中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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骨髓间充质干细胞修复急性呼吸窘迫综合征
背景：临床上骨髓间充质干细胞运用于急性呼吸窘迫综合征尚缺乏报道。
目的：验证骨髓间充质干细胞在大鼠急性呼吸窘迫综合征中的修复效果。
方法：63只SD大鼠随机对照方法分为正常对照组、损伤对照组和骨髓间充质干细胞组，每组21只，另一只用于取干细胞。建立SD大鼠急性呼吸窘迫综合征模型。损伤对照组待其苏醒后不作处理，骨髓间充质干细胞组经尾静脉注入氟尿嘧啶标记的骨髓间充质干细胞。对肺组织切片进行苏木精-伊红染色，采用ELISA检测大鼠肺组织匀浆中白细胞介素1β水平，比较3组SD大鼠肺损伤修复效果。
结果与结论：①苏木精-伊红染色显示：骨髓间充质干细胞组大鼠肺部炎症细胞消退，肺部组织水肿、充血开始消退，并未发生实变情况；损伤对照组肺部组织炎症变化明显，存在明显的水肿和充血情况；对照组大鼠肺部组织正常，未见炎症，未见实变；②骨髓间充质干细胞组肺水肿指数、肺组织匀浆白细胞介素1β含量，显著低于损伤对照组(P <0.05)，损伤组显著高于正常对照组(P <0.05)；③结果提示，全骨髓培养法能获得骨髓间充质干细胞，用于大鼠急性呼吸窘迫综合征效果理想，吸入脂多糖后大鼠出现典型的急性呼吸窘迫综合征改变，骨髓间充质干细胞可减少炎症因子释放，直接参与损伤肺上皮修复。 -
单倍型异基因造血干细胞移植后大剂量环磷酰胺诱导免疫耐受治疗儿童重型再生障碍性贫血
背景：提出单倍型异基因造血干细胞移植后高剂量环磷酰胺诱导免疫耐受的新技术，理论与实践相结合，优化造血干细胞移植治疗儿童重型再生障碍性贫血的技术体系，为临床推广应用提供理论基础。
目的：探讨单倍型异基因造血干细胞移植后应用大剂量环磷酰胺诱导免疫耐受治疗儿童重型再生障碍性贫血的临床疗效和安全性。
方法：解放军北京军区总医院血液科2013年1月至2015年1月应用单倍型异基因造血干细胞移植治疗10例重型再生障碍性贫血患儿(治疗组)，预处理方案为环磷酰胺、氟达拉滨、白舒非联合抗人淋巴细胞免疫球蛋白，移植后+3 d用环磷酰胺(50 mg/kg?d)诱导免疫耐受，供者接受粒细胞集落刺激因子动员，采用骨髓联合外周血干细胞移植。移植物抗宿主病预防采用环孢素A、氨甲蝶呤、他克莫司等联合免疫抑制剂。选择同期行全相合造血干细胞移植治疗10例重型再生障碍性贫血患儿为对照组，统计两组患儿移植相关并发症及存活情况。
结果与结论：随访至2015年5月，治疗组中位随访时间18.1个月(5-28个月)，全部患儿均获造血重建，3例发生移植物抗宿主病、3例合并肺部感染，肺部感染死亡2例；对照组中位随访时间20.7个月(6-27个月)，全部患儿均获造血重建，2例发生移植物抗宿主病、4例合并肺部感染，移植物抗宿主病死亡1例、肺部感染死亡1例，两组患儿总生存率均为80%。结果表明单倍型异基因造血干细胞移植后大剂量环磷酰胺诱导免疫耐受治疗儿童重型再生障碍性贫血安全有效，临床疗效与全相合造血干细胞移植相当。 -
胚胎神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病
背景：近年来，干细胞疗法得到广泛关注，外源性干细胞通过自我复制及分化补充和替代受损或死亡的神经组织细胞，为神经系统损伤带来了希望。
目的：探讨神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病的效果。
方法：①选取30只APP/PS1双转基因AD小鼠，随机分为3组，分别为模型组、细胞液移植组、细胞移植组，每组10只；另选取10只C57BL/6小鼠作为对照组；②获取E18的C57BL/6小鼠胚胎，制成神经干细胞悬液，按照感染复数值为1，5，10，15，20加入携带有GFP基因的慢病毒载体稀释液进行神经干细胞转染；③根据脑立体定位技术将含有GFP基因的神经干细胞移植到阿尔茨海默病小鼠脑内海马中，细胞液移植组采用上述相同的移植方法注射同体积完全培养基；④移植后2周进行Morris水迷宫实验，移植4周后获取大脑标本，进行组织学检测。
结果与结论：①模型组、细胞移植组、细胞液移植组的潜伏期均显著长于对照组，目标象限次数均显著少于对照组，差异有显著性意义(P <0.05)。细胞移植组的潜伏期显著短于细胞液移植组和模型组，进入目标象限的次数则显著高于上述两组，差异有显著性意义(P <0.05)；②移植4周后，与模型组比较，细胞移植组神经元形态较为完整，且数量显著增加；③结果表明，神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病小鼠，可以在行为学和形态学上有所改善。 -
脂肪间充质干细胞移植治疗肝功能衰竭
背景：有研究发现骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞对肝功能衰竭具有治疗作用，而关于脂肪间充质干细胞移植治疗肝功能衰竭的研究不多。
目的：探讨脂肪间充质干细胞移植对大鼠肝功能衰竭的治疗作用。
方法：将45只SD大鼠随机等分为移植组、模型组和对照组。移植组和模型组大鼠腹腔注射D-氨基半乳糖建立肝功能衰竭动物模型，造模后1周，移植组大鼠经尾静脉注射1 mL脂肪间充质干细胞。
结果与结论：与模型组相比，经脂肪间充质干细胞移植治疗的大鼠丙氨酸转氨酶和天门冬氨酸氨基转移酶明显下降，B超结果明显改善，肝细胞排列尚整齐，炎症细胞减少，肝小叶结构基本比较完整。表明脂肪间充质干细胞治疗大鼠肝功能衰竭可以改善大鼠的肝功能及改善大鼠的肝脏病理形态学改变，对大鼠肝功能衰竭具有一定的治疗作用。 -
肿瘤坏死因子α预处理脐血间充质干细胞移植治疗心肌梗死
背景：心肌缺血损伤后，心肌细胞释放大量炎症递质作为对心肌损伤的应答，梗死及缺血区的炎症因子有助于心肌组织对损伤的修复和适应。
目的：探讨肿瘤坏死因子α预处理脐血间充质干细胞移植治疗对心肌梗死兔心功能的效果。
方法：将36只大白兔随机等分为4组，假手术组、模型组、无肿瘤坏死因子α组和肿瘤坏死因子α组，后3组建立心肌梗死模型。造模后24 h，模型组、无肿瘤坏死因子α组和肿瘤坏死因子α组分别在梗死中心区及边缘注射PBS、未经肿瘤坏死因子α预处理的脐血间充质干细胞及经肿瘤坏死因子α预处理的脐血间充质干细胞。
结果与结论：与模型组相比，肿瘤坏死因子α组和无肿瘤坏死因子α组兔心脏功能明显恢复，心肌梗死面积及心肌纤维化面积明显减小；且肿瘤坏死因子α组的效果优于无肿瘤坏死因子α组。表明肿瘤坏死因子α预处理胎儿脐血间充质干细胞移植能有效治疗心肌梗死。 -
淫羊藿联合骨髓间充质干细胞移植治疗肾病大鼠的作用
背景：研究表明，骨髓间充质干细胞具有分化能力，可能治疗肾病损伤；而淫羊藿也具有良好的抗炎作用和免疫修复作用。
目的：观察淫羊藿灌胃联合骨髓间充质干细胞移植对阿霉素肾病大鼠肾脏病变的治疗作用。
方法：将50只大鼠随机分为对照组、模型组、骨髓间充质干细胞+淫羊藿组、骨髓间充质干细胞组和淫羊藿组，各10只。后4组大鼠于尾静脉注射盐酸阿霉素制备肾病大鼠模型；对照组注射等体积生理盐水。模型成功造模24 h后，骨髓间充质干细胞+淫羊藿组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞，同时灌胃淫羊藿水煎液1 mL/d，连续1周。骨髓间充质干细胞组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞。淫羊藿组灌胃淫羊藿水煎液1 mL/d，连续1周。模型组注射等量生理盐水同时灌胃等量生理盐水。对照组大鼠不作任何处理。
结果与结论：①与模型组相比，骨髓间充质干细胞和/或淫羊藿治疗后，大鼠肾脏组织损伤明显减轻，尿蛋白含量减少；②与模型组相比，骨髓间充质干细胞+淫羊藿组和淫羊藿组大鼠血浆白蛋白及血液中过氧化氢酶含量显著升高，血清胆固醇、三酰甘油及丙二醛水平显著降低；③与模型组相比，骨髓间充质干细胞+淫羊藿组和骨髓间充质干细胞组大鼠肾脏组织中转化生长因子β1 mRNA表达显著下降；④结果提示淫羊藿联合骨髓间充质干细胞治疗肾病效果优于单一使用淫羊藿或骨髓间充质干细胞。 -
脂肪源干细胞移植骨质疏松模型大鼠骨密度及骨形态计量学指标的变化
背景：越来越多的研究者希望通过干细胞移植促进成骨细胞分化，抑制破骨细胞增殖，从而治疗骨质疏松症。
目的：探讨外源性脂肪干细胞移植对卵巢切除骨质疏松大鼠的治疗作用。
方法：选取30只SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、脂肪干细胞移植组，每组10只。模型组和脂肪干细胞移植组进行双侧卵巢切除手术，建立骨质疏松模型，假手术组仅摘除卵巢附近的脂肪组织，但不摘除卵巢。脂肪干细胞移植组经尾静脉注射第4代脂肪干细胞(2×106个脂肪干细胞)，模型组注射等量生理盐水，每周1次。细胞移植6周后，检测血清钙、磷、碱性磷酸酶水平及骨密度、骨形态计量学指标。
结果与结论：①与假手术组相比，模型组大鼠胫骨骨小梁体积百分比明显降低(P<0.01)，与模型组相比，脂肪干细胞移植组大鼠胫骨骨小梁体积百分比显著增加，差异有显著性意义(P<0.05)；②与假手术组相比，模型组大鼠胫骨骨小梁吸收表面百分比、骨小梁形成表面百分比明显升高(P <0.05或P <0.01)；与模型组相比，脂肪干细胞移植组大鼠胫骨骨小梁吸收表面百分比、骨小梁形成表面百分比显著降低，差异有显著性意义(P <0.05)；③与假手术组相比，模型组血清钙、碱性磷酸酶水平和骨密度显著降低(P <0.05)，而血清磷水平显著升高(P <0.05)；与模型组相比，脂肪干细胞移植组血清钙、碱性磷酸酶水平和骨密度显著升高(P <0.05)，而血清磷水平显著降低(P <0.05)；④结果表明，脂肪干细胞移植后能够改善卵巢切除骨质疏松大鼠的骨量流失。 -
骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆行为学的影响
背景：临床上通过药物治疗老年性痴呆虽然在一定程度上可以缓解患者的症状，但效果甚微。干细胞移植是对该疾病的一种新的尝试和探索。
目的：观察骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠行为学的影响。
方法：选取SD大鼠20只，给予连续灌胃及饮食三氯化铝60 d建立老年性痴呆大鼠模型，造模后随机分为模型组和实验组，实验组海马区注射骨髓间充质干细胞，模型组注射生理盐水，另取10只大鼠正常喂养作为对照组。移植后4周，通过Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力，取大鼠脑组织检测超氧化物歧化酶活性和丙二醛水平。
结果与结论：①与模型组比较，实验组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P <0.05)，跨越平台次数增加(P <0.05)；②与模型组比较，实验组大鼠脑组织中超氧化物歧化酶活性升高(P <0.05)，丙二醛水平降低(P <0.05)；③结果表明，骨髓间充质干细胞移植后能够改善老年性痴呆大鼠的学习记忆能力，有助于大鼠行为学的恢复。 -
人尿源干细胞移植治疗慢性肾病大鼠
背景：尿源干细胞可能的来源是肾脏组织，可能更加适应肾脏微环境，这为肾脏疾病的治疗提供了新思路。
目的：探讨人尿源干细胞对慢性肾病模型大鼠的治疗作用。
方法：收集健康人新鲜尿液，提取人尿源干细胞，进行体外培养。20只SD大鼠制备慢性肾病模型，实验组肾皮质内注射人尿源干细胞悬液，对照组肾皮质内注射生理盐水，另外取10只健康大鼠作为正常组。通过检测3组大鼠血清肌酐及肾小球滤过率判断尿源干细胞对肾功能的改善作用，并对3组大鼠肾脏进行组织形态学评估。
结果与结论：①尿源干细胞对肾功能具有改善作用，与对照组比较，实验组大鼠血清肌酐降低、肾小球滤过率升高；②尿源干细胞对肾脏的组织学形态有改善作用，与对照组比较，实验组大鼠肾脏组织中CD68阳性细胞明显减少，肾脏间质炎性细胞浸润减轻；③结果表明，人尿源干细胞对慢性肾病模型大鼠肾功能存在修复作用。 -
体内灌注诱导骨髓基质干细胞构建组织工程骨治疗良性骨肿瘤和瘤样病变
背景：骨髓基质干细胞具有较强的成骨潜能，属于当前组织工程中为理想的种子细胞。但是，临床上未见将骨髓基质干细胞植入良性骨肿瘤和瘤样病变的研究。
目的：探讨体内灌注诱导骨髓基质干细胞方法，研究骨髓基质干细胞在良性骨肿瘤和瘤样病变患者中的临床治疗效果。
方法：将65例良性骨肿瘤和瘤样病变患者根据治疗措施不同分为单纯植骨组(n=30)和骨髓基质干细胞组(n=35)。单纯植骨组采用生理盐水混合同种异体骨进行30 min浸泡，并植入骨缺损部位。骨髓基质干细胞组根据植骨量从每一位患者身上抽取20-40 mL骨髓，分化、纯化，培养获得骨髓基质干细胞，经过体内灌注方法诱导工程骨，并植入骨缺损部位。
结果与结论：①在倒置相差显微镜下，灌注的骨髓细胞悬液中细胞为圆球形，但是细胞大小不一。细胞灌注初培养皿造血细胞较多。随着培养时间的延长，可见分布在贴壁梭形细胞及悬浮红细胞，细胞多为圆形、三角形；②两组患者治疗后均进行1-12个月随访，患者术后均为甲级愈合。骨髓基质干细胞组患者感染率、愈合时间显著低于单纯植骨组；③结果提示体内灌注诱导骨髓基质干细胞构建组织工程骨效果理想，能促进血供的重建，将骨髓基质干细胞构建组织工程骨运用于良性骨肿瘤和瘤样病变中能够促进骨融合和骨缺损愈合，具有较高的临床应用价值。 -
姜黄素通过ATK/FoxM1信号通路调控胃癌干细胞增殖及凋亡
背景：姜黄素对多种肿瘤细胞及肿瘤干细胞有抑制作用，但其对胃癌干细胞的影响及作用机制尚未见报道。
目的：探索姜黄素对胃癌干细胞的影响及作用机制。
方法：利用肿瘤球形成实验和胃癌表面标记物(EpCAM 及 CD44)从胃癌 SGC7901细胞系中分离胃癌干细胞；MTT 实验检测姜黄素对胃癌干细胞增殖的影响；流式细胞仪检测姜黄素对胃癌干细胞凋亡的影响；Western blot检测胃癌干细胞中FoxM1、p-AKT及AKT的表达；给予PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002干预胃癌干细胞，研究AKT信号通路与FoxM1信号通路的调控关系。
结果与结论：①成功从胃癌SGC7901细胞系中分离出了EpCAM+/CD44+双阳性胃癌干细胞；②姜黄素可以抑制胃癌干细胞的增殖，促进其凋亡，抑制干细胞中FoxM1及p-AKT的表达；③PI3K/AKT信号通路阻断剂LY294002能够抑制胃癌细胞中p-AKT及FoxM1的表达；④结果提示，姜黄素可以通过阻断ATK/FoxM1信号通路抑制胃癌干细胞增殖并促进其凋亡。 -
胃癌干细胞在肿瘤侵袭转移及对血管形成的影响
背景：胃癌干细胞在新辅助化疗、常规治疗中发挥重要作用，与患者治疗后复发关系密切，但是该结论尚未得到证实。
目的：观察胃癌干细胞在肿瘤侵袭转移中的作用及对血管形成能力的影响。
方法：建立胃癌模型裸鼠，分离培养胃癌干细胞。将采集的胃癌干细胞分别进行细胞划痕实验、成环实验、细胞抑制率实验、细胞转移性实验及成瘤实验。
结果与结论：①细胞形态：胃癌干细胞培养7 d后贴壁生长，贴壁细胞缺乏规律性，多为蝌蚪形；②划痕实验：划痕后0，24 h细胞划痕宽度差异有显著性意义(P <0.05)；③成环实验：倒置显微镜观察显示，胃癌干细胞能形成环状；④细胞抑制率实验：奥沙利铂干预胃癌干细胞的半抑制浓度显著低于5-氟尿嘧啶(P <0.05)；⑤胃癌肿瘤干细胞转移性实验：胃癌干细胞穿过基底膜细胞数显著高于细胞转移前(P <0.05)；⑥成瘤实验：胃癌干细胞植入后胃癌组织质量显著重于普通胃癌裸鼠(P <0.05)。结果说明：胃癌干细胞在肿瘤侵袭、转移中发挥重要的作用，具备较强的血管形成能力。 -
小儿骨髓间质干细胞体外诱导分化为神经元样细胞
背景：以往相关报道大多为成人或者动物骨髓间质干细胞，关于儿童骨髓间质干细胞体外培养及定向分化的研究相对较少。
目的：探讨儿童骨髓间质干细胞诱导分化为神经干细胞及神经元细胞的能力。
方法：取传12代儿童骨髓间质干细胞，加入预诱导液(含体积分数为10%胎牛血清及1mmol/L β-巯基乙醇的DMEM培养液)、诱导液(含2%二甲基亚砜及150μmol/L丁基羟基茴香醚的DMEM培养液)进行定向诱导分化。诱导后30 min，7 d，免疫细胞化学检测神经干细胞特异性抗原nestin、神经丝蛋白β-tublinⅢ的表达，诱导后0，5.5，6 d，RT-PCR检测nestin mRNA的表达。
结果与结论：①经二甲基亚砜、丁基羟基茴香醚联合诱导之后，细胞胞体逐渐收缩为锥形和多角形、类圆形，胞体伸出突起并逐渐延长为细丝状。联合诱导至第6天，相邻细胞突起发生交互，形成网状；②诱导30 min后，nestin抗原表达呈阳性，诱导7 d后，β-tublinⅢ表达呈阳性；③诱导开始时(0 h)未出现nestin mRNA表达，诱导5.5 h时nestin mRNA表达呈阳性，诱导6 d时不再表达；④结果表明，小儿骨髓间质干细胞经二甲基亚砜、丁基羟基茴香醚体外联合诱导可分化为神经干细胞与神经元细胞。 -
力生长因子促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化
背景：力生长因子具有激活肌肉卫星细胞和促进肌原细胞生长的作用，同时在维持骨质量和修复骨损伤方面具有作用。
目的：研究力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的作用机制。
方法：采用MTT法检测力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化的佳质量浓度与时间。用定量PCR和Western blot检测此质量浓度力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化后细胞中成骨细胞标志物碱性磷酸酶和骨钙素mRNA和蛋白的表达水平变化，并用Western Blot检测AKT和mTOR磷酸化水平变化。
结果与结论：力生长因子的质量浓度为45μg/L时作用5 d促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化的效果好。45μg/L力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞成骨分化后细胞中碱性磷酸酶和骨钙素mRNA和蛋白水平在干预后4 h高，同时AKT和mTOR的磷酸化水平也在干预后4 h时高。说明力生长因子促进兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞的分化的作用机制是通过PI3K/AKT途径实现的，且在45μg/L干预后4 h时的效果好。 -
银屑病患者与正常人皮肤间充质干细胞的生物学特性
背景：研究皮肤来源间充质干细胞可以反映银屑病的发病情况。
目的：分析银屑病皮肤间充质干细胞的生物学特性。
方法：利用酶消化法分离培养银屑病组与正常对照组(健康人)皮肤间充质干细胞，流式细胞术检测细胞免疫表型，分别用成软骨、成脂、成骨诱导体系鉴定细胞多向分化能力，细胞计数法绘制第3代细胞增殖曲线，用ELISA法检测细胞培养上清液中转化生长因子β1和表皮生长因子水平。
结果与结论：①倒置相差显微镜下观察银屑病组与正常对照组细胞形态均存在异质性；②细胞表面抗原CD29、CD90、CD44、CD73及CD105呈高表达，CD45、CD34及HLA-DR呈低表达；③成脂、成骨、成软骨诱导后皮肤间充质干细胞可向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化；④银屑病组皮肤间充质干细胞增殖速度明显快于对照组，但终两组细胞数量趋于一致，并没有明显的差异；⑤银屑病组皮肤间充质干细胞分泌表皮生长因子和转化生长因子β1水平与患者病情严重程度无相关性(P >0.05)。与对照组比，银屑病组细胞培养上清液中表皮生长因子水平明显偏高，转化生长因子β1水平明显偏低，差异有显著性意义(P <0.01)；⑥结果表明，银屑病患者皮肤间充质干细胞形态存在异质性，细胞生物学活性异常。 -
脑络欣通和左归丸药物血清体外培养神经干细胞的增殖与分化
背景：神经干细胞种子来源数量相对有限，增殖分化量相对较少，如何采取有效的措施促进神经干细胞增殖、分化成为研究的焦点。
目的：比较脑络欣通和左归丸药物血清对体外培养的大鼠神经干细胞增殖分化的作用。
方法：体外分离培养SD大鼠胚胎神经干细胞，加入含10%的脑络欣通以及10%的左归丸药物血清培养基中共同培养。采用倒置显微镜及免疫荧光染色观察脑络欣通和左归丸药物血清对体外培养的大鼠神经干细胞增殖分化的作用，采用倒置显微镜、免疫荧光染色方法进行观察比较。
结果与结论：①细胞培养24 h后倒置显微镜下观察细胞开始团生长，并聚集成球，但是细胞直径相对较小，48 h后神经球进一步增大，形态相对规则，但是未见神经球分化；②左归丸组细胞培养5 d后细胞球突起平均长度，显著大于脑络欣通组(P <0.05)；③左归丸药物血清培养下大鼠神经干细胞分化为MAP-2阳性细胞率显著低于脑络欣通组(P <0.05)，分化为胶质纤维酸性蛋白阳性细胞率显著高于脑络欣通组(P <0.05)；④将培养48 h的神经球分别放2种入药物血清中培养，12 h后发现神经球贴壁生长，少量细胞迁移。随着时间的延长，迁移的细胞数量开始增多；⑤免疫细胞荧光染色下显示2种药物血清培养下神经元突出均相对较多，且突起的长度较长，神经干细胞神经元以及星形胶质细胞比例差异不显著(P >0.05)。⑥结果提示脑络欣通和左归丸药物血清对体外培养的大鼠神经干细胞增殖分化均具备明显的促进作用，均能营造更加适宜神经细胞增殖等微环境，但是2种药物存在明显的差异，通过脑络欣通和左归丸药物诱导神经细胞增殖分化是可行的。 -
电针对脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化的影响
背景：脾虚证不仅对人体的免疫系统和消化系统等产生不同程度的影响，且脾与脑存在密切的生理联系，因此脾虚证还会影响到中枢神经系统的正常功能。
目的：分析电针在脾虚证大鼠海马区神经干细胞增殖分化中的作用机制。
方法：60只SD大鼠随机分为3组：正常组、对照组以及电针组。对照组和电针组均制备脾虚证动物模型，模型制备后2周，电针组实施电针治疗。造模后2周，测量正常大鼠和模型大鼠的体质量。治疗后1，2，3，4周，分别取各组5只动物进行组织学检测，观察海马区神经干细胞增殖分化情况。
结果与结论：①体质量：造模后2周模型组显著低于正常组(P <0.05)；②BrdU阳性细胞数：造模后2，3，4周电针组均显著高于正常组和对照组(P <0.05)；③BrdU/巢蛋白阳性细胞数：对照组造模后1周显著低于同期正常组和电针组，2，4周显著低于同期电针组，3周显著低于同期正常组(P <0.05)；2，3，4周电针组均显著高于正常组(P<0.05)；④BrdU/胶质纤维酸性蛋白阳性细胞数：造模后1，2，4周对照组显著低于其他2组，2周电针组显著高于正常组(P <0.05)；⑤BrdU/神经元特异性烯醇化酶阳性细胞数：造模后1，2周对照组显著低于其他2组，3周电针组显著高于正常组(P <0.05)。⑥结果表明，电针可以有效促进海马区神经干细胞的增殖，并促进细胞向星形胶质细胞、神经元方向进行分化。 -
CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞活性与多药耐药的相关性
背景：肿瘤干细胞与肿瘤的复发、转移以及耐药等之间存在十分密切的联系。
目的：探讨CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞活性与多药耐药的相关性。
方法：运用免疫磁珠法从多药耐药乳腺癌细胞株MCF-7/ADR中分选出CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞。流式细胞仪测定分选后CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞亚群比例和细胞膜P-gp荧光强度，RT-PCR法检测多药耐药基因MDR mRNA表达水平。
结果与结论：①获得的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞比例在90%以上；②CD44+CD24-/low细胞亚群成球比例明显强于 non-CD44+CD24-/low细胞亚群；③CD44+CD24-/low细胞亚群的细胞膜 P-gp 荧光强度显著高于MFC-7/ADR细胞株(P <0.05)；④CD44+CD24-/low细胞亚群的MDR mRNA表达水平显著高于MFC-7/ADR细胞株(P <0.05)；⑤结果表明，分选得到的CD44+CD24-/low乳腺癌干细胞具有很强的体外成球能力，高表达P-gp蛋白和MDR mRNA可能是导致多药耐药的原因之一。 -
骨髓间充质干细胞移植联合益母草碱治疗宫腔粘连
背景：大量动物实验表明骨髓间充质干细胞移植能够促进皮肤损伤、肝损伤、肺损伤的修复；益母草具有活血祛瘀、调经的功效。
目的：验证骨髓间充质干细胞移植联合益母草碱治疗兔宫腔粘连的作用并探讨其机制。
方法：采用双重损伤法建立新西兰大白兔宫腔粘连模型，实验随机分为5组：假手术组、宫腔粘连组、骨髓间充质干细胞组、益母草碱组和骨髓间充质干细胞+益母草碱组(联合组)。假手术组切开子宫后不作任何处理，生理盐水冲洗后关腹；骨髓间充质干细胞组与联合组在子宫缝合前将骨髓间充质干细胞局部移植至子宫组织内；益母草碱组与联合组分别在造模后灌胃益母草碱4 mg/kg，共14 d。苏木精-伊红染色观察子宫内膜形态学变化，免疫组织化学染色法检测组织中转化生长因子β、Smad3的蛋白表达变化，实时荧光定量PCR(qPCR)检测IFN-γ的mRNA表达变化。
结果与结论：①与宫腔粘连组相比，骨髓间充质干细胞组、益母草碱组与联合组的宫腔粘连程度减轻，其中以联合组宫腔粘连程度小；②与假手术组相比，宫腔粘连组的转化生长因子β、Smad3蛋白表达显著升高，干扰素γ的mRNA表达显著降低；与宫腔粘连组相比，骨髓间充质干细胞组、益母草碱组与联合组中转化生长因子β、Smad3蛋白表达显著降低，干扰素γ的mRNA表达显著升高，其中以联合组的变化程度大。③结果证实骨髓间充质干细胞移植联合益母草碱能够显著改善宫腔粘连；其作用可能与转化生长因子β/Smad3通路有关。 -
洛伐他汀对胶质瘤干细胞增殖和凋亡的影响
背景：越来越多的研究报道洛伐他汀对多种肿瘤细胞具有抑制增殖、促进凋亡、诱导分化等作用，而对正常细胞的毒副作用较小，但其对胶质瘤干细胞的影响尚未见报道。
目的：探讨洛伐他汀对胶质瘤干细胞增殖和凋亡的影响。
方法：利用流式细胞仪分选技术从人类恶性胶质母细胞瘤细胞系U87中分选出胶质瘤干细胞；MTT法检测洛伐他汀对胶质瘤干细胞增殖的影响；流式细胞仪检测洛伐他汀对胶质瘤干细胞凋亡的影响；Western blot检测洛伐他汀对胶质瘤细胞Ki67、Bax及Bcl-2表达的影响。
结果与结论：①利用流式细胞仪分选技术成功从人类恶性胶质母细胞瘤细胞系 U87中分选出 CD133+胶质瘤干细胞，分选后CD133阳性细胞比率为85%；②洛伐他汀能够浓度(5，10，20μmol/L)和时间(24，48，72，96 h)依赖性地抑制胶质瘤干细胞的增殖；③10μmol/L洛伐他汀干预48 h能够诱导胶质瘤干细胞的凋亡；④洛伐他汀能够浓度(5，10，20μmol/L)依赖性地抑制胶质瘤细胞中Ki67的表达；⑤10μmol/L洛伐他汀能够提高胶质瘤细胞中Bax的表达，同时降低Bcl-2的表达；⑥Ki67，Bax，Bcl-2蛋白表达的变化进一步验证了洛伐他汀能够浓度和时间依赖性地抑制胶质瘤干细胞的增殖，诱导胶质瘤干细胞的凋亡。 -
内分泌和化疗对乳腺肿瘤患者干细胞的影响
背景：肿瘤干细胞是恶性肿瘤复发及转移的根源，不同治疗方法对肿瘤中肿瘤干细胞的影响是临床研究的重点。
目的：探讨内分泌和化疗对乳腺肿瘤患者干细胞的影响。
方法：①对雌激素受体阳性人乳腺癌细胞株 MCF-7进行复苏和培养，选取第3代对数期细胞分为对照组、雌二醇组和雌二醇+三苯氧胺组。对照组培养基中添加等量无水乙醇，雌二醇组分为1×10-7，1×10-8，1×10-9 mol/L三个亚组，分别在培养基中加入1×10-7，1×10-8，1×10-9 mol/L雌二醇。雌二醇+三苯氧胺组按雌二醇浓度的差异分为三个亚组，培养基中分别加入1×10-7，1×10-8，1×10-9 mol/L雌二醇，3个亚组均同时加入1×10-6 mol/L的三苯氧胺。②晚期复发转移乳腺癌女性患者15例为雌激素受体阳性复发转移乳腺癌组，接受化疗治疗。另取15名健康志愿者作为健康对照组。
结果与结论：①雌二醇组和雌二醇+三苯氧胺组CD44+CD24-/low细胞亚群比例均显著高于对照组(P <0.05)，雌二醇组CD44+CD24-/low细胞亚群比例显著高于同浓度雌二醇+三苯氧胺组(P <0.05)。各组培养10 d和20 d时的CD44+CD24-/low细胞亚群比例接近(P >0.05)。②不同化疗药物均对MCF-7细胞的增殖产生一定的抑制作用，且呈现出剂量-效应依赖现象。MCF-7经不同化疗药物干预24 h后，细胞中CD44+CD24-/low细胞亚群的比例均明显增加(P <0.05)；但干预20 d后仅紫杉醇和阿霉素组细胞中CD44+CD24-/low细胞亚群比例高于对照组(P <0.05)。③健康者外周血CD44+CD24-/low细胞亚群比例显著低于雌激素受体阳性复发转移乳腺癌患者(P <0.05)。在15例雌激素受体阳性复发转移乳腺癌患者中，9例疾病稳定，5例部分缓解，1例化疗无效，疾病进展。化疗有效者化疗后的外周血CD45-CD44+CD24-/low细胞亚群比例均显著低于化疗前(P <0.05)。⑤结果说明内分泌治疗与化疗会对雌激素受体阳性乳腺癌的 CD44+CD24-/low细胞亚群产生一定的影响。MCF-7细胞中 CD44+CD24-/low细胞亚群会对一定的化疗药物产生抵抗能力，经化疗有效的患者外周血 CD45-CD44+CD24-/low细胞比例会出现下降。 -
人脐血干细胞分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞
背景：鼻黏膜纤毛上皮细胞受损后导致鼻黏膜生物功能严重创伤。相对于其他成体干细胞，人脐血干细胞具有更好的诱导分化潜能。
目的：观察人脐血干细胞通过体外培养、诱导分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞的可行性。
方法：收集正常健康人脐血，分离人脐血干细胞，通过体外培养，鉴定干细胞表面标记物后进行传代培养；取第3代脐血干细胞，用携带增强型绿色荧光蛋白重组腺相关病毒进行感染，采用气液界面培养法，分别于诱导感染1，2周后对干细胞进行MUC8基因PCR检测。在脐血干细胞培养3周后进行FOXJ1免疫荧光染色。
结果与结论：①培养鉴定结果：原代人脐血干细胞传代至第3代时，细胞形态较均一，折光性良好，可表达干细胞表面标记物；②转染鉴定结果：细胞转染3 h后，可见第3代干细胞呈现出绿色荧光，培养48 h后，流式细胞仪检测细胞阳性率达96.2%，说明干细胞转染效果很好；③RT-PCR检测：人脐血干细胞MUC8 mRNA无表达，而鼻黏膜上皮细胞MUC8 mRNA呈现出强表达，培养1周时 MUC8 mRNA呈现弱表达，培养2周后有一定的增强；④免疫荧光染色：在转染的绿色荧光蛋白背景下可观测到FOXJ1红色荧光呈现阳性表达结果；⑤结果说明：人脐血干细胞在适宜培养条件下可分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞。
