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中国组织工程研究

中国组织工程研究杂志

Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복

统计源期刊
  • 主管单位: 中华人民共和国卫生部
  • 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
  • 影响因子: 1.38
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 2095-4344
  • 国内刊号: 21-1581/R
  • 发行周期: 周刊
  • 邮发: 8-584
  • 曾用名: 现代康复;现代康复杂志;中国临床康复;中国组织工程研究与临床康复
  • 创刊时间: 1997
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《中国组织工程研究与临床康复》杂志编辑委员会
  • 出版地区: 辽宁
  • 主编: 王岩
  • 类 别: 临床医学
期刊荣誉:
  • 仙珍骨宝胶囊对去卵巢大鼠股骨颈骨代谢的影响

    作者:廖进民;陈艳;黄连芳;吴天秀;陈文双;吴铁;崔燎

    背景:用骨组织形态计量学方法探讨中药对去卵巢大鼠股骨颈骨质疏松的影响,可为采用中药防治绝经后妇女骨质疏松性股骨颈骨折提供实验依据.目的:观察仙珍骨宝胶囊对去卵巢大鼠股骨颈松质骨的影响.方法:3月龄SD雌鼠随机分为4组:基础对照组于实验开始时处死取材,去卵巢组和仙珍骨宝组去卵巢造模,仙珍骨宝组在去卵巢后灌胃仙珍骨宝,去卵巢组和年龄对照组灌胃生理盐水,90 d后处死,取股骨颈经不脱钙骨制片进行骨组织形态计量学参数测量.结果与结论:与年龄对照组比较,去卵巢大鼠静态参数的骨小梁面积百分数和骨小梁数量明显减少(P < 0.01),骨小梁间隙明显增大(P < 0.01);动态参数的每毫米破骨细胞数和破骨细胞贴壁表面长度明显增加(P < 0.01),骨矿化沉积率明显减少(P < 0.01).说明去卵巢能导致大鼠股骨颈骨量显著减少.给予仙珍骨宝治疗后,大鼠的骨小梁厚度及骨小梁面积明显增加(P < 0.05),每毫米破骨细胞数和破骨细胞贴壁表面长度有所减少,标记周长百分数则有所增加.说明仙珍骨宝能阻止去卵巢所致的大鼠股骨颈骨量丢失.

  • 氯化胆碱与制动性骨骼肌萎缩肌肉生成抑制素mRNA的表达

    作者:秦开元;寇建民;木拉提别克;刁和信

    背景:研究发现类胆碱物质可增加乙酰胆碱的弥散及终板电流的幅度,对神经肌肉接点功能退化有一定的对抗作用.目的:观察氯化胆碱对制动性骨骼肌萎缩的防治作用及对骨骼肌萎缩大鼠肌肉生成抑制素mRNA表达的影响.方法:将30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组10只.采用可塑性石膏固定模型组和治疗组大鼠右后肢制备肌萎缩模型.治疗组每日灌胃氯化胆碱(150 mg/kg),对照组和模型组灌胃等体积蒸馏水.4周后解剖右后肢腓肠肌,检测腓肠肌收缩张力、肌湿质量、蛋白质水平及肌肉生成抑制素mRNA的表达.结果与结论:与对照组比较,模型组大鼠腓肠肌的收缩张力、肌湿质量、蛋白质水平均显著降低(P < 0.05或P < 0.01),肌肉生成抑制素mRNA表达显著增高(P < 0.01).与模型组比较,治疗组大鼠腓肠肌的收缩张力、肌湿质量、蛋白质水平均显著升高(P < 0.05),肌肉生成抑制素mRNA表达显著降低(P < 0.05).说明氯化胆碱能够显著提高制动性萎缩骨骼肌的收缩张力、肌湿质量、蛋白质水平,减少肌肉生成抑制素mRNA的表达,从而有效抑制骨骼肌制动性萎缩的发生.

  • 淫羊藿及骨形态发生蛋白2与家兔的骨折愈合

    作者:王欣文;何爱咏;蔡羽中;闫振升

    背景:淫羊藿是防治骨质疏松症的中药,但对骨折愈合的治疗尚缺乏依据.目的:观察中药淫羊藿对家兔骨折愈合的作用.方法:建立家兔单侧桡骨3 mm骨折动物模型,随机将其分为空白组、对照组和实验组.空白组予生理盐水灌胃加骨折局部注射生理盐水,实验组予中药淫羊藿熬制液灌胃加骨折局部注射生理盐水,对照组予生理盐水灌胃加骨折局部注射骨形态发生蛋白2.在术后2,4,8周,每组各取4只兔子通过X射线摄片、骨密度测定、生物力学测试(仅8周时)以及组织切片等评价骨折愈合的程度.结果与结论:在各个时期段,X射线摄片显示实验组和对照组在骨痂的形成、改建及髓腔再通等均比空白组要好.实验组骨密度均优于空白组(P < 0.05),实验组和对照组之间差异无显著性意义(P > 0.05).实验组生物力学性能优于空白组(P < 0.05),对照组数值介于两者之间.实验组和对照组在胶原纤维、软骨组织、骨小梁及骨基质的形成时期均早于空白组,实验组和对照组之间无显著性差异.提示淫羊藿能促进家兔骨折愈合.

  • CD34及CD105两种微血管标记物在瘢痕微血管构筑中的比较

    作者:黄如林;梁杰;夏琼平;黄绮梨;吴志贤

    背景:在瘢痕微血管构筑研究中,目前尚无可靠的瘢痕新生血管标记物.CD34和CD105是目前常用来标记微血管密度的一种方法,但两者又有各自特点.目的:比较CD34、CD105两种微血管标记物在病理性瘢痕微血管构筑方面的特征差异.方法:采用免疫组化的方法检测人正常皮肤、非病理性瘢痕、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩内CD34、CD105的表达,采用图像分析软件测量阳性染色的微血管的内径、表达面积并分析以CD34、CD105标记的微血管的形态、分布特征.结果与结论:在所有标本内,CD34标记的微血管较为成熟,多表现为分支状、肝窦状及芽孢状,微血管内径平均值为(73.14±13.81) μm;CD105标记的微血管较为幼稚,多表现为圆形或镶嵌状,部分无管腔,微血管内径平均值为(27.91±5.86) μm.作为微血管标记物,CD105在标记瘢痕新生血管方面优于CD34,CD105可视作瘢痕新生血管可靠的标记物.

  • 大鼠椎间盘纤维环细胞的培养及鉴定

    作者:张坤木;陈少清;宋红梅;何艳;廖军;洪钰;王诗忠

    背景:目前关于椎间盘纤维环细胞的培养方面还没有形成统一的标准,导致实验的操作性和重复性存在缺陷.目的:通过对椎间盘纤维环细胞的体外培养,观察细胞的演变,以期为组织工程研究椎间盘纤维环提供方法和体外模型.方法:采用酶消化法分离SD大鼠椎间盘纤维环细胞,进行单层培养,实验在原代培养中使用体积分15%胎牛血清的DMEM培养基,细胞传代培养一代后可换成体积分数10%胎牛血清的DMEM培养基.倒置相差显微镜观察其形态结构和生物学特性,通过甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学染色等方法对其细胞表型进行鉴定.结果与结论:培养的椎间盘纤维环细胞形态为圆形或梭形;原代细胞生长较慢,传代细胞生长增快;细胞具有甲苯胺蓝易染性;免疫细胞学方法检测表明纤维环细胞有Ⅰ,Ⅱ型胶原表达.结果证实,实验成功在体外培养了大鼠椎间盘纤维环细胞.

  • RPMI-1640和DMEM培养基中肝癌细胞系BEL-7402与HepG-2的生长状态比较

    作者:赵翔;张沙;肖军军;林明

    背景:DMEM和RPMI-1640是两种常用的商品化培养基,二者对肝癌细胞生长的影响尚未见直接的对比研究.目的:比较两种常用培养基对人肝癌BEL-7402与HepG-2细胞系体外生长和增殖效果的影响,从中选择更适合的培养基.方法:分别应用高糖DMEM与RPMI-1640完全培养液培养BEL-7402和HepG-2细胞,于培养的0,24,48,72,96,120 h用酸性磷酸酶检测法测定细胞生长和增殖速率,并于倒置显微镜下观察细胞的形态.结果与结论:结果发现BEL-7402和HepG-2细胞在RPMI-1640培养基中的生长增殖速率均明显高于DMEM培养基 (P < 0.01).镜下观察证实细胞在RPMI-1640培养基中的黏附和伸展状态更好.因此,建议首选RPMI-1640培养基进行肿瘤细胞体外培养.

  • 兔深静脉血栓形成与血浆单核细胞趋化蛋白4及白细胞介素8的水平

    作者:付召军;任为

    背景:关节置换后深静脉血栓形成的预后在个体间存在很大的差异.有研究表明,巨噬细胞和内皮细胞活性的增高对于血栓溶解管腔再通有促进作用.目的:分析兔深静脉血栓形成后不同时段血浆单核细胞趋化蛋白4及白细胞介素8质量浓度对于反映血栓病情有无特异性.方法:新西兰大白兔78只,随机分为血栓组、假手术组及正常对照组,血栓组造模后14 d根据血栓再通情况分为再通组及未通组.分别于血栓后8 h,3 d,7 d,14 d抽取耳缘静脉血行单核细胞趋化蛋白4、白细胞介素8质量浓度测定和血常规检测.结果与结论:血栓后第7天血浆单核细胞趋化蛋白4质量浓度再通组较未通组有显著升高(P < 0.01),白细胞介素8质量浓度再通组较未通组降低(P < 0.05).其变化与单核细胞、中性粒细胞之间无相关性(P > 0.05).结果表明血栓形成后血浆高质量浓度的单核细胞趋化蛋白4的病例血栓再通情况较好.单核细胞趋化蛋白4的质量浓度通过反映巨噬细胞和内皮细胞的活性,在一定程度上反映了深静脉血栓形成的预后.

  • 姜黄素对瘢痕疙瘩成纤维细胞周期及其核转录因子κB信号转导通路的影响

    作者:孙晶;赵志英

    背景:有研究表明姜黄素具有抗器官纤维化的作用,具抑制增殖及诱导G0/G1期细胞累积的作用,但姜黄素可否影响瘢痕疙瘩成纤维细胞的细胞周期,活化核转录因子κB通路,从而抑制瘢痕增生至今少有报道.目的:观察姜黄素对体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞周期的影响及其核转录因子κ B信号转导通路的变化.方法:瘢痕疙瘩成纤维细胞进行体外原代培养,待细胞融合后传代,取第6~8代对数生长期的成纤维细胞用于实验.将不同浓度姜黄素(10,20,30,40,50,60 μmol/L)分别对瘢痕疙瘩成纤维细胞干预.用流式细胞仪测定细胞周期;免疫组织化学法检测核转录因子κ B的表达.结果与结论:姜黄素呈剂量和时间依赖性抑制成纤维细胞的增生(P < 0.05),使细胞周期停滞在G1期,核转录因子κB表达随姜黄素剂量的增大而减小(P < 0.05).结果显示,姜黄素能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖,并使细胞周期停滞在G1期,姜黄素可能通过抑制核转录因子κB信号转导通路的活化,从而发挥其抗纤维化的作用.

  • 亚急性创伤性深静脉血栓形成模型大鼠基质金属蛋白酶3的表达

    作者:章玉冰;胡继红;李文;姚黎清;赵学凌;陈淼;宋恩;李云健;王辉;郑燕科

    背景:创伤性深静脉血栓发生率和死亡率呈逐年递增趋势,但其发生发展机制尚未清楚.因此有必要采用先进的基因芯片技术对其进行研究,探索其发生发展的内在规律.目的:观察创伤性深静脉血栓形成过程中基质金属蛋白酶3的表达变化规律,探讨其在创伤性深静脉血栓形成中的作用机制.方法:从110只SD大鼠中随机取10只大鼠作为正常组,其余100只大鼠作为实验组,采用定量击打双侧大腿+髋人字石膏固定方式,建立大鼠亚急性创伤性深静脉血栓动物模型.在伤后即刻、24,72,120和168 h时相点切取股静脉血管组织,随后抽取总RNA,采用Affymetrix 230 2.0芯片对股静脉血管组织进行基因表达检测.结果与结论:在亚急性创伤性深静脉血栓形成演化过程中,基质金属蛋白酶3在实验组的表达随伤后时间的延长而增加,说明其参与血栓形成过程,可能是影响深静脉血栓生物学状态的主要因素之一.

  • 创伤性深静脉血栓模型大鼠组织蛋白酶B,C基因对血管内皮细胞的作用

    作者:姚黎清;宁亚;赵学凌;章玉冰;李宏昆;李文

    背景:骨科手术后易出现深静脉血栓形成,但目前临床上对此尚缺乏有效预测诊断手段,组织蛋白酶可能是血栓形成的有效生物标记物.目的:观察大鼠深静脉血栓形成前后组织蛋白酶B和组织蛋白酶 C在血细胞中的表达变化情况,探讨二者作为深静脉血栓形成早期诊断候选分子标志物的可行性.方法:将100只SD大鼠随机分为正常对照组和模型组,模型组采用血管钳夹股静脉+双后肢固定制动的方式建立大鼠创伤性深静脉血栓模型,根据观察时间点和血栓形成情况分为血栓形成前组、血栓形成高峰期组和血栓不形成组,提取各组血液RNA并反转录为cDNA,应用实时荧光定量PCR检测组织蛋白酶 B和组织蛋白酶 C在血细胞中的表达变化情况.结果与结论:血栓形成高峰期组大鼠血细胞中组织蛋白酶B,C 表达明显,血栓形成前组和血栓不形成组大鼠血细胞中组织蛋白酶B,C表达于正常对照组大鼠为无明显差异.提示组织蛋白酶B和组织蛋白酶C与深静脉血栓形成密切相关,可作为深静脉血栓形成早期诊断的候选分子标志物.

  • Ang-(1-7)与肺高压状态下肺血管平滑肌细胞的增生

    作者:陈丽星;马虹;吴敬国;肖践明

    背景:Ang-(1-7)虽然具有抗血管平滑肌细胞增殖作用,但在不同的血管床中其作用可能存在差异.直接给予外源性Ang-(1-7)是否可抑制肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞的增殖尚不清楚.目的:探讨Ang-(1-7)对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管平滑肌细胞增殖的影响.方法:雄性SD大鼠颈部一次性注射60 mg/kg野百合碱制备肺动脉高压模型.24 h后,分别经微泵持续泵入Ang-(1-7)(治疗组)或生理盐水(模型组),并设立未造模的对照组.给药2,4周,测定大鼠的右心室收缩压、心室质量、肺小动脉管壁厚度占管径的百分比及管壁面积占血管总面积的百分比.免疫组织化学方法检测肺血管平滑肌细胞α-平滑肌肌动蛋白及增殖细胞核抗原的表达.结果与结论:野百合碱诱导2周,与对照组比较,模型组大鼠右心室收缩压、各心室的质量无明显变化,肺小动脉管壁厚度占管径的百分比、管壁面积占血管总面积的百分比、增殖细胞核抗原阳性率显著增高,α-平滑肌肌动蛋白显著降低;野百合碱诱导4周,模型组大鼠右心室收缩压、各心室的质量、肺小动脉管壁厚度占管径的百分比、管壁面积占血管总面积的百分比、增殖细胞核抗原阳性率均显著增高,α-平滑肌肌动蛋白显著降低.而治疗组上述指标与对照组比较差异无显著性意义 (P > 0.05).说明在野百合碱诱导的肺动脉高压模型中,在肺动脉压增高之前已有肺血管形态学的变化,Ang-(1-7)可通过减轻肺血管平滑肌细胞的增生抑制大鼠肺动脉压的升高.

  • 藻黄合剂含药血清体外培养人肾小球系膜细胞结缔组织生长因子的表达

    作者:张李梅;贺玉珍;尹燕志;牟授菡;鞠建伟;吕丛奎;李笃军

    背景:结缔组织生长因子是转化生长因子β1 的下游效应因子,其异常表达在肾小球硬化及纤维化发生、发展中起重要作用.目的:观察藻黄合剂含药血清对肾小球系膜细胞结缔组织生长因子表达的影响.方法:血清药理学方法制备藻黄合剂低、中、高剂量,空白对照及海昆肾喜阳性对照大鼠含药血清,分别用体积分数10%各含药血清培养基孵育高糖作用下肾小球系膜细胞48 h,另设低糖组为对照.免疫细胞化学和RT-PCR方法检测各组系膜细胞结缔组织生长因子蛋白及mRNA的表达.结果与结论:结缔组织生长因子蛋白及mRNA表达在高糖组较低糖组明显升高(P < 0.01);藻黄合剂各剂量组结缔组织生长因子蛋白及mRNA表达均低于高糖组,且具有剂量依赖性;藻黄合剂高剂量组与海昆肾喜组比较结缔组织生长因子蛋白及mRNA表达差异无显著性意义(P > 0.05).提示高糖可诱导肾小球系膜细胞中结缔组织生长因子的表达,而藻黄合剂可抑制高糖条件下肾小球系膜细胞中结缔组织生长因子蛋白及mRNA的表达.

  • 缺血预处理模型大鼠心肌组织小分子热休克蛋白的表达

    作者:路艳;陈莹;李宗斌;赵玉生

    背景:小分子热休克蛋白,尤其是热休克蛋白27和α-B晶体蛋白高表达量对于心肌组织缺血再灌注的保护作用已比较明确.但是在老龄大鼠中小分子热休克蛋白是否仍具有这种保护作用迄今仍无报道.目的:观察热休克蛋白27和α-B晶体蛋白在青年及老年大鼠心肌缺血预处理时表达的变化.方法:24月龄老龄大鼠及两三月龄青年大鼠在体心脏经缺血5 min、再灌注5 min(反复3次)预处理后,于0,5,15,45,60 min取左心室缺血的前壁与非缺血的后壁心肌组织分别匀浆,分离上清及沉淀蛋白,用Western Blot检测热休克蛋白27和α-B晶体蛋白在预处理不同时间可溶性蛋白及不溶性蛋白含量的改变;采用RT-PCR方法观察缺血预处理对青年及老龄大鼠热休克蛋白27和α-B晶体蛋白mRNA在不同时间点表达的改变情况,采用免疫荧光观察缺血预处理后不同时间点热休克蛋白27和α-B晶体蛋白的移位情况.结果与结论:老龄大鼠在缺血预处理后热休克蛋白27和α-B 晶体蛋白表达量增加,表明老龄大鼠仍具有正常的基因转录及蛋白合成的能力;与青年大鼠比较,老龄大鼠缺血预处理后小分子热休克蛋白移位能力降低,从而减弱了与各相应蛋白结合的能力,限制其保护作用的发挥.提示老年大鼠心肌组织中小分子热休克蛋白丧失移位能力,可能是老年大鼠缺血预处理保护作用减弱的重要原因之一.

  • 透骨消痛颗粒干预膝骨性关节炎早期环氧合酶2和诱导型一氧化氮合酶的表达

    作者:刘伯龄;梁珪清;刘献祥;吴广文;李西海

    背景:由巴戟天、杭白芍、肿节风、川芎等组成的透骨消痛颗粒能有效改善膝骨性关节炎的症状,但其具体机制尚不清楚.目的:观察透骨消痛颗粒对膝骨性关节炎早期环氧合酶2和诱导型一氧化氮合酶表达的影响.方法:将90只新西兰大白兔随机等分为6组:除正常组外均采用改良Hulth法建立骨性关节炎动物模型,透骨消痛颗粒低、中、高剂量组及壮骨关节丸组分别在造模的基础上每天灌胃给予含透骨消痛颗粒5,10,20 g或壮骨关节丸10 g的水溶液.4周后,检测兔关节滑液中一氧化氮、一氧化氮合酶、前列腺素E2及关节软骨和滑膜组织中诱导型一氧化氮合酶、环氧合酶2的水平.结果与结论:骨性关节炎早期,关节滑液中一氧化氮、一氧化氮合酶、前列腺素E2水平及滑膜和软骨中环氧合酶2、诱导型一氧化氮合酶表达均明显升高.透骨消痛颗粒及壮骨关节丸均可降低关节滑液中一氧化氮、一氧化氮合酶、前列腺素E2及滑膜和软骨中环氧合酶2、诱导型一氧化氮合酶的表达,以透骨消痛颗粒中、高剂量组作用更明显.提示透骨消痛颗粒可通过抑制环氧合酶2和诱导型一氧化氮合酶表达,从而抑制软骨降解,缓解临床症状,达到保护关节软骨、防治骨性关节炎的作用.

  • 建立椎管内静脉高压动物模型的手术方法及稳定性评价

    作者:陈通;张鸿祺;张智萍;滕梁红;李永忠;郭德玉;卢德宏;凌锋

    背景:构建稳定的脊髓静脉高压动物模型可为临床研究脊髓血管病变提供可靠的平台,课题组前期已成功构建了兔脊髓静脉高压模型.目的:在前期研究基础上改进手术方法和围手术期处理,建立长期稳定的兔脊髓静脉高压模型.方法:48只新西兰大白兔随机分为急性期组、短期组、中期组、长期组,每组12只兔又分为模型兔8只和假手术兔4只.模型兔通过开腹侧侧吻合兔左肾动静脉,形成动静脉瘘,结扎后腔静脉远端和近端导致动脉血异常引流至腰静脉、椎管内静脉丛形成脊髓淤血和脊髓静脉高压.采用Jacobs法对后肢功能评级,Reuter法评估脊髓感觉运动反射功能,每组动物到期后对模型兔行MRI扫描、经股动脉DSA检查动静脉瘘口的通畅,并灌注解剖取脊髓行病理学检查以判定模型符合要求.结果与结论:32只模型兔存活29只,生存率91%,动静脉瘘口通畅率79%,但长期组瘘口通畅率低,仅29%.术后模型后肢运动、感觉功能均有所减退.模型兔脊髓MRI表现为脊髓相应阶段的水肿;病理检查在光镜下见脊髓实质内淋巴细胞的浸润、胶质细胞的增生、髓内血管的玻璃样变性和神经元细胞变性,符合脊髓静脉高压的脊髓病理变化;透射电镜观察可见髓鞘板层的松散、薄髓纤维内线粒体数目增加和神经元的固缩.提示成功建立模拟人类脊髓血管畸形的脊髓静脉高压机制导致脊髓损伤的动物模型,该模型的可靠性和稳定性较高.

  • 金匮肾气丸对肾阳虚证雄性大鼠生精细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

    作者:刘贺亮;陈长生;秦军;杨波;秦卫军;张更;袁建林

    背景:肾虚可导致不育,金匮肾气丸是治疗肾阳虚证的经典药物,但其作用机制尚不明确.目的:观察金匮肾气丸对凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax在肾阳虚证雄性大鼠生精细胞中表达的影响.方法:成年雄性SD大鼠100只随机分成5组,采用氢化可的松注射液制备肾阳虚模型.金匮肾气丸低、中、高剂量组在造模基础上每天灌胃含生药0.625,1.250,2.500 g/kg的肾气丸混悬液,连续30 d.正常组和模型组灌胃等量蒸馏水.检测各组大鼠左侧睾丸质量、血清睾丸酮水平、精子密度、精子活率改变情况.采用免疫组织化学方法检测Bcl-2、Bax蛋白在生精细胞中的表达.结果与结论:模型组左侧睾丸质量、血清睾丸酮水平、精子密度、精子活率低于正常组、金匮肾气丸中、高剂量组(P < 0.05).与模型组比较,正常组、金匮肾气丸低、中、高剂量组大鼠生精细胞中Bcl-2蛋白表达显著增高(P < 0.05),Bax蛋白表达显著降低(P < 0.05).说明金匮肾气丸可使肾阳虚证雄性大鼠生精细胞中Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达降低,从而抑制细胞凋亡,对肾阳虚证雄性大鼠生殖能力有较好的治疗作用.

  • 椎间注射转化生长因子β1对兔退变腰椎间盘蛋白多糖表达的影响

    作者:吴彬;张辉;王海滨;贾存岭;赵益峰

    背景:体外研究证实转化生长因子β1可以促进蛋白多糖合成,延缓椎间盘退变,但体内实验鲜见报道.目的:观察局部应用转化生长因子β1对兔退变腰椎间盘髓核蛋白多糖表达的影响.方法:取30只新西兰大白兔建立兔腰椎间盘退变模型,造模12周,经X射线证实退变后,随机选择6只模型兔及6只未造模正常兔,处死取材.分别向剩余24只模型兔L4~5椎间隙注射转化生子因子β1和生理盐水.末次给药2,4周取材,间苯三酚法测定兔椎间盘髓核内蛋白多糖的水平.结果与结论:造模12周,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖水平明显降低(P < 0.01).经局部注射转化生子因子β1后,兔退变椎间盘髓核中蛋白多糖表达明显增多(P < 0.01).说明在兔椎间注射转化生子因子β1 可以促进髓核蛋白多糖的合成,延缓椎间盘退变.

  • 应力缺失性骨质疏松模型大鼠p38信号通路以及通络生骨胶囊的干预

    作者:刘少军;张娴;冯丽敏;陈小俊

    背景:应力缺失是导致运动不足人员骨质疏松发生的主要原因.通络生骨胶囊具有促进骨生成的作用,其对应力缺失模型大鼠p38 通路的影响未见报道.目的:观察应力缺失性骨质疏松大鼠p38 的变化,以及通络生骨胶囊对其改善作用.方法:将SD 大鼠随机分为4 组,除正常组外以鼠尾悬吊法制备动物应力缺失模型,药物低、高剂量组从造模次日起每日灌胃给予0.6,1.2 g/kg 的通络生骨胶囊.造模21 d,取腿骨,进行形态学观察;分离成骨细胞,Western blot 法测定p38蛋白含量.结果与结论:与正常组比较,模型组成骨细胞显著减少,骨小梁面积及其百分比、骨小梁厚度等显著降低,p38 表达总量显著升高,但磷酸化p38 与对照组无差异.高剂量的通络生骨胶囊可显著增加应力缺失大鼠成骨细胞个数,增大其骨小梁面积,促进磷酸化p38 的表达;而低剂量的通络生骨胶囊则降低了磷酸化p38 的表达.说明应力缺失可导致大鼠骨质疏松,高剂量的通络生骨胶囊可通过增强p38 磷酸化水平预防应力缺失导致的骨质疏松.

  • 小胶质细胞介导帕金森病模型小鼠的炎症损伤

    作者:陆明佳;朱沂;孙娟;杨雪荣

    背景:研究表明帕金森病的黑质纹状体存在小胶质细胞的激活,但其释放炎症因子在帕金森病发病过程中的作用尚不明确.目的:观察小胶质细胞激活所释放的两种炎症因子整合素α及肿瘤坏死因子α在小鼠黑质部位的蛋白表达及酪氨酸羟化酶的蛋白表达.方法:将C57BL/6小鼠经腹腔注射百草枯(10 mg/kg),设为帕金森病模型组,并设置对照组,观察两组小鼠行为活动.用高效液相法测定小鼠黑质纹状体多巴胺的含量.采用免疫组织化学法检测黑质部位酪氨酸羟化酶、整合素α及肿瘤坏死因子α蛋白表达.结果与结论:百草枯可造成帕金森病模型组小鼠运动减少,并伴有运动迟缓、震颤、探嗅、竖毛及尾巴硬类似于帕金森病样的行为表现,并且脑内黑质纹状体多巴胺含量降低(P < 0.05),酪氨酸羟化酶蛋白表达降低(P < 0.05),整合素α和肿瘤坏死因子α蛋白表达增加(P < 0.05),肿瘤坏死因子α在模型组小鼠黑质纹状体有阳性表达,且主要分布在小胶质细胞上.结果表明小胶质细胞介导的炎症损伤参与了帕金森多巴胺能神经元的损害过程.

  • 激素性股骨头坏死模型兔坏死股骨头内核心结合因子α1蛋白表达与普伐他汀的干预

    作者:胡敏;范建楠;赵宏斌;钱传云;魏蔚;张扬

    背景:洛伐他汀、辛伐他汀等他汀类降脂药可上调核心结合因子α1的蛋白表达,促进骨坏死修复.目的:观察普伐他汀对激素性股骨头坏死兔模型核心结合因子α1的蛋白表达的影响.方法:将80只新西兰白兔分为对照组18只,实验组62只.实验组制备兔激素性股骨头缺血坏死模型.造模第5周,将造模成功兔36只分为模型组和他汀组,每组18只.他汀组以普伐他汀(1.2 mg/kg)1次/d灌胃,模型组和对照组以等体积的蒸馏水灌胃.造模后8,12,16周分批处死动物,截取股骨头行免疫组化检测核心结合因子α1的蛋白表达.结果与结论:对照组不同时相点股骨头核心结合因子α1的蛋白表达均为阳性;模型组造模后8周及12周表达均为阴性,造模后16周表达呈弱阳性;他汀组造模后8,12,16周表达均为阳性,且随着用药时间的延长表达逐渐增强.结果说明普伐他汀可有效促进早期激素性股骨头坏死兔模型坏死股骨头核心结合因子α1的蛋白表达.

  • 葛根异黄酮联合维生素D防治骨质疏松的协同效应

    作者:扶晓明;周艳;李梓民;贺栋梁;李东阳

    背景:葛根异黄酮具有类雌二醇结构特征,对去卵巢大鼠的骨质丢失和骨量的减少有一定的抑制作用.但也有报道其对去卵巢大鼠骨质疏松的防治效果较弱且单独使用效果不明显.目的:观察葛根异黄酮与维生素D联合对去卵巢大鼠骨质疏松的作用.方法:将81只3月龄雌性SD大鼠随机分为9组:除假手术组外其他各组均行双侧卵巢摘除造模.低、中、高剂量TIP组,VitD组,低、中、高剂量联合组在去卵巢基础上分别灌胃给予相应剂量的葛根异黄酮和(或)维生素D;模型组和假手术组不给予药物治疗.给药3个月,计算大鼠子宫系数;测定大鼠血清碱性磷酸酶、血钙、血磷、骨钙素及血清雌二醇水平;检测大鼠股骨骨密度.结果与结论:与模型组比较,中、高剂量TIP组,低、中、高剂量联合组大鼠子宫系数、雌二醇水平明显增高(P < 0.05),血清碱性磷酸酶、骨钙素水平明显降低(P < 0.05),股骨中心及远心骨密度均明显增加(P < 0.05),均以高剂量联合组作用效果明显.且在子宫系数,雌二醇、血清碱性磷酸酶、骨钙素水平及股骨远心端骨密度方面,葛根异黄酮和维生素D均表现为协同作用.在血钙、血磷方面,葛根异黄酮和(或)维生素D的作用不明显.说明葛根异黄酮和维生素D联合使用对去卵巢大鼠骨质疏松的防治有协同效应.

  • 光动力学照射小鼠牙周组织的病理变化

    作者:杜波;蒋琳;刘明方;李苹苹;林居红

    背景:光化学疗法对口腔组织可能具有伤害,在临床应用甲苯胺蓝O介导的光动力学疗法预防龋病前,需进行生物安全性评估.目的:观察甲苯胺蓝介导的光动力学疗法产生的光敏作用对小鼠牙周组织健康的影响.方法:将54只小鼠随机分为9组,分别用0,50,100 mg/L 甲苯胺蓝O联合二极管光照0,15,25 min.作用后72 h,切取牙周组织切片观察.结果与结论:经光照治疗后小鼠的牙龈、牙槽骨和牙齿没有发现有坏死、溃疡、增生等异常改变.提示甲苯胺蓝介导的光动力学疗法一个安全的预防龋病的方法,对牙齿临近的牙周组织无破坏性影响.

  • 电针干预膝骨关节炎过程中转化生长因子β的调控作用

    作者:吴耀持;孙毅君;周景辉;李石胜

    背景:电针治疗膝骨关节炎具有良好的中枢和外周镇痛作用.研究显示转化生长因子β在膝骨关节炎发生中具有重要作用.目的:从转化生长因子β调控角度,认识电针治疗膝骨关节炎的可能作用机制.方法:健康3月龄雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、电针组和药物组.通过结扎大鼠股静脉并强迫运动的方法,建立膝骨关节炎动物模型.造模1个月后,电针组刺激内膝眼(EX-LE4)和犊鼻(ST 35)穴位,深0.1寸,脉冲2 Hz刺激20 min,1次/d,药物组为关节腔内注射药物透明质酸钠,0.1 mL/次,1次/周.治疗2周后,采集各组动物膝关节滑膜组织,观察转化生长因子β1、转化生长因子β1受体Ⅰ、转化生长因子β受体Ⅱ的表达.结果与结论:膝关节骨关节炎动物膝关节滑膜中转化生长因子β1水平增加(P < 0.05),经电针或透明质酸钠治疗后,膝关节滑膜中转化生长因子β1水平降低(P < 0.05),且转化生长因子β1受体Ⅰ,Ⅱ含量出现显著降低(P < 0.05).提示电针治疗膝骨关节炎是通过下调转化生长因子β1的含量来改善骨关节炎症状的,受体含量的减少有助于膝骨关节炎的恢复.

  • 低频脉冲超声干预膝骨关节炎模型兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达

    作者:唐进;黄良库;彭李华;李东;陈世荣

    背景:研究表明,低频脉冲超声能促进全层关节软骨缺损修复,延缓实验性早期骨关节炎的病变进展.水通道蛋白3存在于关节软骨及滑膜上,并在骨关节炎的发病机制中发挥重要作用.目的:探讨低频脉冲超声对实验性膝骨关节炎兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达的影响.方法:成年新西兰兔左后膝关节用管型石膏固定于伸直位制动6周制备实验性兔膝关节骨关节炎模型,造模成功后随机分为两组:实验组予以低频脉冲超声治疗(频率为1 MHz,功率为2.0 W),1次/d,15 min/次;对照组不接受超声治疗.分别于治疗后2,4,8周,采用免疫组织化学方法观察兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达.结果与结论:随着造模后时间的延长,各组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达均有所增加;与对照组比较,实验组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达明显降低(P < 0.01).说明低频脉冲超声能降低实验性兔膝骨关节炎关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达,从而缓解关节肿胀,延缓软骨及滑膜的退变,具有软骨及滑膜保护作用.

  • 糖尿病性骨质疏松模型雌激素、一氧化氮及转化生长因子β1的变化

    作者:刘中浩;高红伟;邢德国;赵锡武;王若义;宫明智

    背景:糖尿病和卵巢去势是骨质疏松发生的两大主要原因,均会出现一氧化氮和转化生长因子β1的变化.目的:探讨雌激素、一氧化氮、转化生长因子β1在糖尿病性骨质疏松模型中的变化及意义.方法:采用链脲佐菌素诱导制备糖尿病大鼠模型,于造模后4,8,12,16周,进行骨密度检测,并应用放免法检测血清雌激素水平,硝酸还原酶法检测血清一氧化氮水平,ELISA法检测血清转化生长因子β1水平,免疫组织化学法检测骨中转化生长因子β1水平.结果与结论:随着链脲佐菌素诱导时间的延长,糖尿病大鼠股骨骨密度逐渐降低(P < 0.05或P < 0.01);血清一氧化氮水平逐渐降低(P < 0.05或P < 0.01);血清转化生长因子β1水平逐渐升高(P < 0.01);血清雌激素水平轻度降低,与同时间点正常大鼠比较差异无显著性意义(P > 0.05).免疫组织化学结果显示转化生长因子β1主要表达于成骨细胞的胞浆中,其阳性表达随链脲佐菌素诱导时间的延长逐渐下降(P < 0.01).说明糖尿病大鼠血清一氧化氮水平和骨组织中转化生长因子β1水平的变化导致了骨吸收增加,骨形成减少,使骨密度降低,参与了糖尿病性骨质疏松的发生.

  • 四种药物治疗骨质疏松模型大鼠股骨扭转力学特性对比

    作者:赵宝林;权铁刚;马洪顺

    背景:骨质疏松的预防、诊断和治疗都需要了解药物治疗的效果.扭转力学性能指标是对药物治疗后骨质疏松质量评价的一种可靠方法.目的:观察不同药物治疗动物骨质疏松的疗效.方法:四五月龄雌性Wistar大鼠建立骨质疏松模型,以复方中药、阿仑膦酸钠、维生素K、钙剂进行治疗,饲养15周后处死大鼠,取大鼠股骨在扭转试验机上以1 (°)/s进行扭转实验,实验结束后通过试验机测量变盘读取转矩和扭转角数据,试样破坏后观察试样的断口形貌.结果与结论:骨质疏松大鼠大转矩、扭转角、切应力均低于正常大鼠(P < 0.05),而经过复方中药或阿仑膦酸钠治疗后,大转矩、扭转角、切应力得到恢复,但维生素K及钙剂治疗效果不明显.说明中药、西药、维生素K治疗动物骨质疏松模型大鼠均有一定疗效,钙剂效果不明显,中药的效果好.

  • 压力作用下牙周组织护骨素与Wnt-1的表达

    作者:秦明群;许连静;毛峻武;黄声富

    背景:目前研究发现Wnt信号通路及相关因子对骨组织具有调节作用,Wnt-1与骨形成密切相关,但与正畸骨改建的相关性少有报道.目的:通过建立大鼠的正畸牙移动模型,观察压力侧牙周组织Wnt-1及护骨素的表达.方法:Wistar大鼠80只制备大鼠正畸牙移动动物模型,按牙齿移动1,3,7,14 d分别取材,每只大鼠对侧牙周组织设为空白对照组.苏木精-伊红染色观察大鼠压力侧牙周组织的形态变化,然后采用RT-PCR及免疫组织化学方法检测牙周组织Wnt-1及护骨素OPG的表达.结果与结论:免疫组织化学结果与PCR检测结果显示,大鼠牙齿移动后1,3,7,14 d时,压力侧护骨素均有表达,在牙齿移动后3和7 d时护骨素表达明显增强(P < 0.05).Wnt-1仅在在免疫组化中检测中显示,大鼠牙齿移动后3 d与对照组表达出现明显增强(P < 0.05).结果证实,在正畸力作用下,护骨素参与了正畸牙周组织改建的过程,护骨素在压力区随正畸牙齿移动表达升高具有时间依赖性.Wnt-1在正畸骨改建中的作用需进一步研究证实.

  • 携带DREAM基因小分子干扰RNA重组质粒的构建

    作者:陈敏;项红兵;田玉科

    背景:DREAM是一种多功能蛋白,在细胞中不同位置与不同靶蛋白结合,体外细胞培养和动物实验均证明DREAM参与了许多疾病的发病机制.目的:构建携带DREAM基因的小分子干扰RNA重组质粒.方法:设计并合成shRNA对应的两条互补的寡核苷酸链,pDC316-EGFP-U6质粒经BamHⅠ和HindⅢ双酶切与退火后的寡核苷酸连接,转化感受态E.coli DH5α,获得阳性克隆进行PCR和测序鉴定.结果与结论:经PCR、酶切及测序证实,重组质粒pDC316-EGFP-DREAM-shRNA-U6片段大小为473 bp,其中插入的片断序列和位点与预期完全一致,说明pDC316-EGFP-DREAM-shRNA-U6重组质粒构建成功.

  • 长波紫外线照射皮肤成纤维细胞表皮生长因子受体的表达

    作者:刘垠;刘流;王继华;鲁开化;伍尚敏;杨瑞年;龙庭凤;袁瑞宏

    背景:长波紫外线与人体皮肤老化关系密切,主要作用于表皮和真皮全层.目的:观察长波紫外线照射对体外培养的皮肤成纤维细胞的表皮生长因子受体表达的影响.方法:体外培养人成纤维细胞,将细胞分为对照组、长波紫外线照射5,10,20 J/cm2组.照射24 h后,分别用实时PCR和Western blot检测表皮生长因子受体mRNA和蛋白的表达情况.结果与结论:体外培养的皮肤成纤维细胞随着长波紫外线照射剂量的增加,表皮生长因子受体的mRNA与蛋白水平均显著增加,提示长波紫外线可以诱导成纤维细胞里的表皮生长因子的表达.

  • 新鲜羊膜移植治疗重症角膜溃疡

    作者:张晓辉;孙乃学;王峰

    背景:羊膜具有抗原性低、促进眼表上皮化修复、减轻炎性反应、抑制纤维组织增生和新生血管形成等作用.在修复角膜缺损区的创面,可提供一个理想的基底膜,使其迅速上皮化和创口愈合.目的:新鲜羊膜移植治疗重症角膜溃疡的安全性及其临床疗效.方法:纳入非感染性继发角膜溃疡6例(6只眼)和感染性原发角膜溃疡8例(8只眼),共14例临床连续住院患者.非感染性角膜溃疡行单纯新鲜羊膜移植(6只眼),感染性角膜溃疡羊膜移植联合碘酊烧灼(8只眼).移植后裂隙灯显微镜下观察角膜溃疡的愈合过程,角膜透明性的变化,移植羊膜存活的时间.结果与结论:新鲜羊膜植片未发生排斥反应.14例重症角膜溃疡移植治疗后病情缓解,未发生角巩膜穿孔、坏死等严重并发症.其中非感染性角膜溃疡组1 只眼溃疡未愈合.角结膜未发生进行性溶解、穿孔,视力无提高.随访期间溃疡未出现复发及严重的并发症.提示,新鲜羊膜移植治疗重症角膜溃疡是一种有效、安全的方法.

  • 慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺组织基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1与固本颗粒胶囊

    作者:杨晓萍;周兆山;胡海波;王平丽;殷彬

    背景:中医药防治慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的有效性和安全性已初步得到临床认证.目的:观察COPD模型大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及其特异性抑制物组织金属蛋白酶抑制剂1表达与固本颗粒胶囊干预的影响.方法:将50只Wistar大鼠随机等分为5组,除正常组外,其余大鼠均以烟熏及气管内滴注脂多糖的方式建立COPD模型.造模 29 d,泼尼松组、固本颗粒胶囊低、高剂量组分别灌胃给予醋酸泼尼松 1.04 mg/(kg?d),固本颗粒胶囊0.47,0.94 g/(kg?d),1次/d,观察记录大鼠的一般状况.免疫组织化学方法检测大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达.结果与结论:COPD大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达显著增强(P < 0.05).药物干预后,COPD大鼠的一般状况明显改善,肺组织中基质金属蛋白酶9及组织金属蛋白酶抑制剂1的表达有所降低;其中,醋酸泼尼松的作用为显著,固本颗粒高剂量次之,低剂量弱.说明固本颗粒胶囊能以剂量依赖的方式缓解COPD大鼠的临床表现,改善气道重塑,纠正COPD大鼠体内蛋白酶和抗蛋白酶失衡.

  • 烫伤创面愈合后的瘢痕形成与神经支配

    作者:郭鹏飞;张芮;冯永强;朱守荣;王一兵

    背景:既往研究表明神经因素在创面愈合中具有重要调控作用,但有关神经调节与创面愈合后瘢痕形成之间的关系鲜有报道.目的:观察烧伤创面愈合过程中神经支配与创面愈合质量之间的关系.方法:将30只大鼠右侧T9~L1阶段脊神经根切断,制作失神经支配皮肤模型;然后在大鼠背部右侧失神经支配皮肤区域制作直径4 cm的深Ⅱ度烫伤创面,设为模型组,左侧对称正常皮肤制作同样的创面,设为对照组,伤后连续观察创面变化,于7,14,21 d采用免疫组织化学法观察Ⅰ和Ⅲ胶原分泌情况,并计算Ⅰ/Ⅲ型胶原比例的变化,探讨创面愈合速度及愈合质量.结果与结论:模型组Ⅰ,Ⅲ型胶原分泌和Ⅰ/Ⅲ型胶原比值于伤后各时间点均显著低于对照组(P < 0.05).模型组Ⅰ型胶原分泌与伤后7,14,21 d逐渐增加(P < 0.05),Ⅲ型胶原于伤后21 d时分泌明显增高(P < 0.05),Ⅰ/Ⅲ型胶原比值与伤后21 d时明显降低(P < 0.05).结果证实,创面早期神经支配可以促进创面愈合,创面重塑期减轻神经支配可能会改善创面重塑质量.

  • 重组人胰岛素样生长因子Ⅰ对成骨细胞的影响

    作者:徐萍;张克勤;刘超;陈军建;袁国跃;俞力;钱方方

    背景:人胰岛素样生长因子Ⅰ在成骨细胞中含量丰富,与骨密度有密切关系.目的:观察重组人胰岛素样生长因子Ⅰ对体外培养大鼠成骨细胞的增殖、凋亡及碱性磷酸酶合成的影响.方法:不同质量浓度重组人胰岛素样生长因子Ⅰ刺激体外培养的大鼠成骨细胞,噻唑蓝法测定活细胞数量;肿瘤坏死因子α单独或与重组人胰岛素样生长因子Ⅰ共同刺激成骨细胞,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率,采用对硝基酚磷酸盐法测定细胞裂解液中碱性磷酸酶活性.结果与结论:与对照组相比,一定剂量的重组人胰岛素样生长因子Ⅰ能明显增加大鼠成骨细胞数量(P < 0.05),在质量浓度为0.1~100 μg/L时,成骨细胞数量的增加与质量浓度呈正相关;肿瘤坏死因子α在0.1~100 μg/L范围内呈剂量依赖性地促进成骨细胞凋亡(P < 0.05),并使S期细胞减少(P < 0.05),而重组人胰岛素样生长因子Ⅰ能抑制肿瘤坏死因子α对成骨细胞的促凋亡作用(P < 0.05);与对照组相比,重组人胰岛素样生长因子Ⅰ刺激的成骨细胞碱性磷酸酶的活性明显增高(P < 0.05).重组人胰岛素样生长因子Ⅰ对大鼠成骨细胞有明显的促增殖作用,且能明显抑制肿瘤坏死因子α诱导的大鼠成骨细胞凋亡,提示增加成骨细胞数量可能是重组人胰岛素样生长因子Ⅰ促进骨形成的机制之一;重组人胰岛素样生长因子Ⅰ能促进大鼠成骨细胞碱性磷酸酶的合成,提示重组人胰岛素样生长因子Ⅰ有可能促进骨基质的合成和钙化.

  • 护骨素基因T245G多态性与老年人骨密度关系的部位及性别差异

    作者:陈陵霞;苗懿德;刘杰;魏雅楠;郏蓉;宝辉;褚琳

    背景:作为骨折发生的重要临床预测因子,骨密度在一定程度上由遗传因素决定.护骨素基因是骨质疏松症发病中的重要候选基因.目的:探讨护骨素基因T245G多态性与骨密度的相关性.方法:选取2008-09/2010-04在北京大学人民医院进行常规查体的老年人281名,其中男182名,女99名.应用PCR-RFLP结合DNA测序检测护骨素基因T245G多态性,使用双能X射线骨密度测量仪测定受试者腰椎、髋部标准位置及前臂的骨密度.同时收集受试者的生化指标及临床观察项目.应用ANOVA方法分析护骨素基因T245G多态性与各检测指标的关系.结果与结论:在老年男性及绝经后女性中,T245G基因T,G等位基因频率分布差异无显著性意义(P > 0.05).在老年男性中,GG和TG基因型具有较高的腰椎骨密度,而TT基因型的腰椎骨密度较低(P < 0.05),Ward's三角区及前臂骨密度在各基因型间差异无显著性意义(P > 0.05).在绝经后女性中,T245G多态性与骨密度无关,说明护骨素基因与老年男性腰椎骨密度有关.

  • 雌激素对生长板软骨细胞增殖的调节

    作者:李继斌;黎海芪;王松艳

    背景:雌激素是生长板闭合过程必不可少的因素,但目前尚无实验从不同层次揭示雌激素对生长板软骨细胞增殖率、细胞周期分析、细胞凋亡的超微结构改变的影响.目的:探讨雌激素对生长板软骨细胞增殖能力的调节特点及其在生长板增殖能力老化过程中的作用.方法:选取12周龄新西兰雌兔30只,切除双侧卵巢制备去卵巢模型,4周后雌二醇组每周注射苯甲酸雌二醇,模型组注射灭菌棉籽油.分别于23,26,29周龄时处死白兔,并于处死前7,1 h皮下注射BrdU,免疫组织化学染色检测肋骨生长板软骨BrdU阳性细胞;分离单细胞悬液,采用流式细胞仪作细胞周期分析;透射电镜观察软骨细胞超微结构.结果与结论:两组大鼠BrdU阳性细胞染色率均逐渐下降,雌二醇组肋骨生长板软骨细胞BrdU阳性染色率在23,26周龄时高于模型组(P < 0.05),29周龄时两组差异无显著性意义(P > 0.05).雌二醇组在23,26周龄时S期软骨细胞增多,至29周龄时明显减少;模型组S期软骨细胞的比例无明显改变,至29周出现G2/M期软骨细胞比例减少,细胞增殖指数降低.电镜观察发现,雌二醇组生长板有更多"暗细胞"形式的凋亡增殖软骨细胞.说明雌激素作用早期可促进软骨细胞增殖,但在作用后期出现细胞周期阻滞,软骨细胞增殖率降低,凋亡增多,从而促进生长板老化过程.

  • Brg1调控重组人骨形态发生蛋白2诱导成骨细胞分化

    作者:高忠平;秦丽;张越;耿倩倩;孙奋勇

    背景:Brg1是依赖ATP的染色质改变复合物的核心催化亚基,该亚基在基因的转录调控、复制、重组,骨骼肌的分化、抑制肿瘤的发生等活动中起着重要的作用.目的:探索Brg1基因在骨形态发生蛋白2诱导成骨细胞分化过程中的调控机制.方法:采用胶原酶消化法进行小鼠颅骨成骨细胞的原代培养;分别用0,50,200 μg/L的重组人骨形态发生蛋白2诱导原代培养的成骨细胞的分化,摸索骨形态发生蛋白2的佳作用剂量;实时荧光定量PCR和Western blot进行骨形态发生蛋白2对Brg1的作用时间的动力学分析;实时荧光定量PCR和钙钴染色法检测敲除Brg1对骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化的影响;构建Dlx5腺病毒重组表达载体,实时荧光定量PCR和钙钴染色法检测Brg1在骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化过程中对Dlx5的调控作用.结果与结论:用自行合成的重组人骨形态发生蛋白2可诱导原代培养小鼠成骨细胞分化,200 μg/L剂量有着较好的诱导分化效果;重组人骨形态发生蛋白2可诱导Brg1基因转录水平和翻译水平表达水平上调;敲除Brg1可抑制重组人骨形态发生蛋白2诱导的成骨分化;Brg1能够调控Dlx5的表达水平.说明Brg1通过调控Dlx5的表达水平调控重组人骨形态发生蛋白2诱导的小鼠成骨细胞的分化.

  • 离体骨的置入式微波消融

    作者:柯晋;尹庆水;张余;张涛;徐亮

    背景:微波高温可直接灭活骨肿瘤细胞,并且可维持骨的支架作用.目的:探讨置入式微波对离体状态下正常骨组织的消融作用.方法:采用微波消融治疗仪对新鲜离体猪骨干骺端进行消融,功率分别为60,70,80,90,100 W,消融时间300 s,微波频率2 450 MHz.刻度尺测量凝固区长直径及短直径;取凝固区标本,光镜及电镜观察其组织形态及超微结构.结果与结论:置入式微波在不同功率下消融形态基本恒定,纵面上看类似一个椭球形,横面上看类似一个圆形,微波消融范围随着功率的增加明显增大,光镜下未见变化,电镜下可见经微波消融后的骨组织骨细胞核消失、空泡化,呈现完全坏死.说明置入式微波对离体状态下正常骨组织有消融作用.

  • 关节软骨修复与相关细胞因子的作用

    作者:史新立;胡堃;孟祥提

    背景:关节软骨损伤后几乎不能完全修复,在生理负荷下容易发生退行性改变,终发展成骨性关节炎.利用细胞生长因子构建组织工程化软骨,修复重建受损关节软骨,为骨关节软骨疾病的治疗开辟了新的途径.目的:全面了解细胞因子特性与正常关节软骨相似的组织工程软骨的构建,明确目前细胞因子促进软骨分化修复的研究进展.方法:电子检索中国生物医学文献数据库和计算机Medline数据库1994/2009收录的关节软骨修复与相关细胞因子相关综述和论文报告,并分析其研究进展.结果与结论:共纳入软骨细胞因子相关文献29篇.关节软骨损伤后的修复非常有限,其对创伤、炎症的反应是由软骨细胞、滑膜组织分泌或关节液中含有的细胞因子所介导的.软骨细胞基质中的生长因子,通过不同的细胞信号通路使基因表达启动或关闭,在软骨生长和分化中发挥重要作用,同时软骨细胞周围环境因素也影响调控诱导分化的结果.

  • 应激动物模型构建方法及效果评价的研究进展

    作者:娜琴;程飚;陈阿梅

    背景:应激与疾病的关系越来越被人们所关注,应激动物模型的建立是应激研究的基础.但在应激动物建模方面尚无统一的标准.目的:就各类应激动物模型的建立方法及建立模型后应激效果的评价进行综述,并分析模型建立及评价中存在的问题.方法:应用计算机检索PubMed数据库(2000/2010),以"stress,animal model,murine,evaluate"为检索词;检索重庆维普数据库(2000/2010),以"应激,动物模型"为检索词.文章所述内容需与应激动物模型的建立、应用、评价,及应激与疾病的关系等方面研究密切相关,排除重复性研究.结果与结论:共收集417篇关于应激动物模型的文献,中文115篇,英文302篇.阅读标题和摘要进行初筛,排除发表时间较早、重复及类似的研究,纳入30篇符合标准的文献.目前用于研究的应激动物模型种类繁多,但造模方法还没有统一标准,对应激的程度也没有可量化的指标,在应激的评价方面存在缺陷.随着神经科学、分子生物学、电生理学等的飞速发展,应激研究领域正在向分子水平深入和整体网络水平延伸.转基因技术、基因敲除模型、蛋白缺失实验等技术的发展与广泛应用,为应激机制的研究提供了新思路与新手段.

  • 运动性半月板损伤及组织工程半月板的应用

    作者:钱赫亮

    背景:半月板损伤是常见的膝关节运动损伤之一,常伴有关节软骨的损伤,其原因是膝关节内环境的紊乱.目的:评价组织工程半月板在半月板构建中的生物支架材料的性能,以寻求合理的半月板替代物.方法:以"组织工程;半月板修复;生物材料支架;运动性半月板损伤"为中文关键词,以"tissue engineering,the meniscus repair,biological material scaffold; athletic meniscal injury"为英文关键词,应用计算机检索维普数据库(1994-01/2009-12)和Pubmed数据库(1994-01/2009-12),纳入30篇运动性半月板损伤和组织工程半月板相关的文献.对半月板组织的特征、半月板组织工程种子细胞的来源、组织工程半月板支架材料生物相容性和可降解性以及细胞因子在组织工程半月板构建过程中的作用进行综合评价.结果与结论:与传统半月板修复相比,组织工程化半月板具有无抗原性,来源不受限制,可按预先设计塑型,具有生命力等许多优点.但是组织工程化半月板仍有许多问题有待研究和解决,如何模拟体内环境,在体外成功构建半月板组织,如何提高支架材料的应用性,研制具有与正常人体半月板组织相接近的力学性能的支架材料是一个半月板修复的关键性问题.

  • 胚胎发育与环境激素的影响

    作者:胡梦桑;陈毅斐;徐营

    背景:自然环境中胚胎发育异常,性行为异常,生物两性化以及种族繁殖数量减少等现象的发生概率升高与环境激素有关.随着环境污染的日趋加重,环境激素对胚胎发育的影响已日益受到重视.目的:分析环境激素对早期胚胎着床、着床前期早期胚胎发育及其对胚胎期胚胎的生殖系统发育的影响及其机制.方法:使用环境激素及己烯雌酚、米非司酮、甲氧滴滴涕、胚胎发育、胚胎早期发育等关键词,检索中国知识资源总库与PubMed数据库中的相关研究论文,分析环境激素对不同时期胚胎发育的影响.结果与结论:纳入45篇符合标准的文献.环境激素广泛存在于日常生活中,种类繁多,作用机制复杂多样,且不同环境激素之间可能还存在协同作用,对分子水平的机制探索还处于初级阶段.控制环境激素生成源,尽量减少人为排放是降低环境激素对人类健康影响的重要措施.

  • 夹脊穴结合局部围针治疗带状疱疹后遗神经痛的Meta分析

    作者:朱毅;朱黎婷;李凝;李怡;金宏柱

    背景:临床应用夹脊穴结合局部围针治疗带状疱疹后遗神经痛取得了良好的疗效,但其效果是否优于西药尚不明确.目的:系统评价夹脊穴结合局部围针治疗带状疱疹后遗神经痛的有效性.方法:计算机检索中国知网数据库、维普全文期刊数据库、中国生物医学文献数据库、Pubmed医学文献检索服务系统、美国斯坦福大学的Highwire数据库,手工检索南京中医药大学图书馆过刊资料库及相关会议论文集,检索时间为建库至2010-07,收集夹脊穴结合局部围针治疗带状疱疹后遗神经痛的临床随机对照试验,并按照循证医学原则对文献质量进行评价.统计学分析采用RevMan 4.2软件.采用总有效率、临床治愈率、疼痛目测类比评分、临床症状评分等作为结局评价指标.结果与结论:共纳入13个随机对照试验(共858例).Meta分析结果显示,夹脊穴结合局部围针治疗带状疱疹后遗神经痛在总有效率[RR=1.26,95%CI(1.19,1.34)]、临床治愈率[RR=1.93,95%CI(1.64,2.27)]、疼痛目测类比评分[WMD=3.13,95%CI(2.38,3.87)]方面明显优于对照组.总有效率分类比较显示,夹脊穴结合围针的效果与物理治疗差异无显著性意义[RR=1.60,95%CI(0.43,6.02)],但明显优于卡马西平[RR=1.45,95%CI(1.22,1.72)].说明夹脊穴结合局部围针治疗带状疱疹后遗神经痛的疗效优于西药,但尚需要更多高质量的随机双盲对照试验来进一步证实其疗效.

中国组织工程研究分期目录
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