 g,川芎10 g,熟地12 g,白芍15 g,桑寄生15 g,麦冬15g,天花粉15 g等组成,医院制剂,药物来源于中南大学湘雅医院药剂科).模型组和正常组灌服等容积的蒸馏水(1 mL/100 g),1次/d,连续8周.③予以加味补肝汤治疗8周后,在光镜、电镜下观察坐骨神经形态改变;化学比色法分析血清丙二醛水平;采用MS302多媒体生物信号系统分别记录用药4和8周末大鼠坐骨神经传导速度.④计量资料差异比较采用t检验.结果:正常对照组无动物死亡,模型组、加味补肝汤组在用药4周末各死亡1只,8周末死亡2和3只.①坐骨神经形态结构变化:正常对照组大鼠坐骨神经有髓神经纤维形态正常;模型组出现轴突萎缩,髓鞘的变性;加味补肝汤组病变程度轻于模型组.②血清丙二醛水平:模型组和加味补肝汤组鼠明显高于正常对照组(t=3.594,8.513,P＜0.01),模型组明显高于加味补肝汤组(t=8.513,3.607,P＜0.01).③坐骨神经传导速度:模型组和加味补肝汤组大鼠在用药4和8周末均明显慢于正常对照组(t=3.839～8.438,P＜0.01),加味补肝汤组明显快于模型组(P＜0.05).④血糖:模型组与加味补肝汤组用药前和用药4和8周末差异不明显(P＞0.05).结论:加味补肝汤对糖尿病大鼠周围神经病变具有一定防治作用,但目前剂量末影响其血糖,说明其改善神经结构和功能的疗效不是直接通过降低血糖而实现,有可能是加味补肝汤通过有效清除自由基,减轻脂质过氧化而实现的.

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血损伤的长期保护作用

目的:观察补阳还五汤对大鼠脑缺血损伤后感觉运动功能和脑损伤的长期影响.方法:实验于2005-06/08在浙江中医学院实验动物中心完成.①取33只健康雄性SD大鼠,随机分为3组:补阳还五汤组(n=12)、缺血组(n=11)和假手术组(n=10).前2组采用线栓法诱导大鼠大脑中动脉阻塞模型;假手术组只分离血管,不插栓线.补阳还五汤组:从缺血前7天开始按13.3 g/kg剂量灌服补阳还五汤水煎剂(补阳还五汤处方来源于<医林改错>,成分:黄芪120 g,当归6 g,川芎4.5 g,赤芍4.5 g,地龙3 g,红花3 g,桃仁3 g,药材购自浙江中医学院附属门诊部并经鉴定,煎2次,40 min/次,合并后浓缩为含生药2 g/mL),持续到缺血后14 d,1次/d;其余各组同时灌等量生理盐水,干预时间同补阳还五汤组.②通过肢体放置实验[包括7个步骤.评分标准:正常,2分;延迟(2 s)和/或不完全,1分;不反应,0分]在缺血后1～7,10,14,21和28 d评价前后肢对触觉和本体感觉的反应.通过横木行走实验(用噪音刺激大鼠跨过横木.评分标准:大鼠不能呆在横木上,0分;大鼠能呆在横木上但不动,1分;大鼠试图跨过横木但摔下,2分;大鼠跨过横木,但损伤的后肢滑落次数超过50%,3分;超过1次但不到50%,4分;仅滑落1次,5分;顺利通过,6分)评价运动的协调和整合缺损.通过黏胶揭除实验(评分标准:1分为≤10 s;2分为10～19 s;3分为20～29 s;4分为30～39 s;5分为40～49 s;6分为50～59 s;7分为≥60s)评价躯体感觉功能.2块同面积的医用胶布分别贴在两前肢腕部腹侧面作为触觉刺激,记录大鼠揭除胶布的潜伏期.③缺血后第29天处死大鼠,取脑,冠状冰冻切片,采用甲苯胺蓝染色测定梗死体积.④肢体放置和横木行走实验结果差异比较采用非参数Mann-Whitney U检验,黏胶揭除实验结果和梗死体积差异比较采用单因素方差分析.结果:大鼠33只均进入结果分析.①肢体放置实验评分:缺血后1～10,14,21,28 d缺血组明显低于假手术组(u=0～9,P＜0.01).补阳还五汤组大鼠在缺血后1～7,10,14 d明显高于缺血组(u=4.5～35,P＜0.05～0.01).②横木行走实验评分:缺血后1～7 d缺血组明显低于假手术组(u=0～10,P＜0.05～0.01).缺血后1～3 d补阳还五汤组明显高于缺血组(u=26.5～31,P＜0.05).③黏胶揭除实验评分:缺血后1,7,14,21,28 d缺血组明显高于假手术组(t=2.56～21.91,P＜0.05～0.01).缺血后1,7,14,21 d补阳还五汤组明显低于缺血组(t=2.36～3.88,P＜0.05～0.01).④脑梗死体积:缺血后29 d,补阳还五汤组明显小于缺血组[(95±25),(123±22)mm3,t=2.75,P＜0.05].结论:补阳还五汤能显著改善脑缺血大鼠长期感觉运动功能,减轻脑损伤.

肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴内分泌及钙调蛋白基因表达与淫羊藿总黄酮的干预

目的:观察淫羊藿总黄酮对肾阳虚大鼠下丘脑-垂体-甲状腺轴内分泌功能及钙调蛋白基因表达的影响.方法:实验于2003-10/2004-05在潍坊医学院药理实验室完成.选择健康成年雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组,即生理盐水组、模型组、淫羊藿总黄酮100,200 mg/(kg·d)组,每组10只.生理盐水组给予生理盐水5 mL/(kg·d),连用30 d;模型组大鼠后肢肌肉注射醋酸泼尼松龙注射液10mg/(kg·d)造模,连续用药30 d;淫羊藿总黄酮为中药淫羊藿的主要有效成分,淫羊藿总黄酮100,200 mg/(kg·d)组大鼠在用醋酸泼尼松龙的同时于第12天开始分别灌胃给于淫羊藿总黄酮100,200 mg/(kg·d)至30 d.第30天先将各组大鼠静总动脉取血5 mL,分离血清,应用放射免疫分析法测定各组大鼠的促甲状腺激素、甲状腺激素T3,T4含量.应用反转录-聚合酶链反应技术,测定其下丘脑、垂体、甲状性腺组织中钙凋蛋白基因的表达.结果:40只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①各组大鼠血清促甲状腺激素、甲状腺素T3,T4含量比较:生理盐水组及淫羊藿总黄酮100,200 mg/(kg·d)组大鼠血清中甲状腺素T3,T4含量均显著高于模型组(t=2.90～5.49,P＜0.05～0.01);生理盐水组及淫羊藿总黄酮200mg/(kg·d)组大鼠血清中促甲状腺激素含量均显著低于模型组(t=2.33,2.23,P＜0.05).②各组大鼠下丘脑、垂体、甲状腺组织中钙调蛋白基因表达情况:模型组大鼠下丘脑、甲状腺组织中钙调蛋白基因表达均显著高于生理盐水组及淫羊藿总黄酮200 mg/(kg·d)组(t=4.32～8.69,P＜0.05～0.01),但脑垂体钙调蛋白基因表达的变化不明显(P＞0.05).结论:淫羊藿总黄酮可以促进肾阳虚大鼠甲状腺激素的分泌,较大剂量明显能抑制其促甲状腺激素的分泌,且对肾阳虚大鼠下丘脑、甲状腺组织中钙调蛋白基因的表达有显著的抑制作用.

二羟异黄酮诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的分子机制

目的:分析植物雌激素二羟异黄酮诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的分子机制和信号途径.方法:①实验于2005-11/2006-01在解放军第四军医大学军事预防医学系营养与食品卫生学教研室完成.②用十二孔培养板于细胞培养箱培养乳腺癌MCF-7细胞株(本实验室冻存)至对数生长期,施加终浓度分别为0,5,10,20,40μmol/L的二羟异黄酮(购Sigma公司,4℃储存),作用24 h后收集细胞,采用反转录聚合酶链反应方法检测cyclinE1,cdk2和p21表达水平.③计量资料差异比较采用单因素方差分析.结果:二羟异黄酮终浓度为0,10,20,40μmol/L时,细胞周期素cyclinE1和cdk2与β-actin基因条带的A值比值依次下降(P＜0.05);p21与β-actin基因条带的A值比值依次上调(P＜0.05);二羟异黄酮终浓度为0,5 μmol/L时,cyclin E1,cdk2,p21与β-actin基因条带的A值比差异不明显(P＞0.05). 结论:二羟异黄酮诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡可能是通过p21-cyclinE1/CDK2这条信号通路,且这种诱导呈剂量依赖性.

黄芪和白芍复方制剂干预痛经模型鼠后血液流变学指标变化

目的:观察黄芪和白芍复方制剂治疗痛经的效果,分析其药理作用.方法:实验于2002-01/2003-12在河北省医学科学院药物研究室完成.选用雌性SD大鼠110只,雌性昆明种小鼠50只.实验共分3个层次:①实验1:选用雌性大鼠50只,随机分为5组:痛经模型组,田七痛经胶囊组,黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组,每组10只.实验前大鼠背部皮下注射己烯雌酚4 d.在注射己烯雌酚的当天开始给药.田七痛经胶囊组按1.6g/kg剂量灌胃田七痛经胶囊混悬液[主要成分为三七、延胡索、小茴香等,广州敬修堂(药业)股份有限公司生产,批号:01220619,0.4 g/粒],黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组按1.6,0.8.0.4g/kg剂量灌胃黄芪和白芍复方制剂混悬液(由黄芪、白芍、益母草、熟地、当归等9味中药组成,由河北省医学科学院药物研究室研制,批号:200207102,0.5g/粒,胶囊内容物为棕黑色粉末,每克相当于原生药5.74 g.实验时将黄芪和白芍复方制剂内容物置于乳钵中研细加水研匀,制成不同浓度的混悬液),痛经模型组灌胃等容积生理盐水.注射己烯雌酚第4天及给药后1 h,每只大鼠腹腔注射催产素2 U,观察30 min内引起扭体反应次,而后用放免法测定血浆β-内啡肽水平.②实验2:将雌性小鼠50只随机分为5组:痛经模型组,田七痛经胶囊组,黄芪和白芍复方制剂高、中、低3个剂量组,每组10只.小鼠皮下注射己烯雌酚混悬液,连续9 d,从第10天起,每天上午皮下注射己烯雌酚,下午灌胃给药,田七痛经胶囊组按2.0 g/kg剂量灌胃田七痛经胶囊混悬液,黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组按2.0,1.0,0.5 g/kg剂量灌胃黄芪和白芍复方制剂混悬液,痛经模型组灌胃等容积生理盐水.连续3 d,于末次给药后30 min腹腔注射催产素,记录注射后30 min内扭体反应次数.③实验3:将其余健康雌性大鼠60只随机分为6组:对照组[灌胃等容量自来水灌胃20 mL/(kg·d)],血瘀模型组[蒸馏水灌胃20 mL/(kg·d)],复方丹参片组[灌胃复方丹参片(主要成分为丹参、三七、冰片,石家庄神威药业股份有限公司生产,批号:034070,0.25g/片)混悬液含生药4g/(kg·d)],黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组[按1.6,0.8,0.4g/kg剂量灌胃黄芪和白芍复方制剂混悬液20 mL/(kg·d)],每组10只.每组均连续7 d.第8天对照组皮下注射生理盐水,其他各组均皮下注射盐酸肾上腺素(8 μg/kg)2次,2次间隔2 h,第2次给药后立即将动物置冰水中5 min,处置后24h.采用锥板旋转法测定全血黏度和全血还原黏度,利用上述参数计算红细胞指数.④计量资料差异比较采用t检验.结果:复方丹参片组及黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组进行血液流变学指标检测时采血失败分别为1,1,2,2只,进入结果分析分别为9,9,8,8只,其余各组无脱失值.①实验1:田七痛经胶囊组和黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组大鼠30min扭体次数明显少于痛经模型组(P＜0.05～0.01).黄芪和白芍复方制剂高剂量组大鼠血浆中β-内啡肽水平明显高于痛经模型组(P＜0.05).②实验2:黄芪和白芍复方制剂对痛经小鼠模型30 min扭体次数的影响田七痛经胶囊组和黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组催产素所致小鼠30 min扭体次数明显少于痛经模型组(P＜0.05～0.01).③实验3:黄芪和白芍复方制剂高、中、低剂量组和复方丹参片组全血黏度均明显低于血瘀模型组(P＜0.05～0.01);复方丹参片组和黄芪和白芍复方制剂中剂量组红细胞阳性指数明显低于模型组(P＜0.01,0.05).结论:①黄芪和白芍复方制剂对痛经有治疗作用,其作用发挥可能与改善体内内源性疼痛物质β-内啡肽含量有关.②黄芪和白芍复方制剂还可通过改善血液流变学指标,起到活血化瘀作用,从而治疗痛经.

猫儿眼多糖对力竭运动小鼠心肌线粒体的保护作用

目的:验证大戟科多年生肉质草本植物猫儿眼多糖对力竭运动小鼠心肌线粒体的保护作用.方法:①实验于2004-11/12在甘肃政法学院公安分院实验中心完成.选用出生80 d的雄性昆明种小鼠50只.随机将小鼠分为5组(每组10只):游泳+猫儿眼多糖低、中、高剂量组[按1.0,5.0,10.0g/(kg·d)剂量灌胃猫儿眼多糖;然后进行力竭游泳实验,沉入水下停留10 s为止,1次/d],单纯游泳组(力竭游泳方法同给药组,灌胃等量蒸馏水),对照组(正常饲养,不游泳,灌胃等量蒸馏水).连续干预7 d.②给药7 d后,心肌线粒体蛋白定量测定采用Bradford方法.心肌线粒体过氧化脂质、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶含量测定采用相应试剂盒.游离钙的测定参照Mccormark方法进行.用回归方程计算样品中肝糖原含量.③计量资料差异比较采用Dunntt单因素方差分析进行统计学处理.结果:小鼠50只均进入结果分析.游泳+猫儿眼多糖各剂量组小鼠连续给药7 d,小鼠心肌线粒体丙二醛含量比单纯游泳组分别降低了13.5%,38.8%和59.9%(P＜0.05～0.01);而超氧化物歧化酶含量比单纯游泳组升高了14.9%,55.8%和92.3%(P＜0.05～0.01);谷胱甘肽过氧化物酶比单纯游泳组升高了72.2%,118.5%和174%(P＜0.05～0.01);游离钙比单纯游泳组升高了11.8%,25.3%和56.0%(P＜0.05～0.01);肝糖原含量比单纯游泳组增加了76.9%,101.9%和124.7%(P＜0.01).结论:猫儿眼多糖具有降低过氧化脂质的生成、提高力竭游泳小鼠心肌线粒体超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性和肝糖原含量的功能,从而清除自由基,起到保护线粒体、抗疲劳作用.

黄角颗粒对大脑中动脉栓塞老年大鼠脑神经细胞凋亡形态学的影响

背景:黄角颗粒为纯中药制剂,具有通腑泄热、开窍熄风、活血化淤等功效.目的:观察黄角颗粒对大鼠大脑中动脉栓塞模型神经细胞凋亡的影响,探讨黄角颗粒治疗急性期脑梗死的可能机制.设计:完全随机分组设计,对照动物实验.单位:华中科技大学同济医学院附属中西医结合医院神经内科.材料:实验于2003-09/2003-12在湖北中医学院中心实验室完成.采用鼠龄为22个月的老年Wistar大鼠60只.大鼠适应性喂养3 d后,按体质量随机分为6组:正常对照组、模型组、尼莫地平组、黄角颗粒10 g/kg组、黄角颗粒5 g/kg组、黄角颗粒2.5 g/kg组,每组10只.方法:①采用大脑中动脉栓塞法将大鼠造成脑缺血模型.黄角颗粒(主要成分为生大黄、水牛角等,武汉市第一医院制剂室提供,批号:021120)10,5,2.5 g/kg组于造模前30min分别给予含生药1,0.5,0.25 kg/L的黄角颗粒水溶液按10,5,2.5g/kg灌胃,每只灌胃1次;尼莫地平组于造模前30 min给予含生药1g/L的尼莫地平水溶液按10 mg/kg灌胃,每只灌胃1次;模型组和正常对照组(只结扎颈外动脉)于造模前30 min给予生理盐水按10 mL/kg灌胃,每只灌胃1次.②采用光学显微镜观察原位细胞凋亡染色切片,在高倍镜(20×10)下观察5个视野,观察每个高倍视野平均阳性细胞数,并计算细胞凋亡率.普通光镜下观察皮质缺血局部及周围组织学变化.电镜下观察大鼠大脑皮质细胞超微结构变化.③计量资料差异比较采用F检验及Q检验.主要观察指标:黄角颗粒对大脑中动脉栓塞老年大鼠脑组织神经细胞凋亡率及大脑皮质细胞形态学的影响.结果:Wistar大鼠60只均进入结果分析.①模型组大鼠脑组织凋亡阳性细胞数及细胞凋亡率明显高于正常对照组(P＜0.01);黄角颗粒各剂量组及尼莫地平组大鼠脑组织凋亡阳性细胞数及细胞凋亡率明显低于模型组(P＜0.01);黄角颗粒10g/kg组大鼠脑组织凋亡阳性细胞数及细胞凋亡率与尼莫地平组比较,差异不明显(P＞0.05).黄角颗粒10 g/kg组大鼠脑组织凋亡阳性细胞数及细胞凋亡率明显低于黄角颗粒5和2.5g/kg组(P＜0.05,0.01).②光镜及电镜观察结果显示模型组大鼠局部脑组织细胞有明显的凋亡现象,而黄角颗粒有明显的改善作用.结论:黄角颗粒对急性缺血性神经细胞凋亡有一定的拮抗作用,该种作用可能是黄角颗粒治疗急性期脑梗死的可能机制之一.

针刺预处理全脑缺血大鼠海马CA1区B细胞淋巴瘤2 mRNA的表达

目的:探讨针刺预处理对全脑缺血大鼠海马CA1区B细胞淋巴瘤2mRNA表达的影响,并与缺血预处理的效果进行比较.方法:实验于2003-10在黑龙江中医药大学神经解剖实验室进行.取120只Wistar大鼠随机分为5组,每组24只:①正常对照组:不干预.②假手术组:暴露4条血管,不造模.③脑缺血组:四动脉阻断法全脑缺血10 min制作大鼠全脑缺血模型.④脑缺血预处理组:预全脑缺血3 min,再灌注24 h后再次全脑缺血10 min.⑤针刺预处理组:术前7 d给予针刺,双侧足三里、曲池穴,双侧连接全能脉冲电疗仪,频率为1 Hz,电压为2 V,30 min/次,针刺百会30 min/次,1次/d,7 d后全脑缺血10 min.每组分别于再灌注12,24,48和72 h麻醉状态下取材,免疫组织化学法检测海马CA1区B细胞淋巴瘤2蛋白阳性细胞数,原位分子杂交技术检测大鼠海马CA1区B细胞淋巴瘤2 mRNA表达.结果:经补充后120只大鼠进入结果分析.①脑海马B细胞淋巴瘤2蛋白阳性细胞数:正常对照组和假手术组无;脑缺血组少量表达,再灌注48 h为高峰,脑缺血预处理组和针刺预处理组24 h、48 h、72 h均显著高于脑缺血组[(33.65±9.57),(34.56±12.64),(17.89±5.96)个/mm2;(39.14±9.11),(38.69±10.54),(23.35±7.68)个/mm2;(40.65±10.53),(38.99±9.34),(15.87±4.67)个/mm2;p＜0.05],但两组间无差异(P＞0.05).②脑海马B细胞淋巴瘤2 mRNA阳性细胞数:正常对照组和假手术组无;脑缺血组少量表达,再灌注72 h为高峰,而脑缺血预处理组和针刺预处理组24 h、48 h、72 h均显著高于脑缺血组[(42.64±9.57),(44.66±11.61),(20.8±5.97);(45.14±8.12),(46.68±11.54),(27.39±6.55);(50.65±10.53),(52.19±9.33),(20.87±6.67);P＜0.05],但两组间无差异(P＞0.05).结论:针刺预处理可能通过上调B细胞淋巴瘤2 mRNA和蛋白表达而减轻严重缺血后细胞凋亡并促成脑缺血耐受的产生.

电针刺激水沟、百会穴后对缺血再灌注大鼠脑内小胶质细胞的活化

背景:小胶质细胞是中枢神经系统的免疫效应细胞,正常情况下在脑内处于静息状态,一旦被激活,将释放一系列的神经毒性因子和炎性因子,对神经元产生致死性损害.目的:观察局灶性脑缺血再灌注对大鼠脑内小胶质细胞活化的影响以及电针刺激水沟、百会穴的调节作用.设计:随机对照动物实验.单位:解放军第四五八医院理疗科;上海同济大学附属东方医院;华中科技大学同济医学院组胚教研室.材料:实验于2002-03在华中科技大学同济医学院组织胚胎学教研室完成.取80只Wistar大鼠随机分为8组,每组10只.方法:①正常对照组:不干预,次日处死.②假手术组:仅分离动脉,不插线栓,次日处死.③再灌注6,12,24 h组:线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血30min后分别再灌注6,12,24 h处死.④再灌注6 h+电针组:同前造模,在栓线插入大脑中动脉造模成功后立即进行针刺(水沟、百会),加电刺激(疏密波,频率4 Hz/16 Hz,刺激强度从1 V起,每10 min增加1V,终强度为3 V,每次持续刺激30 min),缺血30 min后再灌注6h处死.⑤再灌注12h+电针组:造模后立即针刺,隔8 h后再针刺1次,参数同前.缺血30 min后再灌注12 h处死.再灌注24h+电针组:造模后立即针刺1次,每隔8 h针刺1次,缺血30min后再灌注24 h处死.主要观察指标:各组大鼠在相应时间点灌注固定处死取脑,采用免疫组化法以蓖麻凝集素标记小胶质细胞,计算小胶质细胞数量,观察其形态变化.结果:67只大鼠进入结果分析.正常对照组和假手术组未见显色,再灌注6,12,24 h组在缺血灶边缘可见大量小胶质细胞活化,数量增加,再灌注12 h达高峰,分别为(35.38±1.77),(54.25±1.67),(49.29±2.21)个/200倍视野;经电针治疗后,再灌注6,12,24 h+电针组均低于同时段模型组[(32.11±2.80),(50.88±2.64),(45.45±3.95)个/200倍视野,P＜0.05].结论:脑缺血再灌注后脑内小胶质细胞被活化,对神经元产生毒性作用.电针治疗可减少小胶质细胞活化,从而对神经元发挥保护作用.

去痰活络健脑制剂改善脑缺血模型大鼠记忆功能的途径

目的:通过放射免疫法测定脑缺血模型大鼠脑组织中神经肽Y及白细胞介素2、白细胞介素6的含量,分析以去痰活络为治则的健脑制剂健脑宁改善其记忆障碍的可能途径.方法:实验于2000-07/2003-02在北京中医药大学东直门医院临床药理实验室完成.选取清洁级4月龄SD大鼠152只,取150只随机分为多发性脑梗死、中动脉脑梗死、去脑膜毛细血管造模大鼠各50只,每组模型随机再分为5组,即对照组、模型组、健脑宁11.25,3.75,1.25g/(kg·d)剂量组,每组10只,雌雄各半;余2只用于取血,配制血栓水溶液.健脑宁胶囊(由天麻、人参叶、枳壳等组成,武汉健民药业集团股份有限公司,批号:000205),实验时将药物用5g/L消毒羧甲基纤维素钠配制成混悬液.150只大鼠在无菌条件下采用由颈总动脉向颈内动脉注入同种动物血栓、结扎颈外动脉由颈外动脉向颈内动脉插线再灌注、开颅去皮质毛细血管的方法制造了3种实验性记忆功能减退实验动物模型,对照组均为假手术.术后对照组、模型组喂饲5 g/L消毒羧甲基纤维素钠,健脑宁11.25,3.75,1.25g/(kg·d)剂量组,给生药剂量分别为11.25,3.75,1.25g/(kg·d),用5g/L消毒羧甲基纤维素钠配制,给药体积均为10 mL/kg体质量.连续给药4周,麻醉取血,分离血浆,用放射免疫法测定中动脉脑梗死、多发性脑梗死、去皮质毛细血管模型大鼠脑组织中神经肽Y及白细胞介素2、白细胞介素6的含量.结果:每个模型组均取模型组9只,健脑宁11.25g/(kg·d)剂量组8只,3.75 g/(kg·d)剂量组9只,1.25g/(kg·d)剂量组8只,对照组9只;剔除手术过程中死亡或造模不成功大鼠21只,终129只进入结果分析.①实验4周后,多发性脑梗死、去脑膜毛细血管、中动脉脑梗死正常组大鼠海马组织中白细胞介素2含量明显高于模型组,白细胞介素6含量和血浆、海马、脑皮质、下丘脑组织中神经肽Y含量均明显低于模型组(P＜0.05～0.01).②多发性脑梗死、去脑膜毛细血管、中动脉脑梗死健脑宁11.25g/(kg·d)剂量组大鼠海马组织中白细胞介素2含量与模型组比较明显升高,白细胞介素6含量和血浆、海马、脑皮质、下丘脑组织中神经肽Y含量均明显降低(P＜0.05～0.01).③多发性脑梗死、去脑膜毛细血管健脑宁3.75g/(kg·d)剂量组大鼠海马组织中白细胞介素6、海马、脑皮质、下丘脑组织中神经肽Y含量与模型组比较明显降低,海马组织中白细胞介素2含量明显升高(P＜0.05～0.01).④去脑膜毛细血管健脑宁1.25 g/(kg·d)剂量组大鼠海马组织中白细胞介素6、中动脉脑梗死大鼠血浆、下丘脑组织中神经肽Y含量与模型组比较均明显降低(P＜0.05～0.01).结论:健脑宁能调节3种脑缺血实验模型大鼠脑组织中白细胞介素2、白细胞介素6和神经肽Y的含量可能是其具有改善脑缺血模型大鼠记忆功能的重要机制.

川芎、瓜蒌仁、桑叶提取物对肝微粒体脂质过氧化模型的影响

目的:观察川芎、瓜萎仁、桑叶的抗氧化作用,分析其剂量效应关系.方法:实验于2005-05/06在解放军第四军医大学毒理学教研室完成.①选用二级雄性成年SD大鼠50只.动物禁食24 h,处死后取出肝脏,制成匀浆.采用钙盐沉淀法制备鼠肝微粒体.②过氧基异丙苯激发的肝微粒体脂质过氧化模型:反应体系中的缓冲液为Tris/HCl(0.1 mol/L,pH=7.4)与0.15 mol/L KCl按1:2的体积比配制.将制备的微粒体按照1 mL/g肝湿重的比例用预冷的0.15 mol/L KCl缓冲液悬浮.在模型反应体系中含缓冲液1.00mL,1 mmol/L过氧基异丙苯0.15 mL,微粒体悬液0.1 mL和中药提取物0.15 mL(川芎、瓜蒌仁、桑叶购于西安万寿路中药材市场.采用煎煮法制备3种中药水提物.粗粉加入8倍质量的水煎煮1.5 h后,过滤,沉淀物再经5倍质量水煎煮1 h,得水提液.得到的水提液趁热过滤,过滤液继续加热,蒸发掉水分,得到的水提膏经80℃烘干,备用,检测水分＜5%.干燥器内保存).37℃水浴15 min,终止反应后离心,取上清,用硫代巴比妥酸法显色并测出吸光度,同时用不同浓度的丙二醛标准品作标准曲线,拟合标准直线方程,由此计算各组的丙二醛浓度.③维生素C/Fe2+激发的肝微粒体脂质过氧化模型:将上述的反应体系改为缓冲液0.8 mL,50 μmol/L FeSO40.15 mL及5 mmol/L维生素C 0.15 mL、微粒体悬液0.1 mL和中药提取物0.2 mL.④四氯化碳/辅酶Ⅱ激发的肝微粒体脂质过氧化模型:将上述的反应体系改为含贮备液(由0.15 mol/L KCl 45 mL,0.10 mol/L Tris/HCl(pH 7.4)30 mL,H2O 4.5 mL,G-6-P127 mg,5g/L,G-6-P Deh30μL,辅酶Ⅱ15 mg,乙酰胺500 mg混合配制)2.20 mL,四氯化碳/二甲基亚砜(按体积比1:4配制)0.50 mL,微粒体悬液0.30 mL,中药提取物0.50 mL.⑤每个模型每种药物设1个阳性对照组(n=3,只造模,未加入中药),5个质量浓度(50,25,12.5,6.25,3.125g/L),每个质量浓度设3个平行样,一个阴性对照管.以每个平行样与相应的阴性对照管吸光度(A值)之差作为该药物浓度下的A值的绝对值.根据A值求得不同剂量药物干预下丙二醛浓度和各药物在各质量浓度下对丙二醛生成量的抑制率.⑥计量资料差异比较采用单因素方差分析.结果:①过氧基异丙苯激发的脂质过氧化模型中,川芎和瓜萎仁作用下丙二醛生成量得到了明显的抑制(P＜0.01),而桑叶作用下生成量只在药物高质量浓度(50,25g/L)下受到抑制.抑制率均随药物质量浓度的降低而降低(除了川芎的低质量浓度).②维生素C/Fe2+激发的脂质过氧化模型中,川芎、瓜蒌仁、桑叶作用下丙二醛生成量得到了明显的抑制(P＜0.01),抑制率与药物质量浓度关系不明显,且药物在该模型中的抑制率远较同种药物在另外模型中的抑制率高.瓜蒌仁作用下随着药物质量浓度降低,抑制率呈先升后降的趋势,在质量浓度为12.5g/L时抑制率大.桑叶作用下抑制率不随药物浓度增减而发生显著变化,均维持在较高水平(0.932 4±0.014).③四氯化碳/辅酶Ⅱ激发的脂质过氧化模型中,川芎、瓜蒌仁、桑叶作用下丙二醛生成量得到了明显的抑制(P＜0.01).川芎和瓜萎仁作用下随着药物质量浓度的降低,抑制率也显著下降.桑叶各质量浓度下均有较高的抑制率,并且除高质量浓度外,呈线性相关.结论:川芎、瓜蒌仁、桑叶在实验浓度下大多具有较好的抗氧化作用,仅桑叶在对过氧基异丙苯模型的作用稍弱.其中川芎、瓜蒌仁和桑叶在过氧基异丙苯模型和四氯化碳/辅酶Ⅱ模型中丙二醛生成量均与药物浓度有显著的量效关系,桑叶在较低浓度下又可激发活性氧的生成.在维生素C/Fe2+模型中,3种药物的量效关系不明显.3种药物在3.125～50 g/L质量浓度内,对维生素C/Fe2+模型的抗氧化作用强于对另外2个模型.

牛磺酸预防肢体缺血再灌注致远隔多器官的损伤

目的:观察肢体缺血再灌注是否可致远隔多器官损伤,以及损伤发生的可能途径和牛磺酸的预防作用.方法:实验于1997-05/1998-03在天津医科大学毒理实验室完成.①选用健康Wistar大鼠18只,鼠龄12周,雌雄不拘.按随机抽签法将大鼠分为3组:假手术组(只切开双下肢股三角区),模型组(夹闭双侧股动脉,阻断循环2 h再灌注5 h,造成下肢缺血再灌注模型)和牛磺酸组[每天给予200g/L牛磺酸(南京制药厂生产,含量99.7%,生产批号595D35D)3 mL/只灌胃,7 d后按模型组方法制备下肢缺血再灌注模型].②各组再灌注5 h时取下肢骨骼肌、远隔器官胃、肾、肺、肝及脑组织,采用电镜(×9 900)观察超微病理改变;测定外周血白细胞总数及其分类;采用在生化分析仪测定大鼠心肌酶、肝酶活性.③采用亚硝酸盐法测红细胞提取液超氧化物歧化酶活性;采用硫代巴比妥酸法测血清和肝、肺、脑组织丙二醛含量;采用生物化学法测血清谷胱甘肽水平;采用酶联免疫吸附法测定肝、肺、脑组织匀浆肿瘤坏死因子α含量.④计量资料差异比较采用t检验.结果:大鼠18只均进入结果分析.①远隔器官损伤组织形态学观察结果:超微电镜结果显示模型组大鼠下肢骨骼肌、远隔器官肺、肝、肾、胃及脑存在弥漫性损伤,而牛磺酸组各器官损伤明显减轻.②外周血白细胞计数和淋巴细胞所占百分比:模型组明显低于假手术组(P＜0.05);外周中性粒细胞所占百分比:模型组明显高于假手术组(P＜0.05).③谷丙转氨酶、碱性磷酸酶和肌酸激酶活性:模型组明显高于假手术组和牛磺酸组(P＜0.05),而牛磺酸组与假手术组差异不明显(P＞0.05).④肝、肺组织匀浆肿瘤坏死因子含量:模型组显著高于假手术组(P＜0.05);脑组织匀浆肿瘤坏死因子含量:模型组与假手术组相近(P＞0.05).⑤肝、肺组织匀浆丙二醛含量:模型组显著高于假手术组和牛磺酸组(P＜0.05);脑组织匀浆丙二醛含量:牛磺酸组明显低于假手术组和模型组(P＜0.05).结论:肢体缺血再灌注可使中性粒细胞激活,释放大量氧自由基、肿瘤坏死因子等炎性介质,使机体处于全身炎症反应状态,引起远隔多器官损伤,牛磺酸具有极强的抗氧化损伤能力,可明显减轻肢体缺血再灌注所引起的远隔多器官损伤.

羌菖合剂对脑供血不足大鼠外周血小板参数的干预

背景:有研究发现,羌菖合剂可防治脑供血不足引起的脑损伤,并可改善血液流变学指标.目的:观察羌菖合剂对脑供血不足大鼠外周血小板的干预结果.设计:完全随机分组设计,对照实验.单位:解放军成都军区总医院中心实验室.材料:选用SD大白鼠60只,雌雄不拘,体质量150～170 g.大鼠被随机分为3组:假手术组(n=8),对照组(n=18),羌菖合剂治疗组(n=34).羌菖合剂:成分为羌活、石菖蒲,将药物等量分2次煎煮,每次30min微火煮沸,将两次滤液混合,过滤,浓缩至含生药1g/mL煎剂.方法:实验于2004-07/09在解放军成都军区总医院中心实验室完成.对照组和羌菖合剂治疗组:结扎大鼠右侧颈总动脉造成脑供血不足.假手术组:只分离右侧颈总动脉,未结扎.假手术组在造模同时灌胃等体积生理盐水3d;对照组在造模同时灌胃等体积生理盐水3和7 d(n=10,8);羌菖合剂治疗组在造模同时灌胃羌菖合剂10g/(kg·d)连续3 d(n=10),3.3,6.7,10.0 g/(kg·d)连续7 d(n=8,8,8).采用Bakeman血细胞自动分析仪检测各组大鼠外周血血小板参数(血小板计数、平均血小板体积、血小板分布宽度、大血小板比率).计量资料差异比较采用t检验.主要观察指标:羌菖合剂对脑供血不足大鼠外周血血小板参数的影响.结果:①术后3 d,对照组血小板数与假手术组比较,差异不明显(P＞0.05),而平均血小板体积、血小板分布宽度和大血小板比率明显高于假手术组(P＜0.01);羌菖合剂10g/kg治疗后平均血小板体积、血小板分布宽度和大血小板比率明显低于对照组(P＜0.01),而与假手术组相近.②术后7 d,对照组平均血小板体积、血小板分布宽度和大血小板比率已恢复到接近假手术组,而大血小板比率则明显低于对照组术后3 d(P＜0.05),羌菖合剂3.3,6.7,10 g/kg治疗后大血小板比率则明显低于对照组术后3 d(P＜0.01).结论:大脑供血不足可引起实验大鼠外周血小板参数异常改变,应用羌菖合剂可改善此种改变.

葡萄籽原花青素对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

背景:研究发现,葡萄籽原花青素具有清除自由基、抗心肌缺血再灌注损伤、增强实验动物学习、记忆等的能力.但其对小鼠脑缺血再灌注损伤的作用尚不十分清楚.目的:观察葡萄籽原花青素对脑缺血再灌注小鼠脑中总抗氧化能力、一氧化氮合酶活性及丙二醛含量的影响,探讨葡萄籽原花青素的脑保护作用.设计:完全随机分组设计,对照实验.单位:锦州医学院病理生理教研室和机能中心实验室,锦州医学院附属第一医院神经内科.材料:实验于2004-03/08在锦州医学院机能中心实验室完成.选用锦州医学院动物实验中心提供的昆明种小鼠40只.随机分为5组:对照组、模型组、低剂量葡萄籽原花青素治疗组、高剂量葡萄籽原花青素治疗组及尼莫地平治疗组,每组8只.方法:①建立脑缺血再灌注模型:动物乙醚麻醉,颈正中切口,两边颈总动脉用微动脉夹夹闭30 min后去除动脉夹,恢复动脉血流.对照组只分离两边颈总动脉,不夹闭.②模型组和对照组:在夹闭小鼠双侧颈总动脉同时及再灌注后每隔24 h分别按40 mg/kg剂量腹腔注射蒸馏水、低和高剂量葡萄籽原花青素组及尼莫地平组按10,40,2 mg/kg剂量腹腔注射葡萄籽原花青素及尼莫地平.再灌注72 h后断头取脑,采用化学比色法测定一氧化氮合酶的酶活力,总抗氧化能力及丙二醛含量.③组间计量资料差异比较采用t检验. 主要观察指标:各组大鼠脑组织中总抗氧化能力、一氧化氮合酶活性及丙二醛含量. 结果:进入结果分析小鼠40只,每组8只.①总抗氧化能力:模型组明显低于对照组(t=8.145,P=0.000),而低、高剂量葡萄籽原花青素治疗组及尼莫地平治疗组又明显高于模型组(t=6.313,8.956,4.14,P＜0.01).②一氧化氮合酶活性:模型组明显高于对照组(t=12.541,P＜0.01),而低、高剂量葡萄籽原花青素治疗组及尼莫地平治疗组又明显低于模型组(t=2.231,8.956,7.260,P＜0.05～0.01).③丙二醛含量:模型组明显高于对照组(t=7.883,P＜0.01),高剂量葡萄籽原花青素治疗组及尼莫地平治疗组又明显低于模型组(t=5.234,4.518,P＜0.01).结论:葡萄籽原花青素可能通过提高机体总抗氧化能力,对抗脂质过氧化以及降低脑组织中一氧化氮合酶活性而发挥脑保护作用.

电针内关穴后下丘脑室旁核、β-内啡肽及白细胞介素1的变化

目的:观察电针刺内关穴后下丘脑室旁核及该区β-内啡肽、白细胞介素1的变化.方法:实验于2004-06于湖北中医学院针灸实验室完成.选取8～12月龄大耳白家兔56只,雌雄各半.随机分为急性心肌缺血+电针组、下丘脑室旁核损毁+急性心肌缺血+电针组、假损毁+急性心肌缺血+电针组、下丘脑室旁核损毁+急性心肌缺血组、下丘脑室旁核损毁模型组、急性心肌缺血模型组、正常组,共7组,每组8只.采用左冠状动脉前降支结扎法制备家兔急性心肌缺血模型,观察电针内关穴对心电图ST段电位的影响;同时观察下丘脑室旁核电解损毁预处理对心电图ST段电位的影响;并且通过免疫组化方法观察室旁核内β-内啡肽、白细胞介素1表达变化.结果:①急性心肌缺血+电针组、下丘脑室旁核损毁+急性心肌缺血+电针组、假损毁+急性心肌缺血+电针组ST段回复的时程及幅度显著快于下丘脑室旁核损毁+急性心肌缺血组(P＜0.05).急性心肌缺血+电针组、假损毁+急性心肌缺血+电针组又优于下丘脑室旁核损毁+急性心肌缺血+电针组(P＜0.05),下丘脑室旁核电解损毁导致家兔出现一过性轻度心肌缺血,下丘脑室旁核预先电解损毁显著降低电针内关穴抗急性心肌缺血损伤效应.②急性心肌缺血+电针组、假损毁+急性心肌缺血+电针组、急性心肌缺血模型组β-内啡肽、白细胞介素1蛋白表达阳性率与正常组比较,差异显著(P＜0.05～0.01).结论:①电针内关穴能显著降低实验性急性心肌缺血家兔心电图ST电位,抗急性心肌缺血损伤.②下丘脑室旁核参与内关-心脏相关的中枢通路,损毁室旁核会在一定程度上显著降低电针内关穴抗急性心肌缺血的效应,室旁核内β-内啡肽、白细胞介素1可能参是电针内关作用的中枢效应物质.

缺氧条件下鼠胚软骨c-Fos和巢蛋白表达及当归的保护作用

目的:探讨宫内缺氧对胚胎大鼠软骨组织内c-Fos和巢蛋白表达的影响,以及中药当归注射液对缺氧状态下其表达的调节.方法:于2004-06/12在四川省泸州医学院动物科将成年发情期雌性Wis-tar大鼠(220～250g)12只,分别与1只雄鼠合笼饲养,于次日上午8:00发现阴栓记孕鼠怀孕0 d,饲养雌鼠至孕15 d.将12只孕鼠随机分为对照组、缺氧组和当归组各4只(每只孕鼠产胎鼠5～8只).当归组孕鼠经尾静脉注入当归注射液,然后用低张性缺氧模型致鼠胚宫内缺氧;缺氧组用生理盐水代替当归注射液,其余同当归组;对照组不缺氧,其余同缺氧组.然后麻醉状态下处死孕鼠,快速剖腹取胎,每组中随机选取20个鼠胚,将各组胎鼠头部软骨组织作c-Fos和巢蛋白免疫组化双标染色后,进行观察分析.结果分析与判断:每张切片用DP12数码相机在400倍下照相,并随机选择1个软骨组织视野观察计数.c-Fos免疫组化反应阳性细胞为胞核着蓝色,巢蛋白免疫组化反应阳性细胞胞质染红色.将凡是胞质染红色的细胞根据红色深浅分为3个等级:深红色计为卅、红色计为++、淡红色计为+,分别对其记数,然后将同一组内20个鼠胚3个等级的阳性细胞数分别相加,得出该组的巢蛋白免疫组化结果.既有胞核染蓝色,又有胞质染红色的为c-Fos/巢蛋白免疫组化双染阳性细胞,计数每例鼠胚软骨组织双染阳性细胞的数量.结果:60个鼠胚头部软骨组织进入结果分析.①对照组软骨组织c-Fos和巢蛋白有弱表达;与对照组相比,缺氧组软骨组织c-Fos和巢蛋白表达增强[c-Fos:(5.35±1.42),(14.55±3.37)个/视野,q=16.48,P＜0.05;巢蛋白:193,427个/20个鼠胚,|RA-RB|=66;78,P＜0.05].②与缺氧组相比,当归组软骨组织c-Fos和巢蛋白表达减弱[c-Fos:(8.00±2.31)个/视野,q=11.73,P＜0.05;巢蛋白:250个/20个鼠胚,| RA-RB |=51.83,P＜0.05].结论:①缺氧可刺激鼠胚软骨组织巢蛋白的表达,c-Fos可能是缺氧刺激巢蛋白表达的机制之一.②当归注射液对缺氧鼠胚软骨组织可能有保护作用.

红花茯苓提取液防治四氯化碳性大鼠肝纤维化的作用

目的:观察四氯化碳诱导的大鼠肝损害的特点,并分析中药复方红花茯苓提取液对其防治作用.方法:实验于2003-03/2005-09在广东医学院实验动物中心、药理研究室和中心实验室完成.选用60只SPF级SD大鼠,随机分为6组,即正常对照组,模型对照组,阳性对照组,红花茯苓提取液生药0.5 kg/L组,1 kg/L组,2 kg/L组,每组10只,雌雄各半.红花茯苓提取液3种剂量制剂由广东医学院科技医药开发中心提供,为红花、茯苓、甘草等中药按照常规中药水提法,经过3次提取后浓缩所需的剂量含生药2 kg/L,然后用双蒸水稀释得到1 kg/L和0.5 kg/L的所需剂量.除正常对照组外,其余各组予600 g/L四氯化碳花生油,按3 mL/kg皮下注射,首剂加倍,3 d注射1次,连续7周,造成大鼠慢性损伤性肝纤维化模型.同时观察红花茯苓提取液2 kg/L、1 kg/L、0.5 kg/L对大鼠肝组织病理变化、血清透明质酸、血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转氨酶、总蛋白和白蛋白以及内脏器官质量的影响,并与秋水仙碱进行了比较,评价红花茯苓提取液对大鼠四氯化碳性肝损害的防治作用及其特点.结果:纳入动物60只,全部进入结果分析.①肝脏变化:模型组肝脏指数比正常组增加2.4倍(P＜0.01),肝脏细胞明显变性坏死,纤维组织明显增生,正常对照组肝脏未见纤维增生,模型组肝纤维化程度达100%(P＜0.01),秋水仙碱可明显减轻肝纤维化程度,红花茯苓提取液2 kg/L、1 kg/L、0.5 kg/L也具有明显的抗肝纤维化作用(P＜0.05),与秋水仙组相比差异不具有显著意义,但肝脏指数比模型组分别减轻1.4倍、1.7倍和2.3倍(P＜0.05).②血清指标变化:秋水仙组透明质酸的含量与模型组相比,下降了3倍(P＜0.05),红花茯苓提取液2 kg/L、1 kg/L、0.5 kg/L组分别下降2.2倍,2.3倍和2.6倍;红花茯苓提取液2kg/L、1 kg/L、05 kg/L丙氨酸氨基转移酶的活性与模型组相比,分别降低1.6倍、1.5倍和2倍,天冬氨酸氨基转氨酶活性也明显下降(P＜0.05),血清白蛋白的含量升高,其中0.5 kg/L组比模型组增1倍(P＜0.05).③门静脉压变化:模型组门静脉压比正常组升高,但是差异无显著意义,各组的门静脉压差异无显著性(P＞0.05).结论:红花茯苓提取液可有效预防大鼠四氯化碳性肝损害后肝纤维化,并能降低转氨酶和升高蛋白含量.

大黄提取物对犬肢体枪弹伤后脑神经元c-Jun蛋白表达变化的影响

目的:观察中药大黄治疗后肢体高能量枪弹伤犬脑神经元c-Jun蛋白表达的变化,从分子生物水平上探讨中药大黄治疗肢体火器伤后远达效应的脑保护途径.方法:实验于2001-07/12在解放军第四军医大学西京医院实验外科完成.18只杂种犬,以M-193,5.56 mm制式弹射击犬双后肢肌肉丰满处,随机分为对照组、大黄治疗组,每组分伤后2,6,10 h 3个时间点,每个时间点3只.对照组伤后应用无菌注射用水鼻饲,大黄治疗组应用中药大黄的乙醇及水提液鼻饲,采用免疫组化方法观察两组伤后2,6,10 h远隔部位脑组织脑神经元中c-Jun蛋白的表达变化.结果:18只杂种犬均进入结果分析.伤后2,6,10h大黄治疗组脑神经元中c-Jun蛋白显著少于对照组[(8.7±1.2),(14.2±1.7)个/单位面积;(3.7±2.5),(21.6±21)个/单位面积;(11.6±1.4),(19.2±1.9)个/单位面积,P＜0.01].结论:中药大黄提取液能够抑制肢体枪弹伤后脑神经元c-Jun蛋白的表达.

黄芪改善心血管功能的作用

目的:观察黄芪对心血管疾病患者的临床作用,为该药材在临床上的正确使用提供科学根据.方法:实验于2003-06/2004-12进行.观察对象为居住在锦州市的解放军干部休养所离、退休的军人,锦州市高校教师,锦州市的干部、工人、居民等.按中华医学会老年医学分会制定的老年心血管疾病患者诊断标准确定诊断共纳入心血管疾病者54例,患者口服黄芪(将药材用蒸馏水洗净、烘干,进行粉碎,然后将细末过筛并装入胶囊内以备口服),每人服用黄芪的剂量是50 g/d,分3次口服,服用3个月为1个疗程.服药3个疗程后观察患者临床衰老指标、临床表现、心电图和心阻抗图及生化指标、血液流变学等一系列项目的变化.结果:54例患者均进入结果分析,无脱落者.①患者服药后的临床症状的变化:54例患者服药后,临床症状全部消失的有4例(7%),有所改变的为36例(67%),无变化者14例(26%),总有效率74%.②患者服药后的心电图和心阻抗图的变化:患者用药后,其窦性心动过缓无效1例,增快2例,房早和室早无效1例,消失4例;心肌缺血无效3例,改善22例.用药后的每搏量、心搏指数、心输出量、心脏指数比用药前升高(P＜0.05),射血前期/左室射血时间比用药前降低(P＜0.05).③患者服药后的血脂和血液流变学的变化:患者用药后的血清三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇比用药前升高,胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇比用药前降低;用药后的红细胞沉降率、血细胞比容比用药前升高,全血比黏度、全血比黏度1/红细胞比积、血浆比黏度则比用药前降低.结论:黄芪是一种比较好的延缓衰老及治疗心血管疾病的中草药,值得在临床医疗实践中推广使用.

低频电针刺激与音乐疗法对急性有氧运动疲劳恢复的效果比较

目的:比较电针刺激足三里与聆听放松音乐疗法对急性有氧运动疲劳的恢复效果.方法:实验于2004-10/2005-01选取南京体育学院48名健康男大学生志愿者,随机分为自然恢复组、音乐治疗组、低频电针组,16名/组.①以80%～85%的乳酸阈强度即65 W为初始功率,受试者进行1 min的准备活动后,正式开始有氧运动直至疲劳.判断疲劳的标准为自我感觉疲劳、且一再鼓励后仍不能维持预定的运动强度.②一次性有氧运动至疲劳后,音乐治疗组卧位,戴耳机听放松音乐,音量以感觉舒适为度,一般控制在45.0～63.5 dB.低频电针组卧位,双足三里针刺得气后,以1 Hz的低频脉冲给予电刺激.自然恢复组静卧休息,不给予任何治疗.各组治疗时间均持续15 min.③比较各组治疗前后心率、下肢肌力、下肢围度、血糖、尿蛋白、血乳酸、视觉简单反应时、主观体力感觉等生理、生化及心理指标的变化.结果:按意向处理分析,实验纳入健康男大学生志愿者48名,全部进入结果分析.①运动前、运动后即刻各项指标的组间比较:经统计学检验,各组间心率、大腿围、小腿围、下肢肌力、简单反应时、主观体力感觉值、血乳酸、血糖及尿蛋白等指标在运动前、运动后即刻均基本相似(P＞0.05).②运动前后各项指标的配对检验结果:与运动前比较,运动后即刻心率、大腿围、小腿围、主观体力感觉值均显著增加(P＜0.01);血糖及尿蛋白均显著下降(P＜0.01,P＜0.05);简单反应时及血乳酸无明显变化(P＞0.05).运动后10min心率平均值为(81.82±10.29)次/min,与运动后即刻心率相比显著降低(P＜0.01),而与运动前相比显著升高(P＜0.01).③受试者运动后即刻自觉症状统计结果:48名受试者中,汗多者占75.00%,口干者占54.17%,下肢乏力者占52.08%,脚跟发软及下肢酸痛、僵硬者分别占16.67%和14.58%.④治疗后各项指标的组间比较:音乐治疗组尿蛋白显著低于自然恢复组和低频电针组(P＜0.01,P＜0.05),其余各项指标各组间均无显著性差异(P＞0.05).⑤各组运动后即刻与干预治疗后各项指标的配对检验结果:与运动后即刻比较,治疗后15 min音乐治疗组心率、大腿围、小腿围、主观体力感觉值、尿蛋白均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),低频电针组心率、大腿围、小腿围、主观体力感觉值、乳酸均显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:低频电针足三里对消除心血管疲劳及清除乳酸的效果较佳,而音乐疗法依从性强、操作简单,具有较好的促进中枢、骨骼肌及心理疲劳恢复、增强肾脏调节能力的作用.

促通技术与推拿手法抗偏瘫上肢屈肌痉挛的效果比较

目的:对西方现代促通技术与中国传统推拿手法治疗偏瘫上肢屈肌痉挛患者痉挛缓解时间进行比较,分析两种方法治疗偏瘫上肢屈肌痉挛效果.方法:①选择2002-12/2004-12上海几家医院及社区(奉贤中医院、龙华医院、长寿路地段医院、静安老年医院、市一医院宝山分院、市六医院、瑞金医院、华山医院以及田林社区)中的28例上肢屈肌痉挛的偏瘫患者,男17例,女11例;年龄31～85岁;改良Ashworth痉挛分级2～4级.均对干预方案知情同意.②抑制患侧上肢屈肌痉挛统一采用的现代促通技术:Rood易化技术中的快速刷擦、叩击等方法刺激患侧上肢伸肌;抑制技术中的持续缓慢牵伸方法,沿上肢长轴挤压肘、腕关节,在肘、腕关节伸展位时让患者将身体的重心移到患侧使之负重,必要时用分指板辅助伸指.中医推拿手法:刺激性手法中的滚法、揉法、捏拿等治疗手法施于患侧上肢伸肌.根据患者的情况每天或隔天做1次抗痉挛治疗.6次治疗分别是:第1次:促通技术5 min;第2次:促通技术20 min;第3次:推拿手法5 min;第4次:推拿手法20 min;第5次:结合治疗10 min(先用促通技术结合推拿手法将肘、腕关节伸展,再负重保持至10 min);第6次:结合治疗20 min(先用促通技术结合推拿手法将肘、腕关节伸展,再负重保持至20 min).6次治疗在一两周内完成.③疗效评价:采用改良Ashworth痉挛分级标准(0～5级:0级:无肌张力的增加;5级:受累部分僵直)评估患者每次治疗前后上肢屈肌痉挛的程度,将治疗后改良Ashworth痉挛分级下降1级以上视为痉挛缓解;从治疗结束后痉挛缓解开始计算时间,到痉挛再次回到原来的级数所经过的时间视为痉挛缓解时间,将该时间作为疗效判定依据.④应用配对的秩和检验分析,用中位数表示均数,用四分位数间距表示均数的范围.结果:上肢屈肌痉挛的偏瘫患者28例均进入结果分析.①相同治疗时间下,治疗效果比较:治疗时间为5 min时,促通技术治疗与推拿手法疗效相同,痉挛缓解的时间分别是9.5和10.0 min(P＞0.05).治疗时间为20 min时,促通技术治疗后痉挛缓解的时间明显长于推拿手法(37.5和26.0 min,P＜0.05),两种方法结合治疗10 min与推拿手法单独治疗20 min痉挛缓解时间相近(P＞0.05).两种方法结合治疗20min与促通技术单独治疗20 min痉挛缓解时间相近(P＞0.05),促通技术和两种方法结合治疗明显优于推拿手法(P＜0.01).②相同治疗方法,不同作用时间治疗效果比较:促通技术治疗20 min痉挛缓解的时间明显长于促通技术治疗5 min(37.5和9.5 min,P＜0.01);推拿手法治疗20 min痉挛缓解的时间明显长于推拿手法治疗5 min(26.0和10.(min,P＜0.01);两种方法结合治疗20 min痉挛缓解的时间明显长于两种方法结合治疗10 min(41.0和24.5 min,P＜0.01).结论:促通技术和推拿手法在对偏瘫患者的抗痉挛治疗方面都有效,相同的治疗方法下,治疗时间越长,疗效越好.在相同治疗时间下,治疗时间为5 min时,两种治疗方法治疗效果相同.治疗时间为20 min时,促通技术显优势,与两种方法结合治疗效果相近,疗效均优于推拿手法.

穴位埋线结合耳压疗法治疗单纯性肥胖病

目的:基于中医基础理论及现代腧穴学研究辩证选穴,观察比针灸更具持续性作用的穴位埋线结合耳压疗法治疗单纯性肥胖病的疗效.方法:纳入2004-07/2005-09大连医科大学美容医学院中医减肥专科门诊单纯性肥胖病患者30例,男6例,女24例,正常组35例,男16例,女19例.以中医理论采用穴位埋线结合耳压疗法辩证论治选穴治疗单纯性肥胖病患者,每次辨证选取5～6个体穴进行埋线,每次选用的穴位不同于前1次,可左右交替,每2周埋线1次,3次(40d)为1疗程.耳压法:将王不留行籽固定于边长为0.6～0.8 cm正方形的胶布上,然后粘贴在相应耳穴上,每天按压5～7次,三餐前30 min必须按压,每次按压2～3 min,两耳交替进行,5 d交换1次,至埋线疗程结束.观察治疗前后自身对照3个疗程,分析对体质量、血糖、血脂、胰岛素等指标的影响.结果:参与实验的单纯性肥胖患者30例,健康体检者35例均进入结果分析,未脱失.①经过3个疗程治疗,30例患者,治愈6例,占20%;显效8例,占27%;有效12例,占40%;无效4例,占13%,总有效率87%.②治疗后体质量、皮脂厚度、体围、体质量指数、腰髋比与治疗前比较差异有显著性(P＜0.001～0.05),且皮脂厚度降低尤为明显.③治疗前患者血清瘦素、胰岛素、空腹血糖均明显高于正常组(P＜0.01),胰岛素敏感指数明显低于正常组(P＜0.01),治疗120 d后瘦素、胰岛素明显下降、胰岛素敏感指数明显回升与治疗前相比差异有显著性意义(P＜0.01).④治疗前单纯性肥胖病的患者脂质指标中除高密度脂蛋白-胆固醇明显低于正常外,其他指标均高于正常水平.治疗120 d后与治疗前比较,患者脂质指标中除高密度脂蛋白-胆固醇明显上升外,均出现了显著的下降,差异有显著性(P＜0.05).结论:穴位埋线结合耳压疗法能调节血糖,提高瘦素、胰岛素的敏感性,从而改善胰岛素抵抗及瘦素抵抗,且对患者的脂质代谢有良性调节,从而具有减轻体质量、重塑体形的作用.

类风湿关节炎、中医舌象与细胞凋亡

目的:了解类风湿关节炎与细胞凋亡的研究进展,以期发现相互之间的关系及其变化规律,探讨类风湿关节炎细胞凋亡特征.资料来源:应用计算机检索1995-01/2003-12Medline和国家科技图书文献中心外文库与类风湿关节炎及细胞凋亡相关的文章,检索词为"rheumatoid arthritis,apoptosis",限定文章语种为英文.计算机检索1995-01/2003-12重庆维普中文科技期刊数据库、清华同方中文科技期刊数据库和中国生物医学文献光盘数据库关于类风湿性关节炎与细胞凋亡相关的文章,限定文章语种为中文,检索词为"类风湿关节炎,细胞凋亡,舌象".资料选择:对资料进行初审,选取类风湿关节炎与细胞凋亡相关性研究的文献开始查找全文.纳入标准:①类风湿关节炎与细胞凋亡的实验研究.②类风湿关节炎与细胞凋亡的临床研究.③中医舌象与细胞凋亡的研究.排除标准:重复性研究.资料提炼:共收集到82篇关于类风湿关节炎与细胞凋亡研究的文章,13篇符合纳入标准.排除的69篇文章中,58篇为重复性研究,11篇为综述类文章.资料综合:13篇文献中有11篇文献是通过实验研究和临床研究,从关节滑膜、外周血检测中发现类风湿关节炎存在着细胞凋亡异常,提示类风湿关节炎的发病、药物和物理治疗的实质均与滑膜细胞凋亡有关.余2篇是其他疾病舌象的细胞凋亡研究,揭示舌象细胞凋亡与疾病的病理相关,目前未找到有关类风湿关节炎舌象与细胞凋亡的有关报道,说明中医舌象与细胞凋亡的相关性研究存在许多空白.结论:中西医结合治疗类风湿关节炎具有优越性,从文献资料显示目前治疗类风湿关节炎的方法,可能通过影响类风湿关节炎的细胞凋亡而发挥作用.中医证型与细胞凋亡的研究仅限于少数的一两个病种,而舌象为证的重要诊断部分,故类风湿关节炎证(或舌象)细胞凋亡的内在联系有待研究,以进一步揭示类风湿性关节炎证的本质、舌象形成的机制.

蛋白质组学在肝郁证研究中的应用

目的:回顾分析血清蛋白质组学技术在肝郁证研究中的应用.方法:检索Medline和中国期刊网1995-01/2005-12关于血清蛋白组学技术应用及证候蛋白质组理论探讨的相关文献.结果:应用蛋白质组学的研究方法,可以研究不同疾病肝郁证中血清蛋白质的变化规律及特异蛋白质的表达规律,就有可能在复杂的多种致病因素下找到证候的本质并建立肝郁证候的微观辨证指标体系奠定基础.结论:血清蛋白质组学作为高通量平行筛选技术,在理论体系上将为中医基础理论研究开创新的领域.

食用香蕉对长期服用番泻叶大鼠所致副作用的改善作用

目的:观察食用具有润肠通便、止泻止痢、预防消化道溃疡作用的香蕉是否可以减轻大鼠长期服用番泻叶引起的副作用.方法:实验于2005-03/07在解放军第四军医大学基础部教学实验中心实验室完成.①选用SD大鼠18只.随机分为3组:番泻叶组[灌胃番泻叶浸液(番泻叶购自西安中药集团公司葆露堂连锁店,准确称取番泻叶5 g,加水50 mL,直火煎煮15 min后冷却,过滤,将浸液定容至50 mL)10 mL/(kg·d),1次/d,共12 d],香蕉组[香蕉购自西安市朝阳门爱家超市,番泻叶浸叶灌胃10 mL/(kg·d),1次/d,同时进食香蕉200g/(kg·d),共120 d],正常组(正常饲养,共120 d),每组6只.②每组干预90 d后测血钾浓度.干预120 d后,于大鼠饥饿24 h后,喂饲黑米饲料,记录从食用黑米饲料到大鼠首粒黑便的排出时间(排便时间),测定白细胞计数,取结肠标本作苏木精-伊红染色观察.③计量资料差异比较采用单因素方差分析,均数间的两两比较采用LSD-t检验.结果:大鼠18只大鼠均进入结果分析.①血钾水平:番泻叶组明显低于香蕉组和正常组(P＜0.01),香蕉组和正常组差异不明显(P＞0.05).②排便时间:番泻叶组明显长于正常组和香蕉组(P＜0.05),香蕉组明显短于正常组(P＜0.01).③白细胞计数:番泻叶组明显低于香蕉组和正常组(P＜0.01),香蕉组和正常组大鼠差异不明显(P＞0.05).④结肠病理切片显示:番泻叶组的肠黏膜局部出现表浅糜烂,绒毛水肿,间质淋巴细胞浸润较多.香蕉组与番泻叶组相比病变较轻.结论:香蕉可以避免大鼠长期服用番泻叶后引起的血钾降低、白细胞数目减少,减轻番泻叶引起的药源性便秘.

中国音乐疗法的历史溯源

目的:回顾中国音乐疗法的历史发展过程,并且分析其在世界音乐治疗学中的地位和作用,从而促进中国音乐疗法的理论和实践的进一步发展.方法:应用文献综述的方法,回顾了音乐疗法在中国历史中的发展过程,并且和现代社会中西方音乐疗法的发展状况进行了对比.后从传统中医学和现代医学两个方面分析了音乐的防病治病原理,从中探寻音乐疗法中的中医学基础.结果:中国音乐疗法萌生于原始社会中的巫医治病.现存早的医学典籍<黄帝内经>对五音疗法的原理和方法进行了论述.自唐宋以来,音乐疗法开始应用于临床.明清时期,音乐疗法得到进一步发展.中国现代意义的音乐疗法起步较晚,临床实践和基础理论都有待完善.结论:中国音乐疗法具有中国特色的中医学原理,但与西方发达国家相比,其学科构建和职业体制等方面还存在差距,因此在坚持中医学原理特色的同时吸收现代西方医学的先进成果,使中国音乐疗法得到进一步的完善.

干预烟草戒断综合征药物的研究与进展

目的:综合研究目前世界上出现的用于干预烟草戒断综合征的药物,分析其优点和局限性.方法:检索和参考相关文献,结合中医理论、本院戒烟门诊临床研究,对目前干预烟草戒断综合征的药物研究进展进行总结.结果:中医中药用于治疗阿片类物质依赖已有百余年的历史,积累了丰富和宝贵的经验,形成了一定的特色和优势.就戒断症状而言,其临床表现复杂多样,适合以中医辨证为基础结合辨病用药进行整体治疗.结论:通过若干年的探索研究,找出治疗烟草戒断综合征的安全、有效的中药有效成分、中药和中药复方是可能的.

肩关节周围炎的发病因素以及中西医结合现代治疗方法的优势

目的:总结肩周炎的发病和治疗研究进展.方法:根据近年来的有关文献,对肩周炎的病因、发病机制以及现代中西医治疗方法的研究和应用做了概要性的介绍.结果:肩关节的病因有肩部因素和肩外因素,其病理过程可分为3期:凝结期、冻结期和解冻期,现代临床常用手术、药物、物理、中医、运动、手法等不同的方法治疗,都有一定的效果,两种以上方法联合运用可以取长补短,提高疗效.结论:针对肩周炎的病因或病理分期,选择正确的治疗方法,可以取得佳疗效.

捏脊配合耳穴贴压治疗小儿消瘦的疗效比较

目的观察捏脊疗法配合耳穴贴压治疗小儿消瘦的临床疗效,并与单纯口服药物治疗效果进行比较.方法①选择2002-03/2005-11中国医科大学附属第二医院中医科中西医结合门诊就诊的小儿消瘦患者93例.按随机抽签法将其分为2组:观察组(n=68,采用捏脊疗法为主,将脊柱正中督脉穴及旁开0.5寸的夹脊穴和旁开1.5寸的背俞穴皮肤捏起,做翻转捻捏递送动作,每天早晚各1次,10 d为1个疗程.配合耳穴贴压,取小肠、神门、脾、内分泌等9穴,5 d贴压1次,10 d为1个疗程.连续治疗5个疗程)和对照组(n=25,口服胃蛋白酶合剂,10ml/次,3次/d,口服,疗程及治疗时间同观察组).②疗效判定标准:显效:经5个疗程治疗,患儿体质量与同性别、同身高参照人群的中位数相同,经半年后随访疗效稳定者.有效:经5个疗程的治疗,患儿体质量低于同性别、同身高参照人群的中位数-1个标准差,经半年后随访疗效稳定者.无效:经5个疗程的治疗,患儿体质量与治疗前相同,仍低于同性别、同身高参照人群的中位数-2个标准差.③疗效评定结果差异比较采用Ridit检验.结果观察组总有效率明显高于对照组(P＜0.05).结论捏脊疗法配合耳穴贴压治疗小儿消瘦疗效优于单纯口服药物.

头针结合语言治疗在卒中后失语症中的应用

目的观察结合大脑皮层功能定位原理在相应的头皮某些穴区进行针刺的头针结合语言训练在卒中后失语症治疗中的临床价值.方法纳入2003-09/2005-08在本院卒中科治疗的卒中后失语症患者101例,采用数字随机法将患者分成两组,即单纯语言训练组(n=50,行单纯语言训练);头针结合治疗组(n=51),在语言训练的同时采用头针治疗,均连续60 d.在训练前及训练后60 d进行听理解、命名、复述、言语表达、阅读能力、书写能力,波士顿诊断性失语检查评定,评定标准用波士顿汉语失语症评测量表对失语症严重程度分级标准评定.结果卒中后失语症的患者101例全部进入结果分析.治疗60 d后头针结合语言训练组听理解、命名、复述、言语表达、阅读能力、书写能力,波士顿诊断失语检查评分显著高于单纯语言训练组(P＜0.05).结论头针结合语言训练对卒中后失语症患者有较好的疗效.

针灸治疗单纯性肥胖症即刻效应的临床观察

目的观察针灸治疗单纯性肥胖症的即刻效应.方法选择2003-06/2004-03南京中医药大学针灸减肥专家门诊就诊的单纯性肥胖症患者35例,男3例,女32例.均对治疗方案知情同意.辨证取穴,用6.7～10.0 cm或10.0 cm以上毫针,针后得气,间隔10 min行针1次,实者以泻法为主,虚者多用补法,寒者可加温灸.隔日1次,每次留针或灸均30 min,12次为1个疗程.测定针灸治疗前和治疗30 min后患者体温、血压、脉搏、呼吸;应用Biodynamics310人体体成分仪测定静息代谢率、体质量、体脂百分率、体脂重、瘦体质量、生物电阻及阻抗.计量资料差异比较采用t检验.结果单纯性肥胖症患者35例均进入结果分析.针灸治疗30 min后患者的体温、脉搏、呼吸、收缩压、脉压差均明显上升,基础代谢率明显下降(P＜0.01);体质量、体脂百分率、体脂质量、生物电阻及阻抗均明显下降(P＜0.01).治疗前后舒张压比较,差异不明显(P＞0.05).结论针灸减肥的即刻效应是非常明显的,是治疗单纯性肥胖症的有效手段之一.

经颅超声多普勒观察针刺治疗前后血管性头痛患者脑血流变化

目的观察针刺对偏头痛患者在颅内血液动力学及脑血管调节方面的良性调节作用,以证实针刺方法是治疗偏头痛较好的方法.方法选择2003-12/2005-08天津中医学院第一附属医院针灸部收治偏头痛患者25例,以"疏通少阳,升清降浊,通经止痛"为治疗原则,针刺为治疗手段,取主穴:人迎,风池(双侧),局部配穴向对侧颔厌透率谷、太阳、禾髎.施捻转泻/补法,1次/d,14 d为1个疗程,连续进行2个疗程,疗程间休息2 d.治疗前后经颅超声多普勒诊断仪检查标准级别变化、血流异常、双侧血流对称情况.结果25例患者均完成全部治疗,进入结果分析.针刺后经颅超声多普勒诊断仪检查标准级别正常者多于针刺前;血流异常情况(包括血流增快,血流减慢,血管紧张增高)均比针刺前有改善;血流正常血管支数比针刺前增多;双侧血流不对称血管数少于针刺前.结论针刺可能是通过改善脑血流情况,改变脑组织血供需求,调节血流不对称性,良性调整脑血管的舒缩功能以达到缓解偏头痛症状的作用.

醒脑开窍针刺法促醒急性脑卒中意识障碍的疗效

目的:以格拉斯哥评分为评定标准,观察醒脑开窍针刺治疗对急性脑卒中意识障碍患者的促醒作用.方法:选择2004-01/2005-10天津中医学院第一附属医院针灸科并脑外科与天津市脑系科中心医院收治的急性脑卒中意识障碍患者91例,针刺组46例,对照组45例.针刺组:按脑梗死、脑出血急性期治疗原则给予常规药物治疗+醒脑开窍针刺治疗;对照组:常规药物治疗同针刺组.以格拉斯哥评分评定疗效,评分≥14分为意识障碍好转标准.两组患者于入院治疗后10,20 d分别再次进行格拉斯哥评分,并对两组患者清醒(格拉斯哥评分≥14分)率进行比较.结果:①治疗10 d后,针刺组格拉斯哥评分与对照组差异有显著性意义(x2=4.07,P＜0.05).②治疗20 d时,针刺组格拉斯哥评分与对照组差异有显著性意义(清醒率为73.91%,53.33%;x2=4.17,P＜0.05).结论:醒脑开窍针刺治疗对急性脑卒中患者意识的恢复有促进和协调作用.

薄氏腹针配合药物治疗强直性脊柱炎32例

目的:观察薄氏腹针配合药物治疗强直性脊柱炎的临床疗效.方法:纳入1998/2002解放军新疆军区总医院住院部中医科强直性脊柱炎患者57例,随机分为两组,即腹针组(n=32例)和药物组(n=25例),两组均接受中药与西药治疗,中药为自拟汤剂:寒湿阻络型:制川乌、桂枝、细辛各10 g,虎杖根、秦艽、鸡血藤、汉防己、淫羊藿、鹿角霜、乌梢蛇各15 g,青风藤、黄芪各30 g,制马钱子0.6 g(研末冲服);湿热阻络型中药处方在上方基础上去川乌、桂枝、淫羊藿,加白鲜皮30 g,白花蛇舌草、生地各15 g.每日1剂,水煎分2次服,连续4周.另口服双氯芬酸钠(加英太青,中国药科大学制药有限公司,H10960217)50 mg,每日2次;柳氮磺吡啶(上海三维制药有限公司,H31020450)第1周每日3次,每次口服0.5 g,从第2周起,每周每次加0.25 g,每日二三次,连续4周.腹针组在此基础上,加用薄氏腹针进行治疗.腹针疗法取穴:君(主穴):即中脘,下脘,气海,关元穴;臣(次穴):中极,大横(双);佐:气穴(双).腹四关(滑肉门、外陵,均双穴);寒湿阻络型加神阙灸,湿热阻络型加水分.针刺顺序中脘、下脘、气海、关元穴、中极、气穴、滑肉门、外陵、大横.中脘、下脘、气海、关元穴、中极、气穴深刺,滑肉门、外陵、大横浅刺.进针后不行针,每日1次,留针30 min.每周一至六连续治疗6 d后休息1 d,连续治疗4周.于治疗前后检测两组患者的血沉、指地距、扩胸距和20 m步行时间,观察两组的疗效.结果:强直性脊柱炎患者57例全部进入结果分析,没有脱失.①腹针组和药物组疗效差异有显著性意义(显效:18,6例;有效13,14例;无效1,5例;总有效率为97%,80%;P＜0.05).②治疗4周后,腹针组患者血沉、指地距、20m步行时间与治疗前比较差异有极其显著性意义(P＜0.01);药物组患者治疗后血沉、指地距与治疗前比较差异有显著性意义(P＜0.05).结论:薄氏腹针配合药物治疗能缓解或减轻强直性脊柱炎患者疼痛症状,恢复改善脊柱及外周关节功能.

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