中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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血清药理学方法对药理、药效学和新药研发的贡献
背景:对于复杂成分药物,尤其是复方中药,国内外诸多学者采用血清药理学方法进行药效评价及相关作用机制的研究,推动了药理药效学研究进展以及血清药理学技术方法本身的不断规范与完善.目的:对近几年来中药血清药理学方法在各领域研究中的广泛应用作以综述,并对血清药理学方法的优势和不足进行评价.方法:应用计算机检索PubMed数据库、中国知网数据库2012年1月至2017年6月发表的与血清药理学方法学相关,或采研究方法中应用了含药血清的研究,检索词为"血清药理学,含药血清,serum pharmacology,medicated serum,drug-containing serum".依据纳入排除标准筛选检索到的2977篇文献,共纳入58篇并分析.结果与结论:血清药理学方法可以较好地反映药物的药效及其作用环境,有助于研究中药药效物质及其在体内的过程,因此已被众多学者和专家所采用.近年来对血清供体、给药剂量、频次方案、血清采集、处理保存、加药比例等研究方案的探索优化中取得了显著进展,并已在心血管系统、呼吸系统、消化系统、神经系统、骨骼系统、泌尿系统、生殖系统、免疫系统、抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等方向广泛应用,推动了药理学、药效学和新药研发等研究的发展进步.
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有限元法在足底筋膜炎生物力学研究中的应用
背景:对于足底筋膜炎生物力学的研究利用实验条件获取存在一定的难度,有限元法可以利用其强大的建模及模拟计算功能解决实验获取存在的难题.目的:探讨有限元分析在足底筋膜炎产生机制、治疗方法、鞋及鞋内垫的设计等几个方面的应用,为足底筋膜炎的预防及康复提供理论性指导,并对有限元分析在足底筋膜炎研究的应用提供新的思路.方法:第一作者以"有限元分析,足底筋膜(炎),足部,生物力学,finite element analysis,plantar fascia(fasci tis),foot,biomechanics"为检索词,在中国期刊全文数据库(CNKI)、百度学术、PubMed数据库中检索了1981年至2016年相关文献.结果与结论:目前各种用于模拟人体生物力学作用机制的模拟分析算法不断地开发,进而实现对复杂结构的足部组织以及鞋模型的建立和分析;对足部连续运动状态下非线性的、动态分析将得以实现,使得模拟分析的真实度得以提升;利用有限元法进一步的进行足底筋膜炎治疗手段的探索、康复器械的研发、鞋类整体材料和结构的设计都将是今后研究的发展方向.
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关节镜下后交叉韧带单束重建与双束重建临床疗效对照的Meta分析
背景:目前,修复后交叉韧带损伤多采用关节镜手术,但具体的重建方法却仍存在争议,单就单束重建和双束重建相关的临床结局,专家各执所见.目的:评价关节镜下单束与双束后交叉韧带重建术在临床疗效上的比较.方法:检索PubMed、Embase、the Cochrane library、CNKI、Wanfang等数据库中,有关关节镜下单束重建与双束重建后交叉韧带对照的文献.根据纳入和排除的相关标准,由2名研究人员进行筛选文献并对其进行质量评价,运用Revman5.3软件进行Meta分析.结果与结论:共纳入文献11篇,其中随机对照试验(RCT)5篇,非随机对照试验(Non-RCT)6篇,共529例后交叉韧带损伤患者.Meta分析结果:术后IKDC评分双束重建要优于单束重建[RR=0.88,95％CI(0.79,0.98),P=0.02];术后Lysholm评分[MD=-0.68,95％CI(-1.59,0.24),P=0.15]和术后Tegner评分[MD=-0.16,95％CI(-0.37,0.04),P=0.12]两组间差异无统计学意义;膝关节屈曲90°后向稳定性评价双束重建要优于单束重建[MD=1.07,95％CI(0.28,1.87),P=0.008].提示:单双束重建手术皆有效,仅在IKDC评分、膝关节稳定性方面双束重建优于单束重建;此次研究同时受到纳入文献数量的限制,后期还可采纳更多高质量的随机对照实验进一步论证.
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肌腱切断和肌腱固定修复伴肩袖损伤肱二头肌长头腱病变疗效比较的Meta分析
背景:肌腱切断和肌腱固定治疗伴有肩袖修复的肱二头肌长头肌腱病变的疗效比较存在广泛争议.目的:对肌腱切断和肌腱固定治疗伴肩袖修复的肱二头肌长头肌腱病变的疗效进行Meta分析.方法:以"肱二头肌,切断,固定,肩袖"为检索词,计算机检索2017年12月之前的中国期刊全文数据库(CNKI)、中文科技期刊全文数据库(VIP)、Medline、PubMed、Cochrane图书馆和Embase并收集所有相关研究,筛选并提取所需数据,使用Rev Man 5.3软件进行Meta分析.结果与结论:共纳入12项研究,共1076例患者.①Meta分析显示,肱二头肌长头肌腱固定组与肱二头肌长头肌腱切断组相比有更高的Constant评分和更低的Popeye畸形发生率(P<0.05);②2组术后目测类比评分、ASES评分、UCLA评分、上臂痉挛性疼痛发生率、患者满意度、肩关节活动范围及上臂力量方面差异均无显著性意义(P>0.05);③结果说明,伴肩袖修复的肱二头肌长头肌腱病变,切断和固定均能有效地减轻疼痛和改善功能,2组在临床功能预后方面无显著差异,肱二头肌长头肌腱固定虽有更高的Constant评分和更低的Popeye畸形发生率,但其临床意义可忽略.
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重组腺病毒介导MRTF-A基因干预缺血再灌注损伤模型大鼠心肌细胞的凋亡
背景:有研究表明上调myocardin相关转录因子A(myocardin-related transcription factor-A,MRTF-A)基因表达可抑制脑缺血再灌注诱导的神经细胞凋亡而发挥脑保护作用,但其对心肌缺血-再灌注损伤中心肌细胞的作用鲜有报道.目的:探讨重组腺病毒介导MRTF-A基因对大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、空白载体组和Adv-MRTF-A组,制备MRTF-A cDNA重组腺病毒载体,除假手术组外构建大鼠缺血再灌注损伤模型.Adv-MRTF-A组取大鼠左心室游离壁上、下、左、右4点各注射病毒滴度1.2×1010 TU/mL的Adv-MRTF-A;空白载体组以同样的方法注射同量的空白对照病毒,假手术组、模型组不注射.14 d后取材,TTC染色法检测各组大鼠心肌梗死面积,TUNEL法检测各组大鼠心肌细胞凋亡,Western blot法检测各组大鼠心肌组织中MRTF-A、Bcl-2、Mcl-1和Bax蛋白表达.结果与结论:①假手术组大鼠心肌梗死面积0％,与模型组和空白载体组比较,Adv-MRTF-A组大鼠心肌梗死面积明显减少(P<0.001);心肌细胞凋亡率显著降低(P<0.001);心肌组织中MRTF-A、Bcl-2、Mc-1蛋白相对表达量均升高,而Bax蛋白相对表达量降低(P<0.05).②结果说明,重组腺病毒介导MRTF-A基因表达可有效减少心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌梗死面积,其机制可能与促进Bcl-2、Mcl-1蛋白表达、抑制Bax蛋白表达从而抗心肌细胞凋亡有关.
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关节腔注射联合跑台运动建立大鼠慢性骨关节炎模型
背景:建立骨关节炎动物模型是研究骨关节炎病理机制、预防及治疗的重要手段.目的:进一步验证关节腔注射联合跑台运动建立大鼠慢性骨关节炎模型的可行性.方法:大鼠随机分为安静组、低强度组(跑台坡度0°,速度15 m/min)、中强度组(坡度5°,速度20 m/min)和高强度组(坡度10°,速度27 m/min),每组6只.实验开始后,采用关节腔注射白陶土-鹿角菜胶诱发大鼠膝关节急性损伤,术后第3天各运动组大鼠在跑台上以慢速跑步适应跑道,5 d后开始正式实验,每天运动1 h,每周休息1 d,持续6周.每周定期测量大鼠关节肿胀度,动物处死后,取膝关节制作石蜡组织切片,进行苏木精-伊红和番红-O-固绿染色,观察关节软骨组织病理学变化,取血清和滑膜,ELISA法测定滑膜基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶组织抑制剂1、白细胞介素1β 水平,黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶含量,以及免疫组化检测关节软骨Ⅱ型胶原的表达情况.结果与结论:①与安静组比较,中、高强度组大鼠膝关节组织病理学评分均明显增高(P<0.05或P<0.01);关节肿胀度明显增大(P<0.01或P<0.05);滑膜基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶组织抑制剂1和白细胞介素1β 含量明显增高(P<0.01),基质金属蛋白酶组织抑制剂1/基质金属蛋白酶3浓度比值显著降低(P<0.01);血清超氧化物歧化酶活性和关节软骨Ⅱ型胶原平均光密度值显著降低(P<0.01);而低强度组除大鼠关节软骨Ⅱ型胶原平均光密度值明显降低(P<0.05)外,其余指标均无明显变化;②中、高强度组各项指标变化与低强度组差别显著(P<0.01或P<0.05);③高强度组除大鼠滑膜基质金属蛋白酶3含量明显高于中强度组(P<0.01)及基质金属蛋白酶组织抑制剂1/基质金属蛋白酶3浓度比值明显低于中强度组(P<0.05)外,其余指标与中强度组差别不显著;④结果表明,中、高强度运动可加重大鼠关节肿胀损伤、组织病理学异常征象,加重大鼠氧化损伤及炎性损伤,同时加速关节软骨基质降解,从而造成大鼠慢性骨关节炎产生,结合实际操作情况,中等强度运动为建立大鼠慢性骨关节炎模型的佳运动条件.
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跑步运动结合摄取杜仲提取物对去卵巢大鼠骨密度和抗氧化能力的影响
背景:研究显示运动导致骨密度增加,并可改善身体组成.但妇女停经后身体抗氧化能力大幅下降,所以预防运动造成的氧化伤害亦非常关键.杜仲具有对改善骨密度和抗氧化效果,利用运动搭配杜仲摄入,尝试既可以改善更年期骨密度又能减少运动氧化伤害的方案.目的:探讨跑步运动结合摄取杜仲提取物和单纯摄入杜仲提取物对接受卵巢切除大鼠骨密度、血清雌激素、骨质代谢、抗氧化能力的影响.方法:先对大鼠进行1周适应性饲养,随机将大鼠分为2组,分别进行卵巢切除或假手术.大鼠恢复4周后,将切除卵巢大鼠随机分为模型组、杜仲组,杜仲运动组,进行12周干预,干预结束后,将所有大鼠置入代谢笼采集24 h尿样;隔日,所有大鼠进行力竭运动,之后采集大鼠腹腔血液.检测各组大鼠的氧化指标(包括血肌酸激酶、乳酸脱氢酶浓度、丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶活性),骨质代谢指标(包括血清骨钙素、碱性磷酸酶、Ca、P浓度以及尿液中的脱氧吡啶啉、Ca、P水平),同时记录大鼠的体质量变化、血清雌二醇水平和股骨骨密度值.结果与结论:经12周干预后,杜仲组和杜仲运动组大鼠体质量、丙二醛、骨钙、碱性磷酸酶、磷浓度显著低于模型组(P<0.05);血清雌二醇、股骨骨密度显著高于模型组(P<0.05).杜仲运动组各项指标均优于杜仲组和运动组,但未达到显著性差异(P>0.05).说明长期进行跑步运动并结合摄取杜仲提取物或单纯摄取杜仲提取物均可以显著提升切除卵巢骨质疏松大鼠的骨密度、血清雌激素水平,并可以促进骨代谢平衡,降低骨转换率和因卵巢功能降低导致的体质量增加,能够起到维护骨量、防止骨质疏松作用.
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敲降Gata6基因雄性小鼠模型睾丸功能维持过程中的调控机制
背景:GATA家族是一类含有两个保守锌指结构的转录调节因子,在人和脊椎动物中广泛表达,同时该家族参与调节组织发育、分化和细胞增殖过程.Gata6属于GATA家族中的一员,其在哺乳动物的心脏、性腺、脾脏、肝、性腺等器官发挥重要功能.目的:分析Gata6基因在小鼠睾丸中的作用机制.方法:以小鼠为模型,通过CRISPR/Cas9技术在雄性小鼠体内敲降Gata6基因,并以正常小鼠做对照,组织学观察睾丸形态学变化,El isa法测定雄激素相关合成酶,实时定量PCR仪检测相关基因.结果与结论:①利用CRISPR/Cas9技术成功在小鼠体内敲降Gata6基因;②与对照组相比,2月龄敲降组小鼠睾丸发育迟缓,睾丸及相关生殖器明显变小,精原细胞和精子生成减少,睾丸中雄性信号通路相关基因表达量降低,雄激素水平显著降低(P<0.05);③结果说明,Gata6在哺乳动物睾丸发育过程中发挥重要作用.
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不同年龄段女性相关部位骨密度与排球运动的相关性
背景:目前研究表明虽然不同类型的运动对骨密度的影响程度不同,但是在运动能够提高骨密度这一问题上已经达成共识.目的:探讨排球运动对女性骨密度的影响以及女性骨密度的年龄和侧别差异.方法:受试者共计112人,分为青年实验组20人,青年对照组20人,中年实验组20人,中年对照组18人,老年实验组18人,老年对照组16人.实验组是来自于高校的排球教师或长期坚持排球运动的女教师.对照组也是高校女教师,但是几乎没接触过排球运动.采用美国GE公司生产的Prodigy Advance型双能X射线骨密度仪对受试者的左右桡骨远端1/3处和腰椎(L2-L4)的骨密度进行骨密度测定.利用SPSS20.0数据统计软件对所得数据进行Independent-Sample T Test和one-way ANOVA.结果与结论:①桡骨骨密度在相同年龄段实验组均显著高于对照组(P<0.05),青年实验组显著高于青年对照组(P<0.05);②老年段腰椎(L2-L4)骨密度实验组显著高于对照组(P<0.05);③各观察指标在老年组和其他两组之间差异均有显著性意义(P<0.05);④结果说明,排球运动对女性桡骨和腰椎骨密度都有良好的作用,尤其是右侧桡骨;该运动对青年女性两侧桡骨骨密度的影响具有不对称性,这可能与两侧手臂所受的运动负荷不同有关;排球运动能够有效延缓老年人骨量的丢失.
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7个关节超声评分和超氧化物歧化酶在类风湿关节炎疾病活动度评估中的应用
背景:类风湿关节炎是一种慢性、累及全身多个关节的自身免疫性疾病.目前已发现类风湿关节炎患者体内氧化应激反应异常,提示氧化应激参与类风湿关节炎的疾病进程.在对类风湿关节炎患者的治疗中,超声作为常见的影像学工具,在评价疗效上受到重视.目的:探讨7个关节超声评分和超氧化物歧化酶在类风湿关节炎疾病活动度评价中的应用价值.方法:选取2016年4月至2017年4月期间在桂林医学院附属医院风湿免疫科就诊(门诊及住院)的类风湿关节炎患者163例,根据28个关节疾病活动指数(DAS28)分为稳定期(n=20)、轻度(n=30)、中(n=70)、重度活动期(n=43).另选同期健康体检者50例.检测所有受试者血清超氧化物歧化酶水平.以高频超声观察类风湿关节炎患者优势侧肢体7个关节,进行US7评分.应用US7评分及超氧化物歧化酶对类风湿关节炎疾病活动度进行评估.结果与结论:轻、中、重度活动期的类风湿关节炎患者血清超氧化物歧化酶水平均低于健康体检者和稳定期类风湿关节炎患者.US7评分中,重度活动期类风湿关节炎患者的滑膜炎灰阶超声评分和能量多普勒评分、腱鞘炎和肌腱炎灰阶超声评分高于稳定期;骨侵蚀在各个活动度类风湿关节炎患者之间无明显差异.超氧化物歧化酶水平与滑膜炎灰阶超声评分、滑膜炎能量多普勒评分、DAS28和类风湿因子负相关;DAS28与滑膜炎灰阶超声评分、滑膜炎能量多普勒评分、腱鞘炎及肌腱炎灰阶超声评分和腱鞘炎及肌腱炎能量多普勒评分正相关.DAS28、超氧化物歧化酶与骨侵蚀无明显相关性.提示超氧化物歧化酶与US7评分中除骨侵蚀以外的指标和DAS28密切相关,超氧化物歧化酶和US7评分可用于评估类风湿关节炎疾病活动度.
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胚胎移植操作对宫腔中胚胎运动、沉积的影响
背景:目前胚胎种植率维持在20％-30％,即移植入子宫的胚胎有70％-80％未能着床.除了胚胎质量、子宫内膜容受性以外,恰当的胚胎移植操作也是成功着床的重要因素.目的:通过数值仿真和体外胚胎移植实验,研究不同胚胎移植参数配合下人类胚胎进入宫腔后的沉积位置,得到佳胚胎移植参数配合.方法:以3个参数即注射时间(T)、移植导管端部与宫底距离(L)、子宫角度(A)的组合进行实验.其中注射时间取值10,20,30 s,移植导管端部与宫底距离取值5,10,15 mm,子宫角度取值-60°、-45°,-30°,-15°,0°,15°,30°,45°,60°.结果与结论:①比较了几种胚胎移植液体积对终沉积位置的影响,根据终分析选择了60μL作为胚胎移植液的体积;②不同子宫角度时,颗粒的运动轨迹和终沉积位置的原因是由于不同角度导致重力不同,佳子宫角度区间为15°-30°;③对比3种注射时间对终沉积位置的影响,佳注射时间为10 s;④对比3种移植管端部与宫底距离对终沉积位置的影响,佳移植管端部与宫底距离为10 mm.
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ROCK抑制剂Y-27632促进人角质形成细胞增殖与调控衰老
背景:促进角质形成细胞体外培养增殖能力对皮肤生物学和皮肤相关疾病发病机制的研究具有重要意义.目的:观察Rho激酶抑制剂Y-27632对角质形成细胞增殖与衰老的影响.方法:分离培养人角质形成细胞,通过形态鉴定观察Y-27632(10μmol/L)对角质形成细胞形态的影响;利用群体倍增速率估算Y-27632对角质形成细胞增殖的影响;分别在角质形成细胞第0,5代,通过 β-半乳糖苷酶细胞染色方法检测Y-27632对细胞衰老的作用;进一步通过MTT法和BrdU细胞增殖检测试剂盒检测细胞增殖情况.结果与结论:人角质形成细胞为大小均一的铺路石样细胞,且在早期具有较强的增殖能力,随着细胞传代,增殖能力降低,且形态变为扁平的,胞浆增大的特点;Y-27632显著提高了细胞的群体倍增速率,通过 β-半乳糖苷酶细胞染色显示,Y-27632降低了阳性细胞数,进一步通过MTT法和BrdU细胞增殖检测法得出,Y-27632促进细胞体外增殖.结果说明,人角质形成细胞体外过程中,Y-27632的加入不仅能够抑制细胞衰老,同时促进其增殖,为角质形成细胞体外扩增培养与研究提供了新思路.
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三种方法提取大鼠原代巨噬细胞的生物学特点比较
背景:提取原代大鼠巨噬细胞的方法包括肺泡灌洗液提取、脾脏提取及外周血提取等多种方法,这些方法各有优缺点,巨噬细胞活性、状态及数量各有不同.目的:分析3种不同组织来源的巨噬细胞原代提取及培养的较优选择.方法:在同一实验条件下,采用肺泡灌洗液提取、脾脏提取及外周血提取3种不同的原代细胞培养方法培养大鼠巨噬细胞.结果与结论:①肺泡灌洗液提取、脾脏提取及外周血提取法各组巨噬细胞培养提取细胞个数平均值分别为(1.14±0.14)×106个、(9.29±0.19)×106个及(3.17±0.13)×106个,3组间比较差异有显著性意义(P<0.001);②3种方法提取细胞存活的平均时间分别为(111.00±5.98),(100.00±4.60)及(97.00±3.43)h,差异有显著性意义(P<0.001);③3种方法提取细胞的活性比较,肺泡灌洗液提取出的巨噬细胞显著高于另2组(P<0.05),而脾脏提取与外周血提取差异无显著性意义(P>0.05);④结果提示,3种方法中,肺泡灌洗液提取的巨噬细胞活性强,脾脏提取的巨噬细胞数量多.
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腺病毒载体构建小鼠趋化素基因缺陷性细胞系
背景:趋化素在动脉粥样硬化中的表达水平上调,趋化素可能参与了动脉粥样硬化的病理过程.目的:应用腺病毒介导的RNA干扰技术,构建并有效沉默趋化素基因的表达体,为研究其对动脉粥样硬化机制奠定实验技术基础.方法:以小鼠趋化素基因mRNA序列作为干扰靶点,以腺病毒基因pCD316-ZsGreen-shRNA作为质粒载体,设计4组靶向趋化素基因的shRNA序列,构建靶向鼠趋化素的shRNA表达质粒,另构建不针对任何已知mRNA的阴性对照shRNA表达质粒,筛选出干扰效果好的shRNA,并在293T细胞对腺病毒进行包装和滴度测定.体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10,转染腺病毒形成趋化素基因缺陷性B16F10细胞,用qPCR和Western blot检测感染腺病毒后细胞中趋化素mRNA和蛋白水平.结果与结论:①PCR以及基因测序结果表明Chemerin shRNA腺病毒载体构建成功,腺病毒的滴度为2×1010 PFU/mL,pDC-shRNA4对趋化素基因的抑制效果显著(P<0.001);③qPCR和Western检测B16F10细胞中趋化素mRNA水平和蛋白水平,结果显示Chemerin-shRNA4达到一定的敲低效果;②表明腺病毒介导的shRNA-Chemerin4可有效沉默B16F10中趋化素基因的表达.
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丹参水溶性提取物上调血红素加氧酶1表达对H9C2心肌细胞的保护
背景:心肌缺血再灌注损伤的发病与氧化应激损伤有关.既往研究显示丹参具有改善急性梗死心肌细胞凋亡的作用.目的:探讨血红素加氧酶1介导丹参水溶性提取物对H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用.方法:以H9C2心肌细胞为研究对象,实验分为4组,分别为对照组、模型组、钴原卟啉组和丹参组;用300μmol/L H2O2处理心肌细胞24 h建立心肌细胞氧化损伤模型;在建立心肌细胞氧化损伤模型后,用丹参水溶性提取物和钴原卟啉干预氧化损伤的心肌细胞.对照组不做任何处理.结果与结论:与对照组相比,模型组细胞上清液中肌酸激酶和乳酸脱氢酶含量升高,细胞裂解液中丙二醛含量升高,超氧化物歧化酶含量下降,细胞中血红素加氧酶1和核转录因子E2相关因子2表达增加;与模型组相比,丹参组和钴原卟啉组上清液中肌酸激酶、乳酸脱氢酶、丙二醛的含量降低,超氧化物歧化酶含量上升,细胞中血红素加氧酶1和核转录因子E2相关因子2表达明显升高.提示丹参水溶性提取物能够通过激活血红素加氧酶1蛋白的表达,对心肌细胞氧化应激损伤起保护作用.
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以组织病理细胞学和影像结构特征为分析依据的乳腺导管增生计算机辅助诊断系统
背景:对疑似乳腺癌诊断而言,细胞组织病理诊断是重要的诊断步骤.若医生需要针对每一张苏木精-伊红染色影像都需要凭借自己的经验以肉眼进行判断,不但具有较大的主观性,医生的疲劳度和专注力也会影响整体判断结果.目前国内外一直缺乏一套定量、客观的乳腺癌细胞计算机辅助诊断系统.目的:将发展一套计算机辅助诊断系统,基于多重分辨率的概念,以组织病理细胞学特征和影像结构特征为分析依据,从而判别乳腺导管细胞增生的类型.方法:针对患者粗针穿刺切片的乳管组织影像,引入多重分辨率的概念,首先将细胞影像进行Sigmoid强化,然后将细胞的形状、大小、排列及颜色均匀度作为计算机辅助诊断系统的判别特征依据,利用大期望算法结合Lab色彩空间对细胞影像进行颜色分离,初步分割得到感兴趣的细胞核;针对细胞核不完全分割的问题,采用空洞修复算法进行解决,对于相邻细胞核重叠的问题,采用分水岭转换进行解决,终成功分离得到候选细胞核.一旦细胞完整呈现后,将进行候选细胞核特征获取,采用椭圆拟合、图论以及纹理特征等方法取出需要的细胞核特征,通过特征选择和线性判别分析进行特征获取和筛选,后由支持向量机分类器进行乳腺导管细胞增生的类型判别,判断是否存在癌症活动.结果与结论:内导管增生病变判读的实验结果证实,当使用特征选取配合线性判别分析筛选得到14维度的特征维度,并使用支持向量机-径向基函数作为分类器时,此文所设计的诊断辅助系统的准确率高达88.4％,能够作为疑似乳腺癌诊断的辅助系统.
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晚期糖基化终末产物致软骨细胞炎性反应的潜在机制
背景:前期研究表明,晚期糖基化终末产物与兔软骨细胞共同孵育后,肿瘤坏死因子 α 和基质金属蛋白酶13等炎性因子与基质降解因子表达明显增多.然而,晚期糖基化终末产物致软骨细胞损伤的机制远未阐明.目的:观察晚期糖基化终末产物对人关节软骨细胞炎性因子与基质降解因子表达及核因子KB活化水平的影响,初步探讨晚期糖基化终末产物诱软骨细胞损伤的潜在机制.方法:运用机械分离与两步酶顺序消化法分离培养人软骨细胞,并用Ⅱ型胶原免疫组织化学染色以及细胞免疫荧光对人软骨细胞进行鉴定.采用不同质量浓度晚期糖基化终末产物(1,10,25,50,100 mg/L)干预人软骨细胞;并以正常人软骨细胞及BSA干预为对照,24 h后采用Real-time PCR及Western blot检测肿瘤坏死因子 α、基质金属蛋白酶13、白细胞介素1三者的mRNA及蛋白表达水平,采用Western blot检测人软骨细胞胞浆中IKBα 及胞核中核因子 κB p65的含量.结果与结论:①与对照组比较,晚期糖基化终末产物可浓度依赖性地诱导人关节软骨细胞肿瘤坏死因子 α、基质金属蛋白酶13、白细胞介素1α、白细胞介素1β 表达增多,且以100 mg/L组作用明显;②晚期糖基化终末产物处理组中软骨细胞胞浆中IKBα 含量明显减少、而胞核中核因子 κB p65的含量明显增多;③结果说明,晚期糖基化终末产物诱导白细胞介素1、基质金属蛋白酶13和肿瘤坏死因子 α 表达增多,其机制可能与核因子KB信号通路有关.
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颈部脊髓损伤患者24 h内外周血中细胞因子水平与ASIA功能分级的相关性:对照组比较
背景:研究表明细胞因子在脊髓损伤的病理生理机制中发挥着至关重要的作用.直接或者间接的抑制或者减轻脊髓损伤后免疫炎性反应,能够改善患者的预后以及神经功能的恢复.目的:分析颈部脊髓损伤早期(<24 h)患者外周血中的白介素1β、白细胞介素6、白细胞介素10、肿瘤坏死因子 α、转化生长因子 β1和干扰素 γ 水平的变化与ASIA神经功能分级的相关性,并探讨细胞因子介导的免疫炎症反应在颈部脊髓损伤发病机制中的作用.方法:30例颈部脊髓损伤患者为脊髓损伤组,另外20例健康的血液捐献者为对照组.采集外周静脉血,并使用酶联免疫吸附(ELISA法)测定外周血中细胞因子水平.脊髓损伤组依据ASIA分级分成A级10例为完全性脊髓损伤组,B级+C级+D级+E级20例为不完全性脊髓损伤组.结果与结论:①脊髓损伤组外周血中白细胞介素1β、白细胞介素6和转化生长因子 β1水平均明显高于对照组;②颈部脊髓损伤患者中完全性脊髓损伤组外周血中转化生长因子 β1水平明显高于不完全性脊髓损伤组(P<0.01);③结果说明,颈部脊髓损伤早期患者外周血中白细胞介素1β、白细胞介素6和转化生长因子 β1的水平升高;颈部脊髓损伤患者外周血中转化生长因子 β1水平与脊髓受损的严重程度有相关性,提示颈部脊髓损伤后患者神经系统功能缺失的程度与免疫反应之间存在着一定的联系.
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miRNA-140靶向结合自噬相关基因ULK1的验证
背景:自噬可以通过抑制凋亡来缓解膝骨关节炎,miR-140是否可以调节自噬关键基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)基因未见报道.目的:探索miRNA-140对ULK1基因的调控关系.方法:通过miRNA靶基因预测网站预测ULK1基因是否为miRNA-140的靶基因;将ULK1基因的3'端非翻译区全长序列载入海肾荧光素酶基因的下游,通过构建结合位点的突变序列,得到野生型和突变型载体,分别用野生型和突变型海肾荧光素酶载体转染293T细胞,检测每种转染细胞海肾荧光素酶的表达活性;运用miRNA-140 inhibitor对293T细胞进行干预,Western blot检测ULK1蛋白表达水平.结果与结论:与野生型载体组细胞相比,加入miR-140 mimics后荧光素酶的表达活性明显降低(P<0.01);当抑制miRNA-140后,ULK1蛋白的表达明显升高(P<0.01).结果证实,miRNA-140可以与ULK1基因靶向结合从而调控其表达.
