中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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医用钛合金掺锶改性的研究与进展
背景：以钛合金为基底进行表面改性进一步提高其表面生物活性是目前研究的热点，而掺锶改性是提高植入物骨整合性的有效手段。目的：介绍以医用钛合金为基底掺锶改性的研究进展。方法：以“钛合金，锶，骨组织，成骨”为中文检索词，以“titanium(ti)，strontium(sr)，bone，osteogenic”为英文检索词，在中国知网和PubMed数据库检索2000年1月至2016年4月期间有关医用钛合金掺锶改性方面的文献。结果与结论：①医用钛合金具有较好的生物相容性，且与人体骨弹性模量接近，因而广泛应用于临床骨修复的植入物；②单纯钛合金表面生物活性较差，难以和骨组织结合达到骨整合；③对钛合金进行表面功能改性是行之有效的方案，而掺锶改性可显著促进新骨生成，达到骨与钛合金的整合；④目前掺锶改性的钛合金植入物及支架材料大多还处于体外实验和动物实验阶段，快速、稳定、易获得且安全有效的改性方法仍需进一步研究。
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高黏度与普通黏度骨水泥椎体成形系统修复骨质疏松性椎体压缩性骨折的荟萃分析
背景：椎体成形系统修复骨质疏松性椎体压缩性骨折的疗效已得到肯定，但骨水泥渗漏导致的相关并发症仍时有发生。根据渗漏因素分析所产生的高黏度骨水泥安全性和有效性高，但缺乏大样本、高强度的证据研究。目的：系统评价高黏度与普通黏度骨水泥椎体成形系统修复椎体压缩性骨折的安全性和有效性。方法：计算机检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网、维普及万方数据库等，检索时间均为各数据库自建库以来至2016年1月，收集关于高黏度骨水泥与普通黏度对比修复椎体压缩性骨折的随机或临床对照研究。由2名研究员根据Cochrane系统评价的方法独立对纳入研究的文献质量进行评价并提取数据，采用RevMan 5.2软件进行数据分析。结果与结论：①纳入4个随机对照试验，6个临床对照试验；②Meta 分析结果显示，与普通骨水泥相比，高黏度骨水泥在注射剂量[MD=0.17，95%CI(-0.04，0.38)]、目测类比评分[随机对照试验：MD=-0.30，95%CI(-0.72，0.11)；临床对照试验：MD=-0.05，95%CI(-0.43，0.32)]以及术后椎体再骨折[OR=1.77，95%CI(0.24，12.86)]方面，差异均无显著性意义；但高黏度骨水泥组术后Oswestry功能障碍指数降低更明显[MD=-2.99，95%CI(-5.85，-0.13)]，Cobb角恢复更佳[MD=-3.19，95%CI(-5.27，-1.10)]，骨水泥渗漏率更低[OR=0.35，95%CI(0.24，0.51)]，差异有显著性意义；③与普通黏度骨水泥相比，高黏度骨水泥椎体成形在恢复脊柱功能、生理结构以及减少渗漏方面更具优势。鉴于研究样本量小、异质性高，结论仍需大样本、高质量的随机对照试验予以论证。
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中空羟基磷灰石复合重组人骨形态发生蛋白2微球体修复骨缺损
背景：羟基磷灰石可以作为一种良好的支架材料，重组人骨形态发生蛋白2是目前活性较强的成骨因子，设计一种复合的新型材料有助于解决骨缺损修复问题。目的：探索中空羟基磷灰石微球复合重组人骨形态发生蛋白2对兔骨缺损成骨行为和生物力学的影响。方法：将48只雄性健康成年新西兰白兔随机分3组(n=16)，制备桡骨缺损后，复合人工骨组将已经制备好的中空羟基磷灰石/重组人骨形态发生蛋白2复合人工骨植入缺损处，单纯人工骨组植入单纯中空羟基磷灰石人工骨，对照组不植入任何材料。于术后第4，8，12，16周第1天检测血清碱性磷酸酶水平，通过X射线摄片、CT三维重建、放射性核素骨显像及生物力学等评估愈合效果。结果与结论：①复合人工骨组术后各时间段的血清碱性磷酸酶活性、X射线评分、成骨效果、放射性核素聚集强度、CT三维重建及生物力学强度均优于单纯中空羟基磷灰石人工骨，而对照组显示骨缺损愈合不良；②结果表明，中空羟基磷灰石/重组人骨形态发生蛋白2复合人工骨具有更强的成骨能力和力学强度，加速了骨缺损愈合进程。
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骨生物材料复合骨髓间充质干细胞异位成骨修复肋骨大段缺损
背景：组织工程生物材料具有与自体组织相似的结构与功能。目的：观察骨生物材料复合大鼠骨髓间充质干细胞异位成骨治疗肋骨大段缺损的效果。方法：取Wistar大鼠50只，制备右侧大段肋骨缺损模型，随机分为2组，对照组于骨缺损处置入氯化钙-藻酸钠凝胶，实验组于骨缺损处植入氯化钙-藻酸钠-骨髓间充质干细胞复合物。植入后2，4，8周，进行胸部X射线及骨缺损处组织形态学观察。结果与结论：①X射线观察结果：植入后2周，实验组骨缺损区无明显变化；植入后4周，缺损部位开始出现骨质痕迹；植入后8周，缺损部位大部分充满骨质，缺损两端逐渐相接。对照组缺损部位始终未见明显骨质修复，缺损两端逐渐封闭并硬化；②骨缺损处组织形态学观察结果：植入后2周，实验组材料腔隙中可见少量骨纤维组织，大量炎性细胞聚集，材料与骨质末端无连接；对照组骨缺部位可见大量炎性细胞，未见骨组织形成。植入后4周，实验组支架逐渐降解，可见大量新生骨质；对照组支架仅少量降解，缺损两端出现骨组织聚集。植入后8周，实验组支架大部分降解，可见大量骨组织、骨小梁等组织结构，缺损两端与再生骨质连接；对照组支架大部分降解，缺损两端出现骨硬化；③结果表明：骨生物材料复合大鼠骨髓间充质干细胞可促进肋骨大段缺损的修复。
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桩道超声清洗对两种根管封闭剂根尖微渗漏的影响
背景：桩道超声清洗可提高自粘接树脂水门粘接纤维桩的粘接强度，但其对桩道根管根尖封闭的影响尚不明了。目的：探讨桩道超声清洗在两种剩余根管充填物长度时，对两种根管封闭剂根尖微渗漏的影响。方法：将80颗离体人上颌单根管前牙随机分为A、B两组，每组40颗，根管充填时分别使用Cortisomol和AH-Plus根管封闭剂，依据桩道预备后剩余根管充填物长度和是否进行桩道超声清洗，两组各随机分为4个亚组(n=10)：A1、B1组，剩余5 mm、不行超声清洗；A2、B2组，剩余5 mm、超声清洗；A3、B3组，剩余3 mm、不行超声清洗；A4、B4组，剩余3 mm、超声清洗。按照分组对标本进行处理后，使用染料渗透法和透明标本技术在体视显微镜下测量根尖微渗漏。结果与结论：A1-A4组根尖微渗漏分别为(0.73±0.21)，(1.37±0.55)，(1.18±0.36)，(2.05±0.62) mm，B1-B4组分别为(0.34±0.18)，(0.47±0.14)，(0.59±0.23)，(1.39±0.50) mm。三因素方差分析显示，超声清洗、根管封闭剂、剩余根管充填物长度均可影响根尖微渗漏(P<0.05)；A1和A2组、A3和A4组、B3和B4组、A2和A4组、B2和B4组间根尖微渗漏比较差异有显著性意义(P<0.05)。结果表明，使用Cortisomol根管封闭剂在剩余根管充填物长度为5，3 mm时，使用AH-Plus根管封闭剂在剩余根管充填物长度为3 mm时，超声清洗可使根尖微渗漏增大；对于同一种根管封闭剂，剩余根管充填物长度较长时，超声清洗后的根尖微渗漏较小。
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釉基质蛋白对双重酸蚀后纯钛表面磷灰石生成的影响
背景：为提高钛种植体植入后的生物活性，常采用各种表面改性技术。目的：研究釉基质蛋白对双重热酸蚀纯钛表面仿生矿化沉积磷灰石层的影响。方法：提取猪未萌恒牙胚表面的釉基质蛋白并进行验证，纯钛片经抛光清洗后进行双重热酸蚀处理，然后放入含不同浓度釉基质蛋白的饱和矿化液中矿化7 d，对照组为不含釉基质蛋白的钙磷过饱和液。扫描电镜观察试件表面形貌，X射线能谱及X射线衍射分析涂层的元素成分及晶相结构。结果与结论：经双重酸蚀处理后的钛片表面形成规则凹坑状的粗糙表面，经过7d的矿化实验后，不添加釉基质蛋白的对照组试件上未见明显矿化涂层的形成。加入釉基质蛋白的实验组试件表面可形成矿化涂层，且随釉基质蛋白浓度的增加，矿化涂层的量及形态发生改变。能谱分析结果显示：矿化涂层中的主要元素为钙、磷、碳和氧，钙磷摩尔比在1.32-1.41之间。X射线衍射结果显示纯钛试件表面的沉积物为碳羟基磷灰石。提示釉基质蛋白可以促进双重酸蚀处理后的纯钛表面更快地生成磷灰石涂层。釉基质蛋白对纯钛表面磷灰石涂层的影响呈浓度相关性。
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生长因子复合支架材料在即刻种植周围骨缺损中的作用
背景：研究发现神经生长因子在骨的愈合过程中发挥重要作用，但关于生长因子复合支架材料在犬即刻种植周围骨缺损中作用的研究不多。目的：分析神经生长因子复合支架材料在犬即刻种植周围骨缺损中的作用。方法：制备神经生长因子复合锶磷灰石支架材料，建立犬下颌骨缺损动物模型，将犬下颌骨缺损种植体分为实验组、阳性对照组和空白对照组，实验组植入神经生长因子复合锶磷灰石；阳性对照组植入锶磷灰石；空白对照组不植入任何材料。观察3组犬下颌骨种植体周围骨缺损的CT三维图像重建情况和苏木精-伊红染色情况。结果与结论：①空白对照组犬骨缺损中央没有新骨生成，周围有少量新生骨生成；阳性对照组和实验组犬骨缺损处骨小梁从中间向四周扩散形成骨修复；②实验组犬下颌骨种植体周围骨小梁的骨密度、数量、厚度、种植体-骨结合率均高于阳性对照组和空白对照组(P<0.05)，阳性对照组4项指标高于空白对照组(P<0.05)；实验组犬下颌骨种植体周围骨小梁分离度低于阳性对照组和空白对照组(P<0.05)，阳性对照组低于空白对照组(P<0.05)；③苏木精-伊红染色显示，实验组犬下颌骨种植体支架网孔中有大量新骨生成，骨小梁排列整齐，周围骨质和新生组织连接紧密；阳性对照组犬下颌骨可见新生类骨质和骨小梁，以及少量死骨碎片；空白对照组骨缺损处有部分新骨生成，骨小梁排列不整齐，周围骨质和新生组织连接不紧密；④结果表明，神经生长因子复合支架材料能够促进犬即刻种植周围骨缺损的骨生成，是一种比较好的骨修复材料。
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不同消毒剂消毒口腔印模效果检测及其对印模尺寸稳定性的影响
背景：在临床工作中，制取口腔印模时必然与患者的唾液、黏膜甚至血液直接接触，印模表面经常附有多种病原微生物，因此，对印模进行消毒灭菌处理不容忽视。目的：检测戊二醛、二氧化氯、氧化电位水对印模的消毒效果，研究消毒对印模材尺寸稳定性的影响，为建立标准、合理的消毒方法提供依据。方法：应用戊二醛、二氧化氯、氧化电位水分别对体外人工染菌的藻酸盐印模进行不同时间(5，10，15 min)的浸泡消毒，通过细菌培养、菌落计数检测消毒效果，比较各消毒剂浸泡不同时间的消毒效果，消毒液浸泡后翻制超硬石膏模型，通过高精度结构光扫描，重建三维数字化模型，进行全局偏差测量分析和指标测量，比较不同消毒方法对模型表面精度及尺寸稳定性的影响。结果与结论：2%碱性戊二醛浸泡5 min对实验菌达到100%杀菌率，浸泡10 min对乙肝病毒有效杀灭；600 ppm二氧化氯浸泡15 min对实验菌达到99%以上杀灭，同时对乙肝病毒有效杀灭；氧化电位水浸泡15 min杀菌率不足99%，对乙肝病毒不能有效杀灭。3种消毒剂浸泡印模不同时间后灌注石膏模型，重建后的三维数字化模型，各组间尺寸变化无统计学差异。提示2%碱性戊二醛浸泡10 min和600 ppm二氧化氯浸泡15 min可以对藻酸盐印模特定染菌达到有效消毒，且消毒对印模尺寸稳定性没有明显影响。
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卡拉胶/聚乙烯醇复合材料的制备及生物相容性评价
背景：聚乙烯醇水凝胶具有与天然关节软骨类似多孔结构和力学性能，适合于关节软骨修复的研究。但纯聚乙烯醇水凝胶不仅缺乏细胞黏附性，而且成型过程中容易出现形貌皱缩的现象，严重限制了其在组织工程领域中的应用。将活性聚合物添加到聚乙烯醇水凝胶体系中能够提高材料的细胞黏附能力。目的：制备含不同卡拉胶配比的聚乙烯醇/ι-卡拉胶复合材料，以血管内皮细胞评价其生物相容性。方法：制备含不同卡拉胶的聚乙烯醇/ι-卡拉胶二维复合膜材料，将血管内皮细胞与复合膜材料共培养，通过细胞黏附及增殖实验，扫描电镜观察细胞在材料上的生长及增殖状况，评价其生物相容性；在此基础上进一步制备不同卡拉胶配比的三维支架材料，根据医疗器械生物学评价标准进行溶血实验，扫描电镜观察复合支架材料的孔隙率、孔径。结果与结论：①体外细胞实验结果表明卡拉胶的加入可以显著提高聚乙烯醇水凝胶的生物活性，促进细胞在材料上的黏附和增殖；②不同卡拉胶配比的各实验组溶血率均小于公认的5%，说明材料符合医用材料的溶血实验要求；③卡拉胶质量分数为20%-30%的材料有适合细胞生长、增殖的孔径和有助于养料和代谢产物的输送孔隙率，可为进一步制备组织工程支架材料提供理论支持。
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中空纤维透析膜制备、传递特性及生物相容性
背景：聚砜膜具备良好的抗生物抗降解性能，但临床上对于以聚砜作为材料制备中空纤维透析膜的制备方法及血液相容性缺乏统一的标准。目的：观察中空纤维透析膜的制备方法、传递特性及材料生物相容性。方法：以聚砜作为膜材料，将一缩二乙二醇作为致孔剂，聚乙烯吡咯烷酮作为改性剂，N，N-二甲基乙酰胺作为溶剂，利用非溶剂致相分离法制备中空纤维透析膜。采用扫描电镜、超景深三维显微镜成像及孔隙率测试等测定透析膜的性能；利用超滤装置完成传递参数截留率和水通量参数测定；通过溶血实验、动态凝血时间实验及血小板黏附实验测定中空纤维透析膜的血液相容性，以Ⅱ型医用聚氨酯材料作为阴性对照。结果和结论：①中空纤维透析膜形态：制备的中空纤维透析膜断面不对称，质量分数17%透析膜中间层呈大孔状结构，而质量分数19%，21%及23%的透析膜制备的中空纤维透析膜呈海绵状结构；②中空纤维透析膜孔隙率：中空纤维透析膜和Ⅱ型医用聚氨酯材料在膜面积相同的情况下，中空纤维透析膜密度显著低于，孔隙率显著大于阴性对照材料(P<0.05)；③中空纤维透析膜传递性能：中空纤维透析膜水体积及水通量，显著高于阴性对照材料(P<0.05)；④中空纤维透析膜血液相容性：两种材料共进行3次溶血实验结果显示：中空纤维透析膜平均吸光度值和溶血率显著高于阴性对照材料(P<0.05)；动态凝血时间实验及血小板黏附实验结果显示，中空纤维透析膜20，40，70 min动态凝血时间显著短于阴性对照材料(P<0.05)。结果提示：将聚砜作为膜材料，利用非溶剂致相分离法能程控制备生物相容性较好的中空纤维透析膜，材料具有良好的血液相容性及传递效率。
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复合叶酸-碳纳米管-紫杉醇的司盘-聚乙二醇超声对比剂微泡的制备
背景：传统超声对比剂功能单一，灵敏度、清晰度和准确度受客观影响因素较大，无法同时实现诊断与治疗的作用。碳纳米管呈特殊的网状中空管腔结构，具有增强显影的潜力，通过非共价吸附、共价键合及内部包埋等方法得到功能化碳纳米管，生物相容性好，药物负载率高。基于此，将载药的碳纳米管加入到超声对比剂微泡结构中，制备一种新型的复合碳纳米管运载体系的多功能超声对比剂微泡。目的：制备复合叶酸-碳纳米管-紫杉醇(folate-carbon nano-tube-paclitaxel，FA-CNTs-PTX)的司盘-聚乙二醇(Span-PEG)超声对比剂微泡，研究微泡的形貌、粒径、以及微泡中碳纳米管和紫杉醇的负载率。方法：先采用声振空化法制备Span-PEG微泡，并通过正交实验优化制备工艺，再通过静电自组装、π-π吸附等原理合成FA-CNTs-PTX中间体。然后，将FA-CNTs-PTX中间体复合在Span-PEG微泡中，得到复合FA-CNTs-PTX的Span-PEG超声对比剂微泡。采用扫描电镜和透射电镜观察微泡的形貌，采用激光粒度分析仪测定微泡的粒径分布及平均粒径，采用紫外分光光度法测定微泡中碳纳米管和紫杉醇的负载率。结果与结论：制备的复合FA-CNTs-PTX的Span-PEG微泡表面光滑、平均粒径为442 nm，微泡中碳纳米管和紫杉醇的负载率分别为1.69%和47.9%。成功将FA-CNTs-PTX靶向载药复合物包覆于Span-PEG微泡中，微泡为空心球体，粒径分布均匀且为纳米级别，该复合微泡有望成为一种集造影和靶向治疗为一体的超声对比剂。
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猪脱细胞真皮与人表皮干细胞构建组织工程皮肤修复全层皮肤缺损
背景：目前已有应用蚕丝蛋白、结缔细胞、生物高分子材料、合成高分子材料、纳米材料、传感器制成的生物人造皮，以及非生物人造皮，应用于临床试验都取得了良好效果，但它们与真正皮肤相比还有很大差距。目的：观察表皮干细胞/猪脱细胞真皮组织工程皮肤修复大鼠全层皮肤缺损的效果。方法：取20只SD大鼠，建立背部皮肤缺损模型，随机分为2组，实验组于皮肤缺损处植入人表皮干细胞-猪脱细胞真皮组织工程皮肤，对照组植入猪脱细胞真皮。植入后4周，进行大体、组织学和免疫组织化学观察。结果与结论：①大体观察：实验组创面愈合良好，皮肤弹性佳；对照组移植区域呈现瘢痕愈合，触之质地偏硬；②组织学观察：两组在镜下均可见良好的表皮和真皮结构，表皮可明显区分为基底层、棘层和角化不全的角质层，与实验组相比，对照组可见较多纤维结缔组织；③免疫组织化学观察：实验组愈合创面抗人类白细胞抗原-Ⅰ型抗原呈现阳性，对照组愈合创面抗人类白细胞抗原-Ⅰ型抗原呈阴性；④结果表明：人表皮干细胞/猪脱细胞真皮组织工程皮肤修复动物全层皮肤缺损，可有效抑制瘢痕形成及挛缩。
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定向结构软骨支架材料修复运动性关节软骨损伤
背景：软骨支架材料虽然在运动关节软骨损伤中发挥了重要的作用，但是在实际开展过程中仍受到较多的限制，导致组织工程化软骨修复达不到预期目标。目的：探讨定向结构软骨支架材料制备方法及在大白兔运动关节软骨损伤中的修复效果。方法：利用温度梯度热诱导相分离技术制备定向结构软骨支架材料，采用京尼平完成对软骨支架材料的交联，并测定支架材料的物理、力学性能。48只大白兔建立运动关节软骨损伤模型，随机将大白兔分为非定向支架组和定向支架组(n=24)，分别于运动关节软骨损伤处植入非定向支架和定向支架，6，12，24周后取材，比较2种支架在大白兔运动关节损伤中的修复效果。结果与结论：①扫描电镜观察：定向支架组纵切面上可见排列相对整齐的微管样结构，且方向一致；而非定向支架组纵切面与横切面表现为多孔蜂窝状结构；②弹性模量：定向支架组支架材料弹性模量显著高于非定向支架组(P<0.05)；③O'Driscoll量表评分：定向支架组大白兔术后6，12，24周显微CT下O'Driscoll量表评分显著高于非定向支架组(P<0.05)；④CT扫描：术后24周定向支架组大白兔CT下三维重建可见缺损部位平坦、光滑，冠状面二维扫面可见新生类软骨厚度与周围正常骨十分接近；非定向组大白兔3D下显示软骨表面比较平整，冠状面2D显示修复软骨与正常软骨基本相同；⑤苏木精-伊红染色：定向支架组术后24周缺损部位消失，软骨细胞呈垂直方向排列；非定向支架组术后24周缺损部位存在典型软骨陷窝，与周围软骨组织存在差异；⑥结果提示，采用温度梯度热诱导相分离技术制备的定向微管结构软骨支架具有良好的物理、力学性能，将其植入大白兔运动关节损伤软骨中能促进损伤部位修复，获得理想的机械力学性能。
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壳聚糖/羟基磷灰石骨复合支架修复关节软骨损伤
背景：壳聚糖/羟基磷灰石复合支架在结构上与天然骨十分类似，具有良好的生物学性能，能够发挥不同材料的性能。目的：观察壳聚糖/羟基磷灰石复合支架修复关节软骨损伤的效果。方法：取30只新西兰大白兔，制作左侧膝关节软骨缺损模型，随机分2组，实验组与软骨缺损处置入壳聚糖/羟基磷灰石复合支架，对照组置入透明质酸钠凝胶。置入后4，8，12周，取软骨损伤组织进行组织学观察。结果与结论：①组织学Wakitani与Mankin评分：实验组置入后4，8，12周Wakitani评分显著高于对照组(P<0.05)，置入4，12周的Mankin评分显著低于对照组(P<0.05)；②番红-O染色：置入后4周，对照组软骨细胞表面存在明显的褶皱状小突起，细胞相对不规则；实验组软骨细胞表面存在轻微的褶皱状小突起，细胞核略大，排列相对有序。置入后8周，对照组软骨细胞表面存在褶皱状小突起，细胞排列欠规则；实验组软骨细胞表面存在褶皱状小突起，细胞核较大，排列规则；置入后12周，对照组软骨细胞表面存在褶皱状小突起，细胞核变大，排列基本有序；实验组软骨细胞表面无褶皱状小突起；细胞核变大，排列规则；③结果表明：壳聚糖/羟基磷灰石复合支架可促进关节软骨损伤的修复。
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致密层骨软骨复合支架的制备及其修复关节骨软骨缺损
背景：理想的骨软骨组织工程支架应巧妙地模拟人体正常关节骨软骨结构。目的：基于关节骨软骨的解剖结构、生理功能，制备致密层骨软骨复合支架，同时观察其修复兔关节骨软骨缺损的效果。方法：利用快速成型技术在三维立体包芯结构骨架表面喷涂乳酸-羟基乙酸共聚物/β-磷酸三钙有机溶液，形成0.5 mm的致密层；利用“溶解-粘连”工艺能将定向微管结构软骨支架与致密层相互连接，形成致密层骨软骨复合支架。取60只家兔，制备左膝关节软骨全层缺损，随机分3组，实验组植入致密层骨软骨复合支架，对照组植入定向微管结构软骨支架，空白对照组不植入任何材料，修复后12，24周进行缺损部位大体与组织学观察。结果与结论：①大体观察结果：对照组修复后12周存在明显缺损部位，未见明显修复痕迹；24周缺损面积减少，可见新生组织覆盖，但表面粗糙。实验组修复12周后缺损部位表面平整，质地较软，与周围组织边界不清；修复后24周，被透明软骨样组织覆盖，表面平整。空白对照组修复效果较差；②组织学观察结果：修复后12周，对照组缺损部位出现形态不规则的骨痂，但未形成骨小梁；实验组出现新生骨，软骨厚度与正常软骨接近，并且软骨下存在不规则骨小梁。修复后24周，对照组出现新生软骨，但厚度不均，高低不平，骨小梁结构不规则；实验组组织与正常组织无明显差异，软骨表面光滑；空白对照组修复效果较差；③结果表明：致密层骨软骨复合支架接近人体正常关节骨软骨结构，可促进关节软骨缺损的修复。
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多孔磷酸钙颗粒对维生素C的负载及其可控释放
背景：近来有报道指出，维生素C可诱导、加速骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化，促进骨的修复和再生，但维生素C水溶液不稳定，因此在其使用时需要载体材料的保护。目的：将磷酸钙作为维生素C的载体，观察其对维生素C的包载及控释能力。方法：采用化学沉淀法制备负载维生素C的磷酸钙颗粒，使维生素C终浓度分别为0，0.1，2，4 mmol/L，检测颗粒载药量。将负载维生素C的磷酸钙颗粒置于模拟体液中，检测维生素C释放量；同时检测超声环境下的维生素C释放量。将磷酸钙颗粒、负载2 mmol/L维生素C的磷酸钙颗粒与MC3T3-E1细胞共培养，1，3，5，7 d后检测细胞增殖，1，5，10，15 d后检测细胞碱性磷酸酶活性。结果与结论：①负载0.1，2，4 mmol/L维生素C磷酸钙颗粒的载药量分别为(59.9±5.4)%、(87.2±1.2)%及(28.4±26.3)%；②在正常环境下，负载0.1，2 mmol/L维生素C的磷酸钙颗粒前期释放速率较慢，负载4 mmol/L维生素C的磷酸钙颗粒前期释放速率较快，3种样品都有持续释药的特点；③在超声环境下，负载2 mmol/L维生素C的磷酸钙颗粒存在一定的突释现象，第1次释放量为5%-15%，而随后的释放速度较缓慢；在75，105和150 W超声辅助条件下，分别持续释放了220，340，260 min；④负载2 mmol/L维生素C的磷酸钙颗粒对MC3T3-E1细胞的增殖无影响，但提高了细胞的碱性磷酸酶活性；⑤结果表明，磷酸钙可作为维生素C的载体。
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载细胞甲壳素曲率混合膜修复角膜上皮损伤
背景：研究发现甲壳素是一种比较好的生物材料，但关于甲壳素载角膜上皮细胞混合膜修复兔角膜上皮损伤的研究不多。目的：观察载角膜上皮细胞甲壳素曲率混合膜对兔角膜上皮损伤的修复作用。方法：取18只新西兰大白兔，建立左眼角膜上皮损伤模型，随机分2组，实验组于角膜上皮损伤处植入载角膜上皮细胞甲壳素曲率混合膜，对照组植入甲壳素曲率混合膜。植入后1，3，7 d，观察角膜上皮损伤面积、眼角膜病理组织学及超微结构。结果与结论：①角膜上皮损伤面积：实验组植入后1，3 d的角膜损伤面积明显小于对照组(P<0.05)，两组植入后7 d 的角膜损伤均全完愈合；②眼角膜病理组织学观察结果：植入后7 d，实验组角膜上皮层和基质层连接紧密，有6层左右上皮细胞层，修复完整，结构整齐，外层平整光滑；对照组角膜上皮层也和基质层连接紧密，有6层左右上皮细胞层，修复完整，但上皮层层次紊乱，外层表面不平整；③眼角膜超微结构：植入后7 d，实验组角膜上皮细胞细胞为六边形，排列较紧密，细胞表面平整；对照组角膜上皮细胞也为六边形，表面不平整，细胞之间有间隙；④结果表明：载角膜上皮细胞甲壳素曲率混合膜可促进大白兔角膜上皮损伤的修复。
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液质谱联用法同时检测体外生殖培养液中的3种能量成分
背景：目前，对于体外生殖培养液的质量控制文件或技术标准中，对成分含量的指标及检测方法未做明确规定，为保证该类产品的安全有效性，应及早建立质量标准。目的：建立采用液相质谱联用法检测体外生殖培养液中葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠3种指标成分的方法，分析不同用途培养液中3种成分的含量。方法：采用超高效液相色谱三重四级杆质谱联用法，使用SUPELCO Discovery HS F5-3色谱柱(15 cm×2.1 mm，3μm)，流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱，流速0.35 mL?min-1，柱温40℃；质谱采用电喷雾离子源，负离子模式扫面，扫描方式为多反应监测。结果与讨论：葡萄糖、丙酮酸钠、乳酸钠分别在0.1-10 mg/L(r=0.9998)、0.05-5 mg/L(r=0.9994)、0.1-10 mg/L(r=0.9994)范围线性关系练好；平均加样回收率在96.4%-98.1%之间，相对标准偏差均小于2.8%。说明采用液相质谱联用法检测体外生殖培养液灵敏、快速、准确、专属性强，可为体外生殖培养液的质量标准研究提供依据。
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肌腱细胞与聚二甲基硅氧烷多孔材料复合培养后的玻璃化低温保存
背景：大量实验已证明，玻璃化低温保存能获得更高的细胞存活率。目的：观察玻璃化低温保存对肌腱细胞与聚二甲基硅氧烷材料复合物的影响。方法：取共培养9-14 d的肌腱细胞-聚二甲基硅氧烷复合物，分别以10%二甲亚砜、玻璃化低温保存液VS55、21%二甲亚砜进行低温保存和复苏。复苏培养1 h后，进行死/活双色荧光染色和流式细胞技术分析，观察肌腱细胞存活率，以新鲜培养的肌腱细胞-聚二甲基硅氧烷复合物为对照。结果与结论：①死/活双色荧光染色：10%二甲亚砜组肌腱细胞从聚二甲基硅氧烷支架材料孔隙表面上剥脱，呈双染的不规则细胞形态；VS55组和21%二甲亚砜组存在单染绿色荧光的梭形和球形细胞，也存在红绿双染的不规则形态细胞，两组细胞观测密度较对照组明显下降；②流式细胞技术分析：对照组细胞大小均匀；10%二甲亚砜组由于细胞量少而不足以进行流式细胞检测；VS55组以较小体积的细胞颗粒为主；21%二甲亚砜组细胞体积大小与新鲜对照组类似，同时存在较小颗粒；③细胞回收率与存活率：VS55组细胞相对存活率低于21%二甲亚砜组(64.9%，76.2%，P<0.05)；10%二甲亚砜不能获取足够细胞，未能行细胞计数；④结果表明：采用21%二甲亚砜玻璃化低温保存有利于提高细胞的存活率，保持肌腱细胞-支架结合完整。
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3D打印丝素蛋白/胶原蛋白支架的制备及性能
背景：目前，大量研究者致力于寻求可制备出具有优良孔隙、力学性能佳、生物相容性好的三维多孔支架材料方法，其中3D打印技术的快速发展为此提供了较好的技术支持。目的：采用3D打印技术制备丝素蛋白/胶原蛋白复合支架，并对其进行表征。方法：采用3D打印技术制备丝素蛋白/胶原蛋白复合支架，设置丝素蛋白与胶原蛋白的质量比分别为4∶2、4∶4，检测两种复合支架的孔隙率、吸水膨胀率、力学性能及孔径。将第3代大鼠骨髓间充质干细胞接种于两种复合支架上，接种13 d时进行MTT检测，接种14 d时进行苏木精-伊红染色和扫描电镜观察。结果与结论：①4∶2复合支架组的孔隙率、孔径、吸水膨胀率均大于4∶4复合支架组(P<0.05)，两组复合支架的弹性模量比较差异无显著性意义；②随着接种时间的延长，两组复合支架上的骨髓间充质干细胞数量逐渐增加，4∶2复合支架组细胞数量始终多于4∶4复合支架组(P<0.05)；③4∶2复合支架内部细胞较多且分布均匀，4∶4复合支架内部细胞较少且分布不均匀；④结果表明，将丝素蛋白与胶原蛋白以质量比4∶2混合，采用3D打印技术制备的丝素蛋白/胶原蛋白复合支架具有良好的理化性能和细胞相容性。
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胶原蛋白-明胶复合支架材料修复周围神经缺损
背景：文献报道显示，胶原蛋白-明胶复合支架可促进周围神经缺损的早期恢复，但该结论尚未得到进一步证实。目的：观察胶原蛋白-明胶复合支架的细胞相容性及修复周围神经缺损的效果。方法：将胶原蛋白-明胶复合支架与SD大鼠骨髓间充质干细胞共培养5 d，观察两者复合形态。切除20只SD大鼠左侧30 mm的腓总神经，建立周围神经缺损模型。随机分组，实验组神经缺损处植入复合骨髓间充质干细胞的胶原蛋白-明胶复合支架，对照组植入自体神经，植入后16周，进行桥接体中段形态观察与电生理检测。结果与结论：①细胞与支架复合形态：骨髓间充质干细胞在支架上生长良好，与支架融合良好；②桥接体中段形态观察：两组有髓神经纤维密度比较差异无显著性意义(P>0.05)，实验组有髓神经纤维直径、髓鞘厚度及神经组织百分比显著低于对照组(P<0.05)；③电生理检测：两组运动神经传导速度、运动神经潜伏期、感觉神经传导速度、感觉神经波幅比较差异无显著性意义(P>0.05)，实验组运动神经波幅、感觉神经潜伏期显著低于对照组(P<0.05)；④结果表明：胶原蛋白-明胶复合支架具有良好的细胞相容性，可用于修复周围为神经缺损。
