中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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骨髓增生异常综合征患者SFRP5基因启动子区甲基化状态研究
背景:SFRP5基因启动子区的甲基化与急性髓系白血病的发生密切相关.作为白血病的前期,骨髓增生异常综合征患者中SFRP5基因启动子区的甲基化状态尚不清楚.目的:探索骨髓增生异常综合征中WNT/β-catenin信号传导通路拮抗基因分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)基因的甲基化状态.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)法对43例骨髓增生异常综合征患者的骨髓或外周血进行SFRP5基因启动子区甲基化状况检测,并以70例门诊普通患者的外周血作为对照.结果与结论:113例样本均成功进行了MSP检测,进入结果分析.43例骨髓增生异常综合征患者中检出5例(11.6%)SFRP5的甲基化,70例正常对照中检出1例(1.4%)SFRP5的甲基化,并且均为不完全甲基化状态.SFRP5在骨髓增生异常综合征患者中的甲基化率显著高于正常对照(χ2=5.511,P=0.019).43例患者样本中,17例为骨髓样本,26例为外周血样本.而5例甲基化的样本中,2例为骨髓样本,3例为外周血样本.样本的来源(骨髓/外周血)对于甲基化状态的结果无显著差异(χ2=0.001,P=0.982).提示,SFRP5基因的甲基化与骨髓增生异常综合征有相关性,SFRP5基因的甲基化可能是引起骨髓增生异常综合征的分子机制之一.
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静脉移植人脂肪间充质干细胞治疗大鼠颅脑损伤
背景:动物实验及临床研究证实间充质干细胞对创伤性脑损伤具有一定的治疗作用.目的:观察脂肪间充质干细胞移植治疗急性创伤性脑损伤大鼠行为学及损伤脑组织中胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白的表达.方法:以自由落体硬膜外撞击法制作SD大鼠脑损伤模型后随机分为3组:移植组于脑损伤48 h时经尾静脉注射Brdu标记的成人脂肪间充质干细胞;对照组不作处理;生理盐水组于脑损伤48 h时经尾静脉注射生理盐水.采用NSS评分法评价大鼠神经功能恢复情况;倒置显微镜观察脂肪间充质干细胞在损伤脑组织内的迁移情况;免疫组织化学法检测大鼠受损脑组织中胶质纤维酸性蛋白、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白表达.结果与结论:移植组NSS评分明显低于对照组与生理盐水组(P < 0.05).在受损伤脑组织周围可发现经Brdu标记的脂肪间充质干细胞.移植组大鼠受损脑组织中胶质纤维酸性蛋白和神经元特异性烯醇化酶阳性表达率明显低于对照组与生理盐水组(P < 0.05),且下降速度较快;巢蛋白表达明显高于对照组与生理盐水组(P < 0.05).证实脂肪间充质干细胞通过血脑屏障进入受损大鼠脑组织后,以上调巢蛋白基因的表达来发挥保护神经元、促进神经发育与再生的功能.
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逆向解剖法游离股骨/胫骨快捷制备小鼠骨髓细胞
背景:如何快速洁净地游离小鼠股骨和胫骨直接影响骨髓细胞缺血时间,虽文献报道可用手术刀片刮除、纱布和纸巾等器物协助去除肌肉组织.但对其具体操作技巧并无详细报道,也无统一简捷的方法.目的:寻找制备小鼠骨髓细胞快捷实用的方法,大限度减少骨髓细胞缺血时间.方法:采用逆向肌肉剥离法由踝关节向髋关节逆行解剖,以镊子配合剪刀行"剪合-滑动-折转"3个动作,彻底去除附着于小鼠后肢股骨的肌肉组织,快捷制备骨髓细胞悬液.记录解剖骨骼和制备骨髓细胞的时间,所得骨髓细胞培养72 h后光学显微镜观察,评价该制备方法的效果.结果与结论:骨骼解剖时间为(1.9±0.4) min,骨髓细胞悬液制备时间为(14.7±1.8)min;游离过程骨折断或髓腔破损率为0%;制备的骨髓细胞培养72 h,细胞数量[(8.1±2.0)×107个]较培养前[(4.7±0.7)×107]明显增加(P < 0.01),而活细胞比率在培养前(97.5±1.1)%和培养后(95.4±1.0)%无明显差异(P > 0.05);镜下微生物污染率为0%,未见肌肉细胞等污染.结果显示该方法快捷实用、不易污染、操作容易程序化,具有很好的参考价值.
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粒细胞集落刺激因子对骨髓极小胚胎样干细胞的动员和募集
背景:极小胚胎样干细胞(very small embryonic-like stem cells,VSEL-SCs)是一种非造血干细胞,具有类似胚胎干细胞的生物学特性.目前,心肌梗死后VSEL-SCs的研究较多,而急性脑梗死后VSEL-SCs的动员及其修复受损组织的研究在国内外报道尚少.目的:观察小鼠急性脑梗死后粒细胞集落刺激因子对骨髓来源的VSEL-SCs动员、募集及其作用机制.方法:线栓法制备小鼠大脑中动脉栓塞模型,腹腔内分别注射粒细胞集落刺激因子和生理盐水,观察术后神经功能评分,流式细胞分析计数动员到外周血中的VSEL-SCs数量;ELISA方法分析术后血浆及缺血侧脑组织中基质细胞衍生因子1水平的动态变化,免疫组化观察缺血边缘带的基质细胞衍生因子1阳性细胞表达.结果与结论:与生理盐水组相比,术后108 h粒细胞集落刺激因子组造模后神经功能评分明显降低(P < 0.05);术后72,108 h粒细胞集落刺激因子组动员到外周血的VSEL-SCs含量高于生理盐水组(P < 0.05);粒细胞集落刺激因子组血浆和脑组织中基质细胞衍生因子1水平高于生理盐水组(P < 0.05),血浆基质细胞衍生因子1水平与动员到外周血的VSEL-SCs数量成正相关;脑组织免疫组化中,粒细胞集落刺激因子组基质细胞衍生因子1阳性细胞多于生理盐水组.结果显示粒细胞集落刺激因子能使更多的VSEL-SCs从骨髓动员到外周血中,粒细胞集落刺激因子对缺血脑组织的保护作用,可能在于其能够使缺血边缘带的基质细胞衍生因子1表达增加,并通过CXCR4/SDF-1轴的趋化作用,使募集到梗死区域的CXCR4+细胞增多来实现的.
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大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞的分离及鉴定
背景:前期研究在大鼠阴茎海绵体组织中检测到了具有干细胞标志物及肌源性标志物的干细胞.目的:在前期研究基础上,对大鼠阴茎海绵体肌源性干细胞进行分离及表型鉴定.方法:取2月龄SD大鼠阴茎海绵体组织,采用Ⅰ型胶原酶、胰蛋白酶消化分离组织,采用Preplate差速贴壁技术对细胞进行初步纯化,获得PP1~PP6贴壁细胞,并进行流式细胞仪检测、免疫荧光细胞化学鉴定及Western blotting检测.结果与结论:连续6步差速贴壁分离后,PP1~PP6细胞贴附能力逐渐减弱,PP6细胞两三天后开始贴壁形成圆形或梭形.流式细胞仪检测PP6细胞中干细胞抗原1(+)5.7%、胚胎抗原(+)2.6%、结蛋白(+) 41.2%.免疫荧光细胞化学显示仅有少量细胞分别表达干细胞抗原1和胚胎抗原,均散在分布,干细胞抗原1主要表达于胞浆,胚胎抗原主要表达于胞核,表达结蛋白的细胞聚集,数量较多,主要表达于胞浆;亦发现有极少量双阳性表达细胞,即干细胞抗原1/胚胎抗原、干细胞抗原1/结蛋白和胚胎抗原/结蛋白.PP1~PP5细胞中未检测到干细胞抗原1及胚胎抗原蛋白明显表达,但在PP6细胞中则检测到干细胞抗原1及胚胎抗原蛋白的表达.结蛋白在PP1~PP6细胞中的表达逐渐增强.提示在大鼠阴茎海绵体中发现具有干细胞及肌源性干细胞表型的细胞.
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不同浓度淫羊藿含药血清干预骨髓基质干细胞的成脂分化
背景:如何抑制骨髓基质干细胞成脂分化,促进其成骨分化将是防治骨质疏松的新途径之一.目的:观察不同浓度淫羊藿含药血清对骨质疏松大鼠骨髓基质干细胞成脂分化的干预作用.方法:全骨髓培养法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,12只SPF级SD雌性大鼠按体表面积的方法给予淫羊藿水提液,药物以蒸馏水定容至所需浓度,相当于临床剂量的20倍、10倍、5倍灌胃,连续灌胃7 d后眼眶取血,观察各组干预后7 d成脂分化情况.结果与结论:中药低、中剂量含药血清组的成脂率低于空白组 (P < 0.01、0.05),说明中药淫羊藿含药血清发挥了抑制骨质疏松骨髓基质干细胞向脂肪细胞分化的作用.中药各剂量组的组间比较差异无显著性意义(P > 0.05),但3组成脂率数值方面以中剂量组佳.
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骨髓间充质干细胞立体定向移植联合亚低温治疗大鼠脑损伤
背景:临床研究证明,亚低温(33～35 ℃)能有效减轻继发性脑和脊髓损伤,对中枢神经损伤有确切的保护作用.目的:检测是否可以通亚低温治疗的方法提高骨髓间充质干细胞立体定向移植对重型颅脑损伤大鼠的治疗效果.方法:采用液压颅脑损伤仪,给予Wistar大鼠2.53.31～303.98 kPa液压冲击力,制成重型液压颅脑损伤大鼠模型,将其随机分为脑损伤组,骨髓间充质干细胞移植组,亚低温+骨髓间充质干细胞组.后2组伤后6 h将体外培养的SD大鼠骨髓间充质干细胞立体定向移植到脑损伤灶内,亚低温+骨髓间充质干细胞组同时给予低温治疗.伤后第3天用Western Blot检测脑组织中AQP4蛋白合成的变化,采用干湿比重法测脑组织含水量.伤后24 h,3 d及伤后1,2 周行动物神经学缺损评分,2周后处死行免疫组织化学和苏木精-伊红染色.结果与结论:亚低温治疗后,与脑损伤组和骨髓间充质干细胞移植组相比,亚低温+骨髓间充质干细胞组AQP4蛋白表达量及脑水肿程度也明显降低(P < 0.05),移植后1和2周,亚低温+骨髓间充质干细胞组的大鼠神经学缺损评分明显低于其他两组;且其脑组织切片中的神经元数量较其他两组明显增多(P < 0.01).提示骨髓间充质干细胞立体定向移植联合亚低温治疗大鼠脑损伤可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经学功能.
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不同孕期羊水间充质干细胞体外培养方法的比较
背景:以往对羊水间充质干细胞的培养多采集孕中期羊水,对妊娠其他阶段羊水进行间充质干细胞培养的研究还很少,特别是系统地对不同孕期羊水和不同培养基进行间充质干细胞培养的效果还未见报道.目的:比较不同孕期羊水中间充质干细胞体外培养的效果.方法:采用两种不同细胞培养基分别对60份妊娠时间为15~42周的羊水进行间充质干细胞的分离培养,观察间充质干细胞培养过程中生长状况及间充质干细胞培养成功率;细胞化学染色法检测间充质干细胞的化学性质;MTT法检测传代后间充质干细胞的生长曲线.结果与结论:采用含体积分数为10%胎牛血清的PRMI-1640培养基和AmnioMAXⅡ complete羊水专用细胞培养基对孕期为37~42周羊水的间充质干细胞培养成功率分别为8%和44%,孕期为21~36周羊水的间充质干细胞成功率分别为20%和60%.而孕期为15~20周的羊水用两种培养基培养成功率为100%.细胞化学染色结果显示:POX、SB(-),ACP、PAS、AENE(+),而NAP有1%为(+),不同孕期染色结果无差异.MTT法测定羊水间充质干细胞的生长曲线呈"S"形.孕期在15~36周的羊水间充质干细胞可以传15代以上仍然旺盛,而孕期为37~42周的羊水间充质干细胞传10代即表现为生长缓慢.结果表明采用AmnioMAXⅡ complete羊水专用细胞培养基可以明显提高晚期羊水间充质干细胞培养的成功率.羊水的佳采集时间为15~20周.
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立体定向移植骨髓间充质干细胞改善血管性大鼠的学习记忆能力
背景:大量的实验证明将骨髓间充质干细胞移植到复制的中枢神经系统疾病大鼠模型后,能迁移到损伤部位,表达神经细胞的潜在特性并且提高神经功能.目的:验证骨髓间充质干细胞对拟人类血管性痴呆模型大鼠学习记忆障碍的改善作用.方法:分离SD大鼠骨髓间充质干细胞,于细胞移植前掺入10 mg/L的BrdU进行标记.建立Wistar大鼠血管性痴呆样学习记忆障碍动物模型,随机分为模型组、假手术组与移植组.移植组致伤后第14天,通过立体定向途径移植骨髓间充质干细胞到大鼠海马,假手术组给予等量生理盐水,模型组大鼠不做处理.采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力.损伤后第90天处死大鼠,观察海马组织有无Brdu+神经元特异性烯醇化酶、Brdu+胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学双染阳性细胞,并且观察从侧脑室到海马是否存在神经元前体细胞的标志Doublecortin (DCX)吻侧迁移流.结果与结论:①移植组大鼠采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力逃避潜伏期及跨越平台次数优于模型组及假手术组(P < 0.05).②移植组大鼠海马组织及其周围可见免疫组织化学双染阳性细胞,但未见从侧脑室到海马关于神经元前体细胞的标志Doublecortin (DCX)吻侧迁移流.结果提示,骨髓间充质干细胞移植可以促进脑损伤大鼠的神经功能的恢复,其机制可能与移植细胞分化为神经元样和神经胶质细胞样细胞,并分泌或促进宿主分泌神经营养因子有关.
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成人外周血平滑肌祖细胞的体外培养
背景:外周血平滑肌祖细胞具有向平滑肌细胞分化的能力.目的:探索体外分离培养成人外周血平滑肌祖细胞的方法及其生长分化特性.方法:采用密度梯度离心法分离获得成人外周血单个核细胞,培养12 d后,应用流式细胞仪鉴定分析平滑肌祖细胞并分选纯化,继续培养诱导分化.采用倒置显微镜观察平滑肌祖细胞的形态变化,免疫荧光染色法观察其α-肌动蛋白的表达,同时应用Western blot法检测调宁蛋白、平滑肌肌球蛋白重链的表达情况.此外,观察平滑肌祖细胞的生长特性,绘制生长曲线.结果与结论:成人外周血单个核细胞诱导培养4 d时开始出现细胞集落,12 d时细胞呈明显梭形.流式细胞仪分析显示,CD14和CD105双阳性的平滑肌祖细胞占贴壁细胞的(71.8±7.2)%.分选纯化的平滑肌祖细胞培养到28 d呈旋涡状生长.间接免疫荧光染色显示,α-肌动蛋白表达呈阳性.Western blot检测显示,调宁蛋白和平滑肌肌球蛋白重链分别于14,21 d开始表达,并逐渐增加.生长曲线表明,细胞生长至第6天进入对数生长期,第12天后进入平台期.提示通过对外周血单个核细胞的诱导培养,可以获得大量的平滑肌祖细胞.它能稳定增殖,并可进一步分化为平滑肌细胞.
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构建携带胞嘧啶脱氨酶基因骨髓间充质干细胞及其对胶质瘤细胞的体外抑制作用
背景:转染胞嘧啶脱氨酶基因的骨髓间充质干细胞能有效地将化疗前药5-氟尿嘧啶转化成具有细胞毒性的化疗药物5-氟尿嘧啶,并在体外对胶质瘤细胞有显著的生长抑制作用.目的:探讨以骨髓间充质干细胞为基因治疗载体表达外源基因胞嘧啶脱氨酶基因对胶质瘤C6细胞增殖的影响.方法:分离、培养小鼠间充质干细胞,构建胞嘧啶脱氨酶基因与GFP联合的慢病毒载体,通过慢病毒包装法将胞嘧啶脱氨酶基因及GFP转染至小鼠骨髓间充质干细胞,获得稳定表达胞嘧啶脱氨酶基因及GFP的骨髓间充质干细胞,使其与胶质瘤C6细胞共培养,在培养液中加入5-氟胞嘧啶后应用流式细胞仪检测胞嘧啶脱氨酶基因对胶质瘤细胞的增殖影响.结果与结论:慢病毒介导的胞嘧啶脱氨酶基因及GFP基因成功转染小鼠骨髓间充质干细胞形成C57BL/6 mMSC-codA/eGFP细胞,C57BL/6 mMSC-codA/eGFP在5-氟胞嘧啶的作用下可引起胶质瘤C6细胞的明显凋亡,在5-氟胞嘧啶浓度为1×106 μg/ L条件下C6胶质瘤细胞凋亡率为60%(P < 0.05).提示,C57BL/6 mMSC-codA/eGFP可将5-氟胞嘧啶转化成5-氟尿嘧啶并对C6胶质瘤细胞生长有显著的限制作用甚至是致死效应.
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侧脑室移植骨髓基质细胞对脑缺血再灌注大鼠运动及认知功能的影响
背景:将骨髓基质细胞经侧脑室移植治疗大脑中动脉阻断缺血所致脑梗死模型鼠已取得一定效果,但尚未见对其认知功能的影响.目的:观察骨髓基质细胞侧脑室移植对大脑中动脉阻断缺血模型大鼠行为认知功能的影响,并观察脑梗死灶大小的变化和植入骨髓基质细胞的迁移路径.方法:制作SD大鼠大脑中动脉阻断缺血2 h再灌注模型后随机分为3组,骨髓基质细胞组及磷酸缓冲液组分别于梗死侧侧脑室注射骨髓基质细胞悬液5 μL(含约1.0×106个细胞)或等量的磷酸缓冲液,模型组和不造模的正常组不作任何处理.应用平衡木实验观察大鼠运动协调能力,水迷宫实验观察其游泳速度及空间学习记忆能力;苏木精-伊红染色观察梗死灶大小的变化,免疫组化观察BrdU阳性细胞的迁移路径.结果与结论:骨髓基质细胞组在移植后第3,7,14天平衡木评分均有显著改善(P < 0.05).移植后第7~10天,骨髓基质细胞组大鼠的游泳速度均快于磷酸缓冲液组(P < 0.05).骨髓基质细胞组大鼠寻找平台潜伏期的时间明显缩短(P < 0.05),在原平台象限所占时间百分比和路程百分比及穿越平台次数明显增加(P < 0.05).移植后7,14 d,各模型组大鼠苏木精-伊红染色均可见典型的脑缺血梗死病灶,梗死面积百分比无明显差异.BrdU染色显示,移植后第1天,阳性细胞都聚集在移植侧侧脑室,以紧密排列的细胞团形式存在于脑室壁;第3天大部分细胞穿越脑室壁以单个细胞形式向周围缺血区迁移;第14天移植细胞在梗死的纹状体、皮质可见.提示大脑中动脉阻断缺血后24 h侧脑室移植骨髓基质细胞可明显改善运动协调能力及空间学习记忆能力;移植骨髓基质细胞未能减小梗死灶大小,但侧脑室移植的骨髓基质细胞可存活并定向性地迁移至缺血的纹状体和皮质.
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糖尿病模型皮肤创面中人真皮多能干细胞向表皮细胞的分化
背景:研究表明,干细胞分化为何种细胞与其所处的微环境密切相关.因此设想:人真皮多能干细胞处于皮肤创面的微环境中,可能具有向人皮肤细胞转化的潜能.目的:探讨糖尿病皮肤创面微环境中的人真皮多能干细胞分化为表皮细胞的可能性.方法:分离培养人真皮多能干细胞并制作糖尿病裸鼠模型皮肤创面,将标记5-BrdU的第3~5代人真皮多能干细胞以注射方式回植入糖尿病裸鼠创面组织周围,分别于注射后2,3周取材,常规石蜡包埋、连续切片,行BrdU和角蛋白免疫组织化学染色.结果与结论:BrdU阳性细胞出现在表皮中,且连续切片中部分BrdU阳性细胞也同时表达角蛋白.说明在糖尿病创面愈合过程中,人真皮多能干细胞具有向表皮细胞分化的潜能.
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造血干细胞移植与血小板输注
背景:血小板输注被认为是对致死性出血为有效的治疗措施,已成为治疗造血干细胞移植后血小板减少的标准方法.关于血小板输注临床应用的相关研究资料相对缺乏,各医院间实际情况变化较大.目的:对52例造血干细胞移植患者移植期间血小板输注的情况进行回顾性分析.方法:将出现活动性出血所进行的血小板输注归为治疗性输注,在没有出血表现的情况下进行的血小板输注定义为预防性输注.根据24 h血小板回收率和出血改善情况来评价不同血小板输注性质、自体或异基因移植类型等因素对血小板输注疗效的影响.结果与结论:预防性和治疗性血小板输注有效率分别为63.6%和55.6%;接受造血干细胞移植患者血小板输注有效率和平均血小板升高值分别为60.9%和26.8×109 L-1.而自体造血干细胞移植组和异基因造血干细胞移植组间预防性和治疗性输注的疗效无差别.回归分析中,凝血功能异常被认为是影响血小板输注疗效的独立风险因素.
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骨髓间充质干细胞移植并用单唾液酸神经节苷脂治疗大鼠脑梗死
背景:神经节苷脂是目前世界公认的惟一具有修复神经损伤,重塑神经网络的特效物质.单唾液酸神经节苷脂是神经节苷脂的一种.目的:观察骨髓间充质干细胞移植并应用单唾液酸神经节苷脂治疗大鼠脑梗死的效果.方法:Wistar大鼠应用线栓法建立大脑中动脉阻塞模型后随机分为3组,建模成功6 h后通过尾静脉注射浓度为1×1010 L-1的骨髓间充质干细胞悬液或细胞培养液1 mL,同时经腹腔注射单唾液酸神经节苷脂水溶液或生理盐水,1次/d,连续3 d.静脉移植后24 h,3 d及伤后1、2 周行Longa行为学评分,检测神经功能的损伤情况.治疗3 d后用RT-PCR、Western Blot检测脑组织中AQP4mRNA表达和蛋白合成的变化.2周后行BrdU免疫组化和苏木精-伊红染色观察移植细胞的存活和对组织的修复情况.结果与结论:移植后1,2周,大鼠神经功能障碍评分细胞移植+单唾液酸神经节苷脂组低于细胞移植组,细胞移植组低于梗死组(P < 0.05);移植后3 d,脑梗死周围组织AQP4蛋白及其mRNA的表达梗死组高于细胞移植组,细胞移植组高于细胞移植+单唾液酸神经节苷脂组(P < 0.05);2周后BrdU免疫组化和苏木精-伊红染色切片中的神经元数量细胞移植+单唾液酸神经节苷脂组多于细胞移植组,细胞移植组多于梗死组(P < 0.05).结果提示骨髓间充质干细胞移植的同时应用神经节苷脂治疗可明显改善脑梗死大鼠的神经学功能.
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植物源性活性因子促进骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化
背景:以往研究已证实,在心肌梗死的大鼠体内,柔毛水杨梅粗提物EGJ能有效促进外源性的骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞.课题组进一步分离EGJ,终得到植物源性的活性因子cardiogenin,其是否也能促进间充质干细胞向心肌细胞分化呢?目的:分离柔毛水杨梅的活性因子cardiogenin,并观察其促进骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞的作用.方法:分离并纯化大鼠的骨髓间充质干细胞,分别用柔毛水杨梅醇的粗提物EGJ 100 mg/L和cardiogenin 10 mg/L来处理间充质干细胞.在处理间充质干细胞的第3天和第7天用免疫荧光的方法进行心肌分化特异性标记物免疫染色,检测被处理的间充质干细胞是否表达心肌特异性标记物.结果与结论:处理3 d后,EGJ组和cardiogenin组有39%的细胞表达心肌分化早期的特异性标记物 Mef2.第7天,EGJ组和cardiogenin组有70%以上的细胞表达心肌细胞的肌球蛋白重链 MHC.结果显示EGJ和cardiogenin均能诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化,但cardiogenin的用量比EGJ少5~10倍,诱导分化的效率也略高.
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体外心肌梗死微环境下大鼠骨髓间充质干细胞向内皮样细胞的分化
背景:间充质干细胞来源于中胚层,具有多向分化的能力.有研究显示骨髓间充质干细胞有向内皮细胞分化的能力,从而有助于心肌梗死后心脏新生血管的形成和心肌修复.目的:观察骨髓间充质干细胞体外成内皮样细胞分化的特点,以及体外模拟心肌梗死微环境对骨髓间充质干细胞向内皮样细胞分化的影响.方法:骨髓取自SD大鼠股骨和胫骨,骨髓分离培养骨髓间充质干细胞,体外扩增,对其形态学、增殖能力及多向分化能力进行鉴定;建立大鼠心肌梗死模型,制备8 h、3 d、1周、2周、4周梗死后不同时间点心肌组织的匀浆,分别加入到由血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子β、胰岛素样生长因子1组成的内皮细胞诱导体系中,共同诱导2周后,观察不同时间的心肌组织匀浆对骨髓间充质干细胞增殖和成内皮分化的影响,检测vWF特异性抗原及表达的阳性率.结果与结论:通过对培养细胞的形态学及功能鉴定,证明其为骨髓间充质干细胞,并具有成骨、成脂肪细胞、成内皮样细胞分化的能力.加入生长因子诱导体系诱导后的细胞部分表达vWF,梗死心肌匀浆与生长因子共同作用,能促进骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化,vWF阳性率提高(P < 0.05).RT-PCR显示加入梗死1周心肌组织匀浆诱导的骨髓间充质干细胞其vWF阳性表达率高.提示骨髓间充质干细胞是一种具有多向分化能力的有别于造血干细胞的另一种骨髓干细胞.骨髓间充质干细胞具有向内皮分化的能力,且加入梗死心肌组织匀浆的诱导体系在体外可促进骨髓间充质干细胞向内皮细胞的分化.应用骨髓间充质干细胞治疗的佳时机在1周为宜.
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大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中Hedgehog信号分子的表达
背景:Hedgehog信号通路是一个在胚胎阶段调控多种组织器官发育的重要信号通路,在成骨发育方面具有重要的作用.但Hedgehog信号分子在大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为成骨细胞过程中的作用尚未清楚.目的:体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨分化,检测Hedgehog信号分子在成骨诱导分化过程中的变化.方法:从大鼠骨髓中分离得到骨髓间充质干细胞,进行地塞米松成骨诱导,通过免疫组化方法鉴定成骨的情况,Western Blot方法检测 Hedgehog信号分子SHH和IHH在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中的表达.结果与结论:成功分离得到骨髓间充质干细胞,地塞米松诱导培养7,14,21 d 后,Ⅰ型胶原的表达量逐渐增加;在诱导成骨分化过程中,SHH蛋白表达升高,诱导组的表达明显高于未诱导组的表达(P < 0.05),而IHH蛋白的表达降低,诱导组的表达明显低于未诱导组的表达(P < 0.05).结果提示,Hedgehog信号分子参与地塞米松诱导骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞的过程,且SHH和IHH在间充质干细胞诱导成骨过程中的作用有差异.
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前列腺素E1对人类脂肪源性基质细胞体外增殖的影响
背景:近年来脂肪源性基质细胞成为研究与应用的热点之一,但前列腺素E1对脂肪源性基质细胞增殖的作用影响尚未见报道.目的:观察前列腺素E1对人类脂肪源性基质细胞体外增殖的影响.方法:从人正常脂肪组织分离培养脂肪源性基质细胞,用5种不同浓度的前列腺素E1处理培养的细胞,其中3×10-6,6×10-6,9×10-6,12×10-6 mol/L作为实验组,0×10-6 mol/L作为对照组,观察经不同浓度前列腺素E1处理后细胞的增殖情况.结果与结论:不同浓度实验组的细胞数量与对照组相比均显著升高,差异有显著性意义(P < 0.05),各实验组内相比,细胞数量增殖无显著性差异(P > 0.05).提示前列腺素E1具有促进脂肪源性基质细胞的增殖作用,且前列腺素E1的影响效果无剂量依赖性.
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P53-P21蛋白通路对5-氮杂胞苷诱导的大鼠骨髓间充质干细胞增殖和凋亡的影响
背景:5-氮杂胞苷是诱导骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的有效化学试剂.目的:观察P53特异性抑制剂PFT-α阻断P53-P21蛋白通路对5-氮杂胞苷诱导的大鼠骨髓间充质干细胞增殖和凋亡的影响.方法:分离SD大鼠骨髓间充质干细胞,取第3代细胞分为4组,即正常对照组、5-氮杂胞苷组、PFT-α组、PFT-α+5-氮杂胞苷组.观察骨髓间充质干细胞培养传代过程中细胞形态变化,应用流式细胞仪鉴定骨髓间充质干细胞表面抗原,MTT法测定诱导后各组骨髓间充质干细胞增殖能力,以流式细胞仪检测诱导后各组细胞凋亡率,采用Western blot法测定诱导后P53、P21蛋白表达情况.结果与结论:原代培养的骨髓间充质干细胞2周形成集落,传代细胞体积变大,呈长梭形,排列趋一致.骨髓间充质干细胞表面抗原CD44,CD45阳性表达率分别为(89.98±1.29)%,(2.14±0.22)%.MTT结果显示,当PFT-α浓度≤20 μmol/L时,对骨髓间充质干细胞的增殖有一定促进作用;而当其浓度达到40 μmol/L时,PFT-α则可明显抑制骨髓间充质干细胞的增殖.培养第5,7天时,与其他3组比较,5-氮杂胞苷组对骨髓间充质干细胞增殖表现出明显抑制(P < 0.01).流式细胞仪结果显示,5-氮杂胞苷组骨髓间充质干细胞凋亡率显著高于其他3组(P < 0.01).Western blot结果显示,各组均有P53、P21蛋白的表达,以5-氮杂胞苷组表达量明显增多.提示通过P53特异性抑制剂PFT-α阻断P53-P21蛋白通路,能显著减少5-氮杂胞苷诱导的骨髓间充质干细胞的凋亡,促进5-氮杂胞苷诱导的骨髓间充质干细胞增殖.
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羊膜脱细胞基质对脐血间质干细胞突触蛋白表达的影响
背景:天然细胞外基质对成体干细胞神经发育的影响,是目前的研究热点,国内外研究多侧重于神经标志物表达的研究,针对突触发育的研究较少.目的:观察羊膜脱细胞基质对脐血间质干细胞突触素表达的影响.方法:实验组将第3代人脐血间质干细胞接种在包被膜样基质盖玻片的24孔板中,以接种时开始计时,细胞以基础培养基培养4 d.对照组无膜样基质,余同实验组.苏木精-伊红染色观察细胞形态变化,免疫组化SP法检测接种第2、4天细胞突触素相关蛋白表达,RT-PCR法检测接种前和接种后第2、4天细胞突触素相关蛋白Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ基因转录水平的表达.结果与结论:对照组呈成纤维细胞形态,实验组细胞突起延伸,相互连接;第2、4天实验组突触素相关蛋白表达均明显高于对照组,差异有显著性意义(P < 0.01);接种前及对照组第2、4天细胞突触素相关蛋白Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ基因转录水平无表达,实验组第2,4天细胞突触素相关蛋白Ⅱ基因转录水平低表达,突触素相关蛋白Ⅲ弱表达,突触素相关蛋白Ⅰ不表达.结果提示羊膜脱细胞基质可以促使人脐血间质干细胞突起的产生、延伸并部分相互连接,表达突触素相关蛋白,为脐血间质干细胞神经分化提供了有利的条件.
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白细胞介素6体外诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化
背景:骨髓间充质干细胞是肝细胞的重要肝外来源,在多种细胞因子和生长因子诱导下可分化为肝细胞,从而参与肝功能的修复和重建.目的:观察白细胞介素6是否可诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞定向分化.方法:采用贴壁法分离培养昆明种雄性小鼠骨髓间充质干细胞,在无血清肝细胞培养液HEPATOZYME-SFM中分别加入2.5,5,10,20 μg/L白细胞介素6诱导其向肝样细胞分化;诱导培养0,7,14,21,28 d时取出细胞爬片,细胞免疫组织化学法检测细胞角蛋白18、甲胎蛋白表达情况,过碘酸-Schiff糖原染色检测细胞功能,ELISA和硝酸还原酶法分别检测培养液中白蛋白和一氧化氮水平.结果与结论:当白细胞介素6质量浓度在2.5~10 μg/L范围内,呈浓度依赖性和时间依赖性增加细胞角蛋白18、糖原表达率及细胞培养液中白蛋白水平;甲胎蛋白表达为先升后降直至21d停止.当白细胞介素6质量浓度增加到20 μg/L时上述诱导作用均不及质量浓度10 μg/L组.只有10 μg/L白细胞介素6组诱导到28 d时细胞培养液中测得微量一氧化氮;提示白细胞介素6可诱导骨髓间充质干细胞向肝系细胞分化,且在10 μg/L作用强,质量浓度再增高时诱导作用反而减弱.
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地塞米松对大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响
背景:研究发现地塞米松能有选择性地促进骨髓间充质干细胞凋亡.目的:了解地塞米松对骨髓间充质干细胞凋亡的影响以及作用机制.方法:体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,传至第2代后分两组培养,对照组不加地塞米松,实验组分别加入10-9,10-8,10-7 mol/L地塞米松,作用3,6,12,24 h后通过流式细胞仪检测凋亡率.MTT法检测地塞米松对骨髓间充质干细胞增殖率的影响.取10-7 mol/L地塞米松作用骨髓间充质干细胞24 h,反转录后检测Caspase-3和bcl-2的表达.结果与结论:与对照组比较,10-8,10-7 mol/L地塞米松作用12~24 h对骨髓间充质干细胞的凋亡有明显促进作用,且与作用浓度和时间存在相关性,随着作用浓度的增大和时间的延长骨髓间充质干细胞的凋亡率有增高的趋势.MTT结果表明10-8,10-7 mol/L地塞米松作用24 h对骨髓间充质干细胞增殖率影响显著,这与上述流式细胞仪的检测结果相符.RT-PCR提示地塞米松作用组Caspase-3显著增高,bcl-2降低.结果证实地塞米松可能是通过细胞外通路和(或)线粒体通路促进骨髓间充质干细胞凋亡.
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马血清在脂肪干细胞成肌诱导中的作用
背景:利用5-氮杂胞苷诱导脂肪干细胞成肌实验对培养技术以及细胞活性要求较高,诱导成肌时间较长.倘若某种添加剂可缩短诱导时间,将具有重要意义.目的:评估马血清在5-氮杂胞苷诱导脂肪干细胞成肌细胞实验中的作用.方法:将第1代长满100 mm培养皿的脂肪干细胞传代至3个6孔板,实验组培养基中加入体积分数为5%马血清+10 μmol/L 5-氮杂胞苷;对照组培养基中单纯添加10 μmol/L的5-氮杂胞苷;空白组为单纯低糖DMEM培养基,余培养、传代及鉴定所需的条件相同.每日光镜观察记录形态,在培养的第7,14,28,35天行免疫荧光和流式细胞仪检测肌蛋白表达差异.结果与结论:免疫荧光检测成肌特异性胞质蛋白表达以及流式细胞检测相应蛋白表达率提示,加入马血清后的实验组脂肪干细胞的成肌速度和诱导成肌所需时间明显比单纯加入5-氮杂胞苷的对照组更有优势.实验初步表明马血清在促进脂肪干细胞诱导成肌方面起着缩短诱导成肌所需时间的作用.
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体外培养大鼠脂肪干细胞诱导分化为神经细胞
背景:脂肪间充质干细胞是一组具有多向分化潜能的干细胞,在不同诱导条件下可以向软骨细胞、骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞分化,在一定条件下也可分化为神经干细胞.目的:研究大鼠脂肪间充质干细胞的体外培养及细胞表型,探讨其向神经细胞方向分化的能力.方法:取SD大鼠的腹股沟、附睾垫和腹膜后脂肪,分离培养脂肪间充质干细胞,形态观察并进行传代.流式细胞仪检测第三四代细胞表型CD29、CD44、CD45.利用碱性成纤维细胞生长因子,表皮生长因子模拟神经细胞生长环境,使脂肪间充质干细胞向神经细胞方向分化,免疫荧光法检测诱导分化后神经细胞nestin、NF-200、GFAP 的表达情况.结果与结论:从大鼠的脂肪组织中成功提取脂肪间充质干细胞,并能连续传代,稳定增殖,高表达CD29(99.00±0.12)%,CD44(95.62±0.68)%,低表达CD45(0.13±0.12)%.经无血清的神经因子诱导后,脂肪间充质干细胞可表达nestin,加入血清后可表达NF-200、GFAP.提示脂肪间充质干细胞具有强大的体外扩增能力,体外建立神经诱导环境后可定向分化为神经细胞的生物学特性,可为神经系统损伤、退行性疾病提供种子细胞.
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骨髓间充质干细胞向肝样细胞的诱导及分化
背景:研究表明,在体外提供肝细胞及成纤维细胞生长因子等多种因子可诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化,但对其诱导的佳环境还处于摸索阶段.目的:观察体外应用肝细胞生长因子和成纤维生长因子4等多种因子联合诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化能力.方法:采用全骨髓贴壁培养法分离、扩增大鼠骨髓间充质干细胞,培养第3代时用肝细胞生长因子、成纤维生长因子4、胰岛素铁硒传递蛋白及地塞米松等联合诱导其向肝样细胞的分化.于诱导7,14,21 d后观察细胞形态变化,RT-PCR检测细胞白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白的mRNA表达;于诱导14,21 d行PAS糖原染色检测,并采用免疫细胞荧光法检测细胞白蛋白表达.结果与结论:随着诱导时间的延长,骨髓间充质干细胞表现为肝细胞样,并呈集落生长,肝细胞特异性标志物逐渐出现和成熟.细胞诱导至7 d出现甲胎蛋白mRNA表达,14 d表达增高,21 d时表达下降;14 d时细胞角蛋白18、白蛋白 mRNA和糖原出现表达,并随时间延长表达逐渐增加.细胞诱导14 d时,胞浆白蛋白出现表达,至21 d时表达增强.证实骨髓间充质干细胞在肝细胞生长因子、成纤维生长因子4等多种因子诱导作用下,具有强大的向肝细胞分化能力.
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脐血间充质干细胞的分离培养及生物学特性
背景:脐血富含干细胞,刺激后进入细胞周期的速度以及自泌生长因子的能力均强于骨髓及外周血干细胞.目的:建立一种分离纯化、培养扩增脐血间充质干细胞的方法,并观察体外培养脐血间充质干细胞的生物学特性.方法:密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,分离纯化脐血间充质干细胞.观察细胞形态,绘制细胞生长曲线,应用流式细胞仪测定细胞周期,以免疫组织化学法(SP法)测定CD29,CD44,CD34.采用体积分数20%马血清诱导脐血间充质干细胞分化为脂肪细胞,以油红O染色鉴定;0.1 μmol/L地塞米松,10 mmol/L β-甘油磷酸钠和50 μmol/L抗坏血酸诱导脐血间充质干细胞分化为成骨细胞,以碱性磷酸酶染色鉴定.结果与结论:分离获得了高纯度贴壁生长的间充质干细胞,间充质干细胞呈梭形,细胞传代稳定,在体外连续传代培养9代,未发生形态学改变,无衰老征象.第3代间充质干细胞体外可以分化为脂肪细胞和成骨细胞.提示采用淋巴细胞分离液密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,可以获得纯度较高的脐血间充质干细胞,脐血间充质干细胞体外增殖和传代能力强.
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神经干细胞与帕金森病
背景:帕金森病已经成为中老年人常见的运动障碍性疾病之一,目前对其治疗的主要方式仍然是在药物和手术等领域,而神经干细胞作用于帕金森病的功能康复已经受到国内外学者的广泛关注.目的:在分析神经干细胞的生物特性及其帕金森病的病理特征的基础上,探讨了神经干细胞对帕金森病的作用,旨在为神经干细胞移植促进帕金森病康复的应用提供科学依据.方法:应用计算机检索Medline数据库、CNKI数据库和维普数据库(1994-01/2010-08)以"Parkinson disease,Neural Stem Cell,Rehabilitation"为英文检索词,以"帕金森病;神经干细胞;康复"为中文检索词,通过对与帕金森病、神经干细胞等的相关文献,以权威期刊、近年来发表的文献作为纳入标准,以重复性研究、陈旧性研究为排除标准等,对所得文献进性整理分析.结果与结论:神经干细胞作用于帕金森病患者的康复具有取材方便、低免疫原性、多向分化潜能、可定向诱导分化等优势,被作为治疗包括帕金森病在内的神经损伤类疾病的新的手段,但如果要将神经干细胞真正应用于临床治疗仍需要不断的开展研究,主要体现在对于神经干细胞得分化和功能修复机制还不清楚,移植后的细胞能否与体内损伤细胞相整合,建立起正常得神经系统突触联系还需要进一步研究.
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脂肪源性干细胞向心肌细胞分化及其移植治疗心血管疾病
背景:作为成体干细胞的一种,脂肪源性干细胞具有可塑性并且能在特定条件下分化为心肌细胞.将自体脂肪间充质干细胞移植到心肌梗死区域后,能够分化为心肌细胞及血管内皮细胞,构建新的血管故能改善心泵功能.目的:全面了解影响脂肪干细胞向心肌细胞分化及移植的各种因素,以及目前临床及实验室研究中,应用脂肪干细胞移植治疗心肌病的现状.方法:电子检索MEDLINE (1981-01/2010- 04)、PubMed数据库,中国生物医学文献数据库(CBM)(1990-01/2010-04)、中文学术期刊全文数据库(CNKI),筛查相关文章的参考文献,主要检索主题词包括"脂肪源性干细胞; 心肌细胞；细胞分化；细胞移植；心肌病治疗".结果与结论:纳入综述文献6篇；试验研究报告24篇.目前脂肪源性干细胞的分离培养方法基本统一,已找到有效的体外扩增技术,但尚无直接方法进行干细胞鉴别；脂肪源性干细胞的诱导分化在体内、体外均可进行,并具有早期分化特性,比骨髓间充质干细胞更有利于向心肌细胞的分化；应针对不同类型心肌病选择不同移植方法；干细胞磁标记技术可以对已经植入体内的脂肪源性干细胞进行活体动态监测；自体移植脂肪干细胞是心肌病的一种新的治疗方法,但要将其成功用于临床实践还需找到可以抑制脂肪源性干细胞的促肿瘤细胞特性的方法以保证术后患者的长期安全性.
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干细胞诱导分化为肝细胞的鉴定方法
背景:目前关于干细胞体外诱导分化为肝细胞的各种方法较多,需要总结一套具有说服力的鉴定方法去验证.目的:总结干细胞经诱导分化为肝细胞鉴定方法的研究进展,使之更安全的应用.方法:应用计算机检索西方生物医学期刊及PubMed数据库1985-01/2010-06有关干细胞分离、培养及诱导分化为肝细胞的文章,检索词为"stem cells,induced,differentiation,hepatocytes,identification"等;同时检索中国期刊全文数据库2000-01/2010-06有关干细胞分离、培养诱导分化为肝细胞的文章,检索词为"干细胞,诱导,分化,肝细胞,鉴定".共检索到文献43篇.结果与结论:干细胞具有可塑性特性,通过体外刺激因子、体内利用特定的微环境均可诱导干细胞分化为肝前体细胞和成熟肝细胞,理论上可提供丰富的肝细胞来源,为人们提供种子细胞,可以进行实验研究、临床应用.但是经诱导后的细胞是否为所预期的种子细胞需要一套科学的、系统的检测方法,根据肝细胞的诸多特性,如表面标志、合成、代谢功能可以证明.
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骨髓间充质干细胞的诱导分化及其恶性转化
背景:近年来有研究认为骨髓间充质干细胞可发生恶性转化,成为恶性肿瘤的细胞起源.目的:综述近年来诱导骨髓间充质干细胞分化的方法、定向分化的细胞种类及其恶性转化的相关研究进展.方法:应用计算机分别以"bone marrow mesenchymal stem cells" AND "differentiation"和"bone marrow mesenchymal stem cells" AND "transformation" 为关键词检索Pubmed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed)、SPRINGER数据库(http://www.springerlink.com)及Elsevier数据库(http://www.sciencedirect.com),时间限定为2000-01/2010-11,语言种类为English.通过阅读标题和摘要进行初筛,排除重复性研究、Meta分析,选择近期发表或发表在权威杂志的31篇相关文献进行综述.结果与结论:体外诱导骨髓间充质干细胞分化的方法主要有特定条件培养液、细胞共培养和损伤病理模型组织细胞或血清3大类.骨髓间充质干细胞可定向诱导分化为内、中及外胚层来源的几乎所有组织类型的细胞.有实验研究及临床病例个案报道,骨髓间充质干细胞可发生恶性转化,成为多种肿瘤的细胞起源.这提示骨髓间充质干细胞临床应用的安全性问题值得进一步深入研究,同时这也可能为肿瘤生物学研究提供了新视野.
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脐血造血干细胞对原发性肝细胞癌的抑制作用
背景:原发性肝细胞癌是一种临床常见的恶性肿瘤,虽然近年来各种治疗方式如外科手术、射频消融以及选择性动脉栓塞等治疗方式均取得了进展,但对于某些进展期肝癌患者,这些治疗方法具有一定的局限性.在这样的背景下,干细胞对恶性肿瘤的治疗或抑制作用正逐渐成为人们关注的焦点.目的:对原发性肝细胞癌的发病情况、肿瘤免疫编辑过程、肿瘤微环境以及脐血造血干细胞对原发性肝细胞癌和其他实体肿瘤的抑制作用进行综述.方法:检索万方医药网及外文生物医学期刊数据库2000-01/2010-09有关原发性肝细胞癌发病情况、免疫微环境以及造血干细胞对包括肝细胞癌在内的实体肿瘤抑制作用的文章,中文检索词为"肝癌,造血干细胞,免疫微环境",英文检索词为"hepatocellular carcinoma,hematopoietic stem cell,microenvironment".终筛选出33篇文献作进一步分析.结果与结论:肿瘤的发生及发展与机体免疫系统的变化密切相关,在已发生肿瘤的机体内,免疫系统处于抑制状态,对于恶性肿瘤细胞无反应或者低反应.脐血造血干细胞具有免疫原性低、分裂能力强、分化谱系广等特点,在接受移植的机体内能够分化为多种谱系的细胞,其中包括多种免疫细胞,从而弥补机体原有免疫系统的缺陷,起到杀伤肿瘤细胞、抑制肿瘤生长的作用.然而其作用机制、适应证及不良反应等仍需进一步深入研究.
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神经干细胞移植等方法治疗脑梗死后遗症的策略研究
背景:国内外动物模型的研究已经表明干细胞移植对脑梗死的治疗可以起到积极作用,在行为恢复和缩小梗死面积临床试验也有一定的成果.目的:通过分析和总结2000年以来国内外多种方法治疗脑梗死后遗症的研究,探讨各疗法的优缺点,寻求佳的治疗途径.方法:分别以"脑梗死后遗症、脑卒中后遗症"," Cerebral infarction sequelae hemiplegia"等为检索词,应用计算机检索万方数据知识服务平台及Pubmed 数据库2000-01/2010-10有关文章,保留22篇文献做进一步分析.结果与结论:神经干细胞治疗脑梗死后遗症的方法主要集中在外源性神经干细胞移植后整合、补充或替代受损及内源性神经干细胞损伤后在细胞因子等的作用下激活修复.神经保护疗法主要是针对缺血性级联反应的各种通路,保护因缺血、缺氧而受损伤但仍有活力的神经元,逆转半暗带,降低再灌注损伤对脑神经细胞的损伤,减少梗死面积,进行有针对性的治疗.理疗及功能康复、民族药物多种方法的应用也为脑梗死后遗症的治疗带来了希望.其中调节在体神经干细胞增殖和分化,促进神经系统的功能修复是未来药物研究的重要研究目标.
