中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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艾滋病非CD4+ T细胞的免疫补偿机制与中医药治疗的关系
目的:从中医整体论角度揭示艾滋病非CD4+T细胞的免疫补偿机制以及艾灸强壮三穴促进整体免疫功能的作用.方法:根据中医整体论思想和系统自稳原理,对艾滋病患者临床表现与CD4+T细胞水平不完全呈正相关的现象和艾灸强壮三穴作用机制的现代免疫学研究结果进行分析,探讨非CD4+T细胞免疫补偿机制的组成要素及其与中医药治疗的关系,揭示其在整体免疫功能中的作用.结果:非CD4+T细胞免疫补偿机制的存在是艾滋病患者整体免疫功能的重要组成部分.用非CD4+T细胞免疫补偿机制能够解释艾滋病患者的临床表现与CD4+T细胞水平不完全呈正相关的现象和艾灸强壮三穴的促进整体免疫功能的原理.结论:重视非CD4+T细胞免疫补偿机制的作用并加强研究,是艾滋病防治的重要内容;提示中医药扶正治疗艾滋病,可能是通过提高艾滋病患者非CD4+T细胞免疫补偿机制所发挥的作用.
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脑卒中后肩关节半脱位的中西医结合治疗
目的:介绍脑卒中后肩关节半脱位的中西医治疗方法,为进一步探讨有效而简便的肩关节半脱位的治疗手段、预防并治疗脑卒中并发症提供借鉴.方法:将近年来康复治疗脑卒中后肩关节半脱位的研究文献进行综合述评,主要介绍脑卒中后肩关节半脱位的发病机制、康复治疗方法及作用机制,重点讨论康复治疗的优势.结果:脑卒中后肩关节半脱位的发生与病灶部位、肌肉瘫痪萎缩、稳固性降低和自身重力等因素有关,还可能与早期干预治疗及方式是否正确有关.常用的治疗和预防方法有正确的体位摆放、运动治疗、电刺激、针刺、手法治疗、外固定等.康复治疗可降低脑卒中瘫痪并发症和致残率,对提高患者的日常生活活动能力水平及改善生活质量有重要作用.结论:早期预防及康复治疗,能有效提高肩关节周围肌肉的张力,加强关节的稳定性,防止肩关节半脱位等并发症的发生.
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健身气功五禽戏的养生之道
目的:用多种研究方法去观照五禽戏养生之道,使广大群众知其所以然,以便更好的吸引和动员更多的群众投身健康、科学、文明的健身气功活动中去.方法:通过访谈传统体育养生方面的专家从中得到一些新观点,再加上走访听取了多位习练人群的心得体会以及自己对此的感悟,来获得思路上的启迪.而后查阅多学科资料来证明自己的观点.结果:①五禽戏是东汉名医华佗根据古代导引、吐纳之术,研究了虎、鹿、熊、猿、鸟的活动特点,并结合人体脏腑、经络和气血的功能所编成的一套具有民族风格的健身气功功法.②健身气功·五禽戏功法的调心、调气、调形的原理符合藏象学说,尤其调心到达一定程度与<庄子>中的"心斋"有同工异曲之妙.这里的"心"指的大脑,说明人的思维活动和情绪变化都能影响五脏六腑的功能."心斋"和"坐忘"是虚静工夫的两种方式,就其养生而言,它们的本质是一致的,都属于气功的调心内容.③健身气功·五禽戏功法创编吸收了传统功法的精髓,并结合中西医、体育以及相关科学为理论基础.任督脉、手三阴阳经等在其动作的巧妙运用却能用经络学说得到阐释.具体到五禽戏功法中,则体现在手型的多变性上,虎爪、鹿角、熊掌、猿钩、鸟翅握固等的运用能不同程度加强手三阴阳经的气血运行.结论:为继承和发扬中国传统文化,应充分挖掘健身气功文化中蕴涵的合理成分和当代价值,有助于满足不同人群多元化的体育健身需求;而五禽戏是传统体育项目,对其进行理论构建能丰富传统体育养生的学科建设,指导科学健身.
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太极拳运动对高脂血症患者血脂及脂蛋白代谢的影响
目的观察太极拳运动对高脂血症患者的治疗作用.方法于2005-09/2006-01在山东临沂师范学院选取中老年高脂血症患者60人进行测试.其中太极拳运动组30人,对照组30人.太极拳运动组进行为期20周的24式太极拳锻炼,在专业教练的带领下集体进行.锻炼方案如下:前6周为学习太极拳阶段,6～20周为运动干预阶段,5 d/周,50 min/d,准备活动时间10 min,太极拳锻炼时间30 min(连续打4套,每套需六七分钟),整理活动时间10 min.对照组按照平时的正常生活方式保持不变.测定两组实验前后三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A、载脂蛋白B含量.结果纳入受试者60人,均进入结果分析.20周太极拳锻炼后,太极拳运动组三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和动脉粥样硬化指数(低密度脂蛋白胆固醇/高密度脂蛋白胆固醇)均显著低于实验前和对照组[分别为(1.04±0.21),(1.42±0.21),(1.41±0.22)mmol/L;(5.17±0.20),(5.90±0.20),(5.97±0.21)mmol/L;(3.21±0.19),(3.86±0.22),(3.87±0.23)mmol/L;2.23±0.39,3.14±0.54,3.15±0.28;P＜0.01];高密度脂蛋白胆固醇显著高于实验前和对照组[分别为(1.91±0.14),(1.47±0.16),(1.47±0.18)mmol/L,P＜0.01];载脂蛋白A显著高于实验前和对照组[分别为(1.47±0.20),(1.26±0.21),(1.26±0.22)g/L,P＜0.05],而载脂蛋白B显著低于实验前和对照组[分别为(0.80±0.25),(1.02±0.20),(1.00±0.22)g/L,P＜0.05].结论太极拳锻炼可以降低患者的血脂,改善脂代谢,提示太极拳运动对预防和治疗高脂血症是十分有益的.
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对肩关节周围炎患者实施中医康复治疗的方法
目的:通过分析中医药防治肩关节周围炎(简称肩周炎)的方法,指导肩周炎患者的康复治疗.方法:归纳总结中医对肩周炎的辨证施治,以及饮食调养、药膳、中成药、验方、外治法、功能锻炼、日常保健等防治措施.结果:①按中医肩周炎可分为风寒湿型,治疗原则为祛风散寒,通络止痛;瘀滞型,治疗原则为活血化瘀,通络止痛;气血虚型,治疗原则为益气养血,祛风通络.②饮食调养包括葛根、鳝鱼、海马、甲鱼.③药膳有当归煮蛋、桑枝炖鸡、芪归炖鸡、归参羊肉汤、桂枝苡仁粥、仙茅五加粥、海马山甲酒、葛根黑豆酒、黄芪当归酒.④中成药有伸筋丹、风湿寒痛片、痹苦乃停片、痹隆清安片、昆明山海棠片、风痛安胶囊、祛风止痛胶囊.⑤验方包括玉竹汤、羌活汤、桂枝四物汤、黄芪桂枝汤、祛风宣痹汤、桑枝羌活饮、祛痰通痹饮.⑥外治法包括热熨法、外敷法、淋洗法、膏药法.⑦根据自身的情况可进行屈肘甩手、手指爬墙、体后拉手、展翅、后伸摸棘、梳头等交替功能锻炼.结论:中医药防治肩周炎有规范的诊断标准和防治措施,在肩周炎的治疗康复中发挥着重要的作用.
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血府逐瘀汤治疗抑郁性神经症的分层随机对照
目的观察中药方剂血府逐瘀汤治疗抑郁性神经症的疗效.方法选择2004-08/2006-01在河北省人民院中医科门诊及住院的抑郁性神经症患者68例,均符合CCMD-2-R中抑郁性神经症的诊断标准.采用分层随机分配方法将患者分为实验组和对照组,每组34例.实验组采用血府逐瘀汤合用氯丙咪嗪治疗,对照组单用氯丙咪嗪治疗,疗程均为8周.分别于治疗前和治疗后第2、4、8周末采用汉密顿抑郁量表评定疗效.疗效以汉密顿抑郁量表减分率(T)评定:T≥75%为痊愈,50%≤T＜75%为显效,25%≤T＜50%为有效,T＜25%为无效.结果治疗8周后,实验组患者的治疗有效率[(痊愈+显效+有效)/例数]高于对照组(u=2.297,P＜0.05).治疗第2、4、8周末,实验组患者汉密顿抑郁量表评分均低于对照组(t=2.09,3.90,5.58,P＜0.05).结论血府逐瘀汤合用氯丙咪嗪治疗抑郁性神经症疗效明显优于单用氯丙咪嗪治疗.
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针灸、微波配合盆底肌锻炼治疗脑卒中后尿失禁106例分析
目的:分析脑卒中后尿失禁患者尿动力学异常情况以及针灸、微波配合盆底肌锻炼治疗脑卒中后尿失禁的效果.方法:选择2004-07/2006-05在华中科技大学同济医学院附属中西医结合医院神经内科住院脑卒中后尿失禁患者106例,随机分为治疗组59例与对照组47例,对照组给予脑卒中常规治疗,治疗组在脑卒中常规治疗的基础上,给予针刺、艾灸以及微波配合盆底肌锻炼等综合治疗.分别于治疗前及治疗30 d后行尿动力学检查,分析膀胱尿道功能.结果:106例患者均进入结果分析.①两组患者常见的尿动力学异常为逼尿肌反射亢进、尿道外括约肌无抑制性松弛,治疗组占37%(22/59),对照组占41%(19/47),两组比较差异无显著性(P＞0.05).②脑卒中性质和病灶部位对患者尿动力学结果无显著影响(P＞0.05).③治疗组经综合治疗后尿动力学检查结果较治疗前明显改善[膀胱大收缩压:(5.16±2.04),(6.65±2.43)kPa;膀胱大容积:(363.50±194.14),(317.11±159.72)mL;尿道闭合压:(8.53±3.23),(5.23±2.17)kPa;膀胱充盈初始量:(174.73±105.32),(188.30±84.95)mL,P＜0.05].④治疗组显效率和有效率明显高于对照组(显效率:26%,53%;有效率:80%,71%,P＜0.05).结论:脑卒中后尿失禁患者尿动力学改变以逼尿肌反射亢进和尿道外括约肌无抑制性松弛为主;针刺、艾灸、微波配合盆底肌锻炼治疗脑卒中后尿失禁效果显著.
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影响股骨颈骨折预后的因素分析
应用计算机检索中国生物医学数据库及PubMed数据库1996/2006期间的相关文章,检索词为"股骨颈、骨折、femoralneckfracture",共有24篇文章符合纳入标准.研究表明,年龄对股骨颈骨折预后是一个重要的影响因素,随年龄的增加,骨折出现并发症的相对危险度增加;骨折部位及移位情况也是其影响因素,股骨颈骨折无移位者在骨折愈合、并发症及术后生活质量上都明显的优于有移位者,同时移位骨折血运破坏也较为严重头缺血性坏死率较高;股骨颈骨折后早期复位,有利于改善局部供血,减轻骨折本身对血管的损伤;影响股骨颈骨折手术治疗的重要因素首先是骨折复位的质量,其次是内固定术后骨折端的稳定性;股骨头的缺血性坏死与关节囊内压力升高是否存在关联及股骨颈骨折术后何时完全负重仍无定论.提高临床股骨颈骨折的治愈率及减少并发症的发生,要综合考虑内固定治疗股骨颈骨折预后的影响因素.
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温针配合康复训练治疗34例髌骨软化症:随机对照疗效观察
目的:观察温针配合康复训练对髌骨软化症患者疼痛及治疗效果的影响,并与口服非甾体止痛剂配合康复训练后的治疗效果进行比较.方法:①选取2004-09/2006-06成都市第一人民医院疼痛专科收治的64例髌骨软化症患者,均符合国家中医药管理局1994年<中医病证诊断疗效标准>的髌骨软化症诊断,患者对本实验均签署知情同意书.随机数字表法分为针刺组34例,药物对照组30例,两组患者在年龄、性别、病程及病情程度差异均无显著性意义(P＞0.05).②针刺组患者给予温针治疗,1次/d,5次为1个疗程,疗程间隔2 d,共治疗4个疗程.主穴:内膝眼、外膝眼、鹤顶.配穴:大腿软痛加扶兔;膝内侧痛加血海;膝外侧痛加梁丘;痰湿痹阻型加丰隆、三阴交;肝肾阴虚型加太溪.药物对照组患者口服非甾体止痛剂美洛昔康(商品名:赛可斯,四川三精升和制药有限公司生产,批号060701)7.5 mg/d,疗程同针刺组.③两组患者每天针刺/给药后均进行康复训练,包括股四头肌等长收缩练习、蹲马步练习、夹球练习,各练习项目均重复10次为1组,5组/次,3次/d.④疼痛积分标准使用0～10分表示疼痛程度,分数越高疼痛越重.髌骨软化症疗效判定标准:治愈为膝部无疼痛,活动无不适,髌骨研磨试验阴性;好转为上下楼梯及半蹲时轻度疼痛,髌骨研磨试验(±);未愈为症状无改善,"软腿"及"假交锁"情况加重,X射线检查发现髌骨周围及软骨下有骨刺形成.结果:64例髌骨软化症患者均进入结果分析.①两组患者治疗后疼痛积分改善情况的比较:与治疗前比较,治疗后两组疼痛积分均明显降低[(8.0±1.0),(5.0±2.7)分;(8.0±3.0),(3.0±2.0)分;P＜0.05或0.01];与药物对照组比较,治疗后针刺组疼痛积分降低幅度更为明显(P＜0.05).②两组患者临床疗效的比较:针刺组总有效率显著高于药物对照组(91.2%,50.0%,P＜0.01).结论:温针配合康复训练与口服非甾体止痛剂配合康复训练均可缓解疼痛,但温灸配合康复训练能更好的缓解疼痛,改善治疗效果.
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藏药哇夏嘎对实验性高血脂大鼠血脂及血液流变学指标的影响
实验于2006-01/05在西北民族大学医学院人体解剖学教研室和兰州大学人体解剖学与组织胚胎学研究所完成.选用普通级Wistar大鼠35只,按随机数字表法分为2组,正常对照组10只,实验组25只.实验组大鼠利用高脂饮食连续灌胃45 d,建立高脂血症模型,随机抽取10只作为高血脂模型组,测定血脂判断模型是否建立成功.在模型成功的基础上,将其余15只大鼠作为哇夏嘎治疗组,用藏药哇夏嘎(由甘肃省甘南州医药公司提供)连续灌胃45 d,用量为30g/(kg·d).高血脂模型组用等量注射用水代替药物.给药45 d后,通过主动脉采血,分析检测各组大鼠的血脂水平及血液流变学指标的变化情况.造模过程中5只大鼠死亡,进入结果分析共30只,正常对照组、高血脂模型组及哇夏嘎治疗组各10只.连续给药45 d后,哇夏嘎治疗组大鼠的血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇含量均显著低于高血脂模型组[(0.98±0.38,0.39±0.21,0.31±0.29;1.32±0.27,0.69±0.16,0.41±0.17)mmol/L(t=0.76～3.47,P＜0.05)];全血低、高、中切黏度均显著低于高血脂模型组[(12.28±3.16,7.09±1.27,4.98±0.83;20.20±2.19,11.60±1.83,9.03±0.60) mPa·s(t=7.03～14.60,P＜0.05)].提示藏药哇夏嘎能够降低实验性高脂血症大鼠的血脂水平,并能够降低血液黏度,防止血小板聚集,改善血流.
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在流动血液中蜂胶黄酮对血小板活性的抑制作用
目录:观察蜂胶黄酮对流动状态下血小板活性的影响.方法:实验于2005-12/2006-09在泰山医学院生命科学研究所完成.采用体外灌注法复制血管内膜创伤模型,正常血液流经受损膜表面后,在切应力为1 000 s-1时,测量血小板黏附率.以0.1g/L的黄酮磷酸盐溶液作实验组,加入25 mmol/L的磷酸盐溶液作阴性对照组,同浓度的阿魏酸磷酸盐溶液作阳性对照组.结果:①血小板在基质膜表面的黏附面积百分比:实验组血小板黏附率低于阴性对照组[(10.498±2.548)%,(18.792±4.169)%,F=34.72,P＜0.01];而实验组与阳性对照组[(9.933±2.647)%]比较,差异不明显(P＞0.05).②血小板在基质膜表面的黏附状况:当血液流经盖玻片后,可观察到血小板黏附于受损膜表面.阴性对照组血小板分布密度较大,有聚集倾向.实验组血小板分布稀疏,密度较均匀.结论:蜂胶黄酮能抑制血小板的活化,降低其在受损膜表面的黏附活性.
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针刺干预金黄地鼠视交叉上核γ-氨基丁酸的表达变化
实验于2005-10/2006-05在成都中医药大学针灸推拿学院和四川大学华西基础医学与法医学院组织胚胎学和神经生物学教研室完成.选用健康雄性叙利亚金黄地鼠10只,按随机抽签法分为电针组和捆绑对照组,每组5只.动物经驯化后进入自由运转状态,在恒定黑暗第3天于近似昼夜时间9:00分别给予电针(固定动物后,选百会、长强穴,电压1～3 V,频率10～20 Hz,15 min)和捆绑(固定动物,不予其他处理)刺激,2 h后用免疫组织化学方法检测各组金黄地鼠视交叉上核内γ-氨基丁酸免疫阳性细胞并对此进行计数.10只动物全部进入结果分析,无脱失.与捆绑对照组比较,电针组动物视交叉上核单位面积内γ-氨基丁酸阳性神经元计数增加(109.450±11.445,66.520±21.119,t=3.9963,P＜0.05).提示于近似昼夜时间9:00进行针刺可使视交叉上核γ-氨基丁酸表达增加,说明在主观白天针刺可影响视交叉上核γ-氨基丁酸的表达.
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安心定悸汤改善快速性心律失常患者心率、血压及血液流变指标的作用
目的:观察安心定悸汤结合西药治疗快速性心律失常的疗效和安全性,并与单纯西药治疗比较.方法:选择湖南中医药大学第二附属医院2004-04/2006-04收治的快速性心律失常患者90例,采用数字表法,按2:1比例随机分为两组:①对照组30例,给予普罗帕酮,150 mg/次,隔8 h服用1次,连续服用2个月.②治疗组60例:在对照组基础上加服安心定悸汤(丹参15 g,当归15 g,黄芪30 g,党参30 g,麦冬10 g,五味子10 g,栝楼20 g,薤白12 g,半夏12 g,桂枝10 g),每日一剂,分早晚温服,连续服用2个月.用药前后各做一次心电图和24 h Holter检查,检测血液流变学,评估临床症状积分(症状越重评分越高)和疗效,并监测心率、血压及药物不良反应.结果:90例患者全部进入结果分析.①临床症状积分:治疗组治疗后显著低于治疗前和对照组治疗后(8.36±1.08,32.45±10.24,18.98±6.32,P＜0.05).②24 h平均心率:治疗组治疗后显著低于治疗前和对照组治疗后[(88.11±10.04),(103.14±10.01),(96.73±9.77)次/min,P＜0.05].③血压:两组治疗前后变化均不显著.④血液流变学指标:治疗组治疗后血浆黏度、纤维蛋白原、红细胞比容、血小板黏度率均较治疗前显著改善(P＜0.05),对照组治疗前后无变化.⑤疗效:治疗组总有效率高于对照组(88%,67%,P＜0.05).⑥副反应:治疗组未发现,对照组有8例出现轻微头痛,6例恶心,1例呕吐.结论:安心定悸汤结合普罗帕酮能改善心律失常患者的心率及血液流变学指标,效果优于单用普罗帕酮,且安全、副反应少.
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耳穴压丸对健康老年人血清丙二醛和超氧化物歧化酶的影响
目的:观察耳穴压丸对人体内丙二醛和超氧化物歧化酶的影响,探讨耳穴压丸对体内自由基是否有清除作用.方法:实验于2005-06/08在潍坊医学院校医院及解剖学教研室完成.对象为60～81岁的健康老年人,共32人.取耳穴心、肺、肝、脾、肾、内分泌、缘中、皮质下.常规消毒,用胶布将王不留行籽贴压固定于上述耳穴,嘱受试者每日自行按压4次,历时60d.在受试前、后分别取静脉血3 mL分离血清,测定丙二醛和超氧化物歧化酶的含量,以受试前后进行自身对照观察.结果:32例受试者有3例因身体不适而中断测试,29例进入结果分析.①血清丙二醛含量:受试前高于受试后[(4.86±0.59),(4.49±0.55)μmol/L,t=2.470 3,P＜0.05];②超氧化物歧化酶活性:受试后高于受试前[(108.37±20.17),(96.61±18.52)NU/mL,t=2.312 7,P＜0.05).结论:耳穴压丸能降低丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶活性,对自由基有明显的清除作用,可作为抗衰老的一种简便可行的方法.
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高原脱适应者肺通气功能变化及4种中药对其的影响
为观察高原脱适应者肺通气功能的变化及4种中药对其的影响,选择驻守海拔5 170 m 1年的57名健康青年,在他们返回平原(海拔1 400m)前1周检测其肺通气功能,然后将其随机分为银杏叶制剂组,复方红景天组,刺五加组,复方党参组和对照组5组,从返回平原前5 d开始分别口服银杏叶制剂、复方红景天胶囊、刺五加片、复方党参胶囊和炒面胶囊,直至返回平原后1周停药,停药当天再次检测其肺通气功能.结果显示与其在高原时比较,返回平原后1周,肺功能指标中,除第1秒用力呼气容量占用力呼气容量的百分率(1秒率)无显著性改变外,其他各项指标均降低(P＜0.05,P＜0.01).复方党参组与对照组比较,用力肺活量、第1秒用力呼气容量、1秒率、大呼气中段流量增高,复方党参组1秒用力呼气容量高于银杏叶制剂组和刺五加组,1秒率高于复方红景天组和刺五加组(P＜0.05).复方红景天组大呼气中段流量高于对照组(P＜0.001).提示海拔5 170 m驻防1年的青年返回平原1周时肺通气功能较在高原时降低,复方党参和复方红景天能显著改善高原脱适应者的肺通气功能,使其逐步适应平原环境.
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腹泻康对脾虚泄泻证大鼠免疫和消化吸收功能的影响
目的:通过观察腹泻康对脾虚泄泻证模型大鼠一般状态、免疫、消化吸收功能的影响,探讨其对脾虚泄泻证的防治作用.方法:实验于2006-06/08在军事医学科学院放射与辐射医学研究所药理与毒理研究室完成.健康SD大鼠70只,随机分成7组,即对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶0.5g/kg组、葛根芩连丸0.75g/kg组、腹泻康1.6,0.8,0.4g/kg剂量组,每组10只,雌雄各半.造模:按20 mL/kg灌服20%番泻叶浸剂,1次/d,连续7 d.在灌服3 d后,禁食不禁水32 h,由肛门(深入8 cm)注入80g/L的乙酸0.5 mL,捏紧大鼠肛门,倒提20s.造模同时每天在给20%番泻叶浸剂4 h后给予相应药物治疗7 d,第8天检测大鼠稀便率(稀便粪粒数/总粪粒数);胸腺指数(胸腺质量/体质量)、脾脏指数(脾脏质量/体质量);血清D-木糖含量、淀粉酶活性、琥珀酸脱氢酶比活性.结果:实验大鼠70只均进入结果分析.①大鼠一般症状:给予药物治疗的各组均较对照组精神好转,食欲增强,稀便减少.②大鼠稀便率:给予药物治疗的各组均较模型组稀便率明显降低,其中葛根芩连丸0.75 g/kg组、腹泻康1.6g/kg剂量组效果显著.③大鼠体质量:实验后模型组、柳氮磺胺吡啶0.5g/kg组、葛根芩连丸0.75g/kg组、腹泻康1.6,0.8,0.4g/kg剂量组均较对照组体质量明显下降,且这6组大鼠实验后体质量均较实验前降低.但高剂量组在5,6 d和低剂量组在6 d与对照组体质量比较差异无显著性.④大鼠胸腺指数、脾脏指数:给予药物治疗的各组均较模型组有不同程度改善.⑤大鼠血清D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脱氢酶比活性:模型组均较对照组明显下降(P＜0.01),柳氮磺胺吡啶0.5g/kg组、葛根芩连丸0.75g/kg组和腹泻康1.6,0.8,0.4g/kg剂量组上述指标均有不同程度的改善.结论:腹泻康对脾虚泄泻证大鼠的免疫和消化吸收功能有明显的防治作用,其中腹泻康1.6g/kg剂量组效果显著.
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茶多酚对离体大鼠尾动脉血管环收缩性能的作用
目的:观察来源于植物茶叶中的茶多酚对离体大鼠尾动脉血管在正常、氯化钾诱导、去甲肾上腺素诱导、无钙环境等状态下收缩性能的影响.方法:实验于2004-10/2005-03在大连医科大学中心实验室进行.①选取28只健康SD大鼠用于尾动脉血管环的制备.茶多酚静脉注射液(10g/L,临用前以生理盐水稀释)与溶媒均由大连理工大学李楠教授馈赠.重酒石酸去甲肾上腺素(上海禾丰制药有限公司产品,批号3E20003).②28只大鼠乙醚麻醉,仰位固定,尾腹侧正中纵切,迅速取出一段动脉血管,制备动脉环,共制28个.动脉环一侧固定于含20mL K-H液的浴槽底部,另一侧与LW-10型医用张力传感器和BI-410生物机能实验系统相连.血管平滑肌收缩通过张力换能器以电压的形式记录于生物机能实验系统.降低率(%)=(1-给药后振幅平均值/给药前振幅平均值)×100%.③正常离体血管平滑肌收缩实验:将茶多酚静脉注射液以生理盐水稀释,分为0.5×10-6,1.0×10-6,2.0×10-6,4.0×10-6,8.0×10-6,1.6×10-5g/L浓度组,另设立溶媒对照组.本项实验选取6个动脉环,每个均用于不同茶多酚浓度及溶媒的检测,每做完一种浓度后,血管环用保养液清洗进行平衡,再做下一种浓度.动脉环制备及系统安装如上,血管平衡1 h后,各茶多酚浓度组分别加入对应浓度的茶多酚0.2 mL,溶媒对照组加入溶媒0.2 mL.④氯化钾诱导离体血管收缩实验:将茶多酚静脉注射液以生理盐水稀释,分为2.0×10-6,4.0×10-6,8.0×10-6,1:6×10-5,3.2×10-5g/L浓度组,另设立溶媒对照组.本项实验选取8个动脉环,血管平衡1 h后,加入氯化钾预收缩,5 min后换液,重复1次,当收缩达到高时,各茶多酚浓度组分别加入对应浓度的茶多酚0.2 mL,溶媒对照组加入溶媒0.2 mL.⑤去甲肾上腺素诱导离体血管收缩实验:分组情况与氯化钾诱导离体血管收缩实验相同,但本项实验选取7个动脉环,血管平衡1 h后,加入去甲肾上腺素预收缩,5 min后换液,重复1次,当收缩达到高时,各茶多酚浓度组分别加入对应浓度的茶多酚0.2 mL,溶媒对照组加入溶媒0.2 mL.⑥无钙液及正常钙液中去甲肾上腺素诱导离体血管收缩实验:将茶多酚静脉注射液以生理盐水稀释,分为8.0×10-6,1.6×10-5g/L浓度组,另设立溶媒对照组.本项实验选取8个动脉环,血管平衡1 h后,无钙K-H液平衡2次,15 min/次,各茶多酚浓度组分别加入对应浓度的茶多酚0.2mL,溶媒对照组加入溶媒0.2mL,3 min后加入去甲肾上腺素,待收缩波幅达大时加入氯化钙.结果:①不同浓度茶多酚对正常离体血管平滑肌收缩的影响:与给药前及溶媒对照组比较,茶多酚各浓度组均可明显抑制正常大鼠尾动脉收缩力(P均＜0.001),且茶多酚浓度在0.5×10-6～8.0×10-6范围内降低率呈明显的剂量依赖性(r=0.963 3).②不同浓度茶多酚对氯化钾所致离体血管收缩的影响:与给药前及溶媒对照组比较,茶多酚各浓度组均可明显抑制氯化钾引起的血管收缩(P均＜0.001),且茶多酚浓度在2.0×10-6～8.0×10-6范围内降低率呈明显的剂量依赖性(r=0.985 3).③不同浓度茶多酚对去甲肾上腺素所致离体血管收缩的影响:与给药前及溶媒对照组比较,茶多酚各浓度组均可明显抑制去甲肾上腺素引起的血管收缩(P＜0.001或0.005),且茶多酚浓度在2.0×10-6～1.6×10-5范围内降低率呈明显的剂量依赖性(r=0.990 8).④茶多酚对去甲肾上腺素在无钙液及正常钙液所致离体血管收缩的影响:与给药前及溶媒对照组比较,无论在无钙液还是正常钙液中,茶多酚8.0×10-6,1.6×10-5g/L浓度组均可明显抑制去甲肾上腺素引起的血管收缩(P＜0.001或0.01).结论:离体太鼠尾动脉血管在正常状态、氯化钾诱导、去甲肾上腺素诱导、无钙环境等条件下,茶多酚均可抑制其收缩,且在一定浓度范围内具有显著的量-效关系.同时茶多酚抑制去甲肾上腺素引起的血管收缩可能是通过减少内钙释放与外钙内流产生.
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拳参水提取物的镇痛作用
背景:拳参别名草河车,具有清热、镇惊、理湿、消肿的功效,也有报道称其水提取物有抗心律失常作用、中枢抑制作用,其镇痛需进一步研究.目的:观察拳参水提取物的镇痛作用,并与吗啡和氨基比林进行比较.设计:完全随机数字表法,随机对照动物实验.单位:赣南医学院药理教研室.材料:实验于2004-03/05在赣南医学院科研中心实验室完成.①选取健康成年昆明种小鼠150只用于以下4个独立实验.②药品:拳参水提取物由沈阳药科大学植化教研室提供(批号:2003061001);盐酸吗啡注射液(沈阳第一制药厂,批号000305);盐酸纳洛酮注射液(盐侨(湖南)制药有限公司,批号20021109).方法:①拳参水提取物对醋酸引起小鼠扭体反应的实验:取小鼠40只,随机数字表法分为4组:生理盐水组,拳参水提取物0.10,0.15m/g组,氨基比林组,每组10只;分别腹腔注射0.02 mL/g生理盐水,0.10,0.15 mg/g拳参水提取物水溶液,0.10 mg/g氨基比林溶液.注药后15 min腹腔注射6g/L冰醋酸0.01 mL/g,记录15 min内各组小鼠扭体反应次数.②拳参水提取物对小鼠热板法致痛作用的实验:取雌性小鼠40只,随机数字表法分为4组:生理盐水组,0.10,0.15 mg/g拳参水提取物组,吗啡组,每组10只,分别腹腔注射生理盐水、拳参水提取物(剂量同前)水溶液,0.01 mg/g吗啡溶液.用GJ-8402型热板测痛仪,致痛温度调节至(55.0±0.5)℃,以舔后足作为痛反应指标,痛阈潜伏期均不超过60 s.给药后15,30,60 min各测1次痛觉反应.用热板法测定给药后15,30,60min的痛觉反应.③纳洛酮对吗啡、拳参水提取物对小鼠热板法致痛作用的实验:取雌性小鼠30只,采用随机数字表法分为3组:生理盐水组,纳洛酮+吗啡组,纳洛酮+拳参水提取物组,每组10只,分别腹腔注射0.02 mL/g生理盐水,0.004 mg/g纳洛酮溶液+0.01 mg/g吗啡溶液,0.004 mg/g纳洛酮溶液+0.15 mg/g拳参水提取物,热板法测定给药后15,30,60min的痛觉反应.④拳参水提取物对电刺激致痛的实验:小鼠40只,随机数字表法分为4组,10只/组,分别腹腔注射0.02 mL/g生理盐水,0.10,0.15 mg/g拳参水提取物,1g/L吗啡,于给药后20,35,50,70 min重复电刺激,电刺激法测定痛觉反应.主要观察指标:①小鼠扭体反应次数.②热板法致小鼠痛觉反应的时间.③电刺激法致小鼠镇痛率.结果:共选取健康成年昆明种小鼠150只用于4个独立实验,全部进入结果分析.①小鼠扭体反应次数:拳参水提取物0.10,0.15mg/g组及氨基比林组小鼠给药后15min扭体反应次数均少于生理盐水组[(15.1±11.1),(8.0±6.5),(6.3±3.2),(54.1±20.2)次,t=3.532～3.681,＜0.01].②热板法致小鼠痛觉反应的时间:拳参水提取物0.10,0.15 mg/g组和吗啡组小鼠给药后15,30,60 min痛觉反应的时间均长于生理盐水组(t=2.676～3.683,P＜0.05～0.01).③纳洛酮+拳参水提取物组小鼠给药后各时间点痛觉反应的时间均长于生理盐水组(t=2.676～3.563,P＜0.05～0.01),但纳洛酮+吗啡组与生理盐水组相接近(P＞0.05).④电刺激法致小鼠镇痛率:拳参水提取物0.10,0.15 mg/g组及吗啡组给药后20,35,50,70 min镇痛率均高于生理盐水组(t=3.455～3.634,＜0.01).结论:①拳参水提取物具有明显的镇痛作用,其镇痛强度与氨基比林、吗啡相当.②阿片受体拮抗剂纳洛酮可拮抗吗啡的镇痛作用,但不能拮抗拳参水提取物的镇痛作用,这表明拳参水提取物的镇痛作用并非通过激动阿片受体而发挥.
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麻黄对去卵巢肥胖大鼠体质量、血脂、血糖及激素水平的影响
背景:近年来,中药麻黄用于肥胖症的治疗并有一定的效果,但麻黄对围绝经期妇女的肥胖是否有效有待研究.目的:观察口服麻黄水煎剂对去卵巢肥胖大鼠体质量、血脂、血糖及激素水平的影响.设计:完全随机分组设计,对照实验.单位:兰州大学基础医学院生理学和心理学研究所.材料:实验于2006-02/06在甘肃省新药临床前研究重点实验室和兰州大学基础医学院生理学和心理学研究所实验室完成.选用健康雌性SD大鼠44只,随机分为4组,每组11只,分别为假手术组,去卵巢组,雌激素替代治疗组和麻黄组.方法:①大鼠用氯胺酮(110 mg/kg)麻醉,除假手术组外全部行双侧去卵巢术.假手术组进行同样的手术过程,但不切除卵巢.②假手术组和去卵巢组大鼠术后每天皮下注射芝麻油(0.2 mL/只),持续到实验结束.③雌激素替代治疗组大鼠术后每天皮下注射雌激素(1 mg/kg),持续到实验结束.④麻黄组大鼠术后自然口服1%浓度的麻黄水煎剂,到第6天浓度逐渐增至8%,持续到实验结束.⑤每天测定大鼠的摄食量,每隔10天测定大鼠的体质量.⑥实验结束时,所有实验动物禁食12 h后,颈动脉取血测定血清指标.同时测定体质量和体长计算李氏指数[(g)×103/体长(cm)].主要观察指标:①不同时间点各组大鼠体质量及李氏指数.②不同时间点各组大鼠摄食量结果.③大鼠血脂和血糖水平.④不同组别大鼠血清雌激素、孕激素和胰岛素水平. 结果:大鼠44只全部进入结果分析.①不同时间点各组大鼠体质量及李氏指数结果:去卵巢组大鼠实验开始第20,30,40,50天体质量分别为(256.4±14.3),(271.3±16.1),(276.4±12.7),(285.7±24.2)g,均大于假手术组大鼠相应时间点[(226.5±11.5),(241.8±12.6),(243.1±13.5),(251.1±22.4)g,P＜0.05～0.01],李氏指数大于假手术组(317.2±13.5,280.4±11.2,P＜0.01).雌激素替代治疗组实验开始第40,50天体质量分别为(243.7±14.8),(246.2±11.9)g,低于去卵巢组相应时间点(P＜0.05～0.01),李氏指数为289.9±13.5,小于去卵巢组(P＜0.01).麻黄组大鼠实验开始第40,50天体质量分别为(245.4±14.1),(252.4±14.9)g,李氏指数为294.4±11.0,小于去卵巢组(P＜0.05).②不同时间点各组大鼠摄食量结果:麻黄组大鼠实验开始第30,40,50天摄食量分别为(17.8±2.4),(22.3±3.9),(26.1±3.5)g/d,与去卵巢组比减少[(25.9±4.7),(28.5±5.3),(32.8±5.5)g/d,P＜0.05].③大鼠血脂和血糖水平:去卵巢组大鼠血清三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量分别为(1.73±0.32),(1.45±0.50),(0.78±0.19)mmol/L,高于假手术组[(0.94±0.29),(1.05±0.30),(0.08±0.11)mmol/L,P＜0.01].雌激素替代治疗后三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量及血糖浓度分别为(1.10±0.34),(1.14±0.30),(0.17±0.05),(5.88±1.21)mmol/L,低于去卵巢组(P＜0.05～0.01),高密度脂蛋白胆固醇含量高于去卵巢组[(1.11±0.31),(0.88±0.21)mmol/L,P＜0.05].麻黄组三酰甘油、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇含量分别为(0.97±0.16),(1.11±0.20),(0.59±0.07),(0.45±0.061)mmol/L,低与去卵巢组(P＜0.05～0.01).④不同组别大鼠血清雌激素、孕激素和胰岛素水平:去卵巢组大鼠雌激素、孕激素水平分别为(17.09±9.00)ng/L,(28.51±7.99)μg/L,低于假手术组[(58.69±12.11)ng/L,(62.73±10.93)μg/L,P＜0.01],胰岛素含量高于假手术组[(31.74±6.69),(23.75±6.66)mU/L,P＜0.01].雌激素替代治疗组及和麻黄组雌激素水平为(36.03±8.83),(30.18±8.61)ng/L,高于去卵巢组(P＜0.05～0.01),胰岛素水平分别为(21.34±4.57),(24.86±6.20)mU/L,低于去卵巢组(P＜0.05～0.01),麻黄组孕激素水平为(17.68±6.19)μg/L,低于去卵巢组(P＜0.01).结论:麻黄能明显降低去卵巢肥胖大鼠的体质量,降低血脂和胰岛素水平,增加血中雌激素水平.
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参附注射液对大鼠肠缺血再灌注损伤和修复时肠上皮细胞的保护作用
背景:细胞凋亡在肠缺血再灌注损伤和修复中起主要作用,参附注射液对肠缺血再灌注时肠上皮细胞凋亡的影响有待观察.目的:分析肠上皮细胞凋亡与肠缺血再灌注损伤和修复特征的关系.设计:随机对照动物实验.单位:湖北省咸宁市中心医院普外科及武汉大学人民医院普外科.材料:实验于2005-03/08在咸宁市中心医院中心实验室完成,选择54只健康雄性大鼠,体质量200～250 g,购自武汉大学医学院动物实验中心.方法:随机摸球法将大鼠分为对照组6只,肠缺血再灌注组24只及参附处理组24只.①麻醉大鼠,分离其肠系膜上动脉,肠缺血再灌注组、参附处理组用无损伤血管夹阻断肠系膜上动脉血流1 h,再灌注1,24,72 h,参附处理组于阻断前30 min经静脉输注参附注射液8 mL/(kg·h),20mL/(kg·d),由人参和黑付子组成(雅安三九药液公司,批号:030302).对照组不阻断肠系膜上动脉血流,对照组与肠缺血再灌注组于阻断前30 min经静脉输注等量生理盐水,整个实验过程对大鼠进行面罩给氧.②肠缺血再灌注组和参附处理组分别于缺血后1 h、再灌注1,24,72 h取材,对照组于造模后取材,每组各6只.观察各组大鼠肠黏膜组织病理学改变(采用下列评分系统:0分,绒毛和腺体正常;1分部分绒毛顶端上皮轻度受损;2分,上皮下腺体轻度受损;3分,上皮下间隙扩大,毛细血管充血;4分,上皮与固有层中度分离,腺体受损;5分,部分绒毛顶端脱落;6分,绒毛明显脱落;7分,固有层绒毛脱落;8分,固有层开始消化分解;9分,出血、溃疡形成)和有丝分裂活性.③采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口未端标记实验结合激光共聚焦显微镜观察小肠黏膜上皮细胞凋亡情况,测定细胞凋亡指数,即每张切片随机取10个高位视野,每100个细胞中凋亡阳性细胞数.④在苏木精-伊红染色的肠黏膜上皮细胞间观察有丝分裂相,10个相邻肠黏膜上皮细胞间具有有丝分裂相的细胞数作为有丝分裂活性指数.主要观察指标:各组大鼠组肠黏膜组织病理学改变,细胞凋亡指数和有丝分裂活性的测定.结果:纳入大鼠54只全部进入结果分析.①参附处理组大鼠肠缺血1 h、再灌注1,24 h黏膜组织病理学改变评分分别为[(0.65±0.35),(3.87±0.86),(0.65±0.35)分,低于肠缺血-再灌注组[(7.11±1.01),(8.05±1.34),(1.53±0.48)分,P＜0.05].②参附处理组大鼠肠缺血1 h、再灌注1,24,72 h黏膜上皮细胞凋亡指数分别为(17.24±7.05),(24.20±9.87),(11.49±4.71),(6.02±2.16)个,低于肠缺血-再灌注组[(51.09±13.76),(54.89±15.58),(23.54±9.64),(12.47±5.52)个,P＜0.05],缺血1 h、再灌注1 h有丝分裂活性分别为(10.37±2.03),(11.72±2.07)个,高于肠缺血-再灌注组[(8.24±1.69),(9.95±1.93)个,P＜0.05].结论:参附注射液能够降低肠黏膜上皮细胞凋亡,并增强肠黏膜上皮细胞有丝分裂活性,从而促进肠黏膜损伤的修复.
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五种不同中药经典方剂影响各型慢性阻塞性肺疾病大鼠气道病理改变的特点
目的:通过观察慢性阻塞性肺疾病大鼠治疗前后气道病理的改变,分析中医药治疗慢性阻塞性肺疾病的可能机制.方法:实验于2005-04/2005-10山东中医药大学附属医院中心实验室进行.①健康雄性SPF级Wistar大鼠264只,随机数字表法分为以下11组:空白对照组,寒痰蕴肺模型组和治疗组,痰热阻肺模型组和治疗组,肺气虚模型组和治疗组,脾气虚模型组和治疗组,肾气虚模型组和治疗组,每组24只.采用改良烟熏加气管滴加脂多糖方法复制慢性阻塞性肺疾病模型,并根据分型,分别给予不同干预,进行二次造模.②第30天起各治疗组分别灌服相应证型的预治疗中药合剂,连续14 d.寒痰蕴肺治疗组灌服小青龙汤煎剂(麻黄9 g,桂枝6 g,白芍9 g,干姜3 g,五味子3 g,半夏9 g,甘草6 g,细辛3 g,水煎浓缩为浓度0.6g/mL的浓缩液),痰热阻肺治疗组大鼠灌服麻杏石甘汤煎剂(麻黄5 g,杏仁9 g,甘草6 g,石膏18 g,水煎浓缩为浓度0.475g/mL的浓缩液),肺气虚治疗组灌服玉屏风散煎剂(防风3 g,黄芪3 g,白术6 g,水煎浓缩为浓度0.15 g/mL的浓缩液),脾气虚治疗组灌服六君子汤煎剂(人参9 g,白术9 g,茯苓9 g,炙甘草6 g,半夏12 g,陈皮9 g,水煎浓缩为浓度0.675 g/mL的浓缩液),肾气虚治疗组灌服人参蛤蚧散煎剂(蛤蚧6 g,杏仁15 g,甘草15 g,人参6 g,茯苓6 g,贝母6 g,桑白皮6 g,知母6 g,除蛤蚧外其他药物水煎浓缩为浓度0.75 g/mL的浓缩液,蛤蚧研末兑入),2 mL/d,相当于成人剂量的7.5倍(饮片由山东中医药大学附属医院中药房提供).模型组大鼠每天给与2mL生理盐水灌胃.空白对照组不做任何干预,相同室内环境下自由饮食饮水.③光镜下观察大鼠小气道病理改变,电镜下观察大鼠气管纤毛的变化,并按照小气道病变评估方法和标准进行分析描述.结果:实验过程中,各造模组均有大鼠死亡,终进入结果分析242只.①正常对照组中、小支气管黏膜上皮细胞排列整齐,肺泡结构连续,肺泡壁完整,且未见明显渗出.模型组气道黏膜充血水肿,上皮细胞变性坏死糜烂脱落,肺内细支气管、终末细支气管管腔及周围表现出不同程度的慢性炎性细胞浸润,管壁周围平滑肌和纤维细胞增生、断裂;肺泡管、肺泡囊及肺泡明显扩大,间隔变薄、断裂,肺泡扩大融合;小动脉血管壁增厚,平滑肌增生,管腔变小,周围炎性细胞浸润.②光镜、电镜下观察治疗组与模型组相比纤毛粘连倒伏、上皮细胞变性坏死以及炎细胞浸润等现象表现均明显减轻,肺大泡数量减少.结论:各经典方剂通过辨证论治均可以缓解大鼠肺内细支气管、终末细支气管管腔及周围表现炎性细胞浸润及分泌物阻塞,恢复纤毛粘连、倒伏、脱落,改善气道高反应性和气道重塑,对于慢性阻塞性肺疾病气道的修复和炎症的缓解作用.
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中药黄芩中金属元素与总黄酮含量测定
背景:中药疗效确切而副作用小,其原因除了自身的药理作用,也与中药中的微量元素有关.目的:测定中药中药黄芩中金属元素和总黄酮含量.设计:重复测量实验.单位:吉林医药学院,吉林医药学院附属医院.材料:黄芩,市售.芦丁标准品(F 20050930,国药集团化学试剂有限公司).方法:实验于2006-04/07在吉林医药学院中药微量元素研究室进行.选取黄芩粉碎、干燥至恒重,采用硝酸-高氯酸湿法消化,具体方法为:用分析天平准确称量1.000 0 g,每种平行取3份,置于25 mL锥形瓶中,加浓硝酸10mL,封口过夜;次日分别加入浓硝酸10 mL、高氯酸5 mL,于电热板上缓慢加热,当剩下1 mL左右时再加浓硝酸20 mL、高氯酸5 mL,继续消化,至溶液呈无色透明近干为止.用3%硝酸稀释溶解,转移至50mL容量瓶中,定容至刻度,混匀待测.用原子吸收分光光度计测定其宏量元素钠、钙、镁、钾和微量元素铁、锰、铜、锌等无机元素的含量,并采用醇提法,提取黄芩中总黄酮,用紫外分光光度法测定药物中总黄酮的含量.主要观察指标:观察黄芩中金属元素的含量及总黄酮含量.结果:中药黄芩中8种金属元素K、Ca、Na、Mg、Zn、Cu、Mn、Fe及总黄酮含量的测定结果如下:钾元素含量为(1 098.5168±2.731 9)μg/g;钙元素含量(6 561.5526±78.716 7)μg/g,;钠元素含量为(9 530.4912±44.1766)μg/g;镁元素含量为(6 555.442 8±36.860 3)μg/g;铁元素含量为(512.075 0±5.135 9)μg/g;铜元素含量为(2.905 0±0.134 2)μg,/g;锌元素含量为(30.081 0±0.740 0)μg/g;锰元素含量为(12.409 2±0.247 7)μg/g;总黄酮含量为(17.496 2±2.134)mg/g.结论:测定结果显示,黄芩中含有丰富的金属元素和黄酮类化合物.
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小鼠灌胃赤芍单味药和桃红四物汤后体内芍药苷的水平比较
背景:桃红四物汤由桃仁、红花、当归、赤芍、生地、川芎组成.芍药苷为赤芍单味药和中药复方桃红四物汤的主要有效成分之一,具有活血化瘀,抗急性心肌缺血的作用.目的:比较小鼠灌胃赤芍和桃红四物汤后血清中芍药苷的质量浓度.设计:随机对比观察.单位:河北北方学院药学系,河北北方学院基础医学部.材料:实验于2005-02/06在河北北方学院药学系第一实验室完成.选用18～22 g昆明种小鼠80只,雌雄兼有,清洁级,购自北京中国科学院遗传与发育生物学研究所实验动物中心.6种中药桃仁、红花、当归、赤芍、生地、川芎均购自张家口中医研究院.方法:①取8只小鼠空腹12 h后分离空白血清,于空白血清中加芍药苷对照品溶液,乙腈沉淀蛋白,离心分离,取上清液20μL,得回归方程.②将72只昆明种小鼠按随机数字表法分为赤芍组和桃红四物汤组,每组36只.空腹12 h后,分别灌胃赤芍提取物及桃红四物汤提取物,以芍药苷计300 mg/kg,灌胃后于15,30,60,90,120,180 min取血1 mL(每组每个时间点各6只),制备血清样品.比较小鼠灌胃赤芍提取物与桃红四物汤提取物后血清中芍药苷达峰时间和达峰浓度的差异.高效液相色谱法测定芍药苷含量,色谱条件为:色谱柱YWG-C18(250×4.6 mm,10 μm),流动相甲醇-0.05 mol/L KH2PO4(38∶62);流速1.0 mL/min;检测波长230 nm;柱温25℃.主要观察指标:赤芍和桃红四物汤在小鼠血清中芍药苷的质量浓度.结果:72只小鼠用于赤芍和桃红四物汤实验,全部进入结果分析,无脱失.①色谱分离结果:芍药苷与血清中其他成分能很好分离,在5.40～646.0 μg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为93.6%,低监测浓度1.08 mg/L.②灌胃不同时间两组小鼠血清中芍药苷的质量浓度比较:赤芍组和桃红四物汤组分别在灌胃60,30 min后达峰值(46.82±5.29),(36.27±5.72)mg/L,桃红四物汤组的峰值浓度低于赤芍组(P＜0.01).结论:复方配伍后,血清中芍药苷浓度明显降低,提示配伍组方后其他化学成分可能促进了芍药苷的代谢转化,从而降低了血清中原形药的浓度.
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高迁移率族蛋白B1及肿瘤坏死因子α在慢性阻塞性肺疾病患者血清中的表达及中药银杏叶的影响
目的:观察银杏叶片对慢性阻塞性肺疾病患者肺功能及血清中高迁移率族蛋白B1和肿瘤坏死因子α的影响.方法:将郫县中医院2005/2006收治的慢性阻塞性肺疾病患者122例按就诊顺序分为2组:①对照组60例,给予去除病因、抗感染、康复锻炼等常规治疗.②治疗组62例,在对照组基础上予银杏叶片80 mg口服,3次/d.3个月为整个疗程.观察两组患者治疗前后肺功能变化、血液流变学变化及血清中高迁移率族蛋白B1和肿瘤坏死因子α表达变化.另选20例健康人为正常组.结果:142例受试者均进入结果分析.①肿瘤坏死因子α的质量浓度:治疗后治疗组显著低于对照组[(6.12±0.56),(10.42±0.99)ng/L,P＜0.01],但仍高于正常组[(3.12±0.54)ng/L,P＜0.01].②高迁移率族蛋白B1表达:慢性阻塞性肺疾病患者较正常组高,治疗组治疗后低于同期对照组.③肺功能:治疗后治疗组第1秒用力呼气量及第1秒用力呼气容积占肺活量的百分率高于同期对照组[(1.73±0.13),(1.49±0.16)L;(63.5±4.3)%,(56.9±4.8)%;P均＜0.05],平均肺动脉也低于对照组[(4.01±0.51),(4.63±0.57)kPa,P＜0.05].④血液流变学指标:治疗后治疗组全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数及红细胞压积显著降低,低于同期对照组(P＜0.05).结论:慢性阻塞性肺疾病患者血清中高迁移率族蛋白B1和肿瘤坏死因子α水平显著上升,银杏叶片可改善患者肺通气功能,改善血液流变学状况并降低高迁移率族蛋白B1和肿瘤坏死因子α水平.
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富铬中药制剂和富铬井水对四氧嘧啶糖尿病大鼠模型各种生化指标的影响
目的:观察富铬中药制剂和富铬井水对四氧嘧啶糖尿病大鼠模型血糖及脑、肝抗氧化能力变化、血清各种生化指标的影响,分析铬与糖尿病的关系.方法:实验于2006-07-04/29在右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室进行.选用清洁级Wistar大白鼠40只,雄雌不拘,鼠龄60 d,以随机数字表法分成4组,即含铬井水组、富铬中药组、模型组、正常组,每组10只.含铬井水组给予含铬井水,每笼5只大鼠上午150 mL,下午150 mL,自由饮用;富铬中药组用富铬中药制剂(商品名舒糖宝,由荔枝、沙田柚、番石榴等果类提取制成,富含铬元素),按每鼠2mL,加到自来水瓶中,自由饮用每天饮完;模型组和正常组自来水自由饮用.1周后,分别收集尿液,测定各鼠每天尿量、蛋白和尿糖.测定造模前、成模后和治疗结束时血糖含量.连续治疗2周后,麻醉下处死大鼠,取大脑、肝脏在冷冻条件下匀浆,用生理盐水制成100g/L匀浆,检测血清尿素、丙氨酸氨基转移酶、三酰甘油、总胆固醇、肌酐,脑、肝匀浆超氧阴离子自由基、丙二醛、谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶含量,比较组间差异.结果:全部大鼠进入结果分析.①含铬井水组、富铬中药组血糖较治疗前明显下降(P＜0.001),模型组下降不明显(P＞0.05).②含铬井水组血清尿素、肌酐含量高于其他各组(P＜0.05～0.01);含铬井水组、富铬中药组脑超氧阴离子自由基清除率高于正常组和模型组,含铬井水组、富铬中药组、正常组肝超氧阴离子自由基清除率、肝谷胱甘肽含量均高于模型组,差异有显著性意义(P＜0.05～0.01).③含铬井水组、富铬中药组、模型组肝丙二醛含量均高于正常组,以模型组高(P＜0.01);含铬井水组、富铬中药组、正常组肝谷胱甘肽过氧化物酶低于模型组(P＜0.01),含铬井水组、富铬中药组、正常组3组差异无显著性意义(P＞0.05);④富铬中药组大鼠尿量明显低于模型组(P＜0.05),与正常组差异无显著性意义(P＞0.05);各组血清丙氨酸氨基转移酶活力差异无显著性意义(P＞0.05);正常组尿糖含量明显低于其他3组(P＜0.01).⑤正常组三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、脑丙二醛含量明显低于其他3组(P＜0.05～0.01),正常组脑谷胱甘肽明显高于其他3组(P＜0.01).⑥治疗药物富铬中药制剂、富铬井水中铬元素含量明显高于当地自来水和其他井水(P＜0.001).结论:富铬中药制剂和矿区某井水含丰富铬元素,两者均可明显降低四氧嘧啶糖尿病大鼠模型血糖、三酰甘油水平,提高脑、肝超氧阴离子自由基清除力和抗氧化能力.铬的作用可能是富铬中药制剂的降糖机制之一.
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橙汁与巧克力载体铁剂改善缺铁性贫血的实验
背景:缺铁性贫血是全世界发病率高的营养缺乏性疾病之一,其中婴幼儿为易发人群之首.缺铁性贫血已成为目前急待解决的为重要的营养问题之一.目的:观察巧克力载体铁剂加橙汁对缺铁性贫血模型大鼠的复健作用.设计:随机对照动物实验.单位:南方医科大学公共卫生与热带医学学院营养卫生实验室.材料:实验于2006-03/06在南方医科大学公卫学院营养卫生实验室完成.选用健康清洁级SD大鼠60只,由南方医科大学动物中心提供(许可证号:2002-009 2005A047).方法:①缺铁性贫血模型建立:在60只大鼠中随机数字表法抽取20只(雌雄各半)作为对照组,其余40只为模型组.对照组食常规鼠饲料,饮自来水;模型组采用AOAC改良的低铁饲料配方辅以尾静脉放血建立缺铁性贫血模型.喂养3周后,模型组平均血红蛋白浓度降至90g/L左右,提示模型建立成功.两组大鼠分别按随机数字表法处死10只(雌雄各半).实验前及实验3周后称大鼠体质量,测其血红蛋白浓度(氰化高铁血红蛋白法)、红细胞计数(直接法)、血清铁(微粒子免疫发光法及配套试剂盒)及血清转铁蛋白受体(ELISA法及配套试剂盒)浓度.②恢复实验:对照组余下的10只大鼠作为正常对照组;喂常规鼠饲料,饮自来水.将模型组余下的30只大鼠按随机数字表法分为3组,每组10只,雌雄各半,分别为模型对照组、硫酸亚铁组及巧克力橙汁组.模型对照组每日以蒸馏水灌胃;硫酸亚铁组每日以硫酸亚铁溶液灌胃;巧克力橙汁组每日以巧克力载体铁剂加橙汁灌胃.其中后两组灌胃液的含铁量均为6mg/(kg·d).干预40 d后,终止实验.测大鼠血红蛋白浓度、红细胞计数、血清铁、血清转铁蛋白受体含量及细胞浆蛋白质的顺乌头酸酶活性(原子吸收分光光度法).并计算巧克力载体铁剂加橙汁的生物利用率.主要观察指标:①各组大鼠实验前及造模成功后的血红蛋白含量、红细胞计数、血清铁、血清转铁蛋白受体含量.②各组大鼠恢复实验前及实验40d后的血红蛋白含量、红细胞计数、血清铁、血清转铁蛋白受体含量及肝细胞浆蛋白质顺乌头酸酶活性.③巧克力载体铁剂加橙汁的相对生物利用率.结果:60只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①各组大鼠造模成功后的血液指标比较:模型组大鼠的血红蛋白含量、红细胞计数、血清铁含量均显著低于对照组(P＜0.01)、血清转铁蛋白受体含量高于对照组(P＜0.01).②各组大鼠恢复实验前及实验40d后的血液指标及肝细胞浆蛋白质顺乌头酸酶活性比较:干预40 d后硫酸亚铁组及巧克力橙汁组大鼠的血红蛋白浓度、红细胞计数、血清铁含量均高于模型对照组(P＜0.01);而血清转铁蛋白受体含量低于模型对照组(P＜0.01).干预40d后硫酸亚铁组及巧克力橙汁组的顺乌头酸酶活性高于恢复实验前(P＜0.01).③巧克力载体铁剂加橙汁的相对生物利用率:以硫酸亚铁的生物利用率为100%,巧克力载体铁剂加橙汁的相对生物利用率(106.7%)明显增加.结论:巧克力载体铁剂加橙汁有明显改善缺铁性贫血的功能,并且吸收良好,可用于缺铁性贫血的治疗.其生物利用率高、味道好且较好的利用了食物之间的互补作用,是目前营养学和食品生产领域研究的热点.
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木犀草素抑制支气管哮喘气道重塑的作用
目的:观察中药木犀草素对哮喘小鼠气道重塑的抑制作用并探讨其可能机制.方法:实验于2006-01/04在南京医科大学呼吸病研究室完成.SPF级雄性BALB/c小鼠32只,体质量18～22 g,随机数字表法分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、木犀草素组,每组8只.卵蛋白致敏反复雾化吸入共8周,建立慢性哮喘模型,每次雾化前30 min,正常对照组、哮喘模型组生理盐水灌胃,地塞米松组、木犀草素组分别使用地塞米松及木犀草素进行干预.观察支气管肺泡灌洗液中白细胞介素5和γ-干扰素水平的变化.对肺组织切片行苏木精-伊红染色,借助图像分析软件测量基底膜周径、平滑肌面积、管壁面积,计算出支气管管壁厚度和平滑肌厚度.结果:纳入小鼠32只,均进入结果分析.①经过反复抗原激发,哮喘模型组肺泡灌洗液中白细胞介素5水平明显高于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[(50.7±2.9),(16.1±1.2),(26.8±1.5),(25.9±2.6)ng/L,P＜0.05].②γ-干扰素水平明显低于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[(38.1±3.3),(64.2±3.5),(58.2±4.2),(54.3±2.4)ng/L,P＜0.05].③哮喘模型组支气管管壁厚度和平滑肌厚度明显高于正常对照组、地塞米松组和木犀草素组[管壁厚度:(17.1±1.6),(12.7±1.1),(14.3±1.1),(14.0±1.2)μm;平滑肌厚度:(6.0±0.5),(4.5±0.4),(5.0±0.5),(5.2±0.6)μm,P＜0.05].结论:木犀草素可抑制气道壁的增厚和平滑肌增殖,减轻气道重塑.
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苦豆子总碱对大鼠实验性结肠炎CD4+CD25+,CD8+CD28-表达的影响
目的:观察苦豆子总碱对实验性结肠炎大鼠的外周血和结肠组织中调节性T细胞CD4+CD25+,CD8+CD28-表达的影响.方法:实验于2006-03/08在南方医科大学实验室进行.①分组:将72只SD大鼠数字表法随机分成正常对照组,模型组,5-氨基水杨酸组,苦豆子15,30,60mg/kg组共6组,每组12只.②造模:除正常对照组外,其他5组采用三硝基苯磺酸灌肠法制备结肠炎大鼠模型,正常对照组给予等量生理盐水灌肠.③给药:造模第2天开始灌胃给药,2 mL/只,1次/d.5-氨基水杨酸组灌胃5-氨基水杨酸400 mg/kg,苦豆子15,30,60mg/kg组灌胃酸苦豆子总碱15,30,60 mg/kg,其他2组灌等量生理盐水.④取材:在第1周和第3周各组分别取6只大鼠处死,测定结肠黏膜组织和外周血中CD4+CD25+,CD8+CD28-的表达水平,观察苦豆子总碱对模型大鼠急慢性期T细胞亚群的影响.结果:72只大鼠进入结果分析.①建模第1周:模型组结肠内T细胞亚群CD4+CD25+,CD4+CD25+/CD25-,CD8+CD28-及CD8+CD28-/CD28+高于正常对照组(P＜0.05,0.01),苦豆子各剂量组数据虽低于模型组,但经统计学处理后差异不显著(P＞0.05).②建模第3周:模型组大鼠外周血中的CD8+CD28-和CD8+CD28-/CD28+的表达高于正常对照组和苦豆子30,60 mg/kg组[CD8+CD28-:(11.3±1.3)%,(5.4±2.2)%,(5.8±3.2)%,(6.0±4.2)%;CD8+CD28-/CD28+:(1.2±0.8)%,(0.4±0.1)%,(0.5±0.2)%,(0.5±0.4)%;P＜0.05,0.01];结肠组织中的CD8+CD28-和CD8+CD28-/CD28+的表达也高于正常对照组和苦豆子30,60 mg/kg组[CD8+CD28-:(17.4±4.2)%,(3.8±4.5)%,(3.9±4.0)%,(4.2±3.6)%;CD8+CD28-/CD28+:(1.8±0.3)%,(0.7±0.3)%,(0.7±0.2)%,(0.7±0.3)%;P＜0.05,0.01].结论:苦豆子总碱30,60 mg/kg能下调实验性结肠炎大鼠慢性期高表达的CD8+CD28-T细胞.
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消可宁对高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的调控效应
背景:中药对早期糖尿病肾病有较好的防治作用,这一作用是基于中药有效成分的多样性而作用于糖尿病肾病不同靶点所引起的.目的:观察消可宁对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增生的影响,并探讨其可能的作用机制.设计:对照观察.单位:南京医科大学第一附属医院内分泌科.材料:实验于2003-07/2004-05在南京医科大学第一附属医院内分泌代谢研究中心细胞培养研究室完成.大鼠系膜细胞株HBZY-1:购自武汉大学中国典型培养物保藏中心.方法:系膜细胞按说明进行传代培养备用.①不同刺激浓度分组:高糖+消可宁组(消可宁分别取20.0,40.0,60.0,80.0,120.0,200.0g/L);正常糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为5.6 mmol/L;高糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为30 mmol/L,分别刺激72 h进行观察.不同刺激时间分组:正常糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为5.6 mmol/L;高糖对照组,细胞液中葡萄糖浓度为30 mmol/L;高糖+消可宁组,细胞液中葡萄糖浓度为30 mmol/L,消可宁浓度为60g/L;3组分别在刺激24,48,72 h给予观察.②将配置好的细胞悬液放入96孔培养板,每孔加200μL.培养板放置体积分数为0.05 CO2,37℃孵箱24 h后,取出弃上清,加入各组含不同药物及浓度的细胞液,每孔200 μL.将96孔板放入37℃含体积分数为0.05的CO2空气和100%湿度培养箱中孵育.不同刺激浓度组别于72 h后分别向板孔中加20 μL 4-甲基偶氮四唑蓝(5g/L),不同刺激时间组别于24,48,72 h后分别向板孔中加20 μL4-甲基偶氮四唑蓝(5g/L),之后均在37℃培养箱中温育4 h,置镜下观察4-甲基偶氮四唑蓝掺入细胞内,吸出上清,加入150 μL二甲基亚砜使用甲醇溶解,用平板摇床摇匀振荡30 s,于酶标仪492 nm波长读数,并记录吸光度值.主要观察指标:不同培养时间及不同消可宁培养浓度下系膜细胞增殖情况(吸光度值).结果:①不同刺激时间各组系膜细胞增殖的情况:高糖对照组刺激24,48,72 h系膜细胞吸光度值分别为0.685±0.010,0.750±0.087,0.659±0.018,高于正常糖对照组(0.586±0.054,0.598±0.040,0.527±0.047,P＜0.05),高糖对照组及正常糖对照组葡萄糖刺激系膜细胞48 h吸光度值高于24 h(P＜0.05),刺激72 h吸光度值低于48 h,(P＜0.05).高糖+消可宁组药物刺激72 h后系膜细胞吸光度值为0.538±0.023,低于高糖对照组(P＜0.05).②不同浓度消可宁刺激系膜细胞增生情况:消可宁自浓度为60.0 g/L起,可明显的阻止高糖对系膜细胞的过度刺激作用,并随着浓度的增加,这种作用逐渐增强,但过高的浓度(120.0 g/L)则出现细胞脱落死亡,极高的药物浓度(200.0g g/L)则不见存活的细胞.结论:高糖培养的系膜细胞在消可宁刺激72 h后表现出较强的抑制系膜细胞增殖的作用,在一定范围内呈剂量依赖的方式,但过高的药物浓度又表现出很强的细胞毒性.
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羊睾丸提取液对小鼠受损睾丸支持细胞一氧化氮合酶活性的影响
背景:大量研究证明,一氧化氮合酶/一氧化氮不仅对维持睾丸支持细胞正常功能起重要作用,而且影响精子的发生、活动及受精能力.目的:观察羊睾丸提取液对重金属铅致损小鼠睾丸支持细胞一氧化氮合酶活性的影响.设计:随机对照动物实验.单位:吉林医药学院组织胚胎学教研室.材料:实验于2004-03/2005-08在吉林医药学院组织胚胎学实验室(解放军总后勤部重点实验室)完成.选用健康昆明种雄性小鼠30只,按随机数字表法分为3组,即对照组、睾丸损伤模型组和羊睾丸提取液组,每组10只.方法:睾丸损伤模型组和羊睾丸提取液组小鼠给予100g/L醋酸铅0.2 mL/(只·d),5次/周,连续2周,停药1周.羊睾丸提取液组同时腹部皮下注射羊睾丸提取液0.5 mL/(只·d).对照组给予与实验组溶剂等量的重蒸馏水.染毒期满禁食12 h后,称体质量后断头处死,解剖取出双侧睾丸,立即称质量,甲醛固定后切片,应用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸-黄递酶组织化学方法结合显微图像分析,观察各组小鼠睾丸支持细胞的一氧化氮合酶活性变化.主要观察指标:染毒期满后各组小鼠的体质量、双侧睾丸质量及睾丸支持细胞一氧化氮合酶吸光度值.结果:30只小鼠全部进入结果分析,无脱失.①染毒期满后羊睾丸提取液组小鼠的体质量、双侧睾丸质量及一氧化氮合酶A值均显著高于睾丸损伤模型组[(22.47±3.49)g,(0.113±0.021)g,0.236±0.020;(19.13±3.46)g,(0.089±0.017)g,0.146±0.023 (t=2.151～3.314,P＜0.05～0.01)].②睾丸损伤模型组睾丸一氧化氮合酶阳性支持细胞肿胀变性;羊睾丸提取液组的一氧化氮合酶阳性支持细胞形态接近对照组.结论:羊睾丸提取液可以提高重金属铅致损小鼠睾丸支持细胞的一氧化氮合酶活性,对睾丸损伤有一定的修复和保护作用,可为临床治疗男性不育提供新思路.
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运动结合补充葛根素干预糖尿病大鼠一氧化氮及一氧化氮合酶的变化
目的:分析有氧运动结合补充葛根素对链脲佐菌素所致糖尿病大鼠血清及肝脏中的一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性的影响.方法:实验于2005-08/2006-01在江西师范大学体育学院完成.①选取8周龄雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机数字表法分为5组:正常对照组、模型对照组、运动组、葛根素组、运动+葛根素组,12只/组.②除正常对照组外,其余各组均喂以高脂饲料,腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型.血糖值≥14.7 mmol/L且尿糖为++～卌者确定为造模成功.正常对照组仅以普通饲料喂养,腹腔注射等体积0.1 mmol/L的枸椽酸盐缓冲液.③造模后,运动组进行跑台训练,跑台坡度为0°,每天以10～15 m/s的速度运动30 min,共训练8周.葛根素组每天按500mg/kg体质量给予葛根素灌胃,共8周.运动+葛根素组跑台训练的同时给予葛根素灌胃.正常对照组、模型对照组不进行任何干预.各组均以普通饲料喂养.④分别于造模后第3天、造模后第8周末对各组大鼠尾静脉取血测定空腹血糖.造模后第8周末,各组大鼠乙醚麻醉,心脏取血,离心取上层无溶血血清,硝酸还原酶法测定一氧化氮含量.取新鲜肝脏组织1 g,用40 mmol/L的磷酸钾缓冲液制成匀浆,离心取上清检测一氧化氮合酶活性.结果:共54只大鼠进入结果分析.①空腹血糖检测结果:造模后第3天～第8周末,各模型组空腹血糖值均明显高于正常对照组(P＜0.01).与模型对照组比较,造模后第3天葛根素组、运动组、运动+葛根素组空腹血糖值无明显变化[(18.3±4.7),(18.6±3.0),(18.9±4.6),(19.1±2.9)mmol/L,P＞0.05],第8周末均不同程度下降,尤以运动+葛根素组明显[(22.3±4.2),(9.4±2.0)mmol/L,P＜0.01].②造模后各组大鼠血清中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的比较:与模型对照组比较,运动组、葛根素组一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性均明显降低(P＜0.01或0.05),运动+葛根素组降低的幅度尤为显著[(58.58±8.97),(30.80±14.80)μmol/L;(2.0±0.23),(0.92±0.13)μkat/L;P均＜0.01].③造模后各组大鼠肝脏组织中一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性的比较:与模型对照组比较,运动组、葛根素组、运动+葛根素组一氧化氮合酶活性略有下降,但差异无显著性意义[(0.26±0.02),(0.23±0.03),(0.21±0.01),(0.19±0.03)μkat/L,P＞0.05];运动组、葛根素组一氧化氮含量均明显降低[(4.21±0.83),(2.86±0.64),(3.39±0.86)μmol/L,P＜0.05],运动+葛根素组降低至(1.75±0.31)μmol/L,差异尤为显著(P＜0.01).结论:有氧运动结合补充葛根素,能够有效降低糖尿病大鼠血清及脏肝中一氧化氮含量及一氧化氮合酶的活性.
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天麻钩藤饮对偏头痛肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质的影响
目的:利用双向凝胶电泳和质谱技术,分析天麻钩藤饮治疗前后偏头痛肝阳上亢证大鼠下丘脑的蛋白质表达的差异.方法:实验于2005-03/2006-04在中南大学湘雅医院中西医结合研究所、湘雅医学院肿瘤免疫与蛋白质组学实验室和卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室进行.①取SD大鼠20只,用附子汤连续灌胃21 d复制肝阳上亢证动物模型,复制成功后给大鼠皮下注射硝酸甘油注射剂10 mg/kg制备大鼠实验性偏头痛模型.②造模成功后将大鼠随机分为模型组和治疗组2组,每组10只.模型组于造模第22天处死;治疗组自第22天起灌服天麻钩藤饮(由天麻、钩藤、石决明、黄芩、泽兰、白芥子组成,中南大学湘雅医院中药房提供)10 mL/(kg·d),连续14 d,然后处死,分离出下丘脑.③通过对下丘脑组织蛋白质的提取,经双向电泳,Pdquest软件分析,进行蛋白质点原位酶解及质谱分析.结果:20只大鼠进入结果分析.①天麻钩藤饮治疗前后大鼠的总蛋白质的分布模式非常相似,以pI4～8,Mr(20～75)×103范围的蛋白质斑点分布多.经PDQuest 7.0软件分析后得出,在相同条件下识别的蛋白质斑点数分别为模型组(443±25)个,治疗组(530±27)个.②用肉眼可区分9个表达上调和下调的蛋白质斑点,将这9个蛋白质斑点进行酶解和质谱分析,所得结果在网上搜寻,其中有5个点的蛋白质与之匹配.结论:经天麻钩藤饮治疗后偏头痛肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质的表达上具有差异,而所鉴定的这5个蛋白质可能与天麻钩藤饮的治疗机制有关.
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江浙蝮蛇毒纤溶酶的生化和药理性质特征
背景:蝰亚科、蝮亚科和眼镜蛇科等蛇毒中存在着一类能直接溶解纤维蛋白(原)的酶,称为纤维蛋白(原)溶酶(纤溶酶),可做为溶解在心肌梗死、中风等期间形成的血栓的抗栓药物.目的:分离纯化江浙蝮蛇毒纤溶酶,并分析其部分生物化学和药理性质.设计:对照观察实验.单位:广西医科大学蛇毒研究所.材料:实验于2003-07/2005-06在广西医科大学蛇毒研究所完成.昆明种小鼠,体质量18～25 g,平均(20±2)g,鼠龄三四个月,由广西医科大学实验动物中心提供.蛇毒冻干粉由广西医科大学蛇毒研究所提供.方法:应用DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换柱和HiPrep Sephacryl S100柱分离纯化纤溶酶,以高效液相色谱仪和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测纯度、相对分子质量,应用等电聚焦电泳测定等电点,然后测定氨基酸组分及部分药理性质.主要观察指标:纤溶酶相对分子质量、等电点和氨基酸组成,抑制剂对纤溶酶的作用,出血活性实验,纤溶酶对家兔体内抗凝活性的作用.结果:纳入30只鼠和12只兔全部进入结果分析.分离得到相对分子质量为59 100,等电点为4.98,SDS-PAGE为一条带,高效液相色谱分析为单一峰的纤溶酶.该组分属于金属蛋白酶类.氨基酸组成分析表明它含较多的酸性氨基酸.有微弱的出血毒性.具有较强且持久的溶栓效果.结论:分离纯化得到了一种有微弱出血毒,具有较强抗凝活性的单一组分的酸性金属蛋白酶.
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天麻钩藤饮对高血压肝阳上亢证大鼠下丘脑差异蛋白质表达的影响
目的:通过观察服用天麻钩藤饮后高血压肝阳上亢证大鼠下丘脑的蛋白质的改变,从蛋白质组学角度探讨天麻钩藤饮的降血压和改善肝阳上亢证症状的机制.方法:实验于2005-10/2006-06在中南大学湘雅医院完成.①动物与中药:自发性高血压大鼠20只,完全随机(随机排列表法)分为治疗组及对照组各10只;正常SD大鼠10只(正常组).附子汤:由60g单味制附子组成,先将药物浸泡30 min,煎煮两次后再将药液合并浓缩为含生药0.1g/mL.天麻钩藤饮:天麻15 g,钩藤15 g,石决明20 g,黄芩10 g,杜仲10 g,牛膝10 g.石决明先煎20 min,天麻后下;煎煮两次后再将药液合并浓缩为含生药0.1 g/mL.②高血压肝阳上亢证模型的复制:所有动物同时喂养,治疗组及对照组连续灌服附子汤共21 d,复制成高血压肝阳上亢证模型(收缩压明显增高,饮水量增加,性情变得更易激怒为造模成功).③对照组自第22天起改为连续灌服蒸馏水14 d,治疗组自第22天起改为连续灌服天麻钩藤饮14 d,均于第36天处死.正常组大鼠,连续灌服蒸馏水35 d,于第36天处死.④用固相pH梯度双向凝胶电泳分离各组大鼠下丘脑的总蛋白质,经考马斯亮兰染色,PDQuest 7.0软件分析.结果:30只大鼠均进入结果分析.①治疗后治疗组大鼠的血压明显下降,饮水量减少,性情变得温和.②大鼠的下丘脑蛋白质图像匹配率达94%～100%,且重复性较好,其蛋白质主要分布在等电点4～8,相对分子质量14 400～75 000.治疗后有67个蛋白质点表达上升2倍及以上,有19个蛋白质点表达下降2倍及以上.结论:天麻钩藤饮治疗后高血压肝阳上亢证大鼠血压降低、症状改善,这可能与其下丘脑蛋白质的改变有关.
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丹参对全脑缺血后神经元PTEN表达的保护机制
目的:探讨丹参对大鼠全脑缺血再灌注后PTEN蛋白表达的影响及其神经保护机制.方法:实验于2005-03/10在解放军第三军医大学大坪医院外研所实验室进行.清洁级健康成年雄性SD大鼠90只,利用随机数字表将动物分为缺血再灌组18只;生理盐水组18只;丹参治疗组54只,丹参治疗组又分为3.0,10.0,15.0g/kg 3个亚组,每组6只.①丹参治疗组和生理盐水组大鼠在缺血前30 min腹腔分别注射丹参注射液(3.0,10.0,15.0 g/kg)和生理盐水再进行4血管阻断建立全脑缺血模型;缺血再灌组模型建立同前,但不注射丹参和生理盐水.②缺血再灌注72 h后取脑组织采用Western blotting和免疫组织化学法检测各组海马PTEN蛋白的表达,细胞被染成棕黄色者为蛋白表达阳性细胞,计数400个细胞,按阳性细胞所占百分比进行比较;应用原位末端标记法和吖啶橙/溴乙啶技术检测各组海马神经元的凋亡,.结果:①大鼠海马PTEN Western blotting检测结果:缺血再灌注组与生理盐水组相比灰度值无明显差异(P＞0.05);与生理盐水组相比丹参各治疗组PTEN表达量明显减少(F=68.73,P＜0.05).②大鼠海马PTEN免疫组织化学检测结果:缺血再灌注组PTEN阳性细胞与生理盐水组相比差异不显著(P＞0.05);与生理盐水组相比,丹参各治疗组PTEN阳性细胞所占比例明显减少(F=185.44,P＜0.05).③各组细胞凋亡情况:与生理盐水组相比,丹参各治疗组吖啶橙/溴乙啶检测凋亡率下降显著(F=58.42,P＜0.05).原位末端标记法结果表明,经丹参治疗后各组凋亡细胞数量明显下降(F=32.68,P＜0.05).结论:丹参能下调PTEN的表达,抑制细胞的凋亡,从而达到神经元保护的目的.
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消痰通络外用中药制剂对腰神经根性痛大鼠神经根功能和组织学的作用
目的:观察消炎通络中药制剂外用后腰神经根性痛大鼠神经根功能和组织学的变化.方法:实验于2005-12/2006-01在中国科学院上海实验动物中心完成.健康雄性SD大鼠60只,体质量250～300 g,随机数字法分为对照组、模型组、消痰通络中药组、扶他林组,每组15只.消痰通络中药全方由天南星、半夏、威灵仙等组成.建立大鼠自体髓核移植致腰神经根性痛模型,造模后第3天起给予不同药物干预.对照组、模型组、消痰通络中药组、扶他林组分别予生理盐水1 mL、生理盐水1 mL、消痰通络外用中药制剂1 g、扶他林乳胶剂1 g外涂于腰部伤口两侧,每日2次,连续用药4周.造模后第31天测大鼠后肢机械刺激缩爪阈值、马尾神经根感觉神经传导速度和运动神经传导速度.取移植髓核和右侧L5神经根作组织病理学观察.结果:60只SD大鼠全部进入结果分析.①造模后31 d,模型组大鼠右后肢机械刺激缩爪阈值降低,与术前及对照组比较差异有显著性意义[(58.6±4.7),(90.8±6.5),(88.1±5.5)mmHg,P＜0.01].消痰通络中药组、扶他林组后肢机械刺激缩爪阈值比模型组显著增高[(82.4±6.0),(82.7±6.2),(58.6±4.7)mmHg,P＜0.01].②造模后31 d,模型组大鼠感觉神经和运动神经传导速度明显减慢,与术前及对照组比较差异有显著性意义[(52.30±3.45),(63.87±4.81),(64.77±3.96)m/s,(46.48±2.47),(70.68±4.21),(69.85±3.34)m/s,P＜0.01].消痰通络中药组、扶他林组感觉神经传导速度比模型组显著增高[(59.61±4.27),(61.14±3.82),(52.30±3.45)m/s,P＜0.05,P＜0.01],运动神经传导速度比模型组显著增高[(62.01±3.44),(64.29±4.61),(46.68±2.47)m/s,P＜0.01].③消痰通络外用中药制剂能够减轻髓核和L5神经根病理损害程度.结论:消痰通络外用中药制剂具有减轻腰椎间盘突出症神经根性痛作用.
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脾虚大鼠脑内催产素受体基因表达变化及归脾汤的影响
目的:观察脾虚模型脑内对学习记忆有促进作用的催产素受体基因表达变化及归脾汤的影响作用.方法:实验于2002-03/2005-03在北京中医药大学基础医学院完成.清洁级雄性Wistar大鼠30只,体质量(160±10)g,常规适应性饲养1周后,随机抽签法分成正常组、模型组、治疗组,每组10只.采用苦降泻下、饮食失节加劳倦过度法建立脾虚大鼠模型,模型组每日灌胃造模药7.5g/(kg·d);治疗组造模处理加胃饲归脾汤7.5g/(kg·d).每日上午对除正常组外的2个组胃饲造模药,正常组予等量生理盐水;下午予治疗组胃饲相应中药.连续6周.原位杂交法检测下丘脑腹侧核、海马CA1区、前额叶皮层催产素受体mRNA表达变化.结果:纳入大鼠30只,均进入结果分析.①模型组上述脑区催产素受体mRNA表达阳性反应物明显升高,与正常组比较差异显著(模型组:19.60±3.51,29.62±3.98,20.13±3.22;正常组:8.11±1.23,11.00±1.42,4.94±0.54;P＜0.01).②治疗组上述脑区的催产素受体mRNA表达阳性反应物明显降低,与模型组比较差异显著(治疗组:9.59±1.34,13.00±1.67,5.38±0.96;模型组:19.60±3.51,29.62±3.98,20.13±3.22;P＜0.01),与正常组比较无显著差异.结论:脾虚模型学习记忆下降变化,与其脑内对学习记忆有促进作用的催产素受体基因表达改变有关,归脾汤可能通过调节催产素受体基因表达而影响其学习记忆能力.
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加味六君子汤对抑郁大鼠行为学及白细胞介素1β和白细胞介素6的水平调整
目的:观察服用加味六君子汤对抑郁大鼠行为学及白细胞介素1β、白细胞介素6的影响.方法:实验于2005-11-01/2006-02-28在大连医科大学动物实验动物中心及附属第二医院实验中心完成.以旷场试验法作行为学评分,选择得分相近的成年普通级wistar大鼠32只,以随机数字表法分为正常对照组,模型组、氟西汀组和加味六君子汤组,每组8只.加味六君子汤由党参10 g,白术10 g,茯苓15 g,制半夏10 g,陈皮15 g,甘草5 g,石菖蒲15 g,龙骨10 g,牡蛎10 g组成(购自大连医科大学附属第二医院中药局),常规方法煎煮浓缩,相当于生药2g/mL,存4℃冰箱备用.氟西汀(商品名百优解,常州四药制药有限公司生产,批号KC8427).以慢性不可预见性中等应激刺激结合孤养的方法造模.正常对照组每笼饲养4只,常规饲养,不予任何刺激和治疗.其他各组全部孤笼饲养.氟西汀组予2.8 mg/(kg·d)氟西汀,溶解于生理盐水中灌胃;加味六君子汤组大鼠2 mL/d加味六君子汤灌胃,均连续灌胃21 d.模型组不予任何治疗.第22天采用旷场试验法观察各组动物行为,以动物3 min内穿越底面块数为水平活动得分,以直立次数为垂直活动得分.眼眶后采血2 mL,比较各组大鼠血浆中细胞因子白细胞介素1β、白细胞介素6的含量变化.结果:实验大鼠32只全部进入结果分析.①加味六君子汤组及氟西汀组水平活动得分与垂直活动得分均高于模型组,差异有显著意义(P＜0.05～0.01);加味六君子汤组及氟西汀组垂直活动得分与正常组相比,差异无显著性意义(P＞0.05),但水平活动得分均低于正常组(P＜0.05);加味六君子汤组与氟西汀组的两项得分比较,差异无显著性意义(P＞0.05).②正常组、加味六君子汤组及氟西汀组白细胞介素1β、白细胞介素6含量均低于模型组动物,差异有显著性意义(P＜0.01);加味六君子汤组白细胞介素1β、白细胞介素6含量高于氟西汀组,差异有显著性意义(P＜0.01).结论:抑郁模型大鼠细胞因子白细胞介素1β和白细胞介素6水平升高,加味六君子汤在改善抑郁模型大鼠行为的同时还可下调以上两中细胞因子.加味六君子汤可改善抑郁大鼠模型的行为学指标,可能是通过降低白细胞介素1β、白细胞介素6的含量而发挥抗抑郁作用的.
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脑卒中后抑郁模型大鼠脑单胺递质变化及中药颐脑解郁方的干预作用
目的:观察脑卒中后抑郁模型大鼠脑内单胺递质的含量变化及补肾疏肝中药颐脑解郁方对脑卒中后抑郁的干预作用.方法:实验于2005-02/2006-01在北京中医药大学基础医学院科研中心实验室完成.取雄性Wistar大鼠40只,按随机数字表法分为5组,即正常组、脑卒中组、脑卒中后抑郁模型组、氟西汀组、颐脑解郁方组,每组8只.正常组不干预,脑卒中组仅进行脑卒中手术,术后常规喂养;脑卒中后抑郁模型组、氟西汀组、颐脑解郁方组均进行脑卒中后抑郁模型制备,先进行脑卒中手术,术后常规喂养7 d后,给予21 d的慢性应激.造模结束后第1天开始,脑卒中组、脑卒中后抑郁模型组灌胃蒸馏水;颐脑解郁方组灌胃颐脑解郁方,剂量为9.92g/(kg·d);氟西汀组灌胃盐酸氟西汀,按照成人用量的7倍计算大鼠用量为2.33 mg/(kg·d),共灌胃6周.给药结束后处死大鼠,采用高效液相-电化学方法测定大脑前皮质、海马去甲肾上腺素、多巴胺、5-羟色胺含量.结果:40只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①各组大鼠的行为学表现:造模成功后,与正常组比较,脑卒中后抑郁模型组、氟西汀组、颐脑解郁方组大鼠体质量增长缓慢,理毛次数显著减少,毛色无光泽,蔗糖水摄入量下降,活动减少.给药6周后,氟西汀组、颐脑解郁方组大鼠的抑郁症状均有所改善.②各组大鼠大脑左侧前皮质单胺递质含量比较:脑卒中后抑郁模型组大鼠大脑左侧前皮质的5-羟色胺、去甲肾上腺素含量显著低于正常组(P＜0.05～0.01),氟西汀组、颐脑解郁方组5-羟色胺、去甲肾上腺素含量显著高于脑卒中后抑郁模型组(P＜0.05～0.01).③各组大鼠大脑左侧海马单胺递质含量比较:脑卒中后抑郁模型组大鼠大脑左侧海马5-羟色胺、去甲肾上腺素和多巴胺含量显著低于正常组(P＜0.05～0.01);颐脑解郁方组5-羟色胺、多巴胺、去甲肾上腺素含量高于脑卒中后抑郁模型组(P＜0.05);氟西汀组5-羟色胺含量高于脑卒中后抑郁模型组(P＜0.05).结论:脑卒中后抑郁模型大鼠存在脑内单胺神经递质含量的减少,中药颐脑解郁方可增加中枢5-羟色胺、去甲肾上腺素及多巴胺的含量,疗效与盐酸氟西汀相近.
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五味子乙素和五味子醇甲对PC12细胞氧化损伤的保护作用
目的:观察五味子乙素和五味子醇甲对过氧化氢(H2O2)PC12细胞氧化损伤的保护作用.方法:实验于2005-08/2006-07在首都医科大学附属北京中医医院中心实验室完成.①PC12细胞培养在RPMI 1640培养液中,加入2.5,5,10,20μmol/L等不同浓度的五味子乙素和五味子醇甲,与细胞培养24 h,然后加入0.1,0.2,0.3,0.5 mmol/L不同浓度过氧化氢(H2O2)溶液,37℃作用30 min.模型组细胞只加入H2O2;正常对照组只加入等量的培养基.②采用倒置显微镜观察PC12细胞形态学变化,四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞生存率,用自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶的活性,按试剂盒说明书用慧星法测定细胞内DNA损伤.结果:①五味子乙素及五味子醇甲对PC12细胞形态学的影响:倒置相差显微镜观察到PC12细胞被H2O2损伤后,细胞形态学发生变化,表现为胞体肿胀、突起断裂、细胞膜溶解等.经五味子乙素及五味子醇甲处理后细胞,状态明显改善,细胞数目较多,而且细胞形态较完整.②五味子乙素及五味子醇甲对细胞生存率的影响:PC12细胞经0.1,0.2,0.3,0.5 mmol/L不同浓度H2O2处理30 min后,与正常对照组相比,四甲基偶氮唑盐法测定其生存率,分别降低了4%,13%,40%,57%,(P＜0.05或P＜0.01).不同浓度的五味子乙素及五味子醇甲(2.5～20μmol/L)均能提高细胞的生存率,并呈浓度依赖关系,浓度为5,10,20 μmol/L时,与模型组比较,具有明显的差异(P＜0.05或P＜0.01),特别是10 μmol/L五味子乙素及五味子醇甲的作用较强.③五味子乙素及五味子醇甲对细胞内乳酸脱氢酶和DNA损伤的影响:用0.3 mmol/L H2O2处理细胞后细胞内乳酸脱氢酶漏出率高于正常对照组(P＜0.01).大量的DNA被损伤,与正常对照组比较,差异有显著性(P＜0.01).细胞与10.0μmol/L五味子乙素及五味子醇甲作用后发现细胞内乳酸脱氢酶漏出率低于模型组(P均＜0.01).DNA损伤明显抑制,与模型组比较,差异有显著性(P均＜0.01).结论:五味子乙素及五味子醇甲均能有效地减轻H2O2对神经细胞的氧化损伤作用.推测保护作用机制是通过清除氧自由基,减轻其对DNA的损伤等方面实现的.
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胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤的干预效应
目的:观察胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织醛缩酶A表达及痹肿消汤干预的影响.方法:实验于2005-05/2005-07在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成.选用51只健康SD大鼠,以随机数字表法选出36只造模,采用皮下注射牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎)模型,另15只作为正常对照组,注射等量生理盐水.成模大鼠30只以随机数字表法分为模型组和痹肿消汤组,各15只.痹肿消汤组于初次免疫7 d后开始灌服痹肿消汤(痹肿消汤由白花蛇舌草、肿节风、苡米、络石藤、丹参、骨碎补等15味中药组成,体表面积比换算关系,大鼠用药为70 kg成人临床用药3倍,药材从中南大学湘雅医院中药房一次性选购,两次水煎取药液备用),相当于生药62.1g/(kg·d),每只约1.5 mL,2次/d灌服;模型组与正常组同体积生理盐水.观察大鼠一般情况,并定期对其进行关节炎指数评分.按0～4级进行评分,0分:无关节炎;1分:有红色斑点后轻度肿胀;2分:关节部位中度肿胀;3分:关节严重肿胀;4分:关节严重肿胀且不能负重.采用免疫印迹法(Western blot)检测正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠在不同时间点滑膜组织醛缩酶A的表达,运用ImageTool 3.0灰度扫描软件对结果进行半定量分析.结果:纳入实验的51只大鼠,造模不成功被淘汰6只,终痹肿消汤组15只、模型组15只、对照组15只,共45只大鼠进入结果分析.①各组大鼠关节炎指数比较:模型组大鼠关节炎指数于免疫后25 d左右达到高峰,30 d后呈下降趋势;痹肿消汤组大鼠亦于25 d左右达高峰,但较模型组低.②各组大鼠滑膜组织醛缩酶A的表达:模型组醛缩酶A表达在25,35,45 d递增(P＜0.05～0.01),且明显高于同时间正常组及痹肿消汤组(P＜0.05～0.01);痹肿消汤组醛缩酶A表达在各时间点明显低于同时间模型组及正常组(P＜0.05,P＜0.005,P＜0.001),在25,35 d和45 d表达水平呈递减趋势(P＜0.05,0.01).结论:类风湿关节炎关节病变过程中醛缩酶A表达增加,且随免疫时间延长而逐渐上调.痹肿消汤能下调关节炎大鼠滑膜醛缩酶A表达,这可能是其阻抑类风湿关节炎骨质侵蚀的重要机制之一.
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艾溃灵合剂抗炎效应的动物实验
目的:艾溃灵合剂为临床用于口腔溃疡疗效确切的中药制剂,采用动物实验,观察其抗炎效应.方法:实验于2005-02/10在河南中医学院动物实验中心完成.艾溃灵合剂主要由黄连、连翘、黄芪、生地、车前草、甘草等药组成.①将50只昆明小鼠按随机数字表分为5组:大、中、小剂量艾溃灵合剂组(20,10,5 g原生药/mL),口炎清颗粒组(3.3 g成品)及同体积的生理盐水组,每组10只.灌服1次/d,连续给药3 d,于后1次给药后1 h,每鼠右耳涂二甲苯,脱颈椎处死小鼠,剪下双耳,用打孔器打下双耳耳片,迅速用电子天平称质量,并计算肿胀度.肿胀度=右耳质量-左耳质量.②将40只wistar大鼠按随机数字表分为5组:大、中、小剂量的艾溃灵合剂组(20,10,5 g原生药/mL),口炎清颗粒组(3.3 g成品)及同体积的生理盐水组,每组8只.灌服给药1次/d,连续给药3 d,于后1次给药后30 min,于每鼠左、右后足跖皮下注射新配制的10%新鲜鸡蛋清液,分别于给蛋清后30 min、60min、120 min、240 min、360 min在足跖测定仪再次测大鼠左右后足跖体积,并计算足跖肿胀率.足跖肿胀率=给药后不同时间足跖体积-同侧正常跖体积/同侧正常足跖体积 结果:90只大小鼠均进入结果分析.①与生理盐水组相比,大、中、小剂量艾溃灵合剂组和口炎清颗粒组均可显著抑制小鼠耳壳二甲苯致肿,使耳壳肿胀度显著降低[(7.0±1.6),(2.3±1.5),(3.5±1.5),(4.7±1.4),(3.6±1.5)mg,P＜0.01].②与生理盐水组比,大、小剂量艾溃灵合剂组在给药后30～360 min均可显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组:0.73±0.12,0.67±0.12,0.54±0.12,0.40±0.14,0.23±0.12;大剂量艾溃灵合剂组:0.56±0.11,0.49±0.09,0.36±0.10,0.27±0.13,0.07±0.07;小剂量艾溃灵合剂组:0.63±0.13,0.54±0.14,0.44±0.13,0.27±0.15,0.12±0.13,P＜0.01,P＜0.05),中剂量艾溃灵合剂组在给药后30min、120min、240min可明显抑制大鼠蛋清性足跖肿胀,在给药后60 min和360 min可显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组:0.73±0.12,0.54±0.12,0.40±0.14,0.67±0.12,0.23±0.12;中剂量艾溃灵合剂组:0.59±0.16,0.43±0.16,0.27±0.13,0.52±0.13,0.11±0.11,P＜0.05,P＜0.01),口炎清颗粒组在给药后30～360 min均可明显抑制大鼠蛋清性足跖肿胀[生理盐水组:0.73±0.12,0.67±0.12,0.54±0.12,0.40±0.14,0.23±0.12;口炎清颗粒组:0.64±0.07,0.56±0.11,0.43±0.10,0.30±0.08,0.12±0.10,P＜0.05].结论:艾溃灵合剂可显著抑制小鼠耳壳二甲苯致肿,显著抑制大鼠蛋清性足跖肿胀,具有明显的抗炎作用.
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雷公藤多甙对佐剂性关节炎模型大鼠踝关节相关指标的影响
背景:类风湿性关节炎是常见的自身免疫性疾病.近年来雷公藤多甙广泛应用于类风湿性关节炎治疗,其治疗过程中对关节滑膜炎症的影响及对类风湿性关节炎的预防作用有待研究.目的:观察雷公藤多甙对佐剂性关节炎模型大鼠踝关节相关指标的影响.设计:随机对照动物实验.单位:四川大学基础医学与法医学院组织胚胎学与神经生物学教研室.材料:选用20只健康清洁级雌性SD大鼠,体质量(200±15)g,鼠龄二三个月,由四川大学实验动物中心提供.氟氏完全佐剂为Sigma公司产品,雷公藤多甙为湖南株州制药三厂产品(批准文号:湘卫药准字(2005)第055172号.剂量:10 mg/片).方法:实验于2004-05/2006-03在四川大学组织胚胎学和神经生物学教研室完成.抽签法随机将大鼠分为正常组、模型组、预防组及治疗组,每组5只.正常组不造模,不给药物治疗;模型组于实验开始后,分别在各个大鼠左后足垫部皮下注射氟氏完全佐剂0.2 mL,不给药物治疗;预防组造模方法同模型组,造模后第7天开始灌胃给予雷公藤多甙,用药剂量以大鼠体表面积换算公式计算,1次/d,每次30 mg/kg,共7 d;治疗组造模方法同模型组,造模后第19天开始灌胃给予雷公藤多甙,方式和疗程同预防组.①采用足跖容积法于造模前,造模后2,10,15,19,22,26 d不同时间点观察记录大鼠原发侧与继发侧关节后肢肿胀程度.②根据其余未注射的3只肢体的病变程度及指间趾间关节是否发炎,评价大鼠关节炎指数(0分:肿胀度≤5%;1分:肿胀≤15%;2分:15%＜肿胀≤30%;3分:30%＜严重肿胀≤60%;4分:肿胀＞60%),把每个关节的得分累计起来,即为每只大鼠的关节炎指数.③造模后28 d取材,将大鼠灌注固定后,取完整踝关节切片,苏木精-伊红染色后观察大鼠踝关节滑膜组织的改变.主要观察指标:各组大鼠关节肿胀程度、关节炎指数及踝关节滑膜组织学观察.结果:大鼠20只均进入结果分析.①造模2 d后,除正常组外,其他各组大鼠原发侧关节均出现明显肿胀,造模2～26 d各时间点大鼠足跖容积均大于正常组(t=2.315～3.041,P＜0.05);预防组大鼠造模后10,15,19,22,26 d原发侧足跖容积小于模型组(t=2.064～2.683,P＜0.05);治疗组大鼠造模后22,26 d原发侧足跖容积小于模型组(t=2.112～2.578,P＜0.05).造模15 d后,模型组和治疗组大鼠继发侧足跖容积均大于正常组(t=2.201～2.546,P＜0.05),预防组大鼠造模15,19,22,26 d继发侧足跖容积小于模型组(t=2.373～2.425,P＜0.05);治疗组大鼠造模26 d继发侧足跖容积小于模型组(P＜0.05).②造模14 d,模型组大鼠关节炎指数为(8.3±2.0)分,预防组为(0.4±0.95)分,预防组较模型组明显降低(t=2.64,P＜0.05);造模26天,治疗组为(7.3±1.3)分,明显低于模型组(11.2±0.9)分(t=3.26,P＜0.05).③正常组大鼠踝关节腔内干净,关节软骨表面光滑,软骨无退行性变,滑膜组织无增生.模型组大鼠原发侧踝关节滑膜增生,滑膜细胞数量增多,体积增大,排列为多层;滑膜下组织水肿,充血,炎性细胞浸润.模型组继发侧继发性病变表现为滑膜增生,踝关节滑膜下组织水肿.预防组原发侧踝关节滑膜与模型组比较,滑膜炎症反应减弱,增生程度减轻.继发侧踝关节滑膜未见明显增生.治疗组原发侧及继发侧踝关节滑膜与模型组比较,滑膜组织增生减少,炎症反应减轻.结论:雷公藤多甙能显著减轻大鼠足跖关节肿胀度,关节炎症指数,减轻踝关节滑膜病理改变,且能预防继发性病变的出现.
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小活络丸的免疫抑制、抗氧化及抗炎镇痛作用
背景:小活络丸具有祛风除湿、活络通痹等功效,用于治疗风寒湿痹、肢体疼痛,麻木拘挛等症.目的:观察小活络丸对小鼠再次免疫应答、特异性免疫(包括细胞免疫和体液免疫)、非特异性免疫(包括补体C3、单核-巨噬细胞系统和红细胞黏附功能)和自由基损伤,以及对疼痛及多种炎症模型的药理作用.设计:随机对照,分层实验.单位:广州市中医中药研究所和广州市中医医院药剂科.材料:选用NIH小鼠和ICR小鼠共628只,鼠龄6～8周.小活络丸(成分:胆南星、制川乌、制草乌、地龙、乳香(制)等;广州陈李济药厂生产,生产批号:19980612).兔抗小鼠IgG和补体C3抗血清试剂盒,由广州市医药卫生研究所药物室提供;超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量测定试剂盒,南京建成生物工程研究所产品.方法:实验于1998-09/1999-12在广州市中医中药研究所药理研究室和广州市医药卫生研究所药物研究室动物室完成.①观察小活络丸抑制鸡红细胞诱导小鼠再次免疫应答作用:取ICR小鼠84只,雌雄各半,取出20只作为空白对照组;其余均腹腔注射环磷酰胺0.2 g/kg,1次/d,1 d.第4和12天,共2次腹膜内注射鸡红细胞诱导免疫增强病理模型探讨再次免疫应答.空白对照组(20只)腹腔注射等量生理盐水;动物于加强免疫后,按随机抽签法分为3组:环磷酰胺组20只(灌胃环磷酰胺40mg/kg),小活络丸组21只(灌胃小活络丸混悬液5.54 g/kg),模型组20只(灌胃等量蒸馏水);均1次/d,连续灌胃给药7 d.19 d后分别按单向免疫扩散法测定血清IgG,补体C3含量,采用聚乙二醇沉淀法测定循环免疫复合物含量变化.②观察小活络丸抑制小鼠迟发型超敏反应作用:取ICR小鼠54只,雌雄各半.第1天皮下注射10 g/L 2,4-二硝基氟苯50 μL/只致敏,第4天,将处理后动物按随机抽签法分为3组:泼尼松组(灌胃泼尼松0.01 g/kg),小活络丸组(灌胃小活络丸混悬液5.54 g/kg),模型组(灌胃等量蒸馏水),每组18只.均1次/d,连续灌胃给药7 d.11d后各组小鼠均涂10g/L 2,4-硝基氟苯25 μL/右耳,24 h后计算肿胀度(右、左耳质量差值).③观察小活络丸抑制小鼠红细胞免疫黏附功能:取NIH小鼠36只,雌雄各半,按随机抽签法分为3组:环磷酰胺组(灌胃环磷酰胺20 mg/kg),小活络丸组(灌胃小活络丸5.54 g/kg),空白对照组(灌胃等量蒸馏水),每组12只.均1次/d,连续灌胃给药7 d.7 d后取小鼠眼眶血,计算红细胞C3b受体花环率和红细胞免疫复合物花环率.④观察小活络丸抑制小鼠碳粒廓清作用:取ICR小鼠33只,雌雄不拘,将其按随机抽签法分为3组:泼尼松组(灌胃泼尼松20 mg/kg),小活络丸组(灌胃小活络丸混悬液5.54 g/kg),空白对照组(灌胃等量蒸馏水);均1次/d,连续灌胃7 d.于给药第7天末次给药后2 h,进行碳粒廓清试验,计算廓清指数K(K值=(LogA1-LogA2)/(T2-T1),式中A1和A2分别表示2和10 min所取血样的吸光度,T1和T2表示给碳粒后5和10 min取血时间;以K值高低,评价碳粒廓清作用.⑤观察小活络丸对鸡红细胞免?忖疫小鼠溶血素、C3和丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性的影响:取ICR小鼠80只,雌雄各半,取20只小鼠作为空白对照组,其余均腹腔注射2×108L-1鸡红细胞15 mL/kg作免疫诱导,空白对照组均以等量生理盐水代替鸡红细胞,灌胃蒸馏水,1次/d,连续灌胃7 d.按随机抽签法将免疫处理的动物分为3组:免疫对照组(灌胃给予蒸馏水),环磷酰胺组(灌胃环磷酰胺20 mg/kg),小活络丸组(灌胃小活络丸混悬液5.54g/kg);均1次/d,连续灌胃7 d;于第7天末次给药后2 h,计算IgM型溶血素半数溶血值[(样品吸收度/鸡红细胞半数溶血时的吸收度)×稀释倍数].按相应试剂盒操作说明书方法测定血清C3含量及丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性.⑥观察小活络丸抑制小鼠琼脂肉芽组织增生作用:取NIH小鼠59只,皮下注射20g/L琼脂0.5 mL/只,24 h后,按随机抽签法分为3组:双氯芬酸组(灌胃双氯芬酸10 mg/kg),小活络丸组(灌胃给予小活络丸混悬液5.54 g/kg),模型组(灌胃等量蒸馏水);均1次/d,连续灌胃给药7 d;第8天处死小鼠,以每千克体质量琼脂肉芽克数表示抑制增生作用.⑦观察小活络丸抑制小鼠醋酸性扭体反应作用:取NIH小鼠63只,按随机抽签法分为3组:双氯芬酸组(灌胃双氯芬酸50 mg/kg),小活络丸组(灌胃小活络丸混悬液5.54g/kg),模型组(灌胃等量蒸馏水);均1次/d,连续灌胃给药2 d.末次给药后2 h,腹腔注射0.1 mol/L醋酸0.2 mL/只,计数20 min内小鼠的扭体次数.⑧观察小活络丸对二甲苯、巴豆油和角叉菜胶诱发急性渗出性炎症及炎症渗出液中前列腺素E含量的影响:取NIH小鼠219只,双氯芬酸组(灌胃双氯芬酸50 mg/kg),小活络丸组(灌胃小活络丸混悬液5.54 g/kg),模型组(灌胃等量蒸馏水);均1次/d,共2 d.末次给药后2 h,①涂二甲苯25μL/右耳,20 min后;②涂巴豆油25 μL/右耳,4 h后;计算耳肿胀度(右耳片重-左耳片重).③用10 g/L角叉菜胶20 μL/右足皮内注射致炎,3 h后,计算肿胀度(右足和左足间重量差值);并测致炎足渗出液中前列腺素E含量.组间计量资料差异比较采用t(方差不齐用t')检验.主要观察指标:小活络丸对小鼠再次免疫应答、特异性免疫、非特异性免疫和自由基损伤,以及对疼痛及多种炎症模型的药理作用.结果:NIH小鼠和ICR小鼠628只均进入结果分析.①模型组小鼠IgG、循环免疫复合物含量明显高于其他3组(P＜0.01),C3含量明显低于其他3组(P＜0.05～0.01).②泼尼松组和小活络丸组小鼠耳肿胀度明显低于空白对照组(P＜0.01).③空白对照组红细胞C3b受体花环率明显高于其他2组(P＜0.01),红细胞免疫复合物花环率明显低于其他2组(P＜0.01).④泼尼松组和小活络丸组吞噬指数(K值)明显低于空白对照组(P＜0.01).⑤环磷酰胺组和小活络丸组IgM型溶血素半数溶血值和血清丙二醛含量明显低于免疫对照组(P＜0.01),C3含量明显高于免疫对照组(P＜0.01),血清超氧化物歧化酶活力与免疫对照组比较,差异不明显(P＞0.05).⑥双氯芬酸组和小活络丸组小鼠琼脂肉芽组织质量与体质量比值明显低于模型组(P＜0.01).⑦双氯芬酸组和小活络丸组小鼠20 min内扭体次数明显少于模型组(P＜0.01,0.05).⑧双氯芬酸组二甲苯炎症模型和巴豆油炎症模型耳肿胀度、角叉菜胶急性炎症模型足肿胀度、炎症渗出液中前列腺素E含量明显小于或低于模型组(P＜0.05～0.01),小活络丸组炎症渗出液中前列腺素E含量明显低于模型组(P＜0.01).结论:小活络丸既有免疫抑制的药理作用,又有抗增殖性炎症、镇痛、抗氧化药效学效应.
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三七皂甙对烧伤延迟复苏大鼠肺血管通透性的调控
目的:观察三七皂甙对烧伤延迟复苏大鼠的肺血管通透性的影响及对肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、髓过氧化物酶、内皮素1及其反馈调节的一氧化氮的调控.方法:实验于2003-07/2005-05在长海医院烧伤中心实验室完成.选用36只健康成年SD大鼠制备烧伤和烧伤休克延迟复苏模型,雌雄不限,体质量200～220 g.随机数字表法分为假烫组、烫伤组、治疗组,每组12只.烫伤组以100℃水烫背部13 s,造成大鼠30%体表总面积Ⅲ度烧伤(病理证实).假烫组以38℃水模拟烫伤过程;治疗组伤后半小时腹腔注射三七皂甙(100mg/kg);烫伤及治疗组均于伤后6 h腹腔注射乳酸林格液进行延迟复苏,总量按Parkland公式计算.伤后24 h检测肺脏含水量、血管通透性及髓过氧化物酶活性的变化,血浆中肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、内皮素1及一氧化氮的浓度水平.结果:36只大鼠均进入结果分析.①烫伤后24 h,烫伤组的肺组织含水量显著高于假烫组和治疗组[(82.04±2.05)%,(76.85±2.18)%,(79.91±1.76)%,P＜0.01,P＜0.05].②烫伤组的肺血管通透性、肿瘤坏死因子α和白细胞介素10的水平均显著高于假烫组与治疗组[(457.86±43.33),(49.46±10.16),(313.05±19.30)mg/L;(612.30±75.03),(32.68±9.33),(298.91±19.40)μg/L;(221.39±33.14),(6.99±1.84),(103.14±26.17)mg/L,P均＜0.01],治疗组的各项指标显著高于假烫组(P＜0.01).③烫伤组的髓过氧化物酶活性显著高于假烫组和治疗组[(578.27±56.43),(106.80±9.94),(312.03±31.41)U/g,P＜0.01].④烫伤组的内皮素1高于假烫组及治疗组[(295.25±44.25),(60.08±11.65),(157.53±26.78)μg/L;P＜0.01];治疗组的一氧化氮浓度高于假烫组与烫伤组[(4.25±0.59),(2.24±0.64),(3.18±0.72)mg/L,P＜0.05,P＜0.01],烫伤组内皮素1/一氧化氮浓度高于假烫组及治疗组[(96.85±24.20)×10-6,(27.67±4.86)×10-6,(38.15±10.62)×10-6,P＜0.01].结论:大鼠烧伤后,早期使用三七皂甙,可调控烫伤大鼠分泌肿瘤坏死因子α、白细胞介素10、内皮素1及一氧化氮和髓过氧化物酶活性,减轻肺组织的水肿,从而减轻烧伤早期脏器损害.
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云芝糖肽配合化疗对卵巢和子宫体癌患者免疫功能及生活质量的影响
背景:生物反应调节剂己成为继化疗、手术及放疗后第4种治疗肿瘤的方法.云芝糖肽是一种生物反应调节剂物质,在肿瘤治疗中具有重要作用,己被应用于胃癌、肺癌、食道癌等的治疗.目的:观察云芝糖肽对因妇科恶性肿瘤而化疗的患者免疫功能与生活质量的影响.设计:对比观察.单位:上海交通大学附属第一人民医院妇产科.对象:选择1999-06/2002-12上海交通大学附属第一人民医院妇产科已手术确诊的妇科恶性肿瘤住院患者共40例.其中卵巢癌36例,平均年龄52岁;子宫体癌4例,平均年龄54岁.纳入标准:卵巢或子宫体癌患者,手术后没有化疗禁忌征.排除标准:有化疗禁忌征的患者.方法:将患者按期别及年龄配对分成试验组和对照组,每组20例.试验组接受化疗加云芝糖肽;对照组单用化疗.卵巢癌采用PAC方案化疗,子宫体癌用MFP方案.实验时机于第2次化疗开始前至第4次化疗前,共2个月.主要观察指标:各组治疗前后血免疫功能指标及生活质量指数的变化.结果:纳入患者40例,均进入结果分析.①治疗前后Karnofsky评分值试验组分别为(84±9.6),(90±8.6)分,(P＜0.05);对照组分别为(83±9.2)及(80±12.8)分,(P＞0.05);治疗后试验组比对照组高10分,(P＜0.05).②治疗后试验组和对照组的CD4+分别为28.14±4.10及23.12±3.97,(P＜0.05);CD4+/CD8+为0.96±0.17及0.75±0.21,(P＜0.01);自然杀伤细胞为23.80±4.90,5.32±3.90,(P＜0.01),试验组均明显高于对照组.结论:云芝糖肽能提高卵巢和子宫体癌患者的细胞免疫和生活质量.
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雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响
目的:观察雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji细胞体外增殖和细胞凋亡的影响.方法:实验于2005-04/11在华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所实验室完成.①人淋巴瘤细胞系Raji(中国科学院上海生物细胞研究所).雷公藤内酯醇(Sigma公司)分子式C20H24O6,相对分子量360.4,纯度99%,用二甲基亚砜稀释,微孔滤膜(0.22 μm)除菌,等量分装,-20℃保存,使用前解冻.②将Raji细胞放入RPMI-1640培养基中常规培养,每48 h换液传代1次.实验前24 h半量换液,取处于对数生长期、细胞活性大于98%的细胞进行实验.③采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响.将Raji细胞按2×108 L-1接种于96孔培养板,200μL/孔.实验共分5组:雷公藤内酯醇12.5,25,50,100 nmol/L浓度组分别加入适量雷公藤内酯醇使其终浓度为12.5,25,50,100 nmol/L,空白对照组未加入雷公藤内酯醇,5个平行孔/组.分别于培养12,24,48,72 h后每孔加入5g/L的四甲基偶氮唑蓝20μL继续培养.用全自动酶标仪测定490 nm波长处吸光度值.细胞增殖抑制率(%)=(1-雷公藤内酯醇各浓度组吸光度值/空白对照组吸光度值)×100%.④采用Annexin V/PI双标流式细胞术检测雷公藤内酯醇对Raji细胞凋亡的影响.将Raji细胞按2×108L-1接种于6孔培养板,实验分组同上,分别于孵育24,48 h后收集细胞,调整各组细胞数为2×108 L-1.取195 μL细胞悬液,加入异硫氰酸荧光素标记的Annexin Ⅴ室温孵育,洗涤后加入碘化丙锭5μL,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果:①雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的影响:不同浓度的雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji的增殖均具有抑制作用,且呈时效和量效关系.与空白对照组比较,培养12,24,48,72 h后雷公藤内酯醇12.5,25,50,100 nmol/L浓度组的细胞增殖抑制率均明显升高(t=18.314～77.366,P均＜0.01),培养24 h时的半数抑制浓度为43.06 nmol/L.②雷公藤内酯醇对Raji细胞凋亡的影响:经雷公藤内酯醇作用后,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,Raji细胞凋亡率逐渐增高,且呈时效和量效关系.与空白对照组比较,培养24,48 h后雷公藤内酯醇12.5,25,50,100 nmol/L浓度组的细胞凋亡率均明显升高(t=-23.657～-37,895,P均＜0.05).结论:雷公藤内酯醇对人淋巴瘤细胞系Raji细胞具有明显的生长抑制作用及诱导凋亡发生,且存在浓度和时间依赖关系.提示雷公藤内酯醇可能通过诱导细胞凋亡来有效抑制人淋巴瘤细胞的增殖,从而有望为治疗淋巴瘤提供新的策略.
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薏苡仁酯对人喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的作用
目的:观察不同浓度薏苡仁酯对人喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的作用.方法:实验于2005-12/2006-04在锦州医学院药理教研室完成.选用人喉癌细胞株Hep-2(北京同仁耳鼻喉研究所),培养于含体积分数为0.1的胎牛血清的RPMI1640培养基中,置37℃,体积分数为0.05的CO2孵箱中培养并传代.实验分4组,每8孔细胞为1组.对照组(加入等体积的无菌蒸馏水),5,10,20 μmol/L薏苡仁酯(商品名:康莱特注射液,浙江康莱特药业有限公司,规格100g/L)组.应用四甲基偶氮唑蓝法观察不同浓度薏苡仁酯对Hep-2细胞增殖的抑制情况,测定其吸光度值;采用流式细胞术方法观察不同浓度薏苡仁酯对Hep-2细胞凋亡率的改变.结果:①四甲基偶氮唑蓝法测定:5,10,20μmd/L薏苡仁酯组作用48 h后吸光度值(A540)明显低于对照组(分别为1.673±0.015,1.362±0.148,1.019±0.036,1.807±0.042,t=1.10,P＜0.01),且呈现一定的浓度依赖性,各个剂量组之间的差异也存在显著性.②流式细胞仪测定:5,10,20 μmol/L薏苡仁酯组作用48 h后抑制Hep-2细胞的细胞凋亡率高于对照组,并能诱导Hep-2细胞凋亡,且呈浓度依赖性[(6.49±0.27)%,(11.33±0.12)%,(13.56±0.47)%,(0.08±0.06)%,t=16.27,P＜0.05].结论:薏苡仁酯可促进喉癌Hep-2细胞增殖抑制和凋亡,并呈浓度依赖性,为薏苡仁酯用于喉癌临床治疗提供了部分依据.
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缺氧诱导因子1α对口腔鳞状上皮癌细胞株接受放射和化学药物治疗感受性的影响
背景:缺氧诱导因子1α是一种转录因子,缺氧环境下对哺乳动物细胞起重要的调控作用.然而缺氧诱导因子1α对口腔鳞状上皮癌细胞株的放疗和化疗感受性的作用有待研究.目的:观察缺氧诱导因子1α对口腔鳞状上皮癌细胞株接受放射和化学药物治疗感受性的影响.设计:观察对比实验.单位:首都医科大学附属北京朝阳医院.材料:口腔鳞状上皮癌细胞株-2,口腔鳞状上皮癌细胞株-4,口腔鳞状上皮癌细胞株-5,和口腔鳞状上皮癌细胞株-6来自人口腔鳞状上皮癌细胞(由日本高知大学医学部口腔外科建株).方法:本实验于2004-09/2006-08于首都医科大学附属北京朝阳医院完成.将口腔鳞状上皮癌细胞株-2,口腔鳞状上皮癌细胞株-4,口腔鳞状上皮癌细胞株-5,和口腔鳞状上皮癌细胞株-6采用含小牛血清,左旋谷酰胺,青霉素,链霉素的改良DMEM培养液中培养.①从未处理和用30 Gyγ射线,100 μmol/L顺铂或100 μmol/L 5-氟脲嘧啶处理后的口腔鳞状上皮癌细胞株中提取细胞核蛋白.采用免疫印迹法检测缺氧诱导因子1α蛋白表达水平,同时采用定量PCR检测缺氧诱导因子1αmRNA的表达.②不同干预条件下细胞增殖抑制情况:将口腔鳞状上皮癌细胞株单细胞悬液以1×104/孔接种于96孔板中,每孔分别加入终浓度为100μmol/L的顺铂或5-氟尿嘧啶,或用30 Gyγ射线处理细胞,培养48 h后,采用用噻唑蓝比色法检测细胞增殖抑制情况.③不同干预条件下细胞凋亡分析:口腔鳞状上皮癌细胞株细胞用30 Gyγ射线,100 μmol/L顺铂或100 μmol/L 5-氟脲嘧啶处理24h后,用Propidium iodide和Annexin V-FITC染色,用流式细胞仪测定凋亡细胞数(仅分析γ射线,顺铂处理组).④质粒构建和转染:将人缺氧诱导因子1αcDNA克隆至pcDNA3.1/V5-His TOPO表达载体.用脂质转染法将缺氧诱导因子1α cDNA暂时转染口腔鳞状上皮癌细胞株-2细胞.将缺氧诱导因子1α siRNA(有义序列为5'CUGAUGACCAGCAACUUGAtt 3')暂时转染口腔鳞状上皮癌细胞株-5细胞,设立空白对照,同时给予细胞增殖抑制情况观察,以及细胞凋亡分析(仅分析顺铂处理组),方法同前.主要观察指标:①不同口腔鳞状上皮癌细胞株缺氧诱导因子1α的mRNA和蛋白表达情况.②不同干预条件下口腔鳞状上皮癌细胞株增殖抑制及细胞凋亡情况.③缺氧诱导因子1α过表达或缺氧诱导因子1α基因敲除的转染细胞的蛋白水平检测.④转染细胞和对照口腔鳞状上皮癌细胞株细胞增殖抑制情况和细胞凋亡分析结果.结果:①不同口腔鳞状上皮癌细胞株间缺氧诱导因子1α mRNA和蛋白表达结果:口腔鳞状上皮癌细胞株-2,口腔鳞状上皮癌细胞株-4,口腔鳞状上皮癌细胞株-5和口腔鳞状上皮癌细胞株-6细胞缺氧诱导因子1α mRNA的相对表达水平分别为1.0,2.2,4.3和4.0.缺氧诱导因子1α的细胞总蛋白和细胞核蛋白的表达在口腔鳞状上皮癌细胞株-2和口腔鳞状上皮癌细胞株-4细胞中较弱,而在口腔鳞状上皮癌细胞株-5和口腔鳞状上皮癌细胞株-6细胞中较强.②不同干预条件下口腔鳞状上皮癌细胞株细胞增殖抑制及被诱导凋亡情况:经γ射线,顺铂及5-氟脲嘧啶处理后,口腔鳞状上皮癌细胞株-2细胞数分别下降至(39.5±3.2)%,(39.2±1.2)%和(47.9±3.6)%,口腔鳞状上皮癌细胞株-4细胞数分别下降至(53.9±6.6)%,(54.3±1.4)%,(54.8+3.8)%.口腔鳞状上皮癌细胞株-5细胞数分别下降至(74.1±3.8)%,(76.5±9.1)%,(69.6±7.7)%,口腔鳞状上皮癌细胞株-6细胞数分别下降至(71.4±7.4)%,(84.4±8.8)%,(82.0±4.5)%.顺铂处理后,口腔鳞状上皮癌细胞株-2,口腔鳞状上皮癌细胞株-4,口腔鳞状上皮癌细胞株-5和口腔鳞状上皮癌细胞株-6细胞的凋亡细胞数分别为(50.9±1.3)%,(67.3±2.2)%,(12.2±0.8)%和(38.6±0.9)%.γ射线处理后,口腔鳞状上皮癌细胞株-2,口腔鳞状上皮癌细胞株-4,口腔鳞状上皮癌细胞株-5和口腔鳞状上皮癌细胞株-6细胞的凋亡细胞数分别为(21.2±1.1)%,(14.6±0.9)%,(9.7±1.0)%和(10.4±0.8)%.③不同干预条件下转染细胞增殖抑制及凋亡情况:经γ射线,顺铂及5-氟脲嘧啶处理后,转染了缺氧诱导因子1α表达载体的口腔鳞状上皮癌细胞株-2细胞数高于对照组(t=-4.693,-8.617,-6.721,P＜0.01);转染了缺氧诱导因子1α siRNA的口腔鳞状上皮癌细胞株-5细胞数低于对照组细胞(t=5.800,5.595,4.253,P＜0.05～0.01).用顺铂处理24 h后,转染缺氧诱导因子-1α的口腔鳞状上皮癌细胞株-2细胞凋亡数为(34.0±1.9)%,低于空白对照[(49.6±3.4)%,t=6.937,P＜0.01].转染缺氧诱导因子1α siRNA的口腔鳞状上皮癌细胞株-5细胞凋亡数为(27.7±2.3)%.高于空白对照[(11.4±2.1)%,t=-8.941,P＜0.01].结论:缺氧诱导因子1α表达与口腔鳞癌细胞对放、化疗感受性之间有负相关性.抑制癌细胞的缺氧诱导因子1α表达能增强癌细胞对放疗、化疗的感受性.
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汉防己甲素预防椎板切除术后硬膜外粘连
目的:观察汉防己甲素对预防椎板切除术后硬膜周围瘢痕粘连的作用.方法:实验于2005-08/10在贵阳医学院动物实验中心完成动物实验,光镜观察完成于贵州省人民医院病理科,电镜观察在贵州师范大学电镜中心完成.①30g/L汉防己甲素制备:用0.1 mol/L的HCl 30 mL将3.0 g 980 g/L汉防己甲素(杭州中香化学有限公司)充分溶解,再以0.1 mol/L的NaOH反滴定至pH值5.5,后以生理盐水(pH=5.5)定容至100mL,4℃保存备用.②40只成年大白兔采用随机数字法分为4组,每组10只.将兔行L3节段椎板切除术,形成一处10 mm×5 mm的硬脊膜裸露区.生理盐水组:予0.5 mL生理盐水覆盖;明胶海绵组:予明胶海绵覆盖;汉防己甲素组:予0.5 mL汉防己甲素覆盖;汉防己甲素+明胶海绵组:予浸湿汉防己甲素的明胶海绵覆盖.③术后2,4,8周取材作大体、光镜、透射电镜观察;8周行硬膜外粘连分级及计算机图像分析.结果:40只大白兔全部进入结果分析.①瘢痕生长情况:大体、光镜、电镜观察生理盐水组及明胶海绵组硬膜外瘢痕粘连日趋明显.汉防己甲素组及汉防己甲素+明胶海绵组炎性细胞渗出较少,成纤维细胞较少,胶原纤维形成较少,硬膜外瘢痕无粘连.②瘢痕面积和粘连长度/硬膜周长比值测定:生理盐水组两项指标均大于汉防己甲素组、汉防己甲素+明胶海绵组[(0.237±0.004),(0.087±0.004),(0.099±0.006)mm2;0.201±0.006,0.059±0.024,0.063±0.008;P＜0.01];明胶海绵组上述两指标也大于汉防己甲素组、汉防己甲素+明胶海绵组(P＜0.01);而生理盐水组和明胶海绵组,汉防己甲素组和汉防己甲素+明胶海绵组间则差异无显著性(P＞0.05).结论:汉防己甲素可以有效地预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的形成.
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脑卒中后抑郁患者中医证型与神经功能及精神心理学表现的关联
目的:分析脑卒中后抑郁患者中医证型与神经功能、精神心理学表现的相关性,为辨证施治提供依据.方法:选择2002-04/2005-07在阜新矿业集团公司总医院治疗的脑卒中后抑郁患者177例.①入选对象均在出院前1周内由资深中医师进行辨证诊断,并接受了以下几项评估:神经功能缺损评分(满分45分,分值越高,缺损程度越重)、Fugl-Meyer评分(满分100分,上肢66分,下肢34分,评分越高运动能力越好)、改良的Barthel指数(满分为100分,评分越高日常生活活动能力越好)、临床精神卫生症状自评量表(SCL-90,评估指标包括总分,阳性总分,阳性项目均数和阳性项目均分)、汉密尔顿抑郁和焦虑量表(均为得分越高病情越重).不同证型患者间进行各量表得分比较.②将患者分为单一证型、2种证型和≥3种证型,并进行组间得分比较.③将患者按虚证、实证和虚实夹杂证型分组,并进行组间得分比较.结果:177例患者均进入结果分析.①177.例患者中痰瘀互阻型43例、气滞血瘀型64例、肾精不足型21例、脾胃虚弱型33例、痰火扰心型16例.痰瘀互阻型、气滞血瘀型和肾精不足型患者的Fugl-Meyer评分、改良的Barthel指数得分明显低于总体样本和脾胃虚弱型、痰火扰心型患者,而前3者中多数神经功能缺损评分、汉密尔顿抑郁和焦虑量表得分、SCL-90各项均分都明显高于后3者(P均＜0.05～0.01).②单一证型和2种证型患者的Fugl-Meyer评分、改良的Barthel指数得分明显高于总体样本和≥3种证型患者,而前2者中多数神经功能缺损评分、汉密尔顿抑郁和焦虑量表得分、SCL-90各项均分都明显低于后2者(P均＜0.05～0.01).③虚证、实证、虚实夹杂证证型患者之间多数神经功能和心理学检查评分无明显区别(P均＞0.05).结论:痰瘀互阻、气滞血瘀、肾精不足证型中风后"郁证"及多种证型组合(≥3种)患者的神经功能指标和精神心理学损害较重,进行中医辨证施治有可能改善病情.
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沈阳地区抑郁症患者常见情志症状与中医分型的相关调查
目的:调查沈阳地区不同中医分型抑郁症患者常见情志症状表现,论证其与精神心理学症状量表的相关性.方法:选择2000-05/2006-05入住中国医科大学附属第四医院精神科的抑郁症患者149例,入选对象均在治疗前由两名资深中医师进行辨证诊断,并获得一致结论后入选,辨证诊断时间在开始治疗前1周内.抑郁症患者中医辩证标准:参照1991年中国中西医结合学会精神疾病委员会昆明座谈会修订的<情感性(心境)障碍中西医结合辨证分型标准>,结合临床实际,拟设肝郁气滞型(证见多愁善感、悲观厌世、失眠多梦、嗳气叹息、身倦纳呆、便结不畅,舌质淡红,脉弦);肝郁脾虚证(证见胸胁胀痛、咽部有梗塞感,四肢倦怠、乏力,情绪抑郁、委靡不振或急躁易怒、善太息,食欲减退、纳呆腹胀、便溏不爽、肠鸣矢气、便溏,舌苔白,脉弦或缓弱);肝郁痰阻证(证见情绪抑郁、表情沮丧,神思迟钝、嗜卧少动、妄见妄闻,善太息,眩晕、胸胁胀闷、恶心欲呕、泛吐痰涎,苔白腻,脉弦滑);心脾两虚证(证见忧心忡忡、寡言少语,纳呆消瘦、心慌气短、神疲乏力、行动迟缓,健忘失眠,舌质淡,脉沉细无力);共计4个证型.同时接受汉密顿抑郁量表(24项版本)评估,该量表共分7类因子结构和24项症状表现,7类因子包括:躯体化、体质量变化、认知障碍、昼夜变化、迟缓、睡眠、绝望感.上述测试项目大部分分为5级(无、轻、中、重和极重度),评分为0～4分,少部分为无、轻、中度和重度3级,评分0～2分.量表评定时间相同于中医辨证诊断时间.结果:抑郁症患者149例,均进入结果分析.①中医证型分布如下:肝郁气滞型53例(35.6%)、肝郁脾虚型45例(30.2%)、肝郁痰阻型27例(18.1%)、心脾两虚型24例(16.1%).②心脾两虚型组的平均年龄明显高于其他证型患者,而肝郁脾虚型和心脾两虚型患者的平均病程明显大于其他证型患者(P均＜0.05).③汉密顿抑郁量表总分和因子分比较中,肝郁脾虚型和心脾两虚型的大部分汉密顿抑郁量表分项评分和汉密顿抑郁量表总分均明显高于肝郁气滞型、肝郁痰阻型患者以及各中医证型抑郁症总体样本(P均＜0.05～0.01).④汉密顿抑郁量表24项症状评分比较显示不同中医证型抑郁症患者之间汉密顿抑郁量表各项症状评分差异有显著性意义(P均＜0.05～0.01).⑤汉密顿抑郁量表量表24项评分高于平均样本前5位症状表现分布中,肝郁气滞型症状表现特点分别为激越、能力感减退、性症状、疑病、体质量减轻.肝郁脾虚型为精神性焦虑、躯体性焦虑、抑郁情绪、胃肠道症状、工作和兴趣.肝郁痰阻型为自知力、精神性焦虑、疑病、迟滞、能力感减退.心脾两虚型为抑郁情绪、入睡困难、能力感减退、迟滞、绝望感等症状表现.结论:各证型抑郁症患者常见情志症状与心理学量表部分条目之间有一定相关性,肝郁脾虚型和心脾两虚型患者病史较长,汉密顿抑郁量表分项评分和总分较高,有较多抑郁情绪表现和躯体症状.
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血府逐瘀汤联合激光治疗视网膜静脉阻塞
目的:观察中药方剂血府逐瘀汤联合视网膜光凝术治疗不同病程视网膜静脉阻塞患者的疗效.方法:①选择2004-04/2006-06新乡医学院第三附属医院眼科收治的视网膜静脉阻塞患者74例74眼.年龄25～76岁,平均62岁;病程5 d～3年,其中病程＜15 d者9眼,15 d～3个月41眼,～6个月7眼,～12个月4眼,～18个月6眼,～24个月5眼,～36个月2眼.②口服血府逐瘀汤(当归9 g,生地9 g,牛膝9 g,红花9 g,桃仁12 g,柴胡6 g,枳壳6 g,桔梗6 g,甘草3 g,1剂/d,2次/d)联合视网膜光凝术治疗观察临床疗效.③疗效标准:痊愈:视网膜出血、水肿全部吸收,视力提高4行以上或恢复至病前水平.视网膜荧光血管造影显示毛细血管无灌注区消失,新生血管消退或纤维化,血管渗漏消失,黄斑水肿消退.显效:视网膜出血大部分吸收,视力提高3～4行,视网膜荧光血管造影显示视网膜循环状态大部分改善.好转:视网膜出血部分吸收,视力提高1～2行,视网膜荧光血管造影显示视网膜循环状态有所改善.无效:视力提高不足1行或下降,眼底无明显改善,视网膜荧光血管造影检查同治疗前.结果:74例患者全部获得随访,随访2～9个月.①痊愈39例(53%),其中病程＜15 d 6例,15 d～3个月27例,～6个月4例,～12个月2例.②显效14例(19%),其中病程＜15 d 3例,15 d～3个月8例,～6个月1例,～18个月2例.③好转13例(18%),其中病程15 d～3个月6例,～6个月1例,～12个月1例,～18个月2例,～24个月3例.④无效8例(11%),其中病程～6个月1例,～12个月1例,～18个月2例,～24个月2例,～36个月2例.总有效率89%,病程在一年以上的患者无一例治愈,病程在3个月以内的患者无一例无效.结论:血府逐瘀汤联合视网膜光凝术治疗视网膜静脉阻塞效果显著,且病程愈短效果愈好.
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太极拳运动对老年人养生保健的作用
目的:观察太极拳运动对老年人养生保健的作用.方法:于2005-03/2006-05随机整群抽取西安市雁塔区、新城区练习太极拳的老年人50名,男25名,女25名;年龄60～65岁,平均62.8岁.心理测量:①测定视觉反应时间及动作速度.②采用具有较高信度和效度的心理问卷进行调查,分数越高心理健康水平越好.生理指标测定:①测定练习前后生理指标变化,包括每分输出量和心功能指数、收缩压、舒张压和基础脉率、呼吸频率、肺活量.②自编问卷主要了解被试的人口学资料以及一些生理状况的自评,如对运动系统、消化系统、免疫系统功能的评定.结果:对50名被试者追踪调查1年多,发放问卷50份,回收有效问卷50份,问卷有效率100%.①受试者练习后视觉反应时间、完成动作时间均明显短于练习前,差异均有显著性意义[简单反应时间分别为(36.21±2.58),(39.43±3.12)ms;复杂反应时间分别为(56.25±3.01),(60.57±2.06)ms;简单动作完成时间分别为(39.39±2.08),(42.85±2.32)ms;复杂动作完成时间分别为(38.76±2.24),(42.15±2.16)ms,P＜0.01].②受试者练习后心理健康总体水平高于练习前,差异有显著性意义[分别为(72.31±3.53),(69.56±3.20)分,P＜0.05].③受试者练习后每分输出量低于练习前,心功能指数高于练习前,差异有非常显著性意义[分别为(4.92±2.32),(5.00±2.21)L;19.40±2.58,14.58±2.36,P＜0.001].受试者练习后收缩压、舒张压和基础脉率明显低于练习前,差异有显著性意义[分别为(124.42±6.32),(143.26±5.02)mmHg;(79.81±5.48),(89.24±6.37)mm Hg;(82.55±5.63),(93.12±6.32)次/min,P＜0.01].④受试者练习后呼吸频率明显低于练习前,肺活量明显高于练习前,差异有显著性意义[分别为(16.90±2.03),(18.34±2.52)次/min;(3.94±2.54),(3.02±2.16)L,P＜0.01].⑤受试者练习后,多数老年人自觉运动系统、消化系统、免疫系统功能都有明显改善,分别有86%的老年人认为太极拳锻炼对老年人具有延缓植物神经系统衰老,96%的老年人认为对运动系统有明显改善,94%的老年人认为对消化系统有明显改善,92%的老年人认为对免疫系统功能有明显的改善.结论:太极拳对老年人的心理活动有显著改善;对老年人的神经系统、运动系统、心血管系统、呼吸系统、消化系统及免疫系统的功能有明显改善.
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人参皂甙单体Rh2对人K562白血病细胞增殖和凋亡的时效和量效分析
目的:观察人参皂甙单体Rh2对人K562细胞增殖和凋亡的影响,分析该影响的时间和剂量依赖性.方法:实验于2006-07/08在吉林医药学院临床检验系实验室完成.①取对数生长期人K562细胞制成细胞悬液,浓度1×108L-1,接种于96孔培养板内,每孔100μL,6 h后加入终质量浓度分别为6.25,12.5,25.0,50.0,100.0mg/L的人参皂甙单体Rh2 100μL(购自吉林省宏久生物科技股份有限公司),每一浓度组均设4孔.对照孔及调零孔加100μL培养液.各孔总体积均为200μL.在加药后48 h采用四甲基偶氮比色法检测各孔中细胞的抑制率.在接近于半数抑郁浓度的人参皂甙单体Rh2处理作用于细胞6,12,24,48和72 h后采用四甲基偶氮唑盐比色法计算抑制率.②在倒置显微镜下观察加药与未加药孔K562细胞形态.③常规苏木精-伊红染色,检测25.0 mg/L人参皂甙单体Rh2作用0,12,24和48 h后K562细胞的凋亡率,并观察人参皂甙单体Rh2质量浓度分别为0,12.5,25.0,50.0,100.0 mg/L时,培养24 h后的细胞凋亡率.结果:①人参皂甙单体Rh2对K562细胞生长抑制作用:当人参皂甙单体Rh2质量浓度为6.25,12.5,25.0,50.0和100.0mg/L时,抑制率逐渐升高,呈现明显剂量依赖性.人参皂甙单体Rh2对K562细胞的半数抑制浓度为25.8 mg/L,处理K562细胞6,12,24,48,72 h后细胞抑制率逐渐升高,且后4个时间点明显高于处理6 h时(t=11.79～50.89,P＜0.01).②人参皂甙单体Rh2对K562细胞形态的影响:细胞经人参皂甙单体Rh2作用后呈现出明显的凋亡细胞形态,细胞分散,体积缩小,胞浆浓缩,细胞核膜消失,细胞核断裂呈小块或碎片状,但细胞膜较完整并可见凋亡小体.③人参皂甙单体Rh2对K562细胞凋亡的影响:在25.0mg/L人参皂甙单体Rh2作用K562细胞0,12,24和48 h后,K562细胞的凋亡率依次升高,分别为(3.8±0.5)%,(9.4±1.1)%,(23.2±2.2)%和(34.5±3.5)%(与作用0 h比较,t=8.78～20.06,P＜0.05～0.01).人参皂甙单体Rh2质量浓度分别为0,12.5,25.0,50.0,100.0mg/L培养K562细胞24 h,细胞凋亡率依次升高,分别为[(3.7±0.6)%,(9.4±1.3)%,(21.2±2.1)%,(28.5±2.5)%,(31.8±3.4)%,与0 mg/L人参皂甙单体比较,t=9.39～18.54,P＜0.01].结论:人参皂甙单体Rh2能抑制体外培养的K562细胞增殖并诱导其凋亡,且呈时间和剂量依赖性.
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补肾祛寒通络法治疗膝骨关节炎:随机对照
背景:骨关节炎属中医学"骨痹"范畴,多因肝肾不足、气血亏损、损伤和感受风寒湿邪所致,肾虚寒凝型为骨关节炎的常见证型.目的:观察补肾祛寒通络法治疗肾虚寒凝型膝骨关节炎的临床疗效.设计:随机对照临床实验.单位:广东省东莞市石龙人民医院中医科.对象:于2005-06/2006-07本院风湿专科和骨科门诊及住院的肾虚寒凝型膝骨关节炎患者,以有可能在实验中获益的患者为目标,纳入88例.采用单纯随机分组方法,分为实验组44例,男21例,女23例,年龄42～70岁,平均(62±8)岁,平均病程(34±18)个月;对照组44例,男24例,女20例,年龄40～69岁,平均(61±7)岁,平均病程(34±16)个月.方法:实验组采用补肾祛寒通络中药内服及中药外洗.补肾祛寒通络中药:胡桃肉12 g,补骨脂12g,炒杜仲12 g,熟地15 g,大茴香9 g,络石藤15 g,制川乌9 g,三七6 g,蜈蚣3 g,鸡血藤15g.外洗方:透骨草40 g,当归15 g,苏木15 g,生大黄15 g,生南星10 g,乳香10 g,没药10 g,冰片3 g.(内服,以37℃温开水100 mL冲服,1剂/d.外洗以100℃开水500mL溶化,待水温降至35℃时外洗双膝部,1剂/次,2次/d).对照组采用硫酸葡萄糖胺(商品名维骨力胶囊,每个胶囊含硫酸葡萄糖胺晶体314mg,相当于含硫酸葡萄糖胺250mg),2粒/次,3次/d.吡罗昔康(商品名炎痛喜康片)口服,20 mg/次,1次/d.2组疗程均为12周.参照WOMAC骨关节炎指数及骨关节炎临床疗效判定标准,比较两组疗效.主要观察指标:两组WOMAC疼痛积分、僵硬积分、生理功能积分、总积分和临床疗效.结果:88例患者全部进入结果分析.①实验组和对照组治疗后患者的WOMAC疼痛指数、关节僵硬指数、生理功能指数、总指数评分均较治疗前有显著降低,差异有显著性意义(实验组:4.95±2.46,11.39±4.10;0.70±0.88,1.57±1.42;13.16±5.71,31.16±10.08;18.82±7.96,44.11±13.29;对照组:6.64±1.81,11.59±3.07;0.68±0.86,1.52±1.34;14.25±3.99,31.89±8.49;21.57±5.35,45.00±10.73;P＜0.05).②治疗后实验组WOMAC疼痛指数低于对照组,差异有显著性意义(P＜0.05),两组WOMAC关节僵硬、生理功能指数评分值比较差异无显著性意义(P＞0.05),其余各指标差异无显著性意义(P＞0.05).③实验组总有效率93.2%,对照组总有效率95.5%,两组比较无显著意义(P＞0.05).④对照组实验过程中,有3例患者出现胃肠道反应,坚持用药症状未加剧;实验组未见不良反应.结论:补肾祛寒通络法中药内服加外洗治疗肾虚寒凝型膝骨关节炎可取得满意疗效,止痛效果尤佳.
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鲑鱼降钙素配合康复疗法治疗腰椎管狭窄症
目的:观察鲑鱼降钙素配合传统综合康复疗法治疗椎间盘突出所致腰椎管狭窄症的有效性和安全性.方法:①选择2004-01/2005-12在解放军第二军医大学长海医院康复医学科和克拉玛依市中心医院康复医学科门诊就诊的80例腰椎管狭窄症患者,按病例号奇偶数分别编入对照组和观察组,各40例.②对照组给予常规康复治疗,采用卧位骨盆牵引治疗、磁热振治疗、低周波治疗3种方法,共治疗6周.观察组在此基础上给予鲑鱼降钙素注射治疗,使用方法:50 IU肌注,1次/d,共14 d,继续50 IU肌注,隔日1次,共28 d,共治疗6周.③治疗后对两组患者疼痛情况、腰部活动范围、跛行状况、下肢反射、日常生活能力进行评定.结果:80例患者均进入结果分析.①视觉模拟量表疼痛评分:观察组低于对照组(0.78±0.76,1.53±1.51),差异有显著性意义(P＜0.05).②腰部活动范围:观察组大于对照组[屈:(2.65±0.48)°,(2.40±0.49)°;伸:(2.80±0.41)°,(2.40±0.55)°],差异有显著性意义(P＜0.05).③跛行评分:观察组高于对照组(4.65±1.35,3.45±0.99),差异有显著性意义(P＜0.001).④下肢反射评分:观察组略低于对照组(膝:0.85±0.36,0.90±0.30;跟踺:0.85±0.36,0.95±0.22),差异无显著性意义(P＞0.05).⑤功能独立性量表评分:观察组略高于对照组(123.73±3.97,122.35±5.04),差异无显著性意义(P＞0.05).⑥治疗过程中有3例出现轻度不良反应,症状轻微未影响治疗正常进行.结论:鲑鱼降钙素具有能迅速减轻腰椎管狭窄症状的作用,尤其是减轻疼痛作用明显,副反应轻微.
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手法治疗相反型腰椎间盘突出症患者20例
目的:观察相反型腰椎间盘突出症患者经冯氏手法复位后的治疗结果.方法:选择1993-11/2005-04在解放军空军总医院正骨科就诊,经临床及影像学确诊的腰椎间盘突出症患者75例,按腰椎间盘突出方向与下肢症状的关系分为2组,即相反型组20例,普通型组55例,两组患者均知情同意.相反型组患者下肢症状与腰椎间盘突出方向相反,普通型组患者下肢症状与腰椎间盘突出方向相同.①用手法触诊检查确定腰椎棘突偏歪方向.②X射线腰椎正侧位片及CT或MRI检查.③应用冯氏手法对两组患者进行复位治疗,手法复位每3～5 d进行1次,10次为1个疗程,1个疗程后即可进行疗效评定,这期间可配合腰部理疗.手法复位后3 d内禁止患者作腰部的旋转动作,以保证复位椎体周围软组织的修复.疗效评定标准:①显效:症状大部分消失,直腿抬高试验超过70°,可恢复原工作.②好转:症状部分消失,直腿抬高较治疗前显著改善,可担任较轻工作.有效率=(显效例数+好转例数)/总例数.结果:75例患者全部进入结果分析,无脱落.①相反型组患者的腰椎影像学变化:棘突偏歪和腰椎间盘突出方向相反.②两组患者治疗1个疗程后的疗效比较:相反型组有效率为95%,普通型组有效率为98.2%,两组相比差异无显著性意义(P＞0.05).结论:冯氏手法是治疗相反型腰椎间盘突出症的有效方法之一,与同侧腰椎间盘突出导致下肢症状患者经冯氏手法治疗的结果无明显差异.
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电针刺激厌恶治疗酒依赖的临床疗效评价
目的:评估电针刺激厌恶疗法治疗酒依赖的疗效.方法:于2006-04/07在四川大学华西医院心理卫生中心住院患者中随机选择35例男性患者,均符合CCMD-3酒依赖的诊断标准,且自愿参加本实验,无电针刺激厌恶治疗禁忌证.平均年龄(41.4±8.2)岁,平均饮酒年限(21.3±8.0)年,平均日饮酒量350～1 200 mL(乙醇含量50～60 mL/L).采用简单随机方法随机分为电针刺激厌恶治疗组20例及对照组15例.两组在年龄、性别、种族及饮酒史方面差异无显著性意义.应用汉密顿焦虑量表评价患者的焦虑症状(其评分为0～4分,5级:0-无症状,1-轻,2-中等,3-重,4-极重).自编饮酒渴求程度量表评估患者饮酒渴求程度(包括想到酒、看见酒、闻到酒及其他触发事件共4项,每项以0～7分评定(0=无,7=经历过的高渴求程度,总分28分).入院后第1周,两组均接受生理性脱毒治疗,包括苯二氮(艹卓)类药物及对症支持治疗.第2周开始,两组均进行饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分并参加团体心理治疗.电针刺激厌恶治疗组同时接受1个疗程的电针刺激厌恶治疗:治疗所用仪器为韩氏穴位刺激仪,治疗时将电极安放在前臂,将电流从小到大逐渐增加,直至患者难以忍受,再取其1/4的值为基本电流,治疗中视患者反应可略加调整;选择单一的饮酒行为作为目标行为.治疗开始时给患者呈现其既往常饮用的酒(种类、浓度及酒具应与平时一致),令其想象一个饮酒情境,当患者饮酒欲望出现时,立即给予电刺激,电流强度以求助者出现不愉快情绪体验及相应生理反应为宜,每次持续电刺激10 min,然后休息5 min,再重复进行1次前述操作;在治疗过程中应予言语暗示增强其厌恶体验.电针治疗1次/d,10次为1个疗程.电针治疗疗程结束后比较两组的饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分.结果:35例患者均进入结果分析.①两组住院第2周时饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分差异不显著.②两组治疗后的饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分与治疗前比较均降低,治疗后电针刺激厌恶治疗组饮酒渴求程度及汉密顿焦虑量表评分均低于对照组[治疗前:饮酒渴求程度评分:19.75±1.86,20.27±2.46,汉密顿焦虑量表评分:17.90±4.05,18.60±4.21;治疗后:饮酒渴求程度评分:1.45±1.28,4.27±3.03,汉密顿焦虑量表评分:2.45±2.46,6.33±4.37,P＜0.001,P＜0.005].③出院后2个月随访中,电针刺激厌恶治疗组有4例复饮,复饮率20.0%,对照组有5例复饮,复饮率33.3%,两组复饮率差异不显著.结论:电针刺激厌恶治疗可有效消退饮酒行为,复饮率倾向于更低.酒依赖的理想心理治疗方案应在其他治疗模型的基础上加以电针刺激厌恶治疗.
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腰椎定点牵扳疗法与银质针导热疗法治疗腰椎间盘突出症的互补作用
目的:观察腰椎定点牵扳疗法与银质针导热疗法治疗腰间盘突出症的互补作用.方法:于2002-02/2005-08选择解放军总医院康复医学科诊治的均由CT扫描或MRI检查确诊的腰椎间盘突出症患者240例.随机数字表法分成3组:腰椎定点牵扳组,银质针导热组,腰椎定点牵扳及银质针导热联合组,每组80例.腰椎定点牵扳组采用腰椎定点牵扳疗法,对间盘突出节段施行该疗法,1次/周,共做2次;银质针导热组采用银质针导热疗法对腰部和臀部软组织病变部位施行银质针导热疗法,1次/周,共2次;腰椎定点牵扳及银质针导热联合组为两种疗法的联合使用:腰椎定点牵扳疗法1周后对腰、臀部软组织病变部位分两次施行银质针肌肉导热疗法.比较各组患者治疗前、治疗后3个月和6个月疼痛数字评分及治疗后3个月的临床体征改善情况及疗效结果.疗效评定标准:①症状消失:腰腿疼痛消失,临床体征均转为阴性,可恢复工作.②有效:腰腿疼痛基本消失,临床体征2～3项转为阴性,可作轻工作.③好转:腰腿疼痛减轻,临床体征有1项转为阴性,尚需继续治疗.④无效:治疗前后疼痛与体征无变化.结果:所有患者均完成治疗和指标评定,全部进入结果分析.①治疗后3个月腰椎定点牵扳组、银质针导热组、腰椎定点牵扳及银质针导热联合组疼痛数字评分值与治疗前相比均有降低,而联合组更为明显(t=8.52P＜0.01).治疗后6个月,各组病例的疼痛症状大多数获得控制,以联合组更为明显(t=7.08,P＜0.01).其中银质针导热组和腰椎定点牵扳组、腰椎定点牵扳及银质针导热联合组与银质针导热组相比差异均有显著性意义(t=9.09,9.82,P＜0.05).②治疗后3个月各组临床体征均较治疗前明显改善,尤其是直腿抬高试验阳性率,治疗3个月后联合组与银质针导热组,联合组与腰椎定点牵扳组相比差异均有非常显著性意义(χ2=9.27,9.04,P＜0.01),而银质针导热组与腰椎定点牵扳组相比差异无显著性意义(χ2=11.51,P＞0.05).③银质针导热组、腰椎定点牵扳组、联合组的有效率(痊愈及有效)分别为72%,73%和88%,联合组与银质针导热组、联合组与腰椎定点牵扳组相比差异有非常显著性意义(χ2=6.31,6.13,P＜0.01).结论:腰椎定点牵扳疗法具有解除肌肉痉挛,松解神经根粘连;银质针导热疗法则有消除椎管内外软组织无菌性炎症、改善血供和松解肌肉的作用.两种疗法治疗腰间盘突出症具有互补性.
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螺旋CT三维重建棘突顶线骨性标志及其在脊柱手法诊治中的意义
目的:利用螺旋CT脊柱三维重建软件重建棘突顶线,并与手法医师触诊结果进行对照.方法:于2005-02/11选取空军总医院接受CT检查者54例,其中因腰部疼痛接受检查29例,因体检或接受腹部CT检查25例.①手法触诊受检者L1～5棘突,记录顶线长度并于皮肤表面标记棘突顶线走行与双侧髂嵴高点连线的垂直线的关系(顺时针、逆时针或重合).②采用三维重建软件进行1.5 mm重建,1.3 mm重叠,观察矢状位、轴位、重建后后前位棘突顶端形态,利用三维重建软件在每个棘突顶端(矢状位、轴位均接近体表)1点及其上、下(在手法治疗医师所记录的顶线长度内)各任取1点,并观察3点在三维重建后棘突顶端的位置关系.结果:①手法医师触诊感觉棘突顶线是每个棘突上下角之间骨性标志,呈一条直线.并可描述顶线与双侧髂嵴连线的垂直线重合或顺、逆时针旋转,有无肿胀钝厚感等.②螺旋CT扫描三维重建:在每个棘突顶端(矢状位、轴位均接近体表)1点及其上、下(在手法治疗医师所记录的顶线长度内)各任取1点,可以将棘突顶线标记在重建后的棘突顶端.③三维重建顶线与2名临床医师所记录棘突顶线走行吻合率分别为99.2%,98.5%,客观地反映了手法医师所触诊的棘突顶线.结论:①螺旋CT三维重建软件将棘突顶线标记在三维重建椎体棘突上,成功的显示了手法医师所触及的棘突顶线走向,棘突顶线是手法医师所能触及到的棘突顶端接近背部皮肤的骨性结构,是客观存在并能为影像学所显示记录.②三维重建棘突顶线为脊柱手法诊断、治疗、机制探讨、学术交流及方法传播提供了一种新的更为客观及标准化的平台.
