中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人羊膜间充质干细胞移植修复肝脏缺血-再灌注损伤
背景:国内外研究表明,人羊膜间充质干细胞可分化为肝细胞样细胞,提示肝损伤后进行人羊膜间充质干细胞移植为临床肝病治疗提供可能。
目的:观察人羊膜间充质干细胞移植对大鼠肝脏缺血-再灌注损伤的修复作用。
方法:将60只SD大鼠随机分为3组,干细胞移植组、模型组建立大鼠肝脏缺血-再灌注损伤模型,造模后1 h,干细胞移植组于尾静脉注射人羊膜间充质干细胞0.5 mL(106个),模型组于尾静脉注射L-DMEM 0.5 mL,正常对照组于尾静脉注射生理盐水0.5 mL。移植后1,2,3周,进行肝功能、肝组织形态学、RT-PCR法及Western blot检测。
结果与结论:①肝功能:与正常对照组比较,模型组移植后不同时间点的门冬氨酸转移酶、丙氨酸转移酶和丙二醛水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,干细胞移植组移植后不同时间点的门冬氨酸转移酶、丙氨酸转移酶和丙二醛水平明显降低(P<0.05);②肝组织形态:移植后2周,模型组肝细胞变性、坏死及纤维化程度严重,干细胞移植组肝细胞变性、坏死及纤维化程度较模型组明显减轻;③RT-PCR法及Western blot检测:移植后2周,与模型组比较,干细胞移植组肝组织肝细胞生长因子水平明显升高(P<0.05),α-平滑肌蛋白明显下降(P<0.05);④结果表明:人羊膜间充质干细胞移植能有效改善大鼠受损的肝功能,其可能通过调节肝细胞生长因子及α-平滑肌蛋白在肝脏中的表达水平,进而发挥促进大鼠肝脏缺血-再灌注损伤修复的作用。 -
骨髓间充质干细胞移植治疗骨关节炎
背景:骨髓间充质干细胞具有自我更新和分化能力,能够迁移到组织损伤部位进行组织修复,在多种疾病治疗中被广泛应用。
目的:探讨骨髓间充质干细胞移植对骨关节炎大鼠的治疗作用。
方法:将36只Wistar大鼠随机分为移植组、模型组和对照组,移植组在建立骨关节炎模型后经尾静脉注射骨髓间充质干细胞(5×107/kg),模型组在建模后经尾静脉注射等量的生理盐水,对照组不予任何处理。各组大鼠于移植治疗后4周评定关节炎指数、关节肿胀度,检测脾脏CD4+CD25+调节性T细胞水平以及血清白细胞介素17、肿瘤坏死因子α、转化生长因子β1水平。
结果与结论:①模型组大鼠关节炎指数明显高于对照组(P<0.05),移植组大鼠关节炎指数明显低于模型组(P<0.05);②模型组大鼠后肢关节肿胀度明显高于对照组(P<0.05),移植组大鼠后肢关节肿胀度明显低于模型组(P<0.05);③模型组大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞水平明显低于对照组(P<0.05);移植组大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞水平明显高于模型组和对照组(P<0.05);④模型组大鼠血清白细胞介素17、肿瘤坏死因子α水平明显高于对照组(P<0.05);移植组大鼠血清白细胞介素17、肿瘤坏死因子α水平明显低于模型组(P<0.05),移植组大鼠血清白细胞介素17、肿瘤坏死因子α水平高于对照组(P<0.05);⑤模型组大鼠血清转化生长因子β1水平明显低于对照组(P<0.05);移植组大鼠血清转化生长因子β1水平明显高于模型组和对照组(P<0.05);⑥结果表明,骨髓间充质干细胞移植主要通过调节骨关节炎大鼠体内细胞因子水平和免疫功能发挥治疗作用。 -
骨髓间充质干细胞移植治疗重症急性胰腺炎肺损伤
背景:研究发现,骨髓间充质干细胞能随血液循环到身体其他器官组织,能够促进胰腺组织修复损伤,能够减轻肺纤维化,对胰腺和肺部损伤有不同程度的治疗效果。
目的:观察骨髓间充质干细胞移植后对大鼠重症急性胰腺炎肺损伤造成的组织损伤的治疗作用。
方法:应用4%牛磺胆酸钠逆行注射法制备大鼠急性胰腺炎肺损伤模型。SD大鼠随机分成3组,移植组大鼠造模成功24 h后进行骨髓间充质干细胞经尾静脉移植;对照组只对尾静脉注射等量生理盐水;正常组大鼠不做任何处理。移植24 h后取各组部分胰腺组织和肺组织进行苏木精-伊红染色;取胰腺组织和肺组织检测肿瘤坏死因子α和白细胞介素1βmRNA表达量;用ELISA试剂盒测定血清C-反应蛋白和肿瘤坏死因子α水平。
结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,造模后的大鼠胰腺组织损伤区域有大量炎性细胞浸润,腺泡的结构不完整,小叶结构破坏严重,肺部组织肺泡分界不明显,肺泡壁变厚,肺泡内有大量的炎性细胞浸润,表明实验所用模型建模成功。移植后,胰腺组织受损部位炎性细胞浸润减少,小叶结构清晰完整,腺泡未见出血;肺部组织结构清晰,肺泡壁完整,间距有所减宽;②免疫组织化学结果显示,移植经过DAPI标记的骨髓间充质干细胞大量聚集在胰腺组织和肺组织,不均匀分布在受损部位。对照组大鼠胰腺组织和肺组织均未见DAPI免疫荧光显色。这显示骨髓间充质干细胞经大鼠尾静脉注射后通过血液迁移至受损的胰腺组织和肺组织处,进一步修复损伤区域;③RT-PCR检测结果表明:移植后大鼠胰腺组织和肺组织的肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β含量明显低于对照组(P<0.05);④血清结果显示,模型组C-反应蛋白、肿瘤坏死因子α含量较正常对照组显著升高(P<0.01),而移植组C-反应蛋白、肿瘤坏死因子α含量较模型组显著下降(P<0.05);⑤结果表明,骨髓间充质干细胞能够修复重症急性胰腺炎肺损伤模型,可能与其减少炎症反应和转化为胰腺组织和肺组织相关。 -
广谱抗菌药物防治造血干细胞移植后的早期感染
背景:造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病的发生与感染有复杂的关系,控制感染能降低移植相关死亡率。
目的:探讨广谱抗菌药物对造血干细胞移植后早期感染发生的影响。
方法:收集31例行造血干细胞移植患者的临床资料,均接受自体外周血干细胞移植治疗。外周血干细胞移植后早期(30 d以内),统计观察移植后早期感染发生率和感染类型以及病原菌分布情况、治疗与转归。
结果与结论:①所有患者均顺利接受自体外周血干细胞移植治疗,造血干细胞移植后早期感染发生率为71%,未出现死亡病例;②共检出20株病原菌,其中革兰阴性菌占80%;③感染后外周血中性粒细胞数量与感染持续时间均有显著性相关性,差异有显著性意义(P<0.01);④试验结果表明,造血干细胞移植后早期感染发生率较高,与中性粒细胞减少及恢复时间密切相关。宜在早期选择合适的广谱抗菌药物进行经验性用药,以快速、有效的控制感染。 -
脐血干细胞移植干预妊娠期高血压模型大鼠的作用
背景:随着对间充质干细胞认识的不断加深,人们发现间充质干细胞在免疫调节和抗炎方面有突出的治疗效果。
目的:探讨脐血干细胞对内毒素诱导的妊娠期高血压模型大鼠的治疗作用。
方法:将24只妊娠SD大鼠随机分为3组:对照组、模型组及实验组,每组8只。模型组和实验组建立内毒素诱导的妊娠期高血压模型,造模同时实验组静脉注射脐血干细胞悬液1 mL,对照组和模型组静脉注射等量生理盐水。通过检测各组大鼠收缩压、尿蛋白浓度及白细胞数量,内皮相关因子AngⅡ及ET-1的表达,观察脐血干细胞治疗妊娠期高血压疾病模型的疗效。
结果与结论:①与对照组比较,模型组大鼠收缩压、尿蛋白及血清白细胞数量明显升高,差异有显著性意义(P<0.05),并且随着内毒素作用时间的延长,模型组大鼠收缩压、尿蛋白和血清白细胞数量不断升高;②与模型组比较,实验组大鼠收缩压、尿蛋白和白细胞数量均明显降低,差异有显著性意义(P<0.05);③与对照组比较,模型组内皮损伤因子AngⅡ和ET-1均有明显升高,与模型组相比,实验组大鼠内皮损伤因子AngⅡ和ET-1表达降低,差异有显著性意义(P<0.05);④结果表明,脐血干细胞对妊娠期高血压模型大鼠有一定的治疗作用,可能是通过是调节内皮损伤相关因子的表达来实现的。 -
骨髓间充质干细胞对创伤性骨折愈合的促进作用
背景:近年来随着干细胞培养、分离等技术的发展使骨折不愈合的治疗有了更多的选择。
目的:探讨骨髓间充质干细胞在大鼠创伤性骨折愈合过程中的促进作用,以及对内源骨髓间充质干细胞迁移能力的影响。
方法:48只Wistar大鼠,随机分为实验组、对照组各24只。所有大鼠均建立股骨骨折模型。另采用贴壁筛选法分离制备健康大鼠骨髓间充质干细胞,通过尾静脉注入实验组大鼠,对照组注入等体积生理盐水。分别于2,3,4,8,12周提取两组大鼠股骨骨髓间充质干细胞,用荧光定量RT-qPCR方法检测细胞中Ⅰ型胶原蛋白和CD44的表达,采用Transwell法测定骨髓间充质干细胞迁移情况,并用免疫组化方法检测骨痂处神经生长因子表达。
结果与结论:①第2,3,4周,实验组大鼠骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原蛋白、CD44 mRNA表达明显高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);②第2,3周,骨髓间充质干细胞迁移能力明显高于对照组(P<0.05);③第3,4,8,12周,实验组骨痂处神经生长因子表达高于对照组(P<0.05);④结果表明,外源骨髓间充质干细胞植入股骨骨折大鼠体内可使内源骨髓间充质干细胞的体外迁移能力及骨折部位神经生长因子表达增强,从而促进大鼠骨折愈合。 -
还原型谷胱苷肽对骨髓基质干细胞增殖及向神经样细胞分化的影响
背景:骨髓基质干细胞具有易获取及多向分化潜能,通过诱导骨髓基质干细胞分化获得神经干细胞是治疗脊髓损伤的重要途径和方法。
目的:观察不同浓度还原型谷胱苷肽对骨髓基质干细胞增殖及向神经样细胞分化的影响。
方法:配置5组不同浓度的还原型谷胱苷肽(0,5,10,20,40 mmol/L)培养液,干预骨髓基质干细胞72 h后,采用MTT法分析细胞增殖活性,倒置显微镜下连续观察细胞形态变化,免疫组织荧光染色法测定MAP-2和GFAP表达。
结果与结论:①低浓度5 mmol/L组还原型谷胱苷肽培养液能够促进骨髓基质干细胞增殖(P<0.05),20 mmol/L组和40 mmol/L组还原型谷胱苷肽培养液抑制细胞增殖(P<0.05),10 mmol/L还原型谷胱苷肽组细胞集落的数量和大小与对照组未见明显差别;②10 mmol/L组还原型谷胱苷肽培养液诱导骨髓基质干细胞向神经细胞分化作用较明显,荧光显微镜下可见大部分细胞表达MAP-2和GFAP,随机选择5个视野观察并计算骨髓基质干细胞分化为神经样细胞的比率为(62.0±4.8)%;③结果证实,低浓度(5 mmol/L)还原型谷胱苷肽可以促进骨髓基质干细胞增殖,10 mmol/L还原型谷胱苷肽有较强的诱导骨髓基质干细胞向神经样细胞分化的作用。 -
非接触共培养条件下骨髓间充质干细胞向类髓核细胞的诱导分化
背景:组织工程中间充质干细胞治疗椎间盘退变性疾病为退变椎间盘结构和功能恢复提出了一种新型的治疗方案,是目前研究的热点。
目的:分析兔骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化的潜能。
方法:将第3代兔骨髓间充质干细胞与兔髓核细胞按培养要求分为3组:普通6孔板单纯培养骨髓间充质干细胞组,普通6孔板单纯培养髓核细胞组,骨髓间充质干细胞与髓核细胞共培养组,Transwell 6孔板底部接种第3代骨髓间充质干细胞,上层接种第3代髓核细胞。倒置显微镜观察各组细胞形态的变化,在培养第7天采用免疫细胞化学、RT-PCR及Western blot技术测定各组细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达。
结果与结论:①共同培养第7天,骨髓间充质干细胞呈多角形、短梭形改变,无纤维样变化,形态接近髓核细胞;②共培养组骨髓间充质干细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达与单独培养髓核细胞组相近,显著高于单独培养骨髓间充质干细胞组;③结果表明,非接触共培养条件下,髓核细胞具有诱导骨髓间充质干细胞向类髓核细胞分化的潜能,为椎间盘退变性疾病的生物学治疗提供大量的细胞来源。 -
CM-Dil标记大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性探讨
背景:目前已有部分实验采用CM-Dil标记间充质干细胞开展体内外实验,取得良好成果。
目的:观察CM-Dil标记大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特性及其定向迁移能力。
方法:分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,通过流式细胞技术分析其特异性细胞表面标记抗原(CD29, CD44,CD11b,CD45)的表达。用CM-Dil标记大鼠骨髓间充质干细胞,继续培养细胞,观察细胞的形态及增殖情况,及传代后荧光的强度与持久性。采用Transwell小室进行标记后大鼠骨髓间充质干细胞向mdx鼠腓肠肌匀浆液的迁移实验。
结果与结论:所培养细胞均一性好,均表达CD29和CD44,不表达CD11b和CD45,符合骨髓间充质干细胞的特点。经CM-Dil标记后对大鼠骨髓间充质干细胞的形态、增殖无明显影响,传代后仍可保持荧光强度,但随传代有所减弱。标记前后大鼠骨髓间充质干细胞的迁移能力无显著性差异(P>0.05)。结果说明,CM-Dil标记过程安全、简单、高效,对大鼠骨髓间充质干细胞的形态、增殖及迁移能力无明显影响,体外细胞传代后仍可保持荧光,是大鼠骨髓间充质干细胞标记与示踪的理想试剂。 -
不同时期局部移植人脐带间充质干细胞修复脊髓损伤的组织学观察
背景:脊髓损伤能造成各种运动、感觉功能障碍,肌张力异常及病理反射等,临床上已通过人脐带间充质干细胞移植对脊髓损伤进行治疗。
目的:探讨大鼠脊髓损伤后不同时期局部移植人脐带间充质干细胞修复脊髓损伤的效果。
方法:选取SPF级雄性成年SD大鼠100只,随机分为5组:空白对照组、单纯脊髓损伤组及3,7,21 d后移植组,各20只。后4组利用Allen’s 打击器制作大鼠T10脊髓损伤模型;3,7,21 d后移植组大鼠分别于脊髓损伤后3,7和21 d在损伤部位周围移植人脐带间充质干细胞。
结果与结论:与单纯脊髓损伤组相比,3,7,21 d后移植组大鼠造模后49 d运动功能评分增加,血清白细胞介素2水平减少,血清白细胞介素10水平增加,脊髓病理损伤明显改善,且7 d后移植组效果为明显。说明人脐带间充质干细胞移植修复大鼠脊髓损伤,改善大鼠运动功能,且在大鼠脊髓损伤7d后移植效果佳。 -
miR-195对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响
背景:既往研究发现,miR-195在人骨髓间充质干细胞成骨分化过程中,表达量显著增加,但是其作用及其机制尚不明确。
目的:探索miR-195对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及其机制。
方法:体外分离、培养人骨髓间充质干细胞,通过碱性磷酸酶活性测定试剂盒、蛋白免疫和实时定量反转录PCR(qRT-PCR)检测在人骨髓间充质干细胞诱导分化过程中,碱性磷酸酶活性和骨分化特异基因Runx2和osteopontin表达水平的变化,以及miR-195和它的潜在靶SMAD7表达量的变化;通过脂质体转染构建miR-195低表达的人骨髓间充质干细胞,研究miR-195对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。利用荧光素酶报告基因实验检测miR-195对SMAD7的靶向作用。
结果与结论:①分离培养的人骨髓间充质干细胞具有优良的体外成骨分化能力;②miR-195表达量随人骨髓间充质干细胞诱导分化时间的增加而升高,SMAD7则相反。③miR-195能够促进人骨髓间充质干细胞成骨分化;④荧光素酶实验证实SMAD7是miR-195的直接靶,SMAD7过表达抑制人骨髓间充质干细胞成骨分化;⑤结果提示,miR-195通过靶向SMAD7促进人骨髓间充质干细胞成骨分化。 -
骨形态发生蛋白2抑制骨髓间充质干细胞成脂分化的优选浓度
背景:骨形态发生蛋白2既可以促进成骨,在不同浓度范围又可以调控骨髓间充质干细胞成脂分化的趋势。因此,骨形态发生蛋白2诱导骨髓间充质干细胞后,如果能够发现抑制其成脂的浓度范围,对于防治骨质疏松症具有重要意义。
目的:确定骨形态发生蛋白2抑制骨髓间充质干细胞成脂分化的优选浓度。
方法:①抽取大鼠股骨及胫骨的骨髓,体外用贴壁培养法获得原代骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测第2代细胞表面抗原标志物;②取第2及3代细胞,分为0.5,5,50,100,200μg/L骨形态发生蛋白2组及对照组。0.5,5,50,100,200μg/L骨形态发生蛋白2组骨髓间充质干细胞用成脂诱导液诱导3 d后,加入0.5,5,50,100,200μg/L骨形态发生蛋白2继续诱导14 d;对照组骨髓间充质干细胞成脂分化3 d,使用骨髓间充质干细胞培养基培养,未加骨形态发生蛋白2处理。
结果与结论:①流式细胞仪鉴定培养的细胞为骨髓间充质干细胞;②油红O染色显示,5-50μg/L骨形态发生蛋白2诱导后,随骨形态发生蛋白2质量浓度的增加,脂滴数量增加;而100-200μg/L骨形态发生蛋白2诱导17 d后,随骨形态发生蛋白2质量浓度的增加,脂滴数量减少。说明100μg/L骨形态发生蛋白2可以抑制骨髓间充质干细胞成脂分化,从而减少大鼠脂肪细胞的形成,可以作为抑制骨髓间充质干细胞成脂分化的优选浓度。 -
miR-2135对P19细胞增殖及向心肌细胞分化的作用
背景:既往研究发现,向心肌分化P19细胞中的miR-2135表达水平显著高于未分化P19细胞,但miR-2135对P19细胞增殖、向心肌细胞分化和心脏发育的影响尚不明确。
目的:探索miR-2135对P19细胞增殖及向心肌细胞分化的影响。
方法:分别以miR-2135沉默及空载质粒转染P19细胞,培养0-4 d,MTT法检测细胞增殖;培养0,24,48 h,流式细胞仪检测细胞周期。诱导两组转染的P19细胞向心肌细胞分化,诱导第0,10天,采用qRT-PCR检测P19细胞中miR-2135的表达;诱导第10天,采用蛋白免疫印迹检测心肌分化相关标志物心肌肌钙蛋白T、心房钠尿肽和心肌转录因子的表达。
结果与结论:①转染结果:转染miR-2135沉默质粒的P19细胞低表达miR-2135;②细胞增殖与周期:miR-2135沉默质粒转染P19细胞的增殖速度快于空载质粒转染P19细胞(P<0.05),培养24,48 h的S期细胞比例明显高于空载质粒转染P19细胞(P<0.05);③qRT-PCR检测结果:miR-2135沉默质粒转染P19细胞诱导10 d的miR-2135表达明显高于诱导0 d水平(P<0.01);④蛋白免疫印迹检测结果:诱导10 d,miR-2135沉默质粒转染P19细胞心肌肌钙蛋白T、心房钠尿肽和心肌转录因子的表达明显低于空载质粒转染P19细胞;⑤结果表明:miR-2135抑制P19细胞的增殖,可促进其向心肌细胞分化。 -
ERK信号通路对人表皮干细胞增殖分化的影响
背景:表皮干细胞体外培养时易于分化和衰老,增殖能力有限,制约了其在皮肤组织工程的应用和发展,了解表皮干细胞增殖分化的调控机制可以为表皮干细胞的临床应用奠定理论基础。
目的:探索ERK信号通路在人表皮干细胞增殖分化中的作用。
方法:分离培养表皮干细胞,使用ERK通路抑制剂PD98059抑制表皮干细胞ERK通路的活性,转染MEK1重组质粒过表达MEK1或者使用PMA激活ERK通路。通过MTT法检测表皮干细胞的增殖率,克隆形成实验检测表皮干细胞的克隆形成能力,Western blot检测表皮干细胞标志蛋白K19和β1-整合素及分化细胞标志蛋白K10的表达。
结果与结论:①使用PD98059抑制ERK通路后,表皮干细胞增殖率下降,克隆形成减少,细胞分化加强;②过表达MEK1或者使用PMA激活ERK通路后,表皮干细胞增殖率上升,克隆形成能力增强,细胞分化受到抑制;③这些结果表明ERK通路在表皮干细胞的增殖分化中有重要的作用。 -
超顺磁氧化铁纳米颗粒标记人端粒酶反转录酶基因修饰神经干细胞及体外MRI成像
背景:细胞标记与体外MRI成像联合,可无创性活体标记移植的神经干细胞存在部位、存在方式及其一些生物学特性。
目的:探讨超顺磁氧化铁纳米颗粒(SPIO)标记对人端粒酶反转录酶(hTERT)基因修饰神经干细胞生物学特性的影响及标记后MR成像效果。
方法:体外培养大鼠骨髓来源的神经干细胞,将其分为正常神经干细胞组、SPIO标记神经干细胞组、SPIO标记空载病毒组及SPIO标记hTERT转染组。采用电穿孔法将pcDNA3-hTERT 重组质粒转染至神经干细胞,并进行SPIO标记,当神经干细胞标记成功后即行4.7T MR扫描,流式细胞仪、MTT法检测细胞周期、细胞增殖能力,RT-PCR和Western blot检测hTERT基因和蛋白的表达。
结果与结论:①普鲁士蓝染色显示SPIO对神经干细胞的标记率为97%;②MRI成像显示,与正常神经干细胞组相比,SPIO标记神经干细胞组的T2及T2*弛豫时间均显著下降,相应的弛豫率则显著升高(P<0.01);③与正常神经干细胞比较,SPIO标记的3组神经干细胞增殖能力相比明显增强,处于G0-G1及S期的比例明显增多;④与SPIO标记神经干细胞组、SPIO标记空载病毒组比较,SPIO标记hTERT转染组hTERT mRNA及蛋白的表达均明显增强;⑤结果表明,在体外超顺磁性氧化铁能够高效标记神经干细胞,经hTERT基因修饰后能够稳定表达hTERT基因,细胞增殖能力显著增强,4.7T MR仪能够对标记后的细胞有效进行体外成像。 -
肿瘤干细胞表面标记物CD44在胃癌组织中的表达及意义
背景:研究表明,CD44的表达与胃癌恶性转化具有密切联系。
目的:分析肿瘤干细胞表面标志物CD44在胃癌组织中的表达及其临床意义。
方法:对92例胃癌患者的术后癌组织标本及30例经病理检查证实为正常胃组织标本进行免疫组化(S-P法)检测,比较两种组织中CD44蛋白的阳性表达率差异,并分析CD44表达与患者预后的关系。
结果与结论:①胃癌组CD44蛋白的阳性表达率(73%)显著高于正常组(3%),差异有显著性意义(P<0.05);②胃癌组CD44蛋白的阳性表达率与患者的临床TNM分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移有显著关系(P<0.05);③胃癌组CD44蛋白阳性表达患者3年存活率(37%)显著低于阴性表达患者(64%),差异有显著性意义(P<0.05);④TNM分期越高、分化程度越低、淋巴结转移、CD44阳性表达是胃癌患者的独立危险因素(P<0.05),其异常持续性阳性表达可以在一定程度上提示胃癌患者预后不良。 -
Noth2调控舌鳞癌干细胞的增殖、侵袭和迁移
背景:前期研究发现,Notch2在舌鳞癌干细胞ALDHbr中表达显著上调,但其具体的作用尚不明确。
目的:分析Notch2对舌鳞癌干细胞ALDHbr增殖、侵袭和迁移的影响。
方法:采用无血清培养基培养舌鳞癌细胞株Tca8113,富集ALDHbr细胞,以流式细胞技术对其进行分选,采用免疫印迹检测Notch2在普通舌鳞癌肿瘤细胞ALDHlow和ALDHbr细胞中的表达水平。通过脂质体转染Notch2 shRNA(sh-Notch2)构建Notch2沉默的ALDHbr细胞(实验组),以转染sh-control的ALDHbr细胞为对照,48 h后检测ALDHbr细胞的增殖及Ki67蛋白表达;Transwell小室法检测两组细胞生物侵袭、迁移及基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9蛋白的表达。
结果与结论:①Notch2在ALDHbr细胞中的表达水平显著高于其在ALDHlow细胞中的表达水平(P<0.05);②实验组ALDHbr细胞的增殖能力、Ki67蛋白表达低于对照组(P<0.05);③实验组ALDHbr细胞的侵袭和迁移能力显著低于对照组(P<0.05),基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9的表达水平显著低于对照组(P<0.05);④结果表明,Notch2可促进ALDHbr细胞的增殖、侵袭和迁移,提示Notch2在舌鳞癌的发生与发展中起着重要作用,其可能成为治疗舌鳞癌的分子靶点。 -
miR-1231对结肠癌干细胞增殖、凋亡和侵袭的影响
背景:前期研究发现miR-1231在结肠癌干细胞中表达明显下调,但是其具体的作用机制尚不明确。
目的:探讨miR-1231对结肠癌干细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。
方法:采用免疫磁珠分选技术从结肠癌细胞株SW1116中分选出结肠癌干细胞(CD133+CD44+)和双阴性细胞(CD133-CD44-)。qRT-PCR检测miR-1231在这2种细胞中的表达水平。将CD133+CD44+细胞通过脂质体转染miR-1231模拟物(miR-1231 mimics)或miRNA模拟物对照(miR-control)。采用MTT、流式细胞仪、Transwell小室实验检测miR-1231对CD133+CD44+细胞增殖、凋亡、侵袭的影响;免疫印迹法检测miR-1231对CD133+CD44+细胞中Ki67、Bax、Bcl-2、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。
结果与结论:①采用免疫磁珠分选技术得到CD133+CD44+和CD133-CD44-细胞;②miR-1231在CD133+CD44+细胞中的表达水平显著低于CD133-CD44-细胞;③miR-1231抑制CD133+CD44+细胞增殖和侵袭,促进其凋亡;④相对于转染miRNA模拟物对照组,miR-1231高表达的CD133+CD44+细胞具有较低的Ki67、Bcl-2,MMP-2和MMP-9蛋白表达和较高的Bax蛋白表达,进一步证实miR-1231抑制CD133+CD44+细胞增殖和侵袭,促进其凋亡。 -
舒芬太尼复合丙泊酚全身麻醉在脐血间充质干细胞移植治疗脊髓损伤中的应用
背景:临床工作中发现,舒芬太尼及丙泊酚对神经系统损伤有很好的保护作用。
目的:观察丙泊酚联合舒芬太尼在脐血间充质干细胞移植治疗脊髓损伤中的作用。
方法:取Wistar大鼠45只,采用Al ens重物坠落法制备急性脊髓损伤模型,脊髓损伤后6 h随机分为3组,联合组尾静脉注射脐血间充质干细胞悬液0.5 mL(细胞浓度为1×105 L-1),同时尾静脉注射舒芬太尼0.5μg/kg、丙泊酚1.0-1.5 mg/kg;干细胞组尾静脉注射脐血间充质干细胞悬液0.5 mL(细胞浓度为1×105 L-1);对照组尾静脉注射含体积分数5%胎牛血清LDMEM培养液30μL。注射后15,60 min时,检测血清S100β蛋白水平;脊髓损伤后1,2,4,6,8周,检测斜板实验运动功能评分与BBB评分;脊髓损伤后第4周,观察脊髓组织病理变化;脊髓损伤后1,2周,检测血管内皮生长因子蛋白表达。
结果与结论:①干预后15,60 min时,联合组血清S100β蛋白水平低于干细胞组、对照组(P<0.05),干细胞组低于对照组(P<0.05);②脊髓损伤后2,4,6,8周,联合组斜板实验运动功能评分与BBB评分高于干细胞组、对照组(P<0.05),干细胞组高于对照组(P<0.05);③脊髓损伤后第4周,对照组脊髓组织损伤严重,神经纤维较少;干细胞组可见增生的脊髓组织及少量再生轴突、PKH-26标记的阳性干细胞;联合组可见大量的神经轴索样结构及PKH-26标记的阳性干细胞;④脊髓损伤后1,2周,联合组血管内皮生长因子蛋白高于干细胞组、对照组(P<0.05),干细胞组高于对照组(P<0.05);⑤结果表明,丙泊酚、舒芬太尼联合脐血间充质干细胞可加快脊髓损伤大鼠后肢功能的恢复,促进脊髓损伤的修复。 -
调控脂肪间充质干细胞成软骨分化基因Sox-9和低氧诱导因子1α的表达
背景:有学者采用基因转染的方法诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化,使种子细胞能够稳定合成和分泌特定的细胞因子,从而达到长期稳定刺激种子细胞增殖、分化和软骨形成的目的。
目的:观察胰岛素样生长因子1基因转染对兔脂肪间充质干细胞低氧诱导因子1α和Sox-9表达的影响。
方法:①取成年新西兰大耳白兔颈后部皮下脂肪组织,分离、培养兔脂肪间充质干细胞,免疫荧光法鉴定后在脂质体介导下应用pcDNA3.1-IGF-1基因转染脂肪间充质干细胞,G418筛选,获得稳定转染的细胞株;②实验分为3组:正常传代培养的脂肪间充质干细胞;转染pcDNA3.1的脂肪间充质干细胞;转染pcDNA3.1-IGF-1的脂肪间充质干细胞。③RT-PCR及Western blot法检测转染后细胞中胰岛素样生长因子1的表达,MTT法绘制细胞增殖曲线,Dil荧光染料标记后计数细胞增殖效率,免疫荧光法分析转染后细胞低氧诱导因子1α和Sox-9的表达情况,DMMB定量测定总糖胺聚糖含量。
结果与结论:①成功构建稳定表达pcDNA3.1-IGF-1的细胞株,RT-PCR及Western blot检测证实转染后的细胞株在mRNA水平上获得胰岛素样生长因子1的表达,并且成功翻译为蛋白;②MTT提示转染后细胞增殖活性增强;③胰岛素样生长因子1基因转染显著提高Dil标记脂肪间充质干细胞的增殖效率;④转染后细胞的低氧诱导因子1α和Sox-9表达阳性;⑤胰岛素样生长因子1基因转染组糖胺聚糖含量明显高于其他2组(P<0.01)。⑥结果说明,胰岛素样生长因子1基因转染能够能够有效促进脂肪间充质干细胞增殖,促使阳性表达低氧诱导因子1α和成软骨分化调控基因Sox-9,并有效促进细胞分泌软骨细胞外基质糖胺聚糖。 -
《中国组织工程研究》杂志2016年投稿须知
关键词: -
神经生长因子干预实验性自身免疫性脑脊髓炎幼年大鼠脑神经干细胞的变化
背景:神经生长因子是一种具有神经元营养作用的细胞调节因子,对神经干细胞的增殖具有促进作用。
目的:观察神经生长因子对实验性自身免疫性脑脊髓炎幼年大鼠脑神经干细胞的影响。
方法:将3周龄Wistar幼鼠随机分为对照组、脑脊髓炎模型组、脑脊髓炎神经生长因子治疗组,后2组建立实验性自身免疫性脑脊髓炎幼鼠模型,脑脊髓炎神经生长因子治疗组在发病当天起腹腔注射神经生长因子(1000 U/kg),共7 d,对照组和模型组幼鼠不予处理。观察神经生长因子对实验性自身免疫性脑脊髓炎幼鼠临床症状的影响,以及各组幼鼠室管膜下区Brdu(神经干细胞标记物)、皮质区Brdu+/GFAP+(星形胶质细胞标记物)的表达变化。
结果与结论:①模型鉴定:实验性自身免疫性脑脊髓炎模型幼鼠在免疫后10 d开始陆续出现脑脊髓炎症状,对照组未出现脑脊髓炎症状;模型组幼鼠脑组织中胶质细胞增生,炎症细胞浸润,血管内皮细胞增生破坏,炎症细胞集中在血管周围;对照组脑组织表现正常;②临床症状:脑脊髓炎神经生长因子治疗组的症状持续时间低于脑脊髓炎模型组(P<0.05),平均神经功能评分低于脑脊髓炎模型组(P<0.05);③室管膜下区Brdu的表达:脑脊髓炎模型组幼鼠高于对照组(P<0.05),发病后7,21 d脑脊髓炎神经生长因子治疗组室管膜下区Brdu的表达显著高于脑脊髓炎模型组(P<0.05);④皮质区Brdu+/GFAP+表达:脑脊髓炎模型组高于对照组(P<0.05),发病后7,21 d脑脊髓炎神经生长因子治疗组皮质区Brdu+/GFAP+的表达显著高于脑脊髓炎模型组(P<0.05);⑤结果表明,自身免疫性脑脊髓炎幼鼠模型被成功建立,神经生长因子治疗能够改善实验性自身免疫性脑脊髓炎幼鼠的临床症状,促进神经干细胞的增殖,并分化为星形胶质细胞。 -
力学刺激调控骨髓间充质细胞向软骨的分化
背景:骨髓间充质细胞是组织工程和细胞治疗的理想种子细胞,有研究基于自然的力学传导途径来提高体外骨髓间充质细胞活力,继而进行的体外软骨修复的策略。
目的:分析力学因素是如何影响骨髓间充质细胞的命运和有效地利用力学诱导软骨形成这一策略。
方法:由第一作者应用计算机对CNKI,PubMed,Medline 和Elsevier数据库中1985至2015年的文献进行检索,以“力学作用;骨髓间充质细胞;软骨;mechanical regulation, bone marrow mesenchymal cells;bone marrow mesenchymal stem cel s;chondrogenic differentiation;cartilage differentiation ”为关键词,对相关文献进行整理归纳。
结果与结论:总结力学刺激对骨髓间充质细胞软骨向分化的新研究成果,论述不同力学刺激对骨髓间充质细胞软骨向分化的影响,并归纳骨髓间充质细胞软骨向分化过程中细胞感应力学刺激并转化为生物学信号的机制和信号通路,同时对基于间充质干细胞和机械应力的新生组织的软骨再生和修复策略等重点研究的问题进行了展望。