中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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造血干细胞移植志愿捐献者罕见基因人类白细胞抗原C*08：99的测序分析
背景：随着测序技术被广泛应用，器官移植配型的高分辨确认工作逐渐深入开展，人类白细胞抗原新等位基因不断涌现，但由于发现较晚，基因频率还不能准确计算，相关报道甚少，这些基因常被忽视，有时单纯根据基因频率判断分型结果，易造成分型结果的误判。目的：检测与分析1例造血干细胞移植志愿捐献者携带的罕见等位基因人类白细胞抗原C*08：99。方法：采用快速DNA提取试剂盒从全血样本中提取基因组DNA，经人类白细胞抗原C基因商品化测序分型试剂盒扩增，纯化后的扩增产物作为模板由试剂盒配套的第2，3和4外显子常规检测区正反向测序引物及自行研制的非常规检测区第5外显子正反向、第6外显子正向和第7外显子反向测序，经乙醇/醋酸钠/EDTA纯化的测序反应产物于ABI PrismTM 3730测序仪电泳检测，相关的Assign 3.6+分析软件予以人类白细胞抗原高分辨水平基因分型。结果与结论：①将电泳后的数据导入Assign-SBT 3.6+分析软件，得出的分型结果为C*07：04，08：99。②结果证实，临床移植配型人类白细胞抗原C基因分型增加第5，6，7外显子区域外的多态性检测可提高分型结果的准确性，对临床组织配型工作具有重要意义。
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脐血干细胞移植治疗糖尿病下肢缺血的可行性
背景：糖尿病下肢缺血患者病变大多会累及下肢远端小动脉，导致常规治疗方法难度增加。目的：探讨脐血干细胞移植治疗糖尿病下肢缺血大鼠的效果和安全性。方法：建立糖尿病下肢缺血大鼠模型，沿股动脉走向，在模型大鼠下肢选取5点，每点注射人脐带间充质干细胞悬液20μL。移植后1，2，4周，检测经皮氧分压以及缺血部位血管密度和血管内皮生长因子水平，并记录不良反应发生情况。结果与结论：移植后1，2，4周大鼠经皮氧分压以及缺血部位血管密度和血管内皮生长因子水平整体均呈现出不断上升的情况，与移植前比较差异均有显著性意义(P <0.05)。移植后所有动物均未出现皮肤出血和皮炎以及局部红、肿、热、痛等炎症反应，相关脏器均未出现瘤样生长。结果表明脐血干细胞移植治疗糖尿病下肢缺血，可显著改善下肢缺血症状，且安全性高，具有一定的应用可行性。
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盐酸川芎嗪联合骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤模型大鼠的神经保护
背景：盐酸川芎嗪具有促进神经修复的作用，可以应用于神经系统损伤的治疗。目的：观察盐酸川芎嗪与骨髓间充质干细胞移植联合应用大鼠脊髓损伤后的干预对电生理及后肢功能变化的影响。方法：采用Al en打击法建立T9脊髓全横断损伤模型大鼠，建模后随机分为3组，对照组仅尾静脉注射培养液；骨髓间充质干细胞移植组于尾静脉注射等体积的骨髓间充质干细胞；联合组尾静脉注射骨髓间充质干细胞+尾静脉滴注盐酸川芎嗪，持续4 h。造模后1，2，4，6，8周后进行BBB评分、改良Tarlov评分检测大鼠后肢运动功能恢复情况；于造模后72 h采用RT-PCR法检测各组大鼠脊髓损伤区周围Bcl-2、碱性成纤维细胞生长因子的表达变化；于造模后4周行体感诱发电位和运动诱发电位进行神经电生理恢复程度测定；造模后8周行辣根过氧化物酶示踪评估大鼠脊髓神经纤维的再生状况，通过PKH-26标记观察移植细胞的存活、迁移。结果与结论：造模后1，2，4，6，8周，联合组大鼠后肢BBB评分、改良Tarlov 评分联合组明显优于骨髓间充质干细胞移植组，骨髓间充质干细胞移植组明显优于对照组(P <0.05)，造模后72 h，PCR法检测结果表明联合组中大鼠脊髓损伤区周围Bcl-2、碱性成纤维细胞生长因子的表达显著高于骨髓间充质干细胞移植组及对照组(P <0.05)。造模后4周，各组体感和运动诱发电位的潜伏期：联合组<骨髓间充质干细胞移植组<对照组(P <0.05)。体感和运动诱发电位波幅宽度依次为联合组>骨髓间充质干细胞移植组>对照组(P<0.05)。造模后8周，骨髓间充质干细胞移植组及联合组有辣根过氧化物酶标记的神经锥体细胞明显的穿越痕迹；联合组中 PKH-26标记的阳性细胞数与辣根过氧化物酶阳性细胞数量多，骨髓间充质干细胞移植组次之，对照组相对少(P<0.05)。研究表明，盐酸川芎嗪联合骨髓间充质干细胞移植可促进脊髓损伤大鼠神经细胞再生，促进Bcl-2、碱性成纤维细胞生长因子基因的表达，改善肢体运动功能。
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人羊膜间充质干细胞移植减轻体外循环再灌注肺损伤
背景：近年来，间充质干细胞在器官或组织修复中展现了良好的前景，因此，基于间充质干细胞可塑性的细胞移植为体外循环后肺损伤的细胞再生及功能恢复提供了可能。目的：探讨外源性移植人羊膜间充质干细胞对犬体外循环缺血再灌注肺损伤的影响，从炎性因子角度初步探讨其作用机制。方法：健康成年杂种犬18只，随机分为空白组(建立体外循环模型，主动脉不阻断+股静脉注射1 mL生理盐水)、对照组(体外循环+主动脉阻断1 h+主动脉开放15 min后股静脉注射1 mL生理盐水)、实验组(体外循环+主动脉阻断1 h+主动脉开放15 min后股静脉注射含2×107人羊膜间充质干细胞的生理盐水1 mL)，每组6只。分别在体外循环前(T1)、主动脉开放后15 min(T2)、开放后1 h (T3)、开放后2 h(T4)、开放后3 h(T5)5个时间点，各取动脉血2 mL计算氧合指数和呼吸指数，取静脉血8 mL分别用ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶9、白细胞介素8、白细胞介素10水平，Western Blot印迹法检测肺组织NF-κB蛋白表达，同时光镜下观察各组肺组织病理学变化。结果与结论：①与对照组比较，实验组氧合指数在人羊膜间充质干细胞移植后2，3 h显著升高，实验组呼吸指数在人羊膜间充质干细胞移植后1，2，3 h显著下降。②与对照组同时间点相比，实验组肿瘤坏死因子α、白细胞介素8以及基质金属蛋白酶9呈明显下降趋势，白细胞介素10有所回升。③与空白组相比，对照组开放后3 h肺组织NF-κB蛋白明显增强，静脉注入人羊膜间充质干细胞后肺组织NF-κB表达较对照组显著降低。④实验组在主动脉开放后，病理改变明显轻于对照组，可见少量间隙内渗出红细胞与中性粒细胞，微血管扩张、充血。⑤结果表明，人羊膜间充质干细胞静脉移植可通过下调促炎因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素8，降低基质金属蛋白酶9水平，上调抗炎因子白细胞介素10水平，抑制肺组织NF-κB活化，减轻体外循环缺血再灌注相关肺损伤。
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脐带间充质干细胞移植对强直性脊柱炎患者免疫调节及组织损伤的影响
背景：间充质干细胞具有独特的免疫调节特性，使得其成为移植领域和治疗自身性免疫疾病的研究热点。目的：探讨脐带间质干细胞对强直性脊柱炎患者免疫水平以及组织损伤的影响。方法：回顾性分析61例强直性脊柱炎患者的临床资料，按照治疗方法分为对照组(33例)和观察组(28例)，分别进行免疫及生物剂治疗、脐带间充质干细胞输注治疗。治疗结束后随访12个月，观察两组治疗效果、免疫学指标、病情活动指数评分和不良反应发生情况。结果与结论：①总有效率：观察组和对照组分别为89%和76%，经比较差异有显著性意义(P <0.05)。②随访12个月，两组的血沉等指标均得到显著改善，且观察组均显著优于对照组(P <0.05)；两组病情活动指数评分均随着时间的推移不断下降，且治疗后3个月开始，观察组病情活动指数评分均显著低于对照组(P <0.05)。③不良反应：观察组有1例患者在治疗过程中出现注射外渗现象，经重新选择血管后顺利完成注射。2例患者出现轻微发热现象，经积极物理降温之后体温恢复至正常水平。④结果表明，脐带间充质干细胞输注治疗强制性脊柱炎可以显著改善患者的免疫水平，并有效减轻组织损伤，不良反应较轻微。
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妇科养坤丸与骨髓间充质干细胞移植修复薄型子宫内膜
背景：已有研究发现骨髓抑制后女性患者的子宫内膜中检测到来源骨髓供体的内膜细胞。目的：探讨妇科养坤丸对骨髓间充质干细胞治疗薄型子宫内膜的促进作用。方法：取处于动情期的雌性大鼠30只随机分为正常对照组、模型组、单药组、骨髓间充质干细胞组、联合组，每组6只，除正常对照组外，其余各组大鼠建立薄型子宫内膜模型。正常对照组正常喂食，模型组尾静脉注射生理盐水，骨髓间充质干细胞组造模后6 h和10 d经尾静脉注射异体骨髓间充质干细胞1 mL，单药组造模后连续20 d灌胃妇科养坤丸水溶液5 mL/kg，联合组造模后6 h和10 d尾静脉注射骨髓间充质干细胞1 mL以及连续20 d灌胃妇科养坤丸水溶液10 mL/kg。造模后第21天苏木精-伊红染色观察子宫内膜组织形态变化，测量子宫内膜厚度，免疫印迹法检测子宫内膜角蛋白与波形蛋白的表达。结果与结论：①与模型组相比，骨髓间充质干细胞组、单药组和联合组的子宫内膜均有不同程度增厚，其中联合组接近正常对照组。②正常对照组的角蛋白和波形蛋白表达强，模型组的表达低，单药组、骨髓间充质干细胞组和联合组依次升高(P <0.05)。③结果表明骨髓间充质干细胞移植于薄型子宫内膜大鼠体内可修复子宫内膜组织，妇科养坤丸能够显著促进骨髓间充质干细胞对子宫内膜的修复作用。
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分区式脊髓导管联合骨髓基质干细胞修复脊髓横断损伤模型大鼠
背景：脊髓损伤致残率高，治疗上仅限于早期手术干预、药物治疗和后期功能锻炼等手段，运动功能稍有改善，但目前尚无有效治愈办法。目的：探讨分区式脊髓导管和骨髓基质干细胞联合对大鼠T8脊髓全横断损伤模型的修复效果。方法：根据数字表法将50只大鼠随机分为5组，每组10只，Ⅰ组为T8脊髓全横断切除5 mm，不做其他处理；Ⅱ组为造模后将分区式脊髓导管植入形成的缺损内；Ⅲ组为造模后将分区式脊髓导管植入形成的缺损内，同时植入骨髓基质干细胞；Ⅳ组为造模后将分区式脊髓导管植入形成的缺损内，同时植入聚乙醇酸纤维；Ⅴ组为造模后将分区式脊髓导管植入形成的缺损内，同时植入骨髓基质干细胞和聚乙醇酸纤维。结果与结论：①术后2周和12周Ⅲ组和Ⅴ组的BBB评分明显高于Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅳ组，差异有显著性意义(P <0.05)。②术后12周Ⅴ组损伤平面以下运动诱发电位的潜伏期明显少于Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组，差异有显著性意义(P <0.05)。③免疫组化显示Ⅲ组和Ⅴ组在导管中间能找到染色阳性的再生神经纤维并生长有序，无明显缠绕成团的现象。④透射电镜显示桥接各组都有一定数量的有髓神经纤维。⑤结果表明分区式壳聚糖脊髓导管联合骨髓基质干细胞植入可以较好的连接脊髓损伤缺损，恢复一部分电生理特性，加快轴突再生，恢复运动功能，为脊髓损伤的治疗提供了一个新的方向。
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Let-7c慢病毒载体对骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经细胞的影响
背景：微小RNA参与调控干细胞增殖、分化、衰老等过程，通过了解Let-7家族成员Let-7c对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响可以为干细胞移植治疗提供新思路。目的：探讨Let-7c慢病毒载体在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化中的作用。方法：构建Let-7c上调及下调慢病毒载体并体外转染大鼠骨髓间充质干细胞，筛选适转染复数；实验分为未转染组、阴性转染组(转染空白慢病毒)、转染上调组(转染 LV-rno-Let-7c-up)、转染下调组(转染LV-rno-Let-7c-5p-inhibition)；采用法舒地尔诱导转染后的大鼠骨髓间充质干细胞分化为神经细胞，倒置荧光显微镜下观察骨髓间充质干细胞转染后荧光表达，免疫细胞化学染色检测神经元标记物NSE和MAP-2的表达，RT-PCR检测MAP-2 mRNA的表达，MTT法检测细胞存活率。结果与结论：倒置荧光显微镜下观察大鼠LV-rno-Let-7c-up和LV-rno-Let-7c-5p- inhibition慢病毒载体转染成功。法舒地尔可以诱导骨髓间充质干细胞分化为神经细胞，与阴性转染组相比，转染上调组的诱导效率升高(P <0.05)，NSE和MAP-2表达率上升(P <0.05)，转染下调组的诱导效率下降，NSE和MAP-2表达率下降(P <0.05)。转染LV-rno-Let-7c-up后骨髓间充质干细胞经法舒地尔诱导向神经细胞分化比率增加，Let-7c可能具有促进骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。
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二甲基亚砜诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化
背景：大量研究证明，骨髓间充质干细胞在一定的诱导条件下可定向分化为心肌细胞。二甲基亚砜是目前常用的诱导分化剂之一，其作用机制主要是通过抑制c-myc基因表达，从而降低细胞内源性聚腺苷二磷酸核苷水平。目的：探讨二甲基亚砜诱导骨髓间充质干细胞定向分化为心肌细胞的可行性及佳诱导浓度。方法：通过体外分离培养 SD 大鼠骨髓间充质干细胞，并用二甲基亚砜诱导使其定向分化为心肌细胞，依诱导剂二甲基亚砜的浓度分为3组，浓度分别为0.6%、0.8%和1.0%，不加诱导剂为空白对照组。诱导72 h后，去除诱导培养基，加入不含诱导剂的普通培养基继续培养4周。结果与结论：形态学及免疫细胞化学检测显示二甲基亚砜可以在体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化为心肌样细胞并表达心肌特异性蛋白desmin、α-actin、cTnT、cTnI和P38MAPK，且1.0%二甲基亚砜是佳诱导浓度。免疫荧光双标染色及电镜结果均进一步证实二甲基亚砜可以诱导骨髓间充质干细胞获得心肌分化表型。
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自体骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白促进拔牙窝骨愈合
背景：牙槽骨骨量不足将不能满足种植修复的审美和功能重建的要求。目的：观察自体第3代骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白修复新西兰兔拔牙创窝骨缺损的效果。方法：将27只新西兰兔随机等分为模型组、富血小板纤维蛋白组和骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组，均拔除下颌左侧中切牙。骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组牙槽窝内植入自体骨髓间充质干细胞与富血小板纤维蛋白的复合物，富血小板纤维蛋白组牙槽窝植入富血小板纤维蛋白，模型组牙槽窝不植入任何材料。结果与结论：①模型组兔牙槽嵴及黏膜明
显凹陷，宽度变窄；而富血小板纤维蛋白组和骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组兔牙槽骨骨壁厚度、牙槽骨宽度、高度差值、骨密度增加，且骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组牙槽骨骨壁厚度、牙槽骨宽度、高度差值、骨密度大于富血小板纤维蛋白组；骨髓间充质干细胞/富血小板纤维蛋白组骨小梁排列情况优于富血小板纤维蛋白组和模型组。②结果说明骨髓间充质干细胞复合富血小板纤维蛋白填充在拔牙窝内能够起到促进拔牙窝骨质生长，达到促进牙槽骨生长与修复的目的。 -
强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞调控巨噬细胞的功能异常
背景：强直性脊柱炎是一种伴有高炎性状态的自身免疫性疾病，但其具体发病机制不明确，目前尚缺乏有效的治疗方案。目的：体外探讨强直性脊柱炎患者来源骨髓间充质干细胞调控巨噬细胞的功能及正常人骨髓间充质干细胞在强直性脊柱炎治疗中的潜在作用。方法：提取25例强直性脊柱炎患者及21例健康志愿者的骨髓间充质干细胞进行体外培养扩增，以第4代细胞进行实验。体外诱导 THP-1细胞系分化成为巨噬细胞。运用流式细胞术鉴定骨髓间充质干细胞及巨噬细胞的表面标志。ELISA 检测健康志愿者/强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞与巨噬细胞共培养体系上清中肿瘤坏死因子α及TSG-6蛋白水平，PCR检测巨噬细胞及骨髓间充质干细胞相关因子基因表达水平。结果与结论：①两种骨髓间充质干细胞均呈现典型间充质干细胞表型，巨噬细胞表型标志 CD68为阳性。②强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞与巨噬细胞共培养组中巨噬细胞分泌的肿瘤坏死因子α蛋白水平及肿瘤坏死因子α转录水平均高于健康志愿者骨髓间充质干细胞(P <0.05)。③强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞组TSG-6基因的转录水平及蛋白分泌水平均低于健康志愿者骨髓间充质干细胞组(P <0.05)。结果提示：①强直性脊柱炎患者骨髓间充质干细胞抑制巨噬细胞肿瘤坏死因子α分泌的功能减弱，可能是导致强直性脊柱炎免疫异常的重要原因。②正常人骨髓间充质干细胞可分泌足量的TSG-6抑制强直性脊柱炎患者巨噬细胞的活化，降低其肿瘤坏死因子α的分泌而发挥治疗作用。
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碱性成纤维细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞在失神经肌肉萎缩中的应用
背景：如何避免失神经性肌萎缩是提高外周神经损伤疗效的关键因素。目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞预防失神经支配肌肉萎缩的作用。方法：通过病毒转染的方法将碱性成纤维细胞生长因子基因转染入大鼠骨髓间充质干细胞，应用MTT法、免疫组化、苏木精-伊红染色光镜观察、RT-PCR、Western blotting及ELISA法检测碱性成纤维细胞生长因子基因转染骨髓间充质干细胞的效果及产物的表达。取32只SD大鼠建立坐骨神经损伤模型，实验组肌肉多点注射碱性成纤维细胞生长因子基因转染的骨髓间充质干细胞，对照组注射细胞培养液，移植后2，4，6，8周腓肠肌取材，检测腓肠肌动作电位、残余湿质量、肌纤维横截面积等指标。结果与结论：①通过病毒转染的方法，成功将碱性成纤维细胞生长因子基因转染入骨髓间充质干细胞。②检测腓肠肌肌肉湿质量残存率、腓肠肌横截面积及肌细胞直径残存率、残存腓肠肌动作电位等指标，实验组均优于对照组(P <0.05)。③结果表明碱性成纤维细胞生长因子基因转染的骨髓间充质干细胞植入失神经肌肉中，可减缓肌肉萎缩速度。
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异氟醚对新生大鼠海马神经干细胞增殖及分化的影响
背景：异氟醚麻醉药物会对神经系统产生一定的影响，研究表明其可能是通过影响神经干细胞功能或形态而引起神经功能障碍。目的：探讨异氟醚对大鼠海马神经干细胞增殖和分化的影响。方法：培养新生7 d SD大鼠海马神经干细胞并进行诱导分化，取传至第3代细胞，将其分为2组：异氟醚组通入2.8%异氟醚和体积分数为5%CO2，体积分数为95%O2的混合气体；对照组仅通入体积分数为5%CO2，体积分数为95%O2的混合气体。干预6 h后，再常规培养2 h。抗BrdU单克隆抗体进行免疫荧光染色检测细胞增殖情况，Western blot法测定神经元标志物β3-微管蛋白和胶质细胞标志物GFAP蛋白的表达。结果与结论：与对照组相比，异氟醚组BrdU阳性细胞数目明显减少，说明异氟烷抑制了神经干细胞增殖；与对照组相比，异氟醚组 GFAP 表达水平上调，β3-微管蛋白表达水平无明显改变，说明异氟烷可促进神经干细胞更多地向星形胶质细胞分化。
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根尖乳头干细胞与牙周膜干细胞的生物学行为比较
背景：根尖乳头干细胞是一种新发现的间充质干细胞，其能否应用于牙根再生是目前研究的关键。目的：体外培养鼠根尖乳头干细胞与牙周膜干细胞，研究比较两者生物学行为，为根尖乳头干细胞用于牙根再生的可能性提供实验依据。方法：取幼鼠根尖尚未发育完全的健康下颌牙，用酶消化法获得根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞，免疫荧光法鉴定干细胞表面标志物，MTT法测定细胞生长曲线，茜素红染色观察细胞矿化结节形成情况。结果与结论：①鼠根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞均呈STRO-1强阳性表达，根尖乳头干细胞呈CD90强阳性表达而CD146阳性表达稍弱，牙周膜干细胞呈CD146强阳性表达而CD90阳性表达稍弱。②根尖乳头干细胞和牙周膜干细胞吸光度值随着时间的递增呈现出增高的状态，第8天起趋于平稳。自第4天起根尖乳头干细胞的增殖活力明显强于牙周膜干细胞，差异有显著性意义(P <0.05)。③与牙周膜干细胞相比，根尖乳头干细胞染色明显较深，可推测矿化结节形成数量较多。④结果表明与牙周膜干细胞相比，根尖乳头干细胞具有较强的增殖活性和矿化能力。
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内皮样细胞与脐静脉内皮细胞的比较
背景：干细胞可诱导分化为内皮样细胞，用于治疗糖尿病下肢血管病变，但诱导后的内皮样细胞是否完全可以取代内皮细胞改善血管病变呢？内皮样细胞与内皮细胞有哪些异同？尚未得到解决。目的：探讨诱导后的内皮样细胞与脐静脉内皮细胞在形态、功能及活性方面的异同。方法：分离、培养脐带间充质干细胞及脐静脉内皮细胞，分别通过流式细胞仪及免疫组化进行鉴定，将分离出的脐带间充质干细胞用含10μg/L血管内皮生长因子、10μg/L的碱性成纤维细胞生长因子及体积分数为2%胎牛血清的DMEM-LG/F12培养液向内皮样细胞方向诱导分化并用免疫组化进行鉴定，通过细胞迁移、活性物质测定及三维血管形成实验对内皮样细胞及内皮细胞进行比较。结果与结论：分离的脐带间充质干细胞经流式及免疫组化鉴定高表达间充质干细胞相关表面标志，脐静脉内皮细胞经免疫组化鉴定高表达CD31和VWF。脐带间充质干细胞经诱导液诱导后，进行免疫组化鉴定高表达CD31和VWF。细胞迁移、活性物质及三维血管形成实验均显示诱导后的内皮样细胞在功能及活性上与内皮细胞相似，且优于内皮细胞。
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间充质干细胞对再生障碍性贫血患者造血支持及T淋巴细胞分泌功能的影响
背景：近年来，间充质干细胞在再生障碍性贫血中的作用受到广泛关注，但是其作用机制尚不清楚。目的：观察脐血间充质干细胞和骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者造血支持及T淋巴细胞分泌功能的影响。方法：收集48例再生障碍性贫血患者和48例健康者的骨髓和健康产妇脐血，采用流式细胞法分离骨髓间充质干细胞和脐血间充质干细胞；将2种间充质干细胞分别与脐血单个核细胞共培养，计数红系爆式集落形成单位和粒-巨噬细胞集落形成单位数目；将间充质干细胞与植物血凝素刺激的再生障碍性贫血患者T淋巴细胞共培养，ELISA检测T细胞分泌的白细胞介素2、白细胞介素4和γ-干扰素水平。结果与结论：①正常骨髓间充质干细胞和脐血间充质干细胞与脐血单个核细胞共培养后，其红系爆式集落形成单位和粒-巨噬细胞集落形成单位数目明显增多(P <0.05)。②再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞与脐血单个核细胞共培养后，其刺激红系爆式集落形成单位和粒-巨噬细胞集落形成单位形成的能力明显减弱(P <0.05)。③与植物血凝素诱导的T细胞对照组相比，正常骨髓间充质干细胞共培养可明显抑制T细胞分泌白细胞介素2、白细胞介素4和γ-干扰素(P <0.05)。正常脐血干细胞共培养组也显示出了相似的抑制效果。④与正常骨髓间充质干细胞和脐血间充质干细胞共培养组相比，再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞共培养组抑制T细胞分泌白细胞介素2、白细胞介素4和γ-干扰素的能力明显降低(P <0.05)。⑤结果表明再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞存在功能缺陷，且对造血功能支持及对T细胞分泌功能的抑制作用明显弱于正常的骨髓间充质干细胞和脐血间充质干细胞，提示再生障碍性贫血患者间充质干细胞可能通过减弱其造血支持及抑制T细胞的功能来影响病理进程。
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人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中肿瘤干细胞的培养分化及增殖侵袭能力分析
背景：研究发现，食管癌组织中存在一类细胞亚群，具有一定的侵袭和转移性能，与治疗效果之间存在十分密切的联系。目的：从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离富含肿瘤干细胞的细胞球，并对其增殖和侵袭能力进行分析。方法：运用无血清培养基培养KYSE-150、TE-1细胞，观察细胞球的生成情况，采用MTT法以及Transwel小室实验检测细胞的增殖情况和侵袭能力，流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达。结果与结论：①KYSE-150、TE-1细胞在无血清培养条件下可以获得稳定传代的细胞球。②细胞球的增殖能力和侵袭能力均显著高于亲本细胞(P <0.05)。③TE-1细胞球和KYSE-150细胞球的CD44+、CD271+、CD44+CD271+细胞比例均显著高于TE-1亲本细胞和KYSE-150亲本细胞(P <0.05)。④实验结果提示，从人食管癌细胞株KYSE-150、TE-1中分离出具有肿瘤干细胞特性的细胞球，具有很强的增殖和侵袭转移能力，且CD44和CD271可以作为重要的食管癌干细胞表面标志物。
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隐丹参酮对肾癌干细胞增殖和凋亡的影响
背景：前期研究发现隐丹参酮对多种肿瘤具有抑制作用，但是对肾癌的影响尚未有报道。目的：探讨隐丹参酮对肾癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用免疫磁珠法分离纯化CD133+肾癌干细胞。通过MTT法检测不同质量浓度(0，0.2，1，5 mg/L)隐丹参酮对CD133+肾癌干细胞增殖的影响；流式细胞仪检测不同质量浓度(0，0.2，1，5 mg/L)隐丹参酮对CD133+肾癌干细胞凋亡的影响；免疫印迹检测5 mg/L隐丹参酮对肾癌干细胞中Ki67、Bcl-2、Caspase-3和p-Caspase-3蛋白表达的影响。结果与结论：分选前CD133+阳性细胞的百分率为6.32%，分选后CD133+阳性细胞的百分率为82.73%，差异有显著性意义(P <0.001)。隐丹参酮抑制肾癌干细胞生长，促进肾癌干细胞凋亡，并呈浓度依赖性。Ki67和Bcl-2在5 mg/L隐丹参酮组中的表达明显低于未加药组，p-Caspase-3的表达水平则明显高于未加药组，而Caspase-3在两组中的表达水平没有明显变化，结果表明隐丹参酮可能通过抑制肾癌干细胞Ki67和Bcl-2表达，促进p-Caspase-3表达来发挥抑增殖促凋亡效应。
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自制免疫磁珠在前列腺肿瘤组织干细胞提取中的应用
背景：有效分离干细胞是前列腺癌发生发展研究的基础，目前的主流方法是免疫磁珠分选。目的：应用自制的免疫磁珠分选前列腺肿瘤组织中的 CD133+/CD44+细胞，并进一步培养和传代进行免疫学鉴定，以确定免疫磁珠分选效果。方法：应用独创的磁珠制备免疫磁珠，分选肿瘤组织中细胞膜表达CD133和CD44的细胞。观察分选细胞无血清培养成球情况，及传代后其在形态学、增殖能力方面与标准肿瘤细胞株的差异，并用免疫荧光法检测其特异性抗体的表达。结果与结论：制备的免疫磁珠粒径小、分选效果佳。分选的细胞成球效果好，培养传代后的细胞依旧明显表达CD133和CD44抗原。分选的细胞非诱导培养后可见多种形态，生长旺盛。转化生长因子β诱导培养后细胞形态较单一且生长缓慢。两组细胞与标准肿瘤细胞株培养后的增殖情况差异均有显著性意义(P <0.05)。结果表明应用自制免疫磁珠从肿瘤细胞中分选的 CD133+/CD44+细胞经过初步形态及功能鉴定具有干细胞的特性，可为前列腺癌干细胞的提取及进一步培养研究奠定基础。
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脐带间充质干细胞在颅脑损伤模型鼠体内的迁徙与定位
背景：选择有效的手段，标记和追踪细胞在体内的分布、分化及转归，才能深入探讨细胞发挥治疗效果的具体机制。目的：了解BrdU标记脐带间充质干细胞在颅脑损伤大鼠体内的迁徙和定位情况。方法：分离培养人脐带间充质干细胞并进行细胞表面标志物鉴定，取第3代人脐带间充质干细胞采用 BrdU进行标记，MTT法检测细胞增殖能力。将BrdU标记的人脐带间充质干细胞经尾静脉注射到颅脑损伤模型大鼠体内，移植后14 d取损伤处脑组织制备组织切片，倒置荧光显微镜下观察人脐带间充质干细胞的迁徙和定位情况。结果与结论：经流式细胞仪检测，细胞表达CD29、CD44、CD105，不表达造血细胞表面特异性标志CD34和CD45。通过生长曲线可以发现，细胞在接种1-3 d处于调整期，第3-5天进入对数生长期。移植后14 d在脑损伤部位可以观察到BrdU染色阳性细胞，表明移植的人脐带间充质干细胞在大鼠体内发生迁徙，经过大鼠的外周血液循环迁徙达到颅脑损伤部位，实现对损伤部位的有效修复。
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脂肪组织来源干细胞构建皮肤复合组织修复创面缺损
背景：皮下脂肪及干细胞对创面愈合的效果尚未确定。目的：探索脂肪组织来源干细胞构建皮肤复合组织及修复皮肤缺损的效果。方法：采用表皮细胞、成纤维细胞、脂肪组织来源干细胞作为种子细胞，并且以牛胶原凝胶作为支架能够构建多种细胞复合物。在大鼠背部两侧建立直径为6 mm的圆形皮肤创面模型，右侧(实验侧)创面缺损部位植入直径为8 mm的多层复合组织，左侧(对照侧)进行简单的创面包扎修复。结果与结论：①构建的多层皮肤复合组织表皮层连续并成复层，真皮层成纤维细胞分布均匀，而脂肪层则含有脂滴空泡，且细胞分布均匀，在不同层交界处存在明显的细胞聚集。②实验侧创面愈合率、肉芽组织厚度、真皮层厚度以及毛细血管密度显著高于对照侧。③结果显示采用表皮细胞、成纤维细胞、脂肪组织来源干细胞作为种子细胞，以牛胶原凝胶作为支架，能够构建出具有多种细胞的多层皮肤复合组织，修复大鼠创面缺损有促进创面的愈合提高真皮层厚度的作用。
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中药诱导骨髓间充质干细胞的定向分化：研究与进展
背景：近年来，对传统单味中药或提取物、复方中药及含药血清调控骨髓间充质干细胞定向分化为肌成纤维细胞、软骨细胞、成骨细胞、心肌细胞、神经细胞等研究的不断深入，使中药或其提取物对骨髓间充质干细胞增殖、调控定向分化和移植等方面成为组织工程研究领域的一大亮点。目的：综述中药或其提取物诱导骨髓间充质干细胞定向分化的新研究进展。方法：分别以“中药，定向分化，骨髓间充质干细胞”，“Chinese herb,directional differentiation, mesenchymal stem cels”为检索词，由第一作者检索2010年1月至2016年1月中国期刊全文数据库、PubMed数据库及万方数据库相关文章。排除缺乏原创性及重复性研究的文献，计算机初检到99篇文献，终保留43篇进行归纳总结。结果与结论：骨髓间充质干细胞作为骨分化系统中强的种子细胞，具有广泛的定向分化潜能，与传统中草药结合在临床治疗众多难治性疾病中凸显重要价值，尤其对于治疗骨代谢疾病、骨缺损、骨折不愈合及迟缓愈合等疾病更加充分发挥其临床应用价值，这既有利于进一步深层次，多角度研究中药的作用及发生机制，也使骨髓间充质干细胞向更宽、更广领域参与临床各类难治性疾病的治疗。
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干细胞转化技术是干细胞基础和未来临床移植研究的基石
背景：干细胞转化技术研究已成为干细胞研究的一个活跃领域，对干细胞基础研究及临床研究均产生巨大的推动作用。目的：对干细胞转化技术研究现状及进展做一综述。方法：在标题和摘要中，以“Stem cels,Transformation, differentiation”或“干细胞，转化，分化”为主题检索词，检索中国期刊全文数据库(CNKI)、PubMed数据库中2000年1月至2015年4月关于干细胞分化技术的文章。优先选择近期发有或发表在权威杂志上的文章。初检得到121篇文章，根据纳入标准，选择其中的64篇进行综述。结果与结论：干细胞转化技术近些年来取得了较大的进展，包括改进培养液的配比，增加特定的诱导因子、蛋白质、酶、受体，注射特定的基因，使用新氧化剂，改善培养微环境，在低氧环境下培养，使用支架，采用转基因技术，三维球形培养，共培养等。干细胞转化新技术的诞生和使用，显著提高了干细胞的转化率，为人类难治性疾病的治疗带来希望。
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中国新疆维吾尔族人群MNS、Duffy和Kell等稀有血型的基因分子遗传分析
背景：欧、美、日等都先后实施和完成了相关的稀有血型筛选项目，但国内还有较大差距，研究主要集中在南方地区汉族人群，对新疆地区维吾尔族人群稀有血型基因频率用PCR-SSP方法进行系统研究的报道较少。目的：探讨新疆维吾尔族人群红细胞 MNS、Duffy、Kel、Dombrock、Diego、Kidd、Scianna、Colton 和Lutheran血型系统基因频率分布情况，为人类群体遗传学及临床科学调配合适血液提供战略支撑。方法：采用PCR-SSP法对158名新疆维吾尔族人群9个稀有血型系统进行基因分型和统计学分析。结果与结论：新疆维吾尔族人群9个稀有血型基因频率依次为M=0.5791，N=0.4209，S=0.1743，s=0.8009， Fya=0.6994，Fyb=0.3006，K1=0.0158，K2=0.9842，Doa=0.2342，Dob=0.7658，Dia=0.0474，Dib=0.9526， JKa=0.5412，JKb=0.4526，Sc1=1.000，Sc2=0，Coa=0.994，Cob=0.0059，Lua=0，Lub=1.000，Aua=0.8102， Aub=0.1899，用χ2检验比较基因型分布的观察值与期望值符合Hardy-Weinberg平衡法则(P >0.05)，且发现维族人群MNS血型系统基因表现型罕见存在S-s-4例频率为0.0253，Jka-b-1例频率为0.0063。结果表明新疆维吾尔族人群MNS、Duffy、Dombrock和Diego 4种血型系统频率分布与其他种族明显不同，具有独特的自身分布频率特点；Kel、Kidd 和 Colton 基因分布与报道的藏族、汉族其他人群分布相似又有差异；Scianna和Lutheran呈单态性分布，与藏族、汉族其他人群分布特点相同。该成果对探讨新疆维吾尔族人群起源进化、民族血液学研究以及稀有血型库的建设等方面提供了基本数据，具有重要意义。
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《中国组织工程研究》杂志2016年投稿须知
1杂志出版目标与范围《中国组织工程研究》(Chinese Journal of Tissue Engineering Research)杂志是国内唯一一本专注出版组织工程领域研究结果的经同行评议的开放获取期刊。期刊以面向国际立足本土为出版宗旨，以双盲严谨的审稿流程，科学规范的编辑服务，优质快速的出版周期，办中国组织工程领域优秀的学术期刊为工作目标。期刊曾经2届被评为“中国百种杰出学术期刊”，并为国家新闻出版广电总局“全国第一批数字出版示范单位”。
