中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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SD大鼠脊髓损伤后微环境的模拟实验
背景：通过制作 SD 大鼠的轻、中、重度脊髓损伤模型，使之符合基础实验研究的脊髓损伤类型，可进一步了解SD大鼠脊髓损伤后的微环境变化，为临床治疗提供帮助。目的：模拟SD大鼠脊髓损伤后微环境，观察不同致伤势能的Al en’s模型和脊髓全切模型SD大鼠脊髓损伤后不同时间点的神经功能、病理以及运动诱发电位的变化。方法：选择125只成年雌性健康SD大鼠，随机分为假手术组、打击势能100 gcf组(20 g×5 cm)、打击势能200 gcf组(20 g×10 cm)、打击势能300 gcf组(20 g×15 cm)、脊髓全切组，每组25只，在制模成功后第1，5，7，14，28天采用BBB后肢运动功能评分、运动诱发电位监测、病理切片鉴定，观察各组大鼠脊髓损伤程度。结果与结论：①整个实验中SD大鼠死亡24只，脊髓全切组的死亡率和并发症高，每组的BBB评分均降低，随着时间延长BBB评分逐渐增高。各手术组与假手术组在对应时间点比较，差异有显著性意义(P <0.05)，打击势能300 gcf组和脊髓全切组在对应时间点比较，差异无显著性意义(P>0.05)。②各手术组在伤后1 d病灶处出现炎性细胞浸润，神经元细胞肿胀明显，随着时间推移，神经细胞减少；伤后28 d发现大量星形胶质细胞增生，瘢痕及脊髓空洞形成，打击势能300 gcf组、脊髓全切组明显重于打击势能100 gcf组、打击势能200 gcf组。③各手术组与假手术组的波幅及潜伏期在对应时间点比较，差异有显著性意义(P <0.05)；打击势能300 gcf组和脊髓全切组在对应时间点比较，差异无显著性意义(P >0.05)。结果表明致伤势能为20 g×5 cm，20 g×10 cm，20 g×15 cm，可模拟SD大鼠轻、中、重度脊髓损伤模型的微环境；不同势能的改良Al en’s模型较脊髓全切模型并发症低，更符合基础研究。
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电针刺激对脊髓挫伤模型大鼠神经细胞凋亡的影响
背景：实验研究表明，电针对于脊髓损伤的功能恢复具有促进作用，可以降低疼痛，提高急性脊髓损伤的术后疗效。目的：观察脊髓挫伤造模后电针刺激干预对损伤区细胞凋亡的影响，并分析其对脊髓挫伤大鼠神经功能保护的可能作用机制。方法：成年雌性SD大鼠66只，采用随机区组法分为假手术组20只和大鼠急性脊髓挫伤造模成功40只，造模成功大鼠再随机分为脊髓挫伤组、电针刺激组。分别于造模前、造模后1 d、3 d、1周、2周、3周、4周通过BBB评分、斜板试验进行运动功能评定。造模后3 d，通过TUNEL法检测各实验组大鼠脊髓挫伤区神经细胞的凋亡情况；RT-PCR、Western blot检测脊髓挫伤区周围bax、bcl-2、caspase-3基因转录和蛋白的表达；苏木精-伊红染色观察脊髓挫伤区病理组织形态学变化；HRP示踪观察神经纤维的再生情况。结果与结论：①电针刺激组2项运动功能评分在治疗后2周各个时间点均较脊髓挫伤组显著增加(P <0.05)。②造模后3 d经脊髓电针刺激组细胞凋亡指数均明显低于脊髓挫伤组(P <0.05)。③造模后72 h，与脊髓挫伤组相比经脊髓电针刺激组bax、caspase-3基因和蛋白表达显著降低(P <0.05)；bcl-2基因和蛋白表达显著升高(P <0.05)。④造模后4周，HRP阳性神经纤维数：假手术组多，电针刺激组次之，脊髓挫伤组少，各组之间差异有显著性意义(P <0.05)。结果提示，电针刺激治疗通过减少大鼠脊髓挫伤区神经细胞的凋亡对脊髓挫伤起到保护作用。
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新型脊髓完全横断缺损模型大鼠的建立
背景：大鼠脊髓完全性横断模型是研究神经组织工程的常用模型，使用既往造模方法横断脊髓后，无法保证断端间隙长度的相对统一，以致无法客观评价各种治疗方法或组织工程材料的效果。目的：采用自制的双刃显微剪刀建立大鼠脊髓完全横断缺损模型，并通过与常规造模方法比较，探索这种新模型的可行性。方法：成年雌性SD大鼠42只，随机分为A组(n=6)、B 组(n=18)和C组(n=18)，A 组仅行椎板切除；B组用尖刀在已显露脊髓的中间位置横向切断脊髓，刀尖要触及椎管前壁和侧壁骨面，反复切割，制备脊髓完全横断模型；C 组采用自制双刃显微剪刀制备脊髓完全横断模型，用一钝头小钩将手术缝线从已显露脊髓的腹侧穿到对侧，轻微抬起脊髓，用双刃显微剪刀将脊髓、硬脊膜及血管一次性全部切除。结果与结论：①B和C组大鼠造模后1周，后肢完全性瘫痪，BBB评分接近，但脊髓残端间距离有显著差异。②造模后4周，两组大鼠后肢功能有不同程度恢复，但BBB评分差异无显著性意义。③造模后8周，两组大鼠后肢运动功能评分差异有显著性意义；生物素化葡萄糖胺示踪显示：B 组大鼠损伤尾侧可观察到少量被标记的轴突纤维，而C组大鼠尾侧无被标记的神经纤维，说明脊髓横断完全。④以上结果提示：使用自制的双刃显微剪刀造模方法可有效消除个体差异，有利于治疗效果的量化分析和研究对比。
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丙泊酚干预脊髓损伤模型脊髓水肿及后肢电生理的变化
背景：大量研究证实，丙泊酚通过改善脊髓损伤的微环境，可以有效减少继发性神经损伤。目的：探讨丙泊酚干预对脊髓损伤大鼠脊髓水肿和后肢电生理的影响。方法：按照改良的Al en打击法形成大鼠急性脊髓损伤模型，取建模成功40只大鼠随机分为脊髓损伤组和丙泊酚组，每组20只，丙泊酚组尾静脉泵注丙泊酚。另20只假手术组大鼠只暴露脊髓组织。分别于造模前、造模后1，3 d与1-4周通过BBB评分、斜板实验进行运动功能评定。造模后72 h采用TUNEL法检测脊髓损伤神经元凋亡情况，RT-PCR和Western blot法检测脊髓组织水通道蛋白4/9、基质金属蛋白酶9/2 mRNA和蛋白的表达。造模后4周进行免疫组化和苏木精-伊红染色观察脊髓组织病理变化，运动诱发电位和体感诱发电位分析大鼠神经电生理恢复情况。结果与结论：①造模后1-4周，丙泊酚组BBB评分、斜板实验评分均高于脊髓损伤组(P <0.05)，但均较假手术组低(P <0.05)。②脊髓损伤组凋亡细胞数明显多于丙泊酚组(P <0.05)，假手术组没有凋亡细胞。③脊髓损伤后72 h，丙泊酚组损伤区脊髓组织水通道蛋白4/9、基质金属蛋白酶9/2 mRNA和蛋白表达高于假手术组(P <0.05)；丙泊酚组大鼠损伤区脊髓组织水通道蛋白4/9、基质金属蛋白酶9/2 mRNA和蛋白的表达较脊髓损伤组明显减少(P <0.05)。④造模后4周，丙泊酚组脊髓损伤区组织较为疏松，脊髓空洞较小，可见部分神经元坏死，丙泊酚组神经纤维密集程度介于假手术组与脊髓损伤组之间。⑤丙泊酚组运动诱发电位和体感诱发电位明显恢复，潜伏期缩短，波幅增高，与假手术组和脊髓损伤组比较差异有显著性意义(P <0.05)。⑥结果表明丙泊酚能够减少脊髓损伤后神经元细胞凋亡，降低脊髓水肿相关基因表达，改善电生理功能及肢体运动功能。
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两种不同Duchenne型肌营养不良症模型鼠神经肌肉接头结构的比较
背景：Duchenne 型肌营养不良症患者神经肌肉接头结构存在缺陷，主要表现为乙酰胆碱受体结构碎片化和突触后膜上棘状突起的减少，一直以来，公认这种结构上的缺陷是肌细胞结构破坏、肌纤维坏死所致。目的：探讨Duchenne型肌营养不良症模型鼠肌肉神经肌肉接头结构受损的原因。方法：引进雄性mdx小鼠和雄性dko小鼠(两者均为Duchenne型肌营养不良症模型)，经基因鉴定后供实验使用，选用雄性 C57BL/6小鼠为正常对照。采用苏木精-伊红染色检测模型鼠肌肉病理改变；应用免疫荧光染色显示神经肌肉接头结构。比较两种不同Duchenne型肌营养不良症模型鼠肌肉组织dystrophin表达、病理变化及神经肌肉接头结构差异。结果与结论：引进的模型鼠在基因型和蛋白表达层面均符合实验的要求，两种模型鼠神经肌肉接头上的乙酰胆碱受体数量有明显减少的趋势，尽管dko鼠肌肉较mdx鼠呈现出更为明显的炎性浸润和肌纤维破坏，但两者神经肌肉接头在结构上的受损并无明显差异，其乙酰胆碱受体的碎片化程度相似。这些证据表明，神经肌肉接头结构损伤和炎性病理反应是互相独立的事件，两者之间并无直接的关系。Dystrophin 基因缺陷是导致乙酰胆碱受体结构碎片化的主要原因。
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糖痹康对糖尿病模型大鼠坐骨神经胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体表达的影响
背景：中药复方糖痹康能够改善糖尿病大鼠神经传导速度，具有抗炎和抗氧化作用。胰岛素样生长因子Ⅰ是治疗糖尿病周围神经病变的一个关键靶点。目的：观察中药复方糖痹康对糖尿病大鼠坐骨神经胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体表达的影响。方法：采用高脂加腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型大鼠，建模后分别灌胃糖痹康4.18，8.35，16.7 mg/(kg·d)，并设置阳性对照弥可保组、模型组和正常对照组，灌胃16周。结果与结论：与模型组相比，弥可保组血糖水平差异无显著性意义，糖痹康高剂量组血糖显著降低(P <0.01)。免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测显示，弥可保组、糖痹康高剂量组大鼠体质量、坐骨神经运动神经传导速度、坐骨神经组织胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体蛋白和mRNA的表达均增高(P <0.05或P <0.01)。结果说明，糖痹康通过促进胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体表达而起到防治糖尿病周围神经病变的作用。
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急性马尾神经压迫后脊髓前角运动神经元细胞凋亡相关蛋白的表达规律
背景：马尾综合征往往遗留有会阴区皮肤感觉减退，尿便控制功能降低，甚至出现男性功能受损。实验研究发现外周神经纤维损伤后，神经元胞体会发生凋亡，这与损伤的性质、神经元种类、动物种属、年龄、与神经元距离等因素有关。目的：探讨急性马尾神经压迫后脊髓前角运动神经元细胞凋亡及相关蛋白的表达规律。方法：27只家犬随机分为3组，压迫组及对照组制备马尾神经压迫模型，正常组不造模。压迫组又分为水囊压迫持续4，8，12，24，48，72，168 h组，每组3只；对照组只置入水囊，不注水。采用TUNEL标记法检测脊髓前角运动神经元凋亡情况，免疫组化SABC法检测 Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达，用Qwin550Cw型图像采集与分析系统检测 Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达阳性细胞灰度值。结果与结论：急性马尾神经压迫后脊髓前角运动神经元细胞发生凋亡，压迫12 h即有阳性细胞检出，72 h神经元凋亡达到高峰。Bax、Bcl-2蛋白在正常组即有少量表达，Caspase-3蛋白在正常组、对照组无表达。Bax、Bcl-2蛋白表达于压迫持续8 h开始显著增加，72 h达高峰，168 h降至正常；Bax蛋白表达增幅较Bcl-2大。Caspase-3蛋白于压迫持续12 h开始表达，72 h达高峰，168 h仍有少量表达；Bax、Caspase-3蛋白表达在72 h达高峰，Bcl-2蛋白表达则无明显上升。提示急性马尾神经压迫后脊髓前角运动神经元发生凋亡；Bax、Bcl-2蛋白表达呈相互拮抗作用，在Bax/Bcl-2复合体中，Bax蛋白占优势时促进凋亡，诱发Caspase-3蛋白表达，导致神经元凋亡发生。
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人工虫草复合液对无心跳模型大鼠离体肾的低温保护作用
背景：无心跳供体已成为近年来有潜力的移植供体来源，为进一步改进供体保存液，在常规保存液高渗枸橼酸盐腺嘌呤液的基础上加入人工虫草制备人工虫草复合液，希望通过其抗氧化作用，减少供体损伤，提高供体质量。目的：探讨人工虫草复合液对无心跳大鼠离体肾的保存作用。方法：将39只SD大鼠毁损延髓，不进行体外呼吸循环支持，造成脑死亡诱导的无心跳模型后，随机等分为3组，人工虫草复合液组(n=15)、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液组(n=15)和生理盐水组(n=9)，分别用人工虫草复合液、高渗枸橼酸盐腺嘌呤液、生理盐水对离体肾脏进行4℃低温保存。结果与结论：与高渗枸橼酸盐腺嘌呤液组相比，人工虫草复合液组肾组织保存6和12 h后，形态损伤较轻，凋亡指数、丙二醛含量、Bax及Caspase-3表达水平下降，超氧化物歧化酶活力及Bcl-2表达水平上升；而保存24 h后，形态损伤程度接近，丙二醛含量下降，超氧化物歧化酶活力上升。提示人工虫草复合液对无心跳大鼠离体肾的抗氧化、抑制细胞凋亡方面保存效果优于高渗枸橼酸盐腺嘌呤液。
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盐负荷对自发性高血压模型大鼠胸主动脉应力松弛特性的影响
背景：近年来正常人尸体和动物动脉血管的力学特性和黏弹性研究取得了一定的成果。目的：定量分析正常饲养自发性高血压大鼠和盐负荷自发性高血压大鼠胸主动脉拉伸力学特性。方法：取20只自发性高血压大鼠，随机分为实验组和对照组各10只，对实验组大鼠持续盐负荷干预16周，对照组大鼠引用普通自来水，正常饮食。实验第16周，取两组大鼠胸主动脉各10个试样进行应力松弛实验。结果与结论：实验组大鼠胸主动脉试样7200 s应力下降量、7200 s归一化应力松弛函数下降值均低于对照组(P <0.05)。结果证实，自发性高血压大鼠和盐负荷自发性高血压大鼠胸主动脉应力松弛特性均发生了改变，其中盐负荷自发性高血压大鼠变化较显著。
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Notch1和Bmi-1蛋白在肺癌组织中的表达及意义
背景：有研究发现，Notch通路与 Bmi-1基因均有调节干细胞自我更新的能力，二者功能障碍可能与肿瘤的发生有很大的关系。目的：探讨Notch1和Bmi-1蛋白在肺癌组织中的表达水平及其临床意义。方法：获取87例肺癌患者术后肺癌组织(肺癌组)、40例心胸外科开胸手术和肺部纤维支气管镜检查所取经病理证实的正常肺组织(正常组)作为研究对象。采用免疫组织化学SP法检测两组标本中的Notch1和Bmi-1蛋白表达情况，并分析Notch1、Bmi-1蛋白表达与肺癌患者临床病理特征的关系。结果与结论：肺癌组Notch1、Bmi-1蛋白表达阳性率分别为61%、47%，均显著高于正常组标本(P<0.05)；肺癌组Notch1蛋白表达与Bmi-1蛋白表达具有显著的正相关关系(r=0.567，P<0.001)。不同性别、不同病理类型患者的Notch1、Bmi-1蛋白阳性表达率差异无显著性意义(P >0.05)；低分化肺癌、发生淋巴结转移、TNM分期Ⅲ-Ⅳ级患者的Notch1、Bmi-1蛋白阳性表达率显著高于高中分化肺癌、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ、Ⅱ级患者(P <0.05)。结果表明Notch1基因和Bmi-1基因可能与肺癌的发生、发展有一定的关系。
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祛浊化痰中药干预食饵性动脉粥样硬化模型兔血脂及相关炎性因子的变化
背景：多项动物实验和临床观察证明，祛浊化痰中药对血清脂质、脂蛋白和肝脂质有较好的调节作用。目的：观察祛浊化痰中药对食饵性动脉粥样硬化兔单核细胞趋化因子1、C-反应蛋白及血脂的影响。方法：将50只新西兰大白兔随机分为5组，空白对照组给予基础饲料喂养，同时灌胃给予生理盐水10 mL/(kg?d)，连续10周；模型组给予高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化模型，同时灌胃给予生理盐水10 mL/(kg?d)，连续10周；祛浊化痰预防组给予高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化模型，同时灌胃给予祛浊化痰中药10 mL/(kg?d)，连续10周；血脂康组给予高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化模型，同时一次性灌胃给予血脂康10 mL/(kg?d)，连续10周；祛浊化痰治疗组给予高脂饲料喂养10周制备动脉粥样硬化模型，同时灌胃生理盐水10 mL/(kg?d)，连续6周，此后改为灌胃给予祛浊化痰中药10 mL/(kg?d)，连续4周。第10周末，检测兔血脂、C-反应蛋白、单核细胞趋化因子1 mRNA表达水平，以及取主动脉进行病理观察。结果与结论：血脂康、祛浊化痰中药可通过降低血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、C-反应蛋白及单核细胞趋化因子1 mRNA表达水平，明显抑制动脉粥样硬化改变，其中祛浊化痰中药预防性应用的效果好于治疗性应用。
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升麻苷H-1利用鼻腔嗅觉区鼻-脑通道进行鼻脑靶向给药的可行性
背景：近些年研究表明，鼻腔给药作为脑靶向给药的途径之一，可有效使通过其他给药途径不易透过血脑屏障的药物绕过血脑屏障，靶向递送到脑部，为治疗中枢神经系统疾病提供一种极有发展前景的给药途径。目的：研究大鼠鼻腔给药及静脉注射升麻苷H-1的药代动力学和脑靶向性归经的组织分布特性，探索升麻苷H-1利用鼻腔嗅觉区的鼻-脑通道进行鼻脑靶向给药的可行性。方法：鼻腔给药及静脉注射给予升麻苷H-1后，检测各时间点血浆和主要的归经组织器官(肺、脾、胃、大肠、肝、肾、脑、大脑、小脑、脑脊液、嗅球、嗅区等)药物浓度，绘制药-时曲线，用DAS程序拟合房室模型并计算药代动力学参数。结果与结论：①升麻苷H-1吸收迅速，分布广泛。在主要的归经器官中，肺、脑药物浓度分布均远高于其他脏器组织。②升麻苷H-1鼻腔给药后经以下吸收通路直接转运入脑：鼻腔嗅黏膜吸收进入蛛网膜下腔的嗅球，然后相继进入嗅区、脑脊液大脑、小脑等部位，嗅球是药物分子经鼻腔入脑的必经之路。③与静脉注射给药相比，升麻苷H-1鼻腔给药具有明显的肺、脑靶向性。
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丹参接骨胶囊对闭合性股骨骨折模型大鼠骨折愈合的影响
背景：丹参接骨胶囊是因有显著活血化瘀、消肿止痛的功效而成为治疗骨折的常用中药制剂之一。目的：观察丹参接骨胶囊对闭合性股骨模型大鼠骨折愈合的影响。方法：将大鼠随机分为丹参接骨胶囊组、生理盐水组及正常组，丹参接骨胶囊组和生理盐水组制备闭合性股骨骨折模型大鼠，骨折后分别给予生理盐水、丹参接骨胶囊2粒灌胃；正常组正常饲养。观察骨折后7，14，28 d丹参接骨胶囊组及生理盐水组苏木精-伊红染色情况、血清骨钙素、Ⅰ型胶原的表达、骨痂转化生长因子β1蛋白/mRNA的表达。结果与结论：①苏木精-伊红染色显示，骨折后7 d，丹参接骨胶囊组、生理盐水组骨折组织病理变化无显著差异，骨折后14，28 d丹参接骨胶囊组股骨骨折病理修复较生理盐水组明显。②骨折后3，7 d丹参接骨胶囊组、生理盐水组大鼠血清骨钙素、Ⅰ型胶原的表达均明显升高(P <0.05)，两组表达趋势一致，其中丹参接骨胶囊表达量始终较生理盐水组高，且骨折后14，28 d表达量差异有显著性意义(P <0.01)。③骨痂转化生长因子β1表达在丹参接骨胶囊组、生理盐水组骨折后第3天出现1个峰值，随后浓度逐渐下降，直至骨折后第14天丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达又再度升高，出现第2个峰值，至骨折后第28天丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达浓度再次出现下降。此过程丹参接骨胶囊组、生理盐水组转化生长因子β1表达趋势一致，在7，14，28 d愈合时期，丹参接骨胶囊组大鼠转化生长因子β1表达均高于生理盐水组。④结果证实，丹参接骨胶囊能够促进骨折的愈合，其机制可能与促进血清骨钙素、Ⅰ型胶原及转化生长因子β1的表达有关。
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构建双足类大型鸟类鸸鹋股骨头坏死模型
背景：虽然对股骨头坏死动物模型的建立已经进行了许多研究，然而到目前为止仍难以模拟出理想的股骨头坏死的动物模型，尤其是股骨头塌陷模型。目的：建立双足类大型鸟类动物鸸鹋股骨头坏死模型，用于更好模拟人类股骨头坏死的治疗研究。方法：成年鸸鹋30只，建立液氮冷冻并射频加热交替损伤股骨头坏死模型。冷冻3个循环，采用局部液氮冷冻和射频加热交替的方法，进行闭合回路的液氮冷冻损伤和射频加热交替的损伤，造模后第6，12，16周进行大体观察、X射线、组织学检查和MRI检查，评价鸸鹋股骨头缺血坏死模型建模效果。结果与结论：经过液氮冷热交替法进行造模的鸸鹋于12-18周逐步出现股骨头坏死征象和影像学表现，通过X射线，组织学检查和MRI检查可见其股骨头坏死过程符合人类股骨头坏死病变的病理过程，且模型具有良好的可重复性。结果提示，采用液氮冷热交替法成功建立了鸸鹋塌陷性股骨头骨坏死模型，具有较好的塌陷率，可以用于骨坏死的机制研究和治疗评价。
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减体积肝移植模型大鼠肝脏组织miRNAs表达谱变化
背景：活体肝移植后肝脏再生是影响肝移植预后的关键因素，目前尚未见调控活体肝移植术后肝脏再生的特异性微小RNA(miRNA)的报道。目的：分析miRNAs在大鼠减体积肝移植后各时间点表达谱的变化，挑选并验证目的miRNAs，为大鼠减体积肝移植后肝脏再生干预策略提供靶标miRNAs，为临床活体肝移植后肝脏再生研究提供理论依据。方法：分别建立大鼠减体积肝移植模型和假手术模型，利用miRNAs基因芯片技术检测miRNAs表达谱的差异。在差异表达的miRNAs中挑选出目的miRNAs进行实时定量PCR检测，验证芯片结果的可信性。结果与结论：与假手术组大鼠肝组织相比，大鼠减体积肝移植肝脏组织中表达上调的miRNAs有11个，分别为let-7b-5p，let-7c-5p，miR-101a-3p，miR-103-3p，miR-130a-3p，miR-142-5p，miR-186-5p，miR-199a-3p， miR-21-5p，221-3p，miR-34a-5p；表达下调的miRNAs有4个miR-26b-5p，miR-150-5p，miR-19a-3p， rno-miR-146-5p。将挑选出的目的miRNAs进行PCR验证发现，miR-221-3p，miR-199a-3p在24 h，48 h，1周表达量与所对应的芯片结果近似，各自变化趋势与芯片结果一致，说明miRNA芯片结果可信。结果证实，大鼠减体积肝移植后伴有miRNAs表达谱的变化，实验挑选并验证了目的miRNAs。
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J2对同种异体穿透性角膜移植模型大鼠CD4+和CD8+T细胞免疫功能的抑制
背景：J2即是以CD4分子与MHC Ⅱ类分子复合结合物功能域(CD4-D1/MHC Ⅱ)为β靶点，在数十万种有机化合物化学数据库中进行计算机筛选获得的小分子化合物。在先期的研究中，作者分别采用口服和腹腔注射等全身用药的方式将J2用于小鼠皮肤移植及角膜移植模型，结果证明J2能够延长移植片的生存时间，抑制排斥反应的发生。为了能更好的发挥药物的靶向作用，并减少全身毒副反应，进一步将J2用于局部治疗角膜移植排斥反应。目的：观察新型免疫抑制剂J2对同种异体穿透性角膜移植大鼠模型CD4+和CD8+T细胞免疫功能的抑制作用。方法：以成年雌性Wistar 大鼠作为供体，SD大鼠作为受体，建立同种异体穿透性角膜移植模型。A组为正常SD大鼠结膜下空白溶剂0.05 mL注射组。手术大鼠随机分成3组：B组为SD大鼠自体角膜移植结膜下空白溶剂0.05 mL注射组；C组为同种异体角膜移植结膜下空白溶剂0.05 mL注射组；D组为同种异体角膜移植结膜下1% J2-纳米混悬液(NS)0.05 mL注射组。各组动物分别于移植后3 d、1周、2周、3周，使用流式细胞仪检测外周血中T细胞亚群分布情况并进行比较。结果与结论：B组各时间点外周血中淋巴细胞总CD3+、CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+差异无显著性意义；C组移植后3 d和1周总CD3+、CD4+、CD8+差异无显著性意义，1周和2周总CD3+、CD4+、CD8+数目增多，差异有显著性意义(P<0.05)；D组中，1周和2周时CD4+和CD8+无显著增生。同一时间点横向比较：3 d、1周、2周时D组总CD3+明显少于C组，差异有显著性意义(P<0.05)，而在第3周时D组与C组差异无显著性意义；CD4+在移植后3 d和1周时D组较C组数目少，但差异无显著性意义。CD4+/CD8+比值，在3 d、1周、3周时D组与C组比较差异均无显著性意义。提示J2通过抑制T淋巴细胞增生，抑制T细胞介导的角膜移植排斥反应。
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不同负荷运动对雄性肥胖模型小鼠性激素和精子质量的影响
背景：超重和肥胖会导致男性体内性激素的分泌出现紊乱，雌性激素含量的升高可能会对雄性激素的合成分泌产生抑制，并且会加剧脂肪堆积，形成恶性循环。而运动能有效降低体脂。目的：观察不同运动负荷对肥胖雄性小鼠性激素和精子质量的影响。方法：刚断乳的雄性C57BL/6J小鼠，分为正常对照组和肥胖造模组。肥胖造模组喂以高脂饲料10周建立小鼠肥胖模型。每日记录饮食饮水量，每周称体质量1次。造模成功后分为肥胖中度负荷运动组和大负荷运动组，运动干预8周，测量体长、体质量、腹腔脂肪、睾丸、附睾、精囊腺称质量；附睾尾精子计数法观察精子活性和活动度；酶联免疫法测定血清黄体生成素、卵泡刺激素、睾酮、雌二醇。结果与结论：与正常对照组相比，肥胖对照组小鼠体质量、腹腔脂肪质量、lee's指数显著升高(P <0.01)；睾丸和精囊腺系数显著降低(P <0.01)；血清黄体生成素、卵泡刺激素、睾酮水平显著降低、雌二醇水平显著升高(P <0.05)；精子数及活动度显著下降(P <0.01)。与肥胖对照组相比，肥胖中度负荷和大负荷运动组小鼠体质量、腹腔脂肪质量、lee's指数显著下降(P<0.05或P <0.01)；睾丸和附睾系数显著升高(P <0.05或P <0.01)。肥胖中度负荷运动组小鼠血清黄体生成素、卵泡刺激素、睾酮水平显著升高(P <0.05或P <0.01)，雌二醇水平显著下降(P <0.05)；精子数及活动度显著升高(P <0.01，P <0.05)。与肥胖中度负荷运动组相比，肥胖大负荷运动组小鼠腹腔脂肪质量和lee's指数显著下降(P<0.05)；血清黄体生成素、卵泡刺激素、睾酮含量，精子数及活动度下降(P <0.01)。结果说明长期高脂饮食诱发雄性早期肥胖会抑制生殖腺和生殖器官的发育，导致雄性激素水平和精子的质量下降；长期中等负荷运动能有效降低体脂，改善早期肥胖对雄性生殖器官和腺体的抑制作用，缓解肥胖对生殖功能的负面影响；长期大负荷运动降低体脂的效果虽然好于中等负荷运动，但对改善肥胖小鼠的雄性激素水平、缓解肥胖对生殖功能的负面影响方面作用不大，甚至有加重的倾向。
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高脂膳食和跑台运动构建模型大鼠腓肠肌葡萄糖转运体4和 cAMP反应元件结合蛋白的变化
背景：研究表明 PI3K/Akt 信号通路与骨骼肌葡萄糖转运体4的表达以及 cAMP 反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein，CREB)的功能发挥均相关，但PI3K/Akt信号通路在高脂膳食和运动对骨骼肌葡萄糖转运体4和CREB的影响中是否发挥作用尚无定论。目的：探讨PI3K/Akt信号通路在高脂膳食和跑台运动对大鼠腓肠肌葡萄糖转运体4和CREB的影响中是否发挥作用。方法：70只大鼠普通饲料适应性喂养2周后，随机分为普通饲料组(n=20)和高脂饲料组(n=50)，分别以普通饲料和高脂饲料饲养8周。普饲料组大鼠随机等分为普饲安静组和普饲运动组。选取高脂饲料组中体质量超过普通饲料组大鼠平均体质量加1.4倍标准差的大鼠20只，随机等分为肥胖安静组和肥胖运动组。普饲安静组和肥胖安静组大鼠不运动。普通饲料运动组和肥胖运动组大鼠经1周适应性运动后进行8周中等强度的跑台运动。结果与结论：①肥胖大鼠腓肠肌出现PI3K/Akt信号通路障碍，但葡萄糖转运体4表达没有显著变化；肥胖大鼠腓肠肌核蛋白CREB水平降低的原因可能与pAkt-Ser473水平下降有关。②运动干预在引起大鼠腓肠肌葡萄糖转运体4表达增加的同时明显上调了pAkt-Ser473的水平；运动干预明显升高普通膳食大鼠和肥胖大鼠腓肠肌核蛋白CREB表达，并与pAkt-Ser473的变化相一致。证实pAkt-Ser473水平的变化在高脂膳食和运动干预影响腓肠肌葡萄糖转运体4和CREB蛋白表达中可能发挥着重要作用。
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黄芪注射液干预人宫颈永生化上皮细胞体外实验模型的细胞凋亡变化
背景：宫颈永生化上皮细胞 H8在致癌因素诱导下可以发生癌变，当有协同因子共同作用时就会导致宫颈癌的发生。但临床上对于癌前病变的女性尚缺乏有效的干预治疗，此项治疗临床为空白。目的：分析黄芪注射液对人宫颈永生化上皮细胞(H8细胞)凋亡的作用及机制。方法：实验分2组，黄芪注射液药物组和空白对照组。①ELISA 法检测黄芪注射液作用后人宫颈永生化上皮细胞H8凋亡的 DNA片断。②酶标仪分析黄芪注射液作用后人宫颈永生化上皮细胞H8中凋亡酶caspase-3、caspase-9酶活性的变化。③Western blot检测黄芪注射液作用后，人宫颈永生化上皮细胞H8中caspase-3、caspase-9、PARP 蛋白表达的变化。结果与结论：①ELISA法检测，20 g/L黄芪注射液分别作用0，6，12，24 h后，人宫颈永生化上皮细胞H8 DNA片段随着药物作用时间的延长逐渐增多，且呈时间依赖性(P <0.05)。②酶标仪检测，20 g/L黄芪注射液作用0，6，12，24 h后，人宫颈永生化上皮细胞H8 caspase-3和caspase -9的活性增高，且呈时间依赖性(P <0.05)。③20 g/L黄芪注射液分别作用0，6，12和24 h后，人宫颈永生化上皮细胞H8中cleaved caspase-3、cleaved caspase-9表达逐渐升高，差异有显著性意义(P <0.05)；Cleaved PARP蛋白的表达逐渐下降，差异有显著性意义(P <0.05)。结果说明，黄芪注射液对人宫颈永生化上皮细胞H8具有较显著的诱导凋亡作用，其机制可能与上调caspase-3和caspase-9蛋白表达有关。
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头颈部不同部位肿瘤动物模型的建立及生长转移特性比较
背景：建立头颈部肿瘤的动物模型，为进一步研究其发病及转移机制，寻找积极有效的诊断及治疗方案有重要的临床意义。目的：比较头颈部不同部位动物模型肿瘤的生长特性、淋巴结转移及远处转移的特性。方法：VX2肿瘤细胞株复苏培养传代后建立荷瘤种兔，麻醉后从荷瘤处剥离肿瘤，制成肿瘤组织细胞悬液，在兔大腿内侧肌肉处注入瘤细胞悬液，制成传代兔，2周后传代。从传代兔大腿内侧获取肿瘤，制备肿瘤组织悬液，分别在兔耳部、舌部和鼻咽部注入，建立兔头颈部VX2肿瘤模型。结果与结论：3组兔精神、饮食、活动等存在明显差异，耳部移植兔明显好于舌部和鼻咽部。兔耳部、舌部、鼻咽部接种 VX2肿瘤细胞悬液，2周后均可成功的建立兔头颈部 VX2肿瘤模型，成瘤率耳部高，为100%(15/15)，舌部和鼻咽部成瘤率为93%(14/15)；不同部位VX2肿瘤模型经历了肿瘤迅速增长、中心坏死、表面破溃等阶段，生存期为4-6周；3组均出现头颈部淋巴结转移以及肺转移。苏木精伊红染色证实兔VX2肿瘤组织以及转移淋巴结为中至低分化鳞状细胞癌。说明VX2肿瘤组织细胞悬液接种建立的兔头颈部肿瘤模型具有建模周期短，稳定性好、易于重复、移植瘤成功率高、操作简单等特点，兔头颈部不同部位VX2瘤生长各具特点，可根据研究目的选择不同的种植部位。
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辅酶Q10干预糖尿病牙周炎模型大鼠牙龈组织白细胞介素17，23的表达
背景：辅酶Q10参与呼吸链的电子传递，具有抗氧化、减少细胞凋亡和抗炎的功能，已经在心血管病、糖尿病、肿瘤等方面取得了良好的效果，在糖尿病牙周炎领域的应用可能也具有一定的应用价值。目的：观察伴2型糖尿病牙周炎大鼠牙龈组织白细胞介素17及白细胞介素23表达的变化。方法：将48只Wistar健康雄性大鼠随机分为3组：空白对照组，牙周炎+糖尿病+生理盐水组，牙周炎+糖尿病+辅酶Q10组。空白对照组正常饮食，其他2组采用丝线结扎的方法建立伴牙周炎模型，采用高脂高糖饮食+腹腔注射链脲佐菌素的方法建立2型糖尿病模型。造模成功后辅酶Q10组大鼠连续8周灌胃辅酶Q10，生理盐水组大鼠给同等剂量的生理盐水，分别于给药前，给药第2，4，8周末随机处死4只，采用免疫组织化学法检测牙龈组织中白细胞介素17及白细胞介素23表达水平。结果与结论：第8周末，生理盐水组白细胞介素17、白细胞介素23的阳性表达率显著高于辅酶Q10组(P <0.05)。辅酶Q10可以降低伴2型糖尿病牙周炎大鼠牙龈组织白细胞介素17、白细胞介素23的表达，减轻牙周组织炎症反应。
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β-酪啡肽7对链脲佐菌素诱导糖尿病肾病模型大鼠的肾保护
背景：研究发现β-酪啡肽7有对糖尿病模型大鼠减轻肾小管上皮细胞的氧化及降血糖的作用，但关于β-酪啡肽7对糖尿病肾病作用机制的研究比较少。目的：探讨β-酪啡肽7对糖尿病肾病模型大鼠肾损伤的作用。方法：将30只大鼠随机以n=10等分为对照组、模型组和β-酪啡肽7组。构建糖尿病模型大鼠20只，造模成功后模型组和β-酪啡肽7组模型大鼠腹腔注射链脲佐菌素(60 mg/kg)，对照组腹腔注射等量柠檬酸液，β-酪啡肽7组模型大鼠给予β-酪啡肽7灌胃30 d，模型组和对照组给予等量生理盐水灌胃。结果与结论：①与对照组相比，模型组大鼠胰岛素水平降低，血糖、尿糖、尿蛋白、血清肌酐、血清尿素氮水平以及肾脏中Ⅰ型胶原蛋白和Ⅳ型胶原蛋白的 mRNA 和蛋白表达水平增加。②与模型组相比，β-酪啡肽7组模型大鼠上述指标明显恢复。表明β-酪啡肽7对糖尿病肾病模型大鼠肾损伤有保护作用。
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活性维生素D3干预保护2型糖尿病模型大鼠肝脏的作用机制
背景：活性维生素D3在2型糖尿病及其并发症发生发展中发挥着重要的调节作用。目的：探讨活性维生素D3干预保护2型糖尿病模型大鼠肝脏的作用及其机制。方法：将35只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和维生素D3干预组，后2组高脂高糖饮食并腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。维生素D3干预组予以0.03μg/(kg?d)的骨化三醇灌胃(溶于花生油)，正常对照组和糖尿病模型组以花生油灌胃。8周后麻醉处死，分离血清测定空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、三酰甘油，计算稳态模型胰岛素抵抗指数；留取肝组织，行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色、实时荧光定量PCR。结果与结论：①与糖尿病模型组相比，维生素D3干预组仅有三酰甘油、稳态模型胰岛素抵抗指数下降(P <0.05)。②与正常对照组相比，糖尿病模型组大鼠肝细胞肿胀、脂肪变性伴炎细胞浸润，JNK和 C-Jun及其磷酸化形式的蛋白表达、JNK和 C-Jun及其下游的肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β的mRNA表达均升高(P <0.05)；维生素D3干预组肝细胞肿胀及脂肪变性减轻，炎细胞浸润减少，同时上述全部因子的表达亦低于糖尿病模型组(P <0.05)。③结果证实，维生素D3保护2型糖尿病模型大鼠肝脏的作用机制可能与其下调JNK/C-Jun信号通路有关。
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体积分数95%乙醇建立薄型子宫模型大鼠子宫内膜中波蛋白和血管内皮生长因子的变化
背景：乙醇化学损伤法能够有效对大鼠子宫进行薄型子宫内膜建模，薄型子宫内膜增殖相关蛋白表达减少，有助于研究薄型子宫内膜相关发生机制，为临床治疗提供指导。目的：探索高浓度乙醇致薄型子宫后子宫内膜中波蛋白和血管内皮生长因子的表达变化。方法：SD雌鼠右侧子宫缓慢注入0.3 mL体积分数95%乙醇建立薄型子宫模型，左侧子宫注入等量生理盐水作为对照侧。结果与结论：与对照侧相比，大鼠损伤侧子宫内膜明显变薄，腺体数量减少，结构紊乱，波蛋白和血管内皮生长因子表达明显降低。说明体积分数95%乙醇损伤可有效建立大鼠薄型子宫内膜动物模型，且与增殖相关的蛋白在薄型子宫内膜中表达出现变化。
