中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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自噬基因在骨关节炎软骨细胞凋亡过程中的保护和平衡效应
背景:软骨细胞在低营养供给下可发生细胞自噬,细胞自噬和细胞坏死、凋亡不同,可以使软骨细胞在营养供给不足时,能够存活下来,可能是软骨细胞自身的重要保护机制之一.目的:综合阐述自噬基因保护关节软骨及抑制骨关节炎等方面的机制和作用.方法:应用计算机检索中国知网、万方数据库及PubMed数据库2000年1月至2015年1月关于自噬基因与骨关节炎的相关研究的文章,中文检索词为"自噬基因、骨关节炎、关节软骨、软骨细胞",英文检索词为"autophagy、osteoarthritis、beclin1、LC3".选择自噬基因与骨关节炎的相关文章,初检得到269余篇文献,根据纳入标准选择其中的38篇进行综述.结果与结论:软骨细胞的损伤凋亡是软骨退变的主要机制,不予控制,就可能会进一步发展为骨性关节炎.细胞的损伤凋亡是软骨退变的重要机制之一,因此防止软骨细胞的损伤凋亡,可能有利于损伤软骨的修复,以此来缓解骨关节炎的病情发展.自噬现象能够抑制受损软骨细胞凋亡,发现其可将改变传统治疗骨关节炎的局限,但目前自噬基因与骨关节炎相关的研究还处于初级阶段,特别是对自噬途径在软骨中如何被诱导,如何进行信号转导,如何对软骨细胞生存产生影响等方面的认识还不够全面,有待进一步的研究.
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器官移植后巨细胞病毒的院内感染:检测与监测
背景:巨细胞病毒是器官移植患者易感染的机会性病毒之一,严重者可导致移植器官失去功能甚至危及生命,因此早期准确诊断巨细胞病毒感染是临床治疗的关键.目的:对器官移植后巨细胞病毒感染的检测方法、准确程度、检测时间和临床意义分析.方法:通过计算机分别检索维普数据库、PubMed数据库和中国知网数据库2007年1月至2014年12月有关器官移植和巨细胞病毒感染的文献,以及通过手工查阅书籍,以"transplantation,cytomegalovirus"为英文检索词,"器官移植,巨细胞病毒"为中文检索词.共检出中文31篇,英文1 894篇,选择代表性好、相关领域权威杂志的文献共35篇做进一步分析.结果与结论:对巨细胞病毒活动性感染的无创检测仍然是以巨细胞病毒-pp65 抗原为主,该方法可以准确反映巨细胞病毒感染的状况,敏感性和特异性均较好,也是临床上具诊断价值的方法.对巨细胞病毒的分子进行生物学检测可以从可以帮助检出潜在的感染人群,而且其检出时间比巨细胞病毒-pp65 抗原早,适用于巨细胞病毒感染的早期诊断和抢先给药治疗.定量核酸检测技术可通过定量的分析巨细胞病毒-DNA 的拷贝数判断患者体内的病毒含量,为判断隐性感染的患者提供了更为灵敏的监测方案.血清中巨细胞病毒-IgG和巨细胞病毒-IgM可以判断器官移植受者是否感染过巨细胞病毒以及后期的发病风险.病毒培养以及组织学的检测已经沿用数年,这两者是检测巨细胞病毒的金标准,但这些方法对于早期发现感染和诊断活动性感染意义不大.免疫学检测方法为诊断巨细胞病毒感染提供了新的思路,巨细胞病毒特异性的细胞的监测可以从早期、动态、准确的监测巨细胞病毒在体内的发展,评估巨细胞病毒发病风险,为巨细胞病毒感染的诊断发展提供新途径.
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牵拉成骨过程中并发症及截骨端骨痂血运情况:多普勒超声监测可行?
背景:影像学对截骨端新生组织的检测结果,是指导牵拉成骨进程的重要依据.传统的监测手段X射线片无法对牵拉早期的新生组织显像,而超声能早期检测到新生骨痂的形成及其周围组织的生长情况.目的:旨在探究超声多普勒在监测牵拉成骨中的研究进展,以促进其临床应用.方法:应用计算机检索CNKI 和PubMed 数据库中1989 年1 月到2014 年10月关于超声监测牵拉成骨相关的文章,在标题和摘要中以"牵拉成骨;多普勒超声;外固定;骨折愈合"或"distraction osteogenesis, ultrasonography, external fixation, fracture healing"为检索词进行检索.终选择24篇重要文献进行综述.结果与结论:超声是评价牵拉成骨早期改变的有效方法.超声能够全程监测骨痂的形成与成熟过程,能够评价骨痂生成的速度及其质量,监测拉伸区域及截骨区附近的软组织情况,早期发现肢体延长过程中出现的并发症,监测截骨端骨痂血运情况.在指导牵拉速度、调节牵拉张力、预防并发症等方面具有重要意义.
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腰椎间盘结构、盘内压力及不同载荷的影响:生物力学研究进展
背景:腰椎间盘突出是临床引起腰腿疼的主要原因,严重影响患者的日常生活、学习与工作,而对腰椎间盘的生物力学特点进行研究,对预防和治疗腰椎间盘疾病具有重要指导意义.目的:综述目前腰椎间盘生物力学的研究进展.方法:由第一作者用中国期刊全文数据库和PubMed数据库,检索时间:2009至2014年,检索词分别为"椎间盘、髓核、生物力学、纤维环、软骨板"和"intervertebral disc,nucleus pulposus,biomechanics,fibrosis annulus,cartilage",语言分别设定为中文和英文.纳入与腰椎间盘、髓核、纤维环及软骨板的生物力学特性相关的研究,排除重复及陈旧文献.共检索到5 072篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入49篇文章进行综述分析.结果与结论:通过对腰椎间盘结构特点、不同载荷的影响、腰椎间盘内压力、腰椎间盘退行性改变的生物力学特点以及腰椎间盘力学模型的建立等方面进行综述,有助于充分了解腰椎间盘相关问题的发生机制、发展过程以及造成的不良后果.对于腰椎间盘的日常保健及如何能更好的运用"力"这个物理因子解决腰椎间盘问题具有指导意义.
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自噬与软骨细胞生存及软骨损伤
背景:自噬是细胞通过溶酶体途径处理内源性底物的过程,它普遍存在于机体细胞中,又被看作是细胞Ⅱ型程序性死亡,自噬可能是正常软骨细胞的一种保护或平衡机制.目的:就自噬与软骨及其损伤相关性的新研究进展进行讨论,旨在对自噬在软骨及其损伤修复中的作用有一个更好的理解.方法:应用计算机检索中国知网、万方数据库及PubMed数据库近20年有关自噬与软骨损伤方面的文献,中文检索词为"自噬、软骨、软骨细胞",英文检索词为"autophagy、cartilage、chondrocytes、beclin1、LC3".结果与结论:软骨细胞能感受关节内微环境变化而做出应答,以调整细胞基质代谢,维持关节软骨生物学功能,而软骨细胞所处低氧环境是引起细胞自噬的重要因素.自噬是正常软骨细胞的一种平衡或者保护机制,虽然自噬与软骨及其损伤相关性在近些年的研究中取得了长足的进步,但不得不承认其仍处于初级阶段,在分子水平上一些 Atg 的发现加深了对自噬的认识,但在软骨中如何诱导自噬途径,自噬信号是如何传导的,对软骨细胞生存会产生怎样的影响等方面的了解还不够丰富,有待广大学者进一步研究.
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烧伤后瘢痕修复早期应用地塞米松:对自体岛状皮瓣移植存活和预后的影响
背景:烧伤瘢痕自体岛状皮瓣移植修复是主要的治疗方法,移植后皮瓣漂浮、坏死是影响移植后效果的主要原因,地塞米松具有免疫调节功能,对创伤、应激过程中的免疫失衡具有调节作用.目的:探讨地塞米松对烧伤后岛状皮瓣修复患者Th1/Th2平衡的调节作用及其对及对皮瓣存活和预后的影响.方法:选择68例烧伤后瘢痕血管蒂岛状皮瓣移植修复患者,随机分为2组,2组患者移植后均给予皮瓣下负压引流、预防感染、改善微循环等治疗;在此基础上,研究组移植后立即给予地塞米松磷酸钠0.2 mg/kg,连续3 d后逐渐减量,移植后第7天停药,观察两组患者移植前及移植后1周Th1、Th2、Th1/Th2水平,比较血清干扰素γ、白细胞介素4水平,比较两组皮瓣血运障碍、坏死、积液等并发症发生率的差异.结果与结论:两组患者皮瓣移植前静脉血Th1、Th2、Th1/Th2水平及血清干扰素γ、白细胞介素4水平差异无显著性意义,移植1周后研究组Th1、Th1/Th2水平高于对照组,Th2水平低于对照组,研究组干扰素γ、白细胞介素 4 水平低于对照组,研究组患者并发症发生率低于对照组.结果说明,烧伤后瘢痕岛状皮瓣修复患者移植后早期应用地塞米松治疗能够减少并发症的发生,其可能通过调整Th1/Th2免疫平衡状态发挥作用.
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新疆肝移植患者生存质量的调查研究
背景:对肝移植后的研究已经不仅仅只停在生存率和生存年限的探索上,生存质量已然成为一个新的研究领域,而新疆在肝移植受者生存质量的研究方面还是一片空白.目的:调查和了解新疆肝移植后患者的生存质量,探索了解影响该人群生存质量的主要因素.方法:运用回顾性研究,对目前存活的所有新疆肝移植受者进行普查,采用中文版SF-36健康量表进行问卷调查,电话随访发放31份,实际回收27份,回收率为87.1%.结果与结论:肝移植受者在8个维度得分范围为(60.6±18.7)-(93.9±22.1).原发疾病、手术方式、婚姻状况、文化程度、职业、性别和年龄对生存质量的某些维度有影响.而族别、收入及医保方式对生存质量影响不大.结果表明肝移植受者的生活质量与普通人群接近且得分在 6 个维度高于国内普通人群,进而肯定了肝脏移植是治疗晚期肝病的有效方式.
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阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者上气道流体动力学模型的建立
背景:对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者上呼吸道内气体流动情况进行分析有助于进一步了解上呼吸道解剖结构与功能间的相互关系,从而认识阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的发病机制.目的:建立阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者上气道三维形态及流体动力学模型,为研究阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者上气道气流动力学特征,探讨其发病机制奠定基础.方法:对1名男性中度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者的上气道行CT扫描,将以DICOM格式存储的扫描数据导入Mimics 10.01软件中进行处理,得到上气道三维模型.通过ANSYS ICEM CFD14.0对三维模型进行网格划分后,用 ANSYS 14.0-Fluid Dynamics对上呼吸道内部流场进行数值模拟,获得上气道气流场相关信息.结果与结论:建立了完整的上气道三维形态及流体动力学模型,共得到上气道网格数为1 751 940个单元,节点数为303 981个节点,上呼吸道内大流速为11.087 m/s位于咽腔狭窄区域腭咽下界处.上气道流体动力学模型符合人体的生物力学特点,为以后进一步研究阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者上呼吸道气流动力学特征奠定了基础.
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同种异体气管原位移植模型的改良与观察
背景:气管上皮的再生能有效抑制黏膜下组织增生和管腔闭塞的发生,有研究表明通气能够加快气管上皮的再生.目的:建立并改良同种异体小鼠原位气管移植模型,进一步观察通气对供体气管的影响.方法:C57BL/6小鼠的气管作为供体,BALB/c小鼠作为受体.实验分2组,实验组取2个供体气管膜部纵行剖开,缝合成一扩大管腔的气管原位植入受体气管;对照组供体气管原位植入受体气管,28 d后获取标本进行检测.结果与结论:苏木精-伊红染色显示,与对照组相比,实验组气管管腔内上皮层可见分化良好的纤毛上皮,亦可见少量无纤毛的单层或复层扁平上皮,黏膜下轻度纤维组织增生和炎细胞浸润.形态学定量分析结果示,实验组在气管上皮中纤毛上皮的比例高于对照组(P < 0.05),实验组固有层与软骨的比值,固有膜纤维组织的面积、淋巴细胞浸润度均低于对照组(P < 0.05).免疫组织化学染色显示,两组移植气管上皮均为为受体上皮表型.结果证实,实验成功建立了改良的小鼠原位气管移植模型,移植段气管通气量增加能够加快气管上皮分化,分化良好的气管上皮可以更好的抑制成纤维细胞的增殖.
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构建运动预适应力竭运动损伤模型大鼠心脏JAK2的表达变化
背景:研究表明JAK2激酶在缺血预适应和药物预适应的心肌保护机制中发挥重要作用.目的:观察运动预适应模型大鼠心脏JAK2 mRNA和蛋白表达的影响及其对心脏保护的作用机制.方法:将 SD 大鼠随机分为对照组、力竭组、运动预适应组、运动预适应+AG490 组.对照组和力竭组大鼠常规饲养3 d;运动预适应组和运动预适应+AG490组大鼠进行连续3 d的间歇跑台运动建立运动预适应动物模型,后一组在运动预适应前10 min腹腔注射JAK2抑制剂AG490.3 d后,力竭组、运动预适应组和运动预适应+AG490 组进行一次性力竭跑台运动.观察血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶的活性,用实时荧光定量PCR和免疫组织化学方法检测心脏JAK2 mRNA和蛋白的表达.结果与结论:与对照组相比,力竭组血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶活性增加,心脏JAK2 mRNA和蛋白的表达升高(P < 0.05);与力竭组相比,运动预适应组血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶活性降低(P < 0.05),心脏JAK2 mRNA和蛋白表达升高(P< 0.05);与运动预适应组相比,运动预适应+AG490组血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶同工酶活性增加(P < 0.05),心脏JAK2 mRNA和蛋白的表达降低(P < 0.05).结果证实,运动预适应通过激活JAK/STAT信号通路,上调心脏JAK2 mRNA表达,增加心脏JAK2蛋白合成,减轻心肌缺血损伤,从而发挥其心脏保护作用.
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激素联合脂多糖建立股骨头缺血坏死模型兔的技术改良
背景:兔是激素性股骨头缺血坏死病因与病理机制研究常使用的实验模型动物,该建模技术的完善与创新研究至今仍然是一个值得关注的现实问题.目的:改良激素联合脂多糖建立兔股骨头缺血坏死模型的技术,验证其降低兔死亡率、保证建模成功率等方面的效果.方法:28只新西兰大白兔随机分为对照组(n=10)和改良组(n=18),采用不同方法建立激素性股骨头缺血坏死模型.改良组兔左侧臀肌注射青霉素钠5.0 mg/kg、硫酸阿米卡星1.63×104 U/kg,24 h后右侧臀肌注射醋酸泼尼松龙20 mg/kg,48 h后耳缘静脉注射脂多糖5.0 μg/kg,之后每间隔24 h左右侧臀肌交替注射醋酸泼尼松20 mg/kg各1次,期间连续2周腹腔注射青霉素钠5.0 mg/kg、硫酸阿米卡星1.63×104 U/kg.对照组通过兔耳缘静脉注射脂多糖10 μg/kg,之后每间隔24 h肌注醋酸泼尼松龙20 mg/kg,共3次,每周1次肌注青霉素钠20×104 U/只.结果与结论:两组兔均成功建立激素性股骨头缺血坏死模型.与对照组相比,改良组兔造模后死亡率明显降低,股骨头骨陷窝及骨坏死明显.提示新改良的激素性股骨头缺血坏死模型建立方法可有效减轻了臀肌注射局部的损伤程度,能保证造模成功率,显著降低了兔死亡率.
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指骨骨密度和膝骨关节炎相关性的影像学评价
背景:骨关节炎和骨质疏松症是与人体衰老相关的两大退行性疾病,国内外针对其相关性的研究较多,但至今仍未得出统一结论.目的:通过横断面研究探讨影像学膝骨关节炎和指骨骨密度的相关性.方法:纳入2 855名研究对象,同时测量骨密度和双膝正位片,对潜在的混杂因素进行校正,应用多变量的Logistic回归分析模型来评估影像学膝骨关节炎和指骨骨密度的相关性.结果与结论:校正因素包括性别、年龄、体质量指数、吸烟、饮酒、总能量摄入量、平均钙摄入量、营养素补充剂和钙补充剂摄入量等,发现影像学膝骨关节炎和指骨骨密度呈正相关.在女性亚组中,这一相关性仍然成立,男性亚组则不具有相关性.证实在女性人群中膝骨关节炎和指骨骨密度的正相关性,提示骨密度可能为膝骨关节炎的保护因素.
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退行性腰椎侧凸程度与骨质疏松症程度无关
背景:骨质疏松是以全身骨组织显微结构损坏及全身骨量减少为特征,有学者认为骨质疏松患者腰椎椎体前高不会减少,反而会有增加的趋势.目的:分析退行性腰椎侧凸与骨质疏松症的相关性.方法:选取退行性腰椎侧凸患者37例,另选取同期在住院治疗的腰椎非侧凸组患者37例.测量时采用改良Cobb法,沿患者的T12-L5各椎体上终板平行划线,2条线的大夹角为侧凸角,两线所在椎体即为上、下端椎.运用双能X射线吸收法对患者L2-L4、股骨颈、Ward's三角区以及股骨转子的骨密度进行测定.采用Linear regression对骨质疏松和退行性腰椎侧凸症的相关性进行分析结果与结论:腰椎侧凸组患者L2-L4、股骨颈、Ward's三角区以及股骨转子部位的骨密度T值与腰椎非侧凸组比较差异有显著性意义(P < 0.05),其中股骨各部位骨密度较腰椎(L2-L4)较低.腰椎侧凸组患者骨质疏松症发病率明显高于腰椎非侧凸组患者(P < 0.05).Linear regression回归分析结果显示骨质疏松症是退行性腰椎侧凸发病的危险因素;退行性腰椎侧凸患者的腰椎及股骨近端各个部位的T值与侧凸Cobb's角无明显相关性.结果提示,骨质疏松症是退行性腰椎侧凸发病的危险因素,同时骨质疏松程度与侧凸程度无关.
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血脂与骨密度:新疆男性高血压患者相关性
背景:有研究表明绝经后女性血脂与骨密度有一定相关性,但针对男性对象的研究较少,且结论不一.目的:通过分析新疆乌鲁木齐市地区维吾尔族与汉族男性高血压患者血脂与骨密度的关系,探讨血脂水平与骨质疏松及骨量减少的相关性,以及民族间的差异.方法:将193例男性高血压患者,按照民族分为2组,维吾尔族73例,汉族120例,再根据是否合并骨质疏松和骨量减少,将上述2组患者再分别分为2个亚组,分析各组骨密度与血脂的相关性,并用二元Logistic逐步回归方法分析血脂和其他相关因素与骨质疏松之间的相关性.结果与结论:高血压维吾尔族骨质疏松及骨量减少患者中,胆固醇与股骨颈(r= 0.43,P=0.01)、Ward三角区(r=0.42,P=0.01)均为正相关,而在汉族高血压患者中未见明显相关性.应用二元Logistic回归方法进行分析,在控制体质量指数、年龄和民族因素后,仅胆固醇与骨质疏松及骨量减少的发生有关(OR=1.48,P=0.03).结果证实,新疆男性维吾尔族与汉族高血压患者中,血脂与骨密度存在一定相关性,可能为骨质疏松发生的影响因素.
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血清骨桥蛋白及瘦素水平与股骨头坏死的相关性
背景:由于骨桥蛋白、瘦素均与骨代谢有着紧密的联系,因此股骨头坏死的发病可能与两者有关.目的:分析股骨头坏死患者血清中骨桥蛋白及瘦素含量变化及相关性.方法:选取31例股骨头坏死患者(ARCO分期Ⅱ期11例、Ⅲ期10例、Ⅳ期10例)及10例健康成年人(对照组)作为研究对象.采用酶联免疫吸附实验(ELISA) 测定血清中骨桥蛋白与瘦素水平.并进行统计学分析比较.结果与结论:①股骨头坏死组血清骨桥蛋白水平明显高于对照组(P < 0.05).②股骨头坏死组血清瘦素水平明显高于对照组(P < 0.05).③股骨头坏死组和对照组的血清骨桥蛋白水平与瘦素水平相关均不显著.结果提示股骨头坏死患者血清骨桥蛋白与瘦素水平均升高,可能在其发病过程中发挥一定作用;股骨头坏死患者血清骨桥蛋白水平与瘦素水平相关不显著.
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基质细胞衍生因子1靶向超声对比剂在体内可与血管内皮细胞紧密结合
背景:基质细胞衍生因子 1 是心肌梗死区域微环境中效力强的趋化因子,在趋化干细胞修复梗死心肌以及在促进血管新生方面起到重要的作用.微泡和声学活性物质携带靶向配基,可制备成超声成像靶向对比剂并与活体细胞结合,用于分子成像,超声分子成像的关键是寻找"成像靶点",并成功制备能与"成像靶点"特异、高效结合的靶向超声对比剂.目的:实验制备和评价携基质细胞衍生因子1单克隆抗体的靶向微泡超声对比剂.方法:采用"生物素-亲和素"桥接法构建携基质细胞衍生因子1单克隆抗体的靶向微泡超声对比剂,并从外观、pH值、粒径测定、光镜及荧光显微镜下观、流式细胞仪检测等多个方面对靶向对比剂进行评价.4头中华小型猪均结扎左冠状动脉前降支第一对角支制备心肌梗死模型,2 头开胸但不结扎左冠状动脉前降支第一对角支,均注入靶向超声对比剂,心肌组织冰冻切片后采用免疫荧光法检测靶向微泡的体内稳定性.结果与结论:通过生物素-亲和素桥接法可将基质细胞衍生因子1抗体和超声微泡两者结合.体外实验中对比剂外观:表现为半透明的淡黄或绿色,静置后分层.非靶向对比剂pH值为7.02±0.12,靶向微泡对比剂的pH值为6.10±0.19.荧光显微镜下观察靶向微泡明亮且呈指环状绿色荧光环绕外壳周边,剧烈震荡后表面荧光无明显改变.靶向对比剂在携带基质细胞衍生因子1抗体之后微泡粒径大小为(2 422.62±238.82) nm.流式细胞仪检测显示,靶向对比剂在不同时间段的基质细胞衍生因子1携带率稳定,静置1 h后携带率稳定且剧烈震荡前后差异无显著性意义.在体内实验中可见靶向微泡在心梗部位血管内皮细胞处聚集.结果证实,经生物素-亲和素桥接法制备的携基质细胞衍生因子 1 单克隆抗体靶向微泡超声对比剂体内可与血管内皮细胞结合,在体外结合率高而且结合稳定.
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慢病毒载体构建小鼠CMKLR1基因缺陷性血管平滑肌细胞系
背景:趋化素在动脉粥样硬化时的表达水平上调,趋化素及其受体CMKLR1可能参与了动脉粥样硬化的病理过程.目的:建立CMKLR1基因缺陷性小鼠血管平滑肌细胞株.方法:以小鼠CMKLR1基因mRNA序列作为干扰靶点,设计3组靶向CMKLR1基因的shRNA序列,构建慢病毒载体,筛选出干扰佳的shRNA,在293T细胞对慢病毒进行包装和滴度测定.体外培养小鼠血管平滑肌细胞,转染慢病毒形成CMKLR1基因缺陷性血管平滑肌细胞株,用real-time PCR检测感染慢病毒后细胞中CMKLR1 mRNA水平.结果与结论:基因测序结果表明慢病毒载体构建成功,慢病毒的滴度约为8.7×106 TU/mL,pLVX-shRNA3对CMKLR1基因的抑制效果显著(P < 0.001).将pLVX-shRNA3转染至血管平滑肌细胞中形成基因缺陷细胞株,用real time PCR血管平滑肌细胞中CMKLR1 mRNA水平,该细胞株中CMKLR1 mRNA水平显著下降(P < 0.001),表明慢病毒介导的siRNA可有效沉默小鼠血管平滑肌细胞中CMKLR1基因的表达.
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H2O2诱导骨骼肌卫星细胞凋亡及法舒地尔的保护作用
背景:骨骼肌卫星细胞是成体骨骼肌中位于肌细胞膜和基膜之间具有增殖分化潜能的肌源性干细胞,研究表明骨骼肌卫星细胞的有效性及安全性,但是移植后的干细胞成活率极低,极大的限制了骨骼肌卫星细胞的应用.目的:观察过氧化氢(H2O2)对大鼠骨骼肌卫星细胞凋亡的影响以及法舒地尔的保护作用.方法:取体外培养的骨骼肌卫星细胞,随机分为正常对照组,H2O2组,H2O2+法舒地尔组(法舒地尔组),采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,ELISA法检测白细胞介素4、肿瘤坏死因子a的浓度,Western blot检测Bax蛋白的表达.结果与结论:同H2O2组相比,法舒地尔组凋亡发生率明显下降(P< 0.05),Bax蛋白水平表达明显降低(P< 0.05),白细胞介素4、肿瘤坏死因子a的分泌显著减少(P< 0.05).结果提示,法舒地尔抑制Rho激酶信号途径发挥抗凋亡保护作用,其机制可能与减少Bax蛋白的表达有关.
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深低温保存兔肢体不同方法复温后许旺细胞的活性
背景:根据神经再生的特点,作为再生支架的许旺细胞完整性十分重要,因此神经的深低温保存重要的是保存许旺细胞的结构和活性.目的:使用不同方法复温深低温保存的兔肢体,通过对比其神经组织的微观形态学变化,得到一种对深低温保存复合组织中的神经组织损伤较小的复温方法.方法:取40个新西兰大白兔后肢,随机分为空白组、快速复温组、慢速复温组、对照组.空白组不进行任何处理,对照组给予保护剂灌注,快速复温组、慢速复温组给予保护剂灌注后采用梯度化降温处理并保存于液氮中72 h,而后慢速复温组采用梯度化复温断肢,快速复温组将断肢直接放入37℃水浴中快速复温.复温后的各组肢体切取胫神经,采用光镜、电镜、免疫荧光、共聚焦显微镜进行观察对比,结果用SPSS 17.0统计软件进行统计分析.结果与结论:通过光镜、电镜、免疫荧光、共聚焦显微镜观察对比,空白组与对照组比较差异无显著性意义,快速复温组、慢速复温组两组均有不同程度的神经纤维断裂,轴突破坏以及线粒体肿胀,与空白组、对照组两组比较差异有显著性意义,快速复温组与慢速复温组比较,快速复温组显著优于慢速复温组.结果说明,深低温保存的兔断肢,快速复温方法对复合组织中的神经组织损伤较小.
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软骨下骨量变化与软骨退变的相关性
背景:关节软骨与软骨下骨在骨关节炎病变进程中的相互作用机制目前尚未完全阐明.软骨下骨量改变在骨关节炎病理进程中亦发挥重要作用.目的:分析2种手术方式及2种蛋白酶诱导建立兔膝关节骨关节炎动物模型的效果,以及软骨下骨量变化与关节软骨退变的相关性.方法:32只新西兰大白兔随机分为4组:Hulth模型组、前交叉韧带切断模型组、Ⅱ型胶原蛋白酶组及木瓜蛋白酶组,每组8只,右膝关节造模,左膝关节作为自身对照.造模后0,4,8周行DXA扫描,8周行MRI扫描后处死实验动物,取双侧膝关节制作病理组织学切片,比较各组膝关节影像学表现、大体形态及病理变化,并采用Mankin评分进行定量分析.结果与结论:造模后0,4,8周实验侧膝关节骨密度进行性降低,骨量降低程度Hulth模型组>前交叉韧带切断模型组>Ⅱ型胶原蛋白酶组>木瓜蛋白酶组.MRI显示实验侧股骨内外髁关节软骨厚度变薄,厚度Hulth模型组<前交叉韧带切断模型组<Ⅱ型胶原蛋白酶组<木瓜蛋白酶组.大体标本、组织切片观察及Mankin评分显示手术建模组骨关节炎程度较药物组重,Hulth模型组病变重,木瓜蛋白酶组轻.结果说明关节内手术及关节腔内注射蛋白酶均能建立骨关节炎动物模型;手术造模可复制出中晚期骨关节炎,药物诱导可产生骨关节炎早期改变.骨关节炎病变严重程度与软骨下骨骨密度呈负相关;关节软骨退变和软骨下骨改变相互关联,病变进行性发展.
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自体软骨移植与气管重建
背景:临床上经常遇到长距离、大范围的气管狭窄或缺损需气道重建.目的:观察动物自体软骨移植在喉气管重建中的应用效果.方法:切除新西兰兔环状软骨及部分气管前壁,制造喉气管损伤,取自体肋软骨膜移植修复,移植后8-24周处死存活动物,观察修复情况.结果与结论:大体观察:动物呼吸通畅,饮食正常,植入软骨膜与周边组织结合紧密,创口愈合良好,无肉芽组织及瘢痕形成,管腔内表面光滑且有黏膜覆盖.光镜结果显示:创口处有黏膜生成,外层有纤维细胞及横纹肌细胞,少量新生软骨形成,软骨细胞与肌细胞链接紧密.结果提示,自体软骨移植可以应用于动物喉气管重建,且具有很好的效果.
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功能性下颌偏斜青春期模型大鼠髁突软骨中血管内皮细胞生长因子的表达
背景:对于功能性下颌偏斜是否会导致骨性的下颌偏斜以及发生功能性下颌偏斜后下颌骨的生长方式是否会发生改变,目前尚存在争议.血管内皮细胞生长因子能够使内皮细胞的渗透性增加、刺激血管内皮细胞的有丝分裂、促进血管生成以及调节骨的形成.目的:探索大鼠功能性下颌偏斜对其髁突软骨中血管内皮细胞生长因子表达的影响及意义.方法:选4周龄雄性SD大鼠60只,随机分为对照组(n=20)和实验组(n=40).实验组大鼠佩戴作者所在课题组自制镍铬合金上前牙冠套,使下颌发生功能性左偏(2.1±0.3) mm,模拟功能性下颌偏斜.结果与结论:造模后7-28 d功能性下颌偏斜模型大鼠髁突软骨矢状向后部区域偏斜侧血管内皮细胞生长因子的阳性细胞数量较非偏斜侧减少;造模后14-28 d功能性下颌偏斜模型大鼠髁突软骨矢状向中部及冠状向中部区域偏斜侧血管内皮细胞生长因子的阳性细胞数量较非偏斜侧减少,但与对照组接近;造模后14-28 d功能性下颌偏斜模型大鼠髁突软骨冠状向外部区域偏斜侧血管内皮细胞生长因子的阳性细胞数量较非偏斜侧和对照组减少.说明青春期大鼠发生功能性的下颌偏斜后,双侧髁突软骨中的血管内皮细胞生长因子表达存在差异,导致软骨内的成骨活动发生变化,进而可能使大鼠下颌骨的正常生长发育受到影响,提示应尽早矫治功能性下颌偏斜.
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重组葡激酶-水蛭素融合蛋白的构建表达
背景:重组融合蛋白是根据凝血酶识别顺序将葡激酶与水蛭素串联而成的蛋白,具有双重功能,分子质量为23 ku,可在工程菌高密度发酵状态下获得高效表达.目的:通过对工程菌进行高密度发酵,构建重组葡激酶-水蛭素融合蛋白纯化工艺,并探讨其构建可行性及表达价值.方法:对工程菌进行高密度培养,并诱导表达重组葡激酶-水蛭素融合蛋白,对菌体进行离心收取,多次冻融后通过超滤、两部阴离子交换层析方法收集上清液,对重组葡激酶-水蛭素融合蛋白进行分离纯化,观察其纤溶比活性及在菌体中的高效表达价值.结果与结论:发酵培养工程菌,并在第17小时时予以诱导.结果发现,诱导0.5 h时,便能观察到重组葡激酶-水蛭素融合蛋白表达,且发酵时间越长重组葡激酶-水蛭素融合蛋白表达量相应越大;至发酵20 h时,表达达到顶峰.菌体干质量为32.20 g/L,目的蛋白表达量约为1.48 g/L.经过纯化处理后,重组葡激酶-水蛭素融合蛋白纯度高达98%,纤溶比活性约为2.6×104 IU/mg,回收活性的概率为56%.实验通过构建重组葡激酶-水蛭素融合蛋白纯化工艺,并分析其表达价值,提示该纯化工艺较为便捷,耗时较短,且能重复使用,可用于大规模生产.
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组织芯片检测星形胶质细胞上调基因1与原发性肝细胞癌病理因素的相关性
背景:星形胶质细胞上调基因 1 是肿瘤发生转移早期的重要标记分子之一,很有可能成为肝癌临床治疗的分子靶标.目的:探索原发性肝细胞癌患者星形胶质细胞上调基因 1 在其癌组织中的表达水平,并推测其在原发性肝细胞癌患者微创疗效中的地位.方法:采用组织芯片方法和免疫组织化学染色方法检测120例原发性肝细胞癌患者肿瘤组织中星形胶质细胞上调基因1蛋白表达水平,并与其临床病理资料进行相关性分析.结果与结论:原发性肝细胞癌患者星形胶质细胞上调基因 1 蛋白表达水平与其临床分期和组织分化程度密切相关,且其星形胶质细胞上调基因 1 蛋白高表达水平与 Ki-67阳性率和肿瘤微血管密度有关,但该蛋白高表达与患者的性别及年龄无相关性.说明星形胶质细胞上调基因 1 蛋白表达水平与常规恶性检测指标相关,检测该蛋白表达水平对于判断原发性肝细胞癌具有重要意义.
