中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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临床与基础研究中实验室生物样本对接管理的主要问题及对策
背景:转化医学实现需要临床医师与基础研究者的密切合作.疾病相关的人体生物样本是转化医学研究的重要资源,是实现转化的核心环节.目的:分析临床医师与基础研究者合作开展转化医学研究的必要性,并就临床与基础研究实验室生物样本对接管理中的主要问题及策略进行了探讨.方法:英文检索词设定为"Translational medical research,biosample,biobank";中文检索词设定为"转化医学,生物样本,生物样本库".检索中国知网、维普资讯、万方数据、PubMed数据库2010年1月至2016年12月相关的文献124篇,选取其中部分文献及作者所在单位与其他单位的科研合作经验进行分析探讨.结果与结论:临床与基础研究实验室生物样本对接管理中可能遇到的问题,包括生物样本采集的伦理问题、标准操作流程的设定、生物样本的采集、运输、保存、登记、管理以及有关生物样本的知识产权分割等,医学标准化,高质量的疾病相关的人体生物样本是实现转化医学的核心环节.建立完善的利益共享机制,对于做好临床与基础研究实验室生物样本对接管理,后续转化医学研究工作的顺利进行将起到至关重要的作用.
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基于文献计量学分析代谢组学在中医证型研究领域的应用
背景:代谢组学是以组群指标分析为基础,以高通量检测和数据处理为手段,以信息建模和系统整合为目标的系统生物学分支,其方法适用于识别代谢指标,可以为个体化诊疗、诊断提供依据,更好指导临床辨证论治.目的:分析建库至今以来代谢组学在中医证型研究领域应用的文献特征和研究现状,为该组学技术在中医证型研究领域的应用提供借鉴.方法:以中国知网、万方数据库、中国生物医学文献数据库、PubMed、Web of science、Medline数据库为资料来源,检索建库至2017年6月收录的中医证型研究领域应用代谢组学的文献,建立文献数据库,采用文献计量学及数据挖掘的方法,对其文献特征及研究特征进行统计分析.结果与结论:①纳入499篇,期刊文献371篇(74.35%),会议论文30篇(6.01%),学位论文98篇(19.64%).371篇关于代谢组学在中医证型研究领域应用的期刊文献共分布在124种期刊上,其中中文核心期刊32种,占总文献量的45.28%;SCI收录期刊10种,占总文献量的3.77%;②根据文献内容统计分类得到7类病症系统(以消化系统和循环系统为主),涉及23种疾病,39种干预措施;③中医证型研究领域应用代谢组学技术辨证分型的统一化、标准化仍有待提高,同时文献的质量也相对欠缺.应加强提高动物实验类研究的质量,探讨疾病证型本质及干预措施机制,以期控制疾病的发生发展.
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运动训练对背根神经节切除模型大鼠运动功能的影响
背景:周围神经损伤后可导致中枢神经系统通路发生广泛的变化,运动训练对于中枢神经系统损伤后运动功能恢复有一定的促进作用.目的:观察运动训练后部分感觉缺失模型大鼠的运动功能变化及相应脊髓节段囊泡谷氨酸转运蛋白表达的变化规律,探究运动训练对背根神经节切除模型大鼠运动功能的影响.方法:10周龄雄性Wistar大鼠39只随机分成实验组(15只)、对照组(15只)和假手术组(9只).实验组和对照组切除右侧L3、L4背根神经节制备局部感觉缺失的周围神经损伤模型,假手术组只咬除相应关节突,分离至观察到背根神经节.实验组于造模后7 d开始进行15 m/min的跑步机训练,对照组和假手术组自由活动.在术前3 d及术后7,14,21,28 d进行大鼠步态分析,观察模型大鼠行为学变化.于术后7,14, 28 d取大鼠L3脊髓节段制作组织切片,免疫组织化学观察脊髓内囊泡谷氨酸转运蛋白1变化及其特点.结果与结论:①步态分析:实验组、对照组造模后各时间点腓神经功能指数值均低于术前(P ＜ 0.05)和假手术组(P ＜ 0.05);实验组、对照组造模后7 d腓神经功能指数值低(P ＜ 0.05),随后逐渐提高,但仍低于术前水平(P ＜ 0.05);实验组造模后21及28 d腓神经功能指数值显著大于对照组(P ＜ 0.05);②脊髓内囊泡谷氨酸转运蛋白1表达:实验组、对照组造模后各时间点脊髓第IX板层囊泡谷氨酸转运蛋白1均明显低于假手术组(P ＜ 0.01);实验组造模后14,28 d脊髓第IX板层囊泡谷氨酸转运蛋白1高于对照组(P ＜ 0.05);实验组与对照组术后各时间点脊髓第IX板层囊泡谷氨酸转运蛋白1表达呈下降趋势(P ＜ 0.05),对照组下降更加明显;③结果表明:运动训练可以促进周围神经损伤后运动功能的恢复.
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三种方法建立大鼠腰椎间盘退变模型
背景:目前国内外学者对椎间盘退变动物模型进行了大量研究,但尚缺乏公认的佳实验动物模型,且不同模型之间缺乏系统的比较.目的:通过针刺纤维环法、终板注射法以及两者联合法建立大鼠腰椎间盘退变模型,比较3种方法的造模效果,为椎间盘退变动物模型的选择提供参考.方法:SD大鼠80只,随机等分为4组,分别为针刺组(针刺纤维环)、终板注射组(终板注射无水乙醇)、联合组(即先针刺L5/6纤维环,再用无水乙醇注射同节段上下终板)以及对照组(假手术对照).分别于术后4,8, 12周每组各随机抽取3只动物行X射线检查,测量椎间盘相对高度;取椎间盘组织,行病理学检查及免疫组织化学染色.结果与结论:①综合X射线检查、苏木精-伊红染色及免疫组织化学染色结果,除对照组外,针刺组、终板注射组及联合组椎间盘退变均逐渐加重;②术后4周,与对照组相比,终板注射组和联合组椎间盘相对高度明显降低,病理学评分明显升高,Ⅰ型胶原染色平均灰度值显著降低(P ＜ 0.05);③术后8,12周,与对照组相比,其他3组椎间盘相对高度均明显降低,病理学评分均明显升高,Ⅰ型胶原染色平均灰度值均显著降低(P ＜ 0.05);与针刺组及终板注射组比较,联合组8周椎间盘相对高度显著降低(P ＜ 0.05),12周Ⅰ型胶原染色平均灰度值显著降低(P ＜ 0.05);④结果表明,3种方法均能诱导椎间盘退变;针刺纤维环法手术操作较简单,造模结果可靠,退变严重程度易于控制,可以满足椎间盘退变的各期研究需要;终板注射法适合于椎间盘退变的病因学研究,较针刺纤维环法较早引起退变,但二者诱导退变程度在后期基本相同;联合法较单一方法可明显加快并加重椎间盘退变,有效缩短实验周期.
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黄芩苷可影响帕金森病模型大鼠纹状体星形胶质细胞缝隙连接蛋白43的表达
背景:在帕金森病发病中,缝隙连接蛋白 43(connexin43,Cx43)作为一种重要的调节蛋白,如何更大的发挥其减少多巴胺能神经元损伤的作用目前还不十分明确.研究显示黄芩苷具有抑制帕金森病的炎症反应及氧化应激等作用,可以预防帕金森病模型大鼠的多巴胺神经元的变形损伤.目的:探讨黄芩苷对帕金森病模型大鼠行为学及星形胶质细胞Cx43表达的影响.方法:80只SD雄性大鼠中随机取10只设为正常组(不造模),另外70只采用6-羟基多巴胺在右侧纹状体单侧双点毁损法制作偏侧帕金森病大鼠旋转模型.将造模成功的 40 只大鼠随机分成模型组(生理盐水)、美多芭治疗组(美多芭125 mg/kg)、黄芩苷低剂量组(50 mg/kg)和黄芩苷高剂量组(100 mg/kg),药物连续治疗28 d.行为学测试观察各组大鼠旋转行为的改变,免疫组化检测TH细胞数量变化、免疫组化及Western Blot法确定Cx43的表达量.结果与结论:①行为学测试结果:正常组干预前后均未有旋转行为,其他4组模型大鼠在注射阿扑吗啡5 min后开始出现旋转行为,药物干预前均为13 r/min左右(P ＞ 0.05),干预后美多芭治疗组和黄芩苷高剂量组旋转圈数较模型组显著减少(P ＜ 0.01);②黑质区TH阳性细胞数量:与模型组比较,黄芩苷低剂量组增加不明显(P ＞ 0.05),美多芭治疗组和黄芩苷高剂量组TH细胞数量均较模型组明显增加(P ＜ 0.01);③Cx43表达:免疫组化及Western Blot结果示,模型组Cx43表达较正常组显著升高(P ＜ 0.01);黄芩苷低剂量组与模型组比较差异无统计学意义(P ＞ 0.05),美多芭治疗组和黄芩苷高剂量组Cx43表达水平相似,但均较模型组显著降低(P ＜ 0.01);④提示:100 mg/kg黄芩苷可显著改善帕金森病大鼠的转圈行为,可明显提高TH细胞的活性,减少6-羟基多巴胺对帕金森病黑质神经元的损害.Cx43在帕金森病模型大鼠纹状体星形胶质细胞中的表达上调,黄芩苷对Cx43的表达有下调作用,100 mg/kg黄芩苷的作用与美多芭相似.
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细胞色素C与Caspase-9在激素性股骨头缺血坏死中的作用
背景:近期研究认为激素性股骨头缺血坏死可能与骨细胞凋亡存在关联,但其确切调控机制仍不清楚,细胞色素C与Caspase-9是线粒体凋亡信号通路的关键因子,二者在激素性骨坏死的作用有待于研究证实.目的:探讨细胞色素C与Caspase-9在激素性股骨头缺血坏死中的作用.方法:将新西兰大耳白兔20只随机分为2组,实验组予臀肌注射甲强龙,按7.5 mg/kg注射,每周2次,对照组于相同部位注射等量生理盐水,每组10只.干预8周后采用空气栓塞法处死兔并在相对无菌条件下切取双侧股骨头标本,行组织学、透射电镜、TUNEL法检测凋亡细胞,及免疫组织化学法进行相关因子细胞色素C及Caspase-9表达的检测.结果与结论:①细胞形态及细胞凋亡:干预 8 周后,与对照组比较,实验组股骨头骨组织疏松,骨小梁变细稀疏,髓腔内脂肪细胞增多,空骨陷窝百分比增高(P ＜ 0.05),凋亡小体形成,细胞凋亡率增高(P ＜ 0.05),细胞色素C、Caspase-9阳性表达率明显升高(P ＜ 0.01);②相关性分析:实验组细胞凋亡率与空骨陷窝率、细胞色素C及Caspase-9阳性表达率均成明显正相关(P ＜ 0.01);③结果说明:细胞色素C异常释放和Caspase-9高表达均与激素性股骨头缺血坏死骨细胞凋亡有关.
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左归丸调控DKK1靶点防治糖皮质激素性骨质疏松
背景:中医药可有效防治糖皮质激素性骨质疏松,但其防治机制尚不明确.DKK1是Wnt/β-catenin信号通路的抑制剂,糖皮质激素可诱导其上调.因此,DKK1蛋白是防治糖皮质激素性骨质疏松的重要靶点.目的:探讨左归丸防治糖皮质激素性骨质疏松中对DKK1的调控作用.方法:18只3月龄雌性SD大鼠随机均分为3组:空白组、模型组和左归丸组.模型组和左归丸组大鼠皮下注射地塞米松建立糖皮质激素性骨质疏松模型;空白组给予等体积生理盐水;左归丸组皮下注射地塞米松同时给予左归丸水提液灌胃.1 个月后取大鼠腰椎进行 micro-CT 检测骨量及骨微细结构、压缩试验检测生物力学性能,qPCR测定腰椎DKK1、Runx2和CTSK mRNA表达;血清检测碱性磷酸酶活性.结果与结论: ①与空白组比较,模型组体积骨密度、相对骨体积、骨小梁数量和骨小梁厚度显著降低(P ＜0.05),骨小梁间距和结构模型指数较空白组显著增大(P ＜ 0.05),血清碱性磷酸酶活性较空白组呈降低趋势, DKK1 mRNA表达显著上调(P ＜ 0.05),成骨相关因子Runx2 mRNA表达呈下调趋势,破骨相关因子CTSK mRNA呈上调趋势;②与模型组比较,左归丸组体积骨密度、相对骨体积和骨小梁数量显著提升(P ＜ 0.05),结构模型指数显著降低(P ＜ 0.05),骨小梁间距有减小趋势但差异无显著性意义,血清碱性磷酸酶活性较模型组呈升高趋势,DKK1 mRNA表达显著下调(P ＜ 0.05),Runx2 mRNA表达呈上调趋势,CTSK mRNA呈下调趋势;③与模型组比较,左归丸组椎体压缩强度显著提升(P ＜ 0.05);④结果说明,左归丸可能通过下调DKK1的表达防治糖皮质激素性骨质疏松.
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miR-467g下调Runx-2表达抑制成骨前体细胞的分化和矿化
背景:新的研究发现miR-467g能抑制骨质再生,但其具体的作用和作用机制尚不明确.目的:探索miR-467g 对小鼠成骨前体细胞成骨分化和矿化的影响及其机制.方法:体外分离、培养C57小鼠成骨前体细胞,通过 Western-blot、实时定量PCR、碱性磷酸酶染色、茜素红染色等实验探索小鼠成骨前体细胞诱导分化过程中,成骨分化指标 Runx-2、Osterix、Osteocalcin 表达变化情况及碱性磷酸酶活性和矿化能力,以及miR-467g和它潜在靶基因Runx-2表达水平的变化;通过脂质体转染构建miR-467g高表达的小鼠成骨前体细胞,研究miR-467g对小鼠成骨前体细胞成骨分化的影响.利用荧光素酶实验检测miR-467g对Runx-2的靶向作用.结果与结论:①分离培养的小鼠成骨前体细胞具有良好的体外增殖与分化能力;②miR-467g表达水平随小鼠成骨前体细胞诱导分化时间的增加而降低;③miR-467g 能够抑制小鼠成骨前体细胞成骨分化和矿化;④荧光素酶实验证实miR-467g直接靶向Runx-2;⑤结果提示:miR-467g 通过下调Runx-2抑制小鼠成骨前体细胞成骨分化和矿化.
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骨关节炎滑膜组织中β-catenin和基质金属蛋白酶13的临床意义
背景:Wnt/β-catenin信号通路在骨关节炎病程中的作用已被大量动物实验和人标本试验验证.Wnt/β-catenin信号通路和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinases,MMP-13)在骨关节炎的病理过程中都发挥重要作用,两者之间可能有某种潜在的联系.目的:检测β-catenin和MMP-13在骨关节炎滑膜中的表达水平,探讨它们在骨关节炎发病过程中的相关性.方法:骨关节炎组取自行人工膝关节置换术或膝关节镜诊治术骨关节炎患者的关节滑膜组织,共54例;非骨关节炎组取创伤后行截肢术健康青年患者自愿捐赠的正常膝关节滑膜组织,共12例.根据改良的Mankin关节软骨病理评分标准分为非骨关节炎组及轻度、中度、重度骨关节炎组.采用免疫组化检测β-catenin和MMP-13在骨关节炎患者滑膜组织中的表达,并进行相关性分析.结果与结论:①MMP-13免疫组化染色结果:非骨关节炎组全部为阴性;轻度骨关节炎组5例阳性、阳性率50%,中度骨关节炎组11例阳性、阳性率65%,重度骨关节炎组23例阳性、阳性率85%;②β-catenin免疫组化染色结果:非骨关节炎组1例染色阳性,阳性率为8%;轻度骨关节炎组7例阳性,阳性率70%;中度骨关节炎组14例阳性,阳性率82%;重度骨关节炎组25例阳性,阳性率93%;③β-catenin与MMP-13在骨关节炎患者滑膜中的含量呈现明显的正相关关系(r=0.806,P ＜ 0.001),其含量亦随着关节退变程度的加重而增加;④结果提示,MMP-13和β-catenin在骨关节炎组滑膜组织中均表现为高表达状态,两者在骨关节炎与非骨关节炎组表达差异有显著性意义,并且共同在骨关节炎病程中发挥作用.骨关节炎病变过程中β-catenin和MMP-13均发挥着重要的调控作用,并且MMP-13与β-catenin在参与骨关节炎软骨退变和滑膜炎症反应等病理变化过程中密切相关,这为骨关节炎的靶向基因治疗提供了新的理论方向和实验依据.
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补肾健脾活血方含药血清提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性
背景:有研究发现中药可以通过Wnt/β-catenin 信号通路影响成骨细胞,而Sost是Wnt信号通路的抑制因子和骨形成中的抑制蛋白,也是一种调控骨分化的拮抗因子,可调控成骨细胞的分化和增殖.补肾健脾活血方是广州中医药大学附属骨伤科医院临床防治骨质疏松症的经验方,对骨形成有促进作用,治疗骨质疏松症疗效显著.目的:应用补肾健脾活血方含药血清干预过表达骨硬化蛋白 Sclerostin(Sost)重组腺病毒转染的成骨细胞,观察其对细胞增殖、碱性磷酸酶活性和相关蛋白的影响.方法:将培养好的成骨细胞分为空白对照组、过表达Sost组(Ad-Sost组)2组,空白对照组给予空载腺病毒转染,Ad-Sost组予过表达Sost重组腺病毒转染,两组分别给予空白血清和含药血清干预,采用CCK-8检测细胞增殖、碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性,Western Blot检测骨调节蛋白表达情况.结果与结论:①与空白血清干预比较,两组含药血清在24,48,72 h均可以提高细胞活性(P均＜ 0.01);②与空白血清干预比较,两组含药血清均可以提高碱性磷酸酶活性(P ＜ 0.01);③与空白血清干预比较,空白对照组含药血清可以降低低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白的表达(P均＜ 0.01),对骨桥蛋白、肿瘤坏死因子α蛋白的表达无明显影响,Ad-Sost组含药血清也可以降低低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白、骨桥蛋白蛋白的表达(P均＜ 0.01),提高肿瘤坏死因子α蛋白的表达(P ＜ 0.01);④结果说明,补肾健脾活血方含药血清可以提高过表达Sost转染成骨细胞增殖和碱性磷酸酶活性,影响低密度脂蛋白受体相关蛋白5、骨保护蛋白、骨桥蛋白和肿瘤坏死因子α蛋白的表达.
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骨骼肌含量、身体活动水平与骨密度的相关性
背景:骨密度是判断人体骨质水平的主要指标.骨质疏松是个世界性难题,目前没有安全有效的根治方法,只能进行预防,需要从影响骨密度的因素着手.目的:探究中老年人骨骼肌含量、身体活动水平与骨密度之间的关系,为预防骨质疏松的发生提供理论依据.方法:随机招募了年龄范围40-84岁的111名受试者.采用问卷调查掌握受试者身体活动水平等基本情况,采用双能X射线骨密度仪测量骨密度值,用人体成分分析仪测量人体的骨骼肌含量、脂肪含量、骨骼肌百分比等身体成分指标.不同年龄段的多组比较采用方差分析,组间两两比较采用LSD法,相关性分析采用Pearson相关分析.结果与结论:①骨密度与身体活动水平、体质量和骨骼肌含量存在中低度相关关系(r=0.30,0.41,0.45),相关性检验差异具有显著性(P ＜ 0.01);②对于中老年人,骨骼肌含量、身体活动水平和体质量与骨密度呈正相关,年龄与骨密度呈负相关;③结果提示,身体活动是影响骨密度的重要因素,较高的身体活动水平有利于骨密度保持和提高.增加肌肉量改善身体成分对增加骨密度具有促进作用.
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入院时低基础代谢率与老年髋部骨折患者死亡率的关系
背景:基础代谢率是人体能量代谢的重要指标,低基础代谢率反映维持机体稳态的重要器官如肝、肾功能低下.试验发现入院时低基础代谢率在髋部骨折患者中是较常见的,而目前尚无髋部骨折死亡率与低基础代谢率的关系的研究.目的:探讨老年髋部骨折患者入院时低基础代谢率对1年死亡率的影响.方法:回顾性分析2014年1月至2016年3月共507例60岁以上髋部骨折患者资料,记录年龄、性别、是否手术、手术方式、受伤至手术时间、住院期间是否发生肺部感染、内科疾病并发症的种类及数目,计算入院时的基础代谢率,随访并统计患者的 1 年死亡率并将以上常见危险因素与入院时基础代谢率值代入多因素Logistic回归分析.结果与结论:①死亡率:患者507例随访时间为13-15个月,1年内死亡率为13.41%(68/507).低基础代谢率组死亡率高于非低基础代谢率组(P ＜ 0.05);②危险因素分析:Logistic回归分析结果显示入院时高龄、非手术治疗、合并内科疾病数量、住院期间发生肺部感染、低基础代谢率为老年髋部骨折患者 1 年死亡率的危险因素;③结果说明,入院时低基础代谢率为老年髋部骨折患者 1 年死亡率的危险因素,基础代谢率能反映出患者营养状况、神经-内分泌、细胞及能量代谢等方面的状况.对于低基础代谢率值的老年髋部骨折患者进行加强营养、体温复苏、及内分泌方面的治疗可能有助于降低创伤导致的死亡率.
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小鼠尾断端愈合形态学观察及细胞增殖活跃区分析
背景:皮肤创面中起到修复再生作用的细胞主要为皮肤源性前体细胞,当皮肤创面发生后,皮肤中的皮肤源性前体细胞进行分裂增殖,迁移修复创面,尽可能恢复损伤处原有皮肤的生理及美观功能.目的:观察小鼠尾部结构以及离断后断端愈合形态,初步探讨这些特征与小鼠尾部皮肤创伤修复的关系.方法:利用眼科显微外科剪对2日龄昆明小鼠尾部尖端进行人工统一离断,建立鼠尾断端毛囊再生动物模型,定位皮肤创面愈合过程中细胞增殖活跃区域,定期获取小鼠尾部皮肤创面愈合样品,OCT 包埋.常规病理染色观察创面愈合形态;对鼠尾细胞增殖进行免疫荧光标记,利用免疫荧光染色鉴定小鼠尾部愈合部位皮肤激活蛋白AP-1的表达.结果与结论:①鼠尾结构复杂,血运丰富,小鼠尾尖离断后可以达到较好愈合形态;②鼠尾部位皮肤细胞的增殖活跃主要在毛囊部位以及真皮乳头层进行细胞分裂,参与修复创面与再生;③荧光染色发现激活蛋白AP-1 的表达主要集中在愈合皮肤的表皮层和真皮乳头层;④结果说明愈合处的皮肤表皮层和真皮乳头层具有较强的再生能力.
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NaCl浓度改变对人类神经元钙传感蛋白结构的影响:来自分子动力学模拟证据
背景:人类神经元钙传感蛋白是一个含有高电荷的蛋白,对溶液温度极其敏感,但溶液中离子浓度的变化是否能够改变蛋白结构,进而影响其正常功能的发挥,尚未发现相关研究.目的:探讨溶液中NaCl浓度的微小改变对人类神经元钙传感蛋白结构动力学影响的分子机制.方法:采用全原子计算机动力学模拟的方法,将蛋白质数据库中ID为2LCP的人类神经元钙传感蛋白前两个能量低的结构作为初始结构,能量小化后,将蛋白置于NaCl浓度分别为0.1,0.3和1 mol/L的水溶液中,以高速摄像速度(ps,10-12s)记录蛋白在模拟体系中的运行和变化情况.结果与结论:溶液中NaCl浓度升高,①人类神经元钙传感蛋白柔性增加,整体结构和局部的疏水口袋体积增大;②蛋白C端尾部L3蜷缩,首尾氨基酸D176和V190之间的次联系路径数量明显减少,导致两者之间的联系减弱;③蛋白N段和C段氨基酸之间的联系削弱,但两段段内氨基酸联系明显增强;④蛋白正负电荷间形成的盐桥数量和百分比均降低,尤其在0.3 mol/L NaCl水溶液中的减少更为明显.⑤结果说明,人类神经元钙传感蛋白对溶液NaCl浓度的改变非常敏感,NaCl 浓度的微小变化能够引起蛋白关键结构的改变,从原子-分子的视角,为人类神经元钙传感蛋白在不同溶液环境中的结构变化提供理论参考.
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水解南珠液能促进人微血管内皮细胞的增殖和迁移
背景:珍珠有镇静安神的药效,临床可应用于高血压病,但水解珍珠液对高血压病的防治作用及相关机制研究目前报道尚少.目的:观察水解南珠液对人微血管内皮细胞生物学行为和分泌功能的影响.方法:人微血管内皮细胞培养,传代.实验分为水解南珠液高、中、低剂量组:分别加入含质量浓度为120, 60,30 mg/L水解南珠液的培养基200 μL;对照组:只加 200 μL的培养基.CCK8法检测人微血管内皮细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞的周期分布,TUNEL法了解细胞的凋亡情况,Transwell法检测细胞迁移情况,硝酸还原酶法检测细胞的NO分泌量及化学荧光法检测细胞活性氧的分泌情况.结果与结论:①与对照组相比,低、中、高剂量水解南珠液对人微血管内皮细胞均有促增殖作用,且浓度越高,对细胞的促增殖能力越强(P ＜ 0.05),因此确定120 mg/L水解南珠液为佳作用浓度;②与对照组相比,水解南珠液组细胞S期和G2期百分比增加,而G1期的细胞比例则减少(P ＜ 0.05),提示水解南珠液可以促进血管内皮细胞的周期进展;③各组均未发现有细胞核被染成绿色的凋亡细胞;④水解南珠液组的迁移细胞数比对照组显著增加(P ＜ 0.05);⑤水解南珠液组细胞NO分泌量明显高于对照组(P ＜ 0.05),活性氧量显著低于对照组(P ＜ 0.05);⑥结果表明,水解南珠液能促进体外培养的人微血管内皮细胞的增殖和迁移,并具有促进其分泌NO及抑制其活性氧分泌的功能,在保护内皮细胞功能方面可能有积极的作用.
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非血瘀证腰椎间盘突出症非手术治疗的血清蛋白质组学分析
背景:蛋白质组学是一项较成熟的实验技术,目前应用于腰椎间盘突出症非手术治疗的研究报道较少.目的:通过蛋白质组学相关技术筛选非血瘀证腰椎间盘突出症患者经非手术治疗前后的差异表达蛋白.方法:选取非血瘀证腰椎间盘突出症患者60例,予非手术综合治疗4周,应用iTRAQ联合LC-MS/MS筛选和鉴定患者治疗前后的血清差异表达蛋白,并对鉴定出的蛋白质进行相关生物信息学分析,同时观察患者临床疗效.结果与结论:①患者治疗后较治疗前的目测类比评分明显降低(P ＜ 0.05),JOA评分明显升高(P ＜ 0.05),疗效优良率达95.0%;②质谱共筛选出有意义差异蛋白300个,并鉴定到25个显著性差异蛋白(P ＜ 0.05),生物信息学分析发现其中9个差异蛋白富集至15条KEGG信号通路;③结果提示,采用西医非手术综合疗法治疗非血瘀证腰椎间盘突出症可取得较满意的疗效;补体 C1qA、cDNA(FLJ60724)蛋白、补体 C4B 移码突变、cDNA(FLJ53025)蛋白、甘露糖结合蛋白C、载脂蛋白B、血红蛋白α-1珠蛋白链变体、血红蛋白β亚基及cDNA(FLJ76254)蛋白可能为非手术综合治疗腰椎间盘突出症非血瘀证的血清标志蛋白.
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沉默DEPTOR表达促进胰岛细胞释放胰岛素
背景:mTOR 复合物是调控胰岛 β 细胞质量与功能的关键蛋白,Deptor 是复合物中的共有组分,Deptor的丢失是否会影响胰岛β细胞的胰岛素分泌功能,目前尚缺乏相关研究.目的:利用siRNA干扰技术沉默小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞DEPTOR基因的表达,探讨其对胰岛素瘤细胞分泌功能的影响及背后的机制.方法:设计合成3对针对DEPTOR 基因的siRNA序列,利用脂质体法将siRNA转染至NIT-1细胞.实验组设为6组:①空白转染组(NIT-1细胞,转染复合液仅加Lipofectamin);②阴性对照转染组(NC-FAM);③阳性对照转染组(GAPDH);④siRNA deptor 1组(脂质体介导的转染复合+siRNA deptor385);⑤siRNA deptor 2 组(脂质体介导的转染复合+siRNA deptor766);⑥siRNA deptor 3 组(脂质体介导的转染复合+siRNA deptor1275).荧光显微镜下观察转染效率;QPCR检测DEPTOR mRNA的相对表达量;ELISA胰岛素试剂盒检测NIT-1细胞胰岛素分泌情况;Western blot检测DEPTOR下游关键蛋白的表达.结果与结论:①在荧光显微镜下观察,siRNA能有效转入到NIT-1细胞内,呈绿色点状荧光;②PCR检测干扰后DEPTOR mRNA的相对表达量,发现设计合成3对siRNA序列中有两对siRNA序列(siDEPTOR385 and siDEPTOR766)对DEPTOR基因有干扰效果,干扰效果与阴性对照差异有显著性意义(P ＜ 0.05);③ELISA胰岛素测定结果显示,在NIT-1细胞中沉默DEPTOR后,有效转染组细胞的胰岛素分泌显著升高(P ＜ 0.05);④Western-blot检测结果显示,Deptor下游关键蛋白S6、4EBP-1磷酸化明显增加,AKT磷酸化略有减少;⑤结果说明,利用RNAi技术在NIT-1细胞上可以有效地沉默DEPTOR 基因的表达,并促进细胞胰岛素的分泌,该现象可能与mTORC1通路的激活相关.
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CCK-8法定量检测亚甲蓝对人髓核细胞的毒性
背景:前期细胞实验研究发现亚甲蓝确实对人髓核细胞具有毒性作用,且与药物浓度呈正相关,但是其毒性的临界范围未进行研究.目的:使用CCK-8法定量测定亚甲蓝对髓核细胞毒性作用的临界范围值.方法:选取 1 例椎间盘突出症患者的术后废弃髓核组织,提取髓核细胞,培养 1 代后制作细胞悬液,分 9组接种到96孔板,空白对照只有培养基、CCK-8溶液而没有细胞;0加药对照组只有培养基、细胞和CCK-8溶液;其余7个加药组分别加入1%,0.5%,0.1%,0.05%,0.01%,0.005%,0.001%浓度的亚甲蓝干预细胞生长繁殖.在培养24,48,72,96 h后使用CCK-8法测定吸光度,计算细胞活力并观察每一组颜色变化.结果与结论:①颜色变化:0加药对照组颜色深,加药组颜色与药物浓度负相关,且0.05%、0.01%、0.005%、0.001%组颜色较深并与0加药组颜色接近;②各组吸光度值均数及细胞活力:与0加药组相比,1%组吸光度减小(P ＜ 0.05),1%与0.5%组比较差异均无显著性意义(P ＞ 0.05),0.1%组吸光度及细胞活力显著高于0.5%组,0.05%组显著高于0.1%组;③结论:亚甲蓝对人髓核细胞具有细胞毒性,毒性临界值在0.1%-0.05%之间且靠近0.05%,确切值还有待于进一步研究.
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工程化软骨几何形状对缺损修复区力学行为的影响
背景:关节软骨损伤修复结果的不确定性与修复区的力学行为有关,缺损修复的形状、层深及载荷特性均不同程度地改变修复区的力学环境.目的:通过有限元仿真分析在生理载荷作用下关节软骨缺损修复区的力学行为.方法:应用有限元软件ABAQUS建立基于横观各向同性的关节软骨损伤与修复的轴对称模型.分析在压缩载荷作用下,软骨不同修复形状(圆柱、圆台、正棱柱、椭圆柱形)和深度对缺损软骨修复区力学行为的影响.结果与结论:①模拟结果表明,不同形状、层深的工程化软骨对软骨修复区力学行为影响规律不同;②中间层缺损修复时应力集中现象显著,深(全)层缺损修复时应力分布较合理;③圆柱形工程化软骨修复时的应力场及液相流场分布规律与无损软骨为接近;临床上,可以选用圆柱形或圆台形工程化软骨进行修复,且尽量避免中间层修复.
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雷珠单抗联合光动力疗法治疗老年退行性晚期渗出型黄斑变性:自身对照临床试验方案和预试验结果
背景:老年退行性黄斑变性视觉中心视野缺失会对患者日常生活活动造成严重影响,其可根据病理表现的不同分为萎缩型和渗出型 2 种,其中渗出型老年退行性黄斑变性进入晚期后,黄斑区结构出现老年退行性变化.临床上可采用雷珠单抗联合光动力疗法治疗渗出型老年退行性黄斑变性,但是既往研究很少关注晚期渗出型老年退行性黄斑变性患者.目的:对雷珠单抗联合光动力疗法治疗的晚期渗出型老年退行性黄斑变性患者的视力恢复情况、视网膜厚度及脉络膜新生血管病灶渗漏情况的变化进行分析,探索这种疗法在治疗晚期渗出型老年退行性黄斑变性的有效性.方法:此次前瞻性自身对照临床试验在中国青海大学附属医院眼科完成.试验纳入 113 例符合标准的晚期渗出型老年退行性黄斑变性患者,采用光动力疗法联合玻璃体腔注射雷珠单抗治疗.结果与结论:试验的主要观察指标为治疗后12个月患者视力改善率.次要观察指标为治疗后1-12个月,每个月的对数视力表评分、视网膜厚度和脉络膜新生血管病灶渗漏治疗以及随访期间的不良事件.预试验结果显示,治疗后12个月时,43只患眼视力比治疗前提高≥2行,患者视网膜厚度平均下降111.21 μm,多数患眼脉络膜新生血管病灶渗漏停止或缩小.试验旨在提供关于雷珠单抗联合光动力疗法治疗晚期渗出型老年退行性黄斑变性效果的可靠数据,从而为该方法治疗晚期渗出型老年退行性黄斑变性的合理使用提供依据.试验在中国临床试验注册中心注册(注册号:ChiCTR1800015410),注册方案版本号1.0.
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曲安奈德联合雷珠单抗玻璃体腔注射治疗老龄黄斑变性病:随机对照临床试验方案
背景:老龄性黄斑变性即老年人黄斑区出现的玻璃膜疣、视网膜色素上皮和脉络膜毛细血管的退行性改变,严重可致盲,目前多数医生给予患者抗氧化剂和扩张血管治疗,效果不明显.抗血管内皮生长因子融合蛋白雷珠单抗是一种血管生成抑制剂,目前已被用于治疗湿性(新生血管性)年龄相关性黄斑变性,但易出现眼内炎、孔源性视网膜脱离、视网膜撕裂和医源性外伤性白内障等不良反应.目的:试验设计了应用抗炎效果较强的糖皮质激素曲安奈德与雷珠单抗联合玻璃体腔注射治疗老龄性黄斑变性的随机对照试验,以观察其有效性及安全性.方法:试验计划纳入华中科技大学同济医学院附属荆州医院的老龄性黄斑变性患者 80 例,共 160 只眼,随机分为2组,对照组玻璃体腔内注射曲安奈德注射液,0.1 mL/次,1次/d;治疗组玻璃体腔注射曲安奈德注射液减量至0.025 mL/次基础上加用雷珠单抗眼用注射液,0.05 mL/次,1次/月,每组40例患者,80只眼.两组均连续治疗3个月,再进行6个月的随访.试验的主要观察指标为治疗前,治疗后6个月黄斑中心凹视网膜厚度;次要观察指标为治疗前,治疗后6个月佳矫正视力、眼压值、生活质量评分变化及治疗后6个月不良反应发生率.试验经华中科技大学同济医学院附属荆州医院伦理委员会批准(审批单位:华中科技大学同济医学院附属荆州医院,伦理批准号:20170338).研究符合世界医学会制定的《赫尔辛基宣言》的要求.参与者对试验方案和过程均知情同意,并签署知情同意书.试验于 2018 年 1 月开始进行患者招募,样本及数据收集时间为2018年1月至2018年6月,结果指标分析时间为2018年9月,试验于 2018 年 9 月结束.文章结果将以科学会议报告,或在同行评议的期刊上发表传播.试验已在中国临床试验注册中心注册(注册号:ChiCTR-IOR-17013865).讨论:试验期望采用曲安奈德与雷珠单抗联合玻璃体腔注射在治疗老龄性黄斑变性方面显示出显著疗效及可靠的安全性.
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踏车训练影响老年与年轻人体适能及脑部动作皮质的活化
背景:老化过程会伴随体适能及脑部认知功能下降,而适当运动可以增强身体机能.脚踏车运动具有非完全负重、踩踏阻力可调的优点,因而被广泛应用于临床康复训练中,但踏车训练能否提升个体脑部认知功能值得深入研究.目的:观察踏车运动对老年人的影响是否与对年轻人的影响一致.方法:招募43名健康的高校教师,依据受试者年龄分为老年组(n=18,年龄60-75岁)与年轻组(n=25,年龄:25-45岁),分别进行连续4周固定式踏车运动训练,并于运动前、训练4周及训练结束后1个月追踪测试其6 min行走、10 m行走、下肢肌力及经颅磁刺激检测.结果与结论:①训练前,老年组虽然在身体活动量上优于年轻组,但在功能性行走、腿肌力及脑部皮质活化度方面均弱于年轻组;②4 周踏车训练后,老年人与年轻人功能性行走、腿肌力皆有大幅度提升,其中在6 min行走及腿部肌肉力量两方面,但2组提升率差异无显著性意义,而年轻人在10 m行走测试上提升率显著高于老年人;③训练后1个月时结果显示,4周踏车对年轻人6 min行走及腿部肌肉力量所获得效益有一定延续效应,而对老年组则在10 m行走上所获得效益有一定延续效应;④不论是左脑或右脑,老年人在动作阈值、动作诱发电位及大脑皮质动作区域范围均比年轻人差,而踏车 4 周训练对老年人及年轻人脑部动作皮质活化与训练前差异无显著性意义;⑤连续 4 周踏车运动训练能有效改善老年人和年轻人的功能性行走能力及下肢肌力,且老年人接受踏车运动训练可以达到与年轻人差不多的提升效果及延续效应,而踏车运动是否可以改善老年人及年轻人的脑部皮质活化还需要进一步探讨.
