缺血再灌注对大鼠心室肌细胞钠离子电流的影响

目的:探讨大鼠心室肌细胞的分离方法以及缺血再灌注后钠通道电流的异常变化.方法:实验于2003-08/2004-06在白求恩国际和平医院心内科中心实验室完成.选择健康成年一级Wistar大鼠30只,随机分为3组,即正常对照组、缺血10min再灌组和缺血30min再灌组,每组10只.采用Langendorff灌流装置,经主动脉根部逆行灌流K-H液使离体大鼠心脏复跳,继以4℃St.Thomas液于主动脉根部逆行灌注,使心脏分别停跳10 min,30 min,再以K-H液复灌使心脏复跳稳定,建立模拟心脏外科体外循环缺血再灌注动物模型.采用酶解技术分离大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录方法,观察记录心室肌细胞钠通道电流的变化.结果:纳入30只大鼠,各组以获得离子电流的实际细胞数作为统计学样本量[正常对照组(n=12),缺血10 min再灌组(n=10),缺血30 min再灌组(n=10)].①心肌细胞存活率及形态:存活率约70%～80%.细胞形态呈长杆状、横纹清晰、膜良好.②缺血再灌注后心室肌细胞钠通道电流密度变化:缺血10 min再灌组的钠通道电流密度峰值(-20 mV)显著低于正常对照组[(6.51±1.06),(13.55±2.33)pA/pF(t=3.126,P＜0.01)];缺血30 min再灌组的钠通道电流密度峰值显著高于对照组[(41.27±4.43)pA/pF(t=5.437,P＜0.01)].结论:在模拟心脏外科体外循环缺血再灌注环境下可分离出高存活率的心室肌细胞,具有很好的电生理活性.钠通道电流于缺血/再灌注不同时间的异常变化,可导致钙超载,产生再灌注损伤.

男性2型糖尿病患者血清睾酮、雌二醇、性激素结合蛋白的变化

目的:观察男性2型糖尿病患者血清总睾酮、总雌二醇、性激素结合蛋白的变化,探讨该种变化与男性2型糖尿病及其并发症发生的关系.方法:①选择2003-10/2005-06在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所门诊就诊及住院男性2型糖尿病患者89例为男性糖尿病组,年龄40～60岁.选择同期本院健康体检男性66人为男性对照组,年龄40～60岁.均对检测项目知情同意.②采用葡萄糖氧化酶法测定血糖,采用酶联免疫吸附法测定血清总睾酮、总雌二醇、性激素结合蛋白、胰岛素水平.③计量资料差异分析采用t检验;胰岛素与性激素的关系用直线相关分析.结果:男性2型糖尿病患者89例,健康男性66人均进入结果分析.①男性2型糖尿病组空腹血糖、餐后120 min血糖、空腹胰岛素和餐后120 min胰岛素、血清总雌二醇、性激素结合蛋白水平均明显高于男性对照组(P＜0.05).男性糖尿病组血清总睾酮水平明显低于男性对照组(P＜0.05).②血清空腹胰岛素、餐后120 min胰岛素与总睾酮、总雌二醇、性激素结合蛋白无明显相关性(P＞0.05).结论:①血浆性激素是反映男性2型糖尿病患者代谢变化的指标之一.②男性2型糖尿病患者人体内存在性激素分泌功能紊乱,其改变可对糖尿病及其并发症的发生发展起重要作用.

体外全波段紫外线照射对T细胞功能及表面形态的影响

目的:观察体外全波段紫外线照射对T细胞活性E-玫瑰花环形成率、活力和表面形态的影响,以探讨T细胞表面形态和细胞功能之间的关系.方法:实验于2003-09/2004-10在青岛大学医学院附属医院和青岛疗养院康复部完成.于晨间取20～40岁健康人空腹肘部静脉血,体外全波段紫外线照射T细胞混悬液,每个平皿加T细胞悬液O.4 mL,每组10例.共分为4组,分别为照射8,16,32 s组(照射距液面0.6 cm)和对照组,对照组不予照射.于照射后1 h测定T细胞活性E-玫瑰花环形成率和活力,扫描电镜观察T细胞表面形态.结果:①各组T细胞活性E-玫瑰花环形成率比较:照射8 s,16 s,32 s组均显著小于对照组[0.456±0.016,0.339±0.017,0.211±0.012,0.635±0.021(P＜0.01)].②各组T细胞活力比较:照射8 s,16 s,32 s组均显著小于对照组[1.223±0.018,1.129±0.030,0.916±0.021,1.285±0.016(P＜0.01)].③各组T细胞表面形态比较:对照组T细胞表面微绒毛较多,长短不一,粗细均等.照射16 s组多数T细胞表面光滑,微绒毛消失,少数T细胞周边有少数突起.结论:体外全波段紫外线照射T细胞可降低其活性E-玫瑰花环形成率,且与照射的剂量有关.T细胞活性E-玫瑰花环形成率降低时,T细胞表面的微绒毛减少甚至全部消失,T细胞功能与其表面微绒毛数量有关,还可能与其活力降低有关.

甲钴胺对实验性糖尿病大鼠组织胰岛素样生长因子1基因表达及周围神经病变的影响

背景:糖尿病状态造成胰岛素样生长因子1基因表达异常,后者参与糖尿病周围神经病变的发生、发展.目的:探讨单剂量甲钴胺预防实验性糖尿病周围神经病变的分子学机制.设计:分组对照动物实验.单位:南京医科大学第一附属医院内分泌科.材料:实验于2001-02/2002-01在南京医科大学动物实验中心完成.选用清洁级SD雄性大鼠80只.方法:①取64只大鼠进行造模:四氧嘧啶溶于生理盐水,以240 mg/kg剂量腹腔注射,48 h后,取20 mmol/L以上者为糖尿病模型.②取16只作为正常对照组,不造成糖尿病模型,仅腹腔注射等量生理盐水.③将造模成功的64只大鼠中采用猪短效和长效胰岛素按2:1比例每日皮下注射后根据血糖水平不同分为2组:一组血糖控制较好为胰岛素治疗1组和血糖控制较差为胰岛素治疗2组,每组32只.各组取16只给予给予甲钴胺500 μg/(kg·d)肌注,分为甲钴胺+胰岛素治疗1组和甲钴胺+胰岛素治疗2组.其余每组16只用作胰岛素治疗组对照.④于实验开始时及造模成功后2周,2,3个月测定动物体质量为初质量和末质量;血糖测定用葡萄糖氧化酶法;血清果糖胺测定采用1-脱氧-1-吗咛.⑤采用VikingⅣ诱发电位仪测定诱发电位出现的波幅和感觉及运动神经传导速度.反转录聚合酶链反应法半定量分析胰岛素样生长因子1 mRNA表达.采用酶联免疫吸附分析法测定神经组织胰岛素样生长因子1肽含量.⑥组间差异采用单析因方差分析. 主要观察指标:①各组大鼠各实验阶段神经组织胰岛素样生长因子1mRNA、胰岛素样生长因子1肽含量,神经电生理变化.②各组大鼠各实验阶段糖代谢指标及体质量比较.结果:实验过程中糖尿病感染或急性并发症死亡3只,终进入结果分析77只.①体质量及血糖代谢变化:糖尿病成模后,甲钴胺+胰岛素治疗组分别与胰岛素治疗组血糖、果糖胺等血糖代谢指标差异不明显,体质量增长较正常对照组延缓趋势一致.②组织胰岛素样生长因子1 mRNA表达及其肽含量变化:甲钴胺+胰岛素治疗组组织胰岛素样生长因子ⅠmRNA含量均不同程度高于胰岛素治疗组(P＜0.05～0.01)..糖尿病成模后2周时,坐骨神经甲钴胺+胰岛素治疗1组组织胰岛素样生长因子1mRNA含量显著高于胰岛素治疗1组(P＜0.05),与正常对照组差异不明显;甲钴胺+胰岛素治疗2组明显高于胰岛素治疗2组(P＜0.05),但低于正常对照组(P＜0.01);病程2个月时,甲钴胺+胰岛素治疗组明显低于对照组,高于相应胰岛素治疗组(P＜0.05～0.01).病程3个月时,甲钴胺+胰岛素治疗2组神经组织与胰岛素治疗2组无差异.甲钴胺对组织胰岛素样生长因子1肽含量变化的影响趋势与对胰岛素样生长因子1 mRNA基本平行.③神经电生理指标变化:病程2和3个月时,甲钴胺+胰岛素治疗1组感觉和运动神经传导速度及波幅明显高于胰岛素治疗1组同期(P＜0.05);病程2个月时,甲钴胺+胰岛素治疗2组感觉神经传导速度及波幅基本明显高于胰岛素治疗2组(运动神经传导速度除外,P＜0.05).病程3个月时,甲钴胺+胰岛素治疗2组和甲钴胺+胰岛素治疗2组感觉和运动神经传导速度及波幅明显低于正常对照组(P＜0.05～0.01).结论:①甲钴胺对糖尿病的血糖水平无显著影响.②甲钴胺可以通过影响实验性糖尿病大鼠组织胰岛素样生长因子1基因表达预防糖尿病外周神经病变的发生.③血糖控制较好结合甲钴胺治疗能更有效预防糖尿病外周神经病变.

应用基因芯片技术评估卡托普利干预后糖尿病性心肌病大鼠基因谱的变化

目的:比较对照组和干预治疗组大鼠心肌组织中基因表达的差异,探讨卡托普利保护心肌组织的作用.方法:①实验于2002-08/2003-12在福建省立医院内分泌科完成.选用雄性SD大鼠12只.在空腹12 h后按60 mg/kg腹腔注入链脲佐菌素,每天注射1次,连续注射10周.5周后血糖浓度持续＞16.6 mmol/L,表明已建立糖尿病模型.②10周后取大鼠部分心肌组织做电镜检查,发现线粒体变性,肌纤维收缩带形成,表明已建立糖尿病性心肌病动物模型.③将12只糖尿病性心肌病大鼠随机分为2组:对照组和干预组,每组6只.干预组给予按1.5 mg/(kg·d)给予卡托普利口服治疗15周;对照组正常饲养.两组均干预15周,然后将大鼠处死,取心肌组织作基因芯片检查.④经反转录分别用Cy3-dUTP和Cy5-dUTP标记对照组和干预组mRNA,获得两组动物来源的cDNA探针.cDNA探针与基因表达谱芯片杂交,结果由扫描仪扫描并用ImaGene3.0软件进行分析统计.以比率(Cy5/Cy3)＞2为表达上调基因,以Cy5/Cy3＜1为表达下调基因.结果:大鼠12只均进入结果分析.①线粒体电子质子偶联和氧化磷酸化相关基因(反映心肌的能量供应)--质子泵基因、细胞色素P450,细胞色素C氧化酶亚单位Va、辅酶Q1b亚单位、泛素特异蛋白酶2 Cy5与Cy3比率分别为2.684,2.387,3.124,3.213,3.234;肌动蛋白(在心肌收缩过程中起重要作用)基因Cy5与Cy3比率为2.277,线粒体电子质子偶联和氧化磷酸化相关基因、肌动蛋白基因在干预组中表达明显上调.②二甲基精氨酸水解酶(可产生一氧化氮,导致线粒体内氧自由基、过氧亚硝酸阴离子生成增加,导致呼吸链损伤)基因Cy5与Cy3比率为0.271,整合素b1(与心肌间质纤维化有关)基因Cy5与Cy3比率为0.286.二甲基精氨酸水解酶基因、整合素b1基因在干预组中表达明显下调.结论:①卡托普利通过增强线粒体电子质子偶联和氧化磷酸化相关基因的表达,促进ATP的产生,保证了病变心肌的能量供应.②卡托普利可通过上调肌动蛋白基因表达,增强病变心肌的收缩力.③卡托普利可下调二甲基精氨酸水解酶基因表达,减少一氧化氮的产生,防止呼吸链的损伤.④卡托普利通过抑制整合素b1的表达,抑制心肌间质纤维化.

热休克蛋白70对缺血再灌注未成熟心肌间质的保护作用

目的:观察热休克蛋白70在未成熟心肌中的表达及对缺血再灌注未成熟心肌间质的影响.方法:①实验于2001-12/2002-06在华中科技大学同济医学院药理实验室完成.选用出生14～21 d的健康新生长耳大白兔12只.随机将兔分为2组:对照组和实验组,每组6只.②对照组:腹腔注射生理盐水0.4 mL,注射后24 h取体外心脏,常规建立Langendorff体外心脏灌注模型,灌注15 min转为工作心15 min后停灌45 min,恢复灌注15 min改为工作心30min;实验组:腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素,24 h后取体外心脏,方法同对照组.③采用蛋白印迹法测定心肌细胞中热休克蛋白70含量.按公式计算羟脯氨酸含量(样本A值/标准A值×10×稀释倍数×1/组织质量).采用均相放射免疫竞争法直接测定血浆内皮素1水平.④计量资料差异比较采用t检验.结果:兔12只均进入结果分析.①实验组心肌细胞中热休克蛋白70含量(A值)明显高于对照组(P＜0.01).②实验组兔心肌羟脯氨酸含量明显高于对照组(P＜0.01),血清内皮素1水平明显低于对照组(P＜0.01).结论:腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素诱导未成熟大白兔心脏热休克蛋白70表达,在注射24 h后热休克蛋白70表达明显增多,热休克蛋白70可明显减轻未成熟心肌内皮素的释放和心肌胶原的降解.

中缝背核介导缰核对大鼠呼吸和行为的影响

目的:观察缰核-中缝背核下行通路对大鼠呼吸、血压的影响.方法:实验于2004-10/12在吉林大学基础医学院生理学实验室完成.取Wistar大鼠25只随机分为两组:①电刺激缰核组(n=17):经气管插管,采用不锈钢同心圆刺激电极电刺激缰核,电极外壳直径为0.4mm,内芯直径为0.2mm,两极在生理盐水中直流电阻为40～60 kΩ.刺激强度为0.10～0.25 mA,刺激持续时间5 s.②电损毁中缝背核组(n=8):采用刺激强度为0.05 mA的直流电刺激损毁中缝背核.在损毁中缝背核前后,刺激缰核,方法同前.应用胸廓皮肤连接张力换能器及股动脉插管的方法记录大鼠刺激缰核前后的呼吸频率及动脉血压.结果:25只大鼠进入结果分析.①电刺激缰核组大鼠刺激缰核后呼吸频率较刺激前加快[146.7±47.5),(78.1±12.6)次/min,P＜0.01],动脉血压较刺激前升高[(141.4±18.0),(89.5±10.5)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),P＜0.001].②电损毁中缝背核组大鼠损毁中缝背核后刺激缰核,呼吸频率增加值低于损毁前[(28.5±18.9),(84.5±32.5)次/min,P＜0.05],动脉血压升高值也明显低于损毁前[(24.1±14.3),(50.4±18.8)mm Hg,P＜0.01].呼吸频率增加效应被阻断66.8%.升压反应被阻断53.6%.结论:缰核对大鼠呼吸运动和心血管活动具有调节作用.缰核的某些功能活动可能通过中缝背核下行通路实现,中缝背核也能介导缰核引起的呼吸和心血管效应,在呼吸和心血管活动调节中,缰核和中缝背核两者互为条件、互为依赖、相互影响.

凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸诱导肺癌细胞株凋亡的实验观察

目的:探讨凋亡抑制基因survivin反义寡核苷酸单用或联用bcl-2反义寡核苷酸对肺癌细胞株的作用,探讨其在抗癌方面的作用.方法:①实验于2002-08/2003-04在蚌埠医学院免疫学实验室完成.将对数生长期NCI-H446细胞分为6组:空白对照组,脂质体10mg/L组(仅加空脂质体),NSODN 500nmol/L组(该3组均为对照组),survivin反义寡核苷酸500 nmoL/L组,bcl-2反义寡核苷酸5 μmol/L,survivin反义寡核苷酸500nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5 μmol/L组(分别在脂质体介导下转染不同寡核苷酸,48h后收取细胞进行以下检测).②在脂质体介导下,以survivin的反义寡核苷酸作用于肺癌细胞株NCI-H446和SPC-A1,于72 h用反转录聚合酶链反应检测survivin mRNA表达.凋亡指数=(静止期/DNA合成前期)占整个细胞周期的百分比;增殖指数=(DNA复制期+合成后期/有丝分裂期)占整个细胞周期的百分比.②survivin反义寡核苷酸单独或联合bcl-2反义寡核苷酸作用NCI-H446后,用四甲基偶氮唑盐法检测细胞生长抑制率并计算两药相互作用指数,锥虫蓝拒染实验检测细胞死亡率.③计量资料差异性比较采用方差分析和q检验.结果:①两种肺癌细胞株皆表达survivin基因.survivin反义寡核苷酸作用细胞株后,出现生长抑制和细胞凋亡,细胞survivin mRNA明显下调,反义寡核苷酸500nmol/L作用72 h后NCI-H446和SPC-A1细胞survivin mRNA抑制率分别达62.72%和67.43%.②四甲基偶氮唑盐法检测结果显示,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸单独应用对NCI-H446细胞均有生长抑制作用;联合应用survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸的细胞生长抑制率为64.9%,优于单独应用(单用bcl-2反义寡核苷酸为34.2%)(P＜0.01),两药相互作用指数为0.708.锥虫蓝拒染实验显示,survivin反义寡核苷酸500 nmol/L+bcl-2反义寡核苷酸5μmol/L组细胞死亡率为62.1%,高于两药单用时的31.4%和41.4%.流式细胞仪检测凋亡显示,与各对照组相比,survivin反义寡核苷酸和bcl-2反义寡核苷酸均可诱导细胞凋亡,凋亡率分别为43.6%和30.7%,两者联用凋亡率提高到58.6%(P＜0.01).结论:①survivin反义寡核苷酸能抑制肺癌细胞株survivin基因表达,并诱导细胞凋亡和抑制生长.②survivin反义寡核苷酸联合bcl-2反义寡核苷酸具有显著协同抗癌作用.

缺氧对体外培养动脉内皮细胞中诱生型一氧化氮合酶表达和细胞形态的影响

目的:观察体外培养的动脉内皮细胞在缺氧条件下诱生型一氧化氮合酶的表达和细胞形态的变化情况.方法:实验于2004-09/11在哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室实验室完成.原代培养牛动脉内皮细胞,将培养的内皮细胞随机分为5组,即常氧组、缺氧0.5,1,2,3 h组.每组切片选取12个400倍视野进行观察.诱生型一氧化氮合酶的表达采用免疫组织化学法测定.用计算机图文分析系统对各组切片内皮细胞诱生型一氧化氮合酶阳性表达的平均积分吸光度和缺氧后的细胞形态进行分析.结果:①缺氧1 h,2 h,3 h组的平均积分吸光度显著高于常氧组[0.100 8±0.019,0.117 9±0.037,0.196 4±0.023,0.073 5±0.032(t=-10.364～2.133,P＜0.05～0.01)].②缺氧后细胞的大直径和小直径均变小,核浆比例增大,细胞数量减少.结论:缺氧后动脉内皮细胞的生长数量和形态发生明显变化,使其屏障作用降低;同时诱生型一氧化氮合酶表达的增加提示诱生型一氧化氮合酶在缺氧后内皮细胞的损伤中发挥重要作用.

胰岛素增敏剂对糖尿病患者胰岛素受体激酶的影响

目的:针对糖尿病患者胰岛素受体缺陷导致的胰岛素抵抗,观察胰岛素增敏剂罗格列酮和吡格列酮对2型糖尿病患者胰岛素受体蛋白酪氨酸激酶活性的影响.方法:实验于2001-10/2003-03在东南大学基础医学院生化教研室完成.应用WGA-Sepharose 4B亲和层析方法分离纯化来自正常人16例、糖尿病患者16例、肥胖症患者22例3组人群的血红细胞膜胰岛素受体,分别在罗格列酮或吡格列酮作用下应用同位素示踪法测定受体蛋白酪氨酸激酶活性的变化,激酶活性用多肽底物磷酸化的程度表示.结果:16例正常人,16例糖尿病患者,22例肥胖症患者的血样均进入结果分析.①正常人、糖尿病患者、肥胖症患者3组红细胞膜受体蛋白酪氨酸激酶活性均呈胰岛素剂量依赖关系.②与正常对照组相比[(781.86±120.23)fmol/(mg·min)],糖尿病组与肥胖症组的红细胞膜蛋白酪氨酸激酶和纯化胰岛素受体蛋白酪氨酸激酶的活性均显著降低[(230.09±35.87),(253.57±37.38)fmol/(mg·min)].吡格列酮和罗格列酮均可以明显改善糖尿病患者和肥胖症患者的纯化胰岛素受体蛋白酪氨酸激酶的活性[(830.63±166.96),(800.79±153.45)fmol/(mg·min),P＜0.01:(664.92±119.33),(567.98±103.47)fmol/(mg·min),P＜0.01l.结论:罗格列酮和吡格列酮可能部分通过直接激活胰岛素受体蛋白酪氨酸激酶的活性来改善胰岛素敏感性.

慢性阻塞性肺疾病患者外周血T淋巴细胞亚群与肺功能的相关性

目的:通过对慢性阻塞性肺疾病T淋巴细胞亚群与肺功能测定,了解两者间的相关性.方法:①选择2001-11/2002-1l杭州市中医院呼吸科呼吸科住院及门诊就诊慢性阻塞性肺疾病患者50例为患者组.其中缓解期患者20例,男13例,女7例;急性发作期30例,男23例,女7例.选择与慢性阻塞性肺疾病患者年龄匹配的同期本院健康体检者l0人为对照组,男6例,女4例.纳入对象均对检测项目知情同意.②采用流式细胞仪检测淋巴细胞群中标记的CD4细胞百分比,CD8细胞百分比,并计算CD4与CD8的比值.③采用肺功能仪测定肺功能(第1秒用力呼气量、第1秒用力呼气量占预计值的百分比、大用力呼气中段流量占预计值百分比).④组间计量资料差异比较:小样本,正态,方差齐采用t检验;小样本,非正态或方差不齐采用t'检验),相关性处理采用直线相关分析.结果:慢性阻塞性肺疾病患者50例和健康者10人均进入结果分析.①在急性发作期及缓解期慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD4细胞所占百分比明显低于对照组(t=4.87,9.70,＜0.05,0.01),而急性发作期慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD8细胞所占百分比明显高于对照组和缓解期患者(t=2.72,2.07,＜0.05),发作期慢性阻塞性肺疾病患者外周血CD4/CD8和大用力呼气中段流量明显低于缓解期(t=3.04,t'=16.9,＜0.05,0.01),第1秒用力呼气量占预计值百分比与缓解期差异不明显.大用力呼气中段流量与急性期CD8细胞百分比呈显著负相关(r=-0.431,P＜0.05),与CD4/CD8呈显著正相关(r=0.564,P＜0.01).结论:CD8细胞与慢性阻塞性肺疾病患者急性发作期小气道功能密切相关.

少加样高收效制备创伤修复剂纤维粘连蛋白的方法

背景:纤维粘连蛋白不仅对细胞起支架作用,而且是细胞间重要的连结因子,具有类似调理素作用,可促进单核吞噬细胞系的吞噬功能,在炎症和创伤中起修复作用.目的:以新鲜健康男性"O"型血浆为原料,为制备纤维蛋白结合素筛选出加样量小,方法简便、收得率高的纯化方法.设计:开放性实验.单位:广州市红十字会医院暨南大学第四附属医院创伤外科研究所.材料:实验于2000-07/2002-07在广州市红十字会医院创伤外科研究所完成.材料主要包括新鲜健康男性"O"型血浆、明胶、CNBr-activatedSepharose 4B、交联葡聚糖G-25、尿素、三羟甲基氨基甲烷等.方法:用明胶与溴化氰活化琼脂糖珠偶联的亲和层析柱对纤维蛋白结合素进行纯化.①加人血浆:取新鲜健康男性O型血浆150 mL,每次向柱内加入25 mL,停留20 min,流速3.5 mL/min.②去杂蛋白:用pH 7.5的Tris-柠檬酸钠平衡液洗柱,洗至流出液280nm下吸光度值＜0.02,再用含1 mol/L NaCl的Tris-柠檬酸钠洗去其他杂蛋白.③收集纤维蛋白结合素:用3 mol/L脲-Tris洗脱液洗柱,收集纤维蛋白结合素.④纤维蛋白结合素收集液去尿素:取纤维蛋白结合素的收集液,过SephadeG-25,去除尿素.⑤除菌:用0.22μm滤菌器过滤除菌.主要观察指标:①十二烷基黄酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果.②停留时间对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响.③加入血浆量对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响.结果:①十二烷基黄酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果:分离胶浓度为7%,浓缩胶浓度为3%,纤维蛋白结合素电泳结果为单一蛋白区带.②停留时间对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响:血浆加样量为150 mL,柱内不停留和停留时间为10,20,30 min时纤维蛋白结合素收得率分别是(65.24±3.45)%,(74.77±4.05)%,(86.99±4.10)%,(80.47±3.75)%.③加入血浆量对提纯纤维蛋白结合素收得率的影响:柱内停留时间为20min时,血浆加样量为100,130,150,180mL时纤维蛋白结合素收得率分别是(72.56±3.63)%,(77.61±3.14)%,(86.99±4.12)%,(74.67±3.05)%.结论:在明胶亲和柱体积不变的条件下,制备纤维蛋白结合素的量与血浆加样量、血浆在柱内停留时间密切相关.明胶亲和柱的血浆佳加样量为150 mL,每次血浆在柱内停留时间应为20 min,此法制备的纤维蛋白结合素加样量小,收得率高.

亚低温治疗对实验性脑梗死大鼠心脏功能的影响

背景:实施亚低温可能对全身各重要脏器的功能和代谢产生一定影响,这些影响有利还是有弊,需要进一步研究考证.目的:在亚低温治疗脑梗死的同时测定心脏的能量储备,心电图,观察其超微结构,从而探讨亚低温对心脏功能的影响.设计:随机对照实验.单位:武汉大学人民医院神经内科.材料:实验在武汉大学人民医院神经内科实验室完成.选择SD大鼠58只,随机分为假手术组10只,脑梗死后常温组(简称常温组)24只,脑梗死后亚低温治疗组(简称亚低温组)24只.方法:常温组、亚低温组采用线栓法制作大脑中动脉梗死模型,假手术组仅切开皮肤及结扎血管,不穿线入大脑中动脉.亚低温组动物置于4℃环境中将动物肛温控制在(34±1.0)℃;假手术组、常温组动物置于室温(20℃)环境中.12 h后测定心肌组织的三磷酸腺苷、二磷酸腺苷和磷酸腺苷值及能量储备值,并于电镜下观察心肌超微结构改变.主要观察指标:①各组大鼠心肌能量代谢的改变.②各组大鼠心电生理改变.③各组大鼠心肌超微结构.结果:58大鼠均进入结果分析.①缺血后12 h时常温组和亚低温组大鼠心肌三磷酸腺苷、二磷酸腺苷、能量储备值均低于假手术组(P＜0.01),但亚低温组的三磷酸腺苷和能量储备值却高于常温组(P＜0.01).②常温组和亚低温组异常心电图发生率差异无显著性意义(P＞0.05);但亚低温组的心率明显低于常温组[(290.92±44.18),(472.20±12.79)次/min,P＜0.01],有3只大鼠的心率低于150次/min.③超微结构显示常温组和亚低温组心肌均有缺血性损伤,但亚低温组的损伤较常温组轻.结论:全身亚低温治疗脑梗死时可显著减缓心率,改善心肌的能量储备,减轻脑梗死引起的心肌缺血,不会增加心电图异常的发生率.

缬沙坦和盐酸贝那普利对心力衰竭患者心室重塑及心功能的影响

目的:观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂缬沙坦和血管紧张素转换酶抑制剂盐酸贝那普利对心力衰竭患者心室重塑及心功能的影响.方法:①选择2004-03/2004-08在朝阳市第二医院心内科住院由冠状动脉硬化性心脏病、高血压心脏病及瓣膜疾病所致心力衰竭患者100例.均对实施方案知情同意.随机将100例患者分3组:对照组20例,缬沙坦组40例,盐酸贝那普利组40例.②所有患者在无禁忌证的条件下均接受心力衰竭的常规治疗.缬沙坦组加用缬沙坦80 mg/次,1次/d,口服;盐酸贝那普利组加用盐酸贝那普利10 mg,1次/d,口服,连续16周.③于治疗前及治疗4,16周后进行心力衰竭临床症状评分(总分0～13分;休息状态下呼吸困难4分;端坐呼吸4分;夜间阵发性呼吸困难,不能平卧2分;平地走路困难2分;活动后呼吸困难1分)和心功能分级评估.④应用彩色多普勒超声诊断仪,于用药前、治疗后4周、治疗后16周测定纳入对象心功能和心室重塑指标(左室舒张末期室间隔厚度、左室后壁厚度、左室舒张末期容积、左室收缩末期容积、左室射血分数).左室质量指数=左室质量/体表面积.⑤计量资料组内差异比较采用配对t检验,多组间比较采用单因素方差分析.结果:心力衰竭患者100例均进入结果分析.①心力衰竭临床症状评分和心功能级别:治疗16周后,缬沙坦组和盐酸贝那普利组明显低于对照组和治疗前(P＜0.05).②左室收缩末期容积、左室舒张末期容积:治疗16周后,缬沙坦组和盐酸贝那普利组低于对照组和治疗前(P＜0.05).③左室射血分数:治疗16周后,缬沙坦组和盐酸贝那普利组明显高于治疗前和对照组(P＜0.05).④室间隔厚度、左室后壁厚度、左室质量指数:治疗16周后,缬沙坦组和盐酸贝那普利组明显低于对照组和治疗前(P＜0.05).结论:缬沙坦和盐酸贝那普利均能改善心力衰竭患者的心功能,并能逆转心室重塑.

急性心肌缺血损伤中过氧化物酶体增殖物激活受体α活化与肿瘤坏死因子α表达的关系

目的:观察预先应用过氧化物酶体增殖物激活受体α的激动剂非诺贝特活化过氧化物酶体增殖物激活受体α,对急性心肌缺血性损伤大鼠血清肿瘤坏死因子α的影响.方法:实验于2004-06/2005-05在哈尔滨医科大学克山病研究所完成.取30只健康纯系雄性Wistar大鼠随机分为异丙肾上腺素组、非诺贝特组和正常对照组3组,每组10只.①非诺贝特溶于30 g/L阿拉伯树胶中制成混悬液,非诺贝特组给予非诺贝特80 mg/kg灌胃,其他两组给予等量的30 g/L阿拉伯树胶灌胃,1次/d,,共7 d.②末次灌胃后1 h异丙肾上腺素组和非诺贝特组给予异丙肾上腺素5 mg/kg腹腔注射复制急性心肌缺血损伤模型;正常对照组给予等量的生理盐水腹腔注射.异丙肾上腺素注射24 h,麻醉后取血清和部分心脏,用酶联免疫吸附实验测定血清中肿瘤坏死因子α的浓度,用反转录-聚合酶链反应测定心肌组织中过氧化物酶体增殖物激活受体α mRNA表达水平.结果:30只大鼠进入结果分析.①血清中肿瘤坏死因子α的浓度:异丙肾上腺素组和非诺贝特组高于正常对照组[(301.72±2.49),(164.29±3.60),(16.35±2.37)ng/L,P＜0.01],但非诺贝特组低于异丙肾上腺素组(P＜0.01).②心肌组织中过氧化物酶体增殖物激活受体α mRNA表达水平:异丙肾上腺素组和非诺贝特组低于正常对照组(0.735 5±0.045 5,0.886 3±0.032 2,0.926 7±0.031 9,P＜0.01);但非诺贝特组高于异丙肾上腺素组(P＜0.01).结论:过氧化物酶体增殖物激活受体α活化后参与急性心肌缺血性损伤中的炎症反应,显著抑制肿瘤坏死因子α表达.提示非诺贝特对心肌缺血有一定保护作用.

糖尿病性视网膜病变与血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平的关系

目的:通过测定正常人、糖尿病性视网膜病变不同发展时期患者血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平,探讨肿瘤坏死因子α、白细胞介素6与糖尿病性视网膜病变的关系.方法:糖尿病组63例为2004-02/06收治的糖尿病患者,按眼底荧光造影检查结果分为无视网膜病变组24例,单纯性视网膜病变组25例,增殖性视网膜病变组14例.采用放射免疫分析法检测血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素6及胰岛素水平,并进行相关性分析.以同期健康体检的20名正常人为正常对照组.结果:83名受试者全部进入结果分析.①血清肿瘤坏死因子α水平:糖尿病组高于正常对照组[(1.81±0.36),(1.19±0.30)μg/L,P＜0.05],增殖性视网膜病变组高于无视网膜病变组和单纯性视网膜病变组(P＜0.05).②白细胞介素6水平:糖尿病组高于正常对照组[(168.81±33.60),(110.47±30.26)ng/L,P＜0.05],增殖性视网膜病变组高于无视网膜病变组和单纯性视网膜病变组(P＜0.05).③相关性分析结果:糖尿病组血清肿瘤坏死因子α与白细胞介素6水平呈正相关(r=0.623,P＜0.05),血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6分别与糖化血红蛋白水平呈正相关(r=0.504,0.528,P＜0.05).结论:①糖尿病患者血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平增高.②随着糖尿病性视网膜病变程度的加重,血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平逐渐升高,提示其与糖尿病性视网膜病变,特别是增殖性糖尿病视网膜病变的发生、发展有关.

创伤患者纤维蛋白单体的聚合功能

背景:创伤可以引发机体高凝血状态,并可导致显微外科手术失败.目的:观察创伤患者治疗前后纤维蛋白单体聚合功能的变化,探索预测创伤后高凝状态和血栓形成的有效辅助手段.设计:病例-对照观察,前后对照观察.单位:华中科技大学同济医学院协和医院血栓与止血研究室.对象:创伤组受检病例为2001-05/2002-01华中科技大学同济医学院协和医院住院的创伤患者34例,男18例,女16例,年龄8～65岁;正常对照组为健康体检者96例,男50例,女46例,年龄21～68岁.所有受检者均无凝血障碍病史,无全身性与凝血相关疾病.方法:血浆纤维蛋白单体聚合功能采用血浆纤维蛋白单体聚合功能测定系统进行测定.在蕲蛇毒的作用下,纤维蛋白原转变为纤维蛋白单体并发生聚合反应,伴随纤维蛋白单体聚合反应发生的浊度变化,用光度仪在340 nm连续进行监测,并将电信号输入微机进行分析.创伤组分别于患者创伤后入院时和入院后经过临床清创、手术、缝合、补液及应用抗生素后第3天采集静脉血,测定纤维蛋白单体聚合功能.主要观察指标:①纤维蛋白单体聚合速率(反映血浆纤维蛋白原浓度和功能的综合参数).②大吸光度(反映标本中凝固性血浆纤维蛋白原的量).③纤维蛋白单体聚合速率与大吸光度的比值(反映血浆纤维蛋白原分子的聚合功能).结果:全体受检者均完成相应检测并纳入数据统计中.①创伤组患者纤维蛋白单体聚合反应速率、纤维蛋白原含量、纤维蛋白单体聚合速率与大吸光度的比值均显著高于正常对照组[创伤组:0.87±0.31,(5.81±3.22)g/L,4.61±0.97;正常对照组:0.61±0.15,(3.36±1.02)g/L,3.93±0.68,P＜0.01].②治疗3 d后,尽管纤维蛋白单体聚合速率、纤维蛋白原含量有所下降,但仍高于正常组[3.93±0.68,(4.21±1.93)g/L],而纤维蛋白单体聚合速率与大吸光度的比值无改变(4.68±1.19).结论:创伤患者纤维蛋白原水平增高功能增强.创伤患者机体处于高凝状态,有血栓形成趋势.纤维蛋白单体聚合功能测定可作为创伤后预测高凝状态和血栓形成的有效辅助手段.

体外延长胰岛培养时间的实验

目的:分离纯化大鼠胰岛,探索胰岛体外长期培养的新方法,为胰岛移植治疗糖尿病提供数量多、质量好的胰岛.方法:实验于2002-12/2004-03在哈尔滨医科大学组织工程与发育生物学研究室完成.①取16～22 d龄,体质量80 g的雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞.②采用改良的胰管内顺行灌注胶原酶消化体质量200～250 g的Wistar大鼠胰腺,Ficoll不连续浓度梯度纯化,手挑法检出全部胰岛,用双硫腙鉴定胰岛.③分为胰岛单独培养组和胰岛与支持细胞联合培养组,应用倒置显微镜和荧光显微镜观察单独培养组和联合培养组的胰岛形态和存活率,在培养的第3,7,14,28天用放射免疫法测定胰岛素分泌量,并通过胰岛素释放实验计算刺激指数.结果:①胰岛的回收率:回收率为53.6%,纯度为100%.②两组胰岛存活率的比较:联合培养组的胰岛存活率显著高于单独培养组[培养14 d:84%,3%;培养28 d:82%,0(P＜0.01)].③两组累积胰岛素分泌量及刺激指数比较:联合培养组胰岛素分泌量显著高于单独培养组[培养7 d:(105.0±11.6),(48.0±5.3)mIU/L(P＜0.01)],刺激指数也显著高于单独培养组(培养7 d:6.1±0.7,1.1±0.2)(P＜0.01).结论:通过胆总管顺行注入胶原酶进行消化,Ficoll不连续密度梯度离心法进行胰岛纯化,体视镜下手挑胰岛,胰岛的回收率和纯度较高.睾丸支持细胞与胰岛联合培养可以促进胰岛生长,显著延长存活时间,是一种较好的体外长期培养胰岛的方法.

慢性阻塞性肺疾病患者大通气量推算公式的建立

目的:探求更科学、合理反映慢性阻塞性肺疾病患者真实情况的大通气量的推算公式.方法:①选择2003-03/2004-04四川大学华西医院呼吸内科门诊的稳定期慢性阻塞性肺疾病患者721例.均对实验目的知情同意.②以慢性阻塞性肺疾病的严重程度分级标准(GOLD方案)将721例慢性阻塞性肺疾病进行分度:轻度慢性阻塞性肺疾病281例(男247例,女34例),中度慢性阻塞性肺疾病316例(男248例,女68例),重度慢性阻塞性肺疾病124例(男87例,女37例).③采用6200型体积描记仪对其行大通气量及大呼气流量-容积曲线测定,以3组慢性阻塞性肺疾病患者实测大通气量与以往采用(以正常人测值所推导)的大通气量推算公式所得间接大通气量相比较;并以慢性阻塞性肺疾病患者肺功能实测值为自变量,实测大通气量为应变量,应用逐步回归法取得中、重度慢性阻塞性肺疾病患者推算大通气量的佳回归公式.④行多样本均数比较的方差分析及直线相关分析.结果:慢性阻塞性肺疾病患者721例均进入结果分析.①轻度慢性阻塞性肺疾病应用以往公式所得结果与实测大通气量较吻合(t=0.349,P=0.727),提示轻度慢性阻塞性肺疾病患者可应用以正常人第1秒用力呼气量推导的大通气量推算公式[大通气量推1(L)=30.2第1秒用力呼气量(L)+10.85,大通气量推2(L)=45.12第1秒用力呼气量(L)-15.85].②正常人第1秒用力呼气量推导的大通气量推算公式不适宜中、重度慢性阻塞性肺疾病患者,推算值与实测值间差异明显(t=11.463～18.067,P=0.000).③在众多肺功能指标中,慢性阻塞性肺疾病患者仍以第1秒用力呼气量与大通气量具有好的相关性(r=-0.922,P=0.000).④推出以中、重度慢性阻塞性肺疾病患者实测第1秒用力呼气量所得大通气量推算公式,中度慢性阻塞性肺疾病患者大通气量推算值公式=40.006第1秒用力呼气量(L)+2.938;重度慢性阻塞性肺疾病患者大通气量推算值公式=34.914第1秒用力呼气量(L)+0.570.上述公式推算值与实测值呈显著正相关(r=0.880～0.884,P＜0.01),两数据间差异不明显(P＞0.05).结论:第1秒用力呼气量既与大小气道功能有关,也与呼吸肌力有关,以慢性阻塞性肺疾病患者实测值第1秒用力呼气量所作的大通气量推算公式比现行的以正常人测值所作大通气量推算公式更符合l临床实际,对不宜进行大通气量测定的严重慢性阻塞性肺疾病患者,可在慢性阻塞性肺疾病分度后,依据此研究建立的慢性阻塞性肺疾病推算公式算出较为接近实测大通气量的间接大通气量,以减少实测时发生气胸的危险性.

原发性高血压及糖尿病患者动脉硬化指数检测的意义

目的:比较单纯高血压与合并高脂血症和冠心病、脑血管疾病高血压患者及单纯糖尿病与糖尿病伴高血压患者间动脉硬化指数差异,并与健康者进行比较,同时分析影响动脉硬化指数的因素.方法:①选择2004-04/2004-09解放军总医院门诊内科患者226例.按照患者的诊断结果将其分为5组:单纯高血压组51例(男25例,女26例),高血压伴高脂血症组53例(男23例,女30例),高血压伴冠心病和/或脑血管病组53例(男22例,女31例),单纯糖尿病组21例(男14例,女7例),糖尿病伴高血压组48例(男27例,女21例).选择同期本院健康体检者50人为健康对照组(男34例,女16例).均对检测项目知情同意.②采用Cardio Vision MS 2000动脉硬化测量仪在上午8:00/11:00检测受试对象的动脉硬化指数、血压、脉压和心率.受试者安静休息5～10min,坐位取右上臂测量,由指定的专业人员操作,测量3次,取其平均值作为后的测定结果.并测量受试对象的身高、体质量,记录一般情况.③所有参数经正态性检验,动脉硬化指数不符合正态分布,余参数均为正态性分布.动脉硬化指数经倒数转换,即动脉硬化指数的倒数,转变为正态分布.采用t检验进行组间比较,Pearson相关系数进行相关分析.结果:单纯高血压患者51例,高血压伴高血脂症患者53例,高血压伴冠心病和/或脑血管病患者53例,单纯糖尿病患者21例,糖尿病伴高血压患者48例,健康体检者50人均进入结果分析.①高血压伴冠心病和/或脑血管病组和糖尿病伴高血压组患者的动脉硬化指数明显高于健康对照组(P＜0.01).高血压组、高血压伴高脂血症组以及糖尿病组的动脉硬化指数与健康对照组比较,差异不明显(P＞0.05).②动脉硬化指数的倒数与年龄、收缩压和脉压呈显著负相关(r=-0.534,-0.544,-0.768,P＜0.01);与舒张压呈显著正相关(r=0.185,P＜0.01),与体质量指数和心率无明显相关性(r=-0.011,0.088,P＞0.05).结论:①动脉硬化指数越高,高血压患者合并冠心病、脑血管疾病的可能性越大.②糖尿病合并高血压可明显促进动脉硬化的发展.③年龄、收缩压、脉压、舒张压大小与动脉硬化指数有关.

宁夏回族自治区两所医院13年回族糖尿病住院患者2696例合并肾脏损害相关因素的回顾性分析

目的:了解宁夏回族糖尿病患者合并肾脏损害的发生率以及相关危险因素,为宁夏回族糖尿病患者预防并发症的发生、发展提供依据.方法:①研究于1990-01/2003-06在宁夏回族自治区两家三级甲等医院完成.患者来自于全区各市县,均为回族糖尿病住院患者.13年中两家医院收住回族糖尿病患者2 696例.②依据糖尿病合并肾脏损害的特点制定统计表格,表格包括患者基本情况、个人史、治疗措施、本次入院情况以及糖尿病合并肾脏损害的情况等项目,其中入院情况及糖尿病合并肾脏损害情况统计如下:基本调查情况包括身高、体质量、体质量指数、吸烟史、血压、空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、肝功能、肾功能,肾脏并发症情况包括早期肾病、临床肾病、肾功不全、尿毒症等情况.本文的统计表是按照中华医学会糖尿病分会设计的糖尿病合并并发症调查表格设计,回顾性登记患者住院病历资料.③对糖尿病合并肾脏损害相关危险因素进行危险性分析.结果:糖尿病患者2 696例均进入结果分析.①1991-01/2003-06宁夏回族住院1型糖尿病和2型糖尿病患者中合并肾脏损害者分别为45例(1.7%)和844例(31.3%).②糖尿病合并肾脏损害相关危险包括病程、空腹血糖、三酰甘油、收缩压、舒张压、吸烟(危险系数分别为3.096,1.184,1.186,1.789,1.182,1.515,P＜0.05～0.01).结论:①1991/2003宁夏回族住院2型糖尿病患者合并肾脏损害发生率高于1型糖尿病患者.②糖尿病合并肾脏损害危险因素包括病程、空腹血糖、三酰甘油、收缩压、舒张压、吸烟.

中国汉族人群维生素D受体基因多态性与糖尿病肾病的易感性

目的:将维生素D受体基因作为糖尿病肾病候选基因,探讨维生素D受体基因FokⅠ酶切位点多态性与中国汉族人群糖尿病肾病之间的关系.方法:①选择2003-06/2004-08在南京医科大学第二附属医院内分泌科及常州市第二人民医院内分泌科住院2型糖尿病患者94例为糖尿病组,男30例,女64例.②根据3次晨尿尿白蛋白与肌肝比值将2型糖尿病患者分为3组:尿白蛋白与肌肝比值＜30 mg/g为正常白蛋白尿组(n=55),30 mg/g≤尿白蛋白与肌肝比值＜300 mg/g者为微量白蛋白尿组(n=32),尿白蛋白与肌肝比值≥300mg/g为大量白蛋白尿组(n=7).微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组合称为异常白蛋白尿组.病程≥5年未合并糖尿病肾病31例为迟发/未发糖尿病肾病组,病程≤1年伴有肾病患者20例为早发糖尿病肾病组.选择同期本院健康体检者77人为对照组,男35人,女42人.纳入对象均为汉族人,均对实验目的知情同意.③采用多聚酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测维生素D受体基因多态性等位基因频率和基因型频率.④对数据先进行正态分布检验,若符合正态分布,两组间计量资料均数的比较,用t检验,多组间比较用F检验.计算维生素D受体基因多态性的基因型频率,确认符合Hardy-Weinberg平衡,计算等位基因频率.等位基因频率和基因型频率分布比较采用x2检验.基因型分布作Hardy-Weinberg吻合度检验.相对风险率(RR)表示疾病与标志性状关联的强度.结果:健康者77例和2型糖尿病患者94例均进入结果分析.①中国汉族人群维生素D受体基因FokⅠ酶切位点有2种等位基因F,f;存在3种基因型FF,Ff,ff.②对照组、正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组间维生素D受体基因型频率分布具有显著性差异(x2=21.137,P=0.002);等位基因频率分布差异具有显著性(x2=366.924,P＜0.001).③正常白蛋白尿组和异常白蛋白尿组维生素D受体基因型频率分布差异有显著性(x2=12.131,P=0.002),等位基因频率分布差异也有显著性(x2=13.884,P=0.000).④等位基因f与异常白蛋白尿的发生相关联(RR=3.57,P＜0.005),具有显著性意义,表明具有等位基因f的2型糖尿病患者发生糖尿病肾病的可能性是没有等位基因f的糖尿病患者的3.57倍.等位基因F与异常白蛋白尿的发生呈负关联(RR=0.21,P＜0.005).结论:维生素D受体基因多态性与糖尿病肾病易感性相关联,等位基因f是糖尿病肾病的易感基因,是早发糖尿病肾病的危险因素.

几种肺功能分级标准对慢性阻塞性肺疾病患者病情评价差异性的分析

目的:通过慢性阻塞性肺疾病患者的肺功能测定数据,比较"慢性阻塞性肺疾病防治全球倡议"之前中华呼吸学会/欧洲呼吸学会、英国胸科学会和美国胸科学会慢性阻塞性肺疾病的分级标准差异,并对这些标准进行评价.方法:①选择1991-01/2001-01在中山大学附属第一医院呼吸专科门诊就诊和住院的慢性阻塞性肺疾病患者713例,男571例,女142例.均对检测项目知情同意.②将713例慢性阻塞性肺疾病患者的肺功能测定数据分别按中华呼吸学会/欧洲呼吸学会分级标准、英国胸科学会分级标准和美国胸科学会分级标准进行轻、中、重度分级.于患者病情缓解和门诊就诊时采用Sensor medics 2100型肺功能仪进行肺功能测定,具体指标包括通气功能(用力肺活量占预计值百分比、第1秒用力呼气量占用力肺活量百分比、大通气量占预计值百分比),小气道功能(50%肺活量时的大呼气流速、25%肺活量时的大呼气流速、呼气峰值流速占预计值百分比)、肺容量(肺活量、肺总量、残气量、残气量与肺总量比值).③两组间比较采用独立样本t检验及相关分析.结果:慢性阻塞性肺疾病患者713例均进入结果分析.①慢性阻塞性肺疾病患者按英国胸科学会分级标准、美国胸科学会分级标准分级后肺功能与中华呼吸学会/欧洲呼吸学会分级标准之间差异明显(P＜0.05).②按中华呼吸学会/欧洲呼吸学会分级标准,轻度慢性阻塞性肺疾病时第1秒用力呼气量占预计值百分比与50%肺活量时的大呼气流速和25%肺活量时的大呼气流速呈正相关(r=0.188,0.145,P＜0.05),与呼气峰值流速占预计值百分比和75%肺活量时的大呼气流速无明显相关(P＞0.05),在中、重度的慢性阻塞性肺疾病患者中,第1秒用力呼气量占预计值百分比与上述4项指标皆呈正相关(r=0.261～0.715,P＜0.01);而按英国胸科学会、美国胸科学会分级标准,则无论轻、中、重度的慢性阻塞性肺疾病患者第1秒用力呼气量占预计值百分比与上述4项指标皆呈明显正相关(r=-0.187～0.587,P＜0.01).结论:中华呼吸学会和欧洲呼吸学会关于慢性阻塞性肺疾病的分级标准较英国胸科学会、美国胸科学会以及以美国胸科学会的标准为蓝本的"慢性阻塞性肺疾病防治全球倡议"标准更能客观合理地反映慢性阻塞性肺疾病发生、发展的病理生理改变以及气流受限和肺功能受损程度.

运动疗法干预2型糖尿病患者的血糖、血脂变化

目的:观察应用运动疗法后2型糖尿病患者血糖、血脂水平的变化情况.方法:选择2004-02/06在郑州大学第一附属医院内分泌科就诊的2型糖尿病患者40例,均自愿参加观察.对40例患者进行运动治疗,包括热身活动、运动锻炼和放松运动3个部分.根据患者的年龄、体质量、有无并发症来决定其运动强度、运动方式.运动时要遵循循序渐进、持之以恒的原则,密切观察患者运动时的反应,运动频率5～7次/周,每周至少3次.分别于运动前和运动后第2,4,6,8周,检测患者空腹血糖、总胆固醇和三酰甘油水平.结果:纳入2型糖尿病患者40例,全部进入结果分析,无脱落.①运动前及运动后患者血糖水平的比较:运动后第2周患者的空腹血糖和餐后2 h血糖水平均显著低于运动前[(6.35±0.48,7.01±0.67)mmol/L,(6.40±0.53,11.98±1.24)mmol/L(F=2.76,P＜0.01)],运动后第4周患者的空腹血糖水平显著低于治疗后第2周[(5.72±0.39)mmo1/L(F=6.58,P＜0.05)].②运动前及运动后患者血脂水平的比较:运动后第2周患者的总胆固醇和三酰甘油水平均显著低于运动前[(5.01±1.02),(6.63±1.52)mmol/L;(1.48±0.32),(1.82±0.48)mmol/L(F=3.21,＜0.01)],运动后第4周患者的总胆固醇水平显著低于运动后第2周[(4.82±0.72)mmol/L(F=2.25,P＜0.05)].结论:运动疗法可以明显改善糖尿病患者的血糖、血脂水平,是糖尿病患者长期综合治疗方法之一,长期使用效果更佳.

动脉粥样硬化与平滑肌细胞凋亡的调控

目的:探讨动脉粥样硬化过程中影响平滑肌细胞凋亡的各种影响因素及其传导通路.资料来源:应用计算机检索Medline1995-01/2003-12有关平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化关系的文献,检索词为"atherosclerosis,apoptosis,SMC",并限定文章语言种类为English.同时计算机检索中文期刊全文数据库及万方数据库1994-01/2003-12有关平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化关系的文献,限定文章语言种类为中文,检索词为"动脉粥样硬化、凋亡、平滑肌细胞".资料选择:选取所有检索到的相关文献,包括动物实验、细胞培养和临床研究,进行初审,排除不符合要求的文献.评价指标主要是内容是否所需,资料是否真实,设计是否严密,实施过程是否严格,统计学处理是否合理.资料提炼:共检索48篇有关平滑肌细胞凋亡与动脉粥样硬化关系的文献,其中16篇符合要求.排除的32篇中,26篇与平滑肌细胞凋亡的调控无关,6篇内容重复.资料综合:选取16篇文献,对动脉粥样硬化中平滑肌细胞凋亡的调控因素进行深入分析.①动脉粥样硬化中影响细胞凋亡的外部信号:氧化低密度脂蛋白、机械扩张、炎性细胞因子、活性氧、血管紧张素Ⅱ和内皮素1等.②动脉粥样硬化中影响细胞凋亡的内部基因及传导信号:c-myc、Bcl-2、P53、Id3基因及白细胞介素1β转换酶家族.结论:动脉粥样硬化中平滑肌细胞凋亡的调控需要外部影响因素和内部相关基因通过不同的传导通路共同完成.

遗传因素与运动能力发展的关系

目的:探讨运动能力的遗传规律、方式、外显度及其在运动员科学选材中的应用. 方法:采用文献检索、比较分析及经验总结法,从身体形态、生理功能、生化代谢、身体素质和个性特征等方面论述它们的遗传度及其与运动能力的关系.结果:人体的运动能力是由遗传因素和环境因素共同作用的结果.遗传决定了运动员运动能力的起点高低,后天训练决定了运动员运动能力的发展水平.在选拔青少年运动员时,除必须充分考虑遗传度、遗传变异和环境因素及其相互影响外,还应做好家族谱系调查和母亲生理变数的相关分析.结论:组成运动能力的各种性状是由遗传因素和环境因素共同决定的.科学的运动选材不仅要考虑运动员的体表性状,而且还要考虑其生理功能、生化代谢、身体素质、智力和个性特征等方面的因素.

微波治疗后糖尿病周围神经病变患者神经传导速度的变化

背景:糖尿病周围神经病变主要临床表现为肢体麻木、疼痛和肌肉萎缩.如果得不到及时控制,将导致糖尿病患者病死率和致残率明显升高.

浮针结合电针治疗慢性腰肌劳损患者140例

目的观察浮针结合电针治疗慢性腰肌劳损的疗效.方法选择2003-05/2004-11成都医学院第一附属医院中医科慢性腰肌劳损患者140例.随机分为3组,浮针组45例、电针组45例、浮针结合电针组50例.浮针组:在病痛范围内确定一个或两个为敏感的压痛点,在距痛点上方、两侧或下方6～8 cm处作为进针点.当针体完全进入皮下,以进针点为支点,手持针柄,使针体做扇形环扫运动十余次.进针完毕后,嘱患者活动腰部,如不影响活动,则留针15 min,抽出针芯,用胶布固定针柄,使留于皮下的软套管不致脱落,针眼处用创可贴敷盖.留针8～24 h,1次/d,连续治疗6 d后休息1 d,再继续治疗.电针组:取阿是穴、肾俞(双)、大肠俞(双)、委中(双),采用常规针刺手法,待得气后,连接G6805-1型电针仪,连续波,电流强度以患者耐受为度,留针20 min,1次/d,连续治疗6 d后休息1 d,再继续治疗.浮针结合电针组:首先对患者阿是穴、肾俞(双)、大肠俞(双)、委中(双)进行电针治疗,然后再施以浮针治疗,方法同前.治疗1次/d,连续治疗6 d后休息1 d,再继续治疗.治疗2周后通过视觉模拟评分法评估疼痛改善情况.视觉模拟评分为0～100分,0分为无痛,1～50分为轻度疼痛,51～80分为中度疼痛,81～100为重度疼痛.结果①浮针结合电针组的视觉模拟评分为0分患者优于浮针组或电针组(浮针结合电针组、浮针组、电针组分别为42,31,23例,x2=10.389,P＜0.01).②对于病程＜1年的患者,浮针结合电针组的视觉模拟评分为0分患者优于电针组(浮针结合电针组、电针组分别为19,13例,x2=4.874,P＜0.05).③而对于病程＞1年的患者,浮针结合电针组的视觉模拟评分为0分患者优于浮针组或电针组(浮针结合电针组、浮针组、电针组分别为22,12,10例,x2=6.563,P＜0.05).结论浮针结合电针疗法比单纯用电针或浮针对改善慢性腰肌劳损疼痛效果好.

运动治疗前后急性心肌梗死患者心电图QT离散度及超声心动图相关参数的变化

目的探讨急性心肌梗死患者康复运动前后QT离散度及超声心动图参数的变化,观察QT离散度与心功能改变的关系.方法选取2001-06/2004-03汕头中心医院住院的108例急性心肌梗死患者,分成康复治疗组61例及对照组47例.康复治疗组患者于心肌梗死后4周开始康复运动,对照组不行康复治疗,所有患者于心肌梗死后4周及28周时行静态l2导联同步心电图记录及心脏超声心动图检查,进行比较.结果心肌梗死后28周时康复治疗组患者QT离散度较对照组显著缩短(P＜0.01),而射血分数及左室短轴缩短率明显增加(P＜0.01),E峰与A峰比值亦有所升高(P＜0.05).QT离散度与射血分数及左室短轴缩短率高度相关.结论康复治疗能缩短急性心肌梗死患者QT离散度,显著增强左室收缩功能,无创性指标QT离散度对心肌梗死患者预后的评价有一定的应用价值.

北京地区1082名离退休干部心脏事件危险因素评估

目的评估北京军区部分驻京离退休老干部10年间发生冠心病危险的可能性.方法①于2002-05/2003-09对北京军区驻京15个干休所的1 238名离退休干部进行调查,其中1 082名流行病学调查资料完整,男984名,女98名,年龄60～95岁.②基线危险因素调查采用国际标准化心血管病流行病学调查方法.按美国国家胆固醇教育计划成人治疗组第3次指南改良的弗莱明翰10年间发生冠心病危险的评估积分方法对离退休干部10年间发生冠心病的危险性进行评估.结果①老干部存在冠心病危险因素的状况显示,每名至少存在2个危险因素,存在2个危险因素的人群仅占0.97%,3个危险因素的占10.9%,4个的占26.98%,5个以上的占61.14%.②1 082名军队离退休干部10年间发生冠心病危险的评估结果:以高危人群为主,占48.34%;其次分别为:中危人群占26.48%,低危人群占21.72%,极高危人群占5.27%.结论军队离退休干部每名至少存在2个危险因素,存在3个以上危险因素的达到99.03%,且以高危人群为主,是一个冠心病高危人群.

神经内科重症监护单元卧床患者肛周湿疹特点分析

目的分析神经内科重症监护单元收治的长期卧床患者产生肛周湿疹并发症的原因及其特点.方法分析神经内科重症监护单元卧床患者发生肛周湿疹的原因,并评价防治臀部感染、治疗原发病灶等综合康复措施的康复效果.结果神经内科重症监护单元长期卧床患者由于肛周皮肤清洁情况较差,继发细菌感染向周围扩散,同时卧床患者伴有感觉障碍,不能主诉患区皮肤所受伤害性刺激,也加重了肛周湿疹的病情.针对以上致病因素,采取防治臀部感染,及时清洗粪便;积极治疗原发病灶,去除尿便失禁诱因以及给予正确的胃肠喂养等治疗康复措施,成功地减轻了肛周湿疹的症状,促进了神经内科患者的康复进程.结论神经内科重症监护单元卧床患者出现的肛周湿疹是影响康复进程的重要因素.

脊柱疾病的医疗练功处方

目的探讨脊柱疾病的佳练功方法.方法从脊柱的解剖和功能特点出发,结合目前相关文献的研究,对用以防治脊柱疾病的医疗练功方法综合分析.结果脊柱的结构病理改变能通过合理的运动来调整,故医疗练功能有效的防治脊柱疾病.但不加辨证盲目的进行不但不能起到相应的疗效,反而会加重病情,所以通过辨证以练功处方的形式有针对性的来指导患者练功将能有效的防治脊柱疾病的目的.结论以练功处方的形式来指导患者进行锻炼是脊柱疾病防治的有效方法.

有限度脊神经后根切断术联合有限度软组织松解术改善痉挛性脑性瘫痪患儿独立行走能力:438例9年随访

目的:观察有限度的脊神经后根切断术联合有限度软组织松解术治疗对痉挛性脑性瘫痪患儿运动功能的影响.方法:①收集1996-10/2004-01在吉林大学第一医院骨科施行选择性脊神经后根切断术联合有限度软组织松解术治疗的脑性瘫痪患儿438例,男298例,女150例.监护人对治疗方案及观察目的知情同意.②351例为有限度的脊神经后根切断术及有限度软组织松解术一次完成,87例术前不能独立行走,先行有限度软组织松解术,进行功能锻炼,待可行走后再行脊神经后根切断术.③根据运动功能评分(立姿:可以稳定自行站立,足跟着地,膝关节伸直计5分,扶持亦不能站立或直跪竖立计1分.步姿:能自己稳定上下楼梯,独立行走,步态稳定计5分;扶持亦不可行走,抬腿困难计1分.下蹲起立:可自行蹲下起立,不用扶持及帮助计5分;扶物亦不能站立计1分)评定患儿手术前后的运动功能变化.对438例患儿术后运动功能进行9年随访.④计数资料和计量资料差异比较分别采用x2检验和t检验.结果:脑性瘫痪患儿438例均进入结果分析.438例患儿术后能生活自理、功能改善、独立行走的占99.3%.家长反映无明显好转者3例.畸形改变:完全消失32.1%,程度减轻82.2%,程度不变0.68%.术后计分明显高于术前(立姿4.32,3.12分,步姿3.62,2.42分,蹲立变换3.82,2.32分,x2=11.3201,P＜0.01).结论:选择性脊神经后根切断术联合有限度软组织松解术可改善脑性瘫痪患者站立和行走时的交叉和尖足畸形,改善患者行走步态,提高患者的运动功能,尤其是改善独立行走能力.

新生儿神经行为发育与脐血及胎粪铅含量的关系

背景:以往大量研究都是以生产时一次性脐血铅的浓度来进行研究的,但生产时一次性脐血铅的浓度并不能很好的代表在整个妊娠期间铅对胎儿神经系统的累积损伤.胎粪中的铅主要来源于胎儿消化道分泌的消化液、新生儿肠道脱落的上皮细胞、胎儿吞咽下的羊水、皮脂,是从妊娠一开始直至新生儿出生后24h内排出,它反映的是整个妊娠过程中铅在新生儿胃肠道中的蓄积量.目的:探讨在宫内低水平铅暴露状态下,比较新生儿脐血铅含量及胎粪铅含量与新生儿神经行为发育的相关性.设计:以脐血铅和胎粪铅含量作为新生儿宫内铅暴露的指标,新生儿神经行为发育评分作为效应指标,采用描述性分析方法评价其相关关系.单位:武汉科技大学,华中科技大学同济医学院职业病流行病学实验室,武汉第一冶金建筑总公司职工医院.对象:选择武汉市新型工业区的青山区第一冶金建筑总公司职工医院妇产科1999-01/10出生的足月、健康新生儿103例作为观察对象.家属同意参加课题研究并填写问卷调查,提供新生儿胎粪,按时进行新生儿测试.方法:①样本的采集及测定:采取脐血5 mL,于-4℃冰箱中冷藏保存.收集出生24 h内的胎便,干重5～10 g,用石墨炉原子吸收光谱法测定脐血铅与胎粪铅的含量.②分组:以脐血铅0.483 μmol/L为分界值,将新生儿分成高铅组与低铅组.以127.78 mg/kg作为胎粪铅的分界点,并将观察对象分为高铅组与低铅组.③新生儿神经行为发育检查:采用新生儿神经行为发育检查法,于分娩第3天进行检查.同时采用自行设计的问卷对产妇进行调查.主要观察指标:①新生儿脐血与胎粪中铅含量.②不同浓度脐血铅和胎粪铅的新生儿神经行为发育评分.结果:103例新生儿均进入结果分析.①脐血高铅组与低铅组仅在新生儿神经行为发育总评分、生物视听定向反应得分上差异有显著性意义(P＜0.05),但脐血铅含量与新生儿神经行为发育总评分、非生物听定向反应、非生物视定向反应、生物视听定向反应之间不存在等级相关关系.②胎粪高铅组与低铅组在新生儿神经行为发育总评分、非生物听定向反应、非生物视定向反应、生物视听定向反应4项评分上,两组差异有显著性和非常或极显著性意义(P＜0.05～0.01).胎粪铅含量与新生儿神经行为发育总评分、非生物视定向反应、生物视听定向反应3项神经评分有明确的等级负相关关系.结论:胎粪铅含量与新生儿神经行为发育评分更为密切,胎粪铅含量可作为妊娠期胎儿体内铅蓄积的指标.

早期接受中西医综合干预与未干预组缺氧缺血性脑损伤患儿脑功能及发育商随访结果比较

目的:观察早期中西医综合干预对缺氧缺血性脑损伤患儿近期和远期脑功能及发育商的影响.方法:选择2000-01/2004-01张家界市人民医院儿科收治的缺氧缺血性脑损伤新生儿148例,发病时间均在出生72 h内,监护人知情同意.新生儿期后坚持中西医综合治疗者83例作为观察组,因各种原因未接受治疗者65例作为对照组.观察组急性期后予以保护脑细胞、高压氧、针灸、功能训练等方法中西医综合干预;对照组进行保护脑细胞治疗,出院后常规育儿.两组患儿均于3,6,12,18月龄时进行随访.由专人负责,随访内容包括喂养史、疾病史、体格发育、神经系统及精神运动发育检测.精神运动发育检测标准:发育商＞90分为正常,90～75分为可疑异常,＜75分为异常.结果:纳入缺氧缺血性脑损伤患儿148例,全部进入结果分析,无脱落.①不同随访期两组患儿平均发育商比较:3,6,12,18月龄时观察组平均发育商显著高于对照组[83.76±4.35,92.17±6.51,97.38±4.32,99.27±4.62;78.53±13.87,77.63±12.75,75.92±14.O1,75.21士13.76(u=2.93～13.51,P＜0.01)].②两组患儿后遗症发生率比较:对照组显著高于观察组[33.8%,7.2%(x2=16.84,P＜0.01)].结论:早期中西医综合干预能有效促进缺氧缺血性脑损伤患儿精神运动发育,是改善预后、减少后遗症发生率、提高患儿生活质量的有效手段.

刘惠亮教授·硕士导师

今天,我盘点2005的收获

从春种、夏锄到秋收,在2005,哪组数字曾经让我猝不及防?乐不可支?

心脏康复

2型糖尿病的一级预防

《中国临床康复》2006年推出全新策划