中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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乌司他丁干预减体积肝移植模型大鼠的肝脏代谢
背景:乌司他丁在肝切除、肝移植后抗炎、脏器保护、改善微循环等方面的作用已经有大量的研究,然而其作用的microRNA调控机制尚未见报道.目的:观察模型大鼠减体积肝移植后乌司他丁干预microRNA及蛋白组学的变化,并在差异表达的microRNAs和蛋白中预测microRNA对其靶向蛋白的调控,为乌司他丁的临床应用提供更深入的理论依据.方法:以Kamada的双袖套法为基础建立40％减体积肝移植模型大鼠,实验分2组:实验组在肝移植后0,12,24,36,48 h经腹腔注入乌司他丁(100 U/g);对照组在同样时间点注入生理盐水2 mL.在移植后24,48 h取2组大鼠肝脏分别行microRNA芯片检查及蛋白质质谱分析.将二者的结果输入mirTarBase软件进行靶基因预测.结果与结论:①与对照组相比,实验组表达差异超过2倍的miRNAs有19个,蛋白丰度表达差异超过1.5倍的蛋白有17个,靶基因预测发现一组具有强力证据推荐的microRNA目标蛋白的调控通道:rno-miR-181a-5p和Gpx1;②结果表明,模型大鼠减体积肝移植后,乌司他丁的使用,改变了rno-miR-181a-5p的表达,rno-miR-181a-5p通过调控Gpx1表达来改善模型大鼠减体积肝移植术后肝脏的代谢,这可能是乌司他丁作用机制之一.
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保留黄韧带预防模型兔腰椎椎板切除后硬脊膜粘连
背景:瘢痕组织的生成以及随之形成的与硬脊膜及神经根的粘连一直是影响椎板切除后疗效的重要因素之一.如何减少或预防这种粘连或瘢痕形成,是临床医生着重研究的问题.目的:探索术中保留黄韧带对预防腰椎椎板切除后硬脊膜周围粘连的作用.方法:将40只新西兰大白兔随机分为黄韧带切除组与黄韧带保留组,每组实验动物20只,均行L4-5椎板切除术,模拟髓核摘除,术中分别保留或切除黄韧带.参考Rydel-balazs评分标准和Nuss-baum组织学评分标准,评定椎板切除后硬脊膜与周围结组粘连情况.结果与结论:①所有手术均顺利完成,黄韧带保留组椎板切除区仍可见瘢痕组织,硬脊膜与周围组织粘连轻,容易钝性分离.黄韧带切除组可见手术创面肌肉明显瘢痕化,并有类骨质形成,其与脊柱背侧肌肉及软组织粘连紧密,钝性分离非常困难;②黄韧带保留组Rydel-balazs与Nuss-baum评分显著低于和黄韧带切除组(P<0.05);③结果提示,保留黄韧带可降低硬膜外瘢痕形成,减少硬脊膜与周围组织粘连.
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人参皂苷Rg1干预非酒精性脂肪肝模型大鼠肝细胞的凋亡
背景:人参皂苷Rg1可以减轻氧化应激并且抑制细胞凋亡,是三七和人参共有的有效活性成分.目的:分析人参皂苷Rg1对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型肝细胞凋亡的抑制作用及分子机制.方法:SD大鼠40只,适应性喂养2周后随机分成4组(n=10),分别为空白对照组,模型对照组,人参皂苷Rg1低剂量组,人参皂苷Rg1高剂量组.空白对照组正常饮食,模型对照组高脂高糖饮食22周,人参皂苷Rg1组高脂高糖饮食14周后加用Rg1灌胃治疗8周.用显色法检测血清中氧化应激指标,苏木精-伊红染色观察肝组织病理形态变化,油红染色观察肝组织的脂滴,TUNEL染色观察肝细胞的凋亡情况.通过Q-PCR从mRNA水平检测肝脏组织中Bax、Bcl-2、Caspase-3的表达情况.通过免疫组织化学、Western Blotting从蛋白质水平检测肝脏组织中的凋亡关键因子Bax、Bcl-2、Procaspase-3、Caspase-3 cleavage p17表达情况.结果与结论:①苏木精-伊红染色:与空白对照组比较,模型组肝脏细胞排列紊乱出现大量脂肪空泡并且大量炎性细胞浸润,与模型对照组相比,人参皂苷Rg1组肝细胞排列形态逐渐恢复正常脂肪空泡减少以及炎性细胞浸润减少;②油红染色:与模型对照组比较,人参皂苷Rg1组肝细胞脂滴明显减少,并且随着Rg1的浓度升高而降低;③TUNEL染色:与模型对照组比较,人参皂苷Rg1组的凋亡程度明显降低;④显色法检测:与模型对照组比较,人参皂苷Rg1组与模型组比较,谷胱甘肽、超氧化物歧化酶升高(P<0.05),丙二醛降低(P<0.05);⑤与模型对照组比较,人参皂苷Rg1组Bax、Caspase-3的mRNA表达降低(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达升高(P<0.05);⑥与模型对照组比较,人参皂苷Rg1组的Bax,Caspase-3 cleavage p17的蛋白表达降低(P<0.05),Bcl-2、Procaspase-3的蛋白表达升高(P<0.05),存在一定的剂量依赖性;⑦结果表明,人参皂苷Rg1可能通过减轻氧化应激,抑制非酒精性脂肪肝大鼠模型的肝细胞凋亡,从而缓解非酒精性脂肪肝的进展.
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甲烷饱和生理盐水对内毒素导致急性肺损伤模型大鼠的保护作用
背景:研究表明甲烷在肠道、肝脏、心肌等多种缺血再灌注损伤疾病中具有显著的抗氧化和抗凋亡作用.甲烷对急性肺损伤的保护作用未见相关研究.目的:分析甲烷饱和生理盐水对由于内毒素导致的大鼠急性肺损伤的保护作用及其可能的机制.方法:内毒素(20 mg/kg)诱导大鼠急性肺损伤.实验分为空白组,对照组(甲烷饱和生理盐水),急性肺损伤组,急性肺损伤组+甲烷组(急性肺损伤甲烷饱和生理盐水治疗).24 h后取材测定肺组织湿干质量比,苏木精-伊红染色及电镜组织学检查,ELISA法检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素1β炎症因子的质量浓度,并检测肺组织丙二醛和超氧化物歧化酶活性;TUNEL检测肺组织中细胞凋亡情况;Western blot法检测肺组织中caspase-3含量.结果与结论:①空白组和对照组在各项指标上均无显著差异;②与空白组相比,急性肺损伤和急性肺损伤+甲烷组肺组织湿干质量比显著增加(P<0.05),肺组织的炎症反应强度、氧化应激水平和凋亡率均显著增高(P<0.05);③与急性肺损伤组相比,急性肺损伤+甲烷组肺组织湿干质量比,炎症因子、细胞凋亡率、caspase-3表达及丙二醛含量均有显著降低(P<0.05),超氧化物歧化酶活性提高(P<0.05);④结果说明,甲烷饱和生理盐水可以通过降低肺组织氧化应激水平,抑制炎症因子表达,减少细胞凋亡等途径治疗由于内毒素导致的大鼠急性肺损伤.
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骨折模型小鼠周围组织E、P选择素含量变化及意义
背景:E、P选择素是重要的黏附分子,参与机体内的炎症反应,而炎症反应对早期骨折的愈合具有积极的促进作用.目的:探究小鼠骨折周围组织内E、P选择素含量变化及意义.方法:取BALB/c小鼠36只,制作小鼠稳定胫骨骨折模型,建模后随机将小鼠分为1 h、6 h、12 h、24 h、48 h及3 d组,分别在对应时间点取骨折周围血肿肌肉组织,健侧同部位胫骨周围肌肉组织作为对照,采用酶联免疫吸附法对所取组织标本进行E、P选择素含量检测.结果与结论:①骨折周围组织的E、P选择素含量均较健侧胫骨周围肌肉组织明显升高(P<0.01),其中E选择素含量在6 h左右达到高峰,P选择素含量在24 h左右达到峰值;②小鼠胫骨骨折后,骨折周围组织内E、P选择素含量明显上调,提示两者在小鼠骨折早期内可能介导了炎症细胞迁移、黏附,并参与了骨折后机体修复的病理过程.
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不同强度耐力运动影响高脂诱导肥胖模型小鼠血清Irisin含量、骨骼肌PGC-1α、FNDC5、PPARδ蛋白的表达
背景:研究表明小鼠体内过氧化物酶体增殖活化受体 γ 辅助活化因子1α(peroxisome proliferators-activated receptor-γcoactivator-1α,PGC-1α)蛋白、Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白5(fibronectin typeⅢdomain-containing protein 5,FNDC5)蛋白和Irisin组成一条正向调节脂肪分解代谢的通路,并且PGC-1α能调控骨骼肌中调节脂肪代谢相关蛋白PPARδ的表达.耐力运动训练可以有效减轻小鼠体质量,但不同强度耐力运动训练对高脂诱导的肥胖小鼠血清Irisin含量及骨骼肌中PGC-1α、FNDC5、PPARδ蛋白表达的影响尚不清楚.目的:分析不同强度耐力运动训练对高脂诱导肥胖小鼠血液中Irisin含量及骨骼肌中脂肪代谢相关蛋白的影响.方法:4周龄雄性C57BL/6J小鼠经过1周常规饲料适应性喂养后,通过8周高脂饲料喂养建立营养性肥胖小鼠模型,对照小鼠一直使用常规饲料喂养.构建成功的肥胖小鼠经过1周适应性跑台运动后,分为高强度耐力运动组和低强度耐力运动组进行跑台运动,对照小鼠不运动.8周后量小鼠体长、称量体质量并计算Lee's指数,同时取各组小鼠血清和股四头肌,使用ELISA方法检测小鼠血清中Irisin水平并对比各组变化,使用Western Blot方法检测小鼠股四头肌中PGC-1α、FNDC5和PPARδ蛋白的表达情况并对比各组变化.结果与结论:①高脂诱导能够明显增大小鼠的体长、体质量和Lee's指数,表明高脂诱导的营养性肥胖小鼠模型是成功的,并且高脂诱导能明显降低小鼠血清Irisin水平,降低小鼠股四头肌脂质代谢相关蛋白PGC-1α、FNDC5和PPARδ的表达;②耐力运动训练尤其是高强度耐力运动训练能有效减小肥胖小鼠体长、体质量和Lee's指数;③耐力运动训练尤其是高强度耐力运动训练能有效提高肥胖小鼠血清中Irisin水平,明显提高小鼠股四头肌PGC-1α、FNDC5和PPARδ蛋白的表达;④PGC-1α和FNDC5蛋白与Irisin的变化一致,提示耐力运动训练尤其是高强度耐力运动训练可以诱导骨骼肌高表达PGC-1α 蛋白,从而促进FNDC5蛋白高表达,随着FNDC5蛋白在体内被剪切转变成高浓度的Irisin释放到血液中,加速小鼠脂肪代谢水平,达到减肥的目的.
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富血小板纤维蛋白修复陈旧性负重位创伤性膝关节炎模型兔的软骨缺损
背景:富血小板纤维蛋白不仅具有抗感染及减轻炎症反应的作用,还能促进组织愈合和再生,其中所包含的多种细胞因子可以促进骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化.目的:观察富血小板纤维蛋白对负重区域陈旧创伤性兔膝关节炎软骨缺损修复的效果.方法:选取27只6月龄新西兰大白兔(苏州大学动物实验中心提供),参照Hulth法建立陈旧性负重位的创伤性兔膝关节炎软骨缺损(深3.0-4.0 mm,直径4 mm).3周后,原手术切口进入,磨除陈旧缺损内纤维肉芽组织,将制备好的填充物填入缺口,共3个处理组,富血小板纤维蛋白组、骨髓间充质干细胞组、空白组.在修复缺损后4,8,12周,取出关节,进行大体观察和组织学观察,ICRS大体评分和Wakitani's组织学评分进行修复效果的评估.结果与结论:①大体观察:植入后4,8,12周后,空白组软骨组织出现大范围磨损,纤维结缔组织和骨赘增生,关节腔出现粘连;富血小板纤维蛋白组缺损处外观光滑,新生组织与周边正常组织相似;骨髓间充质干细胞组的修复各阶段较富血小板纤维蛋白组差;②组织学变化:苏木精-伊红染色、阿利新蓝染色、番红O染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色显示,富血小板纤维蛋白组兔膝关节软骨细胞逐渐增多,软骨细胞可见Ⅱ型胶原的表达;空白组软骨细胞出现全层退化;骨髓间充质干细胞组软骨细胞数量较少;③富血小板纤维蛋白组各个时间点的ICRS大体评分和Wakitani's组织学评分明显优于空白组(P<0.01)和骨髓间充质干细胞组(P<0.05);④结果提示,富血小板纤维蛋白能够很好地修复创伤性骨关节炎所致的负重位的陈旧软骨缺损,其修复能力显著优于单纯的骨髓间充质干细胞.
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骨性关节炎与骨质疏松症共病模型兔的建立及鉴定
背景:老年人群多同时患有骨性关节炎和骨质疏松症,但目前骨性关节炎与骨质疏松症两者之间的关系尚未明确.目的:构建骨性关节炎+骨质疏松症动物模型并进行鉴定.方法:贵阳医学院动物实验中心提供的37只2月龄雌性新西兰大白兔,30只随机分为骨性关节炎组、骨质疏松症组、骨性关节炎+骨质疏松症组,另设7只兔为正常对照组.分别制备骨质疏松症(造模方法:切除双侧卵巢+肌注甲泼尼龙)、骨性关节炎(造模方法:切除前交叉韧带)、骨性关节炎+骨质疏松症(造模方法:切除双侧卵巢+肌注甲泼尼龙+切除前交叉韧带)动物模型,确认造模成功后对上述3种模型软骨进行分离及培养,比较3者软骨细胞中Ⅱ型胶原酶分泌情况.结果与结论:①运用切除兔前交叉韧带、卵巢及肌注甲泼尼松龙琥珀酸钠的方法可使骨质疏松兔骨密度降低25％以上,从关节外观可见明显关节软骨剥脱,膝关节X射线检查可见明显骨赘生成,MRI检测可显示明显关节软骨损伤,由此可知通过上述方法可成功制备骨质疏松症合并骨性关节炎的模型;②骨性关节炎组、骨质疏松症组、骨性关节炎+骨质疏松症3组兔膝关节软骨中均能成功提取出软骨细胞,与骨质疏松症组比较骨性关节炎+骨质疏松组软骨细胞Ⅱ型胶原酶的能力下降差异明显(P<0.05);③结果说明:实验成功建立了骨性关节炎+骨质疏松症动物模型.
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中药复方柔肝化纤颗粒干预肝纤维化模型大鼠肝脏微循环障碍的变化
背景:中药复方柔肝化纤颗粒已证明能显著改善慢性肝炎、肝硬化患者的临床症状,但其能否多途径、多靶点、多环节改善肝脏微循环尚不明确.目的:构建肝纤维化大鼠模型,观察中药复方柔肝化纤颗粒全方及不同拆方组合对模型大鼠肝脏微循环障碍失衡的影响及差异.方法:采用CCl4复合因素造模方法复制肝纤维化大鼠模型,在第4周造模结束后将建模成功的大鼠随机为6组:模型组、大黄蟅虫丸组,柔肝化纤颗粒组1:柔肝化纤颗粒全方灌胃;柔肝化纤颗粒组2:予补肾养肝方灌胃;柔肝化纤颗粒组3:予益气健脾方灌胃;柔肝化纤颗粒组4:予化痰解毒方与活血化瘀、软坚散结方灌胃;同时设正常对照组进行对比,各组分别按0.1 mL/kg灌胃给予相应的药液,1次/d,共给药12周.结果与结论:①光学显微镜下观察,模型组肝间质出现广泛纤维组织增生,将正常肝小叶分割成大小不等的肝细胞团(即假小叶形成),说明肝纤维化模型大鼠造模成功;②与正常对照组比较,各组大鼠血清一氧化氮及内皮素1水平明显偏高,且肝硬化程度越高,一氧化氮及内皮素1水平增高越明显(P<0.01),而肝动脉始增时间、肝静脉始增时间的缩短越明显(P<0.05或P<0.01);③与模型组比较,各用药组血清一氧化氮及内皮素1水平均有不同程度的降低(P<0.01),各用药组肝动脉始增时间、肝静脉始增时间均有不同程度的延长(P<0.01);④与黄蟅虫丸组相比,柔肝化纤全方组的一氧化氮及内皮素1水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),肝静脉始增时间较黄蟅虫丸组延长(P<0.01);⑤结果说明,实验成功复制了肝纤维化模型大鼠,采用中药复方柔肝化纤颗粒全方干预治疗后,能够调节模型大鼠肝脏微血管的流速,促进肝脏微循环的血流灌注量,有助于延缓肝纤维化的进展,其机制可能主要通过降低血清一氧化氮及内皮素1水平有关.
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小鼠慢性根尖周炎中RANKL的表达
背景:慢性根尖周炎根尖区发生不同程度的骨吸收及炎性肉芽组织,研究表明RANK-RANKL-骨保护素信号通路被认为是调节骨吸收的关键通路.目的:检测RANKL在小鼠根尖周炎中的表达及作用.方法:C57BL/6J小鼠分为正常对照组和实验组,实验组将双侧下颌第一磨牙直接开髓,暴露于口腔环境中,建立小鼠根尖周炎模型,分别在建模后1,2,3,4周收集下颌骨组织,苏木精-伊红染色观察根尖周组织的变化,免疫组织化学染色检测各时间点RANKL的表达情况.结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,成功建立了小鼠慢性根尖周炎动物模型.正常对照组小鼠下颌第1磨牙根尖区仅有少数炎性细胞,牙周组织完整;术后1-4周,实验组根尖周组织炎性细胞不断增多,浸润范围逐渐变大,牙槽骨破坏逐渐增多;②免疫组织化学染色显示,实验组各时间点RANKL的表达量较正常对照组明显升高(P<0.05),术后1,2周RANKL的表达量明显增加(P<0.05),术后3周表达量持续增加,4周时表达量降低(P<0.05);③结果表明,实验成功建立小鼠慢性根尖周炎模型,RANKL在小鼠慢性根尖周炎中的表达量较高且具有明显趋势,可能对小鼠慢性根尖周炎的进展及骨破坏起促进作用.
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补肾健脾方影响高脂肪饮食骨质疏松模型大鼠脂代谢及瘦素的变化
背景:绝经也可导致体内瘦组织与脂肪成分的改变,现阶段发现骨质疏松在肥胖的老年人中的发生率要大于非肥胖者,由此推断瘦素可能是骨质疏松症发病机制中的一个重要调节因素.目的:探讨补肾健脾方对高脂肪饮食骨质疏松大鼠脂代谢及瘦素的影响.方法:将6月龄SPF级雌性SD大鼠220只随机分成模型组170只和假手术组50只.模型组行双侧卵巢结扎切除术,假手术组除未行卵巢结扎切除外,其余步骤同模型组.手术后12周,模型鉴定成功后,手术组随机分成正常饮食模型组、高脂饮食模型组、高脂饮食健骨颗粒组和高脂饮食辛伐他丁组各40只.各组于术后第13周开始给药,健骨颗粒组给予健骨颗粒2 g/(kg?d),生理盐水2 mL溶解后灌胃,辛伐他丁组给予辛伐他丁100μg/(kg?d)灌胃,假手术组和正常饮食模型组以2 mL生理盐水灌胃,1次/d.于用药2,6,12,24周后测体质量,取血清、腰椎和股骨近端备用.双能X射线测定右侧胫骨骨密度,ELISA法测定血清骨钙素、血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACT-5b)、总胆固醇、三酰甘油、瘦素、瘦素受体的水平,qPCR法测定大鼠骨组织瘦素、瘦素受体mRNA表达.结果与结论:①高脂饮食健骨颗粒组大鼠的体质量高于同期正常饮食模型组和高脂饮食模型组,但低于假手术组和高脂饮食辛伐他汀组,同时表达的瘦素、瘦素受体、骨钙素水平均高于正常饮食模型组和高脂饮食模型组,TRACT-5b、胆固醇、三酰甘油的浓度均低于正常饮食模型组和高脂饮食模型组,各组比较差异均有显著性意义(P<0.05);②结果表明,补肾健脾方可以调整大鼠脂代谢紊乱、降低血液黏滞度、改善血管壁结构的同时还能通过上调大鼠血清和骨组织中瘦素、瘦素受体的表达,改善大鼠骨代谢水平,防治原发性骨质疏松症.
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XCT-790导致成骨细胞活性下降和骨形成不足的机制
背景:Wnt信号通路在骨细胞的形成、分化和成熟过程中起着重要作用,DKK1、Sost在调节骨量和成骨细胞分化中起负调节作用,是Wnt信号通路的负调节因子.XCT-790是雌激素相关受体α的特异性抑制剂,可调节雌激素信号通路对成骨细胞的功能活动.目的:观察XCT-790对Wnt信号通路抑制因子DKK1、Sost过表达腺病毒载体转染的人成骨肉瘤细胞MG63细胞及其骨形成相关蛋白LRP5、骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白、骨保护蛋白、结缔组织生长因子的作用.方法:将MG63细胞分成8组:空白对照组、过表达DKK1组、过表达Sost组、过表达DKK1+Sost组、XCT-790干预空载腺病毒组、XCT-790干预过表达DKK1组、XCT-790干预过表达Sost组、XCT-790干预过表达DKK1+Sost组,根据组别不同分别用上述重组腺病毒转染MG63细胞.应用MTT法检测MG63细胞的活性,碱性磷酸酶试剂盒检测碱性磷酸酶活性,流式分析钙离子浓度;Western blot检测低密度脂蛋白相关蛋白5、骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白、骨保护蛋白、结缔组织生长因子的表达.结果与结论:①与空白对照组对比,过表达DKK1、Sost、DKK1+Sost组及XCT-790干预空载腺病毒组均可降低细胞活性、碱性磷酸酶活性,提高钙离子浓度;降低低密度脂蛋白相关蛋白5、骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白、骨保护蛋白、结缔组织生长因子的表达量,组间比较差异均有显著性意义(P<0.05);②而当XCT-790干预过表达DKK1、Sost、DKK1+Sost组的MG63细胞时,可进一步降低细胞活性、碱性磷酸酶活性,提高钙离子浓度;降低低密度脂蛋白相关蛋白5、骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白、骨保护蛋白、结缔组织生长因子的表达量,组间比较差异均有显著性意义(P<0.05);③结果说明,XCT-790直接调节Wnt信号通路的传导,同时也可协同DKK1、Sost共同抑制Wnt信号通路的开放,从而降低成骨细胞活性和骨形成相关蛋白LRP5、骨形态发生蛋白2、骨保护蛋白等的表达量,导致成骨细胞分化、增殖能力减弱和骨形成不足.
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少年篮球运动员和普通中学生身体成分及骨密度比较:来源一所中学的数据
背景:研究少年篮球运动员群体的身体成分和骨密度不仅关系篮球事业的长远发展,关系到全民健身事业的可持续性.目的:探讨篮球运动对14岁汉族少年身体成分和骨密度的影响以及骨密度的性别差异及原因.方法:受试者共270人,全部为郑州市14岁汉族少年中学生,其中少年篮球运动员(运动员组)为79人(男性28人,女性51人),不考虑身高体质量的普通中学生(对照组1)为87人(男性32人,女性55人),身高体质量与少年篮球运动员相仿的普通中学生(对照组2)为104人(男性40人,女性64人).采用问卷调查法来获取受试者日常生活情况的相关数据.采用骨密度仪Metriscan测量受试者利手中指中段的骨密度;测量受试者身高和体质量,计算体质量指数;采用DBA-550人体成分分析仪测量受试者的身体成分,计算出与体质量的相对比率.结果与结论:①女性少年篮球运动员身体中的总水分比率显著性的高于同性别的普通中学生(P<0.05);②相同性别少年篮球运动员身体中蛋白质比率显著性高于普通中学生(P<0.05),这在女性的两组之间表现的尤为突出(P<0.01);③脂肪和去脂体质量在相同性别的两组之间差异均有非常显著性意义(P<0.01);④相同性别的少年篮球运动员无机盐比率显著性高于普通中学生(P<0.05);⑤少年篮球运动员和身高体质量与运动员相仿的普通中学生的中指骨密度差异有显著性意义(P<0.05);相同性别的少年篮球运动员中指骨密度显著性高于普通中学生(P<0.05);⑥在日常生活习惯指标上,相同性别的少年篮球运动员每天体育锻炼时间显著性高于普通中学生,其他生活指标表现的规律性不强;⑦结果提示,篮球运动对人体的身体成分有良好的改善作用,能够降低身体中的脂肪含量,提高身体中蛋白质、水分、无机盐和去脂体质量的含量,同时篮球运动能够提高人体中指的骨密度,可以用于肥胖和骨质疏松症防治,篮球运动员的身体成分和骨密度指标可以为篮球运动的训练和选材提供参考.
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骨关节炎基因差异谱的生物信息学分析
背景:骨关节炎对中老年人群的健康具有重要的威胁,其疾病发生发展受到多个基因的调控,但其具体机制尚未明确.目的:应用生物信息学方法研究骨关节炎的差异基因表达.方法:从GEO在线数据库中下载并分析获得在骨关节炎发生时关节滑膜组织中明显表达差异的158个基因.通过DAVID数据库对基因进行功能富集.通过STRING数据库分析蛋白质与蛋白质间相互作用关系.结果与结论:共筛选出158个差异基因,其中上调12个,下调146个.利用DAVID数据库对差异基因进行GO和KEGG Pathway分析显示,差异基因主要富集在破骨细胞分化的正性调节、细胞连接等功能以及MAPK信号通路、PI3K-Akt信号通路及ECM受体相互作用等信号通路.将差异基因进行蛋白质相互作用分析后筛选出网络的核心基因为VEGFA,JUN,PRKACA,PXN,SPTAN1,核心基因之间存在复杂的相互作用.结果证实,差异基因的相互作用可能与骨关节炎的发生有关,可为骨关节炎的诊疗提供新的靶点.
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ITRAQ技术筛选系统性红斑狼疮合并股骨头坏死的血清差异蛋白质组学变化
背景:系统性红斑狼疮合并股骨头坏死是由于长期大剂量应用皮质类固醇糖皮质激素造成股骨头活性成分死亡的病理过程,但其早期诊治缺乏特异的生物标志物.目的:应用同位素相对标记与绝对定量技术(iTRAQ)筛选系统性红斑狼疮合并激素性股骨头坏死的血清标志物.方法:分别收集系统性红斑狼疮合并激素性股骨头坏死患者血清8例(实验组)、系统性红斑狼疮使用激素后无股骨头坏死的患者血清(对照组)10例,采用iTRAQ联合二维液相色谱-串联质谱技术(2D-LC-MS/MS)对差异蛋白质进行筛选与鉴定.结果与结论:①共鉴定出10种差异蛋白质,与对照组相比有统计学差异,其中实验组中铜篮蛋白、免疫球蛋白IgG、免疫球蛋白κ链、补体C2等4种蛋白表达上调;内皮细胞蛋白C受体、人源性激肽释放酶结合蛋白、色素上皮衍生因子、四连接素、胰岛素样生长因子2、甲状腺素运载蛋白等6种蛋白表达下调;②KEGG通路分析提示以上10个蛋白与Wnt信号通路、补体与凝血级联反应、系统性红斑狼疮这3条信号通路密切相关;③结果说明,通过蛋白质组学技术成功得到了可靠的激素性股骨头坏死血清差异蛋白质,为激素性股骨头坏死的诊断及其发病机制提供了理论依据.
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硫辛酸对脂多糖诱导帕金森病细胞模型的保护作用及机制
背景:近年越来越多的研究证实神经免疫和炎症反应参与了帕金森病的发病,硫辛酸目前被证实具有抗炎和神经保护作用.目的:探讨硫辛酸对脂多糖诱导PC12细胞制备的帕金森病细胞模型的保护作用及相关可能机制.方法:将PC12细胞分为正常细胞组、脂多糖-帕金森病组和硫辛酸+脂多糖-帕金森病组.硫辛酸预处理PC12细胞2 h后,再用脂多糖干预PC12细胞.用CCK8法筛选佳帕金森细胞模型制备的脂多糖浓度以及硫辛酸佳干预浓度;细胞免疫组织化学法检测各组细胞中酪氨酸羟化酶的表达;ELISA法检测各组中细胞上清液中白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平;Western blot检测各组细胞中NF-κBp65、酪氨酸羟化酶的蛋白表达情况.结果与结论:①建造帕金森细胞模型佳脂多糖的质量浓度为600μg/L,佳硫辛酸干预浓度为25μmol/L;②硫辛酸干预后可以促进酪氨酸羟化酶阳性细胞表达,减少帕金森病细胞模型的炎症因子释放,并且可以抑制NF-κBp65的产生,提高酪氨酸羟化酶含量;③结果提示,硫辛酸对帕金森病细胞模型的作用可能通过抑制NF-κB信号通路,减轻炎症状态,从而起到对神经元的保护作用.
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野生型和功能增强型ADAMTS13蛋白酶分子的表达及功能鉴定
背景:血管性血友病因子水解蛋白酶13(a disintegrin and metaloproteinase with a thrombospondin type 1 motif,member 13,ADAMTS13)可结合并酶切血管性血友病因子,在防止血小板过多聚集和血栓的形成中起到关键作用.重组ADAMTS13通常选择在真核细胞中表达分泌,然而对于其表达纯化目前仍缺乏一个明确高效的途径.目的:寻找合适的宿主细胞,得到稳定表达野生型ADAMTS13和功能增强型ADAMTS13的细胞株,建立高纯度ADAMTS13的纯化方法,进而研究其生物学功能.方法:以野生型ADAMTS13重组质粒为模板,利用位点突变试剂盒得到功能增强型ADAMTS13重组质粒.比较CHO-S细胞、CHO-K1细胞、293T细胞对ADAMTS13的表达效果,挑选出合适的宿主细胞.通过Ni柱亲和层析和分子筛纯化蛋白;采用7.5％SDS-PAGE、Western-blot鉴定野生型ADAMTS13和功能增强型ADAMTS13的纯度及特异性;利用原子力显微镜技术检测野生型及功能增强型ADAMTS13与血管性血友病因子A2的相互作用,鉴定两种蛋白的活性.结果与结论:相对于CHO-S和CHO-K1,293T细胞更适合作为野生型ADAMTS13和功能增强型ADAMTS13的表达宿主;经Ni柱亲和层析和分子筛纯化后,所得到的野生型ADAMTS13和功能增强型ADAMTS13质量浓度分别为103.7,149.7 mg/L,且两种蛋白纯度均约90％;原子力显微镜检测结果显示,野生型ADAMTS13、功能增强型ADAMTS13与血管性血友病因子A2的黏附频率分别为11.37％,14.70％,表明功能增强型ADAMTS13与血管性血友病因子A2的结合亲和力更高,这与近期ADAMTS13构象研究一致.
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重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响
背景:有研究发现重组人骨形态发生蛋白2的临床应用可增加恶性肿瘤的患病风险,但关于重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响及机制尚未被阐明.目的:探讨在体外及体内条件下重组人骨形态发生蛋白2对乳腺癌MCF-7细胞增殖能力的影响及其作用机制.方法:①体外实验:无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理MCF-7细胞,通过MTT检测重组人骨形态发生蛋白2对细胞增殖能力的影响.利用流式细胞分析技术检测细胞周期,通过Real-time PCR检测不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2对p21、cyclin E表达的影响,应用Western blot技术检测不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理对p21、cyclin E蛋白水平及对PI3K/Akt磷酸化水平的影响;②体内实验:将14只雌性裸鼠随机等分为实验组和对照组,实验组成瘤方案为MCF-7细胞+重组人骨形态发生蛋白2,对照组成瘤方案为等量MCF-7细胞,分别于6周龄裸鼠皮下注射.结果与结论:①体外实验:无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理细胞,发现重组人骨形态发生蛋白2可显著抑制乳腺癌细胞系MCF-7的增殖能力.无血清条件下,不同浓度的重组人骨形态发生蛋白2处理细胞24 h,发现重组人骨形态发生蛋白2可增加G1期细胞所占比率.重组人骨形态发生蛋白2可显著促进p21的表达,显著抑制cyclin E的表达,并显著抑制PI3K/Akt信号通路的磷酸化过程;②体内实验:实验组裸鼠皮下瘤体体积均较对照组低,免疫组化检测显示重组人骨形态发生蛋白2处理可显著降低瘤体组织中ki-67的表达水平;③研究证实在体外及体内条件下重组人骨形态发生蛋白2通过影响PI3K/Akt信号通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖能力发挥显著抑制作用,从基础水平进一步论证了重组人骨形态发生蛋白2的临床应用不能显著增加乳腺癌的患病风险,为脊柱融合及骨不连等骨科疾病的治疗中应用重组人骨形态发生蛋白2提供了一定的理论基础.
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深圳地区乙型肝炎病毒携带者人白细胞抗原C等位基因多态性分布特点
背景:目前,较多文献是研究乙型肝炎病毒与人白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)A、B、DR之间的关系,较少文献报道乙型肝炎病毒与HLA-C的相关性,可能与HLA基因型检测方法的发展有关系.目的:研究深圳地区乙型肝炎病毒携带者HLA-C等位基因多态性分布特征.方法:应用聚合酶链反应-直接测序分型法分别对186名深圳地区健康人群(对照组)和122名乙型肝炎病毒携带者HLA-C基因进行基因分型.结果与结论:在对照组中检出的HLA-C等位基因有24种,其中HLA-C*01:02、07:02、03:04以及08:01为常见;携带组检出HLA-C等位基因有18种,常见等位基因有HLA-C*07:02、01:02、03:04、08:01.携带组中未检出基因HLA-C*12:02,对照组HLA-C*12:02检出率显著高于携带组,提示深圳地区乙型肝炎病毒携带者HLA-C等位基因频率分布与对照组比较同样具有高度的遗传多态性.HLA-C*12:02基因可能与深圳地区感染乙型肝炎病毒的机会呈负相关性.
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白藜芦醇修复内皮细胞氧化损伤抑制促血栓分子表达的作用和机制
背景:相关研究表明,白藜芦醇具有抗氧化、抑制动脉血栓的作用.目的:探讨白藜芦醇保护内皮细胞氧化损伤,抑制深静脉血栓形成的分子作用.方法:使用人脐静脉内皮细胞进行传代培养;实验分3组:①对照组为正常培养液中培养24 h;②H2O2组在培养液中加入200μmol/L H2O2培养24 h;③H2O2+白藜芦醇组:先分别予以10,20,30μmol/L的白藜芦醇预处理2 h,再加入200μmol/L H2O2培养24 h.采用MTT法检测细胞活力;Hoechst 33258染色法、荧光显微镜观察细胞凋亡;Western blot检测P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子及PI3-K/Akt/GSK3β、NF-κB信号通路关键蛋白表达.结果与结论:①与对照组相比,H2O2能够诱导内皮细胞损伤,白藜芦醇对H2O2诱导的内皮细胞损伤具有修复作用(P<0.05);②与对照组相比,H2O2组细胞凋亡率明显增加(P<0.05);与H2O2组相比,H2O2+白藜芦醇组细胞凋亡率明显减少(P<0.05);③与对照组相比,H2O2组P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子、NF-κB和GSK3β蛋白的表达显著上调(P<0.05),Akt总蛋白无明显变化(P>0.05),pAkt蛋白表达下调(P<0.05);与H2O2组相比,H2O2+白藜芦醇组上述蛋白表达被逆转(P<0.05);④结果表明,白藜芦醇能够修复静脉内皮细胞氧化损伤,对P-选择素、P-选择素糖蛋白配体1、血管性血友病因子蛋白表达具有抑制作用,其机制可能与PI3-K/Akt/GSK3β、NF-κB信号通路相关.
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低强度脉冲超声可缓解膝骨关节炎疼痛与修复关节软骨损伤
背景:大量研究证实低频脉冲超声治疗能有效缓解膝关节骨关节炎患者的关节肿胀与炎症.但同时探讨低强度脉冲超声波治疗对骨关节炎疼痛与关节软骨损伤修复作用的临床研究鲜有报道.目的:探讨低强度脉冲超声波对膝骨关节炎疼痛与关节软骨损伤的治疗作用及疗效评价.方法:将120例膝骨关节炎患者随机分为对照组、超声治疗组和联合治疗组,对照组患者接受双氯芬酸钠缓释片常规治疗,超声治疗组接受低强度脉冲超声波治疗,联合治疗组接受双氯芬酸钠缓释片联合低强度脉冲超声波治疗.治疗后1和3个月观察疼痛目测类比评分、Lequesne指数、Lysholm评分、Noyes关节软骨缺损评分、临床疗效和不良反应发生情况.结果与结论:①治疗后1和3个月,超声治疗组和联合治疗组疼痛目测类比评分及Lequesne指数显著低于对照组,末次随访总有效率显著高于对照组(P<0.01,P<0.05);②治疗后1和3个月,超声治疗组和联合治疗组Lysholm评分显著高于对照组(P<0.01);③治疗后1和3个月,超声治疗组和联合治疗组Noyes关节评分显著低于对照组(P<0.01);④随访期间,仅对照组有2例发生药物相关性头痛和恶心,其他2组未发生超声波毒性反应和药物不良反应;⑤结果提示,低强度脉冲超声治疗膝关节骨关节炎疗效确切,能有效减轻疼痛并促进关节软骨损伤的修复,且低强度脉冲超声治疗并不影响药物的有效性.
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大鼠高加速度离心加载装置:高加速度环境下动物的力学生物学响应
背景:载人航天器发射与返回、舰载机的起飞与降落,会使航天员、飞行员处在高加速度(超重)环境中,高加速度环境会对细胞、器官、动物体等产生重要影响.高加速度离心加载机是一种可以为动物个体及细胞提供高加速度力学环境的装置,在航空航天的力学生物学、组织工程研究中起基础平台作用,目前通常生物学实验室需要高加速度加载装置.目的:结合现有离心机,设计制作大鼠高加速度离心加载机,研究大鼠在高加速度力学环境下的力学生物学响应.方法:离心机设计制作流程:确定设计参数、选择动力源→设计离心机结构并验证→选择制作控制器→加工制作机器并调试.对大鼠进行水平和竖直放置方向的加载,每个方向设置了4 G组、8 G组、10 G组、20 G组4个小组和一个对照组,观察不同高加速度环境对大鼠身体和行走能力的影响.结果与结论:①经过结构设计加工、配件选型和安装调试研制出高加速度加载机,设备包括机械结构与控制系统两部分;该机运行平稳,噪声低,平稳实现0-40 G的高加速度加载,并且还可实现变加速度加载;②采用该机对大鼠进行不同高加速度环境加载后,表现出身体向一侧倾斜,不能直线行走的现象,并且伴随战栗、后肢充血等症状,高加速度值越大,大鼠所受的影响越大,经过一段时间休息,大鼠身体基本可以恢复;③实验结果验证了该离心加载机可以为动物实验提供相应的高加速度环境,可以用于研究高加速度环境下动物的力学生物学响应.
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血管内皮生长因子联合突变型低氧诱导因子1α的促血管生成作用
背景:研究表明,血管内皮生长因子的转录翻译过程在许多缺血、缺氧的条件下都会增加,有效改善机体血管形成与侧支微循环.突变低氧诱导因子1α的表达也需要严格的缺氧条件,很大程度上限制了其实际应用.目的:观察腺病毒介导的血管内皮生长因子联合突变型低氧诱导因子1α(Ad-VEGF-IRES-HIF-1αmu)转染内皮祖细胞在激素性股骨头缺血性坏死修复中促血管生成的作用.方法:①转染Ad-VEGF-IRES-HIF-1αmu到内皮祖细胞,观察细胞活性、形态及细胞病变效应;②将转染Ad-VEGF-IRES-HIF-1αmu成功的内皮祖细胞植入激素性股骨头缺血性坏死动物模型的股骨坏死部位(实验组:转染Ad-VEGF-IRES-HIF-1αmu,对照组:内皮祖细胞细胞悬液,空白组:细胞培养液);③移植10周后,检测血管内皮生长因子、低氧诱导因子1α蛋白表达及CD34表达和微血管密度计数;④墨汁灌注透明切片血管形态学观察.结果与结论:①实验组血管内皮生长因子和低氧诱导因子1α蛋白表达高于对照组与空白组(P<0.05);②实验组的CD34表达阳性的微血管数量较多,且相互之间有连接.③实验组动物股骨头血管墨汁染色显示有新的血管生成,部分血管管径良好,有再通现象,血管间有清晰的连通脉络,有效的血管脉络均匀分布在缺损区域;实验组新生血管面积显著高于对照组和空白组(P<0.05);④结果提示,血管内皮生长因子联合突变型低氧诱导因子1α在激素性股骨头缺血性坏死修复中可以增强血管生成作用.
