中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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不同给氢方式对兔氢气代谢的影响
背景:不同给氢方式均可对缺血再灌注损伤产生治疗作用,目前尚缺乏不同给氢方式对机体氢气代谢影响的研究.目的:比较等体积氢水腹腔、静脉注射及氢气腹腔注射对兔氢气代谢的影响,以利于提供更优化的氢气治疗方案.方法:20 只新西兰大白兔在监测呼气氢气基础值后,依次予以饱和氢气生理盐水、氢气10 mL/kg 腹腔注射及氢水10 mL/kg10 min 内静脉泵入,持续监测呼气氢气浓度,等降至基础值并稳定30 min 以上后再进行下一方式给氢干预.记录各种给氢方式呼气氢气浓度的达峰时间、峰浓度,计算半衰期和曲线下面积,比较3 种给氢方式对呼气氢气浓度的影响.结果与结论:腹腔注射氢水、氢气及静脉注射氢水3 种方式达峰时间分别为(3.25±1.80),(17.8±6.48)和(7.45±1.39) min,差异有显著性意义(P < 0.01);半衰期分别为(7.40±2.09),(141.50±85.01)和(1.20±0.37) min,差异有显著性意义(P < 0.01);较基础值增加的曲线下面积分别为(302.17±221.90),(5 234.29±2 681.18)和(209.51±104.49) ppm?min,差异具有显著性意义(P < 0.01).提示腹腔注射氢水、氢气均可迅速提高呼气氢气浓度,腹腔注射氢气能长时间维持呼气氢气高浓度.
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体力劳动农民工足底压力的特征
背景:国内外研究多集中于常人和患者的足底压力特征,有关体力劳动农民工足底压力特征的研究鲜见报道.目的:测试经常性体力劳动农民工的足底压力.方法:采用比利时Footscan USB2 平板式足底压测试系统检测30 名经常性参与体力劳动的农民工和30 名大学生自然行走过程中的动态足底压力.结果与结论:农民工组右足第一趾与第二、三跖骨区域的峰值压强显著高于大学生组(P < 0.01),两组足弓指数差异无显著性意义(P > 0.05).行走过程中农民工组足落地偏角及左右足的内翻人数显著高于大学生组(P < 0.01).说明经常性参与体力劳作对农民工的足底压力分布有明显影响,表现在足底压力前移,足内翻程度加强,行走过程中足的外偏角度增大,造成下肢伤害的可能性增高.
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5-氮胞苷诱导培养P19胚胎癌细胞表达心肌结构蛋白
背景:少数研究者发现5-氮胞苷在结合P19 胚胎癌细胞聚集培养时导致有效的心肌分化,而且在P19 胚胎癌细胞单层融合培养时,5-氮胞苷诱导也可致心肌分化.目的:观察5-氮胞苷诱导下P19 胚胎癌细胞是否可以分化成肌细胞及心肌结构蛋白的表达.方法:培养P19 胚胎癌细胞,实验分为2 组,诱导组以1 μmol/L 5-氮胞苷诱导4 d,对照组加入同体积的PBS.免疫荧光双标检测各组结蛋白和心肌肌钙蛋白T 的共表达;Western blot 检测各组细胞的心肌肌钙蛋白T 表达.结果与结论:诱导组检测到结蛋白和心肌肌钙蛋白T 在同一细胞相同部位共表达,对照组未见两种蛋白表达和共表达;Western blot 检测显示诱导组细胞有心肌肌钙蛋白T 表达,对照组无心肌肌钙蛋白T.提示5-氮胞苷可以诱导单层培养P19胚胎癌细胞分化成肌细胞并表达心肌结构蛋白.
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余甘子提取物对糖尿病大鼠肌肉和脂肪组织胰岛素信号通路的影响
背景:余甘子具有明显的降血糖作用,但其作用机制尚不清楚.目的:观察余甘子提取物对大鼠骨骼与脂肪组织中胰岛素信号通路相关蛋白的影响.方法:将30 只SD 大鼠随机等分为对照组、模型组和余甘子组,后2 组以腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型.余甘子组用余甘子提取液灌胃6 周,模型组和对照组灌胃同体积的蒸馏水.结果与结论:与对照组相比,糖尿病大鼠的体质量、空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数均显著升高(P < 0.05),脂肪和肌肉组织磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶B mRNA 及葡萄糖转运蛋白4 mRNA 和蛋白水平显著下降(P < 0.05,P < 0.01),灌胃余甘子提取物6 周后,余甘子组大鼠体质量、空腹血糖、空腹胰岛素和胰岛素抵抗指数均比模型组下降(P < 0.05),脂肪和肌肉组织磷脂酰肌醇-3-激酶、蛋白激酶B 和葡萄糖转运蛋白4 mRNA 水平明显增加(P < 0.01,P < 0.05),且脂肪组织葡萄糖转运蛋白4 蛋白表达增加(P < 0.01),但肌肉组织葡萄糖转运蛋白4 蛋白差异没有显著性意义.提示余甘子提取物可调控胰岛素介导的磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/葡萄糖转运蛋白4 信号转导通路,发挥降血糖作用.
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一种适合肝细胞生长的无血清培养基
背景:寻找一种既能适合细胞生长又避免添加血清的培养基迫在眉睫,无血清培养应运而生.目的:探索一种适用于C3A 细胞生长的无血清培养基,为肝细胞用于临床治疗以及生物人工肝走入临床奠定基础.方法:分别用无血清培养基、完全培养基和基础培养基培养C3A 细胞,观察细胞的生长状态,绘制细胞生长曲线和活力曲线,全自动生化分析仪测定上清中谷丙转氨酶漏出量、尿素含量,放射免疫分析法检测白蛋白分泌量,实时荧光定量PCR检测基因水平的变化情况.结果与结论:3 种培养基培养的细胞生长良好,无血清培养基组与完全培养基组细胞密度在培养周期内,除第7 天以外差异无显著性意义(P > 0.05).培养第4~7 天,其他两组明显高于基础培养基组(P < 0.05);无血清培养基尿素合成水平>完全培养基>基础培养基(P < 0.05).Real-time qPCR 显示,无血清培养基组相对于完全培养基组仅CK18、CK19 和HNF4α基因表达量下降(P < 0.05).说明实验研制了一种适合于肝细胞(C3A)生长的无血清培养基,与传统血清培养能达到同样的效果.[
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VX2肿瘤种植于肾静脉上下建立的兔下腔静脉模型
背景:目前,临床上对恶性肿瘤侵犯肾静脉以上、以下的下腔静脉处理原则及方式还有争议,而类似的动物模型尚少见文献报道.目的:分别建立VX2 肿瘤侵犯肾静脉以上、以下的下腔静脉的动物模型,观察并对比分析其生长,以及对下腔静脉和腹主动脉的影响.方法:将24 只实验兔随机摸球法均分为肾静脉以上组和肾静脉以下组,分别将VX2 肿瘤组织块种植在兔肾静脉以上、以下的下腔静脉附近软组织内,每周在超声下观察肿瘤的大小,下腔静脉和腹主动脉管径大小,对周围组织的侵犯情况.结果与结论:所有肿瘤均种植成功.两组肿瘤大小与生长时间均呈显著正相关(r1=0.894,r2=0.879),下腔静脉管径及腹主动脉管径与肿瘤大小均显著负相关(r3=-0.663,r4=-0.834;r5=-0.826,r6=-0.870).两组肿瘤大小变化差异无显著性意义(P=0.293> 0.05).在观察期末,肾静脉以上组下腔静脉管狭窄不到50%,肾静脉以下组下腔静脉管已完全闭塞,且有效避免了对腹主动脉的压迫(狭窄不到50%),结果说明VX2 肿瘤种植于肾静脉以下可以得到较理想的动物模型.
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石蜡包埋组织提取DNA不同条件下的PCR扩增
背景:在甲醛固定石蜡包埋组织的制作及保存过程中会对DNA 造成损害,提取的DNA 在用于PCR 扩增时部分结果并不理想.目的:比较分析石蜡包埋组织中提取DNA 应用于PCR 反应的影响因素.方法:从10.0 μm×2、10.0 μm×4 和10.0 μm×5 石蜡包埋食管癌组织切片中提取DNA,以0.05,0.1,0.2 μg 模板DNA量扩增内参基因β-actin,PCR 反应循环次数分别为35,40,45 次,分析影响PCR 反应的因素.结果与结论:琼脂糖凝胶电泳结果显示以10.0 μm×2 组织切片量,PCR 反应循环次数40 次,PCR 反应模板DNA 量0.05 μg 扩增取得的目的基因DNA 的质量高.说明减少石蜡包埋组织用量和减少模板DNA 量有助于获得高质量的PCR反应条带,且PCR 反应循环次数应大于40 次,小于45 次,再增加循环次数,则意义不大.
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雄性大鼠长期有氧运动期间血液铁状态与饮食铁含量的关系
背景:运动对雌性大鼠血液铁状态的影响也已经得到广泛研究,但运动对雄性大鼠血液铁状态的影响仍不明确.目的:观察不同铁含量饮食以及游泳运动对雄性大鼠血液铁状态的影响.方法:断乳雄性SD 大鼠90 只,分为饮食低铁含量组、标准铁含量组、高铁含量组.每组再分为运动组和静息组.用不同的铁含量饲料喂养1 个月后,运动组开始游泳,每天1 次,持续3 个月,静息组除不做运动外,其余处理同对应运动组.后1 次运动后,大鼠空腹24 h,戊巴比妥钠麻醉下取静脉血测定红细胞相关指标和血清铁状态指标.结果与结论:饮食铁含量对红细胞和血清铁状态指标的主效应都有显著影响,运动对红细胞分布宽度、血浆总铁结合力的主效应也显著影响.饮食低铁含量静息组表现为铁缺乏性贫血的典型改变,而运动组血清铁和转铁蛋白饱和度显著降低,血浆总铁结合力显著增大,说明低铁饮食情况下运动加重了血液低铁状态.饮食标准铁含量、高铁含量的运动组都表现为红细胞分布宽度显著增大,血浆总铁结合力显著增大,但其他指标均无显著改变,说明运动没有导致血液低铁状态.
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肾间质纤维化模型大鼠转化生长因子β/Smads信号传导通路变化与温阳活血方的干预
背景:转化生长因子β/Smad 信号转导通路在肾纤维化的发生发展中起重要作用.目的:探讨温阳活血方对肾纤维化转化生长因子β/Smads 信号传导通路的影响.方法:选用清洁级雄性SD 大鼠28 只,随机分为假手术组和模型组,模型组行左侧输尿管结扎术,单侧输尿管梗阻模型.假手术组大鼠打开腹腔后分离左侧输尿管但不结扎,随即关闭腹腔.造模后第2 天开始分别给予温阳活血方、血管紧张素转化酶抑制剂或生理盐水灌胃,1 次/d,各组均连续灌胃14 d.结果与结论:温阳活血组转化生长因子β1、Smads3 的表达显著低于模型组(P < 0.01),Smad7 表达显著高于模型组(P < 0.01),与福辛普利组相当.推测温阳活血方可能通过抑制转化生长因子β1、Smads3 的表达,上调Smad7 的表达,进而影响转化生长因子β/Smad 信号传导通路,对肾间质纤维化起防治作用.
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QIAamp及Biomed粪便细菌基因组DNA提取试剂盒提取人肠道细菌基因组DNA质量的差异
背景:有研究表明,不同试剂盒提取的粪便细菌基因组DNA 质量有差别,选择一种操作简便、质量优良的粪便细菌基因组DNA 提取试剂盒成为研究者们关注和急需解决的问题.目的:比较QIAamp 及Biomed 粪便细菌基因组DNA 提取试剂盒提取的人肠道细菌基因组DNA 质量的差异.方法:收集健康成年人新鲜粪便标本30 例,用两种试剂盒分别提取细菌基因组DNA,检测其浓度、吸光度A260/280 nm 值及提取率,设计乳酸菌属16S rDNA 基因特异性引物,以各自所提DNA 为模板,进行常规聚合酶链反应,凝胶电泳后比较条带数量、明暗度及密度,并进行实时荧光定量聚合酶链反应定量检测各自所含乳酸菌属的数量.结果与结论:QIAamp 试剂盒提取的正常人肠道细菌基因组DNA 的浓度、提取率、表达量及乳酸菌属的数量均高于Biomed试剂盒(P < 0.05 或P < 0.01).说明QIAamp 试剂盒提取的粪便细菌基因组DNA 质量优于Biomed 试剂盒.
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兔膜联蛋白A1基因短发夹RNA慢病毒载体构建与RNA干扰效率的鉴定
背景:膜联蛋白A1 参与细胞凋亡的调控.目的:针对兔膜联蛋白A1 基因构建短发夹RNA 慢病毒载体,并检测其对成骨细胞的沉默效率.方法:针对兔膜联蛋白A1 基因设计RNA 干扰靶序列,合成Oligo DNA,退火形成双链DNA,与BamHI 和EcoRI 双酶切后的pGLV/H1/GFP 载体连接成pGLV-shANXA1,PCR 筛选阳性克隆,测序鉴定.pGLV-shANXA1 和pGLV/helper-1、pGLV/helper-2、pGLV/helper-3 共转染293FT 细胞包装产生慢病毒颗粒LV-shANXA1,并测定其滴度,随后将LV-shANXA1感染兔成骨细胞.结果与结论:经PCR 和测序证实构建片段大小及DNA 序列与目标序列一致,shANXA1 片段完全正确插入慢病毒载体pGLV/H1/GFP 中.包装浓缩慢病毒颗粒LV-shANXA1 的滴度为3.8×108 TU/L.经嘌呤霉素筛选后,感染复数为50 时,LV-shANXA1 对成骨细胞感染效率为80%;感染复数为100 时,感染效率为95%.Real-time PCR 和Western blot 检测显示,LV-shANXA1-901 对膜联蛋白A1 基因的沉默效率高,在感染复数为50 时,沉默效率可达71.2%.表明实验成功构建的兔膜联蛋白A1 基因短发夹RNA 慢病毒载体能够在细胞水平有效沉默靶基因.
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人端粒酶反转录酶936-1132氨基真核表达载体的构建及在293T细胞中表达
背景:人端粒酶反转录酶是端粒酶的重要组成之一,可使端粒酶表现活性从而拮抗端粒缩短或细胞衰老.目的:构建人端粒酶反转录酶C 端936-1132 氨基真核表达载体,并在人胚肾细胞293T 表达,为其在细胞内定位研究奠定基础.方法:以人端粒酶反转录酶cDNA 为模板,PCR 扩增出带有酶切位点其 C 端 936-1132 氨基序列片段,并与真核表达载体pcDNA3.1-HisA 连接,构建出重组质粒pcDNA3.1-HisA-hTERT aa936-1132,将重组质粒转染入人胚肾细胞293T 中,使蛋白表达,并对蛋白进行免疫印迹鉴定.结果与结论:经双酶切和基因测序等方法证实,人端粒酶反转录酶C 端936-1132 氨基重组质粒pcDNA3.1-HisA-hTERTaa936-1132 构建成功,经免疫印迹鉴定可检出融合蛋白.
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CHOP基因shRNA载体构建及沉默效应
背景:研究认为,CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,CHOP)通路是内质网应激介导细胞凋亡的3 条通路之一,目前国内外对内质网应激介导细胞凋亡在胃癌方面的研究较少.目的:构建针对人CHOP 基因的短发卡RNA 表达载体,观察RNA 干扰对人胃癌细胞系BGC823 细胞CHOP 基因表达的抑制作用.方法:设计CHOP 的shRNA 靶序列,分别合成两条互补的寡核苷酸链,退火后重组入真核表达载体pSUPER-EGFP1,转化扩增后进行序列测定.用脂质体包裹转染人胃癌细胞系BGC823 细胞,采用RT-PCR 和Western blotting 分别检测CHOP 基因mRNA 和蛋白表达的变化.结果与结论:把针对CHOP 基因的shRNA 的双链寡核苷酸片段克隆入pSUPER-EGFP1 载体,经测序分析,插入片段正确;RT-PCR 和Western blot 检测显示,CHOP 基因的表达水平明显降低,其中以CHOP-1 为靶序列的shRNA 沉默作用强,CHOP 的表达抑制率约67%.
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转录因子Nkx2.5和GATA4的相互作用
背景:心脏发育过程是复杂多种因子相互作用的结果,对转录因子Nkx2.5 和GATA4 在心脏发育过程中相互作用的研究将有助进一步了解心脏发育过程.目的:分析心脏转录因子Nkx2.5 和GATA4 在细胞内的相互作用.方法:在构建Nkx2.5 和GATA4 真核表达质粒以及脑钠肽启动子荧光表达质粒的基础上,将真核表达质粒经共转染或单转染COS7 细胞,利用免疫共沉淀技术验证Nkx2.5和GATA4 在细胞内是否有相互作用,并通过荧光素酶分析技术分析Nkx2.5和GATA4 对脑钠肽启动子序列可能存在的协同激活作用.结果与结论:通过免疫共沉淀实验发现GATA4 能将Nkx2.5 沉淀下来,相应的Nkx2.5 也能将GATA4 沉淀下来,说明在COS7 细胞中,GATA4 能和Nkx2.5 相互作用.脑钠肽启动子荧光表达质粒并与Nkx2.5 和GATA4 共转染COS7 细胞,比起单转染Nkx2.5 或GATA4 质粒,两者共转染更能激活脑钠肽启动子的表达.Nkx2.5 和GATA4 不仅各自在心脏发育过程中发挥重要作用,两者之间的相互协调作用对于心脏的正常发育过程同样非常重要.
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成年大鼠心肌细胞的急性分离方法
背景:获得存活率高、活性好的正常单个心肌细胞是心肌电生理研究的基础,寻求一种可以获得在形态、功能和结构上接近于正常心肌细胞的实验方法具有重要意义.目的:探讨酶解法急性分离大鼠心肌细胞过程中的各影响因素,建立一种可以稳定获取高活性心肌细胞的急性分离方法,为心肌细胞电生理研究和分子生物学研究提供细胞.方法:SD 大鼠颈椎脱臼,迅速开胸取心脏,将心脏悬挂于Langendorff 装置上进行主动脉逆流灌流.先用无钙台式液灌流5 min,然后换上酶液灌流消化20 min,后用终止液灌流3 min 终止反应,将细胞置于HK 液中保存.结果与结论:可获得60%~80%的横纹清晰,透亮的长杆状的心肌细胞.说明调节和控制细胞分离过程中的各影响因素可以保证分离的心肌细胞的数量和质量.
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青老年大鼠脑缺血模型的比较
背景:大鼠具有成本低,种系内纯合性好,脑血管解剖特性与人类相似等特点,是目前脑缺血研究常用的实验动物.目的:观察青老年大鼠大脑中动脉梗死后的行为学变化,分析年龄对脑缺血的影响.方法:将青、老年SD 大鼠随机分为青、老年假手术组,青、老年模型组(同侧颈总动脉永久结扎大脑中动脉线栓法制备大脑中动脉梗死模型)4 组.结果与结论:老年假手术组体质量低于青年假手术组(P < 0.05),但高于老年模型组(P < 0.05),老年模型组体质量低于青年模型组(P < 0.05).术后第1,3,5,7 天老年模型组改良神经功能损害程度评分高于青年模型组(P < 0.05);与青年模型组及青、老年假手术组比较,术后第3,8,12 周老年模型组逃避潜伏期明显延长,跨过平台所在位置的次数明显减少(P < 0.05).表明在同等缺血打击下,老龄鼠脑缺血模型缺血损伤重、修复能力低,其神经功能恢复、学习和记忆能力明显逊于青年大鼠,提示增龄因素是研究脑缺血后神经损伤的重要影响因素之一.
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人宫颈癌细胞的体外培养及鉴定
背景:由于肿瘤存在个体差异,对癌株的研究不能准确反映个体之间的差异,原代细胞培养则与体内状态更相近.目的:体外培养建立宫颈癌细胞原代培养方法.方法:采用胰蛋白酶及Ⅰ型胶原酶联合消化法从23 例新鲜宫颈癌组织获取宫颈癌细胞,测定其细胞生长曲线,并用免疫荧光染色检测细胞表面标记物CD44、CK17 进行鉴定.结果与结论:23 例中有21 例成功从宫颈癌组织中获取宫颈癌细胞并能连续传代,稳定增殖,免疫荧光染色显示宫颈癌细胞表面标记物CD44、CK17 表达呈阳性.说明胰蛋白酶及Ⅰ型胶原酶联合消化法能成功分离原代宫颈癌细胞.
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股直肌腱中1/3与前交叉韧带的生物力学比较
背景:股直肌腱已成为重建前交叉韧带的重要替代物.目的:比较股直肌腱中1/3 和前交叉韧带的生物力学特性.方法:标本于死者死亡后9.0~10.0 h 解剖取下股直肌腱和前交叉韧带,取下后立刻用以生理盐水浸湿的纱布包裹,密封后置于-20 ℃冰箱内保存.实验前取出标本,切取试样,股直肌腱和前交叉韧带每组共10 个试样.结果与结论:股直肌腱中1/3 的单位模量是前交叉韧带的63%,单位大载荷为63%,提示股直肌腱中1/3 是适合作为交叉韧带重建物的.
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贯穿缝扎联合打孔法构建兔耳难愈性创面模型
背景:以往制作的兔耳难愈创面模型仅局限于单纯的缺血模型,缺血淤血模型少见.目的:建立一种方法简单、效果确实的兔耳难愈性创面模型.方法:将40 个兔耳分为两组:实验组贯穿缝扎兔耳根部背腹侧中央、头侧所有动、静脉,缝扎后第10 天在耳背侧用活检打孔器制作3 个深达软骨面的圆形创面.对照组仅制作与实验组完全相同的3 个圆形创面.结果与结论:实验组兔耳缝扎后立即呈现紫黑色,第10,20,30 天为淡紫黑色、紫色、淡紫色,说明贯穿缝扎联合打孔法构建的难愈创面的缺血、淤血状态持久、稳定.实验组创面肉芽组织生长、表皮化时间及创面愈合时间均较长于对照组均延迟(P < 0.01),血管内皮细胞生长因子表达明显低于对照组(P < 0.01).说明贯穿缝扎联合打孔法制作的兔耳难愈性创面模型方法简单、效果确实可靠,可作为缺血淤血因素所致难愈性创面修复的实验研究模型.
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关节滑液对兔前交叉韧带重建后腱骨愈合生物力学和组织学的影响
背景:目前前交叉韧带重建后关节滑液对移植物强度以及腱骨愈合的影响尚无定论.目的:观察兔前交叉韧带重建后腱骨愈合过程中,关节滑液对移植肌腱生物力学及组织学的影响.方法:取新西兰大白兔下肢半腱肌腱,以同侧肢体半腱肌腱重建前交叉韧带模拟关节滑液影响模型,并同时取对侧肢体半腱肌行股骨髁上"U"形肌腱埋植避免关节滑液的影响.重建4 周,取股骨-韧带-胫骨复合体,行生物力学测定和组织学观察.结果与结论:重建后4 周,生物力学测定时发现"U"字形埋植肌腱断裂时平均载荷明显大于前交叉韧带重建后处于关节内的肌腱(P < 0.01).组织学观察发现,骨隧道内坏死的腱组织已被纤维组织、新生骨组织替代,腱骨交界面形成Sharpey 纤维连接和纤维软骨,优于关节内肌腱;"U"字形埋植肌腱腱骨交界面成骨细胞数目明显多于前交叉韧带重建肌腱(P < 0.01).结果证实"U"字形埋植肌腱的生物力学及腱骨愈合均优于处于关节内肌腱,提示关节滑液对前交叉韧带重建后韧带的强度以及腱骨愈合有不利影响.
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酵母膏联合氧嗪酸钾构建高尿酸血症模型大鼠继发的心血管病变
背景:高尿酸血症动物模型的构建是研究高尿酸血症与肾脏和心血管疾病相互关系的重要手段.目的:采用酵母膏和不同剂量的氧嗪酸钾建立高尿酸血症动物模型,寻找建模的佳剂量.方法:以酵母膏(21 g/kg)或酵母膏联合不同剂量氧嗪酸钾(50~200 mg/kg)持续灌胃或腹腔注射28 d 建立高尿酸血症大鼠模型.结果与结论:酵母膏或酵母膏联合50~200 mg/kg 氧嗪酸钾持续灌胃或酵母膏联合50~100 mg/kg 氧嗪酸钾腹腔注射均能显著提高大鼠血清高尿酸水平,而对大鼠肾、心和动脉功能无明显影响.酵母膏联合200 mg/kg 氧嗪酸钾腹腔注射不仅使大鼠血清尿酸维持在高水平,也可引起大鼠肾脏、心脏及动脉形态和病理改变.说明酵母膏联合200 mg/kg 氧嗪酸钾腹腔注射是建立持续、稳定高尿酸血症动物模型的佳配伍剂量,也是研究高尿酸血症引起继发性心血管病理损伤的良好模型.
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氧化应激和Rac1/2对静脉壁的影响及在创伤性深静脉血栓形成中的作用
背景:深静脉血栓形成的分子机制及核心调控网络目前仍未完全阐明.目的:观察氧化应激和Rac1/2 在大鼠创伤性深静脉血栓形成中的作用.方法:将SD 大鼠采用股静脉钳夹联合下肢石膏制动构建大鼠深静脉血栓模型.不同时间点(造模后2.5 h 和25 h)解剖股静脉观测血栓的发生率及严重程度.再将模型大鼠分为:血栓形成前组(造模后2.5 h)、血栓形成组(创伤后25 h)、血栓未形成组(造模后25 h).获取股静脉壁组织,提取总蛋白质和总RNA.结果与结论:比色法检测结果显示,相比血栓未形成组,血栓形成组大鼠股静脉组织中丙二醛的含量高(P < 0.05),血栓形成前组次之(P < 0.05);而总超氧化物岐化酶、谷胱甘肽还原酶的活性在血栓形成组低,血栓形成前组次之(P < 0.05).基因芯片分析及real-time PCR 结果发现,相比血栓未形成组,血栓形成组大鼠股静脉组织中Rac1 和Rac2 的表达高(P < 0.05),血栓形成前组次之(P < 0.05).结果证实,局部静脉血管壁组织中丙二醛,Rac1/2 表达上调,总超氧化物岐化酶和谷胱甘肽还原酶活性降低,可能导致创伤性深静脉血栓的形成.
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心肌梗死模型大鼠心肌组织中白细胞介素17的表达
背景:白细胞介素17 在多种心血管疾病中如自身免疫性心肌炎、病毒性心肌炎、扩张型心肌病、不稳定型冠心病等表达增加,在心血管病慢性炎症性过程起到了一定作用.目的:分析白细胞介素17 在心肌梗死大鼠心肌中的表达特点.方法:采用液氮冷冻法建立大鼠心肌梗死模型,将造模成功的66 只大鼠按照不同的观察时间随机摸球法均分为1,3,7,14,28,56 d 组,另设对照组8 只.采用酶联免疫吸附测定法、免疫荧光激光共聚焦技术及蛋白免疫印迹法检测白细胞介素17 的表达.结果与结论:造模成功率为73%.大鼠心肌梗死的发生发展过程中,白细胞介素17 在心肌组织大量表达,且随着时间变化而逐渐升高,在28 d 时表达为显著.说明白细胞介素17 作为一种强力的促炎症因子在心肌梗死大鼠心肌组织中大量表达,有可能与心肌梗死后的心室重塑及心律失常的发生有关.
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携带人血管内皮生长因子165慢病毒表达载体的构建与表达
背景:已有研究证实血管内皮生长因子在正常肝脏肝部分切除后余肝的再生过程中发挥着重要的作用,但关于其对肝硬化肝脏是否也有相同作用国内外鲜有报道.目的:构建携带人血管内皮生长因子165 基因的慢病毒载体,体外转染BLR 3A 大鼠肝细胞并观察该细胞中人血管内皮生长因子165 基因的表达.方法:采用DNA 重组技术将人血管内皮生长因子165 基因克隆入pLenti6/V5-D-TOPO 慢病毒表达载体中,筛选出阳性克隆与慢病毒包装系统ViraPowerTM Packaging Mix 共转染293T 细胞产生病毒颗粒,通过实时定量-聚合酶链反应法测定病毒滴度;携带人血管内皮生长因子165 基因的慢病毒载体体外转染BLR 3A 大鼠肝细胞72 h 后,利用反转录-聚合酶链反应及Western blot 法检测细胞中人VEGF165 mRNA 及蛋白的表达.结果与结论:成功构建了表达人VEGF165 基因的慢病毒载体pLenti6/V5-D-TOPO-VEGF165,测得病毒滴度为1.18×107 VP/mL.重组慢病毒载体转染BLR 3A 大鼠肝细胞72 h 后,荧光蛋白表达率超过80%,反转录-聚合酶链反应及Westernblot 法测得转染组人血管内皮生长因子165 mRNA 及血管内皮生长因子165 蛋白表达阳性.提示构建的携带人血管内皮生长因子165 的慢病毒载体可有效转染BLR 3A 大鼠肝细胞,并促使该细胞表达人血管内皮生长因子165 mRNA 及蛋白.
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微透析和高效液相色谱检测万古霉素在清醒兔眼玻璃体内的浓度
背景:万古霉素玻璃体内注射后的药代动力学资料较少.目的:观察万古霉素玻璃体腔内注射后在清醒兔眼玻璃体内的浓度.方法:将微透析探针植入清醒正常兔眼和细菌性眼内炎兔眼玻璃体内24 h 后,向玻璃体内注射10 g/L 万古霉素0.1 mL,利用微透析采样技术联合高效液相色谱法连续检测万古霉素注射后0.5,1,2,4,6,12,24,48,72,84 h,兔眼玻璃体内的药物浓度.结果与结论:万古霉素在正常兔眼玻璃体内的代谢呈开放式二室模型,玻璃体内的峰值浓度为695.92 mg/L,半衰期51.66 h;在细菌性眼内炎兔眼玻璃体内的代谢呈一室模型,万古霉素的峰值浓度为713.35 mg/L,半衰期为11.91 h.所有动物给药84 h,玻璃体内万古霉素的浓度均高于小抑菌浓度.实验在动物清醒状态下实时、连续、动态采样,检测结果准确,能满足万古霉素药动学分析的需要.
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脂联素对兔下颌快速牵张成骨的影响
背景:脂联素可参与骨代谢及成血管过程,但目前关于脂联素对牵张成骨有无促进作用尚不清楚.目的:通过建立兔下颌快速牵张动物模型,探讨局部应用脂联素对骨牵张新骨再生的影响.方法:16 只新西兰大白兔随机摸球法均分为对照组及实验组,建立兔下颌单侧快速牵张模型,牵张速率为2 mm/d.在牵张开始的1,3,5 d,对照组及实验组分别于牵张间隙注入200 μL 磷酸盐缓冲液或含有2 μg 重组人脂联素的磷酸盐缓冲液.结果与结论:两组动物牵张间隙内均可观察到新骨生成,组织学及显微CT 检查显示实验组的新骨生成与钙化明显高于对照组.实验结果显示局部应用脂联素可有效促进兔下颌快速骨牵张的新骨再生.
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骨形态发生蛋白与碱性成纤维细胞生长因子联合修复软骨缺损的效果评价
背景:多种细胞生长因子在骨软骨代谢过程中的协同作用越来越受到重视,但目前复合细胞生长因子修复软骨缺损报道较少,且修复效果尚无定论.目的:探讨骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子联合应用修复关节软骨缺损的效果.方法:24 只日本大耳白兔建立骨软骨缺损模型后随机等分为4 组,对照组缺损处仅填塞明胶海绵,其他3 组在对照组基础上,缺损处分别注射骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子、骨形态发生蛋白、碱性成纤维细胞生长因子.结果与结论:大体观察显示联合应用2 种细胞因子后,软骨缺损面基本修复但稍不平整,单独使用其中1 种细胞因子缺损面未完全修复,对照组无明显修复.联合应用2 种细胞因子缺损部位软骨细胞数多于其他3 组(P < 0.05),且Ⅱ型胶原免疫组化染色深于其他组.提示联合应用骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子可以促进关节软骨损伤的修复,疗效优于单独应用骨形态发生蛋白或碱性成纤维细胞生长因子.
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鸡胚在生物医学研究中的应用
背景:近年来应用鸡胚培养组织细胞研究广泛,但应用鸡胚培养神经细胞尚无文献报道.目的:综述了应用鸡胚进行组织细胞培养的研究进展,以便找到一种方便价廉的神经细胞培养手段.方法:应用计算机检索CNKI 和PubMed 数据库中1998-01/2011-06 关于鸡胚培养模型及神经细胞培养的文章,以"鸡胚绒毛尿囊膜模型;神经细胞培养"或"chicken embryo chorioallantoic membrane model; neuronal culture"为检索词进行检索.选择文章内容与鸡胚培养模型相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章.初检得到205 篇文献,根据纳入标准选择34 篇文章进行综述.结果与结论:鸡胚在病毒的分离、培养、疫苗制备,肿瘤生物学机制和药物筛选等方面均有广泛应用.与其他培养方法相比具有价廉,方便,快速等优点.充分正确的利用该培养体系可为多领域的研究提供科学可行的方法和思路.
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运动与不同组织细胞凋亡
背景:细胞凋亡程序可被运动刺激诱发启动造成细胞死亡.目的:分析运动训练对不同组织细胞凋亡的影响,探讨运动训练引起的不同组织细胞凋亡与运动性疲劳,运动损伤,运动心脏重塑,运动性心肌微损伤,运动性免疫抑制的关系.方法:应用计算机检索Medline 数据库1990-01/2010-05 期间运动训练与细胞凋亡关系的文章,检索词为"apoptosis".同时检索Ginii 数据库2000-01/2010-06 期间运动训练与细胞凋亡关系的文章,检索词为"アポトーシス,運動".同时计算机检索中国期刊全文数据库2000-01/2010-05 期间运动训练与细胞凋亡相关的文章,检索词为"细胞凋亡,运动训练,骨骼肌,心肌,淋巴细胞,肝肾细胞".结果与结论:无论是单次运动还是系统运动训练,都可以对骨骼肌、心肌、肝肾及淋巴细胞的凋亡产生影响,并呈现细胞凋亡水平随运动强度的提高而提高,因此细胞凋亡与运动性骨骼肌微损伤,运动心脏重塑,运动性心肌微损伤,运动性免疫抑制的关系密切.
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线粒体生物学性状及细胞衰老和运动的影响
背景:线粒体结构和功能的改变与细胞衰老有密切联系.目的:归纳线粒体生物学性状改变对细胞衰老的影响.方法:应用计算机检索Medline 数据库(1990-01/2011-06)、中国期刊全文数据库(1994-01/2011-06)、万方数据库(1994-01/2011-06)中有关线粒体对细胞衰老影响的文章.结果与结论:从线粒体呼吸链逸出形成的活性氧导致线粒体膜通透性升高,线粒体跨膜电位降低,ATP 合成减少.持续的活性氧氧化作用使线粒体DNA 损伤增多,导致线粒体结构功能严重受损,促进细胞衰老甚至死亡.有氧训练可显著提高机体的有氧代谢水平,增进有氧工作能力,并提高机体线粒体基质酶及呼吸链酶活性,降低糖酵解酶活性,减少线粒体的氧化损伤,降低线粒体DNA 缺失突变率,使线粒体产生适应性变化,提高氧化磷酸化功能.在训练中应合理安排运动间歇,避免大强度训练对细胞的持续损伤造成线粒体结构功能下降,从而对延缓细胞及机体衰老起一定的积极作用.
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人体肌肉短时间工作能力的遗传学特点
背景:近年来,研究者们从人类遗传学的角度论证人体肌肉短时工作能力很大程度上受控于基因,且人体肌肉力量、无氧耐力均有较高的遗传度.目的:就近年来人体肌肉短时间工作能力研究进展进行综述,为今后短时工作能力的遗传学研究打下基础.方法:应用计算机检索中国期刊全文数据库、PubMed 数据库和Medline database 数据库1990/2011 相关文献,纳入以短时肌肉工作能力分子遗传学评价的文献报道,选取35 篇文献进行分析归纳.结果与结论:文章归纳了前期动物实验与近期人体试验.在为数不多的与人有关的肌肉短时间工作能力的遗传学研究中,结果取得了惊人的一致性,而且阳性率较高.由此可见,存在于人类肌肉短时间工作能力的个体差异在很大程度上反映了DNA 序列及其表达调控差异.伴随着分子生物学的技术的发展,为进一步开展与基因相关的肌肉短时工作能力遗传学研究提供了强有力的理论依据.
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唾液检测在运动指标分析中的应用
背景:在唾液检测研究过程中发现多项检测指标与血液呈正相关性,因此越来越多的研究者将唾液检测作为机体生化指标检测另一项重要手段,且运动研究工作者也将唾液检验作为一种方便有效且可以长期操作的检验方法.目的:全面了解唾液作为个体生化指标检测的操作方法、可行性以及优劣势分析,以期将其作为运动个体的机能和心理状态的分析手段.方法:电子检索PubMed 数据库和中国期刊全文数据库1980/2011 收录的唾液作为个体生化指标检测的文章,并重点突出唾液相关生化指标的检测在运动研究中的运用.早期的无建设性意义的以及内容重复的文章通过手动选择被排除在外.结果与结论:通过31 篇文献可证实唾液检测这种快捷有效的检测手段具有其便捷性和有效性.其中免疫球蛋白A、皮质醇、睾酮、脱氢表雄酮、淀粉酶在血液中的浓度和唾液中的浓度具有较好的相关性,作为生化指标的检测应用较为广泛.随着研究的深入,唾液分析这一检测手段在运动个体运动状况和身体状况监测中将被逐步推广使用.
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创面修复"TIME"原则及其意义
背景:随着人们对创面愈合机制研究的深入和创面处理经验的积累,创床的准备对于创面修复的重要性越来越引起人们的高度重视.目的:全面了解创面愈合的机制,明确影响创面愈合的各种影响因素及其作用.方法:电子检索中国期刊全文数据库(1994/2011)和 PubMed 数据库(1994/2011),检索词分别为"TIME 原则,创面准备,创面愈合"和"TIME principles,wound bed preparation,wound healing",语言分别设定为中文和英文,分析创面愈合临床应用原则及效果的研究进展.结果与结论:共检索到文献 498 篇,阅读标题和[摘要]后,按纳入标准,共纳入22 篇.TIME 为创面处理过程中创床准备4项原则性的方法的首个英文字母的缩写,即:T 指清除创面坏死组织(tissue);I 指控制炎症、减轻感染(infection/inflammation);M 指保持创面正常的湿度为肉芽组织生长和创面上皮化创造条件(moisture);E 指去除创缘迁移受损的表皮(edge of wound,non migrating).目前TIME 原则作为一个有价值的创面处理指导工具受到临床医生的好评,并应用于临床实践.
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成骨细胞培养在骨组织工程和运动领域的研究进展
背景:成骨细胞在不同的培养环境、细胞因子刺激下增殖、分化及功能不同.目的:总结成骨细胞体外培养技术与成骨细胞增殖速度的研究进展.方法:检索1990/2011PubMed 数据及万方数据库有关运动、成骨细胞培养和骨组织工程等方面的文献,英文检索词为"exercise,Osteoblast raise method",中文检索词为"运动,成骨细胞,骨组织工程".排除与研究目的无关和内容重复者.保留29 篇文献做进一步分析.结果与结论:骨组织工程构建中种子细胞的选择方式、支架材料的不同形式、细胞因子、培养环境、力学因素都对成骨细胞的培养有重要影响.构建骨组织工程中成骨细胞在不同的培养环境、细胞因子刺激下会有不同的增殖能力和分化结果.成骨细胞的增殖速度与旋转壁式生物反应器提供的低剪力环境、适宜的细胞因子、细胞支架的选择密切相关.
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脊髓损伤患者站立活动量与骨密度的变化
背景:脊髓损伤后的骨质疏松,可造成患者持重能力下降,严重影响其生活质量.目的:分析脊髓损伤后患者的活动情况与骨密度变化的情况.方法:根据脊髓损伤患者每天的站立活动情况,分为3 组:充分活动组每天站立活动1 h 以上;限制活动组每天站立活动不足1 h;无活动组无站立活动.结果与结论:通过双能X 射线骨密度仪对患者腰椎及股骨部进行骨密度检查后显示,充分活动组与限制活动组的腰椎(L2~4)、股骨颈、股骨转子和Ward's 三角区骨密度水平高于无活动组(P < 0.05),充分活动组的骨密度水平较限制活动组有显著提高(P < 0.05).结果证实,相对于脊髓损伤后的相对制动,适当的站立活动在一定程度上有助于减少患者的骨质丢失,缓解骨质疏松的发展,提高骨密度水平.
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一个新的ACTC1基因5'端剪切位点突变可能在先天性心脏病室间隔缺损发病中起重要作用
背景:ACTC1 是先天性心脏病的候选基因,且与人类先天性心脏病房间隔缺损有关.目的:对110 个先天性心脏病核心家系中ACTC1 基因进行突变筛查.方法:在110 个先天性心脏病核心家系与300 例无报道有心脏畸形的正常人之间进行对照试验.使用5 对引物将ACTC1 基因的6 个编码区片段进行PCR 体外扩增,从PCR产物中筛查基因突变.结果与结论:在ACTC1 基因的第五外显子下游5'端剪切位点第3 个碱基发现了1 个G-A 的全新的突变.这个突变存在于1 个患有单纯性室间隔缺损的女孩和她30 岁的没有报道过心脏畸形的父亲,且该突变没有在300 例正常对照组中筛出.提示该突变可能与人类先天性心脏病室间隔缺损有关.
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细胞色素P4502E1基因PstI/RsaI多态性与结直肠癌易感关系的Meta分析
背景:CYP2EI 基因是该酶系重要的编码基因之一,有关CYP2E1 基因多态性与结直肠癌易感性关系研究较多,但结果存在一定的差异.目的:探讨细胞色素P450 2E1 基因PstI/RsaI 单核苷酸多态性与结直肠癌易感性的关系.方法:检索EMBASE、PubMed、Ovid、Highwire press 等西文生物医学文献数据库; CNKI、CBM、万方数据库等中文数据库.获取发表的CYP2E1 基因PstI/RsaI 单核苷酸多态性与结直肠癌易感性关系的研究.病例组及对照组CYP2E1 等位基因分布的比值比为效应指标,根据异质性检验结果选择随机效应模型或固定效应模型对OR 进行合并.结果与结论:按照文献入选标准共查到9 篇病例对照研究,其中病例组4 760 例,对照组5 812 例.以野生型纯合子为参照,评估突变纯合子患结直肠癌的风险OR=1.24(OR=1.24,95%CI:0.93~1.66,P=0.15);以野生纯合子加突变杂合子为参照,评估突变纯合子患结直肠癌的风险OR=1.26(OR=1.26,95%CI:0.94~1.68,P=0.12);以野生纯合子为参照,评估突变纯合子加突变杂合子患结直肠癌的风险OR=1.00(OR=1.00,95%CI:0.90~1.12,P=0.97).亚组分析,按不同种族分为高加索人群和东亚人群,除高加索人群在c1c1 vs.c2c2 模式下显示CYP2E1 基因PstI/RsaI 单核苷酸多态性与结直肠癌易感性有关(OR=2.67,95%CI:1.03~6.89,P=0.04),其他各种模式下Meta 分析结果均未显示与结直肠癌易感性有关.说明整体上CYP2E1 基因PstI/RsaI 单核苷酸多态性与结直肠癌易感性间不存在明显相关性,但高加索人群中携带c2c2 突变基因型的个体可能是结直肠癌的易感人群.
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神经节苷脂治疗急性脑梗死国内随机对照文献的系统评价
背景:目前已有一些文献报道神经节苷脂治疗急性脑梗死的有效性和安全性,但单个研究的样本量均较小,其疗效仍不肯定.目的:应用偱证医学方法评价神经节苷脂治疗急性脑梗死的有效性和安全性.方法:采用计算机与手工检索相结合的方法,在中国生物医学光盘数据库(CBM,1990/2010)、清华期刊数据库(CNKI,1990/2010)与维普数据库(VIP,1990/2010)及主要的神经内科相关学术期刊中,检索神经节苷脂治疗急性脑梗死的随机对照试验(RCT),文献质量评价参照Cochrane 协作网推荐的偏倚风险评价工具,统计分析采用RevMan5.0 软件,对同质研究进行Meta 分析.结果与结论:初检得到119 篇文献,通过阅读标题、[摘要]和全文,9 篇文献满足纳入排除标准,但文献的方法学质量均偏低.以神经功能改善的临床疗效和以中华医学会标准(NDS)评分为结局指标分别进行的Meta 分析,均提示神经节苷脂疗效优于对照措施.但由于方法学质量偏低,神经节苷脂治疗中国急性脑梗死患者的有效性和安全性,有待高质量的临床试验证实.
