中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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茶多酚对D-半乳糖与Aβ25～35诱导脑神经细胞凋亡的保护效应
背景:有研究表明茶多酚对β淀粉样蛋白、6-羟多巴和氧化性物质诱致海马神经细胞的神经毒性具有保护作用,临床初试表明其对老年性痴呆高危人群认知功能减退具有一定的防治作用,但其作用靶点及作用机制仍是研究的热点.目的:观察茶多酚干预D-半乳糖与Aβ25～35诱致小鼠脑神经细胞凋亡作用.设计:随机对照动物实验.单位:暨南大学药学院药理教研室.材料:实验于2004-09/2005-01在暨南大学医学实验中心完成.选用90只2月龄健康昆明种小鼠,雌雄各半,体质量26～28 g.由广东省医学实验动物中心提供.茶多酚(浙江东方茶业科技公司,批号:20040203);D-半乳糖(上海试剂二厂,批号:20030708);Aβ25～35(Sigma,批号:13/01/2004);维生素E(上海信谊药厂,批号:20030708).方法:实验干预:按体质量将小鼠随机分为6组:假手术组(n=17),模型组(n=16),维生素E组(n=16),茶多酚低剂量组(n=13),茶多酚中剂量组(n=14)、茶多酚高剂量组(n=14).除假手术组外,小鼠均皮下注射D-半乳糖,120mg/(kg·d),连续给药至第12周,并在第7周时,于侧脑室缓慢注射4 nmol Aβ25～35.假手术组小鼠侧脑室内注射等容积的人工脑脊液.各组药物处理于造模后第1周开始,假手术组和模型组给予蒸馏水,维生素E组给予100 mg/kg维生素E,茶多酚低、中、高剂量组分别给予100,250,625 mg/kg,给药方式均为灌胃,容量均为10 mL/kg,连续给药12周.实验评估:给药后各组分别采用LW-Ⅱ型水迷宫仪测定小鼠学习记忆情况;分别取动物脑、肝脏组织和血清测定超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量;Fura-2/AM负载法测定小鼠红细胞内和脑神经元细胞浆钙离子浓度;流式细胞仪检测各组小鼠脑神经细胞凋亡.主要观察指标:①小鼠学习记忆情况.②血清、肝脏和脑组织内超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量.③各组红细胞内和脑神经元细胞浆内钙离子水平变化.④小鼠脑神经细胞凋亡情况.结果:纳入大鼠90只均进入结果分析.①药物处理12周后,茶多酚中、高剂量组和维生素E组的小鼠游出迷宫时间短于模型组,进入迷宫盲端的错误次数较模型组减少,差异均有统计学意义(P＜0.05～0.01).②茶多酚中、高剂量组超氧化物歧化酶活性较模型组有所增高,茶多酚高剂量组丙二醛含量较模型组有所降低,差异有统计学意义(P＜0.05～0.01).③茶多酚中、高剂量组和维生素E组红细胞内和脑神经元细胞浆钙离子浓度均低于模型组,差异有统计学意义(P＜0.05～0.01).④茶多酚各剂量组神经细胞凋亡率均低于模型组,差异有显著性意义(P＜0.05).结论:茶多酚具有抑制D-半乳糖与Aβ25～35诱致脑神经细胞凋亡作用,并明显改善摸型小鼠学习记忆能力,其作用可能与提高全身性抗氧化能力,改善氧化应激损伤引起的细胞内钙超载有关.
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肺缺血再灌注损伤模型大鼠肺组织细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达的动态变化
背景:肺缺血再灌注损伤过程中肺组织细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达的动态变化及其可能的作用机制有待观察.目的:观察大鼠肺缺血再灌注损伤中肺组织细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达的动态变化,并分析细胞凋亡在肺缺血再灌注损伤中作用及可能机制.设计:随机对照动物实验.单位:南京医科大学附属南京第一医院急诊中心.材料:实验于2006-04/2006-09在南京医科大学附属南京第一医院动物实验室及南京市放射免疫检测中心完成.选用28只雄性健康清洁级SD大鼠,体质量250～350 g,鼠龄49～76 d,由南京医科大学实验动物中心提供.随机数字表法将大鼠分为实验组及对照组,每组14只.方法:①实验干预:实验组大鼠参照Eppinger等的方法进行建立肺缺血再灌注模型,大鼠给予阻断肺门45 min(观察肺无舒缩为阻断标准),再开放3,6 h(再灌注以肺恢复舒缩为标准)后取材,每次取7只,对照组仪行开胸术,于相同时间点同样方法分离肺组织.②实验评估:采用Annexin-V-PI双染法通过流式细胞仪检测肺组织凋亡细胞,计算凋亡率;采用免疫组织化学法及图像分析法观察肺脏天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的表达;计算2组大鼠左肺湿干质量比;计算肺泡损伤数比值进行肺组织损伤定量评价;光镜下苏木精-伊红染色观察肺脏的病理形态学变化.主要观察指标:①肺组织细胞凋亡率及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3的表达.②肺湿干质量比及肺组织损伤定量评价结果.③肺组织病理形态学变化.结果:纳入大鼠28只均进入结果分析,无脱落.①实验组肺缺血再灌注3,6 h肺组织细胞凋亡率较对照组有明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01),实验组缺血再灌注6 h凋亡率较3 h有所降低(P＜0.05).②实验组大鼠肺组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达3 h达到高,6 h稍有下降,较对照组各时间点表达增加(P＜0.01).③实验组肺缺血再灌注3,6 h肺泡损伤数比值及肺脏湿干质量比值较对照组均明显增加(P＜0.01).实验组缺血再灌注6 h两比值较3 h有所增加(P＜0.05).④实验组肺泡结构破坏、塌陷、消失,肺泡间隔有大量的炎性细胞浸润,肺缺血再灌注6 h较3 h更严重.对照组无明显改变.结论:肺缺血再灌注早期可能通过天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3表达的改变,激活细胞的凋亡途径,诱导肺组织细胞凋亡的发生,从而导致肺损伤的发生.
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仰卧和俯卧位心脏对煤尘肺患者肺组织体积与功能的影响
目的:观察仰卧位和俯卧位心脏对煤尘肺患者肺组织体积和肺功能的影响,为临床应用俯卧位治疗成人呼吸窘迫综合征等肺部疾病提供依据.方法:2006-08/2007-01河南鹤煤集团公司总医院放射科对10例煤尘肺患者行仰、俯卧位高分辨螺旋CT扫描,分别测量位于心脏下方肺组织的体积,测量仰、俯卧位状态下肺功能,用配对t检验进行统计学分析.结果:10例患者均进入结果分析.①CT扫描心脏压迫下的肺组织体积:俯卧位时均小于仰卧位[左肺:(7.74±9.55),(242.60±72.11)mm3;右肺:(12.21±11.41),(156.49±76.54)mm3,P均＜0.01].②肺功能测量结果:仰卧位时,患者的用力肺活量、第1秒用力呼气容积、第1秒用力呼气容积预计值百分率、大呼气量,分别为(2.14±0.56)L、(1.62±0.79)L、(89.80±29.26)、(3.42±1.98)L/s;俯卧位时,患者的用力肺活量、第1秒用力呼气容积、第1秒用力呼气容积预计值百分率、大呼气量,分别为(2.36±20.79)L、(1.80±0.77)L、(100.10±22.46)、(4.30±2.37)L/s.俯卧位时肺功能明显优于仰卧位(P＜0.05).结论:俯卧位时位于心脏下方的肺组织明显减少,可显著改善人体的肺换气功能.
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柯萨奇病毒致小鼠心肌损害的组织形态学变化
目的:观察柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌组织的病理特点及胶原蛋白的表达情况.方法:实验于2004-10/2006-04在广西医科大学医学科学实验中心完成.①实验分组:选择80只Balb/c纯种雄性小鼠,鼠龄4～6周,随机分为对照组20只和模型组60只.②实验方法:模型组小鼠腹腔注射柯萨奇B3 Nancy株悬液0.1 mL,对照组腹腔注射不含病毒的Hep-2细胞冻存液0.1 mL.模型组小鼠分别于接种柯萨奇B3后第7,14,28和42天麻醉后断颈处死10只,10只,10只和9只,颈动脉采血0.8～1.0 mL,保存血清;摘取心脏,浸泡于4%多聚甲醛溶液中;对照组20只小鼠于42 d后采用上述方法处死,并留取血清及心脏.③实验评估:检测血清CVB3中和抗体滴度;心肌组织切片苏木精-伊红染色后,光镜下观察组织形态学改变;免疫组化法检测心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达情况.结果:①行为学变化及死亡情况:模型组于接种后第3天出现行为学改变,第12天后症状逐渐缓解;从第4天开始发生死亡,第7～10天为死亡高峰期,第12天后无死亡,总死亡率为35%(21/60).②血清柯萨奇B3中和抗体滴度:模型组各时间点血清柯萨奇B3中和抗体滴度均高于对照组(P＜0.01),以第7天滴度为高.③心肌组织形态学特点:接种病毒后7 d,心肌组织出现多灶性凝固性坏死,大量炎细胞浸润;28 d后,坏死灶周围的炎细胞已近消失,代之以增殖的成纤维细胞.④心肌组织病理积分:模型组各时间点心肌病理积分均明显高于对照组,其中第7天增高为显著(P＜0.05).⑤心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达:模型组各时间点心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均明显增加,以第42天为显著(P＜0.01);第7天和第14天小鼠心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原比值与对照组之间无显著性差别(P＞0.05),而第28天和第42天则显著高于对照组(P＜0.05).结论:采用腹腔注射柯萨奇B3 Nancy株悬液的方法可以成功构建病毒性心肌炎小鼠模型.病理表现为急性期心肌细胞大量坏死,伴多种炎细胞浸润,胶原蛋白表达活跃;缓解期,成纤维细胞大量增殖,胶原蛋白表达持续增高,终导致心肌间质重构.
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力竭运动大鼠心室肌蛋白质组表达特征
目的:采用蛋白质组学技术,建立安静和递增运动负荷训练后力竭大鼠心室肌蛋白质组的差异性表达谱,初步筛选出心室肌对力竭运动产生反应的目标蛋白质.方法:实验于2007-03在湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学与蛋白质组学国家教育部重点实验室和省级运动人体科学实验室完成.①实验分组:10只SD雄性大鼠随机分为对照组和运动组,每组5只.②实验方法:运动组经过7周的大强度递增运动负荷训练后(后一次力竭),对两组心室肌组织的全蛋白进行双向凝胶电泳分离.结果:经图像分析,在运动组的电泳图谱上共展现蛋白质点(338±17)个,对照组展现蛋白质点(352±17)个.运动后差异表达的蛋白质点共有99个.对其中差异表达的9个蛋白质点进行质谱鉴定,共鉴定出7个蛋白质,Stress-70 protein,NADH-ubiquinone oxidoreductase Mr75 000 subnunit,Long-chain specific acyl-CoA dehydrogenase,Tropomyosin-1 alpha chain在运动后"缺失",Nitrilase family,member 2在运动后表达上调在5倍以上,一个相对分子质量为21 000的未知蛋白在运动后表达下调在5倍以上,另外有两个点经鉴定均为Myosin-6,在运动后表达量相反.这些蛋白质属于收缩蛋白、能量代谢酶、分子伴侣等.结论:递增运动负荷训练后力竭时,大鼠心室肌蛋白质组明显地发生了反应.运动后"缺失"和下调的蛋白质点与心肌收缩的调控和能量代谢的方式转变以及细胞的应激反应有关,其中,成功筛选出6种在运动医学领域尚未涉足的、具有运动应激特点的目标蛋白质.
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SARS患者康复期淋巴细胞功能状态及T细胞受体Vβ24个亚家族表达的格局
背景:严重急性呼吸道综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)是由SARS相关冠状病毒感染引起的急性传染性疾病.但目前其康复期患者细胞免疫状态仍有待进一步研究.目的:观察SARS患者康复期淋巴细胞功能状态和T细胞受体(TCR)Vβ24个亚家族表达的格局.设计:前后对照观察.单位:广东省中医院中心实验室.对象:选择2003-01/04在广州中医药大学第二附属医院收治的76例治愈的SARS患者,全部病例均符合"非典型肺炎的临床诊断标准"、"非典型肺炎重症病例诊断标准、出院标准"及《中医临床诊疗术语证候部分》的诊断标准,男30例,女46例,平均(32±11)岁.选择10名同期健康到院体检者,女5名,男5名,平均(32±7)岁,所有受试对象对检测项目知情同意.方法:①TCR Vβ 24个亚家族的表达检测:取受试对象全血2 mL,用EDTA-K2抗凝管抗凝.在流式细胞术检测专用管中,分别加入各种荧光素标记的mAb:抗CD3、抗CD4、抗CD8、抗CD25、抗CD28、抗HLA-DR、PC5-抗CD3mAb、TCR Vβ1 (PE+FITC)、Vβ2(PE+FITC)、Vβ3(FITC)、Vβ4(PE+FITC)、Vβ5.1(PE+FITC)、Vβ5.2(PE),Vβ5.3(PE)、Vβ7.1(PE+FITC)、Vβ7.2(FITC)、Vβ8(FITC)、Vβ9(PE)、vβ11(PE)、Vβ12(FITC)、Vβ13.1(PE)、Vβ13.2(PE)、Vβ13.6(PE+FITC)、Vβ14(FITC)、Vβ16(FITC)、Vβ17(PE+FITC)、Vβ18(PE)、Vβ20(FITC)、Vβ21.3(FITC)、Vβ22(PE+FITC)和Vβ23(PE)10 μL,然后加入抗凝血50 μL.混匀后,于室温避光孵育15 min,再加入溶血素溶血、洗涤.后将沉淀溶在300 μL PBS中,用Coulter ESP流式细胞仪进行检测.②T细胞亚群,T、B细胞的活化状态及Ts细胞和Tc细胞百分率的检测:每次收集5 000个细胞,用仪器所带软件分别计算T细胞亚群(CD3、CD4和CD8)、活化的T、B细胞(CD3+/ CD25+、CD3+/HLA-DR+、和CD3-/HLA-DR+)、Ts细胞和Tc细胞(CD8+/CD28+、CD8+/CD28-)的百分率.主要观察指标:①T细胞亚群(CD3、CD4和CD8)的表达.②活化的T、B细胞(CD3+/CD25+、CD3+/HLA-DR+、和CD3-/HLA-DR+)的表达.③Ts细胞和Tc细胞(CD8+/CD28+、CD8+/CD28-)的百分率.④TCR Vβ 24个亚家族的表达.结果:所有受试对象均进入TCR Vβ 24个亚家族检测结果分析,74例SARS患者及健康对照者10名均进入其余检测结果分析.①T细胞亚群的检测结果:CD4+细胞的百分率均数低于参考值[(33.33±6.64)%,(43±9)%.P＜0.01],CD8+细胞的百分率高于参考值[(34.07±6.40)%,(30±9)%,P＜0.01].②活化的T、B细胞表达检测:表达HLA-DR的T、B细胞增加,而表达CD25的T细胞减少.有53例CD25+细胞的百分率低于正常参考值,有64例CD3+/CD25+ T细胞的百分率低于正常参考值.只有CD3+/HLA-DR+和CD3_/HLA-DR+细胞的百分率高于正常参考值,其中表达CD3+/HLA-DR+的T细胞增加36例,表达CD3-/HLA-DR+的T细胞增加30例.③Ts细胞和Tc细胞的百分率:Ts细胞(CD8+/CD28-)的百分率较参考值增高[(28.75±7.31)%,(15.99±5.1)%,P＜0.01];Tc细胞(CD8+/CD28+)的百分率则低于参考值[(5.99±3.60)%,(13.2±4.1)%,P＜0.01].其中有39例Tc细胞的百分率降低,有48例Ts细胞的百分率升高,CD4+与CD8+T细胞的比值均在正常参考值范围内.④TCR Vβ24个亚家族表达:康复期SARS患者TCR Vβ24个亚家族表达中,TCR Vβ14的表达高,TCR Vβ5.3、和23表达次之,出现TCR Vβ24个亚家族表达的不同.正常对照组中只有TCR Vβ14表达高,与SARS患者的结果相一致,但TCR Vβ 24个亚家族的分布格局不同.两组进行比较,Vβ1、Vβ5.2、Vβ5.3、Vβ7.2、Vβ9、Vβ11、Vβ13.1、Vβ13.2、Vβ17、Vβ18、Vβ22和Vβ23的表达差异显著,康复期SARS患者组均高于正常对照组(P＜0.05-0.01).结论:康复期SARS患者CD8+CD28- T细胞数的升高可导致CD8+ T细胞数升高;而Ts细胞数的增加,因其分泌的抑制因子增多,从而造成CD3+和CD4+ T细胞数降低.SARS患者康复期TCR Vβ 24个亚家族在T细胞上的表达不同.CD3+/HLA-DR+和CD3-/HLA-DR+ T细胞数的升高,可能与T、B细胞的活化较晚有关.
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不同饮食条件糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及诱生型一氧化氮合酶的表达
目的:观察不同饮食条件下,糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及诱生型一氧化氮合酶的表达.方法:实验于2004-09/2005-10在新疆医科大学完成.①实验分组:Wistar雄性大鼠60只,随机分为高脂喂养糖尿病组、非高脂喂养糖尿病组和正常对照组,每组20只.②实验方法:高脂饮食糖尿病组大鼠以高脂饲料喂养1个月造模,自由饮水,禁食12 h,将链脲佐菌素冰浴下按10 g/L溶于柠檬酸缓冲液,以25 mg/kg注入精索静脉.非高脂饮食喂养糖尿病组大鼠正常饲料喂养1个月后造模,自由饮水,禁食12 h,链脲佐菌素冰浴下按10 g/L溶于柠檬酸缓冲液,将制得的链脲佐菌素溶液以60 g/L标准给予一次性腹腔内注射.两组大鼠于注射后第7天用血糖仪测定血糖,以不同时间空腹血糖均大于13 mmol/L为糖尿病模型成功标准.正常对照组采用相同剂量的柠檬酸缓冲液注射.分别喂养至3个月时采静脉血5 mL,麻醉后处死大鼠解剖取心肌组织,进行各项指标测定.③实验评估:血胰岛素用放免法测定,血游离脂肪酸、一氧化氮含量用721分光光度计测定,三酰甘油、胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平采用全自动生化分析仪测定.用比色法测定心肌组织一氧化氮含酶活性,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡率.结果:60只大鼠均进入结果分析.高脂喂养糖尿病组血糖、一氧化氮、游离脂肪酸、心肌诱生型一氧化氮合酶活性及心肌细胞凋亡百分率均高于非高脂喂养糖尿病组(P＜0.05).高脂喂养糖尿病组和非高脂喂养糖尿病组上述指标高于正常对照组(P＜0.05).结论:糖尿病大鼠易发生心肌损害,主要表现为心肌细胞凋亡率增加,诱生型一氧化氮合酶的表达增加、一氧化氮水平升高;高脂因素进一步增加上述指标变化.
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急性心肌梗死大鼠心肌乙酰胆碱酯酶活性的变化
目的:观察大鼠急性心肌梗死后心肌中乙酰胆碱酯酶活性的变化.方法:实验于2004-10/2005-04在哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室完成.①实验方法:选择雄性Wistar大鼠68只,采用结扎左冠状动脉前降支的方法制备大鼠心肌梗死及假手术(穿线后不结扎冠状动脉)模型.②实验分组:将术后存活的53只心肌梗死大鼠按随机数字表法分为心肌梗死后3,7,30 d组各9,10,10只,将假手术大鼠24只做为各组的对照组,每组8只.③实验评估:从各组大鼠梗死中心、梗死周边、室间隔和右室取材,检测不同部位心肌中乙酰胆碱酯酶活性的变化.结果:存活的53只大鼠均进入结果分析.①心肌梗死后3 d时,梗死中心区、梗死周边和室间隔中乙酰胆碱酯酶活性明显高于假手术组[分别为(14.12±3.55),(1.50±0.75)μkat/g;(16.59±7.17),(0.92±0.22)μkat/g;(8.64±4.02),(2.43±1.63)μkat/g],差异有显著性意义(t=3.168,3.367,P＜0.01,t=2.817,P＜0.05).②心肌梗死后7 d时,梗死中心区、梗死周边心肌中乙酰胆碱酯酶活性明显低于心梗后3 d组[分别为(7.13±2.50),(14.12±3.55)μkat/g;(7.45±1.42),(16.59±7.17)μkat/g],但仍明显高于假手术组,差异有显著性意义(t=2.732,2.176,P＜0.01);室间隔及右室中乙酰胆碱酯酶活性仍明显高于假手术组(P＜0.01,P＜0.05).③心梗后30 d时,梗死中心区和梗死周边乙酰胆碱酯酶活性较心梗后3 d组进一步降低[分别为(4.55±1.17),(7.13±2.50)μkat/g;(5.83±1.55),(7.45±1.42)μkat/g],差异有显著性意义(t=2.653,2.763,P＜0.05),梗死周边、室间隔、右心室中乙酰胆碱酯酶活性仍高于假手术组(P＜0.05).结论:心肌梗死后不同部位心肌中乙酰胆碱酯酶的活性具有不同的变化特点,提示心肌中乙酰胆碱酯酶的检测不仅是评价迷走神经活性的指标,可能也是一个较好的评价迷走神经支配的方法.
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凝血酶敏感蛋白1对人肝癌细胞株HCCLM3生长和黏附的作用
目的:观察凝血酶敏感蛋白1对人肝癌细胞株HCCLM3的生长抑制和黏附的作用.方法:实验于2006-05/2007-01在河南省高等学校省级开放实验室完成.①采用浓度为2×107L-1的HCCLM3对数生长期单细胞悬液接种培养后,采用MTT法检测凝血酶敏感蛋白1对HCCLM3的生长抑制作用.②对数生长期的HCCLM3细胞株接种于纤黏连蛋白覆盖的96孔板后,按照处理因素分组:空白对照组、凝血酶敏感蛋白1组(加入凝血酶敏感蛋白1蛋白40 mg/L)、CD36阻断组和CD47阻断组[先加入对应的单抗(浓度5 mg/L),在体积分数为0.05 CO2,37℃温箱孵育30 min使单抗与细胞充分结合后再加入凝血酶敏感蛋白1].培养72 h后MTT方法检测凝血酶敏感蛋白1对细胞黏附力的作用,染色后直接计数黏附细胞.结果:①凝血酶敏感蛋白1对HCCLM3细胞的生长抑制率随着浓度的提高而增加,40 mg/L与50 mg/L相比抑制作用差异无显著性.抑制率随着时间的延长而增加,在72 h抑制作用明显.②黏附力的检测显示:凝血酶敏感蛋白1组,CD36阻断组,CD47阻断组细胞黏附力均显著低于对照组(P＜0.05).但凝血酶敏感蛋白1组,CD36阻断组,CD47阻断组细胞黏附力差异无显著性(P＞0.05).结论:凝血酶敏感蛋白1对HCCLM3的生长有抑制作用,在一定范围内呈剂量依赖性和时间依赖性.凝血酶敏感蛋白1可抑制人肝癌细胞株HCCLM3与细胞外基质的黏附能力,作用途径可能与受体CD36,CD47无关.
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脑出血大鼠脑组织膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达及益气活血中药的干预效应
目的:观察益气活血中药对脑出血大鼠脑组织中膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达量的影响,从脑出血损伤区微血管系统重建的角度,探讨益气活血中药治疗脑出血的作用机制.方法:实验于2006-03/10在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室完成.实验材料:补阳还五汤全方(黄芪,当归,赤芍,红花,川芎,地龙,桃仁按 20:3:3:3:2:3:3的比例);补阳还五汤益气成分(黄苠按上述比例);补阳还五汤活血成分(当归,赤芍,地龙,川芎,桃仁,红花按 3:3:3:2:3:3的比例).用蒸馏水两次水煎,分别浓缩为1.54,0.81和0.73 g/mL.实验分组:155只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、益气活血组、益气组、活血组.正常对照组5只大鼠,其余每组30只,再随机分为术后灌胃2,4,7,14,21,28 d 6个观察时间点,各个时间点5只大鼠.实验干预:造模:采用立体定位技术将胶原酶Ⅶ注入大鼠大脑右苍白球制成脑出血大鼠模型.假手术组大鼠仅注入2 μL生理盐水,其余手术过程相同.给药:正常对照组:普通饲养,自由饮水;假手术组和模型组术后予蒸馏水灌胃2次/d,2 mL/次;益气活血组、益气组、活血组分别给予补阳还五汤全方、补阳还五汤益气成分、补阳还五汤活血成分30.80,16.20,14.60 g/(kg·d)(按体表面积计算为临床70 kg成人剂量的3倍)灌胃,2次/d,2mL/次.各组大鼠分别于灌胃2,4,7,14,21,28 d麻醉下取脑,制备切片;正常组动物于28 d处死.实验评估:免疫组织化学染色方法检测各组灌胃不同时间脑组织基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9和膜型基质金属蛋白酶的阳性微血管数.结果:155只大鼠均进入结果分析.①正常组、假手术组皮质偶见膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达.②模型组膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2呈双峰表达,4 d为高峰,至14～21 d再有小高峰出现.③益气活血组给药4 d时,膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2为表达低谷,低于模型组(P＜0.01)、益气组和活血组(P＜0.05);在中后期,益气活血组膜型基质金属蛋白酶表达高峰为7～14 d,较模型组提前出现,21 d后与模型组比,各治疗组膜霉型基质金属蛋白酶已表达极少(P＜0.01);益气活血组基质金属蛋白酶2在7 d后一直呈高水平维持,高于其他各组(P＜0.05),28 d后开始逐渐下降.④模型组基质金属蛋白酶9在造模后4 d达高峰(P＜0.01),两周后几乎无表达.益气活血组基质金属蛋白酶9高峰推迟至7 d出现(P＜0.05),之后逐渐下降.结论:益气活血中药可通过调节脑出血后膜型基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达,改善出血后脑组织的微环境,有利于微血管系统重建,促进组织修复.
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链球菌蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的增殖抑制作用及其分子机制
目的:从分子水平观察链球菌蛋白质对人肝癌Bel-7402细胞的生长增殖的抑制作用.方法:实验于2005-10/2006-11在首都医科大学病原生物学系实验室完成.①链球菌32080株购自中国医学细菌保藏管理中心,人肝癌Bel-7402细胞株由首都医科大学细胞生物学系惠赠.②常规培养链球菌并按照Winters方法提取细菌蛋白.③用0.10,20.100 mg/L细菌蛋白作用于单层培养的Bel-7402细胞24,48,72 h,采用MTT法检测链球菌蛋白对细胞的增殖抑制作用.④Bel-7402细胞经10 mg/L或50 mg/L细菌蛋白分别作用48,72 h后,流式细胞术检测细菌蛋白对癌细胞生长周期时相分布.⑤Bel-7402细胞经50 mg/L的细菌蛋白分别作用24,48,72 h后,Annexin-v PI双染法检测Bel-7402细胞凋亡率.⑥用50 mg/L的链球菌蛋白分别作用于Bel-7402细胞0,24,48,72 h后,Western Blot检测链球菌蛋白对Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的影响.结果:①链球菌蛋白对Bel-7402细胞的抑制作用:链球菌蛋白能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞增殖,100 mg/L细菌蛋白作用于细胞24,48,72 h的抑制率分别为15.6%,35.6%,50%,呈剂量和时间依赖关系.②细菌蛋白对肝癌细胞生长周期时相分布及细胞凋亡率的影响:经链球菌蛋白(10,50 mg/L)作用后,G2/M期Bel-7402细胞比率较正常对照组增加,差异有显著性(P＜0.05);流式细胞术检测显示,经50 mg/L链球菌蛋白作用后,实验组Bel-7402细胞凋亡率明显高于对照组细胞(P＜0.01).③Bel-7402细胞凋亡相关蛋白的变化:Bel-7402细胞经50mg/L链球菌蛋白分别作用24,48,72 h后,细胞色素C的释放逐渐增多,Procaspase-3及Bcl-2蛋白水平降低.结论:链球菌32080株蛋白对人肝癌Bel-7402细胞的生长抑制作用存在着剂量和时间依赖性,并能将细胞的生长周期阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡,影响Bcl-2,procaspase-3和细胞色素C等重要的凋亡相关蛋白水平.
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川芎嗪对阿霉素所致体外心肌细胞损伤的保护作用
目的:心脏毒性限制了阿霉素在肿瘤化疗中的应用,体外实验观察川芎嗪对阿霉素所致心肌细胞损伤的保护作用及其机制.方法:实验于2006-10/2007-02在辽宁医学院药理学教研室完成.①实验材料及分组:选用出生 1～3 d的SD大鼠30只,雌雄不拘.采用纯化培养的心肌细胞建立阿霉素损伤模型,培养4 d的心肌细胞随机分为5组:正常对照组(正常细胞培养,加入等数量的培养基,不加入任何药物),阿霉素损伤组(加入阿霉素1 mg/L),阿霉素+川芎嗪低浓度组(加入阿霉素1 mg/L和川芎嗪5 mg/L),阿霉素+川芎嗪中浓度组(加入阿霉素1 mg/L和川芎嗪10 mg/L),阿霉素+川芎嗪高浓度组(加入阿霉素1 mg/L和川芎嗪20 mg/L).作用48 h后检测相关指标.②实验评估:采用乳酸脱氢酶试剂盒测其释放量;采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活力;硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛含量;硝酸还原法测定一氧化氮含量;四唑盐比色法测定心肌细胞线粒体酶活性.③组间显著性检验采用单因素方差分析和LSD检验.结果:①丙二醛含量:阿霉素损伤组明显高于正常对照组(P＜0.01),阿霉素+高、中、低浓度川芎嗪组明显低于阿霉紊损伤组(P＜0.01).②心肌细胞超氧化物歧化酶活性:阿霉素损伤组明显低于正常对照组(P＜0.01),阿霉素+高、中、低浓度川芎嗪组明显高于阿霉索损伤组(P＜0.01).③心肌细胞线粒体酶活性:阿霉素损伤组心肌细胞线粒体酶活性明显低于正常对照组,阿霉素+高、中、低浓度川芎嗪组明显高于阿霉素损伤组(P＜0.01).④心肌细胞内一氧化氮含量:阿霉素损伤组明显高于正常对照组(P＜0.01).阿霉素+高、中、低浓度川芎嗪组明显低于阿霉素损伤组(P＜0.01).结论:川芎嗪具有对阿霉素所致心肌细胞氧化损伤的保护作用,可能与其抗氧化、抗自由基作用有关.
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豚鼠离体右心房自律性及收缩特性与葛根素的影响
目的:观察葛根素对豚鼠离体右心房自律性及收缩特性的影响,并探讨其作用机制.方法:实验于2005-07在赣南医学院药理实验室(省级重点实验室)完成.健康豚鼠6只,用锤子击打头部至昏迷,剖开胸腔迅速取出心脏,在持续充纯氧的条件下,分离右心房.将右心房肌悬挂在含20 mL Krebs液的麦氏浴槽中.恒温(37±0.5)℃,持续通入纯氧.右心房稳定45min后,测定其正常自动节律、收缩幅度、收缩速度和舒张速度作为给药前对照,然后累积加入葛根素(终浓度为0.003 6,0.012,0.036,0.12,0.36,1.2,3.6 mmol/L),每次给药间隔5 min,测定其自动节律、收缩幅度、收缩速度、舒张速度的变化.结果:葛根素可降低豚鼠离体右心房的自律性、收缩幅度、收缩速度、舒张速度,且有明显的剂量依赖性.结论:葛根素可抑制豚鼠离体右心房的自律性,明显降低豚鼠离体右心房的收缩幅度、收缩速度、舒张速度,且有明显的剂量依赖性,其作用机制可能与抑制钙离子通道及钠离子通道有关.
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康复运动干预对动脉粥样硬化患者C-反应蛋白浓度及血脂水平的影响
目的:有研究表明在动脉粥样硬化的发展和易损斑块的破裂中,炎症和高脂血症是其重要特征.为此探讨康复运动是否可以通过干预病理发生发展过程中血脂和炎症反应来预防、延缓动脉粥样硬化.方法:①实验对象:选取湖北省华中科技大学附属同济医院2006-07/2007-04筛查确诊的动脉粥样硬化患者64例,在知情同意的原则下,随机数字表法分为康复运动组34例,空白对照组30例,两组性别、年龄及病史等比较差异均无显著性意义(P＞0.05).②实验方法:两组患者保持平时的饮食习惯及一般的体力活动,分别于实验前后禁食12 h后的清晨采集空腹肘静脉血2 mL,定量检测C-反应蛋白浓度、总胆固醇、低密度脂蛋白胆同醇、高密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油.此外康复运动组患者接受运动干预,进行功率自行车、跑步机等项目锻炼,使大肌群进行规律性的有氧代谢运动;运动时机为进餐0.5～1.0 h后,每次持续0.5～1.0 h;运动强度为60%～90%大心率,或50%～85%的心率储备;运动量根据运动强度和持续时间灵活掌握,循序渐进;运动频度为每周进行6 d,坚持6周.③测定实验前和康复运动6周后两组血清中C-反应蛋白浓度及血脂生化指标的变化.结果:空白对照组1例在出院后失去联系而脱落,康复运动组2例因感冒发烧而退出实验,其余患者均进入结果分析.①两组实验前后血脂水平的变化:与实验前比较,干预后康复运动组低密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油均显著降低(P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇显著升高(P＜0 05);空白对照组无明显变化(P＞0.05).②两组实验前后血浆C-反应蛋白浓度的变化:与实验前比较,干预后康复运动组血浆C-反应蛋白浓度显著降低(P＜0.05),空白对照组无明显变化(P＞0.05).③康复运动后血浆C-反应蛋白浓度的变化与血脂变化的相关性分析:康复运动组血浆C-反应蛋白浓度降低率与血浆低密度脂蛋白胆固醇浓度降低不相关(r=0.014,P＞0.05),与血浆高密度脂蛋白胆固醇浓度升高呈负相关(r=-0.23,P＜0.05).结论:康复运动能够有效地改善动脉粥样硬化患者血清中C-反应蛋白浓度及血脂生化指标,可成为预防冠状动脉粥样硬化性心脏病的有效措施.
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高脂血症大鼠肝细胞脂肪变性及脂蛋白代谢酶变化与电针丰隆穴的干预效应
目的:以往研究证实,针刺丰隆穴可有效的调节血脂,为了进一步研究其对高脂血症后肝脏脂肪变性的作用机制,实验观察了电针丰隆穴对高脂血症大鼠脂蛋白脂酶、肝脂酶活性及肝细胞脂肪变性的影响.方法:实验于2005-09/12在北京中医药大学针灸学院综合实验中心完成.①实验干预:选用健康雄性SD大鼠30只,鼠龄4个月.随机分为3组:空白组、模型组、丰隆穴组,每组10只.空白组每日给予基础饲料喂养及普通饮水;其余两组均给予高脂饲料喂养及普通饮水2周以制备高脂血症模型.造模2周后开始电针干预.丰隆穴组:取双侧丰隆穴,直刺10 mm,接电针仪,频率50 Hz,强度1 mA,留针20 min,每周治疗2次,治疗10次.空白组、模型组于丰隆穴组治疗时同样抓取,但不针刺.②实验评估:治疗结束后,所有大鼠腹腔静脉取血,采用分光比色方法测定血清脂蛋白脂酶、肝脂酶活性.摘取肝脏进行油红"○"染色,并光镜下观察肝脏脂肪细胞组织形态学表现.结果:大鼠30只均进入结果分析.①血清脂蛋白脂酶、肝脂酶活性:模型组与空白组比较,差异无显著性意义(P＞0.05);丰隆穴组高于模型组,差异有十分显著性意义(P＜0.01).②肝脏脂肪细胞组织形态学表现:模型组肝细胞明显增大,且排列松散紊乱;肝组织的汇管区、中央静脉区等细胞内可见数量众多、颜色深染、体积较大的红染脂滴,而且肝小叶结构被破坏.丰隆穴组比模型组的肝脂肪细胞小、数量少、染色浅.结论:电针丰隆穴可提高高脂血症大鼠血清脂蛋白脂酶、肝脂酶活性,减轻肝细胞内脂肪的堆积,对肝脏脂肪变性有改善作用.
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整合素β1在肝纤维化中的表达
目的:观察黏附分子整合素β1在肝纤维化中的表达情况.方法:实验于2005-03在上海市第十人民医院中心实验室完成.①实验分组:雄性SD大鼠20只,随机分为肝纤维化模型组10只和正常对照组10只.②实验干预:正常对照组不给予任何干预措施正常喂养,肝纤维化模型组给予400 g/L CCl4 7.5 mL/kg腹壁皮下注射造模,于造模后12周处死动物,取1 cm×1 cm×1 cm肝组织备用.③指标检测:反转录-聚合酶链反应半定量检测整合素mRNA在肝组织中的表达;常规苏木精-伊红染色了解肝纤维化的程度.结果:20只大鼠均进入结果分析.①整合素在正常肝脏和肝纤维化阶段均有表达;正常对照组整合素β1的表达量低于模型对照组(66.81±4.36,83.39±4.04,P＜0.01).②肝纤维化模型组大鼠肝组织可见肝细胞广泛的变性坏死,正常小叶结构消失.在高倍镜下可见纤维隔形成.结论:整合素β1在正常和病理肝脏均有表达,在肝纤维化过程中表达明显增高.
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急性肺损伤兔肺泡灌洗液及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6浓度变化与小剂量高渗盐水的干预
目的:观察创伤性休克兔经小剂量高渗盐水治疗后肺部炎症反应及病理学损伤的变化情况,进一步研究高渗盐水对创伤应激状态下急性肺损伤的作用及其机制.方法:实验于2005-08/2006-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科实验室完成.①实验分组:新西兰白兔30只随机分为3组:假手术组、生理盐水处理组、高渗盐水治疗组,每组10只.②实验方法:假手术组:局部麻醉下行插管术及肝素化,静脉输注平衡盐80 mL.生理盐水处理组:用骨钳致兔一侧股骨中下1/3粉碎性骨折,经股动脉放血至储血瓶内,使平均动脉压降至(40±5)mm Hg,45 min后输注生理盐水4 mL/kg,再回输储血及2倍于失血量的平衡盐液进行复苏.高渗盐水治疗组:除以75 g/L的氯化钠溶液代替生理盐水外,其余处理同生理盐水处理组.在休克前、休克末、复苏后2 h、4 h分别采集静脉血1 mL备用.复苏后4 h空气栓寒处死动物,进行支气管肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液.③评估指标:双抗体夹心ELISA法测定支气管肺泡灌洗液以及血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的浓度;凝胶电泳迁移率改变分析法检测肺泡巨噬细胞核蛋白提取物中核因子κB的活性;显微镜观察肺组织的病理改变.结果:30只实验动物均进入结果分析.①血清细胞因子浓度的变化:与假手术组比较,生理盐水处理组肿瘤坏死因子α浓度在休克发生后迅速升高(P＜0.05),复苏后又进一步上升(P＜0.01),白细胞介素1β及白细胞介素6浓度在复苏后4 h才有明显增加(P＜0.01 ).高渗盐水治疗组与生理盐水处理组比较,复苏后2～4 h肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6浓度均有不同程度下降(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05).②支气管肺泡灌洗液细胞因子浓度的变化:生理盐水处理组肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及白细胞介素6浓度均显著高于假手术组(P均＜0.01).高渗盐水治疗组各细胞因子的浓度虽然也高于假手术组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01),但与生理盐水处理组比较均有明显降低(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).③肺泡巨噬细胞核因子κB的活性变化:生理盐水处理组核因子κB的活性远高于假手术组(P＜0.01),而高渗盐水治疗组核因子κB的活性虽然也高于假手术组(P＜0.01),但与生理盐水处理组比较有显著降低(P＜0.01).④肺组织病理学改变:高渗盐水治疗组肺水肿及炎性细胞浸润明显减轻;Ⅰ、Ⅱ型肺泡上皮细胞内仅有少量空泡,上皮基本完整,基底膜增厚不明显.结论:小剂量高渗盐水治疗可抑制创伤性休克时核因子κB的活化,减少促炎细胞因子的合成与分泌,减轻肺部的炎症反应,从而发挥对急性肺损伤的保护作用.
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鸭乙肝模型氧化应激反应及金丝桃苷的干预
目的:观察鸭乙肝病毒感染所致稚鸭血清及肝脏氧化应激状态的改变及金丝桃苷的干预作用.方法:实验于2006-03/07在中国医学科学院生物技术研究所以及解放军第三○一医院老年医学研究所进行.①实验分组:44只1日龄北京稚鸭随机分为7组:正常组,模型组,金丝桃苷15,30,60 mg/(kg·d)剂量组,拉米夫定50 mg/(kg·d)组和恩替卡韦0.25 mg/(kg·d)组.其中正常组5只,金丝桃苷15.30,60 mg/(kg·d)剂量组各7只,其余各组6只.②实验干预:除正常组外,其余6组每只动物经胫静脉注射鸭乙肝病毒阳性血清0.2 mL,第7天开始灌胃给药,2次/d,给药10 d,正常组和模型组给予等量生理盐水.停药后第3天处死动物检测相关指标.③实验评估:黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性、非酶促反应法检测谷胱甘肽过氧化物酶活性,硫代巴比妥酸法检测丙二醛含量.结果:纳入稚鸭44只,在模型制备及后期干预中无动物死亡,全部纳入统计分析.与正常组相比,模型组肝匀浆超氧化物岐化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量显著降低(P＜0.01,P＜0.05),而血清谷胱甘肽过氧化物酶活力及丙二醛含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05);与模型组相比,金丝桃苷治疗组肝匀浆超氧化物岐化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05),然而血清谷胱甘肽过氧化物酶活性及丙二醛含量显著降低(P＜0.01,P＜0.05).结论:鸭乙肝病毒感染引起稚鸭肝脏氧化应激损伤,金丝桃苷可有效的逆转肝损伤.
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罗格列酮和二甲双胍对伴有血脂紊乱的2型糖尿病患者血糖、血脂、血压和体质量的影响
背景:胰岛素抵抗是2型糖尿病患者疾病进展和大血管并发症发生的一个主要病因,以胰岛素增敏剂(二甲双胍和罗格列酮)治疗能减轻胰岛素抵抗,但其对心血管其他危险因素(血脂、血压、体质量)的影响仍有待研究.目的:观察罗格列酮和二甲双胍治疗伴有血脂紊乱的2型糖尿病患者时对血糖、血脂,血压和体质量的影响.设计:临床观察试验.对象:选择2006-06/09于南京医科大学附属南京第一医院内分泌科门诊就诊的42例2型糖尿病伴血脂紊乱患者.纳入标准:①2型糖尿病均符合美国糖尿病协会2006年的诊断标准.②血脂紊乱的诊断标准为:总胆固醇(TC)＞4.68 mmol/L,三酰甘油(TG)＞1.7 mmol/L,低密度脂蛋白胆固醇(LDL)＞2.68 mmol/L,高密度脂蛋白胆固醇(HDL)＜0.9 mmol/L(女性),＜1.0 mmol/L(男性).男27例,女15例,年龄30～70岁,平均(58±12)岁.所有患者对治疗和检测项目知情同意.方法:①药物治疗:所有患者在12周治疗期间均给予同样剂量的二甲双胍(江苏恒瑞医药股份有限公司生产,批号为051110和051214,剂型为0.25 g/片)0.75 g,2次/d和罗格列酮(江苏恒瑞医药股份有限公司生产,批号为0511101,剂型为2 mg/片)2 mg,2次/d.②相关指标测量:所有患者在治疗前及治疗第8,12周分别测量体质量指数,比色法检测血脂(总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇),空腹及餐后血糖,血压.主要观察指标:①空腹血糖和餐后血糖的变化.②患者血脂、血压、体质量指数的变化.结果:纳入2型糖尿病伴血脂紊乱患者42例,3例患者退出实验,1例患者出现严重水样泻,1例为严重腹胀,1例尿路感染,其余39例均进入结果分析.①空腹血糖和餐后血糖的变化:治疗12周后患者空腹血糖及餐后血糖较治疗前下降(P＜0.01).②患者血脂、血压、体质量的变化:治疗12周后患者总胆固醇较治疗前轻度升高(P＜0.05),低密度脂蛋白胆固醇较治疗前轻度下降(P＜0.01),高密度脂蛋白胆固醇较治疗前轻度上升(P＜0.01),血压较治疗前无变化(P＞0.05),体质量指数较治疗前轻度上升(P＜0.01).结论:罗格列酮、二甲双胍治疗能显著地改善血糖控制,轻度增加总胆固醇,降低低密度脂蛋白胆固醇,升高高密度脂蛋白胆固醇,对三酰甘油、血压无显著影响.体质量增加轻微.安全可耐受.
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应用两层法保存和运输成人胰腺的实验
目的:提高胰岛的分离纯化率是胰岛移植成功的关键,其中胰腺的冷缺血时间是主要影响因素之一.探讨并建立供体胰腺长时间(＞8 h)保存和运送方法.方法:实验于2006-06/2007-02在解放军南京军区福州总医院全军器官移植中心完成,得到医院伦理道德委员会批准.①实验方法:应用两层保存法(University of Wisconsin 液/全氟化碳),将25例成人胰腺置于广口瓶中,充氧并盖紧,放入冰筒中送达实验室,按冷缺血时间的长短,分为＞8 h组(n=17)和≤8 h组(n=8).参照改良后Ricordi方法分离胰岛,将胰腺切片置入消化罐中循环消化.应用连续密度梯度离心法在COBE 2991离心机中纯化胰岛组织,并用双硫腙、吖啶橙、碘化丙啶染色.②实验评估:分别进行纯化后胰岛计数、纯度和活率检测,同时检测胰岛对高、低糖的反应性.结果:①冷缺血时间＞8 h组胰腺的冷缺血时间显著长于≤8 h组(P＜ 0.01).②经双硫腙染色后,两组分离纯化的总胰岛当量、胰岛收获量差异无显著性意义(P＞0.05);两组胰岛纯度和活率差异也无显著性意义(P＞0.05).③经低糖、高糖分别刺激后,两组胰岛素释放量及其刺激指数差异均无显著性意义(P＞0.05).结论:应用两层保存法保存和运送供体胰腺,可明显延长保存时间,但对胰岛的分离纯化数量和功能没有明显影响,为胰岛移植远距离保存和运送腺体提供了有利条件.
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隐神经-大隐静脉营养血管远端蒂复合瓣移植修复小腿、踝足部创伤
目的:在显微解剖学基础上,观察隐神经-大隐静脉营养血管远端蒂复合瓣移植修复小腿、踝足部创伤的临床效果.方法:选择2004-05/2007-04由解放军南京军区福州总医院骨科、解放军第97医院骨科、解放军第107医院骨科采用隐神经-大隐静脉营养血管远端蒂复合瓣移植修复小腿、踝足部组织缺损48例,患者对治疗均知情同意.其中皮瓣修复小腿、踝周及足部的创面感染、缺损23例;肌皮瓣修复小腿上段、下段的溃疡、骨髓炎和骨钢板外露12例,跟骨内侧骨髓炎5例;骨皮瓣修复伴有胫骨缺损和跟骨骨不连的创面8例.术后定期随访,观察隐神经-大隐静脉营养血管远端蒂皮瓣移植修复术后的存活情况及骨皮瓣的骨愈合、功能情况.结果:48例患者术后均有程度不同的皮瓣肿胀,其中3例皮瓣远侧边缘少量坏死,经换药愈合;皮瓣部分坏死植皮1例.伤口Ⅰ期愈合44例,Ⅱ期愈合4例.所有病例经5～15个月随访,创面及骨不连修复,外形满意.结论:隐神经-大隐静脉营养血管远端蒂皮瓣、复合瓣用于外伤造成的小腿远端骨缺损、骨不连、大的死腔以及踝足部的缺损创面修复,具有快捷方便,抗感染力强,成活率高和愈合快的优点.
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人工全膝关节置换术中关节周围注射镇痛药物对术后痛的效果
目的:关节周围注射混合镇痛药物是比较新颖的术后镇痛方法.运用随机对照的前瞻性方法观察人工全膝关节置换术中膝关节周围注射布比卡因、吗啡、肾上腺素等混合药物的止痛效果.方法:①实验对象:于2006-09/2007-05上海市第六人民医院关节外科病房选取60例择期、单侧人工全膝关节置换患者,患者知情同意参加本实验,随机分为研究组30例和对照组30例.②实验方法:研究组患者术中关节周围注射镇痛药物(0.5%布比卡因30 mL,肾上腺素1:200 000,吗啡10 mg,生理盐水30 mL),对照组患者没有运用镇痛药物.所有患者术后都运用镇痛泵(曲马多500 mg,氯诺昔康16 mg,稀释到100 mL,2 mL/h),持续运用48 h.⑨实验评估:术前、术后分别记录静止和活动视觉模拟疼痛评分和膝关节活动度.结果:60例患者均进入结果分析.①视觉模拟疼痛评分:研究组术后6,12,24 h静止视觉模拟疼痛评分低于对照组(P均＜0.01),研究组术后6,12,24 h运动视觉模拟疼痛评分也低于对照组(P均＜0.01).两组术后36,48,72 h静止和运动视觉模拟疼痛评分比较差异无显著性(P＞0.05).②手术前后镇痛药物使用情况:研究组术后有6例需长期服用奇曼丁(曲马多),对照组术后有18例需长期服用奇曼丁,两组相比有统计学差异.同时,对照组术后有5例需肌注吗啡(10 g/L).③膝关节活动度:研究组术后第1,2,3天膝关节活动度高于对照组(P均＜0.01).两组术后第1,2周膝关节活动度比较差异无显著性.④并发症:没有任何因为注射而引起的伤口并发症、心脏或中枢神经系统的毒性被发现.结论:人工全膝关节置换术中应用关节周围注射镇痛药物可以在术后早期减少静止和活动状态疼痛评分并且减少术后镇痛药的使用、改善术后早期关节活动度.
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CD30基因多态性与慢性肾功能衰竭及肾移植术后急性移植排斥反应的相关性
目的:近年来,国际多个移植免疫学者发现可溶性CD30可作为一种新的与移植肾存活相关的风险预测指标.拟在基因水平上分析CD30基因启动区和5'侧翼区3个位点的多态性与肾功能衰竭的关系,以探讨其与慢性肾功能衰竭患者血清中可溶性CD30含量增高的相关性以及与肾移植术后发生急性移植排斥的关系.方法:选取2004-05/2006-04在南京市鼓楼医院首次接受肾移植手术的肾功能衰竭终末期患者78例,另选择95例健康体检者作为对照,均知情同意.提取两组观察对象的外周血基因组DNA,采用聚合酶链反应扩增CD30基因启动区-201位的AJ289159多态性位点和5'侧翼区rs946461和rs1208993多态性位点所在部分的DNA片段.采用高效液相色谱法检测各位点多态性,DNA测序验证.比较分析CD30基因型在慢性肾功能衰竭患者和正常人群中的分布,并探讨CD30基因多态性与慢性肾功能衰竭的关系.同时检测慢性肾功能衰竭患者血清中可溶性CD30的含量,探讨CD30基因多态性与可溶性CD30含量的关系.结果:两组观察对象均进入结果分析,无脱落.①CD30启动区-201位的AJ289159多态性位点在入选的173例中国人群中未发现存在碱基突变.②两个5'侧翼区的多态性位点rs946461和rs1208993虽然在慢性肾功能衰竭组和正常对照组中基因突变频率较高,但多态性分布在两组观察对象中差异无显著性意义(P＞0.05).③慢性肾功能衰竭患者血清中可溶性CD30水平显著高于正常对照组(P＜0.01).结论:CD30启动区的AJ289159位点和5'侧翼区的rs946461和rs1208993位点的基因多态性与肾功能衰竭患者中可溶性CD30含量的增高可能无关,可溶性CD30的增高也许在基因水平上存在着其他改变,或是受其他刺激因素的影响导致患者的免疫活化状态,进而关系到移植后急性排斥反应的发生和移植肾的长期存活.
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彩色多普勒超声对移植肾急性排斥反应的评价
目的:肾移植的成功与否关键在于及时发现和正确处理排斥反应.探讨无创伤性形态学和血流动力学检查手段彩色多普勒超声在移植肾急性排斥反应中的作用,为临床评估肾移植效果及移植肾功能提供客观的辅助性数据.方法:选择2004-01/2005-12在南京医科大学附属第一医院、江苏省人民医院行同种异体移植肾患者57例,其中经穿刺活检证实或后临床诊断为急性移植肾排斥反应者22例,未发生排斥反应等并发症的移植肾功能正常者35例,患者均知情同意.采用Philips EnVisor彩色多普勒超声血流显像仪,对急性排斥反应肾移植患者进行二维超声和彩色多普勒血流显像检测,观察排斥反应患者甲基强的松龙冲击治疗前后移植肾脏的大小、形态结构、肾内血管树分布、血流灌注以及各级动脉血流参数(阻力指数,搏动指数)等指标的变化,并与移植肾功能正常患者进行比较.结果:急性排斥反应组2例患者发生严重并发症死亡,进入结果分析急性排斥反应组20例,移植肾功能正常组35例.①发生急性排斥反应时肾移植患者移植肾体积明显大于肾功能正常组(P＜0.01);肾实质增厚,皮髓质界限模糊.给予甲基强的松龙冲击治疗后急性排斥反应组患者肾脏厚径显著小于治疗前(P＜0.05);肾实质回声减低,皮髓质交界变清.②发生急性排斥反应时肾移植患者移植肾血流阻力指数、搏动指数均显著高于移植肾功能正常组(P＜0.01).治疗后急性排斥反应组患者肾血流阻力指数、搏动指数均显著低于治疗前(P＜0.01),与移植肾功能正常组差异无显著性意义(P＞0.05).结论:彩色多普勒超声作为一种简便、经济的无创性技术,对移植肾血流阻力指数、搏动指数的追踪观察可为临床上评估肾移植效果提供较可靠的客观依据,对移植肾急性排斥反应的早期诊断有较高的评估价值.
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雷帕霉素/雌二醇复合洗脱支架体外释放度及体内对猪冠状动脉内膜增殖的抑制效应
目的:目前认为雷帕霉素等药物抑制血管内皮细胞引发的血管再内皮化延迟是引起晚期支架内血栓的主要原因.将促内皮化药物雌二醇与雷帕霉素联合应用,制备复合洗脱支架,初步考察其体外释放度及体内抑制猪冠状动脉内膜增殖的效果.方法:实验于2006-05/12在复旦大学附属华山医院临床药学研究室及解放军第二军医大学附属长海医院心内科实验室完成.①考察雌二醇在10-10～10-5 mol/L剂量区间对10-8/10-7mol/L雷帕霉素抑制血管内皮细胞增殖行为的影响.②采用气体喷涂法依次喷涂2 mL雷帕霉素层涂层液和1 mL雌二醇层涂层液制备得到雷帕霉索/雌二醇复合洗脱支架,并用10 mL体积分数为0.2的甲醇在37℃100 r/min水浴振荡器中对支架进行体外释放度考察.③在猪冠状动脉球囊扩张模型中,植人雷帕霉素/雌二醇复合洗脱支架、雷帕霉素洗脱支架和裸支架,术后28 d考察支架血管段新生内膜面积、内膜平均厚度及支架内皮化程度.结果:①雌二醇在剂量为10-8mol/L时对雷帕霉素的抑制作用强,使10-8/10-7 mol/L雷帕霉素对血管内皮细胞的增殖抑制率从50.33%,90.88%分别下降到18.45%,73.01%.②制备的雷帕霉素/雌二醇复合洗脱支架体外持续释放1个月,30 d时雷帕霉素和雌激素的释放百分数分别为41%和97%.③植入小型猪冠状动脉28 d后,雷帕霉素/雌二醇复合洗脱支架和雷帕霉素洗脱支架的内膜面积和平均厚度均较裸支架明显减少,而两组比较无明显差异;复合洗脱支架再内皮化程度明显优于雷帕霉素洗脱支架.结论:雷帕霉素/雌二醇复合洗脱支架有改善雷帕霉素洗脱支架内皮化延迟的临床前景.
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股骨偏心距重建与全髋关节置换术后关节功能的相关性
目的:股骨偏心距的恢复和重建,在髋关节软组织张力的平衡中具有非常重要的作用,是调节软组织平衡的主要手段.分析重建股骨偏心距与人工全髋关节置换术后关节功能恢复的关系.方法:选择2004-01/2005-06北京大学人民医院骨关节科收治的单侧髋关节置换患者76例,随访资料均完整,患者对治疗方案均知情同意.随访时间16～29个月,平均23.2个月.手术均采用髋关节外侧入路,使用Zweymüller双锥形螺旋臼及SL-PLUS矩形直柄(颈干角135°,股骨头假体的直径均为28 mm).术前和术后随访时拍摄双髋正侧位X射线片,测量股骨偏心距、髋外展肌力臂及双下肢长度;记录手术前后髋关节活动度及Harris评分,分析股骨偏心距与其他指标的相关性.结果:76例患者全部进人结果分析.①股骨偏心距与髋外展肌力臂具有正相关性(r=0.523,P＜0.001).②髋关节术后活动度、Harris评分与股骨偏心距均存在明显回归相关关系(r=0.419,0.326,P＜0.001).③股骨偏心距重建与否对下肢长度的影响存在显著性意义(χ2=4.62,P＜0.01).结论:人工全髋关节置换术中股骨偏心距重建与髋外展肌的力臂增加、髋关节的活动度、功能改善及稳定性增强呈正相关.
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国产雷帕霉素洗脱支架治疗急性冠状动脉综合征:安全性和临床有效性
目的:分析国产雷帕霉索洗脱支架治疗急性冠状动脉综合征的安全性和有效性.方法:选择2004-11/2006-02在河北大学附属医院接受冠状动脉介入治疗的急性冠状动脉综合征患者102例,其中ST段抬高型心肌梗死54例,非ST段抬高型心肌梗死28例,不稳定型心绞痛20例.根据血管情况置入国产雷帕霉素药物洗脱支架(Firebird支架),支架选择原则为:支架长度应覆盖病变两端;血管直径:支架直径=1:1.1.所有患者术前3 d均口服阿司匹林100 mg,氯吡格雷75 mg,术中推注肝索8 000～10 000 U,手术每延迟1 h,补充肝素1 000 u.术后皮下注射低分子肝素5～7 d;服用氯吡格雷75 mg,1次/d,共服用9～12个月,并长期服用阿司匹林100 mg,1次/d.随访情况:术后6个月时随访64例;7个月时随访26例;8个月时随访12例;平均随访6.8个月,患者出院后定期进行门诊随访,记录一般情况及严重心脏不良事件(包括急性、亚急性、迟发支架内血栓形成;再发心肌梗死;急诊冠状动脉旁路移植术;死亡),术后6～8个月行冠状动脉造影评价支架内再狭窄情况.并观察材料及宿主反应.结果:102例患者经皮冠状动脉介入治疗治疗均获得成功,共治疗靶血管102支,置入Firedird 支架116枚,术中3例ST段抬高型心肌梗死患者出现无复流现象,2例发生室颤,电转复恢复窦性心律,3例因分支受压,出现心绞痛症状.术后4例出现穿刺部位血肿,经重新加压压迫后好转.随访6～8个月所有患者未发生严重心血管事件;42例(41.2%)患者术后6～8个月行冠状动脉造影复查,无一例发生支架内再狭窄.随访期间所有患者无全身毒性及超敏反应发生,生物相容性好.结论:国产药物洗脱支架治疗急性冠状动脉综合征安全,有效.
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外周血反应性嗜酸细胞及造血干细胞检测在器官移植中的临床意义
目的:如何早期判断并尽早地控制排斥反应是器官移植能否成功的关键.通过常规的检验方法观察器官移植受者外周血液细胞形态学的改变,并对造血干细胞进行检测,探讨外周血反应性嗜酸细胞及造血干细胞在器官移植术后急性排斥反应中的临床意义.方法:选择1997-07/2006-12于解放军第四军医大学西京医院接受不同器官移植的受者80例,根据术后是否发生排斥反应分为急性排斥反应组(n=29)及非排斥反应组(n=51);另外选择40例健康体检者作为正常对照组,以上所有观察对象均知情同意.分别取各组观察对象的抗凝血液制成血薄片,经瑞氏染色计数反应性嗜酸细胞和嗜酸性粒细胞的百分率;同时采用SE-9000型全自动血液分析仪分别检测各组观察对象外周血造血干细胞的百分率,并进行统计学分析.结果:80例器官移植受者和40例健康体检者全部进入结果分析.①急性排斥反应组观察对象外周血中反应性嗜酸细胞百分率及其阳性率显著高于非排斥反应组和正常对照组(P＜0.01).3组观察对象外周血中嗜酸性粒细胞百分率计数差异无显著性意义(P＞0.05).②急性排斥反应组观察对象外周血中造血干细胞百分率及其阳性率显著高于非排斥反应组和正常对照组(P＜0.01).结论:外周血反应性嗜酸细胞及造血干细胞检测可作为诊断器官移植术后急性排斥反应的敏感实验室指标.
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自体肾移植治疗肾动脉狭窄介入治疗后再狭窄:3例报告
目的:肾动脉狭窄可以导致肾血管性高血压和缺血性肾病,是慢性肾功能衰竭的主要原因之一.观察自体肾移植术在肾动脉狭窄及介入治疗后再狭窄中的应用效果.方法:选择2003-12/2006-10北京中医药大学东直门医院泌尿科收治的自体肾移植治疗肾动脉狭窄介入治疗失败或再次出现狭窄的年轻患者3例,均为男性,平均年龄14岁,患者及其监护人对治疗方案均知情同意.两例年龄较大的患者采用腹膜外入路,另1例经腹腔切取肾脏.肾脏均植于同侧髂窝,两例采用肾动脉与髂内动脉端端吻合,1例切取髂内动脉与左肾动脉吻合,将延长的左肾动脉与髂外动脉行端侧吻合;3例均行肾静脉与髂外静脉端侧吻合,输尿管与膀胱隧道式吻合.采用门诊方式随访,观察手术对患者血压、肾功能的影响.结果:3例患者手术成功率为100%,未发生术后并发症;术后2周内血压均恢复正常,随访9～36个月移植肾功能良好.结论:自体肾移植治疗肾动脉狭窄介入治疗失败或再次出现狭窄手术成功率高,无并发症发生.肾动脉狭窄介入治疗后再狭窄及患多发性大动脉炎的年轻患者可选择自体肾移植术.
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血液透析和腹膜透析方式与肾移植术后并发症发生的关系:204例回顾性分析
目的:由于移植肾源不足,大多数晚期尿毒症患者术前需要透析治疗.探讨血液透析和腹膜透析方式与肾移植受者术后并发症发生的关系.方法:选择2000-01/2005-12南昌大学第一附属医院泌尿外科收治的肾移植受者204例,术前透析时间大于3个月,均知情同意.按照移植术前透析方式分为两组:①血液透析组(n=122)术前采用血液透析治疗,透析10～12 h/周,手术前1日透析1次.②腹膜透析组(n=82)术前采用标准连续非卧床腹膜透析治疗,直至手术当日,在术前4～6 h排空腹透液.术后3个月拔管.两组都采用同种异体尸肾移植,术后1年内随访记录两组患者术后超急性排斥反应、急性排斥反应、细菌感染、移植肾功能延迟恢复的发生情况以及人,肾1年存活率,并进行对比分析.结果:204例肾移植受者全部进入结果分析.①两组患者肾移植术后1年内超急性排斥反应的发生率及人、肾1年存活率差异无显著性意义(P＞0.05).②血液透析组患者肾移植术后1年内急性排斥反应、细菌感染的发生率低于腹膜透析组(14.8%,25.6%:13.9%,23.2%,P均＜0.05),移植肾功能延迟恢复发生率高于腹膜透析组(40.2%,20.7%,P＜0.05).结论:肾移植前腹膜透析、血液透析各有优缺点.血液透析患者的感染率低,移植肾急性排斥反应发生率低;而腹膜透析患者术后肾功能恢复较快,肾功能延迟恢复的发病率低.
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血管紧张素系统基因多态性与经皮冠状动脉腔内成形术加支架置入术后支架内再狭窄的关系
目的:心血管支架内再狭窄的好发因素很多,在探讨肾素-血管紧张素系统基因型与冠状动脉粥样硬化性心脏病患者经皮冠状动脉腔内成形术及支架置入术后支架内再狭窄相关性的基础上,进一步分析支架内再狭窄发生的其他相关因素.方法:选择2003-03/2004-12于复旦大学附属中山医院心血管内科接受经皮冠状动脉腔内成形术加支架置人术的上海籍汉族患者103例,有6个月随访造影资料并且临床资料完整,均知情同意.根据临床诊断标准,将患者分为再狭窄组(n=30)和未狭窄组(n=73).再狭窄组30例,根据病例情况调查表,对患者的年龄、病史、实验室检查结果、狭窄病情、经皮冠状动脉腔内成形术和支架相关因素等进行综合分析,对患者冠状动脉狭窄情况、血管紧张紊Ⅰ转换酶、血管紧张素原(M235T)和血管紧张素Ⅱ受体1(A1166C)基因型与支架内再狭窄的关系进行多元Logistic回归分析.结果:①103例患者全部进入结果分析,经皮冠状动脉腔内成形术加支架置入术后支架内再狭窄发生率为29.19%.②再狭窄组患者多支狭窄发生率大于未狭窄组(×2=14.203,P=0.000).③血压、血脂、支架个数、安放次数、安放位置等因素、支架置入前经皮冠状动脉腔内成形术的次数、扩张程度、是否更换球囊或更换球囊种类与术后是否发生支架内再狭窄无关(P＞0.05).④血管紧张素Ⅰ转换酶(D/I)与支架内再狭窄具有相关性(P＜0.05).结论:经皮冠状动脉腔内成形术加支架置入术患者的血管紧张素Ⅰ转换酶(D/I)基因型和冠状动脉多支狭窄与支架内再狭窄存在关联.
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过度表达突变核纤层蛋白A受精卵移植至假孕鼠体内的成活能力
目的:制备Hutchinson-Gilford早老症转基因小鼠模型,观察突变的核纤层蛋白A对小鼠受精卵着床和成活情况的影响.方法:实验于2004-09/2007-04在北京大学医学部医学遗传学系和中国农业大学生物技术国家重点实验室完成.①实验方法:将缺失了第11外显子末端150个碱基的LMNA基因cDNA克隆到pcDNA3.1载体,应用原核显微注射方法将线性化的pcDNA3.1-mutant LMNA注射到小鼠受精卵的雄原核,再将注射后的受精卵移植至假孕鼠的输卵管.②实验评估:观察受精卵的着床和成活情况.通过聚合酶链反应检测着床的胚胎,鉴定有无阳性转基因动物.结果:①178只注射pcDNA3.1-mutant LMNA后的存活受精卵移植至假孕鼠输卵管后,出生13只子代鼠,出生率只有7%;58只注射pcDNA3.1-mutant LMNA后的存活受精卵移植到假孕鼠输卵管后,在移植后12～15 d的受体母鼠子宫内收集到1只活胚和5只死胚.②聚合酶链反应方法检测所收集到的胚胎,没有得到pcDNA3.1-mutant LMNA阳性转基因鼠.在着床的胚胎中也没有检测到pcDNA3.1-mutant LMNA.结论:过量表达的突变核纤层蛋白A对小鼠受精卵有致死性,只有无目的基因整合的受精卵才能存活至出生.
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胸腺内注射异基因抗原对同种异体鼠坐骨神经移植免疫反应的影响
目的:降低移植神经的抗原性、抑制异体神经移植中的排斥反应是目前的研究焦点.观察小鼠胸腺内注射异基因抗原对异体鼠坐骨神经移植存活的干预作用.方法:实验于2006-06/2007-05在哈尔滨医科大学附属第四医院实验室完成,实验方法符合动物伦理学要求.①选用雄性C57BL/6(H-2b)供体鼠32只,雌性Balb/c(H-2d)受体鼠44只,将坐骨神经移植受体鼠按随机数字表法分为4组(n=11):主要组织相容性复合物(H-2b)抗原注射组自供体小鼠的脾细胞中提取抗原注入受体鼠胸腺内,于2周后移植供体鼠坐骨神经;免疫抑制剂组移植前3 d开始腹腔注射环孢霉素A;异体神经移植组、自体神经移植组单纯进行异体及自体神经移植.②于神经移植3周后进行电生理学、组织学及免疫学检测.结果:44只受体鼠全部进入结果分析.①坐骨神经移植段的神经传导速度:异体神经移植组显著小于主要组织相容性复合物(H-2b)抗原注射组(P＜0.05),自体神经移植组显著大于主要组织相容性复合物(H.2b)抗原注射组(P＜0.05),主要组织相容性复合物(H-2b)抗原注射组与免疫抑制剂组差异无显著性意义(P＞0.05).②组织学检查证明自体神经移植组及主要组织相容性复合物(H-2b)抗原注射组均有大量神经纤维再生,并已通过移植体.③混合淋巴细胞反应及迟发型超敏反应结果:主要组织相容性复合物(H-2b)抗原注射组对供体小鼠淋巴细胞反应呈特异性减弱,与异体神经移植组及免疫抑制剂组比较其差异具有显著性意义(P＜0.05).结论:胸腺内注射异基因主要组织相容性复合物抗原可诱导对异体坐骨神经移植的特异性免疫耐受,神经恢复效果优于单纯异体神经移植,等同于免疫抑制剂使用组.
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肝移植患者术后白蛋白的应用
目的:低白蛋白血症是肝移植患者的常见并发症,也是患者预后的重要影响因素.肝移植术后选择合理的白蛋白应用方案将有益于提高肝移植患者术后近远期疗效.方法:选择2000-10/2005-06于北京大学第三医院行肝移植并且随访时间大于6个月的患者80例,对治疗方案均知情同意.医院自2003年8月开始改变了肝移植术后白蛋白的输入方案:①方案改变之前患者即白蛋白输入方案未改变组(n=50),术后早期常规输入白蛋白剂量大于60 g/d.②方案改变之后患者即白蛋白输入方案改变组(n=30),适当减少术后早期白蛋白输入的常规剂量至0～20 g/d.统计分析两组患者的一般情况、术后白蛋白使用情况、预后情况及住院费用.另外,对于两组中术后存在低白蛋白相关严重并发症的患者进行进一步的比较分析.结果:80例患者全部进入结果分析.①两组患者术前及术中一般情况差异无显著性意义(P＞0.05).②白蛋白输入方案改变组术后早期白蛋白的使用量及其费用/总住院费用比例显著低于白蛋白输入方案未改变组(P＜0.01).但两组患者术后第3天肝功能情况、白蛋白水平、早期并发症发生率、早期死亡率、半年生存率及呼吸机时间等情况差异均无显著性意义(P＞0.05).③两组中术后出现低白蛋白相关严重并发症患者术后第3天肝功能情况、白蛋白水平、早期死亡率、半年生存率及呼吸机应用时间等情况差异均无显著性意义(P＞0.05).结论:肝移植术后过多输入白蛋白不能改善患者预后;适当减少术后白蛋白的常规输入剂量,同时根据血白蛋白水平及并发症情况随时调整白蛋白的输入量能够减少白蛋白的用量,对患者预后因素亦无明显影响.
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健康教育对肾移植术后患者服药依从性的作用
目的:肾移植患者对免疫抑制药物的依从性与排斥反应的发生及移植肾的存活等临床结果有关,调查健康教育对提高肾移植术后患者服药依从性的影响.方法:选择2005-01/2006-12在解放军总医院接受肾移植手术患者124例,患者对治疗方案均知情同意.按随机数字表法分为健康教育组和对照组,每组各62例.对照组进行常规护理,健康教育组在常规护理基础上实施健康教育干预措施,然后进行包括一般情况、肾病、肾移植和服药依从性在内的问卷调查,比较两组患者得分情况,得分越高,表明对对肾移植相关知识掌握越多,服药依从性越好.结果:124例肾移植患者全部进入结果分析.①服药依从性在不同年龄组之间差异无显著性意义(P＞0.05);女性患者的依从性较男性好(P＜0.01);不同文化程度、婚姻状况、医疗费支付方式的患者依从性差异无显著性意义(P＞0.05);干部较其他职业者依从性好(P＜0.05);服用的主要免疫抑制剂为进口药物者较国产者依从性好(P＜0.01);有提醒服药者较无提醒服药者依从性好(P＜0.01).②健康教育组患者实施健康教育干预后对肾移植术基本知识的掌握和认识程度及服药依从性的得分均显著高于对照组(P＜0.05).结论:系统规范的健康教育可使患者掌握肾移植的基本知识,增强患者的服药依从性,有助于提高其生活质量.
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肝移植围术期肌钙蛋白Ⅰ和肌酸磷酸激酶的变化
选择2004-01/06在天津市第一中心医院麻醉科行肝原位移植术的患者38例,均知情同意.患者在全麻下行经典非转流肝原位移植术,分别在切皮时、无肝期20 min、新肝期1 h、术后24,48,72 h6个时间点由中心静脉抽取静脉血,检测血清肌钙蛋白Ⅰ和肌酸磷酸激酶同工酶变化.新肝期1 h患者血清肌钙蛋白Ⅰ含量、肌酸磷酸激酶同工酶活性比切皮时增高(P＜0.05),术后24,48,72 h的肌酸磷酸激酶同工酶活性比切皮时增高(P＜0.05～0.01);而术后24,48,72 h的肌钙蛋白Ⅰ含量无明显变化(P＞0.05).心肌损伤的评价指标肌钙蛋白Ⅰ的变化说明再灌注期存在一过性心肌细胞损伤,术后肌酸磷酸激酶同工酶仍增高可能由肠道缺氧引起.
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推移腓肠肌肌皮瓣移植修复小腿中下部软组织缺损的临床应用
目的:腓肠肌肌皮瓣因受到蒂部长度限制,只能修复小腿中上部的皮肤软组织缺损,难以修复中下部的软组织缺损.采用推移腓肠肌肌皮瓣移植的方法,观察其修复小腿中下部软组织缺损的临床效果.方法:选择2000-02/2006-10应用推移腓肠肌肌皮瓣移植修复小腿中下部软组织缺损患者14例,软组织缺损范围为12.0 cm×6.5 cm～4.5 cm×3.5 cm,均知情同意.只保留内和/或外侧腓肠血管蒂,切开肌皮瓣周围皮肤及切断腓肠肌的起止点,形成岛状腓肠肌内和/或外侧腓肠肌肌皮瓣,在屈膝30°～60°时,肌皮瓣能明显向远端、前端推移4～10 cm,修复至中小腿下段创面,腓肠肌肌皮瓣大为26.0 cm×8 cm,小为13.0 cm×4.5 cm.术后定期随访.结果:所有病例均随访半年以上,12例肌皮瓣完全成活;2例远端部分皮肤坏死,经清创及比目鱼肌肌瓣转移填塞、中厚皮植皮愈合.术后有4例皮肤裂开,2例经换药愈合;1例用局部皮瓣转移修复;1例再行取钢板及清创后伤口愈合.结论:推移腓肠肌肌皮瓣能明显延伸向小腿远、前方,达小腿下段,血运丰富,转移方便,适应症广,是移植修复小腿中下部软组织缺损的一种优良供区.
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肾移植术后肺部感染特征97例分析
回顾性分析解放军总医院第二附属医院1992-05/2007-07收治的97例肾移植术后肺部感染患者的临床资料,患者对治疗方案均知情同意.①肺部感染多发生于术后1～12个月,尤以术后2～6个月多见,大剂量激素冲击多为诱因;重症肺部感染多为混合性感染,多为巨细胞病毒、真菌、耐药菌群和条件致病菌感染为主.②97例患者中肺部感染致急性呼吸窘迫综合征25例,13例死亡,死亡率达47.3%;在2007年,4例急性呼吸窘迫综合征中仅1例死亡,死亡率下降为20%,其中,1例长呼吸机辅助呼吸达33 d,患者痊愈出院;2个或2个以上器官障碍者死亡24例,多见于上消化道出血和肾功能衰竭.③从2006-06开始,对于急性呼吸窘迫综合征患者早期T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+＜1%,即刻完全停用钙调神经磷酸酶抑制剂和抗细胞代谢免疫抑制剂,仅给小剂量的糖皮质激素,且血肌酐平均下降100 mmol/L,其中1例完全停用达25 d,血肌酐完全正常.④肾移植术后肺部感染发生率高,早期依据T淋巴细胞亚群和血肌酐的变化及时有效的减少或停用抗排斥药物及抗生素经验性用药是救治成功的前提.病情危重者(特别是急性呼吸窘迫综合征)及早呼吸末正压通气,充分保护其他脏器的正常功能,合理应用糖皮质激素和纤维支气管镜,密切加强各专业学科问协作等是救治成功的关键.
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2型糖尿病并发末梢神经病变的危险因素:1∶1病例对照
背景:多种相关因素影响糖尿病末梢神经病变的发生率.这些相关因素也可表现在单纯糖尿病患者身上,其中的哪些因素参与糖尿病患者发生末梢神经病变的发生过程?目的:分析2型糖尿病患者并发末梢神经病变的危险因素.设计:以医院为基础的1∶1配对病例对照.单位:天津医科大学公共卫生学院.对象:选择2002-12/2003-11就诊于天津医科大学代谢病医院的门诊或住院的111例糖尿病末梢神经病变患者作为糖尿病末梢神经病变组.其中男53例,女性58例.纳入标准:依据1997年美国糖尿病协会推荐的糖尿病诊断标准,2型糖尿病的分型按1997年ADA分型方案[7];神经反射检查,跟腱反射、膝腱反射等减退或消失,痛温振动觉检查,痛温觉减退或消失,音叉振动觉减退或消失.选择同期本院门诊及住院的单纯糖尿病患者111例为对照组.纳入对象均对纳人情况知情同意.方法:于患者住院或门诊就诊时应用自制调查表进行调查.调查表包括患者的一般情况、既往史等80多项目.记录患者的实验室检查结果:包括血糖控制情况,基础代谢率,腰臀围比值,收缩压,舒张压,尿素氮,肌酐,尿酸,生化检查,跟腱反射,膝腱反射,振动觉,巴氏征阳性,心电图.将资料分类输入计算机,运用多因素条件Logistic回归分析,建立主效应方程分析精尿病末梢神经病变的危险因素.主要观察指标:糖尿病末梢神经病变的相关因素.结果:纳入111例糖尿病末梢神经病变患者和111例单纯糖尿病患者全部进入结果分析.糖尿病末梢神经病变发生的保护性因素包括:文化程度高、治疗方法力度大、现患冠心病、饮茶;危险因素包括:糖尿病病程长、血糖控制不良、使用胰岛素、合并糖尿病肾病、合并糖尿病视网膜病变、主诉眩晕症状、皮肤干燥、现患高血压、既往酮症、患精尿病前肉类食物的摄入较多、既往吸烟、创伤经历、腰臀比超标、血胆固醇水平高.多因素Logistic同归分析示糖尿病末梢神经病变发生的危险因素有6个:糖尿病病程、使用胰岛素、主诉眩晕症状、糖尿病前肉类食物摄入较多、饮酒以及既往创伤经历.结论:糖尿病末梢神经病变与多种因素相关,在2型糖尿病患者中,糖尿病病程长、使用胰岛素、主诉眩晕症状、糖尿病前肉类食物摄入较多,饮酒、既往创伤史会增加精尿病神经病变的发生危险.应在糖尿病末梢神经病变的防治过程中特别予以注意.
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江苏地区汉族人群白细胞分化抗原14启动子C(-159)T多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病的相关性
目的:分析江苏地区汉族人群白细胞分化抗原14基因启动子C(-159)T多态性与冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)之间的关系.方法:选择2003-08/2005-09南京市鼓楼医院心内科经冠状动脉造影确诊为冠心病患者(冠状动脉至少有一支管腔狭窄大于50%)193例.同时间随机抽取参加南京市鼓楼医院门诊无血缘关系的健康体检者225名为健康对照组.采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术分析冠心病患者及健康对照者白细胞分化抗原14基因启动子-159位点多态性.并采用生化方法和酶联免疫吸附法检测研究对象的血脂和外周血可溶性白细胞分化抗原14水平.结果:所有受试者完成测试并进入结果分析,无脱落者,DNA抽提均成功.①血脂和可溶性白细胞分化抗原14水平:冠心病组血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、血清白细胞分化抗原14水平高于健康对照组.血清高密度脂蛋白胆同醇水平低于健康对照组.②基因型分布:健康对照组和冠心病组CC,CT,TT基因型分布分别为20.90%,55.10%,24.00%和15.00%,49.20%,35.80%,健康对照组高于冠心病组,差异有统计学意义(χ2=7.527,P＜0.05).③等位基因频率:健康对照组和冠心病组C,T等位基因频率则分别为48.40%,51.60%和39.40%,60.60%.健康对照组高于冠心病组,差异有统计学意义(χ2=6.858,P＜0.05).④冠心病组CC,TC和TT基因型人群之间血脂水平和血清可溶性白细胞分化抗原14水平差异无显著性(P均＞0.05).结论:白细胞分化抗原14基因启动子C(-159)T位点多态性与江苏地区汉族人群冠心病存在相关性,它可能是汉族人群冠心病发病的遗传学易感因素.
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南京地区支气管哮喘患者合并过敏性鼻炎的现状及其临床表现相关性
背景:过敏性鼻炎和支气管哮喘均为呼吸道炎性疾病,它们常并存于同一患者.目的:了解南京地区支气管哮喘患者中过敏性鼻炎的发生率,并分析过敏性鼻炎与支气管哮喘在临床表现方面的相关性.设计:问卷调查.单位:解放军南京军区南京总医院耳鼻咽喉-头颈外科及呼吸内科.对象:纳入2001-02/2005-04解放军南京军区南京总医院确诊为支气管哮喘的患者134例,男73例,女61例;年龄3～72岁.参照全球哮喘防治创议(Global initiative for asthma,GINA)方案进行哮喘严重程度分级;过敏性鼻炎的诊断标准参照1997-11"海口会议"的修订标准;所有患者均同意参与问卷调查.方法:通过问卷调查,详细了解134例支气管哮喘患者中患支气管哮喘、过敏性鼻炎患者的年龄、症状分型及严重程度、治疗状况、家族史等临床资料.应用统计学描述和两个独立样本的t检验,并计算支气管哮喘合并过敏性鼻炎的发生率,比较支气管哮喘和过敏性鼻炎患者的年龄、发病年龄及病程的差异有无显著性.应用Spearman等级相关分析进行两者严重程度相关性分析.主要观察指标:支气管哮喘患者中过敏性鼻炎的发生率,以及过敏性鼻炎与支气管哮喘在临床表现方面的相关性.结果:支气管哮喘患者134例中82例(61.2%,82/134)并发过敏性鼻炎,其中男45例,女37例.此82例患者中,哮喘严重程度一级(轻度间歇)56例,二级(轻度持续)21例,三级(中度持续)4例,四级(重度持续)1例.其过敏性鼻炎分型,间歇性65例,持续性17例;按严重程度分级,轻度63例,中-重度19例.过敏性鼻炎与支气管哮喘严重程度呈明显正相关(r=0.689,P＜0.01).结论:南京地区支气管哮喘合并过敏性鼻炎的发生率较高;过敏性鼻炎与支气管哮喘严重程度具有高度相关性.
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基于医学指标与体质量指数关系评价肥胖标准的方法
目的:以医学指标为参照依据,建立与健康密切相关的肥胖评价标准,为国内制定肥胖评价标准提供了一种新的理论与方法.方法:调查于2002-11在西安市完成.调查对象为无明显严重急、慢性疾患、无肥胖遗传史、居住5年或以上的常住女性居民108人,均知情同意.调查指标:①血压.②血脂、胰岛素:应用7170生化分析仪测定总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇,应用FJ-2008Pγ放射免疫计测定胰岛素.依据《全国临床检验操作规程》中血压、血脂、胰岛素等临床医学指标的标准将受试者分为两组,在正常范围内者为正常组,超出正常范围者为异常组.③肥胖:体质量指数18.5～23.9 kg/m2为正常,24～27.9 kg/m2为轻度肥胖即超重,≥28 kg/m2为肥胖.结果:①西安市中老年女性的体质量指数与收缩压、舒张压、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、胰岛素等医学指标呈正相关(P＜0.05～0.01).②医学指标异常组调查对象的体质量指数均大于正常组(P＜0.05～0.01).③随调查对象体质量指数的增加,医学指标异常率也不断增加.④医学指标异常数达到临界值以上时引发相关疾病的可能性很大.结论:西安地区中老年女性临床医学指标与体质量指数相关性较高,且随着肥胖程度增加其异常率同步提高.临床医学指标可以作为建立肥胖评价标准的重要科学依据.
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锦州地区男性吸烟、体质量指数与临床良性前列腺增生的危险性研究
背景:良性前列腺增生是一种老年男性常见的疾病,尽管发病的危险因素仍不清楚,但是诸多生活方式因素对此病具有一定的影响作用.目的:观察锦州地区男性吸烟、体质量指数与临床良性前列腺增生危险性之间的关系.设计:病例对照观察.单位:华中科技大学同济医学院流行病与统计学系;辽宁医学院预防医学教研室.对象:选择2004-05/2006-05在辽宁医学院附属第一及第三医院、锦州中心医院和锦州市第二人民医院泌尿外科收治的343例良性前列腺增生行外科手术患者为病例组,年龄50～82岁.纳入标准:①年龄＞50岁,I-PSS症状分＞7.②排尿后直肠指检前列腺Ⅰ度以上(横径＞3 cm).③B超检查示前列腺体积≥30 g.④大尿流率＜15 mL/s;选择同期入住于上述医院,因患各种与良性前列腺增生、前列腺癌以及前列腺炎危险因素无关疾病的361例患者为对照组,年龄50～82岁,平均65岁.所有患者均对调查内容知情并同意.方法:采用标准调查表对病例组和对照组患者进行调查,定义一生总吸烟量≥20包为吸烟者,反之为不吸烟者.根据吸烟量分成不吸烟、吸烟量1～19支/d、吸烟量20～29支/d和吸烟量≥30支/d,并按吸烟的时间分为不吸烟、1～19年、20～29年和≥30年.通过询问法,获得受试对象体质量指数,分为体质量指数＜18.4、正常(体质量指数18.5～23.9)、超重(体质量指数24.0～27.9)和肥胖(体质量指数≥28);调查患者文化程度分为文化程度＜7年,7～11年和≥12年,患者的职业分为工人、农民、知识分子及其他.将调查结果输入计算机、建立数据库,应用多元Logistic模型分析患者吸烟量、吸烟时间、体质量指教、文化程度、职业与临床良性前列腺增生的比值比(OR)和95%可信限(Cl).主要观察指标:患者吸烟量、吸烟时间、体质量指数、文化程度、职业与临床良性前列腺增生的关系.结果:纳人病例组患者343例,对照组361例均进入结果分析.①吸烟量≥30支/d患者与不吸烟者相比,发生临床良性前列腺增生的危险性增加(OR=1.32,95%CL为0.92～2.58,P＜0.01).②超重及肥胖吸烟者发生临床良性前列腺增生的危险性较不吸烟者显著增高(OR=1.68,2.35,95%Cl分别为1.32～3.67,1.83～4.16,P＜(0.01).③体力劳动者(农民)与发生良性前列腺增生的危险性呈负相关(P＜0.05).脑力劳动者(知识分子)发生临床良性前列腺增生的危险性高于对照组(χ2=6.62,P＜0.01).结论:吸烟≥30支/d的男性与临床良性前列腺增生呈正相关,超重(体质量指数24.0～27.9)和肥胖(体质量指数≥28.0)的男性吸烟发生临床良性前列腺增生的危险性显著地升高.
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慢性病患者生命质量测定量表体系共性模块的应用:高血压及冠状动脉粥样硬化性心脏病患者生命质量及其影响因素分析
目的:分析高血压与冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者的生命质量及影响因素.方法:①随机抽取2004-09/2005-10昆明医学院第一附属医院收治的具有一定文化程度(文盲及看不懂量表者除外)的高血压患者67例、冠心病患者64例,用慢性病患者生命质量测定量表体系共性模块(QLICD-GM)进行测定.②QLICD-GM包含3个领域10个小方面30个条目.各条目均采用5级评分法,分为一点也不、有一点、有些、相当、非常5个等级.在评分时正向条目直接计1～5分,逆向条目则反向计分.③用t检验和秩和检验比较其治疗前后的改变,用多元线性回归方法分析其影响因素.结果:①高血压患者治疗后躯体、心理功能及总量表得分高于治疗前(P＜0.05).②冠心病患者治疗后躯体、心理功能及总量表得分高于治疗前(P＜0.05).③年龄、性别、民族、医疗保障方式进入不同的回归方程.④多元逐步回归分析表明,射体功能得分变化与婚姻状况有关(t=2.43,P=0.016)结论:①高血压与冠心病患者治疗后生命质量有明显改善,其影响因素有年龄、性别、民族、医疗保障方式.②躯体功能的得分变化与婚姻状况有关.
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大肠癌患者生命质量测定量表FACT-C(V4.0)中文版应用评价
目的:对大肠癌患者生命质量测定量表FACT-C(V4.0)中文版的应用效果进行考评.方法:①选择2001/2005云南省肿瘤医院收治的具有一定文化程度(文盲及看不懂量表者除外)的大肠癌住院患者作为调查对象.②调查者以医生的身份出现,作简单的解释和说明后将FACT-C中文版量表发给110例知情同意的患者填写,并等待其完成后收回检查有无漏项.对每个调查对象在入院时进行一次测定,并抽取109例患者在第2-3天进行一次重测,经过治疗后在出院前再抽取54例患者进行第3次测定.③按照FACT-C的计分规则计算各条目、领域和总量表得分,并据此计算各种信度、效度,反应度指标.结果:①信度:各个领域的重测相关系数均在0.76以上;各领域内部一致性信度的α值除附加关注领域为0.56外,其余均在0.80以上.②效度:各条目与其所属领域的相关系数较大,而与其他领域的相关较小;对共性模块FACT-G的27个条目进行因子分析,提取了4个主成分,累积方差贡献达到70.03%.③反应度:生理状况、附加关注、试验结局指数及总量表得分均显示治疗前后差异有统计学意义.结论:FACT-C中文版具有较好的信度、效度及反应度,可作为我国大肠癌患者生命质量的测评工具.
