中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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根管封闭材料的生物学特点及其临床应用
致密的封填是根管治疗成功的关键之一,其主要目的是为减少经由口腔或根尖周围组织渗透进入根管系统的信道,以及将根管清创、修形过程中无法完全移除的刺激物封闭于根管系统内.影响根管封填材料封闭效能的重要因素还是材料的理化性能,优良的技术配合理想的材料,才能成功地做好根管封填.根管充填材料的分类为以氧化锌丁香油为基质的根充填糊剂,以环氧树脂为基质的根充填糊剂及含有氢氧化钙混合物的根充填糊剂.根管治疗术常用药物有氢氧化钙糊剂,Vitapex糊剂,氧化锌丁香油酚糊剂类.根管封闭技术在热载体牙胶充填和激光根管充填方面已取得了一定进展.
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软骨组织工程载体材料的研究与进展
随着组织工程技术的兴起,利用组织工程的方法和手段修复软骨缺损成为一种新的治疗模式,其中寻找一种合适的软骨细胞载体则足当前软骨组织工程研究的焦点之一.文章从人工合成的可降解性聚合物和天然的细胞外基质替代物(天然高分子聚合物)两方面的进展做一综述,总结了各种载体的优缺点.
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钛种植体表面改性的研究现状及应用进展
近年来,纯钛因其具有良好的生物相容性,而被应用于口腔种植领域,但其本身仍存在着许多问题.随着钛种植体广泛应用于临床,如何提高其种植的成功率引起了人们越来越多的关注.学者们研究了多种改善方法,其中钛种植体的表面处理对提高种植成功率起着重要作用,目前常用的表面处理方法主要包括:化学处理方法、物理方法,以及生物方法等,且不同处理方法都有其各自的优点.文章就目前国内外对钛种植体表面处理方法的研究现状及进展进行综述.
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合成及天然支架材料在皮肤组织工程中的应用
目前用作皮肤组织工程支架的材料有很多种,大致可以分为合成支架材料和天然支架材料两大类.文章在广泛查阅国内外有关皮肤组织工程方面相关文献的基础上进行总结,发现天然支架材料可以更好地为细胞的黏附、增殖提供三维支架空间,具有更大的潜力应用于皮肤组织工程.
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抗菌金属材料的发展现状与研究动态
文章重点介绍了抗菌金属材料的分类及其抗荫机制,综述了抗菌金属材料的发展现状和研究动态,分析了各类抗菌金属材料的工艺特点和应用情况,阐述了中国抗菌金属材料的发展趋势和热点问题,提出了依据中国国情,对国外的研究成果进行消化吸收、降低成本,研制出抗菌时间持久、抗菌性能优良、能够适合大规模生产的抗菌金属材料.
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硅胶乳房假体的选择与临床应用
硅胶乳房假体一直是乳房美容和乳房重建使用广泛的生物材料.隆乳术在中国开展起步较晚,且以采用硅胶假体置入为主.硅凝胶充填的硅胶乳房假体历经40余年临床应用实践并不断演变完善,取得良好临床疗效的同时,也暴露了一些相关的问题.其主要的并发症有乳房假体破裂或渗漏,纤维包膜挛缩,假体移位及感染等.对待硅胶乳房假体置入材料,既要重视已明确的并发症,又要重视尚存争议的安全性问题.
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口腔修复合金材料的理化特性及临床应用评价
常用的口腔修复体金属有贵金属(合金)和镍铬合金、钻铬合金、钛(钛合金)等.材料的耐腐蚀性是临床医师选择合金种类的重要依据之一,金属腐蚀分为化学、电化学和物理腐蚀等3类.影响微生物在材料表面黏附为关键的是材料表面粗糙度和个体口腔卫生习惯.文章对口腔修复合金材料的种类、耐腐蚀性、粗糙度的影响以及过敏性和毒性等方面进行了探讨,以希望研究出性能更为优良的口腔修复合金材料.
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组织工程心脏瓣膜的材料特点及临床应用
背景:从组织工程心脏瓣膜材料的来源、瓣膜脱细胞方法、组织工程瓣膜的保存、组织工程心脏瓣膜的钙化、生物反应器及细胞与材料的黏附几方向进行归纳总结,为组织工程心脏瓣膜的临床应用提供理论依据.方法:应用计算机检索检索中国期刊全文数据库、万方数据库2000-01/2008-12期间的相关文章,检索词"瓣膜;心脏;组织工程",限定文章语言种类为中文.共检索到50篇文献,对资料进行初审,纳入标准:与心脏瓣膜支架材料相关的文章.排除标准:重复性研究.结果:目前临床治疗心脏瓣膜病常用的瓣膜替代物上要是机械瓣和生物瓣.所使用的瓣膜支架材料大多属于生物"惰性"材料,不能为种子细胞的附着和生长提供良好的生物界面.研究表明,选取低渗液-SDS和核酸酶共同对猪主动脉瓣膜进行脱细胞处理效果较好.动物实验证明环氧氯丙烷能使戊二醛处理的瓣膜钙化明显减轻,且瓣膜的力学性能和组织稳定性良好.有研究发现,将促黏附分子RGD肽(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)对胶原材料表面修饰,可提高生物源性支架的细胞黏附性,促进组织工程心脏瓣膜构建.结论:异种生物源性脱细胞的生物瓣膜足常用的生物材料之一其在免疫原性方面基本满足了作为组织工程心脏瓣膜支架材料要求,但其他方面的特件如机械力学性能、细胞亲合性等还需进一步验证.
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乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球的制备、性能及应用
用于制备乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球的方法很多,可根据聚合物和药物的性质进行选择,其中乳化-固化法是目前制备乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球中常用的方法,适用于在连续相中不溶或难溶的药物,缺点在于使用有机溶剂,不利于保持药物的活性,复乳化时工艺也比较复杂,不适宜进行工业化生产;喷雾干燥技术是一种快速的一步微囊化过程,其条件温和,制得的微球具有粒度分布窄、包封率高等特点,其用于不稳定药物微囊化的大规模生产极具潜力.由于给药初期的突释有可能导致血药浓度接近或超过中毒水平,产生明显的毒副作用.乳酸-羟基乙酸共聚物的分子质量、乳酸-羟基乙酸共聚物的纯度、主药理化性质、微球制备方法及制备参数、微球载药量等均是影响突释程度的具体因素.目前防止突释或降低突释程度的方法主要有改变载体材料结构、适当的微球制备以及萃取、洗涤或加入附加剂等.乳酸-羟基乙酸共聚物微球控释系统具有延长药物释放时间、靶向释放、降低药物毒性和刺激性等特点,存在多种给药途径可肌肉注射、皮下注射、玻璃体内注射、关节腔内给药、植入给药、黏膜给药等.
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腹膜透析管材料特征及相关性感染
腹膜透析是急、慢性肾衰竭的主要替代疗法之一,与血液透析相比,它具有操作简单,可自行透析和大限度保护残存肾功能的特点,目前已在国内外广泛开展.腹膜透析相关性感染是影响患者透析疗效和病死率的丰要原因.资料显示,腹膜透析相关性感染与多种因素有关,包括操作方法、患者的营养状况、家居环境、文化程度及肠道因素等,而腹膜透析管材料特征所导致的感染越来越受到重视.腹膜透析管类型、临床置管操作方法的不统一以及熟练程度都会影响腹膜透析患者的治疗效粜及远期预后.
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一次性气管导管与金属导管联用在吸入性损伤患者应用中的生物相容性反应
背景:目前用于气管切开后的气管导管主要有一次性气管导管和金属导管2种,临床中发现各有优势与不足.目的:对比观察单用金属导管、单用一次性气管导管及联用一次性气管导管与金属导管在气管切开患者中应用的生物相容性反应.设计、时间及地点:回顾性分析,对照观察,于2008-12/2009-01在宜春市人民医院、南昌大学第一附属医院完成.对象:选择宜春市人民医院、南昌大学第一附属医院烧伤中心伴有吸入性损伤、作气管切开并行呼吸机支持的患者203例.其中1990/1997用金属导管患者85例为金属导管组,1998/2002用一次性气管导管患者62例为一次性气管导管组,2003-01/2008-11在应用呼吸机时用一次性气管导管而撤机后用金属导管患者56例为联用组.各组患者在性别、年龄、烧伤面积及吸入性损伤分型、治疗及呼吸机应用时间等方面差异无显著性意义(p>0.05).方法:金属导管组患者一直采用金属导管外套气囊,一次性气管导管组患者应用一次性气管导管,联用组患者在应用呼吸机时采用一次性气管导管而撤机后用金属导管,应用金属导管时可每日拔出内导管清洗消毒4次.主要观察指标:观察各组患者在用管期间导管气囊破裂、脱落情况,计算各组患者气道出血例数、气管导管堵塞例数、撤机至拔管时间.结果:一次性气管导管组、联用组患者气囊破裂、脱落例数与出血例数少于金属导管组(P<0.05);金属导管组、联用组导管堵塞例数少于一次性气管导管组(P<0.05),拔管时间也较一次性气管导管组短,但差异无显著性意义(P>0.05).结论:一次性气管导管与金属导管联用在吸入性损伤行气管切开患者中应用效果较单用效果好.
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羟基磷灰石义眼台置入23例
为观察眼球摘除后羟基磷灰石义眼台置入后的疗效及对羟基磷灰石义眼台暴露的原因和预防义眼台暴露进行分析,文章对2005-01/2007-12泸州医学院附属医院眼科采用自体巩膜包裹或带肌肉缝线义眼台的23例患者进行回顾性总结分析,其中Ⅰ期置入17例,Ⅱ期置入6例.对于眼球内容物剜出有巩膜瓣的患者角膜缘处360°结膜巩膜剪开,完全清除色素膜,做巩膜放射状切口,将义眼台置入巩膜腔内,缝合前部巩膜.对于眼球摘除术或羟基磷灰石义眼台Ⅱ期置入无巩膜瓣的患者,将义眼台置入肌锥内,直肌对位缝于义眼台缝线孔处.筋膜囊严密双层错位褥式缝合,结膜问断缝合.结果显示置入后义眼活动度和稳定性良好,2例发生义眼台暴露.提示羟基磷灰石义眼台置入是无眼球患者的首选,并发症少,即使出现义眼台暴露,也能很容易的处理.
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骨水泥填充骨质疏松性胸腰椎骨折椎弓根钉置入22例
背景:椎弓根螺钉固定在骨科临床上已得到了广泛应用,但螺钉松动、拔出和断裂等并发症时有发生,尤其是老年性和继发性骨质疏松患者,因此强化螺钉的即刻固定显得非常重要.目的:椎弓根螺钉加磷睃钙骨水泥治疗骨质疏松性胸腰椎骨折的效果分析.设计、时间及地点:病例分析,于2003-09/2007-09在阳煤集团总医院骨科完成.对象:应用磷酸钙骨水泥强化椎弓根螺钉治疗胸腰椎骨折22例,其中男6例,女16例;年龄56-74岁,平均66.5岁.按Saville分度法椎体骨量减少Ⅰ度4例,Ⅱ度6例,Ⅲ度7例,Ⅳ度5例.T12骨折3例,L1骨折12例,L2骨折4例,L3骨折2例,L4骨折1例.方法:以上关节突外缘与横突中心水甲的交点为椎弓根钉的进针点,在C型臂X射线线机的监视下,分别于患椎上下椎体经椎弓根沣入1～3 mL磷酸钙骨水泥(不能进入椎管)后冉拧入相应椎弓根螺钉.患者有双下肢症状者行伞椎板减压,单侧下肢有症状者可只行半椎板减压,用明胶海绵覆盖硬脊膜.旋紧内固定系统,撑开使椎体复位,椎板和横突间植骨融合或椎体间植骨融合.主要观察指标:骨折愈合情况及材料与宿主的生物相容性反应.结果:22例患者中有17例获得随访,随访时间8个月～2年,平均16个月.17例均获得骨性愈合,愈合时间为4～6个月,16例患者椎体高度得到恢复.有3例患者椎管减压术后仍有双下肢疼痛,考虑为神经根水肿所致,给予神经阻滞及脱水治疗后症状缓解.X射线片显示17例患者内固定物均无松动、断裂或脱落.患者在骨水泥注入过程中无特殊反应.结论:内固定加磷酸钙骨水泥强化治疗骨质疏松性胸腰椎骨折能增加椎体的强度,迅速缓解疼痛,是一种比较理想的治疗方法.
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高强度可注射型硫酸钙植骨材料治疗胫骨平台骨折21例
解放军第二军医大学附属长海医院2005-10/2007-10治疗21例胫骨平台骨折患者,其中SchatzkerⅡ型12例,SchatzkerⅢ型5例,SchatzkerⅣ型2例,SchatzkerⅤ型1例,Schatzker Ⅵ型1例.17例使用MIIGTMX3型高强度可注射硫酸钙,4例使用MIIGTMX3HiVisc型高强度可注射硫酸钙.20例患者获得随访,平均22.1个月.所有患者均获得骨性愈合,无骨不连发生;无感染情况发生;2例患者切口有渗出,渗出液细菌培养为阴性.术后4周高强度可注射硫酸钙开始明显吸收,术后12周基本吸收,术后6个月高强度可注射硫酸钙植入区域与正常松质骨一致.20例术后半年Rasmussen膝关节功能平均25.8分,12例术后1年Rasmussen膝关节功能平均26.9分.术后1年1例发生胫骨甲台高度丢失约2 mm,但无关节功能障碍.结果提示应用MIIGTMX3或MIIGTMX3HiVisc可注射式人工植骨材料治疗胫骨平台骨折,能有效避免骨折再移位和关节面高度的丢失,与宿主无生物相容性不良反应,并具有提高关节早期功能锻炼安全性的特点.
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纳米人工骨植入颈椎前路植骨融合60例
目的:评估颈前路植骨融合中应用纳米人工骨后临床症状的改善和影像学变化.方法:2005-06/2006-06辽宁医学院附属第一医院骨科收治脊髓型颈椎病26例,混合型颈椎病5例,颈椎创伤脱位29例,均采用纳米人工骨替代自体髂骨进行60例颈椎前路椎体次全切减压植骨融合钛板内固定.植入前根据临床症状行神经功能JOA评分,并予颈椎X射线、CT、MRI等检查.植入后1周、3个月、6个月、1年、1年半随访情况定期复查,行神经功能JOA评分,X射线检查分析椎体高度,颈椎生理曲度等,并将植入前后情况比较分析.结果:60例患者随访≥3个月,植入后均未见过敏及毒性反应,切口愈合均良好.植入后定期拍片复查,可见颈椎骨折者伤椎高度恢复,颈椎病患者未发现伤椎高度丢失,颈椎椎问角和颈前屈基本正常,内固定位置良好,未发现内固定松动、移位等现象.植入前X射线片及磁共振可见C4-5椎体脱位,脊髓受压;植入后3个月X射线可见骨折复位良好,内固定可靠.植入后神经功能JOA评分有明显提高,随访3个月者JOA评分由植入前(9.78±3.15)分增加到(15.25±2.79)分.结论:纳米人工骨在颈椎前路植骨融合术中效果良好,可以替代自体骨应用于颈椎前路植骨融合.
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淀粉型可吸收多聚糖止血粉预防大鼠术后肠粘连
背景:淀粉犁可吸收多聚糖止血粉是美国新推出的可吸收犁止血材料,因其具有良好的止血作用且能被体内完全降解吸收目前已用于临床.目的:观察来源于淀粉的可吸收多聚糖止血粉对术后肠粘连的预防作用.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-06/2008-06在解放军第四军医大学病理生理学教研室完成.材料:两种可吸收多聚糖止血粉:PerClotTM由美国Starch Medical Inc公司提供、AristaTMAH由美国Medafor Inc.公司提供.透明质酸钠由上海建华精细生物制品有限公司提供.方法:48只SD雄性大鼠建立肠粘连模犁,随机分为4组,每组12只,其中PerClotTM、AristaTMAH和透明质酸钠组分别以相同剂量(1 g)药物完全覆盖创面,对照组不给予任何药物.14 d后剖腹取材.主要观察指标:①大体观察动物伤口和腹腔感染情况,比较各组药物体内残留情况.②半定量的分级评定法观察腹腔粘连情况.③组织病理学观察浆膜刨面修复情况.结果:AristaTM AH、PerClotTM和透明质酸钠组腹腔粘连程度明显低于对照组(P<0.05),但3者之间抗粘连效果差异无显著性意义(P>0.05).PerClotTM组、AristaTMAH组术后腹腔中均无多聚糖膜残留,但透明质酸钠组腹腔内有人量积液.组织病理学结果显示对照组肠管浆膜面有明的炎症细胞浸润和纤维组织增生,而AristaTM AH、PerClotTM和透明质酸钠组病理改变明显轻于对照组.结论:两种来源于淀粉的可吸收多聚糖止血粉与透明质酸钠均有预防术后肠粘连作用.
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水溶性壳聚糖对黄芪水提液絮凝性能的影响
背景:壳聚糖及其衍生物是环境友好的天然高分子材料,其分子中丰富的带电基团如氨基、羟基以及长链分子结构赋予其优良的絮凝吸附能力,被作为絮凝剂广泛用于工业用水、食晶精制以及中药液纯化等领域.目的:对比壳聚糖、丙烯酰胺,壳聚糖接枝共聚物和2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖3种澄清剂对黄芪水提液的絮凝效果.设计、时间及地点:对比观察,实验于2007-09/2008-1 1在武汉理工大学化学工程学院药用高分子材料实验室完成.材料:内蒙黄芪由毫州新必中药材饮片有限公司提供;丙烯酰胺,壳聚糖接枝共聚物(接枝率为146.01%)和2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖(季铵化取代度为96.15%),为武汉理工大学化学工程学院药用高分子材料实验室自制.方法:用自制的丙烯酰胺,壳聚糖接枝共聚物和2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖作为絮凝澄清剂,考察其对于单味中药黄芪水提液的絮凝澄清效果,以水提液浊度去除率与药液的活性成分保留率为实验指标进行单因素实验,优化澄清工艺,并与壳聚糖絮凝法的澄清效果进行对比.主要观察指标:水提液浊度去除率和药液的活性成分保留率.结果:丙烯酰胺/壳聚糖接枝共聚物与2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖对于浊度去除率方面明显高于壳聚糖,2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖高;对于活性成分保留率方面三者接近.结论:通过接枝与季铵化改性得到的衍生物丙烯酰胺/壳聚糖接枝共聚物和2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖对黄芪水提液絮凝效果优于壳聚糖.
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重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白胶植入联合髓芯减压治疗兔股骨头缺血性坏死
背景:大量实验证明骨形态发牛蛋白2不但对骨组织来源的细胞有刺激分化作用,还可诱导非骨组织来源的细胞株分化为成骨细胞.但是,许多学者在研究中发现,将骨形态发生蛋白直接用于骨的修复效果不理想.目的:将重组人骨形态发,上蛋白2,纤维蛋白胶复合物植入髓芯减压后的兔激素性股骨头坏死区,观察股骨头坏死区域的新骨形成情况.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-01/2007-12在武警医学院完成.材料:在纤维蛋白胶的抑肽酶溶液内加入重组人骨形态发生蛋白2形成胶冻状的生物材料,终聚合材料中重组人骨形态发牛蛋白2的质量浓度1 mg/L.方法:制造激素型股骨头缺血性坏死的动物模型,将实验动物分为3组全部进行股骨头钻孔减压,在霞组人骨形态发生蛋白2,纤维蛋白组和单纯重组人骨形态发生蛋白2组孔道内植入相应材料,髓芯减压组钻孔后不植入材料.主要观察指标:MRI检查股骨头软骨及软骨下骨质信号改变,光镜下观察新骨生长情况,原子吸收分光光度仪测定钙含量.结果:MRI观察显示,植入重组人骨形态发牛蛋白2/纤维蛋白胶8周后原骨缺损孔道消失,被新生骨所取代.单纯植入重组人骨形态发生蛋白2可见少量新生骨,髓芯减压组仍为纤维组织.组织形态学观察可见重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白胶组术后8周原骨缺损区基本消失,有大量相对较成熟的骨小梁及板状骨并存.单纯重组人骨形态发生蛋白2组骨缺损区明显缩小,周边亦有少量骨小梁存在,新生毛细血管少见,缺损区有大量纤维组织填充.髓芯减压组术后8周缺损区缩小,周边有少量新骨形成,中心部仍为纤维组织.重组人骨形态发生蛋白2/纤维蛋白胶组钙含量显著高于另外2组(P<0.01).结论:骨形态发牛蛋白在缺血坏死的股骨头内可诱导新骨形成,与纤维蛋白胶复合后,骨形态发生蛋白诱导新骨形成的质量和数量均明显增强.
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氟尿嘧啶植入剂在蛋白变性剂盐酸中的释药行为
背景:研究经皮穿刺瘤内注射蛋白变性剂并植入抗癌植入剂,使瘤体速毁、药物缓释持续杀灭残癌细胞的治癌新方法,但有关植入剂与变性剂能否联用尚不清楚.目的:观察氟尿嘧啶植入剂与蛋白变性剂6 mol/L盐酸的相容性,了解两者能否联用.设计、时间及地点:观察性实验,于2006-10/2007-03在合肥工业大学完成.材料:Wistar大鼠78只,体质量(200±20)g,用于植入剂体内释放度测定;氟尿嘧啶植入剂(国药准字H20030345,圆柱体颗粒,直径0.8 mm,长4.0 mm,含氟尿嘧啶2 mg/粒,批号:20060922),经检验符合氟尿嘧啶植入剂国家药品质量标准[WS1(X-103)-2005Z],芜湖中人药业有限责任公司产品;体积分数为37%的盐酸为市售分析纯.方法:装有氟尿嘧啶植入剂和盐酸试管96只,置(37.0±0.5)℃下保温,于1,8,16,24,48,96,120,168,240,360,432,480,528,600,720,960 h各取6只试管内药粒,显微镜观察形态;高效液相色谱和紫外法测定氟尿嘧啶在盐酸中的稳定性,紫外法测定药含量和饱和质量浓度;计算体外释放度,并与大鼠体内释放度比较.主要观察指标:氟尿嘧啶在变性剂中的近似溶解度、稳定性、形态变化;植入剂在变性剂和大鼠体内的释放度.结果:在(37.0±0.5)℃盐酸中.氟尿嘧啶960 h内稳定,饱和质量浓度为(22.72±0.04)g/L,植入剂药粒完整,表面多孔,释药速率与大鼠体内相比,前期大,后期小,药物难以放完;1,96,360,960 h时释放度分别为(11.9±5.3)%,(52.6±4.3)%,(75.3±3.8)%,(85.3±2.1)%.结论:氟尿嘧啶植入剂在蛋白质变性剂6 mol/L盐酸中缓释药物,两者相容性好,可以联用.
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壳聚糖季铵盐作为基因递送载体的初步研究
背景:非病毒载体因其安全性好而在基因治疗领域赢得了广泛的关注,各种各样的非病毒载体处在不断的研究中,壳聚糖季铵盐作为一种新的生物材料,同样也具有作为基因递送载体的潜质.目的:考察壳聚糖季铵盐体外基因转染活性,寻求一种新的非病毒基因载体递送系统.设计、时间及单位:对比观察实验,于2008-04/12在浙江省医学科学院生物工程所完成.材料:质粒pcDNA3.1-EGFP为浙江省医学科学院生物工程实验室保存.以3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵作为改性剂制备壳聚糖季铵盐,用复凝聚法制备载基因纳米粒.方法:凝胶阻滞实验分析壳聚糖季铵盐包裹质粒的能力,DNase Ⅰ的保护实验分析载基因纳米粒的抵抗核酸酶降解的能力,体外基因转染实验评价纳米粒的体外转染活性,用倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪测定转染结果.通过考察转染液中有无牛血清和递送不同剂量的基因对转染效率的影响,寻求本递送系统较好的转染条件.另外,用MTT法测定壳聚糖季铵盐的细胞毒性.主要观察指标:壳聚糖季铵盐和pcDNA 3.1-EGFP以何种比例结合形成的纳米粒、转染液中有无牛血清,质粒的量为多少时对人胚肾T细胞的转染效率足高的;不同浓度的壳聚糖季铵盐对细胞生长的影响.结果:壳聚糖季钱盐纳米粒能转入人胚肾T细胞,虽然转染效率略逊丁聚乙烯亚胺,但是细胞毒性明显小于聚乙烯亚胺.壳聚糖季铵盐纳米粒转染细胞72 h后效率较高,经综合分析,当pcDNA质量为2 μg,壳聚糖季铵盐和pcDNA以质量比为5结合形成的纳米粒,在无血清条件下对人胚肾T细胞进行转染,转染效率足高的.结论:壳聚糖季铵盐纳米粒能将基因递送到细胞内,并且报告基因能在细胞内表达.因此,壳聚糖季铵盐用做基因递送的载体系统值得进一步的研究.
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重组人表皮生长因子纳米微球修复糖尿病大鼠溃疡创面
背景:在糖尿病合并有溃疡创面的动物实验中,各种生长因子单药或联合治疗都有报道.但是以纳米微球作为表皮生长因子载体进行糖尿病溃疡愈合的研究作者未检索到.目的:比较重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)纳米微球和rhEGF原液2种不同剂型修复糖尿病大鼠溃疡效果的差异.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-02在卫生部及天津市激素与发育重点实验室完成.材料:rhEGF原液由深圳华生元基因工程有限公司提供[rhEGF含量为1 μg(500 u)],rhEGF纳米微球[rhEGF含量为1 μg(500 U)]、空纳米微球由天津医科大学代谢病医院与天津大学材料学院纳米生物技术研究所联合制备,并完成鉴定.方法:88只SD大鼠尾静脉注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,用打孔器制备糖尿病大鼠溃疡模型.随机分为4组:rhEGF纳米微球组24只给予rhEGF纳米微球,rhEGF原液组24只给予rhEGF原液,空微球组24只给予空微球(与rhEGF纳米微球质量相同),PBS溶媒对照组16只给予PBS.各组均于造模后第1天开始用注射器将溶解好的药物均匀的喷洒在创面,待作用5 min后用无菌纱布包扎.第1天给液量为0.12 mL,以后根据创面愈合情况逐渐减少给液量.主要观察指标:于3,7,14,21 d计算创面愈合率.同时取创面肉芽组织,免疫组织化学染色测增殖核细胞抗原阳性表达情况,透射电镜观察成纤维细胞超微结构改变.结果:从第14天开始,rhEGF纳米微球组创面愈合率、增殖核细胞抗原阳性细胞率高于rhEGF原液组(P<0.05,P<0.01).透射电镜下可见thEGF纳米微球组成纤维细胞胞质内有大量的内质网,扩张成池状,腔内充满了合成的胶原蛋白.结论:与rhEGF原液比较,rhEGF纳米微球促进溃疡愈合更快.
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吲哚美辛柔性纳米脂质体与普通纳米脂质体体外透皮速率的比较
背景:吲哚美辛口服副作用大,将其制成软膏局部应用,透皮扩散速率较慢,影响吸收.柔性纳米脂质体是一种新型的经皮给药载体,对药物的皮肤渗透有显著的促进作用.目的:制备吲哚美辛柔性纳米脂质体并舰察柔性纳米脂质体对吲哚美辛离体透皮扩散速率的影响.设计、时间及地点:体外对照观察,于2008-07/2009-01在中南大学卫生部纳米生物技术重点实验室完成.材料:用薄膜超声法制备吲哚美辛纳米柔性脂质体.方法:采用小鼠体外皮肤的Franz扩散池作为渗透屏障进行体外透皮吸收实验,对比柔性纳米脂质体和普通脂质体的药物渗透速率.主要观察指标:粒径、回收率、包封率、药物累积渗透速率.结果:纳米脂质体作为载体粒径小,包封率高,具有可变形性,能顺利携带药物透过皮肤,提高吲哚美辛的透皮速率;与普通纳米脂质体相比,柔性纳米脂质体透皮速率更高.结论:柔性纳米脂质体可显著地促进吲哚美辛的透皮吸收.
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聚(左旋乳酸-己内酯)/Fe304取向超细纤维的制备及生物相容性
背景:在静电纺过程中利用磁场效应的方法更适合制备载有磁性纳米粒子的取向纤维.但当前的研究多限于水溶性聚合物材料的电纺.目的:通过相转移方法制备均匀分散有Fe3O4磁性纳米粒子的聚(左旋乳酸-己内酯)溶液,在外加磁场作用下通过静电纺技术制备聚(左旋乳酸-己内酯)/Fe3O4定向排列复合纤维,体外接种猪髋动脉内皮细胞,初步观察细胞相容性.设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-0612008-10在东华大学化学化上与生物工程学院生物科学研究所生物材料与组织T程实验室完成.材料:聚(左旋乳酸-己内酯)无规共聚物(50:50,M.30-40万)由日本Nara Medical University提供;猪髋动脉内皮细胞由中国科学院细胞所提供.方法:采用相转移法将水相中的Fe3O4磁性纳米粒子转移至有机溶剂中,制备聚(左旋乳酸-己内酯),Fe3O4的溶液.利用磁场对Fe3O4磁性纳米粒子的牵引作用,静电纺制备取向超细纤维.主要观察指标:通过扫描电镜对纤维进行表面形态、取向度进行分析,采用透射电镜分析Fe3O4磁性纳米粒子在纤维中分散和分布情况.在复合Fe3O4磁性纳米粒了的聚(左旋乳酸-己内酯)静电纺纤维膜上体外接种猪髋动脉内皮细胞,采用MTT法检测纤维膜上细胞的黏附和增殖能力以评价其生物相容性.结果:通过添加乳化剂汕酸钠成功得到分散均匀的Fe3O4磁性纳米粒子三氯甲烷溶剂.扫描电镜结果表明在磁场的影响下,静电纺得到的纤维农面光滑、无明显珠状物分布:排列方向沿磁场磁力线分布.取向度良好.透射电镜结果显示Fe3O4磁性纳米粒子在静电纺超细纤维中分散度良好.细胞生物相容性结果显示制备的载有磁性纳米粒子的聚(左旋乳酸-己内酯)静电纺超细纤维细胞黏附率优于纯聚(左旋乳酸-己内酯)纤维;其细胞增殖率与纯聚(左旋乳酸-己内酯)静电纺超细纤维接近.结论:含有一定浓度的Fe3O4磁性纳米粒子的聚(左旋乳酸-己内酯)溶液,在外加磁场的作用下,静电纺得到的纤维排列方向沿磁场磁力线分布,取向度极佳,且具有良好的细胞相容性.
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壳聚糖与大鼠嗅鞘细胞的生物相容性
背景:众多研究证实,嗅鞘细胞移植和生物导管在修复中枢神经系统损伤中发挥了显著的作用,课题组前期研究已证实了壳聚糖在大鼠体内神经系统具有良好的生物相容性.目的:观察壳聚糖与大鼠嗅鞘细胞的生物相容性.设计、时间及地点:体外细胞学对比观察,于2005-12/2006-05在武汉协和医院泌尿外科实验室完成.材料:将壳聚糖粉溶于10 g/L的乙酸溶液中,配制成10 g/L的壳聚糖溶液;显微剥离成年大鼠嗅球表面层,按常规方法行原代细胞培养.方法:实验分为3组,每组10孔.壳聚糖组将制备好的壳聚精溶液0.1 mL加入到培养板中,50℃烘箱至成膜干燥,加入40 g/L氧氧化钠溶液中和乙酸,双蒸水漂洗,晾干即可.多聚赖氨酸组按常规方法赖氨酸包被培养板.未包被组不用任何材料包被.将原代培养的嗅鞘细胞分别接种至壳聚糖包被、多聚赖氨酸包被和未包被的培养板上进行培养.主要观察指标:于培养第3,5天显微镜下观察细胞形态学变化,MTT比色实验检测细胞存活和增殖状况.结果:嗅鞘细胞可在壳聚糖膜上贴壁生长,细胞形态及数量与未包被组相比差异无显著性意义,但与多聚赖氨酸组相比细胞数量偏低.结论:嗅鞘细胞与壳聚糖有良好的生物相容性.
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涂覆聚氨酯材料植入神经电极的细胞相容性评价
背景:由于植入式电极在长期使用后会形成组织包囊,从而严重影响了电极的性能.课题组提出采用生物相容性好、离子导通能力强的聚合物涂层来包裹整个电极.这样,就能在不影响电极的电化学性能的前提下提高电极的生物相容性,使得电极在长期植入后的稳定性增强.目的:观察合成聚氨酯材料的离子导通性能以及与PC12细胞和小鼠小脑颗粒神经元的细胞相容性.设计、时间及地点;对比观察实验,于2007-10/2008-04分别在武汉大学化学院神经电极研究室和华中科技大学生科院完成.材料:首先用2,4-异佛尔酮二异氰酸酯和聚乙二醇合成预聚体,然后直接用水为交联剂,二丁基二月桂酸锡为催化剂进行交联形成聚氨酯.方法:将硅橡胶片在空气中等离子处理1 min后,将一定景合成的聚氨酯溶液铺展在处理后的硅橡胶片上,形成一层均匀的薄膜.以未经涂层处理的硅橡胶片为对照.主要观察指标:采用红外测试仪对合成的聚氨酯进行官能团的分析;测试电极上涂敷聚氨酯涂层前后的循环伏安性能;观察不同材料上PC12细胞和小鼠颗粒神经元的贴附状况;计算不同材料上细胞的相对存活率.结果:红外测试说明聚乙二醇和异佛尔酮二异氰酸酯反应完全;循环伏安测试证明离子在聚氨酯膜内的导通能力较强,而且不影响电极的电化学性能;PC12细胞和小脑颗粒神经元在涂覆有聚氨酯材料的硅橡胶上的贴附状况均好于未经涂层处理的硅橡胶;MTT法实验结果表明,涂覆有聚氨酯材料的硅橡胶上细胞的存活率高于未经涂层处理的硅橡胶(P<0.001).结论:在聚氨酯合成的过程中引入聚乙二醇,使得其不仪具有良好的离子导通性能,而且与PCI2细胞和小脑颗粒神经元具有良好的细胞相容性.
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聚氨酯与丝素粉体共混膜的血液吸附性
背景:为了改善医用聚氨酯的亲水性和血液相容性,利用共混的方法制备聚氨酯,丝素粉体共混膜,但是粉体的加入会显著提高共混膜的吸水性,因此会影响体外血液相容的表征.目的:观察丝素粉体的加入对聚氨酯,丝素粉体共混膜亲水性和血液吸附性能的影响.设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2008-08/10在武汉科技学院新型纺织材料绿色加工及其功能化教育部重点实验室和医院实验室完成.材料:蚕丝纤维由浙江桐乡市思源纺织有限公司提供,医用聚氨酯由DOW Chemical公司提供.方法:将蚕丝纤维在质量浓度为10g/L,浴比为1:20的Na2C03溶液中煮沸3 h,洗涤晾干后利用自制磨盘磨制成乳白色粉体而得到非水溶性丝素粉体.将丝素粉体加入到聚氨酯溶液中利用液体交换的方法制备了不同丝素粉体含量(0%,10%,30%,50%,70%)的聚氨酯与丝素粉体共混膜.主要观察指标;扫描电子显微镜观察共混膜表面形貌.计算单位体积共混膜上吸附血液红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板的数量.结果:当丝素粉体含量在50%以下时,丝素粉体被包含在聚氨酯大分子中间.当丝素粉体含量在70%时,丝素粉体均匀分布在共混膜表面.随着丝素粉体含量的增加,共混膜吸附血液各组分数量增加.随着时间的延长,共混膜吸附血液的量增加,直到达到动态平衡.在吸附动态平衡过程中,血小板的吸附量下降,主要归功于丝素粉体对其他细胞吸附能力要强于血小板.结论:丝素粉体加入可以明显改善材料的亲水性,并且随着丝素粉体含量的增加,共混膜对血液的吸附能力增强.
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牡蛎壳细胞毒性和遗传毒性的生物相容性评价
背景:研究资料表明牡蛎壳是一种新的根管充填材料.根据中国医药行业标准,细胞毒性试验和遗传毒性试验是临床应用前生物学评价的初级筛选试验.目的:评价牡蛎壳粉末的细胞毒性和遗传毒性.设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-04/07在北京大学口腔医学院材料研究室完成.材料:牡蛎壳粉末由中国科学院海洋研究所提供.用于细胞毒性检验的L929细胞株和遗传毒性检验的实验菌株--组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌-TA97,TA98,TA100,TA102由中国约品生物制品检定所提供.方法:制备牡蛎壳粉末0.5,1,2倍浸提液.分别采用分子滤过法和鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验(Ames试验)的平板掺入法,对浸提液进行细胞毒性和遗传毒性检测.主要观察指标:测量经琥珀酸脱氢酶作用后微孔滤膜的褪色面积和各平皿中细菌回变菌落数.结果:分子滤过法实验显示材料与成纤维细胞接触2 h,实验材料组的滤膜褪色面积与阴性对照结果一致,均未见滤膜褪色,细胞毒性为0级.实验材料与成纤维细胞接触24 h,实验材料组的滤膜未染色区直径为1.0～2.0 mm,褪色区面积达1～3 mm2,细胞毒性为1级,表明实验材料对细胞会产生轻度毒性作用,但仍属合格范围.Ames实验显示各实验材料组菌落回变数均未高十相应菌株白发回交菌落数的2倍,且无剂昔反应关系,结果为阴性.结论:牡蛎壳粉末对机体没有明显的细胞毒性和遗传毒性作用.
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聚乙烯醇水凝胶的生物相容性评价
背景:聚乙烯醇水凝胶作为烧伤创而的修复材料具有能保持创而湿润,有利于上皮细胞的生长和修复,加速伤口愈合.目的:拟验证物理交联法制各的聚乙烯醇水凝胶的生物相容性.设计、时间及地点:体外细胞毒性、皮内反应、迟发型超敏反应实验,2007-09/11在天津市医药科学研究所细胞实验和动物实验窀完成.材料:将医用纱布浸渍于一定浓度的聚乙烯醇溶液中,通过反复冷冻解冻制备水凝胶医用材料.方法:参照GB/T 16886中的体外细胞毒性、皮内反应和迟发型超敏反应标准评价材料的生物相容性.主要观察指标:①计算各组细胞的相对增殖率,确定样品的细胞毒性.②计算比较实验组与阴性组的综合平均记分.③记录样品组与阴性对照组的红斑和水肿的反应等级.结果:细胞毒性试验中,样品浸提尿液组与50%浸提原液组的细胞相对增殖率分别为80.9%,94.1%,毒性反应均为1级;皮内反应试验巾综合平均记分之差为0.2,于棉籽汕介质中的综合平均记分之差为O.7;迟发型超敏反应试验中,样品浸提液致敏反应记分未超出阴性对照组.结论:体外细胞毒性、皮内反应和迟发型超敏反应测试结果均达到国标要求,聚乙烯醇水凝胶具有可靠的生物安全性.
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异种脱蛋白松质骨支架与经诱导骨髓间充质干细胞的生物相容性
背景:研究证明脱蛋白松质骨具有良好的孔隙结构、生物可降解性和力学特性,但是应用于临床还要考虑其安全性.目的:观察片种脱蛋白松质骨支架与经诱导骨髓间充质干细胞的相容性以及对其生物学行为的影响.设计、时间及地点:体外观察实验,于2008 02/10在黑龙江省纤维化生物治疗重点实验帘完成.材料:取成年猪新鲜股骨远端松质部分,初制为3 cm×0.5 cm×0.5 cm大小.抽取山羊髂骨骨髓,梯度密度离心法分离提.纯骨髓间充质干细胞,传至第2代时换含1 × 107mol/L地塞米松、1×10-2mol/L β-甘油磷酸钠、100 mg/L维生素C的培养液进行成骨诱导.方法:无菌条件下将支架材料置入6孔板内,每孔1块,重复3孔.调整细胞悬液浓度为2×10.一,向每块支架滴加细胞悬液1 mL,培养5 h后将骨块翻面后沿6孔板内壁缓慢加入诱导培养液10 mL.另3孔接种相同数量细胞单纯培养做对照分析.主要观察指标:倒置相差显微镜F观察细胞贴附及基质分泌情况,MTT法分析种子细胞与支架复合培养1,3,5,7 d后的存活和增殖能力,复合培养1,3,5,7 d后检测碱性磷酸酶活性,流式细胞仪分析复合培养7 d后细胞周期、DNA倍体水平及细胞凋亡率.结果:复合培养3 d时接种于支架J二的细胞在孔隙内表而贴壁生长,并分泌较多的细胞外基质,复合培养5,7 d,细胞基质分泌旺盛,几乎充满支架孔隙.在各个时间点复合材料组骨髓间充质干细胞增殖峰值高于单纯培养组,但差异无显著性意义(P>0.05).复合材料组倍增时间为3d,单纯培养组为3.15d.各时间点两组碱性磷酸酶活性差异无显著性意义(P>0.05).两组细胞周期大致相同,未见异倍体细胞.结论:异种脱蛋白松质骨与骨髓间充质干细胞有良好的细胞相容性并促进细胞生长分化.
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镁锌合金在动物体内降解及其相容性
背景:研究发现镁离子可以促进成骨细胞的生长,但镁合金存体内的相容性和降解性尚不清楚.目的:观察镁锌合金在动物体内的生物相容性及其在体内降解和新骨形成情况.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/11在上海交通大学附属第六人民医院动物实验室完成.材料:镁锌合金棒由上海奥芮济材料和医学技术有限公司提供,含镁94%,含锌6%.聚丙交酯棒由京同公司提供.方法:48只新西兰大白兔随机分成镁锌合金组和聚丙交酯组,每组24只.在左侧股骨髁钻成直径0.45 cm,长1 cm的孔,分别植入镁锌合金棒和聚丙交酯棒.主要观察指标:植入前第1天,植入后第1天、第1,2,5,10周测镁锌合金组动脉血镁离子,镁锌合金组和聚丙交酯组白蛋白、碱性磷酸酶、钤丙转氨酶、尿酸、肌酐水平.植入后3,6,12,18周植入材料部位拍摄X射线片,摄片后取股骨髁,脱钙后苏水精伊红染色组织学观察和骨量分析.结果:镁锌合金组各血清学指标存第1周内均有不同程度提高,但第2周开始下降,变化无显著性意义.两组其他各生化指标变化芹异无显著性意义.X射线片在3周显示镁锌合金组材料旁有气体产生,6周发现有成骨.12周时骨密度明显增加,12周气体自行消失.而聚丙交酯组无气体产生,有成骨.18周时镁锌合金组成骨多于聚丙交酯组(P<0.05).结论:镁锌合金在动物体内降解时有新骨替代形成,具有良好的生物相容性.
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二硫化钼含量变化对银-二硫化钼复合材料力学性能和电磨损性能的影响
背景:银基复合材料是一种常见的电接触材料,具有良好的导电导热性能;而二硫化钼是一种重要的固体润滑材料,具有良好的减摩润滑性能.因此考虑把二硫化钼添加到银基体材料中,以制备适用于滑动电摩擦磨损过程的复合材料.目的:制备不同含量配比的银-二硫化钳复合材料,通过对其力学性能以及电摩擦磨损性能的比较,得到佳含量组成的复合材料.设计、时间及地点:观察对比实验,于2008-04/05在合肥工业大学材料科学与工程学院完成.材料:银粉由蚌埠金银饰品厂提供,二硫化钼粉由国药化学试剂有限公司提供.方法:采用粉末冶金方法,经配料、烘干、混料、初压、烧结、复压等过程,制备二硫化钼含量为12.0%,13.5%,15.0%.16.5%,18.0%的银-二硫化钼复合材料.主要观察指标:利用万能力学实验机对材料的抗弯强度进行测试,光学显微镜观察其烧结过后的组织形貌;使用自制的电磨损试验机对试样进行电摩擦磨损实验,并用扫描电子显微镜对试样磨损表面进行观察分析.结果:随着复合材料中二硫化钼含量的增加,材料的抗弯强度下降,电阻率升高,磨损率先降低后升高,在二硫化钼含量为15%时材料的磨损量低.结论:二硫化钼含量在15%时综合性能指数佳.
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弹性培养膜力学性能的相移影栅云纹法测试
背景:细胞附着在生物硅胶膜上,在机械顶压作用下,细胞会随着培养膜伸张发生形变,从而可以观察其在不同外力作用下的生长规律,但是,培养膜各部分受力情况如何?目的:用光力学实验方法得出培养膜的离面位移,进而求出生物硅胶膜的应变分布.设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-03/08在上海应用技术学院机械与自动化工程学院光测力学实验室完成.材料:将美国道康宁公司生产的医用硅橡胶Q7-4750模压成圆形薄膜,直径为100 mm,厚度为150～160 μm,弹性模量2.14 MPa,泊松比为0.48.方法:运用相移影栅云纹法.光源采用点光源:栅板采用5线/mm的玻璃栅板,夹持在平移相移机构上,相移机构每次手动5刻度,栅板移动0.1 mm,以产牛相移图,CCD摄像机被用来进行采集云纹图,并直接输入电脑,利用专用图像处理软件进行位相计算和位相解包裹,后根据相位与位移关系,将相位转换成位移,可得到三维形貌.主要观察指标:离面位移信息.培养膜的变形量(包括位移和应变).结果:利用采集的云纹图,通过相移方法,对4种球冠加载后的培养膜三维形貌利用图像处理重建,得到了培养膜各点的离面高度,对应于1%,10%,20%,25%的应变量,高点分别为2.28.8.32,12.12,13.52 mm,重建培养膜形貌矢径高与已知球缺矢径高误差3.5%,表明该实验方法精度较高;通过离面高度计算了沿径向由张力引起的应变,其结果呈抛物线型.结论:通过将影栅云纹法应用于细胞培养膜的力学性能测试,得到了培养膜的各个部分的位移分布为等高线分布形式,即培养膜中心部位移大,应变沿培养膜对称轴呈抛物线形.
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锌7-金属硫蛋白对深Ⅱ度烧伤创面脂质过氧化反应的影响
背景:研究表明锌-金属硫蛋白具有明显的清除氧自由基和保护生物大分子的功能.目的:观察锌7-金属硫蛋白对大鼠深Ⅱ度烧伤创面脂质过氧化反应的影响及在创面愈合中的作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-10/2009-01在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所第二研究室完成.材料:健康雄性Wistar大鼠78只,随机分为2组,锌7-金属硫蛋白保护组、生理盐水组各36只,各组观察时相点为伤后12,24,48 h及7,14,21 d,每时相点6只.方法:将大鼠背部置于98℃水中8 s,造成大鼠背部15%的深Ⅱ度烫伤创面.2组均于伤后即刻给药,锌广金属硫蛋白保护组与生理盐水组分别外敷单层纱布浸润的浓度为1×105mol/L的锌7-金属硫蛋白以及等渗盐水,第1天每4 h换药1次,第2,3天每8 h换药1次,此后每日换药1次,直至创面愈合.主要观察指标:伤后7 d开始采用硬纸片质量间接法测创面愈合率.伤后各时相点取创面组织标本(创面已愈合则取瘢痕组织),分别测羟脯氨酸、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性.结果:伤后7,14,18,21 d锌7-金属硫蛋白组创面愈合率高于生理盐水组(P<0.05);且锌7-金属硫蛋白组伤后48 h,7 d,14 d,超氧化物歧化酶活性降低程度和丙二醛含量升高程度与生理盐水组比较差异有显著性意义(P<0.05);锌7-金属硫蛋白组在伤后48 h,7 d羟脯氨酸含量减少程度显著低于生理盐水组(P<0.05),且在14 d时含量已接近正常水平.结论:锌7-金属硫蛋白对大鼠深Ⅱ度烧伤创面有促愈合作用,其促愈机制与使用锌7-金属硫蛋白后创面脂质过氧化反应程度减轻有关.
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家蚕后部丝腺丝素蛋白的制备
背景:采用对天然蚕丝进行去丝胶蛋白而获得丝素蛋白的方法,无法完全去除具有显著免疫原性的丝胶蛋白.为此,为了得到完全不含丝胶的丝素蛋白,必须要选择其他方法.目的:对从家蚕后部丝腺直接提取丝素蛋白的方法进行初步评价,试图为相关研究提供实验依据.设计、时间及单位:重复测量试验,2008-07/2008-08西南大学生物技术学院,西南大学生命科学学院.材料:五龄家蚕(Bombyx mori)100头,由西南大学蚕丝,上物学实验室提供.方法:解剖五龄家蚕,取出后部丝腺,在双蒸水中溶解丝素蛋白,过滤,冷冻干燥,研磨,筛分(400目)备用.主要观察指标:对丝素蛋白粉末进行形态学观察,检测其粒径分布情况.计算丝素蛋白的得率.结果:通过本方法所提取的丝素蛋白呈乳白色颗粒状,粒径大小介于100～400 μm,平均每头五龄家蚕可制备出0.33 g丝素蛋白.结论:从家蚕后部丝腺直接提取丝素蛋白的方法简单易行,丝素蛋白得率较高,所制备的丝素蛋白纯度高,是理想的生物组织工程原材料.
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胶原膜引导下同种骨颗粒修复兔桡骨节段性缺损
背景:胶原膜是一种可吸收引导成骨材料,同种异体骨是较为理想的骨替代材料,但单独应用均有其不足,拟将两种材料结合使用以期达到理想效果.目的:利用膜引导组织再生技术,观察胶原膜复合同种骨颗粒修复兔桡骨节段性骨缺损的成骨速度和质量,并与单纯胶原膜进行比较.设计、时间及地点:同体对照观察实验,于2004-09/2005-02在中国辐射防护研究院医用组织库中心实验室完成.材料:胶原膜规格20 mm×20 mm,由北京天新福医疗器材有限公司提供.同种异体骨颗粒按美国组织库标准制备,直径0.2～0.7 mm,由山西省医用组织库提供.方法:健康成年新西兰大白兔40只,制备双侧15 mm桡骨缺损模型,采用同体对照方法,实验侧(左侧)缺损区移植胶原膜及同种骨粒,对照侧(右侧)仅移植胶原膜.主要观察指标:光镜组织学观察骨缺损愈合情况,计算机图像分析仪计算骨小梁的成骨面积,扫描电镜观察缺损再生修复情况.结果:①光镜组织学变化:实验侧新骨增生明显,迅速,以膜性化骨及软骨内化骨的方式由骨缺损周围向中央成骨或以同种骨粒为中心由周围向骨粒内成骨,后骨膜形成,新髓腔不断扩大、再通,骨重建顺利,缺损修复完成.对照侧成骨方式以软骨化骨为主,新骨形成较同期实验侧慢,新骨成熟度不如实验组.②成骨面积图像分析:结果显示术后2,4,8周新生骨小梁成骨面积均大于同期对照侧(P<0.05).③扫描电镜观察:术后8周实验侧有较多分泌胶原的成骨细胞和带有较多突起的骨细胞,钙盐沉积,骨质排列开始有序.对照侧软骨与类骨质互相存在,低倍下骨基质排列无序,胶原纤维编织样排列.术后12周实验侧骨质排列有序,胶原粗大排列整齐,大量骨细胞方向有序,大量钙盐沉积,可见哈佛氏管和血管.对照侧骨质排列有序,但胶原纤维较细、基质钙化程度不如实验侧.结论:两种方法均能成骨修复缺损,但胶原膜复合同种异体骨粒组成骨速度快,且成骨质量优于单纯胶原膜组.
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纳米羟基磷灰石修复免颌骨缺损的骨密度分析
背景:纳米羟基磷灰石因其与天然骨中的盐类成分一致,与骨中羟基磷灰石的尺寸接近,因而成为骨修复材料的较好选择.设计、时间及地点:材料学动物实验观察,2003-01/2005-06于佳木斯大学实验动物中心及北京积水潭医院完成.目的:探讨纳米羟基磷灰石修复颌骨缺损的可行性.材料:采用磷酸二氢钙和氢氧化钙中和反应构造体系,通过控制反应条件,适量加入形核剂,使反应物成为胶体状态,在不同反应条件下得到针状羟基磷灰石纳米晶体,再进行烧结除处理,得到羟基磷灰石纳米粒子,直径为1～56 nm.方法:24只大耳白兔于颌下区各皮,麻醉后在下颌骨体部以GX微型钻机慢速制作一面积为1.5cm×1.5cm的骨缺损.将24只大耳白兔随机分实验组和对照组,12只/组.实验组采用纳米羟基磷灰石修复,对照组采用普通羟基磷灰石修复,并应用抗生素5 d.主要观察指标:纳米羟基磷灰石植入骨缺损后骨密度的变化.结果:骨缺损修复后,实验组骨密度随时间的延长逐渐增大,直至与正常的骨密度接近并趋于稳定;对照组骨密度随时间的延长逐渐减小.实验组与对照组比较,差异有显著意义(P<0.01).结论:纳米羟基磷灰石修复骨缺损,骨成熟较快,是修复骨缺损的良好材料.
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β-磷酸三钙复合成骨细胞的异位成骨
背景:β-磷酸三钙作为理想的骨替代材料己成为众多学者研究的重点之一,但与新生大鼠颅盖骨来源成骨细胞复合的研究较少.目的:评价多孔β-磷酸三钙支架与成骨细胞复合植入大鼠肌袋模型后的异何成骨能力.设计、时间及地点:同体对照动物实验,于2007-09/2008-10在西安交通大学医学院中心实验室和实验医学动物中心完成.材料:新生SD大鼠2只,12周龄SD大鼠20只.多孔β-磷酸三钙购自上海贝奥路公司.大小为5mm×5mm×5mm.方法:应用扫描电镜观察β-磷酸三钙结构特点.成骨细胞体外分离、培养,倒置显微镜下观察细胞生长情况.使用第3代细胞与β-磷酸三钙复合后,植入大鼠背部左侧肌袋,将β-磷酸三钙空白支架植入右侧肌袋.分别在植入1,4,8周后,将成骨细胞β-磷酸三钙复合物取出行苏木精-伊红染色观察新骨形成情况,并应用KS400 3.0软件进行新骨生成分析.主要观察指标:①β-磷酸三钙结构特征.②成骨细胞生长情况.③组织学观察新骨生成情况.④图像分析新骨生成结果.结果:β-磷酸三钙孔径大小一般为(500±150)μm,孔内连接径(150±50)μm.倒置显微镜下观察成骨细胞呈三角形、多角形或梭形.植入1周后所有标本都末发现骨生成;在4,8周时成骨细胞复合β-磷酸三钙组新骨生成量均多于β-磷酸三钙组(P<0.05,0.01).结论:多孔β-磷酸三钙复合成骨细胞支架在大鼠体内具有异位成骨能力.
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不同方法处理瓷修复体后粘接托槽的抗剪切强度
背景:目前临床多用酸蚀、打磨、打磨+酸蚀等方法处理瓷面,但均未得到满意效果:亟待出现理想处理方法,为正畸医师提高工作效率.目的:观察用不同方法处理烤瓷冠瓷面,粘接托槽后的抗剪切强度.设计、时间及地点:随机对照观察实验,于2008-03/10在解放军第四军医大学口腔医院材料实验室完成.材料:选择80颗成品前牙烤瓷冠,随机分为4组,酸蚀组、打磨组、打磨+酸蚀组、喷砂组,每组20颗.测试前浸泡在人工唾液中大约2周.方法:酸蚀组的20个瓷冠用370 g/L磷酸酸蚀60 s;打磨组的20个瓷冠分别用快速涡轮机做以轻微打磨,去掉釉质光滑面为准;打磨+酸蚀组的20个瓷冠先打磨冉用370 g/L磷酸酸蚀,处理后酸蚀面积约为托槽底面积大小.喷砂组的20个瓷冠用喷砂机喷砂,面积与网底相近.4组样本终用体积分数75%乙醇擦拭,吹干,常规光固化黏结,每个样奉固化20 s.再次浸泡于人工唾液中,时间大约2周.主要观察指标:①扫描电镜观察处理后的瓷面.②拉力机测试抗剪切强度.③用10倍放大镜观察瓷面残留黏结剂情况.结果:扫描电镜观察打磨组、打磨+酸蚀组处理后瓷面不均匀,喷砂组瓷面形成均匀.喷砂组残留指数高;打磨组、打磨+酸蚀组数值相近,但低十喷砂组.喷砂组抗剪切强度高于其他3组(P<0.05).结论:喷砂处理瓷面后粘接托槽具有较强的抗剪切强度.
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应用引导组织再生膜与人工骨、碱性成纤维细胞生长因子等生物材料治疗牙周骨缺损
背景:引导组织再生已成功地应用到牙周病的治疗,应用生物相容性膜,依靠其机械屏障作用能阻止牙龈上皮根向生长,并形成一定的间隙以利于牙周膜细胞占据根面,进而重建牙周结构.目的:验证引导组织再生是否可促进牙周骨缺损的修复及增加新骨的形成,将引导组织再生和人工骨,生长因子等生物材料联合使用是否可获得更多牙周新组织.设计、时间及单位:动物实验观察,2006-02/2006-07在大连大学医学实验中心完成.材料:取碱性成纤维细胞生长因子冻干粉(50 mg/支),ddH2O彻底溶解,制成含碱性成纤维细胞生长因子5 g/L的溶液.将胶原膜剪为10 mm×10 mm大小,取1 mL溶液滴注胶原膜上完伞复合,使每张膜含5 mg碱性成纤维细胞生长因子.方法:刮取16只大耳白兔兔牙骨质,去骨高度为自牙槽脊水平至釉牙骨质界下6 mm制成缺损,右侧用加入碱性成纤维细胞生长因子的人工骨和引导组织再生含生长因子的引导组织再生膜包绕缺损,全瓣复位、缝合,作为实验组,左侧作为对照,制备方法及大小同,骨缺损直接全瓣复位、缝合.主要观察指标:光镜下观察载体材料吸收情况,结缔组织内炎症情况,结合上皮根向移行情况.结果:对照侧均呈现牙槽骨不愈合现象,实验侧有不同程度的牙槽骨骨愈合现象.与对照比较,实验组愈合效果较好.结论:引导组织再生膜与人工骨、碱性成纤维细胞生长因子等生物材料膜技术的应用有利于骨缺损的愈合.
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聚甲基丙烯酸-2-羟乙酯水凝胶载药(类软骨)膜的制备及性能
背景:聚甲基丙烯酸-2-羟乙酯载药生物材料既有优异的生物学功能,又能释放药物,是一种潜在的组织工程支架材料和缓、控释药物载体材料.目的:观察布洛芬-聚甲基丙烯酸-2-羟乙酯水凝胶膜表面形态、吸水膨胀性能及缓控释性能.设计、时间及地点:体外观察实验,于2008-01/05在福建医科大学药学院药学综合实验室完成.材料:甲基丙烯酸-2-羟乙酯为Aldrich Chemical Company产品;布洛芬为山东新华制药股份有限公司产品;过硫酸铵为广东省化学试剂工程技术研究开发中心产品;N-N'-亚甲基双丙烯酰胺为苏州市化工研究所有限公司产品.方法:选甲基丙烯酸-2-羟乙酯为单体、过硫酸铵为引发剂、N-N'-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂、布洛芬为模型药物水相聚合,通过分步法和同步法导入药物.主要观察指标:光学显微镜和扫描电镜观察凝胶膜的表面形态;水溶液法测定凝胶膜的膨胀性能,拟体液环境中测定凝胶膜的释药特征.结果:含有N-N'-亚甲基双丙烯酰胺的水凝胶膜表面褶皱和沟痕更少,整体面光滑.随着交联剂加入量增加,吸水溶胀度减小,水凝胶膜形成体型结构的趋势增大.不论是同步法还足分步法所制的载药水凝胶膜,其释药达到平台的时间都比未加入交联剂的凝胶膜要长,但同时也发现在交联剂加入后,膜的载约量在减少,综合各因素以N-N'-亚甲基双丙烯酰胺含量7.5 g/L为较佳方案.结论:水凝胶膜表面形态理想,导入药物后的载药膜具有良好的膨胀性能和更优秀的缓、控释特征.
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磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷对谷氨酸的吸附
背景:磷灰石-硅灰石生物玻璃陶瓷足近年发展起来的优良骨修复支架材料,可为种子细胞提供良好的生长环境.但是细胞与载体的相互作用及变化机制尚未完全清楚.目的:考察溶胶-凝胶法制备的磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷对谷氨酸的吸附行为,探讨温度、溶液pH值、质量浓度对谷氨酸吸附量的影响.设计、时间及地点:观察实验,于2008-03/09在四川大学材料科学与工程学院完成.材料:用溶胶凝胶法制备的磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷.方法:将片状磷灰石-硅灰杆生物活性玻璃陶瓷浸泡于谷氨酸溶液中,改变谷氨酸溶液质量浓度、pH值、温度等吸附条件.主要观察指标:测量不同条件下的谷氨酸吸附量.结果:①磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷仞次对谷氨酸吸附时,属于Freundlich型吸附,包括物理吸附和化学吸附.②谷氨酸较适宜的吸附条件为DH 3.4或者8,温度为37℃左右.结论:磷灰石-硅灰石生物活性玻璃陶瓷对谷氨酸的吸附受溶液pH值、温度,谷氨酸质量浓度等因素的影响,且存在一定的规律.
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乙交酯-丙交酯共聚物/神经生长因子复合支架植入大鼠损伤脊髓后的髓鞘再生
背景:前期体外实验已经证明神经生长因子乙交酯-丙交酯共聚物与神经生长因子复合支架具有良好的细胞黏附亲和性;同时观察到其随时间推移可稳定释放神经生长因子.目的:将生物可降解材料乙交酯-丙交酯共聚物与神经生长因子复合支架移植入大鼠脊髓半横断损伤动物模型中,观察其对脊髓损伤髓鞘再生的影响.设计,时间及地点:随机对照动物实验,于2006-05/07在首都医科大学附属北京市神经外科研究所损伤修复实验室完成.材料:乙交酯-丙交酯共聚物与神经生长因子复合支架材料,其中0.02 g乙交酯-丙交酯共聚物中含有1 μg神经生长因子.方法:45只成年Wistar大鼠制备T8～9脊髓半横断损伤模型,随机分为单纯支架组20只和复合支架组25只,分别移植乙交酯-丙变酯共聚物支架和掺有神经生长因子的乙交酯-丙交酯共聚物支架.主要观察指标:于术后1,4,8和12周进行髓鞘碱性蛋白免疫组织化学及超微结构检测观察髓鞘再生的情况.结果:复合支架组苏木精-伊红染色观察脊髓损伤程度较单纯支架组明显减轻.复合支架组髓鞘碱性蛋白免疫组织化学阳性颗粒明显多于单纯支架组.透射电镜观察复合支架组大鼠新生髓鞘明显多于单纯支架组.结论:乙交酯-丙交酯共聚物联合神经生长因子促进髓鞘再牛的效果优于单纯乙交酯-丙交酯共聚物.
