中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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运动应激状态下的心肌热休克蛋白表达
背景：热休克蛋白因其具有特殊的生物学特性，在运动应激下探讨此类蛋白质在心肌的表达情况具有重要的研究价值。
目的：了解国内外有关运动应激状态下心肌热休克蛋白表达的研究情况，对不同运动应激下心肌热休克蛋白的表达特点及意义进行分析。
方法：以“heat shock protein；myocardium；exercise stress”为英文检索词；以“热休克蛋白；心肌；运动应激”为中文检索词，检索1991年1月至2014年1月检索PubMed数据库及万方数据库与热休克蛋白的产生、分类及功能有关、与运动应激下心肌热休克蛋白的表达相关、与运动应激下心肌热休克蛋白表达的机制相关及运动应激下心肌热休克蛋白表达的意义相关的文献。终选择48篇进行归纳总结。
结果与结论：热休克蛋白具有免疫协同作用。研究报道，运动训练能引起心肌热休克蛋白的表达。急性运动应激能使机体发生许多的生理、生化变化，心肌热休克蛋白会做出相对应的表达，对心肌细胞进行保护。低强度运动能够诱导增加热休克蛋白72基因的表达，抑制心肌细胞凋亡。大强度运动减少了热休克蛋白72基因的表达，不能有效抑制心肌细胞凋亡，不利于心肌的保护作用。中等运动强度下，热休克蛋白在不同运动时间的表达情况存在异议。运动诱导热休克蛋白表达对运动所致损伤的防护是有可能的，适量的运动活动在增强心肌功能、预防心肌在各种应激情况下的损伤具有重要作用。 -
全身振动改善脑卒中患者肢体运动功能障碍：目前证据不足
背景：全身振动训练作为新兴的神经肌肉训练方法，经研究发现能有效提高老年人肌力和姿势控制能力。近年来研究者将全身振动训练应用于脑卒中患者，探索其是否能减轻患者的运动功能障碍。
目的：阐述全身振动对脑卒中患者患侧肢体肌力、肢体肌张力及平衡与步态的影响国内外研究的进展。
方法：通过检索PubMed、EBSCO、Medline等数据库2002年1月至2014年6月与全身振动训练干预脑卒中患者肢体功能障碍的相关研究，选择34篇文献进行分别探讨。
结果与结论：全身振动训练干预脑卒中患者具有较强的可行性和安全性。在疗效方面，研究主要关注肌力、肌张力、平衡功能、姿势控制能力，但目前全身振动训练改善脑卒中患者运动功能障碍的证据不足。在具体的振动干预方案方面，振动的类型、频率、振幅、时间暂无公认的标准，也待进一步研究。目前临床疗效观察研究较多，缺乏对全身振动训练影响机制的研究，其疗效有待更多大样本、多中心随机对照实验验证。 -
运动干预原发性骨质疏松症：不同运动方式、强度及频率对骨密度的影响
背景：研究证明，运动是骨质疏松症治疗的重要组成部分，适量的运动可以改善骨代谢、提高骨生物力学性能、增加骨密度。
目的：从运动对骨代谢的影响、运动对骨生物力学的影响、运动对不同年龄段人群骨密度的影响及不同运动方式、运动强度、运动时间和频率对骨质疏松症的影响等方面，就运动干预对原发性骨质疏松症的研究现状进行探讨。
方法：检索2000年1月至2014年6月PubMed数据库及维普中文科技数据库。英文检索词为“Osteoporosis；Bone Density；Bone Diseases，Metabolic；Exercise Therapy”；中文检索词为“骨质疏松症；运动干预；骨密度；骨代谢”。根据纳入标准保留33篇进一步归纳总结。
结果与结论：运动对骨代谢影响的实验提示中等强度运动刺激和雌激素都可以改善骨质疏松的发生程度，对于骨质疏松症的预防、减缓及治疗有积极意义。经过适量运动训练，大鼠去卵巢后体内骨改建的高转换状态可以得到缓解。运动对骨生物力学的影响研究显示，运动和雌激素均能显著提高大鼠股骨骨密度和骨生物力学性能，但运动能够更好地提高骨硬度和增强骨抵抗变形的能力。说明运动训练对骨质疏松大鼠的骨骼和肌肉有良好的刺激效果，肌肉的增大对骨骼质量也有良性的刺激作用。研究结果提示，参加体育活动越早，有可能获得的骨峰值越高，任何时候开始有规律的运动，对维持一定的骨量都有积极的作用。不同时期的运动作用效果不同，儿童期增加骨量，成人期获得骨量并保存骨量，老年期保存骨量减少骨丢失，因此，不同的运动方式和运动强度、频率对骨密度的影响也不同，应根据患者的实际情况，选择合适的运动方式。 -
对骨质疏松性慢性疼痛：如何认知和预防？
背景：对于骨质疏松症的治疗，临床医师一般只关注骨密度的改善和降低骨折的发生率，却往往忽视与提高患者生活质量密切相关的缓解骨质疏松性慢性疼痛的治疗。
目的：就目前国内外有关骨质疏松性慢性疼痛的研究现状做一概述，以期对骨质疏松性慢性疼痛的基础研究和临床治疗有所帮助。
方法：应用计算机检索1999年3月至2014年3月万方医学网及PubMed数据库，以“骨质疏松；疼痛；骨质疏松性骨折；经皮椎体成形术”或“Osteoporosis； Chronic pain； Treatment of Osteoporotic； Vertebral Compression Fracture”为检索词进行检索。检索与骨质疏松性慢性疼痛特点、发病机制、药物治疗相关的文献，以及与骨质疏松性椎体压缩性骨折外科治疗相关的文献。终纳入49篇文章进行分析。
结果与结论：骨质疏松慢性疼痛的发病机制有淤血机制，细胞因子和乳酸堆积机制等，但其确切的细胞生化机制尚不十分明确。常用的药物治疗降钙素、二膦酸盐等，降钙素通过抑制骨吸收间接降低氢离子浓度，抑制前列腺素的合成，提高动物痛阈，提高血浆β-内啡肽浓度，而起到镇痛作用。二膦酸盐主要药理作用是抑制破骨细胞生成及其活性，抑制骨吸收，改善骨质疏松性骨痛，显著提高骨密度，增加骨强度，预防骨质疏松性骨折的发生。骨质疏松脊柱压缩性骨折及脊柱良恶性肿瘤采用经皮椎体成形或经皮椎体后凸成形治疗，完全或部分恢复椎体丢失高度，纠正后凸畸形，增加椎体稳定性，缓解疼痛。多种治疗方法联合为骨质疏松慢性疼痛行可行有效的治疗措施，同时，有效防治骨质疏松性骨折的发生对骨质疏松慢性疼痛的防治也具有积极促进作用。 -
过敏性紫癜患儿外周血单核细胞TLR2、TLR4、TLR6及与Treg相关细胞因子的表达
背景：Tol 样受体介导的信号通路转导及调节性T细胞异常活化在过敏性紫癜发病中的作用不清楚。
目的：研究Tol 样受体TLR2、TLR4、TLR6在过敏性紫癜患儿外周血单核细胞的表达及调节性T细胞(Treg)的免疫应答，探讨TLR及Treg活化在敏性紫癜发病机制中的作用。
方法：选择处于过敏性紫癜急性期的患儿42例为观察对象，另选取15名门诊健康查体儿童为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单核细胞的 TLR2、TLR4、TLR6的蛋白表达量；应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR检测外周血单核细胞TLR信号途径分子MyD88 mRNA的基因相对表达量；ELISA法测Treg细胞分泌的转化生长因子β、白细胞介素10的血浆水平；两组间比较采用独立样本t或t’检验，相关性分析采用Pearson相关检验。
结果与结论：过敏性紫癜患儿外周血单核细胞的TLR2、TLR4、TLR6蛋白的表达及MyD88 mRNA基因的相对表达量均显著高于对照组(P <0.01)；过敏性紫癜患儿血浆中转化生长因子β、白细胞介素10均高于对照组(P <0.05)；过敏性紫癜患儿TLR2、TLR4、TLR6的蛋白表达量与Myd88 mRNA的基因相对表达量呈正相关(P<0.01)，与血浆白细胞介素10、转化生长因子β水平无明显相关(P>0.05)。提示TLR2、TLR4、TLR6活化后可能通过MyD88依赖的途径参与敏性紫癜的发病，而过敏性紫癜急性期Treg代偿性活化可能为机体的保护性免疫应答。 -
神经肌肉电刺激治疗膝骨关节炎疼痛的Meta分析
背景：膝关节骨关节炎早、中期的治疗方法以对症治疗为主，有研究表明神经肌肉电刺激用于膝关节骨关节炎的治疗能改善患者的疼痛评分，但目前对于其疗效仍存在争议。
目的：评价神经肌肉电刺激治疗膝关节骨关节炎患者疼痛的疗效。
方法：计算机检索Medline数据库和手工查找神经肌肉电刺激治疗膝关节骨关节炎相关文献的全文，所有检索截止至2014年7月3日。搜集国内外研究神经肌肉电刺激对膝关节骨关节炎患者疼痛评分影响的随机对照试验，2名研究人员独立按照纳入和排除标准筛选文献，采用Cochrane协作网提供的Revman 5.2软件进行Meta分析。
结果与结论：共纳入5项随机对照试验，累计239例研究对象。Meta分析结果显示，与空白对照组相比，神经肌肉电刺激对减轻膝关节骨关节炎患者的疼痛无统计学意义[均数差=-0.40，95%置信区间(-1.34-0.54)， P=0.40]。结果表明，神经肌肉电刺激对改善膝关节骨关节炎患者的疼痛情况无明显疗效。但由于纳入的样本量较小，参数选择存在较大的差异，所以未来尚需大样本和高质量的随机对照试验对结果做进一步的证实。 -
破骨细胞骨吸收中肿瘤坏死因子α可提高空泡型质子泵表达与活性
背景：空泡型的ATP酶(V-ATPase)在破骨细胞的骨吸收功能中起重要作用，肿瘤坏死因子α对破骨细胞中的V-ATPase表达与活性的影响尚不明确。
目的：通过V-ATPase的表达与酶的活性变化，探讨肿瘤坏死因子α促进破骨细胞骨吸收功能的机制。
方法：体外诱导培养破骨细胞，分别给予不同质量浓度的肿瘤坏死因子α干预(5，10，30μg/L)。采用荧光定量 PCR 及 Western Blot 检测肿瘤坏死因子α对破骨细胞 V-ATPase 表达的影响；根据吸光度值计算出V-ATPase的相对活性；倒置显微镜下观察骨吸收陷窝形成情况，采用Image J软件分析骨吸收面积。
结果与结论：破骨细胞经过48 h的肿瘤坏死因子α干预以后，V-ATPase的表达与活性均有显著的增加，并且提高肿瘤坏死因子α的干预浓度均可增强此效应。破骨细胞经肿瘤坏死因子α干预后，培养板的骨吸收面积明显增加，这种作用随着肿瘤坏死因子α干预浓度的增加而增强。由此推测肿瘤坏死因子α作为一个重要的炎症递质参与病理性骨质吸收的过程，除促进破骨细胞形成以外，其可能的机制是肿瘤坏死因子α通过增加V-ATPase的表达，并提高V-ATPase活性，从而增强破骨细胞的骨质吸收活动。 -
双膦酸盐对破骨细胞分化及抗酒石酸酸性磷酸酶的影响
背景：抗酒石酸酸性磷酸酶是破骨细胞分化及骨吸收功能的特异性标志酶，是破骨细胞分化成熟的标志。
目的：观察双膦酸盐对破骨细胞分化及骨吸收功能相关因子抗酒石酸酸性磷酸酶的影响。
方法：小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培养破骨细胞。实验分2组：对照组开始时加入质量浓度100μg/L核因子kB受体活化因子配体进行诱导至收获细胞，双膦酸盐组在对照组的基础上加入10-7 mol/L阿仑膦酸盐处理至收获细胞。培养第7天检测各组破骨细胞生成和骨吸收功能，免疫荧光检测两组抗酒石酸酸性磷酸酶表达的差异，Western blot检测抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白表达情况。
结果与结论：各组细胞均有抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核破骨细胞生成，并在牙本质磨片上形成吸收陷窝；但对照组抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积均大于双膦酸盐组(P<0.01)。免疫荧光检测显示，对照组抗酒石酸酸性磷酸酶表达均强于双膦酸盐组(P<0.01)。Western blot检测显示，双膦酸盐组抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白的表达低于对照组(P<0.01)。说明双膦酸盐通过抑制抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白的表达，阻碍破骨细胞分化生成及骨吸收功能。 -
人破骨细胞分化中重组结核杆菌热休克蛋白10的影响
背景：体外小鼠颅盖骨实验已证实了其结核杆菌热休克蛋白10的破骨效应。
目的：在诱导破骨细胞分化的体外细胞培养系统中，研究重组结核杆菌热休克蛋白10对破骨细胞分化的影响及相关机制。
方法：选用人巨噬细胞集落刺激因子依赖性附着性血液单个核细胞，实验分为：核因子κB受体活化因子配体+重组结核杆菌热休克蛋白10组、核因子κB受体活化因子配体组、重组结核杆菌热休克蛋白10组(1 mg/L)、阴性对照组(完全培养基)，核因子κB受体活化因子配体+重组结核杆菌热休克蛋白10组、重组结核杆菌热休克蛋白10组中重组结核杆菌热休克蛋白10质量浓度为1 mg/L，在含有巨噬细胞集落刺激因子的a-MEM培养液重悬单核细胞，各组培养7，14，21 d后，观察所形成的抗酒石酸酸性磷酸酶阳性染色多核细胞的形态、数目、骨吸收面积；各组NFATc1、c-Fos基因及蛋白表达情况。
结果与结论：阴性对照组无抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核破骨细胞分化生成，其余各组均有抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核破骨细胞分化生成，并在小牛骨磨片上形成吸收陷窝；重组结核杆菌热休克蛋白10组形成的破骨细胞分化细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积显著低于核因子κB受体活化因子配体+重组结核杆菌热休克蛋白10组；阴性对照组 NFATc1、c-Fos基因表达水平显著低于核因子κB受体活化因子配体+重组结核杆菌热休克蛋白10组和重组结核杆菌热休克蛋白10组，而重组结核杆菌热休克蛋白10组表达NFATc1、c-Fos蛋白，显著低于核因子κB受体活化因子配体+重组结核杆菌热休克蛋白10组。提示结核杆菌热休克蛋白10参与破骨细胞分化的形成，可能与诱导相关基因NFATc1、c-Fos表达上调有关。 -
乳兔成骨细胞原代培养与鉴定：改良胶原酶与胰酶的分段消化
背景：成骨细胞获取的方法较多，如何简便而迅速的获得高纯度的成骨细胞成为研究的热点。
目的：比较组织块法、胶原酶消化法、改良胶原酶和胰酶分段消化法体外培养纯化乳兔颅骨来源的成骨细胞结果及其细胞的生物学特点。
方法：取新生24 h内新西兰大白兔乳兔颅盖骨，采用组织块法、胶原酶消化法和改良胶原酶和胰酶分段消化法分离获取兔原代成骨细胞，并进行传代培养。通过倒置显微镜下形态学观察、锥虫蓝排斥法计数活细胞率及MTT法绘制细胞生长曲线、茜素红染色、细胞培养上清液碱性磷酸酶和骨钙素检测、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原免疫组织化学法和RT-PCR检测骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA的表达等对成骨细胞进行鉴定。
结果与结论：分离培养的成骨细胞均一性好、增殖能力强，具备成骨细胞的典型特征，茜素红染色阳性，Ⅰ型胶原免疫组织化学染色阳性，Ⅲ型胶原免疫组织化学染色阴性，细胞培养上清液碱性磷酸酶、骨钙素均有表达，PT-PCR结果有Ⅰ型胶原蛋白和骨钙素mRNA表达。改良胶原酶和胰酶分段消化法较传统胶原酶消化法有更高的细胞获取率，更好的细胞活性，且比传统胶原酶消化法耗时短(P<0.05)；组织块法操作方法为简单，细胞活性高，但是细胞产出率低、耗时长，不适合用于成骨细胞大规模培养。用改良的胶原酶和胰酶分段消化法可获得数量较多且纯度较高的成骨细胞，可以成为一种相对可靠、有效的原代成骨细胞的体外培养方法。 -
血管平滑肌细胞增殖与p21基因启动子甲基化的影响
背景：血管平滑肌细胞增殖、迁移及表型改变是动脉粥样硬化发生的中心环节，一系列相关基因的甲基化参与该过程。
目的：观察血管平滑肌细胞p21基因启动子甲基化对其增殖活性的影响。
方法：采用组织贴块法培养人脐血管平滑肌细胞，给予不同质量浓度氧化低密度脂蛋白(0，10，20，40 mg/L)孵育24 h，甲基化特异PCR检测p21基因启动子区CpG岛甲基化程度，反转录PCR检测p21 mRNA表达， MTT比色法测定血管平滑肌细胞增殖活性。
结果与结论：氧化低密度脂蛋白呈浓度依赖性促进p21启动子甲基化和降低p21 mRNA表达，同时平滑细胞增殖活性增高。提示氧化低密度脂蛋白可以通过p21基因甲基化促进血管平滑肌细胞增殖，p21基因甲基化可能在动脉粥样硬化发生中起到一定作用。 -
血小板源性生长因子B基因转染抑制缺血缺氧诱导心肌细胞凋亡
背景：血小板源性生长因子B(platelet-derived growth factor-B，PDGF-B)是一种有效的促血管生长因子，9型腺相关病毒(adeno-associated virus serotype，rAAV9)对心肌细胞具有良好的靶向亲和力，是目前缺血性心脏疾病基因治疗的理想载体。
目的：探索rAAV9介导PDGF-B基因(rAAV9-PDGF-B)体外转染乳鼠心肌细胞，抵抗缺血缺氧诱导心肌细胞凋亡的作用。
方法：分离培养原代乳鼠心肌细胞，分别将感染复数为1×105，1×106及1×107 MOI携带rAAV9-PDGF-B基因的重组9型腺相关病毒及空病毒(rAAV9-eGFP)转染乳鼠心肌细胞，逐日在荧光显微镜下观察eGFP的阳性表达，采用流式细胞仪测定rAAV9载体的转染效率，Western blot和免疫荧光鉴定PDGF-B蛋白表达情况；并于rAAV9-eGFP及rAAV9-PDGF-B(107感染复数)转染第5天时，建立体外心肌细胞缺血缺氧损伤模型，通过 TUNEL法检测心肌细胞凋亡数目，Western Blot 检测 Bax及 Caspase-3凋亡相关蛋白的表达，研究PDGF-B基因过表达抗心肌细胞凋亡的作用及可能机制。
结果与结论：rAAV9载体可有效转染乳鼠心肌细胞，eGFP和PDGF-B蛋白可在心肌细胞中高效正确表达，其表达强度随着转染时间和转染复数的增加而逐渐增强，第5天趋于稳定，此时各组转染率相比差异均有显著性意义(P<0.01)。rAAV9-PDGF-B组心肌细胞凋亡率低于rAAV9-eGFP组(P<0.05)，且rAAV9-PDGF-B组凋亡相关蛋白Bax和Caspase-3的表达与rAAV9-eGFP组比均显著下调(P <0.05)。结果表明，PDGF-B基因过表达可有效减轻缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡，其机制通过抑制Bax和Caspase-3蛋白表达而发挥作用，为rAAV9-PDGF-B载体用于缺血性心脏疾病的基因治疗提供依据。 -
姜黄素抑制NRLP-3表达对抗肿瘤坏死因子α诱导的人血管内皮细胞炎症
背景：前期研究表明，姜黄素对细胞氧化应激炎症有重要作用。
目的：拟进一步阐明姜黄素在血管内皮细胞病理性炎症反应中的生物学作用及机制。
方法：以人血管内皮细胞为细胞模型，应用肿瘤坏死因子α(10μg/L)作为刺激因子，姜黄素(0，50，100μmol/L)孵育24 h作为干预治疗组。应用HRP标记的BSA检测内皮细胞通透性，应用罗丹明标记的鬼笔碱染色检测F-actin 变化，酶联免疫吸附实验检测细胞分泌白细胞介素1β的变化，进一步通过免疫荧光染色检测细胞内核转录因子κB蛋白表达和转位；应用Western blot方法检测炎症小体相关基因NRLP-3和caspase-1的表达。
结果与结论：HRP-BSA检测提示，姜黄素可呈剂量依赖性对抗刺激引起的血管内皮细胞通透性增加。同时，抑制F-actin应力纤维的形成。ELISA检测发现，姜黄素治疗后，可呈剂量依赖性抑制肿瘤坏死因子α刺激引起的血管内皮细胞白细胞介素1β分泌。同时，免疫荧光分析证实，肿瘤坏死因子α刺激后，对照组血管内皮细胞中核转录因子κB表达持续增高且发生明显的入核转位现象，而100μg/L姜黄素干预组细胞中炎症递质转录因子核κB表达定位无明显改变。Western blotting结果证实，炎症小体调控基因NRLP3和caspase-1表达在姜黄素干预组受到明显抑制。结果表明姜黄素可通过减少核转录因子κB 的表达对抗肿瘤坏死因子α刺激引起的炎症小体活化和白细胞介素1β分泌，对抗细胞病理性炎症损伤发生。 -
透明质酸对人骨关节炎软骨细胞骨桥蛋白和CD44表达的影响
背景：软骨进行性破坏为晚期骨关节炎的特征性病变，骨关节炎相关因子透明质酸、骨桥蛋白、CD44在骨关节炎软骨中表达增加。
目的：通过透明质酸干预体外培养的人膝骨关节炎软骨细胞，探讨透明质酸对人膝骨关节炎软骨细胞 CD44与骨桥蛋白表达的影响。
方法：将软骨标本进行体外培养获取纯化的软骨细胞，分为3组：空白对照组、透明质酸干预组(100 mg/L)和透明质酸酶干预组(200 mg/L)。培养48 h后，采用Real-time Q PCR检测软骨细胞骨桥蛋白mRNA，CD44 mRNA表达水平。用SPSS 17.0统计软件包分析骨桥蛋白mRNA和CD44 mRNA经透明质酸干预前后表达的差异。
结果与结论：透明质酸组的骨桥蛋白 mRNA表达水平较空白组高，透明质酸酶组的骨桥蛋白 mRNA表达水平较空白组低；透明质酸组及透明质酸酶组的CD44 mRNA表达水平均较空白组低。结果提示透明质酸可以上调骨关节炎软骨细胞骨桥蛋白的表达；透明质酸在骨关节炎软骨细胞内对 CD44表达的影响具有双相性，其影响结果可能与透明质酸的相对分子质量有关。 -
低强度脉冲超声介导威灵仙干预兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原和转化生长因子β1的表达
背景：研究显示威灵仙可促进软骨细胞增殖，维持和促进软骨细胞合成蛋白多糖和Ⅱ型胶原；低强度脉冲超声能有效促进软骨细胞增殖、提高细胞膜的通透性，促进药物或基因的传递，从而提高药物的生物学效应。
目的：观察低强度脉冲超声介导威灵仙对体外培养的兔膝关节软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及转化生长因子β1表达的影响，探讨低强度脉冲超声介导威灵仙在软骨损伤修复中的作用及机制。
方法：体外分离培养兔膝关节软骨细胞，取处于对数生长期的2代细胞，随机分为4组：对照组，低强度脉冲超声组，威灵仙组，威灵仙+低强度脉冲超声组，干预3 d后分别采用CCK-8比色法检测软骨细胞增殖情况，细胞化学染色法分析Ⅱ型胶原分泌情况及Western blot检测转化生长因子β1的表达情况。
结果与结论：干预培养3 d后，与对照组比较，其他3组细胞数量均显著增加(P <0.05)，威灵仙+低强度脉冲超声组细胞数量多；威灵仙+低强度脉冲超声组软骨细胞Ⅱ型胶原表达面积、吸光度值均显著大于对照组(P <0.05)，且其差值大于低强度脉冲超声组、威灵仙组与对照组差值之和；威灵仙+低强度脉冲超声组转化生长因子β1表达水平显著，其相对灰度值显著高于其他各组(P <0.05)。结果提示低强度脉冲超声、威灵仙均可促进体外培养兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原、转化生长因子β1的分泌，二者联用具有一定的协同作用。 -
微型种植体支抗负载对邻近牙根及牙周组织的影响
背景：微型种植体植入过程中植入的位点和方向、微型种植体加载后的移动、牙齿移动后与微型种植体接触等都将导致牙根的损害。
目的：观察微型种植体负载不同周期后与其邻近的牙根和牙周组织的变化，以及牙周组织中骨保护素的表达变化。方法：beagle犬2只，在犬上颌第2，3，4前磨牙和下颌第2，3，4前磨牙及第1磨牙的牙根之间的唇侧牙槽间隔邻近牙根处各植入1枚微型种植体。每只犬各植入微型种植体14枚，上颌6枚，下颌8枚，其中上颌有2枚微型种植体设置为对照组不加载，其余均为实验组加载正畸力。微型种植体植入后2周，通过镍钛螺旋拉簧为微型种植体加载150 g的水平力。分别于微型种植体负载4周、8周后处死beagle犬，完整切取牙齿连同牙槽骨，苏木精-伊红染色观察以及免疫组织化学法检测牙周组织中骨保护素的表达变化。
结果与结论：当微型种植体邻近牙根时，牙根表面牙槽骨出现吸收陷窝；微型种植体负载与牙根相向的水平力后，牙槽骨吸收变的更加活跃。当微型种植体接触牙周膜时，牙根表面的牙骨质局部严重吸收甚至达牙本质层。微型种植体接触牙根后负载，大面积的牙骨质全层吸收，牙本质暴露在外并出现吸收。对照组骨保护素出现强阳性表达，8周表达显著；8周实验组的骨保护素阳性表达明显下降(P <0.01)。结果表明，微型种植体邻近牙根植入后，邻近微型种植体的牙根及牙周组织均受到不同程度的损伤。微型种植体负载与牙根相向的水平正畸力，短期内对牙周组织中骨保护素的表达影响较小，随着负载周期的延长，压力显著抑制了骨保护素的表达。提示当发现邻近牙根植入后，微型种植体不应再负载与邻近牙根相向的正畸力，而应该及时取出待牙根自行修复，避免对邻近牙根的损伤进一步加重。 -
富血小板血浆复合Bio-Oss/Bio-Gide修复兔牙槽骨临界骨缺损
背景：有研究发现，富血小板血浆可促进骨、软组织损伤修复，但在骨愈合过程中的作用仍存在争议，目前尚无定论。
目的：对比观察富血小板血浆复合Bio-Oss/Bio-Gide在兔牙槽骨缺损修复过程中的成骨效果，以探讨富血小板血浆在骨损伤愈合中的作用。
方法：选择新西兰大白兔16只，手术建立兔下颌牙槽骨临界骨缺损模型，采取自身对照，随机选择一侧下颌骨以富血小板血浆/Bio-Oss/Bio-Gide 修复骨缺损(实验侧)；另外一侧以 Bio-Oss/Bio-Gide 修复骨缺损(对照侧)。分别于术后2，4，8，12周时各处死4只，通过大体观察、X射线观察、CBCT骨密度测定、组织学切片观察以及新生骨占缺损面积百分比的测定，定性及定量分析牙槽骨缺损区的成骨效果。
结果与结论：术后2-12周的 X射线、CBCT及组织学切片观察显示，实验侧和对照侧均有不同程度的新骨形成以及植骨材料的降解吸收；12周时，实验侧缺损表面可见连续的皮质骨形成，植骨区新骨形成并趋于成熟，植骨材料降解吸收明显，对照侧修复效果次之。在术后2，4，8，12周各时间点，实验侧骨密度值均低于对照侧(P<0.05)，实验侧新生骨占面积百分比均大于对照侧(P<0.05)。说明在兔下颌牙槽骨缺损修复中，富血小板血浆/Bio-Oss/Bio-Gide比Bio-Oss/Bio-Gide具有更好的成骨效果，表明富血小板血浆可促进新骨的形成以及Bio-Oss骨粉的降解吸收。 -
对于中国医生难的永远不是技术！
这是一篇来自光明日报发表的文章，作者是北京大学第一医院急诊科原主任陈旭岩教授。之所以在此转载，我想读了这篇文章，有许多人会和我一样感动得流泪，抑或产生很多的思索……
“那是多年前的事了，许多细节已不甚清晰，但有些感动我终身难忘。
一个10多岁的男孩刚刚经历了母亲病故的重创，跟着父亲在北京靠卖晚报谋生。有一天，男孩突然病倒，在家坚持了整整一个月，实在扛不住了，才被父亲送到医院。入院时，他父亲身上仅有200元钱。这是他们父子进报纸的钱，也是谋生的后一点儿本钱。 -
模拟4000 m高住及抗炎活血解痉中药干预力竭运动大鼠肾细胞超微结构变化
背景：抗炎活血解痉中药具有修复肾脏组织，改善肾脏血液供应，降低肾小球毛细血管的通透性，增强肾小管的滤过功能的作用。
目的：探讨模拟4000 m高住及抗炎活血解痉中药对4周力竭运动大鼠肾细胞超微结构及α-平滑肌肌动蛋白表达的影响。
方法：将大鼠在速度为10 m/min坡度为0的跑台上进行适应性跑15 min，筛选出32只能完成跑的大鼠，随机分为正常对照组、力竭运动组、高住力竭运动组和给药力竭运动组，每组8只。正常对照组不进行运动，其他3组均进行力竭运动。高住力竭运动组模拟4000 m高住后再进行力竭运动；给药力竭运动组先给予抗炎活血解痉中药灌胃，再进行4周力竭运动。采用苏木精-伊红染色、透射电子显微镜观察各组大鼠肾细胞的超微结构，免疫组织化学法检测肾组织α-平滑肌肌动蛋白的表达。
结果与结论：力竭运动组可出现慢性肾损伤，肾小球滤过膜3层超微结构破坏，肾小管间质大量纤维化改变。与力竭运动组相比，高住力竭运动组和给药力竭运动组大鼠的运动量(跑距)增强(P <0.05)，肾超微结构的损伤有明显的改善，α-平滑肌肌动蛋白的表达显著下降(P <0.01)。结果证实，抗炎活血解痉中药灌胃与模拟4000 m高住干预对4周力竭运动诱导的肾超微结构损伤起保护作用。 -
血管性血友病因子A1分子在大肠杆菌中的可溶性表达及功能鉴定
背景：血管性血友病因子A1通过介导随流血小板在受损血管部位的黏附在初始止血中发挥至关重要的作用，但重组A1在原核中多为包涵体表达，不利于纯化及体外的功能研究。
目的：在大肠杆菌中稳定高效表达可溶性野生型血管性血友病因子A1以及突变型血管性血友病因子G1324S，并研究其生物学功能。
方法：将血管性血友病因子A1(野生型)、血管性血友病因子G1324S(功能失去型突变体)重组质粒分别转化到感受态细胞DH5α中，筛选提取质粒。将提取的质粒分别转化到大肠杆菌(E.coli)BL21、E.coli M15中，筛选挑单克隆菌于LB培养基，扩大培养。比较溶菌酶破碎法和超声波破碎法两种不同的裂菌方法，使目的蛋白血管性血友病因子A1的可溶性表达，经过Ni柱亲和层析纯化蛋白，用SDS-PAGE和Western-blot鉴定纯化的血管性血友病因子A1、血管性血友病因子G1324S纯度和免疫学活性；采用流动腔实验系统分析在不同流体剪应力条件下，血小板在两种目的蛋白上的黏附能力。
结果与结论：每100 mL上清液可分别纯化得到5.77 mg血管性血友病因子A1，6.83 mg血管性血友病因子G1324S纯品，并具有较高的纯度和免疫学活性。流动腔结果显示，对每个剪切应力下铺设不同A1分子的底板进行两两比较，随着流体剪应力从0.1 Pa提高1 Pa，G1324S突变组所黏附细胞数下降的幅度(46.8%)要远高于野生型组(20.5%)，说明突变后的A1分子的功能有所减弱。结果表明纯化的蛋白介导血小板黏附的能力与临床特征一致，野生型血管性血友病因子的结合活性明显高于突变型。 -
高频超声引导下胸背动脉穿支移植皮瓣的设计
背景：国内外先进的、具有代表性的研究穿支血管的诊断学技术有数字减影血管造影、CT、MRI等影像技术。血管显影清楚、精准性高，但有一定的创伤，且不易普及。
目的：应用高频超声探测胸背动脉及其穿支血管，为胸背动脉穿支皮瓣的术前设计提供参考依据。
方法：对15例拟行胸背动脉穿支皮瓣的患者，术前用高频超声探测穿支血管，重点探测各穿支血管走形、直径、穿支的位置，并进行体表标记。选取直径粗、位置表浅、血管走行平直的穿支血管为主干血管，设计并切取皮瓣。
结果与结论：15例患者胸背动脉全部发自肩胛下动脉，胸背动脉及其主要分支以及13例大于1 mm的主干穿支显示清晰，并与术中测量结果基本吻合。小于1 mm的穿支血管仅能显示点条状血流信号或基本无血流及频谱信号，且与周围组织分辨不清。1例经术前探测发现血管扭曲、变异，改行其他手术。2例穿支血管术前非探及，经术中解剖发现并证实。结果表明高频超声在穿支血管术前体表定位方面作用显著，结合计算机辅助断层增强扫描或核磁辅助增强扫描等影像技术，可发挥更全面、可靠的参考价值。 -
硬膜外注入亚甲蓝对腰椎脊髓及脊神经节结构的影响
背景：亚甲蓝可阻碍感觉神经的异常疼痛传导，其机制是阻断缓激肽诱导的痛觉过敏，消除局部组织炎症引起的痛觉过敏反应。
目的：观察亚甲蓝溶液对大鼠腰椎脊髓及脊神经节功能的影响，明确亚甲蓝治疗椎间盘源性腰痛的安全性。方法：将120只Wistar大鼠随机分为5组，每组24只。暴露大鼠腰节段硬膜，亚甲蓝0.2 mL组、亚甲蓝1 mL组、亚甲蓝2 mL组分别于大鼠硬膜外注入相应量的亚甲蓝；生理盐水组大鼠硬膜外注入1 mL生理盐水；空白对照组不进行此步操作。分别在注入后30 min，2 h，24 h，72 h每组分别随机对6只大鼠进行灌流固定，并切除相应节段脊髓及神经节，行苏木精-伊红染色，在光镜下观察对比组织结构改变。
结果与结论：亚甲蓝各组大鼠注入后30 min，2 h，24 h，72 h时间脊髓及神经根苏木精-伊红染色，显示脊髓背侧面结构完整，白质与灰质分界清晰，白质中神经纤维致密，纤维间有圆形或卵圆形的神经胶质细胞核；灰质后角神经纤维致密；神经元细胞，胞核圆形染色浅，核仁明显；细胞群间有成束的神经纤维。亚甲蓝各组大鼠腰椎脊髓及脊神经节与生理盐水组及空白对照组比较均无明显的组织结构变化。结果表明硬膜外注入1%亚甲蓝对脊髓及脊神经结构无明显影响。 -
复合骨折后下肢深静脉血栓形成Wells评分与D-二聚体及纤维蛋白降解产物的预测
背景：文献报道各种对深静脉血栓形成的诊断方法，但是结合危险度预测评分系统及多种实验室指标对深静脉血栓形成的预测诊断率的提高尚不明确。
目的：使用Wel s评分系统并结合D-二聚体及纤维蛋白降解产物提高诊断创伤后下肢深静脉血栓敏感性。方法：下肢骨折及脊柱骨折患者82例，排除患病前合并深静脉血栓形成高危因素的患者及曾患有深静脉血栓形成的患者。入院后检测患者D-二聚体、纤维蛋白酶原降解产物、纤维蛋白酶原、凝血酶原时间、部分活化凝血酶原时间、血小板计数、C-反应蛋白及血沉相关指标，并做彩色多普勒下肢超声检测。根据下肢深静脉栓塞评分表(Wel s评分表)评分分为低危、中危及高危患者。
结果与结论：彩色多普勒下肢超声检测深静脉血栓形成组30例；非深静脉血栓形成组52例，两组患者 D-二聚体及纤维蛋白降解产物的峰值差异有显著性意义(P<0.05)。Wel s评分低危患者13例、中危32例、高危37例，D-二聚体及纤维蛋白降解产物对诊断深静脉血栓形成的诊断正确率：中危患者深静脉血栓形成阳性预测值为44.44%，而高危患者的深静脉血栓形成阳性预测值为70.97%。logistic回归分析显示Wel s评分中危及高危组实验室指标与下肢静脉彩色多普勒超声检查结果均为正关联(P<0.05)。结果表明Wel s评分结合D-二聚体及纤维蛋白降解产物对预测创伤后下肢深静脉血栓的形成有临床意义。
