中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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烟酰胺对压力诱发免腰椎间盘退变的保护作用
背景:近研究已经证实,烟酰胺能够促进椎间盘细胞的增殖并对椎间盘退变有改善作用.目的:验证烟酰胺对压力诱发的兔腰椎间盘退变的保护作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-11/2009-04在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室及骨科实验室完成.材料:4月龄日本大白兔24只,体质量2.0 kg;烟酰胺为天津市大茂化学试剂厂产品.方法:取24只日本大白兔随机分入1～6组,采用可控轴向压力,以98 N压力诱发椎间盘退变建立兔腰椎间盘退变模型,并按分组要求给予兔口服烟酰胺;第1组2只,安装加压装置不予加压或给药;第2组2只,给予50mg/kg烟酰胺口服1周:第3组5只,以98N压力加压1周;第4组5只,以98 N压力加压1周,去除压力自行恢复1周;第5组5只,加压1周同时给予50 mg/kg烟酰胺口服1周;第6组5只,自加压开始时持续给予50 mg/kg烟酰胺,加压1周,然后去除压力后恢复1周.主要观察指标:以Thompson分级法及腰椎间盘磁共振评价退变程度;苏木精-伊红染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及藏红O-快绿染色考察其组织学改变:P161NK4A免疫组织化学染色检测细胞增殖和衰老状态的变化.结果:①第2组椎间盘未见明显退变;第3组5只动物Thompson分级均为Ⅱ级,第4组4只为Ⅱ级,1只为Ⅲ级,第5组2只为Ⅰ级,3只为Ⅱ级,第6组3只为Ⅰ级,2只为Ⅱ级.MRI也显示,服用烟酰胺的动物椎间盘退变程度有所减轻.②第6组纤维环Ⅱ型胶原含量较第4组高约53.2%(P＜0.01).③第2组藏红O染色强度较第1组有所上升;第5,6组髓核和纤维环染色强度均高于第4组的相对应部位,其中以第6组髓核上升为明显(P＜0.01,P＜0.01),第6组较第5组有轻微上升.④P161NK4A阳性率随烟酰胺给药时间延长而降低.结论:烟酰胺有助于减轻压力对椎间盘的损伤,能够促进压力损伤后的椎间盘恢复.
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端粒酶转染大鼠胰岛素分泌细胞建立的永生化细胞系
背景:在前期DNA重组技术构建端粒酶反转录酶基因真核表达的质粒、端粒酶反转录酶基因基因转染大鼠胰岛素分泌细胞的基础上,得到永生化的胰岛素分泌细胞系,建立了稳定一致的细胞模型.目的:端粒酶转染健康成年SD大鼠的胰岛素分泌细胞,建立均一稳定的胰岛素分泌细胞系,为临床胰岛素分泌细胞移植治疗糖尿病奠定实验基础.设计、时间及单位:动物实验观察,2007-02/05在辽宁医学院人类学研究所完成.材料:健康成年SD大鼠20只,取其胰岛细胞的分离、纯化、培养及鉴定.方法:原代培养健康成年SD大鼠的胰岛素分泌细胞,采用V型胶原酶消化和Ficoll 400纯化液纯化.经双硫腙染色和高效液相包谱分离及质谱分析的方法对分离得到的胰岛素分泌细胞进行检测.采用含有端粒酶反转录酶基因的载体转染大鼠胰岛素分泌细胞,经G418筛选后得到阳性细胞克隆,并在体外进行连续的传代培养.应用RT-PCR方法检测hTERT基因在细胞中的整合和表达情况,同时用高效液相色谱分离法对转染后的细胞分泌胰岛素的功能进行检测.主要观察指标:①胰岛细胞在经过端粒酶反转录酶基因转染前后的细胞生长情况.②转染后的细胞在体外的传代培养情况.③细胞的胰岛素分泌情况.结果:端粒酶反转录酶基因转染后细胞与未转染的细胞对比活力良好并且仍有分泌胰岛素的功能,可在体外连续的进行传代培养(目前已传至第15代,仍在进一步传代培养中),同时外源性的hTERT基因在转染后的胰岛素分泌细胞中有稳定的整合并表达.结论:转染后的细胞具有分泌胰岛素的功能并可以在体外连续传代培养,端粒酶反转录酶基因在胰岛素分泌细胞中稳定的整合并表达,胰岛素分泌细胞的永生化细胞系基本建立.
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机械牵张人牙周膜成纤维细胞钙离子通道的变化
背景:当机械牵张力作用到细胞上,通过激活钙离子通道以改变胞内Ca2+浓度,引发细胞功能的相应改变.目的:应用激光共聚焦显微成像技术观察钙通道阻滞剂对机械牵张力下,钙离子浓度变化的影响.设计、时间及地点:细胞学观察实验,于2007-03/2008-08在哈尔滨医科大学药理学院完成.材料:硝苯地平、氯化镉购自美国SIGMA公司.12～16岁青少年因正畸目的拔除的双尖牙.方法:以酶消化组织快法培养人牙周膜成纤维细胞,采用体外细胞加力装置给细胞加力,按弹力形变8%、12%加力2,4 h后,分别加入10,20 μmol硝苯地平及10 μmol氯化镉,同时设单纯加力和正常对照组,共17组.经Fluo-3/AM负载后,在激光共聚焦显微镜下观察人牙膜成纤维细胞在不同加力时间以及弹性形变的荧光强度变化.主要观察指标:激光共聚焦显微镜下观察人牙周膜成纤维细胞荧光强度变化及钙离子浓度变化.结果:单纯加力人牙周膜成纤维细胞中钙离子浓度升高明显,细胞亮度明显增强,加入硝苯地平10,20 μmol后,随着药物浓度增高,细胞亮度逐渐减弱,加入氯化镉后,细胞亮度减弱更加明显.人牙周膜成纤维细胞弹力形变8%,细胞加力2 h后,细胞内钙离子浓度明显升高(P＜0.01),加入10,20 μmol硝苯地平后,随着药物浓度的增加,细胞内钙浓度逐渐降低(P＜0.01),但高于正常对照组,加入氯化镉后,细胞内钙浓度下降比硝苯地平组更加明显(P＜0.01),但高于正常组.弹力形变8%+细胞加力4 h组、弹力形变12%+细胞加力2 h组、弹力形变12%+细胞加力4 h后与弹力形变8%,细胞加力2 h组结果一致.结论:单纯加力可以提高人牙周膜成纤维细胞中钙离子浓度,与弹性形变、加力时间无关.硝苯地平和氯化镉可以降低人牙周膜成纤维细胞内钙离子浓度,氯化镉作用更强.
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青年男女膝关节屈伸肌群达到峰值力矩时关节角度变化规律的等速肌力测试
背景:人体各关节灵活程度不同,但屈伸运动都是具备的,在日常活动当中,屈伸运动也是为常见的,但关节屈伸时在何角度产生的力矩是大的昵?目的:掌握膝关节屈伸时发挥大肌力的关节角度,为运动健身、训练提供理论指导.设计、时间及地点:对比观察,试验于2008-04/06在郑州大学体育学院实验室进行.对象:自愿参加测试的大学生男女各30名.方法:测试仪器使用澳大利亚产Kinitech等速肌力测试系统,按照Kinitech等速肌力测试系统手册要求对参试者膝关节进行固定并测试,3种测试速度为慢速60(°)/s中速120(°)/s和快速240 (°)/s.主要观察指标:膝关节屈伸肌群的峰值力矩、达到峰值力矩时关节角度.结果:在速度为60(°)/s时,男女左屈肌小于右屈肌达到峰值力矩的关节角度,且左伸肌小于右伸肌;男子右屈肌达到峰值力矩的关节角度大于左屈肌,且女子与男子相同.在速度为120(°)/s时,男子屈伸肌达到峰值力矩的关节角度差异不显著,女子右伸肌达到峰值力矩的关节角度大于左伸肌.在速度为240 (°)/s时,男子左屈肌达到峰值力矩的关节角度大于右屈肌,而左伸肌和右伸肌差异不存在显著性.女子左右屈伸肌差异也不存在显著性.结论:自然发育下人体存在优势腿,在不同速度下达到峰值力矩的关节角度有所不同,在日常运动健身时尽可能的全面训练,使屈伸肌群得到全面发展.
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大鼠脊髓完全性损伤模型的建立
背景:建立有效的完全性脊髓损伤动物模型是深入研究脊髓损伤的前提,只有建立标准的、可重复性高的实验动物模型才能择优选出治疗脊髓损伤的可行方案.目的:实验拟建立一种稳定的大鼠完全性脊髓损伤动物模型.设计、时间及地点:对照观察动物实验,于2007-11/2008-10在石河子大学药学院动物试验中心完成.材料:30只健康Wistar大鼠随机分成假手术组6只、实验组24只.方法:显露实验组大鼠T8～T12棘突及椎板,切除T9～10棘突及椎板,暴露相应脊髓段作为损伤区,采用大鼠脑定位仪自主设计改良Allen模型打击装置,予15 g×20 cm=2.94×10-2N重力打击大鼠T10节段脊髓,动物模型保证硬脊膜完整.假手术组仅同法暴露相应脊髓段,但不做打击.主要观察指标:造模后2,4,8周以斜板试验及BBB评分观察大鼠双后肢运动功能,以苏木精-伊红染色观察大鼠脊髓组织的变化.结果:假手术组大鼠苏醒后能站立行走,斜板试验角度均大于70°,BBB评分21分,脊髓结构正常.实验组大鼠造模后双下肢全瘫,2只大鼠表现为痉挛性瘫痪,5只大鼠表现出不同程度的自残现象.造模后2,4,8周斜板试验角度均小于30°,BBB评分均少于10分,随时间延长,部分大鼠可见后肢刺激性反射,但无主动性功能活动,局部脊髓结构破坏严重.结论:以2.94×10-2N重力打击大鼠脊髓可保证硬脊膜的完整,并获得稳定的完全性脊髓损伤动物模型.
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C3H10T 1/2小鼠胚胎成纤维细胞Dlxin 1基因表达及骨形态发生蛋白2的调控机制
背景:Dlxin 1可与成骨相关转录因子Dlx、Msx家族成员相互作用调节其转录活性,骨形态发生蛋白2可诱导小鼠胚胎成纤维细胞(C3H10T 1/2)向成骨细胞分化.目的:对C3H10T 1/2小鼠胚胎成纤维细胞中Dlxin 1基因的表达及骨形态发生蛋白2调控机制进行初探.设计、时间及地点:细胞分子水平实验,于2007-03/10在暨南大学生物工程研究所实验室完成.材料:C3H10T 1/2细胞为ATCC产品,骨形态发生蛋白2为自产,DH5α为自备.方法:用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测骨形态发生蛋白2对基因表达的影响,用双荧光报告载体系统搜寻Dlxin 1的上游启动子元件,用凝胶迁移实验(EMSA)对其精确定位.主要观察指标:①细胞中Dlxin 1基因mRNA的表达情况.②pGL3-Dlxin 1系列缺失突变报告载体荧光活性及启动子片段与C3H10T 1/2细胞核蛋白的结合能力检测.结果:在转录水平上骨形态发生蛋白2可以诱导Dlxin 1基因表达上调;Dlxin 1启动子基础活性和骨形态发生蛋白2诱导活性调控区域均位于转录起始位点上游-943～-728 bp之间;EMSA证实,-758～-748 bp这一片段是调控核心区域.结论:转录因子通过与Dlxin 1启动子上游TATA box结合来调控Dlxin 1基因的转录.
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成骨相关分子在成骨肉瘤细胞株MG63中的表达
背景:许多学者在骨肉瘤组织中检测到许多成骨相关分子,并发现这些分子与骨肉瘤的发生发展和转归密切相关.目的:观察骨形态发生蛋白7、血管内皮生长因子及核心结合因子α1在成骨肉瘤细胞株MG63中的表达.设计、时间及地点:分子生物学观察实验,于2007-03/11在上海长海医院中心实验室完成.材料:成骨肉瘤细胞株MG63购自中科院上海生物研究所.方法:MG63细胞株经血细胞计数板计数,以1×104/cm2接种于100 mL培养瓶,置于37℃、体积分数为5%CO2和饱和湿度的培养箱中,以含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液贴壁培养.待细胞生长达到70%～80%汇合时,0.25%的胰酶消化5 min,加入以含体积分数为10%胎牛血清的DMEM培养液中止消化,按1:3的比例传代培养.主要观察指标:以RT-PCR和免疫组织化学方法检测骨形态发生蛋白7、血管内皮生长因子、核心结合因子α1在MG63中的表达.结果:RT-PCR及免疫组织化学方法均从MG63细胞中检测到骨形态发生蛋白7、血管内皮生长因子、核心结合因子α1的阳性表达.结论:从转录和翻译的水平证实MG63细胞表达骨形态发生蛋白7、血管内皮生长因子、核心结合因子α1,提示这些成骨相关分子在骨肉瘤的发生发展过程中可能起着重要作用.
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内源性硫化氢的中枢心血管效应与KATP通道开放机制有关
背景:硫化氢具有舒张离体血管平滑肌、促进下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素和细胞膜超极化的作用.中枢内硫化氢是否参与心血管活动的调节目前尚未得到充分的研究.目的:观察中枢内源性硫化氢的心血管效应及其机制.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-10/2008-10在解放军第一医院检验科完成.材料:清洁级雄性SD大鼠40只,体质量200～250 g;S-腺苷蛋氨酸,KATP通道阻断剂格列苯脲为Sigma公司产品.方法:40只大鼠随机被分为6组:①对照组6只,注射人工脑脊液.②S-腺苷蛋氨酸低剂量组6只注射S-腺苷蛋氨酸5 μmol、中剂量组5只注射S腺苷蛋氨酸10 μmol、高剂量组7只注射S-腺苷蛋氨酸20 μmol.③预先注射人工脑脊液8只或格列苯脲格列苯脲8只,40 min后注射10 pmol S-腺苷蛋氨酸.将大鼠固定于立体定位仪,进行侧脑室注射.主要观察指标:①侧脑室注射不同剂量S-腺苷蛋氨酸后对血压及心率的影响.②侧脑室注射KATP通道阻断剂格列苯脲对侧脑室注射S-腺苷蛋氨酸中枢心血管效应的影响.结果:侧脑室注射S-腺苷蛋氨酸能够显著降低麻醉大鼠的血压,减慢大鼠的心率.侧脑室注射人工脑脊液不影响麻醉大鼠的血压和心率.格列苯脲预处理能显著减弱侧脑室10 μmol S-腺苷蛋氨酸产生的降低血压效应,与人工脑脊液预处理组比较差异有显著性意义(P＜0.05),格列苯脲+S腺苷蛋氨酸组和对照组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论:侧脑室注射S-腺苷蛋氨酸增加内源性硫化氢产生的中枢性降低血压、减慢心率的作用可能与KATP通道开放有关.
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构建兔菜花耳模型和曲安奈德对耳郭的影响
背景:菜花耳主要是皮下的纤维组织增生,目前还没有找到一种令人满意的动物模型,曲安奈德常用于治疗增生性瘢痕和咬肌肥大,其是否也可以诱导其增生的组织萎缩呢?目的:构建菜花耳兔模型并观察注射曲安奈德对其增生性瘢痕的修复和治疗作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验;组织学观察,于2008-08/2009-02在广西中医学院动物实验中心进行.材料:健康新西兰兔10只,耳郭没有异常,雌雄不限;曲安奈德注射液为昆明积大制药有限公司产品(国药准字53021604).方法:10只健康、耳郭正常的新西兰兔通过反复重物撞击耳郭造模,6轮实验后成功构建菜花耳模型,随机分为对照组和实验组,每组5只兔子(10只耳郭).对照组在增厚的耳郭内注射利多卡因0.3 mL,实验组注射曲安奈德40 mg(1 mL)和利多卡因1 mL混合液0.3 mL,每3周1次,共3次,游标卡尺测量耳郭的厚度,实验结束进行组织病理检查.主要观察指标:①两组兔大体观察.②耳郭厚度.③耳郭组织病理学观察.结果:6轮实验后,全部的耳郭显著增厚变硬,造模成功,两组耳郭厚度差异无显著性意义,注射后实验组显著比对照组变薄变软.实验结束的组织病理检查,对照组的组织特点同菜花耳,皮下大量的纤维组织增生,组织致密;实验组可见药物残留,其周围的纤维组织变得疏松,有的出现变性、玻璃样变、胶原断裂和钙盐沉积;而离药物较远的位置纤维组织增生、更致密,同菜花耳治疗前.结论:通过反复重物坠落撞击兔耳可构建菜花耳模型,局部注射曲安奈德可修复模型耳郭变薄变软.
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A multi-center study of repairing articular cartilage defects of the knee using cultured autologous chondrocytes
背景:由于关节软骨再生修复能力有限,自体软骨细胞移植技术为关节软骨损伤的修复提供了较好的修复材料.目的:多中心评估自体软骨细胞移植的短期疗效与安全性.设计、时间及地点:自身前后对照观察,于2001-03/2006-04在韩国80所附属医院完成.对象:软骨缺损患者261例,男169例,女92例,年龄15～70岁,平均36.47岁.软骨缺损面积2.0～20.0 cm2.其中股骨髁损伤215例,滑车30例,髌骨25例,胫骨2例.方法:取关节非负重区软骨组织200～300 mg,体外培养扩增后将软骨细胞植入患者关节缺损区.于移植后6个月对所有患者进行随访,膝关节功能评估标准采用美国膝关节协会评分系统[Knee society score-A(KSS-A)和Knee society score-B(KSS-B)].主要观察指标:自体软骨细胞膝关节缺损区移植后KSS-A和KSS-B评分.结果:获得随访患者261例.患者移植前KSS-A评分为63.55±18.47,移植后6个月为88.74±11,47,差异有显著性意义(P＜0.05)移植前KSS-B评分为59.56±24.92,移植后6个月为85.13±14.67,差异有显著性意义(P＜0.05).患者移植前后膝关节疼痛、活动度、前后稳定性、屈曲挛缩、伸直迟滞、行走能力和上下楼能力均明显改善(P＜0.05).综合评价移植有效率为97.3%,优良率为89.3%.结论:自体软骨细胞移植可有效的治疗关节软骨缺损,促进膝关节功能的恢复.
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高密度细胞培养对兔关节软骨细胞糖胺多糖合成的作用
背景:软骨细胞体外培养时常发生失分化,合成糖胺多糖的能力下降,延缓软骨细胞的失分化速度是组织工程学需要解决的重要课题.目的:观察不同接种密度下,软骨细胞合成糖胺多糖的能力.设计、时间及地点:对比观察细胞学实验,于 2007-01/05在山西医科大学第二医院骨科实验室完成.材料:1月龄新西兰兔5只.方法:采用0.4%Pronase酶和0.025%Ⅱ型胶原酶消化分离双膝关节关节软骨细胞,来源于同一只兔的软骨细胞分为两部分,一部分以2×104/cm2接种,传代时仍以相同密度接种.另一部分在细胞贴壁后,人工降低细胞密度至2×103/cm2培养.倒置显微镜下观察细胞形态和增殖情况.原代和传1代细胞于细胞融合后换液.主要观察指标:换液后12,24,36,48,60 h以改良Alcian blue染色沉淀法测定糖胺多糖质量浓度.结果:原代高密度培养组关节软骨细胞为多边形,轮廓清晰,三四天即可见集落形成,集落周边细胞较中心瘦长,为长多边形,传1 代细胞形态无明显变化.低密度培养细胞早期散在分布,7 d左右形成集落,细胞形态与高密度培养无明显差异.原代低密度培养软骨细胞长到融合所需时间较原代高密度培养细胞所需时间长.原代低密度培养组上清液中糖胺多糖质量浓度显著低于原代及传1 代高密度培养组软骨细胞(P＜0.001,P＜0.05),且时间越长,质量浓度相差越大.结论:与低密度培养相比,平面高密度培养可提高软骨细胞合成糖胺多糖的能力,明显减缓软骨细胞的失分化速度,提示高密度培养更有利于软骨细胞维持表型,是软骨平面培养的较好方式.
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膝关节滑膜形态学特征及病变后的观察临床意义
背景:疾病和创伤等常伴有关节滑膜的改变,由于膝关节滑膜的分布范围较大,各部病变形态不一,为临床诊治带来困难.目的:观察膝关节滑膜在髌上囊、髌下深囊、髌软骨上缘和后内侧隐窝处的大体形态学和组织学改变,寻找患者膝关节病变的滑膜变化特征.设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-10/12在成都医学院解剖学实验室完成.材料:经MRI检查具有膝关节滑膜增厚或关节腔积液的新鲜尸体标本15具(30侧膝关节),其中风湿性关节炎6例、结核性滑膜炎4例、银屑病关节炎3例和肠病性关节炎2例.方法:对30侧膝关节标本进行解剖,充分暴露髌上囊、髌下深囊、髌软骨上缘、后内侧隐窝处滑膜,进行大体形态学观察;并于上述部位取材,经苏木精-伊红染色行组织学观察.主要观察指标:膝关节滑膜大体形态学观察及组织学观察结果.结果:大体观察显示:髌软骨上缘处滑膜质地变硬发生率为87%(26/30)、髌上囊内滑膜厚度大于5mm发生率为73%(22/30)、髌下深囊内滑膜表面粗糙发生率为70%(21/30),与其他部位比较差异均有显著性意义(P＜0.001).组织学观察显示:髌软骨上缘、后内侧隐窝处滑膜细胞及小血管增生发生率分别为80%(24/30)和57%(17/30)、间质纤维化及玻璃样变发生率分别为83%(25/30)和74%(22/30),与其他部位比较差异均有显著性意义(P＜0.001).结论:髌下深囊、髌上囊、髌软骨上缘处滑膜易发生大体形态学改变,后内侧隐窝和髌软骨上缘处滑膜是组织学改变显著的部位.
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阴中求阳法治疗去卵巢骨质疏松大鼠骨组织作用的对比研究
背景:祖国医学中"肾主骨"的理论符合现代医学骨代谢调节机制,依此"阴中求阳法"和"阳中求阴法"理论研制的补肾复方在治疗骨质疏松症虽取得较好效果,但是滋补肾阴药与温补肾阳药配伍比例需要进行骨形成机制的深入探讨.目的:对比观察依照阴中求阳法组成的补肾方药中滋补肾阴药与温补肾阳药不同配伍比例对卵巢切除所致骨质疏松大鼠的治疗作用,以探讨它们之间的疗效是否存在差异.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/2009-01在河北医科大学中西医结合基础实验室完成.材料:清洁级3个月龄健康雌性SD大鼠(未曾交配)90只,只随机分成9组:正常对照组、假手术组、卵巢切除组、91组、82组、73组、64组、55组、补肾复方组,每组10只.补肾方药由地黄、淫羊藿、山药、丹参、骨碎补、独活等药物组成.方法:正常组和假手术组不造模,其余各组均切除卵巢造成骨质疏松症模型.91组、82组、73组、64组、55组分别按补肾阴药地黄:补肾阳药淫羊藿为9:1,8:2,7:3,6:4及5:5的比例配伍;生药含量均为960 g/L,每天灌服7 μL/g.补肾复方组按照地黄:淫羊藿:淮山药:丹参:骨碎补:独活等于8:4:4:3:3:3的配伍比例制成的口服剂,生药含量约为1 010g/L,每天灌服7 μL/g,以上给药,1次/d,连续6 d,休息1 d后,再连续灌服6 d,如此至3个月止;假手术组和正常对照组大鼠灌服等容积的蒸馏水.于卵巢切除1周后给药.主要观察指标:3个月后处死大鼠.普通光镜下观察骨小梁体积百分比、骨小梁吸收表面百分比及骨小梁形成表面百分比.荧光镜下观察活性生成表面百分比、骨小梁矿化率及骨小梁骨生成率.结果:90只大鼠均进入结果分析.切除卵巢3个月后,大鼠胫骨骨小梁体积百分比显著降低,骨小梁吸收表面百分比以及骨小梁形成表面百分比、活性生成表面百分比、骨小粱矿化率、骨小梁骨生成率皆显著增高.给药3个月后,与切除卵巢模型组比较,给大鼠灌服不同配伍比例滋阴药和温阳药组成的补肾方药3个月后,均能使上述指标发生逆转,但程度有所不同,补肾阴药地黄和补肾阳药淫羊藿配伍比例之中以7:3比例为明显.结论:根据"阴中求阳法"理论组成的补肾方剂,滋补肾阴药与温补肾阳药不同配伍比例对卵巢切除所致的骨质疏松均有明显的治疗作川,补肾阴药和补肾阳药配伍比例应该是"补阴药"大于"补阳药"疗效更好.
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自体髂骨复合骨形态发生蛋白与自体髂骨移植治疗骨折不连接的比较
目的:对比观察自体髂骨复合骨形态发生蛋白移植及单纯自体髂骨移植两种方法治疗骨不连接的临床效果.方法:骨不连接患者40例,男24例,女16例,年龄19～56岁,随机分为两组,实验组20例,对照组20例.实验组行自体髂骨复合骨形态发生蛋白后移植于骨折端;对照组单纯行自体髂骨移植于骨折端.术后随访11～20个月.结果:40例骨不连接患者均进入结果分析.术后X射线片显示所有骨折均获得愈合,实验组骨折临床愈合时间(10.0±3.0)周(8～16周),对照组骨折临床愈合时间(13.0±3.8)周(8～20周),两组比较差异有显著性意义(t=2.26,P＜0.05).结论:自体髂骨复合骨形态发生蛋白治疗骨不连接临床效果优于单纯自体髂骨移植,具有良好的成骨诱导活性,可缩短骨折愈合期,疗效安全、可靠,是治疗骨不连接较好的方法.
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双侧坐骨神经及股神经离断并固定大鼠神经肽Y水平对骨密度的影响
背景:以往研究认为,刺激坐骨神经及中枢神经受伤可使神经肽Y含量发生改变,神经肽Y对破骨细胞产生作用,影响骨代谢.目的:验证双侧坐骨神经、股神经失神经及固定后神经肽物质对大鼠双侧胫骨骨密度的影响,并进行相关性分析.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-09/11在湘南学院附属医院完成.材料:10周龄SD雄性大鼠96只,体质量220～250 g,用于制备失神经支配模型.方法:96只SD大鼠按数字表法随机分为3组,每组32只.①失神经支配组:切断大鼠两侧后肢坐骨神经和两侧股神经,远端游离5 mm,缝合切口.②固定组:大鼠切断神经,程序同前,继之采用管型石膏固定.③对照组:行假手术,仅暴露神经,然后缝合伤口.主要观察指标:实验期间大鼠的一般情况.造模后1,10,30,60 d每组分别处死大鼠8只,观察双侧胫骨骨密度和神经肽Y的变化及神经肽Y水平与骨密度水平的相关性.结果:96只SD大鼠均进入结果分析.①失神经后神经肽Y含量先降低,后升高,随着失神经支配时间的延长,神经肽Y持续升高,超过正常水平.②固定组神经肽Y含量先升高,后下降,但随着固定时间的延长,逐步升高并超过正常水平.⑧随着神经肽Y含量变化,大鼠双侧胫骨骨量也相应发生改变,大鼠失神经、固定30 d后双侧胫骨骨密度明显下降.失神经及固定后神经肽Y与骨密度含量变化高度相关(P＜0.01).结论:失神经支配及固定后大鼠神经肽Y含量变化均与骨密度改变具有高度相关,故可认为神经肽Y可作为骨质疏松形成的关键指标之一.
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经皮电刺激大鼠骨骼肌失神经肌萎缩时成肌调节因子基因的表达
背景:在去神经早期大鼠骨髂肌成肌调节因子(MyoD)表达明显上调,有明显延缓骨骼肌肌萎缩的作用.临床实验证实电刺激是治疗失神经肌萎缩的有效方法.尚未有实验证实电刺激对失神经肌萎缩MyoD表达的影响.目的:验证电刺激对大鼠骨骼肌MyoD基因表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-07/11在山西医科大学动物实验中心完成.材料:健康的SD大鼠36只,雌雄不限.随机分成3组,即空白对照组、去神经组、电刺激组,每组12只.方法:空白对照组不做任何处理;去神经组和电刺激组大鼠制作右侧坐骨神经离断,腓肠肌失神经支配模型.用电刺激对电刺激组进行刺激,1次/d,30 min/次.分别于去神经第2,7,14,28天,处死大鼠,取小腿的腓肠肌肉标本.主要观察指标:用反转录聚合酶链式反应技术检测MyoD mRNA的表达变化,免疫组织化学检测MyoD蛋白表达的变化.结果:在去神经支配后第2,7,14,28天,去神经组和电刺激组标本中MyoDmRNA和蛋白含量表达上调,与空白对照组比较差异有显著性意义(P＜0.05),电刺激组表达高于去神经组(P＜0.05).结论:通过电刺激可以上调大鼠腓肠肌失神经模型MyoD的表达,说明电刺激是延缓骨骼失神经肌萎缩的有效方法.
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透骨消痛颗粒诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化
背景:研究表明,透骨消痛颗粒通过有效抑制细胞因子、基质金属蛋白酶3、氧自由基的生物效应来延缓关节宏观形态、软骨基质及软骨细胞退变的作用.目的:验证透骨消痛颗粒含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖和诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-12/2007-08在福建中医学院中西医结合研究院分子生物学实验室完成.材料:选用清洁级4周龄SD大鼠80只.透骨消痛颗粒,由巴戟天、杭白芍、青风藤、川芎等组成,由福州屏山药厂制作.方法:取72只SD大鼠随机分为5组,透骨消痛颗粒的水提物高剂量组、水提物中剂量组、水提物低剂量组、醇提物组各16只,空白对照组8只,分别以含14,7,3.5g/(kg·d)药量的水溶液2 mL灌胃,对照组以等量生理盐水2 mL灌胃,2次,d,连续给约3 d后,腹主动脉采血制备血清.从另8只4周龄SD大鼠骨髓中分离出骨髓间充质干细胞,体外传代培养,取第2代骨髓间充质干细胞分为空白对照组、软骨诱导剂组及透骨消痛颗粒组,通过透骨消痛颗粒含药血清诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化.主要观察指标:采用MTT法检测骨髓间充质干细胞增殖和免疫组织化学检测Ⅱ型胶原在细胞分化过程中的表达.结果:透骨消痛颗粒含约血清各组均能促进骨髓间充质干细胞增殖,与空白对照组相比差异均有非常显著性意义(P＜0.01),中剂量约物浓度时达到大效应(P＜0.01),中剂量1 h组与2 h组相比差异无显著性意义(P＞0.05).透骨消痛颗粒含药血清能增强Ⅱ型胶原在细胞分化过程中的表达,与空白对照组相比差异有非常显著性意义(P＜0.01),与软骨诱导剂组相比差异有显著性意义(P＜0.05).结论:透骨消痛颗粒含药血清能有效促进骨髓间充质干细胞增殖和诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化.
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高糖高脂饮食对兔膝关节软骨形态的影响
背景:血清胆固醇水平增高与人群中骨关节病发病率增高呈正相关.而对于高糖高脂饮食是否参与关节软骨退变过程从而诱发骨关节炎,其参与机制又是什么,目前尚不清楚.目的:观察经高糖高脂喂养后新西兰兔膝关节软骨形态学改变,探索饮食在关节软骨退变过程中的作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/09在中南大学湘雅医学院动物实验室完成.材料:健康成年雄性新西兰兔40只,体质量约2 kg.随机分为4组,每组10只.方法:①对照组饲以基础饲料作.②高糖组饲以高糖饲料(37%的蔗糖混合63%的普通饲料).③高脂组饲以高脂饲料(20%猪油混合80%的普通饲料).④高糖高脂组饲以高糖高脂饲料(37%蔗糖、10%猪油混合53%基础饲料).主要观察指标:每4周末抽取空腹血样,测血糖、三酰甘油、总胆固醇及胰岛素水平,记录体质量变化.28周后取兔膝关节行大体观察后,取股骨髁部软骨行甲苯胺蓝染色、透射电镜观察.结果:①与对照组相比,高脂组及高糖高脂组血糖、三酰甘油、总胆固醇水平都显著升高,而胰岛素水平先升高后显著降低,上述变化均有显著性意义(P＜0.05).高糖组上述指标均较对照组升高,但差异无显著性意义(P＞0.05).②光镜和透射电镜下,高脂饮食组和高糖高脂饮食组可见潮线消失、软骨细胞排列紊乱、胶原纤维断裂、软骨细胞固缩等形态变化,高糖组未见明显改变.结论:长期高脂饮食及高糖高脂饮食可诱发和加重软骨损伤,提示其可能参与了骨关节炎的发生发展.
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重组碱性成纤维细胞生长因子基因转染对于骨髓源性成骨细胞的生物学特性及对血管生成的影响
背景:碱性成纤维细胞生长因子对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有明显的促进增殖作用,对骨髓间充质干细胞具有间接的成骨作用.目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对骨髓源性成骨细胞生物学特性和血管生成的影响,与骨髓间充质干细胞作对比.设计、时间及地点:对比分析基因转染效果实验,于2007-11-27/2008-12-01在南方医科大学珠江医院中心实验室和动物实验中心完成.材料:2月龄新西兰大白兔用于骨髓间充质干细胞的分离培养及成骨细胞诱导.5周龄Wistar大鼠用于移植实验.牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒由中山大学中山医学院免疫教研室徐霖博士惠赠.方法:分离兔骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞,采用脂质体介导将牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒分别转染体外培养的兔骨髓间充质干细胞和诱导的骨髓源性成骨细胞,G418筛选.稳定转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓源性成骨细胞与磷酸钙胶原材料复合培养,植于Wistar大鼠后腿肌袋内,正常饲养2,4周后取出植入的复合材料,观察血管新生情况.主要观察指标:碱性成纤维细胞生长因子转染前后骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性参数的比较以及骨髓源性成骨细胞转染碱性成纤维细胞生长因子前后新生血管数目的比较.结果:利用RT-PCR、免疫细胞化学染色分析转染细胞的碱性成纤维细胞生长因子表达情况.从形态、增殖特性和细胞周期、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原等方面分析稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性.重组牛pcDNA3-bFGF真核表达质粒成功转染目的细胞,经G418筛选稳定表达.转染的细胞有大量目的基因mRNA转录和目的蛋白表达.转染碱性成纤维细胞生长因子基因的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生长均加快,细胞周期中增殖期细胞比例明显增加,细胞形态无明显变化.转染与未转染的骨髓源性成骨细胞比较,碱性磷酸酶的分泌量无明显变化(P＞0.05),转染后骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶分泌量小于骨髓源性成骨细胞(P＜0.01).骨髓源性成骨细胞转染与未转染碱性成纤维细胞生长因子基因组均有Ⅰ型胶原mRNA表达,但是,转染和未转染的骨髓间充质干细胞中均无Ⅰ型胶原基因mRNA转录.转染有外源性碱性成纤维细胞生长因子基因的复合材料部分被增生纤维结缔组织包绕,内有新生血管生成,随着时间的延长而增多.结论:稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞增殖较快,但作为组织工程骨的种子细胞,骨髓源性成骨细胞较骨髓间充质干细胞更理想.外源碱性成纤维细胞生长因子基因转染后稳定表达,对新生血管的形成具有促进作用,可以作为组织工程化人工骨种子细胞转染的目的基因.
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细菌内重组法快速构建血管内皮生长因子165重组腺病毒载体
背景:腺病毒载体具有在哺乳动物及其多种细胞基因转移和蛋白表达的高效性,目前以细菌内重组法构建病毒载体成为常用方法.目的:观察以细菌内重组法构建血管内皮生长因子165重组腺病毒载体的可行性.设计、时间及地点:基因转染病毒载体的单一样本实验,于2007-10/2008-02在中山大学分子生物实验室完成.材料:合成血管内皮生长因子165基因的引物合成和序列测定由上海生工公司提供.pDNR-1r质粒(已含有绿色荧光蛋白基因)、pint.AV.spaT质粒、pint.B.B质粒均购自广州拓普基因技术公司.方法:通过动态模板PCR基因合成法合成的血管内皮生长因子165基因克隆入pMD18-T载体获得pMD18-T-VEGF165.将pMD18-T-VEGF165和pDNR经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切,构建pDNR-VEGF165载体,酶切鉴定后,pDNR-VEGF165与pint.AV1.spat共转化BNN菌株的感受态细胞,构建pint,AV1.spat.VEGF165腺病毒表达载体,将线性化的pint.AV1.SpaT-VEGF165和pint.B.B转染293细胞.主要观察指标:以DNA测序、酶切及聚合酶链反应法鉴定重组质粒和病毒,并测定重组腺病毒的感染效率.结果:重组质粒用EcoR Ⅰ酶切后,切成2条片段,大小约为1 kb和6.9 kb,实际的酶切分析结果与理论分析相符,证明转化子中的重组质粒为Cre-LoxP系统介导的含有血管内皮生长因子165基因的重组质粒.荧光显微镜下,8 h后即可见部分细胞发出荧光,24 h发荧光的细胞数及强度达到高峰,转染率超过80%.线性化的pint.AV1.SpaT-VEGF165和pint.B.B共转染293细胞,12-14 d后会出现细胞病变效应.分别提取病变293细胞、正常293细胞的DNA,PCR后,1%琼脂糖凝胶电泳,病变的293细胞在约500 bp处出现条带.结论:以细菌内重组法获得了含有成熟血管内皮生长因子165基因的重组腺病毒.
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补肾壮骨颗粒干预维甲酸致骨质疏松大鼠的骨生物力学变化
背景:以中药复合成分制成的补肾壮骨颗粒应用于临床治疗骨质疏松症已十余年.目的:验证补肾壮骨颗粒对维甲酸致骨质疏松大鼠骨生物力学的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/06广州医药工业研究所完成.材料:3月龄SD大鼠60只,雌雄各半,体质量227～369 g.按体质量随机分为5组:正常对照组、骨质疏松模型组、补肾壮骨颗粒治疗高、低剂量组、仙灵骨葆阳性对照组,每组12只.补肾壮骨颗粒主要由鹿角胶、龟胶、山药、水蛭等药物组成;仙灵骨葆胶囊由贵州同济堂制药有限公司提供;维甲酸由武汉远城科技发展有限公司提供.方法;各组大鼠上午均灌胃给予维甲酸2周,造模同时下午按指定剂量灌胃给予相应药物:补肾壮骨颗粒低剂量组2.5g/kg,高剂量组5.0 g/kg;仙灵骨葆阳性对照组1.1 g/kg;正常对照组以及骨质疏松模型组给予等量的蒸馏水,1次/d,连用3周.麻醉后处死动物进行大鼠左侧股骨3点弯曲试验、左侧胫骨3点弯曲试验、第4腰椎骨压碎试验.主要观察指标:各组大鼠左侧股骨大荷载、第4腰椎骨骨结构强度及左侧胫骨骨结构强度.结果:模型组大鼠的股骨大荷载、椎骨结构强度均显著低于正常,表明给大鼠灌胃维甲酸,可导致大鼠骨生物力学性能的降低;与模型组相比,各给药组的左侧股骨大荷载、第4腰椎结构强度、左侧胫骨弯曲试验的大荷载结果差异均无显著性意义,但均有增加趋势,其中补肾壮骨颗粒低剂量组的左股骨弯曲试验的大荷载、左胫骨弯曲试验的大荷载、第4腰椎压碎试验的结构强度分别增加了16.2%,17.7%,15.4%.结论:补肾壮骨颗粒能增加小梁骨的骨强度,以低剂量组效果佳,起到防治骨质疏松症的作用.
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大鼠骨髓间充质干细胞与成骨细胞共育环境下Ⅰ型胶原的表达
背景:骨髓间充质干细胞在不同条件下可以分别分化为成骨细胞、软骨细胞、成肌细胞、脂肪细胞、神经胶质细胞、血管内皮细胞等.目的:与成骨细胞共培养的条件下,观察大鼠骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原的表达.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2007-01/08在广州中医药大学附属骨伤科医院细胞室完成.材料:3月龄SPF级SD大鼠6只用于骨髓间充质干细胞的分离与扩增,1 d龄以内清洁级SD乳鼠10只用于成骨细胞的分离与扩增.方法:贴壁法分离骨髓间充质干细胞,扩增后以流式细胞仪检测其均一性及细胞表型.采用酶消化法分离培养成骨细胞,以磷酸酶染色观察细胞分泌情况.利用Transwell培养板将成骨细胞和骨髓间充质干细胞在培养液以及其中的大分子蛋白可以相互交流而细胞间不相互接触的培养板内培养,以采用普通培养板单独培养的骨髓间充质干细胞为对照.主要观察指标:观察骨髓间充质干细胞的形态学变化及矿化能力,20 d后半定量RT-PCR方法检测骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原的表达,茜素红染色后显微镜下计数钙化结节.结果:流式细胞仪检测结果显示细胞均一性较好,2代细胞均一性在90%以上,CD34、CD45表达为阴性,CD44表达阳性.成骨细胞原代培养20 d时出现不透光的钙化结节,生长期细胞分裂相多见,细胞突起相互连接,汇合时呈铺路石状.茜素红染色矿化结节呈现酒红色,骨碱性磷酸酶染色可见胞质内出现黑色颗粒或块状沉淀.共培养的骨髓间充质干细胞形成的钙化结节数高于对照组(P＜0.05):与成骨细胞共培养的骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原表达量明显高于对照组(P＜0.01).结论:与成骨细胞共培养的骨髓间充质干细胞Ⅰ型胶原的表达量高,成骨能力强.
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胰岛素样生长因子1对糖尿病大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响
背景:胰岛素样生长因子1是近年来发现的一种神经营养因子.目的:验证胰岛素样生长因子1对局灶性脑缺血糖尿病大鼠的神经功能、神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-10/2008-03在齐齐哈尔医学院实验中心完成.材料:Wistar大鼠40只,体质量200～250 g,雌雄不限,鼠龄2.0～3.0月.方法:线栓法制作糖尿病大鼠大脑中动脉栓塞模型,随机分成胰岛素样生长因子1组和对照组,每组12只.胰岛素样生长因子1组连续皮下注射胰岛素样生长因子1,10 μg/(kg·d),对照组注射等量的生理盐水,两组分别注射7,14 d,每时间点取6只.主要观察指标:对两组大鼠进行神经功能缺损评分,采用TUNEL染色计数脑缺血周边区神经细胞凋亡数,免疫组织化学方法观察Bcl-2、Bax蛋白的表达.结果:胰岛素样生长因子1组神经功能缺损评分明显低于对照组(P＜0.01);胰岛素样生长因子1组缺血周边区的TUNEL阳性细胞数均明显少于对照组(P＜0.01);Bcl-2蛋白免疫阳性细胞明显多于对照组(P＜0.01),Bax蛋白免疫阳性细胞明显少于手术对照组(P＜0.01).结论:胰岛素样生长因子1可增加糖尿病脑缺血之后缺血周边区Bcl-2蛋白的表达,减少Bax蛋白的表达,拮抗神经细胞凋亡,改善神经功能.
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早孕小鼠子宫内膜中凋亡蛋白抑制因子Survivin表达及对胚胎着床的作用
背景:有研究表明Survivin作为一种凋亡蛋白抑制蛋白,在胚胎植入过程中可能起到抑制子宫内膜凋亡及诱导子宫内膜蜕膜化和促使滋养层细胞入侵的作用,但是目前关于Survivin在胚胎着床方面的报道较少.目的:观察凋亡蛋白抑制因子Survivin在早孕小鼠子宫内膜中的表达及对胚胎着床的作用.设计、时间及地点:随机分组设计,实验于2008-03/06在重庆医科大学医学检验中心完成.材料:6～8周龄清洁级NIH小鼠76只,体质量20～25 g;兔抗人Survivin多克隆抗体为美国Santa cruz公司产品.方法:①根据阴道涂片结果鉴别雌鼠的动情周期,动情后期雌鼠设为未孕组,记为妊娠第0天.雌雄鼠按2:1比例自然合笼,次晨7时检查雌鼠阴栓阳性者即为妊娠,定为妊娠第1天,依次计算妊娠天数.②取妊娠4d的小鼠20只随机抽签法分为2组,每组10只.对照组:双侧子宫角均注射5 μL正常兔血清IgG;实验组:左侧子宫角注射Survivin 1:80比例抗体5 μL,右侧子宫角正常兔血清IgG 5 μL对照.妊娠第8天剖腹取出子宫,大体观察并统计胚胎着床数.主要观察指标:①免疫组织化学检测Survivin在未孕及妊娠第2,3,4,5,6,7天各组小鼠子宫内膜的表达.②子宫角注入Survivin抗体,统计胚胎着床数.结果:①免疫组织化学检测妊娠组Survivin蛋白的表达明显高于未孕组(P＜0 05),且随着妊娠天数的增加,子宫内膜Survivin蛋白的表达逐渐增加,到孕第6天达到高峰,随后下降,但孕第7天仍明显高于未孕组(P＜0.05).②实验组左右侧子宫胚胎着床数分别为1.400 0±0.5164和6.400 0±1.075 0:对照组左右侧子宫胚胎着床数为6.500 0±1.0801和6.200 0±0.918 9;实验组注射抗体的左侧胚胎着床数较右侧明显下降(P＜0.05);对照组左右侧子宫胚胎着床数差异无显著性意义(P＞0.05).结论:Survivin在早孕小鼠子宫内膜持续表达,并参与胚胎的着床调控过程.
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比较脊髓损伤及制动后大鼠骨密度与生物力学变化的差异
背景:脊髓损伤及制动均可导致骨质疏松的发生.目的:建立胸髓横断大鼠动物模型,建立大鼠失用性萎缩模型,观察及比较大鼠胸髓损伤大鼠和失用性骨质疏松大鼠的骨密度及生物力学改变.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-08/11在解放军第四军医大学骨科研究所实验室完成.材料:将48只4月龄雌性大鼠分为3组:对照组(假手术组)、制动组、脊髓损伤组.方法:脊髓损伤组及对照组大鼠麻醉后行T10椎板切除,脊髓损伤组用锐刀横切脊髓,对照组则仅进行椎板切除术而不干预脊髓,制动组大鼠左下肢用小夹板固定后绷带悬吊,室温下分笼饲养,标准大鼠饲料,自由饮水、摄食.主要观察指标:术后3,6周检测大鼠腰4椎体、肱骨近端、股骨远端、骨盆骨密度及生物力学变化.结果:与对照组比较,术后3周,脊髓损伤组大鼠股骨远端骨密度显著下降(P＜0.05):术后6周,股骨远端、骨盆骨密度显著F降(P＜0.01,P＜0.05),两组肱骨近端、腰椎骨密度无明显差异.与对照组比较,术后3周,制动组大鼠股骨远端、腰椎骨密度较对照组下降,差异无显著性意义;术后6周,股骨远端、腰椎骨密度降低(P＜0 05).制动组与对照组肱骨近端、骨盆骨密度差异无显著性意义.术后6周,脊髓损伤组骨盆、股骨远端骨密度低于制动组(P＜0.05),腰椎骨密度高于制动组(P＜0.05).术后3周,脊髓损伤组及制动组大鼠腰椎、肱骨近端及骨盆大载荷、结构刚度与对照组差异无显著性意义.术后3,6周,脊髓损伤组股骨远端大载荷、结构刚度均低于对照组(P＜0.05,P＜0.01),肱骨近端及腰椎差异无显著性意义.结论:脊髓损伤及制动均可导致骨质疏松的发生,但骨密度及生物力学变化不同,即两种骨质疏松所发生的部位不同,即使同一部位发生骨质疏松,发生的程度也不相同.
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早期药膳饮食对烫伤大鼠肠黏膜Peyer's结T淋巴细胞及亚群的影响
背景:肠相关淋巴组织的组成部分Peyer's结是肠黏膜免疫系统的重要诱导部位,含有参与免疫应答的各种免疫细胞,如CD4+T细胞、CD8+T细胞、B细胞等.目的:观察早期药膳饮食对烫伤大鼠肠道肠黏膜Peyer's结T淋巴细胞及其亚群的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-04/2007-03在南昌大学一附属医院完成.材料:Wistar大鼠100只,随机分成药膳喂养组(n=30)、肉汤喂养组(n=30)、常规喂养组(n=30)、正常对照组(n=10).药膳成分:党参20 g、白术25 g、茯苓25 g、炙甘草15 g、黄芪20 g、薏苡仁20 g、瘦猪肉200 g.方法:药膳喂养组、肉汤喂养组、常规喂养组实施背部30%体表面积Ⅲ度烫伤,伤后早期分别给予药膳、肉汤和生理盐水,2 mL/次,2次,d.正常对照组实施37℃假伤.主要观察指标:伤后3,7,14 d检测大鼠肠黏膜Peyer's结T淋巴细胞及亚群.结果:伤后3,7 d,药膳喂养组、肉汤喂养组、常规喂养组Peyer's结淋巴细胞总数、CD3+淋巴细胞的百分比及总数、CD4+百分比及总数、CD8+细胞的百分比及总数较正常对照组明显减少(P＜0.05,P＜0.01),至14 d,药膳喂养组与正常对照组相比差异不显著.伤后3,7,14 d药膳喂养组CD3+淋巴细胞的百分比及总数、CD4+百分比及总数较肉汤喂养组、常规喂养组明显升高(P＜0.05).伤后3,7 d药膳喂养组Peyer's结CD8+细胞的百分比及总数较肉汤喂养组、常规喂养组明显F降(P＜0.05).结论:早期药膳饮食有利于肠道Peyer's结淋巴细胞的增生,并改善Peyer's结T淋巴细胞亚群的比例,从而改善烫伤大鼠肠道免疫功能.
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成体骨髓间充质干细胞生物学特性及在组织工程和再生医学中的作用
成体骨髓间充质干细胞可向其他组织分化,称为可塑性,在组织工程和再生医学的各个领域都进行着广泛的研究.虽然骨髓间充质的生物学特性、诱导分化、调控机制等研究已取得了许多成就,但其很多功能仍不被人所知,如是否存在间充质干细胞、是否具有分化特性、骨髓间充质干细胞和其他来源干细胞的区别等.文章介绍了骨髓间充质干细胞的来源和基本特征,并研究了骨髓间充质干细胞的生长、增殖、自我更新和分化,探讨了骨髓间充质干细胞的生理功能,展望了骨髓间充质干细胞在组织工程和再生医学中的作用.
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谷胱甘肽S-转移酶P1～105基因多态性与高原环境下人体运动能力的关系
背景:谷胱甘肽S-转移酶具有清除活性氧、提高机体抗氧化能力的作用.目的:分析谷胱甘肽S-转移酶P1～105基因多态性与高原环境下人体运动能力的关联性.设计、时间及地点:对照比较分析,于2007年在解放军体育进修学院完成.对象:实验组86名高原登山运动员为在高原环境下具有较强的作业能力的特定人群,对照组为解放军体育学院随机选取的90名健康学员.方法:采集86名高原登山运动员及90名健康学员的血样,提取基因组DNA,采用PCR-RFLP技术检测谷胱甘肽S-转移酶P1～105基因多态性,分别比较高原登山运动员与平原汉族对照人群间谷胱甘肽S-转移酶P1～105等位基因和基因型的分布.主要观察指标:谷胱甘肽S-转移酶P1～105基因型的分布.结果:共检测到谷胱甘肽S转移酶P1～105基因3种基因型:变异杂合型(A/G)、变异纯合型(G/G)、野生基因型(A/A).实验组谷胱甘肽S-转移酶P1～105的G等位基因、变异基因型(A/G+G/G)的频率皆明显低于对照组(P＜0.01).以变异基因型作为暴露因素,求得OR=2.19,95%CI=1.16～4.13,提示在高原环境下,与具有谷胱甘肽S-转移酶P1～105野生基因型人的运功能力比较,具有谷胱甘肽S-转移酶P1～105变异基因型人的运动能力下降了1.19倍.结论:谷胱甘肽S-转移酶P1～105基因多态性与高原环境下人体运动能力相关,野生基因型表现出明显的运动优势.
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用logisitic回归模型和负二项回归模型分析藏族人群亚健康状态的危险因素
背景:一般社区人群亚健康状态的研究少有报道,对于少数民族的研究更是少见.目的:用logisitic回归模型和负二项回归模型分析藏族人群亚健康状态的危险因素.设计、时间及地点:横断面调查于2007-09在四川省阿坝藏族羌族自治州松潘县完成.对象:1 791名藏族受试者均来自海拔3 000余米的四川省阿坝藏族羌族自治州东北部的松潘县,1 763人完成了亚健康状态量表.年龄10～80岁,平均27岁;男性受试者的比例为41.5%(731人).所有受试者对调查方案均知情同意.方法:采用分层二阶段整群抽样在四川省松潘县进行藏族人群亚健康状态调查,采用陈青山等制定的亚健康量表进行亚健康状态评定,分别用亚健康状态现患率、症状数及各维度的现患率反映人群的亚健康状况.主要观察指标:用多因素logistic回顾模型和负二项回归模型进行亚健康状态危险因素分析.结果:1 038名受试者拥有1项或1项以上的亚健康症状,亚健康状态的现患率为58.9%.量表的分半信度和内部一致性分别为0.765 8和0.815 4.logistic回归模型结果显示高龄(P=0.000 4)、女性(P＜0.000 1)、已婚(P=0.000 8)、脑力劳动(P=0.002 1)和吸烟(P＜0.000 1)是亚健康的主要危险因素.但是在负二项回归模型中,婚姻状态(P=0.068 9)和职业(P=0.139 8)未证实为危险因素.结论:生活在高海拔地区的藏族人群也有较高的亚健康状态患病情况,值得医学研究人员的进一步关注.此外,负二项回归模型应被推广用于亚健康状态及其危险因素的研究.
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某市农村居民类风湿性关节炎的危险因素分析
目的:分析影响类风湿性关节炎发病的危险因素.方法:采用多级整群抽样法,先从某市37个乡镇中随机抽取3个乡镇,对3个乡镇的全部常住居民进行类风湿性关节炎普查,类风湿性关节炎病例以县及县以上医院的诊断为准.在第一阶段调查发现的344名类风湿性关节炎患者中随机选择144人为病例组,同时选取在性别和年龄构成上与病例组相似的健康人群191人为对照组.调查项目主要包括性别、年龄、受教育程度、婚姻状况、感冒、鱼虾过敏、扁桃体切除、腮腺炎史、职业、劳动强度、外伤史、手术史、输血史、住房类型、居住环境潮湿、青春期前养猫或养狗、类风湿性关节炎或支气管哮喘或过敏性鼻炎家族史、口服避孕药、体质指数、吸烟、戒烟、饮酒、戒酒及饮茶等23个因素.结果:单因素分析结果显示,感冒、超重及肥胖、外伤史、支气管哮喘或过敏性鼻炎家族史、类风湿性关节炎家族史、饮茶、住平房和居住环境潮湿与类风湿性关节炎的关系有统计学意义.将单因素分析中的全部18个变量作为自变量,以是否患类风湿性关节炎作为应变量,采用后退法进行非条件Logistic回归分析,结果显示,感冒、支气管哮喘或过敏性鼻炎家族史、类风湿性关节炎家族史、饮茶、住平房、居住环境潮湿和超重及肥胖与类风湿性关节炎的联系有统计学意义.结论:农村居民的类风湿性关节炎主要与既往感冒、家族史、居住条件及生活习惯相关.
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广州市越秀区126例老年人膝关节骨性关节炎患病危险因素:与121例老年组的病例一对照分析
目的:通过调查越秀区老年人膝关节骨性关节炎的患病情况,分析老年性膝关节骨性关节炎的相关危险因素.方法:选择广州市越秀区采用美国风湿病协会1995年制定的标准确诊的126例膝关节骨性关节炎老年患者为病例组,121例非膝关节骨性关节炎老年患者为对照组,实施横断面现场调查.采用<骨性关节炎调查问卷>表,包括以下几个方面的调查:①一般情况:姓名、性别、年龄、身高、体质量、文化程度、家庭住址.②工作性质:职业分类、工作环境、膝关节是否经常负重.③曾居住环境(是否阴暗、潮湿).④遗传因素:骨关节炎家族史.⑤膝关节既往病史:外伤、骨病等.⑥其他内分泌疾病:肾病、糖尿病、甲状腺疾病等.采用非条件Logistic回归分析筛选出膝关节骨性关节炎的危险因素.结果:共收回完整问卷247份.参与分析的9个变量中,4个变量有统计学意义,包括:性别(OR=2.646,95%CI=1.021～6.861)、曾居住环境[潮湿(OR=5.792,95%CI=1.503～22.326)、阴暗(OR=5.593,95%CI=1.476～65.722)、潮湿+阴暗(OR=13.582,95%CI=2.123～86.910)]、关节经常负重(OR=18.091,95%CI=5.861～55.842)、膝关节既往史(OR=27.298,95%CI=7.990～93.268).而年龄、体质量指数、文化程度、家族史、其他内分泌疾病史与膝关节骨性关节炎不相关.结论:膝关节骨性关节炎发病受到性别、曾居住条件(潮湿、阴暗、潮湿+阴暗)、关节经常负重以及膝关节既往史的影响.
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长沙地区女性促卵泡刺激素水平与骨密度和骨质疏松患病率的关系
目的:调查中国女性年龄相关的血清促卵泡刺激素浓度及其与骨密度和骨质疏松症患病率之间的关系.方法:于2007-06/2008-06选择自长沙和附近地区20～82岁699名健康的中国女性,排除患有影响骨代谢疾病、服用影响骨代谢药物的个体.其中绝经前妇女464名和绝经后妇女235名,绝经年龄为41～59岁.受试者均知情同意并签定了书面协议书.抽空腹静脉血测定血清卵泡刺激素和黄体生成素浓度.用DXA仪测定腰椎、总髋部、前臂超远端骨密度,评价血清促卵泡刺激素与年龄、骨密度和患骨质疏松症风险的关系.结果:促卵泡刺激素约从40岁起随增龄而增加,到60岁又随增龄而下降.促卵泡刺激素与不同部位骨骼的骨密度呈显著负相关.在腰椎、总髋部、前臂超远端,促卵泡刺激素四分位数的骨质疏松症平均患病率分别为0.57%,0.43%,27.1%,30.9%.与一分位数和二分位数比较,四分位数的妇女骨质疏松症患病率和患病风险显著增加;与三分位数比较,处于四分位数的妇女骨质疏松症患病率和患病风险也显著增加,特别是在腰椎.结论:血清促卵泡刺激素水平与骨密度的变化呈负相关,和骨质疏松症的发生呈正相关.
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高原成年人的体育锻炼行为趋向
目的:调查分析高原成年人体育锻炼行为和体质的现状及发展趋势.方法:2000年和2005年在青海省全省范围内,分别对9 621名和11 859名20～59岁的成年人进行了体质监测评定和体育锻炼行为(体育锻炼的次数、时间、目的和运动项目等内容)的抽样调查,并将两次的调查结果依据性别、年龄、职业分为不同类群,进行比较分析.结果:调查结果表明青海高原成年人的体质达标率明显提高;高原成年人参加体育锻炼的人数比例呈增长的趋势,但体育锻炼次数和锻炼时间有所下降:成年人体育锻炼的目的和运动项目由单一向多样化发展.结论:随着社会经济发展和生活水平提高,高原成年人的体质状况在提高,而且对体育健身的认知和需求在增长.
