脊髓损伤实验动物模型评价：诱发电位的应用与研究进展

背景：随着工业社会的发展和交通的发达，脊髓损伤的发病率也逐年升高。脊髓损伤的辅助检查手段除了影像学以外，神经电生理技术的应用也越来越广泛。其中诱发电位因其准确率高、操作简便应用较多。目的：综述躯体感觉诱发电位及运动诱发电位在兔脊髓损伤中的应用情况。方法：通过检索中国知网、PubMed数据库，输入“脊髓损伤，诱发电位，动物模型，Spinal cord injury，evoked potential，animal model”等关键词进行检索，终纳入文章33篇进入结果分析。结果与结论：详细阐述了体感诱发电位与运动诱发电位在动物实验中的操作方法、波形分析、应用价值、影响因素及诱发电位与动物预后功能评价。其中体感诱发电位是反应脊髓后索功能的很好指标，操作简便，对检测患者感觉功能的变化有很好的指导作用。运动诱发电位能为各种脊髓疾病提供敏感而精确的诊断，尤其在患者治疗和康复期间可作为重要的评估手段。而两者连用效果更精确。

远程医疗与老年疾患：国际发展趋势分析

背景：随着科技的发展和人民生活水平的提高，远程医疗技术已在人们的生活中起到了举足轻重的作用，尤其是在老年疾病的诊治和抢救过程中发挥了重要作用。目的：以汤森路透Web of Science数据库及北美临床试验注册中心的信息为数据源，分析国际远程医疗与老年疾患发展的趋势，以期为国内该领域研究提供可借鉴的依据。方法：①被收录的文章及以关键词“telemedicine”(远程医疗)，“geriatric diseases”(老年疾病)进行检索。②检索文献时间范围10年(2003至2013年)。③检索信息源：Web of Science数据库和北美临床试验注册中心的临床试验项目。结果与结论：①在汤森路透Web of Science数据库，2003至2013年关于远程医疗与老年疾患发表的文献共239篇。美国发文量多，93篇，占总数比重大，为38.912%；2003至2013年发表远程医疗与老年疾患的研究文献较多的机构是美国华盛顿大学，美国哥伦比亚大学，澳大利亚昆士兰大学，澳大利亚西澳大学；Journal of telemedicine and telecare (《远程医疗与远程护理杂志》)杂志发表此领域文献多，20篇，占全部文献的8.368%；近年来，国际远程医疗与老年疾患相关文献呈总体逐渐上升的趋势；从2003至2013年，在上述239篇远程医疗与老年疾患的研究文献中来自中国的文章仅有4篇，说明中国对此领域的研究关注相对较少，文章数量和质量极有待提高。②2003-2013年，在北美临床试验注册中心注册的远程医疗与老年疾患相关临床试验注册项目共有18项，干预性研究所占比重大，15项，其次为观察性研究。

磷酸三邻甲苯酯诱导鸡迟发神经毒性模型和苯甲基磺酰氟的预处理

背景：接触有机磷化合物可导致迟发神经病的发生，然而因为迟发性神经病发生的确切机制不清楚而尚无有效的治疗方法。目的：构建磷酸三邻甲苯酯诱导鸡迟发性神经毒性模型并观察苯甲基磺酰氟预处理的影响。方法：将成年罗曼母鸡随机分为2个磷酸三邻甲苯酯染毒组，苯甲基磺酰氟预处理组和对照组。其中磷酸三邻甲苯酯染毒组浓度分别为1000 mg/kg和750 mg/kg，均一次性灌胃；苯甲基磺酰氟预处理组先将苯甲基磺酰氟按40 mg/kg剂量给鸡皮下注射，24 h后，再经灌胃一次性给鸡1000 mg/kg的磷酸三邻甲苯酯；而对照组则给予等量生理盐水。使用6分制来评价迟发性神经病临床症状并记录鸡的体质量变化。在染毒第5，21天分别断头处死鸡，制备电镜切片并于电镜下观察。结果与结论：磷酸三邻甲苯酯染毒后鸡临床症状随着时间的延长而渐进性加重(P <0.05)，体质量显著降低(P <0.05)，但苯甲基磺酰氟预处理组鸡与对照组鸡实验期间则无任何迟发性神经病异常表现和体质量变化。磷酸三邻甲苯酯组染毒5 d后，发现一些线粒体有轻微肿胀，轴突内微丝微管排列发生可疑改变，但是其他细胞器没有明显异常改变。磷酸三邻甲苯酯组染毒21 d后，脑神经元退行性改变明显，内质网肿胀，线粒体异常改变，细胞骨架排列紊乱。1000 mg/kg的磷酸三邻甲苯酯为佳染毒剂量。结果显示，实验成功建立了磷酸三邻甲苯酯诱导鸡迟发性神经毒性模型和苯甲基磺酰氟预处理模型，苯甲基磺酰氟预处理能明显改善磷酸三邻甲苯酯染毒后鸡迟发性神经病的临床症状和病理改变。

慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈功能与蒙药槟榔十三味丸的干预

背景：抑郁症是具有很高的致死、致残率，严重威胁着人类健康的常见精神疾患。临床上应用槟榔十三味丸治疗抑郁症取得良好的疗效。但其作用机制尚未明确。目的：观察蒙药槟榔十三味丸对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈功能的影响，探讨槟榔十三味丸抗抑郁作用机制。方法：80只Wistar雄性大鼠，根据蔗糖水消耗量随机分为正常对照组、模型组、氟西汀组、槟榔十三味丸低、中、高剂量组、RU486组和槟榔十三味丸低、中、高剂量+RU486组，每组8只。除正常对照组外，其余大鼠均采用慢性应激结合孤养方法制备抑郁模型，槟榔十三味丸低、中、高剂量组大鼠在造模同时连续28 d灌胃槟榔十三味丸0.2，0.4，0.8 g/kg；正常对照组和模型组大鼠灌胃羧甲基纤维素钠；RU486组大鼠自造模第21天起腹部皮下注射糖皮质激素受体拮抗剂RU486；槟榔十三味丸低、中、高剂量+RU486组大鼠在造模同时灌胃槟榔十三味丸0.2，0.4，0.8 g/kg，且自造模第21天起腹部皮下注射RU486。结果与结论：与正常对照组相比，模型组及RU486组大鼠肾上腺皮质酮水平显著升高(P <0.05)，海马、下丘脑、垂体糖皮质激素受体mRNA表达显著下降，下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素mRNA表达显著增多；与模型组相比，灌胃槟榔十三味丸的大鼠肾上腺皮质酮水平降低，海马、下丘脑、垂体糖皮质激素受体mRNA表达明显增多，下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素mRNA表达水平显著降低；且与RU486组相比，同时灌胃槟榔十三味丸的大鼠肾上腺皮质酮、海马、下丘脑、垂体糖皮质激素受体 mRNA、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素mRNA表达水平也出现改变。提示槟榔十三味丸对糖皮质激素的过度分泌有直接的调控作用，并可通过增强糖皮质激素受体mRNA的表达及降低促肾上腺皮质激素释放激素mRNA的表达，改善下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈中枢的功能障碍。当下丘脑-垂体-肾上腺轴负反馈通路被阻断后，槟榔十三味丸作用减弱。

脊髓损伤模型大鼠鞘内注射甲基强的松龙后的蛋白质组学变化

背景：临床研究表明，早期使用甲基强的松龙可以促进损伤神经功能恢复，合理的初始剂量、剂量间隔时间和治疗持续时间是甲基强的松龙治疗急性脊髓损伤取得良好效果的关键。目的：观察急性脊髓损伤模型大鼠鞘内注射大剂量甲基强的松龙后的脊髓组织差异蛋白表达质谱。方法：取8只SD大鼠，建立急性脊髓损伤模型，随机分2组，分别于造模后0，8 h鞘内注射甲基强的松龙7.5 mg/kg，于注射24 h后取损伤段脊髓组织，采用同位素标记相对和绝对定量技术分析两组差异蛋白质及表达明显相关神经再生的差异蛋白。结果与结论：共鉴定到了87个差异表达的蛋白，与0 h组相比，8 h组上调的差异蛋白有43个，下调的差异蛋白数是44个。相关神经再生的差异蛋白18个，上调的差异蛋白有8个，下调的差异蛋白数是10个，其中OMgp是一个潜在的神经轴突生长抑制因子，OMgp与NgR/P75/TROY/Lingo-1组成受体复合体特异性结合，通过第二信使cAMP激活RhoA作用可抑制轴突生长锥的崩解。提示鉴定鞘内注射甲基强的松龙治疗大鼠急性脊髓损伤后脊髓差异蛋白和脊髓相关神经再生因子，分别进行蛋白数据库检索和功能分析，其表达可能作为急性脊髓损伤后临床上监测神经损伤再生的指标。

硫化氢对急性马尾神经损伤模型大鼠的神经保护作用

背景：研究发现内源性硫化氢可以作为一种新型气体信号分子，具有重要的信号传递功能和生物调节作用。目的：研究硫化氢对急性马尾神经损伤大鼠的神经保护作用。方法：将72只SD大鼠随机均分为3组，实验组、模型组咬除L4椎板，将长10 mm、厚1.0 mm、宽1.0 mm的硅胶条植入大鼠L5和L6椎管内，建立大鼠马尾神经压迫损伤模型；假手术组仅咬除L4椎板，未植入硅胶条；实验组造模前1 h腹腔注射20μmol/kg的NaHS，模型组与假手术组腹腔注射等量生理盐水。造模后12，24，48，72 h检测马尾神经组织中丙二醛和谷胱甘肽水平，同时在48 h取材进行苏木精-伊红染色和TUNEL染色。结果与结论：苏木精-伊红染色显示，假手术组马尾神经纤维致密有序，髓鞘完整，轴突无肿胀；模型组马尾神经纤维松散，脱髓鞘改变，部分轴突及髓鞘肿胀；实验组马尾神经纤维紧密，少量轴突肿胀、脱髓鞘改变。TUNEL染色显示，假手术组中脊髓和背根神经节组织中阳性细胞数量较少，模型组脊髓和背根神经节中可见大量阳性细胞，实验组阳性细胞数量显著低于模型组。假手术组、实验组丙二醛水平低于模型组(P <0.05， P <0.01)，谷胱甘肽水平高于模型组(P <0.05，P <0.01)。表明硫化氢可以降低氧化应激反应，保护急性损伤大鼠马尾神经。

复方倍他米松局部注射后自体髓核移植模型大鼠脊髓及背根神经节中P物质和降钙素基因相关肽变化

背景：复方倍他米松注射液治疗椎间盘突出症临床应用广泛，但其具体作用机制尚不明确。目的：探讨局部注射复方倍他米松对自体髓核移植模型大鼠脊髓及背根神经节中P物质和降钙素基因相关肽的影响。方法：36只SD大鼠随机分为4组，即：空白组、模型组、假手术组、西药组，每组9只。模型组和西药组适应性喂养1周后手术制作大鼠自体髓核移植模型。于术后第3，7，12天，模型组和假手术组给予128.25μL生理盐水，西药组给予复方倍他米松注射液13.5μL+2%利多卡因注射液67.5μL。末次给药12 h取L4-6节段脊髓及背根神经节，采用免疫荧光染色方法测定两种组织中P物质和降钙素基因相关肽的含量。结果与结论：各组大鼠脊髓、背根神经节中P物质和降钙素基因相关肽平均荧光强度比较，差异有显著性意义(P <0.01)，进一步两两比较：与空白组、假手术组相比较，模型组大鼠脊髓、背根神经节中P物质和降钙素基因相关肽含量显著性增高(P <0.01)，证明模型复制可靠；与模型组、假手术组相比较，西药组大鼠脊髓、背根神经节中P物质和降钙素基因相关肽含量显著性降低(P <0.01)。结果表明复方倍他米松治疗腰椎间盘突出症的作用机制，可能是通过抑制背根神经节神经元合成和分泌P物质，清除背根神经节中P物质和降钙素基因相关肽，减少其向脊髓传递，从而抑制和缓解疼痛。

山楂叶总黄酮抑制慢性脑缺血模型大鼠脑组织神经元的凋亡

背景：脑血管疾病常引起大脑神经功能缺失，而神经细胞凋亡是造成脑神经功能缺失的重要因素，c-fos的过度表达能阻断细胞内信号的转导而产生一些促调亡因子，参与脑缺血损伤后的神经细胞凋亡过程， Bcl-2是抑制细胞凋亡因子，抑制或减少损伤后神经细胞凋亡可能成为缺血性脑血管病治疗的关键。目的：探索山楂叶总黄酮对慢性脑缺血模型大鼠的治疗作用及机制。方法：72只健康雄性SD大鼠随机等分为假手术组、模型组、山楂叶总黄酮组和银杏叶片组。后3组大鼠采用永久性双侧颈总动脉结扎法制备脑缺血模型。山楂叶总黄酮组和银杏叶片组大鼠分别于造模后36 d起连续36 d灌胃140 mg/kg山楂叶总黄酮和12.3 mg/kg银杏叶片，而模型组和假手术组大鼠灌胃3.5 mL/kg生理盐水。结果与结论：与模型组比较，山楂叶总黄酮组模型大鼠缺血脑组织中 c-fos 表达水平显著降低(P<0.01)，Bcl-2表达水平显著增加(P<0.01)，Ca2+含量降低(P<0.05)，且上述指标与银杏叶片组比较差异无显著性意义(P>0.05)。提示山楂叶总黄酮对慢性脑缺血的保护作用与抑制脑神经细胞凋亡有关，其抗凋亡的机制可能与上调 Bcl-2表达，下调 c-fos 表达，降低脑组织Ca2+含量有关。

成年大鼠急性压迫性脊髓损伤模型音猬因子的表达

背景：在神经系统的发育中，音猬因子信号通路的主要作用为诱导整个中枢神经系统形成背腹两侧分区,当这一信号通路受到破坏时，将导致整个中枢神经系统腹侧表型神经元的完全丧失。目的：制造成年大鼠急性压迫性脊髓损伤模型，检测脊髓急性压迫性损伤后与发育相关的重要分子音猬因子的表达，探讨其在神经再生过程中所发挥的作用。方法：将30只同龄SD大鼠置入后路压迫装置，制作成急性压迫性脊髓损伤模型。随机分为椎板钻孔组5只和急性脊髓损伤组25只。应用原位杂交检测方法，分别于脊髓损伤后1，3，5，7，14 d对损伤区行音猬因子mRNA检测。结果与结论：脊髓损伤后7 d，音猬因子表达水平达到大值，在损伤区至远端10 mm处的灰质和白质中都有表达。音猬因子在室管膜细胞的表达明显低于在灰质和白质中的表达；其在室管膜区域的表达仅限于损伤区域周围5 mm的范围内，分布范围明显小于在灰质和白质中的表达。提示激活急性压迫性脊髓损伤模型音猬因子的表达，可能和损伤脊髓神经的再生有关。

BACKGROUND: Cerebrovascular disease often causes dysfunction of the brain nerve, and nerve cel apoptosis is the important factor of cerebral nerve dysfunction. The excessive expression of c-fos can block the transduction of intracelular signal so that producing some apoptosis-promoting factors, which involve in nerve cel apoptosis process after ischemia injury of brain. Bcl-2 is an inhibited factor. It might to be the key to treat ischemic cerebrovascular disease by inhibiting or reducing the apoptosis of nerve cels after ischemia injury. OBJECTIVE: To investigate the therapeutic effect and mechanism of the Total Flavone of Hawthorn Leaf on chronic cerebral ischemia rats. METHODS: A total of 72 healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into sham surgery group, model group, Total Flavone of Hawthorn Leaf group and ginkgo leaf group. Permanent bilateral carotid artery ligation was used to prepare chronic cerebral ischemia model in the model group, Total Flavone of Hawthorn Leaf group and ginkgo leaf group. Total Flavone of Hawthorn Leaf group and ginkgo leaf group respectively received 140 mg/kg Total Flavone of Hawthorn Leaf and 12.3 mg/kg ginkgo leaf intragastricaly for 36 days from 36 days after model induction. Model group and sham surgery group received 3.5 mL/kg physiological saline intragastricaly. RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the model group, the expression of c-fos protein significantly deceased in the Total Flavone of Hawthorn Leaf group (P < 0.01), Bcl-2 expression levels significantly increased (P < 0.01), and Ca2+ content decreased (P < 0.05). Moreover, no significant difference in above indexes was detected between Total Flavone of Hawthorn Leaf group and ginkgo leaf group (P> 0.05). These data indicated that the protective effect of Total Flavone of Hawthorn Leaf on chronic cerebral ischemia was associated with its inhibition of neuronal apoptosis. Its mechanism of anti-apoptosis might be associated with up-regulating expression of Bcl-2, down-regulating expression of c-fos and decreasing Ca2+ content in brain.

急性脊髓损伤模型大鼠蛋白质组学研究：iTRAQ技术的验证

背景：同位素标记相对和绝对定量(Isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ)质谱分析技术依据串联质谱中信号离子表达质荷比峰值的不同来研究相关对应蛋白质的信息。目的：建立急性脊髓损大鼠模型，观察其脑脊液差异蛋白谱，从微观分子水平研究急性脊髓损伤后继发性损伤的机制及有效治疗方法。方法：建立SD大鼠急性脊髓损伤模型，取脑脊液应用iTRAQ技术鉴定SD大鼠急性脊髓损伤后脑脊液的差异蛋白质。结果与结论：共鉴定蛋白数722个，差异表达蛋白107个：下调的差异蛋白有63个，上调的差异蛋白数是44个。其中相关神经再生的差异蛋白19个：上调14个，下调5个；调节神经再生的差异蛋白7个。实验中检测到的多种差异蛋白及表达明显的神经再生因子可能作为急性脊髓损伤的生物标记物或可能作为临床管理监测急性脊髓损伤的损伤进程、靶向治疗及评估疗效的强有力证据。

胸骨正中切口与左侧肋间切口开胸制备心肌梗死动物模型的比较

背景：许多治疗冠心病的研究依赖于心肌梗死动物模型的建立。探索创伤小、易操作、安全、存活时间长、存活率高的心肌梗死动物模型制作方法具有重要意义。目的：比较两种开胸结扎冠状动脉制作心肌梗死动物模型方法的优劣。方法：健康雄性新西兰大耳白兔30只，随机分为3组，每组10只。胸骨正中切口组、胸骨左缘切口组开胸后结扎冠状动脉前降支，假手术组不结扎冠状动脉。监测手术时间、术中出血量、术后进食量、进食恢复时间。术后24 h内测心肌酶学指标，术后4周检测超声心动图。结果与结论：胸骨正中切口组及胸骨旁切口组结扎冠状动脉后心电图检查均出现不同程度的 ST 段弓背样抬高。胸骨正中切口组造模成功率为70%、胸骨左缘切口组造模成功率为80%。两组术后24 h内心肌酶学指标升高，与术前相比差异有显著性意义(P <0.05)；术后4周左室射血分数、左室短轴缩短率降低，与术前相比差异有显著性意义(P <0.05)。与胸骨左缘切口组比较，胸骨正中切口组造模成功所需的手术时间少，术中出血量少，术后恢复进食时间短，术后进食量较多，差异均有显著性意义(P <0.05)，结果表明采用胸骨正中开胸法结扎冠状动脉更适合用于制作心肌梗死动物模型。

有氧运动干预自发性高血压模型大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src mRNA表达和c-Src的活性

背景：原癌基因 c-Src 在调节高血压等心血管系统疾病中起着重要的作用，目前尚未看到有关运动干预影响主动脉血管内皮细胞c-Src的表达和活来调节高血压的研究。目的：观察有氧运动对自发性高血压大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src mRNA表达和c-Src活性的影响。方法：8只雄性Wistar大鼠作为正常对照组，16只自发性高血压大鼠随机分为自发性高血压组8只，自发性高血压运动组8只。自发性高血压运动组每天进行90 min无负重有氧游泳运动，6 d/周，共8周；正常对照组和自发性高血压组大鼠不做游泳运动。每周测定大鼠血压1次，8周后，测定各组大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src mRNA表达和c-Src活性。结果与结论：与自发性高血压组相比，自发性高血压运动组血压明显降低，主动脉血管内皮细胞c-Src mRNA表达和c-Src活性明显升高。与正常对照组相比，自发性高血压运动组大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src活性和c-Src mRNA表达高于正常对照组和自发性高血压组(P <0.01)。结果提示有氧运动可以促进自发性高血压大鼠主动脉血管内皮细胞c-Src活性和c-Src mRNA表达的增加。

骨性关节炎模型大鼠关节软骨变化及透骨消痛胶囊干预的作用

背景：透骨消痛胶囊是治疗骨性关节炎的临床验方，作用机制尚未完全阐明。尿激酶型纤溶酶原激活系统参与关节软骨的细胞外基质降解及关节滑膜增生，在骨性关节炎的病理过程中起着重要作用。目的：观察透骨消痛胶囊对膝骨性关节炎模型大鼠软骨中尿激酶型纤溶酶原激活系统的影响。方法：SD大鼠144只，随机取120只采用关节腔注射木瓜蛋白酶复制大鼠膝骨性关节炎模型，并随机分为模型组、壮骨关节丸组[1.2 g/(kg?d)]、透骨消痛胶囊低剂量组[0.092 g/(kg?d)]、透骨消痛胶囊中剂量组[0.184 g/(kg?d)]和透骨消痛胶囊高剂量组[0.368 g/(kg?d)]，每组24只，每2周为1个疗程，中间休息2 d，共4个疗程。另取24只正常大鼠为空白组。每2个疗程后，处死一批实验动物，苏木精-伊红染色观察软骨组织病理改变；免疫组织化学反应观察尿激酶型纤溶酶原激活剂、尿激酶型纤溶酶原激活剂受体、纤溶酶原激活物抑制因子阳性表达情况；Western blot检测尿激酶型纤溶酶原激活剂、尿激酶型纤溶酶原激活剂受体、纤溶酶原激活物抑制因子蛋白表达情况。结果与结论：透骨消痛胶囊组和壮骨关节丸组的骨性关节炎大鼠关节软骨 Mankin’s 评分较模型组明显降低(P <0.01)，具有时间依赖；免疫组织化学反应显示，透骨消痛胶囊组和壮骨关节丸组尿激酶型纤溶酶原激活剂、尿激酶型纤溶酶原激活剂受体的阳性率明显降低，而纤溶酶原激活物抑制因子明显升高，具有时间依赖。Western blot检测结果与免疫组织化学具有相同的趋势。提示透骨消痛胶囊可能通过调控尿激酶型纤溶酶原激活剂系统对骨性关节炎发挥防治作用。

诱导早期动脉瘤形成模型大鼠血管生长因子的表达

背景：血管内皮细胞生长因子和转化生长因子在胚胎发育、伤口愈合、炎症、肿瘤及缺血缺氧等多种生理和病理过程中发挥重要作用，并参与脑损伤的发生发展过程。目的：评价血管内皮细胞生长因子和转化生长因子α在大鼠早期动脉瘤形成过程中的表达差异。方法：取SD大鼠28只，随机分为3组，假手术组(n=8)暴露左侧颈动脉分叉和双侧肾动脉，不进行结扎，于当天处死；15 d组(n=10)与30 d组(n=10)结扎左侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉及双侧肾动脉后支建立动脉瘤大鼠模型，分别于造模后15，30 d处死，取双侧大脑前动脉和嗅动脉分叉处，在光镜下观察其病理变化，同时进行血管内皮生长因子和转化生长因子α免疫组织化学染色。结果与结论：假手术组和15 d组均未见有动脉瘤，30 d组10只大鼠中发现在右侧大脑前嗅动脉分叉处1个囊性动脉瘤和5个早期动脉瘤样改变。假手术组和15 d组脑动脉标本无血管内皮生长因子表达，30 d组脑动脉标本血管内皮生长因子表达阳性率为80%，提示血管内皮生长因子可能参与动脉瘤形成过程。假手术组和15 d组脑动脉标本转化生长因子α表达较30 d组明显，提示转化生长因子α在动脉瘤形成过程中受损或分泌减少，可能与动脉瘤形成有关。

基于机器学习分类判断算法构建心力衰竭疾病分期模型

背景：早期发现心力衰竭及心力衰竭分期的正确诊断是获得良好治疗效果的基础，但由于缺乏简单有效的心力衰竭分期诊断模型，使临床诊断心力衰竭较为困难，导致心力衰竭的确诊率和控制率都比较低。目的：采用基于机器学习的分类判断算法，建立心力衰竭分期模型，提高心力衰竭诊断和分期准确度。方法：选择心力衰竭患者和健康体检者共194例，以美国心脏病协会和美国心脏协会分期为依据，采集与心力衰竭分期密切相关的特异性临床特征参数指标，对参数进行筛选，参考专家的临床确诊结果，采用Adaboost模型和SVM模型训练心力衰竭诊断和分期模型，获得诊断模型。结果与结论：采用每搏输出量、心输出量、左室射血分数、左房内径、左室收缩末内径、N末端B型利钠肽原、心率变异性等指标，Adaboost模型的灵敏度很高，达到了100%，而特异性为94.4%；同时SVM模型也具有良好的灵敏度和特异性，分别为86.5%和89.4%。Adaboost分类模型可准确诊断心力衰竭症状，准确率达到89.36%。而在进一步确诊为心力衰竭的基础上，SVM 分类模型能对心力衰竭的严重程度进行有效分期，B分期和C分期的准确率分别达到了86.49%和81.48%。说明结合Adaboost和SVM两种机器学习模型，能为心力衰竭的诊断及分期提供较准确的模型。

建立反映心脏内部各腔室结构的数字化三维模型

背景：心脏内部各腔室精细结构的数字化三维模型，不仅能够加强对心脏生理的认识，还能为心脏电生理仿真与心内膜电生理标测导航的研究提供重要的基础医学数据。目的：建立符合心腔实际解剖结构的三维数据，建立反映心脏内部各腔室结构的数字化三维模型。方法：在 MATLAB软件环境下完成图像分割，首先对医学人体断层数据集中心脏切片图像进行自动配准，再运用聚类法根据图像的颜色特征对图像中各组织与成分进行分类，随后经区域生长法处理实现心腔及相关连通区域的图像分割与提取。所得图像导入专用医学图像处理软件，完成心腔三维模型重建。结果和结论：所提出的方法能够重建出较为精细的心腔结构三维模型。此模型中左右心房、心室结构明晰，能清楚地观察到主动脉、上腔静脉等血管，三尖瓣与二尖瓣等微细结构也有所体现。结果说明，重建的三维模型能够准确地反映出人体心腔解剖学结构特征，为心脏电生理方面的仿真和标测研究提供基础的医学数据支持。

回肠代膀胱家兔模型制作中不同的麻醉药物

背景：家兔回肠代膀胱模型制作对麻醉要求较高，需要手术野清晰，术毕恢复迅速，麻醉药物及方法的选择不影响肠道平滑肌的蠕动。目的：比较水合氯醛和乌拉坦对家兔回肠代膀胱模型制作的麻醉效果。方法：18只家兔随机等分为乌拉坦组和水合氯醛组，分别用体积分数10%水合氯醛2 mL/kg和体积分数20%乌拉坦5 mL/kg实施耳缘静脉麻醉后，于原膀胱外1 cm处离断双输尿管，种植于回盲部10 cm处切取的15 cm肠段，建立回肠代膀胱模型。结果与结论：2组家兔麻醉后心率均较麻醉前出现明显下降(P≤0.05)，但2组间差异无显著性意义(P>0.05)。与水合氯醛组相比，乌拉坦组兔被麻醉的持续时间、苏醒时间过长，死亡率高。说明水合氯醛是适合家兔回肠代膀胱模型制作的安全长效的麻醉剂。

非酒精性脂肪性肝病模型大鼠饮食或二甲双胍干预后肝视黄醇结合蛋白4表达

背景：目前关于血清视黄醇结合蛋白4在非酒精性脂肪性肝病中的表达水平仍存在争议。目的：研究饮食或二甲双胍干预对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝脏视黄醇结合蛋白4表达的影响。方法：将50只SD大鼠随机分为6组，8周对照组，正常饮食8周后处死；8周高脂组，高脂饮食8周制作非酒精性脂肪性肝病模型，随后处死；16周对照组，正常饮食16周后处死；16周高脂组，高脂饮食16周后处死；饮食干预组，8周高脂饮食后再正常饮食8周，随后处死；二甲双胍治疗组，8周高脂饮食后，继续8周高脂饮食，同时给予二甲双胍灌胃治疗，随后处死。采用ELISA法检测血清视黄醇结合蛋白4水平及生化指标，免疫组织化学法、Western blotting法、RT-PCR法检测肝脏组织视黄醇结合蛋白4表达。结果与结论：高脂饮食成功建立非酒精性脂肪性肝病大鼠模型，随造模时间延长，大鼠肝脏由单纯性脂肪肝逐渐进展成为脂肪性肝炎。饮食干预可改善高脂饮食引发的肝组织视黄醇结合蛋白4表达下降、肝功能异常、脂代谢紊乱和胰岛素抵抗，二甲双胍治疗仅改善了高脂饮食引发的肝脂肪变。结果表明肝组织视黄醇结合蛋白4表达的改变可能在非酒精性脂肪性肝病发病中起一定作用，饮食干预应作为防治非酒精性脂肪性肝病的基本措施，二甲双胍可以改善非酒精性脂肪性肝病的肝脂肪变。

复发性口腔溃疡家兔模型补充超氧化物岐化酶的作用

背景：复发性阿弗他溃疡的具体发病机制目前医学界尚无定论，其中体内氧自由基的增多是引起复发性口腔溃疡反复发作的原因之一。目的：观察超氧化物歧化酶对复发性阿弗他溃疡治疗效果的影响。方法：在24只复发性阿弗他溃疡家兔模型建立后，按随机数字表法分为3组。模型对照组作为对比不做处理；阴性对照组家兔每天局部碘甘油擦拭；超氧化物歧化酶组家兔每天进行超氧化物歧化酶生物胶囊溶液灌胃，溃疡局部用碘甘油进行擦拭。1周后切取口腔溃疡病变组织进行对比研究。各组家兔造模后，每隔3 d上午同一时间兔耳静脉采血，流式细胞仪分析T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+以及CD3+/CD8+变化。结果与结论：当溃疡病变形成后，模型对照组和阴性对照组家兔外周血中细胞 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+的比值经过统计均明显低于正常，而CD8+细胞数远远大于正常数值。超氧化物歧化酶组灌服超氧化物歧化酶生物胶囊后，CD3+、CD4+细胞数开始逐渐升高，而CD8+细胞数则相反呈下降趋势。提示应用氧自由基的天然清除剂超氧化物歧化酶就能有效清除溃疡面中过量的氧自由基，从而达到临床上治疗复发性阿弗他溃疡的目的。

慢性胰腺炎模型大鼠转化生长因子β1/Smads通路被秋水仙碱的抑制

背景：胰腺星状细胞内转化生长因子β1/Smads信号通路活化可能是导致胰腺组织纤维化的主要分子学机制。如能阻断这一通路，就可能抑制慢性胰腺炎组织的纤维化进程。目的：探讨秋水仙碱对慢性胰腺炎模型大鼠转化生长因子β1/Smads通路的抑制作用。方法：健康雄性 SD 大鼠随机分为慢性胰腺炎组及秋水仙碱干预组，慢性胰腺炎造模成功后，秋水仙碱干预组大鼠每日腹腔内注射秋水仙碱150μg/ kg，慢性胰腺炎组则每日腹腔内注射等体积的生理盐水。3个月后取胰腺组织，苏木精-伊红染色观察胰腺组织的病理学改变，免疫组化观察胰腺组织转化生长因子β1表达， Western blot法测定胰腺星形细胞内P-Smad2、P-Smad3、α-SMA蛋白表达水平。结果与结论：苏木精-伊红染色结果显示：与秋水仙碱干预组相比，慢性胰腺炎组胰腺组织内腺体组织减少，而纤维结缔组织、炎细胞明显增多并取代胰腺腺体组织。免疫组化结果显示：秋水仙碱干预组胰腺组织内转化生长因子β1阳性表达级别和阳性细胞指数显著低于慢性胰腺炎组(P <0.05)。Western blot结果显示：慢性胰腺炎组胰腺星形细胞内 P-Smad2/β-actin、P-Smad3/β-actin、α-SMA/β-actin 表达明显低于秋水仙碱干预组(P <0.05)。结果提示秋水仙碱可以抑制慢性胰腺炎大鼠转化生长因子β1/Smads信号通路及胰腺组织纤维化。因此，秋水仙碱可作为治疗慢性胰腺炎纤维化的一种新的候选方案。

恒河猴肝移植模型急性排斥反应时T细胞亚群的变化

背景：寻找肝移植急性排斥反应的早期诊断指标，可快速而有效的评估移植后排斥反应的风险，而T淋巴细胞在急性排斥反应中发挥主要作用。

羟苯磺酸钙治疗慢性移植肾功能不全的临床观察

背景：羟苯磺酸钙作为一种血管保护剂被广泛用于治疗慢性静脉功能不全和糖尿病肾病，尤其大量临床研究表明它可以减轻糖尿病肾病的肾损害，但很少有关于羟苯磺酸钙用于治疗肾移植后慢性移植肾功能不全的文献报道。

科研型肝癌肝移植临床标本库的建立及意义

背景：建立规范化的肝癌肝移植临床样本库可为开展相关领域研究提供资源平台，是进行科学研究的先决条件。目的：初步建立科研型肝癌肝移植临床标本库，研究并制定规范化的肝癌肝移植标本采集、处理、保存操作流程，建立完善、全面的肝癌肝癌肝移植标本信息化管理系统。方法：鉴国内外标本库建立的标准化程序，制定肝癌肝移植标本库操作流程及质量控制体系，规范化收集、处理及保存肝癌肝移植受者的肿瘤组织及血液标本，同时收集良性肝病肝移植受者及健康供者的肝组织及血液标本作为研究对照。对所收集的标本及相关临床资料信息进行系统化管理。结果与结论：自2009年8月肝癌肝移植标本库收集有完整临床资料的501例肝移植供、受者组织及血液标本，其中肝癌标本203例，良性肝病标本214例，健康供肝标本84例。肝癌标本包括肿瘤组织、癌旁组织及远端非癌组织标本，共计1773份；随机抽取45例标本进行质量监测，显示所收集的标本质量较好，开发了规范化的标本信息资料计算机管理系统。实验初步建立了具有一定规模的科研型肝癌肝移植标本库，有利于提高标本的质量，可操作性较好。

Abstract BACKGROUND: Looking for the early diagnosis of acute rejection indicators after liver transplantation can assess the risk after liver transplantation quickly and effectively, and T lymphocytes play the significant role in acute rejection. OBJECTIVE:To observe the relationship between acute rejection and variation of expression of T cel subset in blood after liver transplantation in rhesus monkey. METHODS: The sixteen liver transplant models in rhesus monkey which were constructed successfuly by the method of “double-cuff and one support tube” were divided into two groups randomly: experiment group (no treated by immunosuppressant in perioperative period) and control group (treated by immunosuppressant in perioperative period). Then the blood specimen and liver tissue respectively were colected at 6, 12, 24 and 72 hours after operation. The levels of alanine transferase, aspartate aminotransferase, and total bilirubin were detected with the fuly automatic biochemical analyser. The levels of CD4+/CD8+were tested by flow cytometry. The liver tissue in rhesus monkey after liver transplantation was detected by hematoxylin-eosin staining. The degree of acute rejection was evaluated by Banff Score System. RESULTS AND CONCLUSION: Acute rejection appeared in the experiment group at 12, 24, and 72 hours after liver transplantation. Levels of alanine transferase, aspartate aminotransferase, and total bilirubin were significantly higher in the experimental group than in the control group at 24 and 72 hours after transplantation (P < 0.05). The expression of CD4+/CD8+of the experiment group and control group began to rise at 6 hours after surgery, but the experiment group increased the most obvious. CD4+/CD8+ expression was significantly greater in the experimental group than in the control group at 24 and 72 hours after transplantation (P < 0.05). Morphological pathology was severer, and Banff score was higher in the experiment group than in the control group at 72 hours (P < 0.05). These data suggested that the variation of expression of CD4+/CD8+was earlier than the change of liver tissue pathology and the change of liver function in the early acute rejection after liver transplantation. The rise of level of CD4+/CD8+ after liver transplantation indicated the increase of celular immunity in body, which had an important role in the early diagnosis of acute rejection after liver transplantation.

组蛋白去乙酰化酶抑制剂对急性移植物抗宿主病模型小鼠 CD4+CD25+Foxp3+细胞的影响

背景：防治移植物抗宿主病，提高移植存活率是异基因造血干细胞移植急待解决的核心问题；因此寻找新的免疫抑制剂成为必要。近期的研究发现组蛋白去乙酰化酶抑制剂具有免疫调节作用。目的：通过建立小鼠急性移植物抗宿主病模型，观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对小鼠急性移植物抗宿主病的影响及免疫调节作用。方法：选择C57BL/6(H-2b)→BALB/C(H-2d)作为完全异基因移植供、受体建立移植物抗宿主病小鼠模型，移植后3，5，7，9，11 d，治疗组小鼠腹腔注射组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA 35 mg/(kg?次)(0.2 mL)，对照组小鼠腹腔注射灭菌水0.2 mL/次，通过流式细胞术、实时定量PCR、病理学等方法，比较两组小鼠的急性移植物抗宿主病临床表现、生存时间及CD4+CD25+Foxp3+细胞百分率。结果与结论：治疗组较对照组小鼠出现急性移植物抗宿主病时间推迟，程度减轻、生存时间延长。治疗组生存率显著高于对照组(P<0.05)。移植后治疗组小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+细胞阳性百分率随时间延长呈逐渐递增趋势；反之对照组小鼠外周血CD4+CD25+Foxp3+细胞阳性百分率随时间延长呈逐渐递减趋势(P <0.05)。提示SAHA可延迟急性移植物抗宿主病的发生，减轻急性移植物抗宿主病的严重程度，以上作用可能是通过提升CD4+CD25+Foxp3+细胞的比例来实现的。

构建大鼠减体积肝移植模型的肝脏信号转导差异蛋白表达

背景：蛋白质组学是目前医学界比较热门的科学研究技术，已经在肝移植的相关研究中得到初步应用，但未曾报道有在大鼠减体积肝移植相关研究中的应用。目的：利用蛋白质组学相关技术探讨大鼠减体积肝移植后与肝脏信号转导蛋白相关的差异蛋白。方法：在成功建立大鼠减体积肝移植模型的基础上，分别于移植后1，3，7 d获取移植肝脏组织，然后与预先获取冻存的供体和受体肝脏组织采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术，建立双向凝胶电泳图谱，再利用串联质谱(MS-MS)分析及数据库对差异表达的蛋白质点进行鉴定。结果与结论：实验中以变化倍数大于10倍为标准进行差异蛋白点的选择，总共发现了72个差异点，终鉴定到了功能比较明确的32个蛋白，其中有4个蛋白参与了信号转导的过程，其分布于肝移植后的第3天和第7天，占6%。结果显示在大鼠减体积肝移植模型的成功和稳定建立的基础上，利用蛋白组学的相关技术，研究了大鼠减体积肝移植后参与肝脏信号转导的差异蛋白，为下一步深入研究调控这些蛋白的 MicroRNA 提供了有力的前期基础研究数据。

Abstract BACKGROUND: Calcium dobesilate (calcium dihydroxy-2, 5-benzenesulfonate) has been widely used to treat chronic venous insufficiency and diabetic retinopathy, especialy many clinical studies showed that calcium dobesilate as vasoprotective compound ameliorates renal lesions in diabetic nephropathy. However, there are few literatures reported calcium dobesilate in the treatment of chronic renal alograft dysfunction after renal transplantation. OBJECTIVE:To observe the efficacy and safety of calcium dobesilate on chronic renal dysfunction after renal transplantation. METHODS:A total of 152 patients with chronic renal alograft dysfunction after renal transplantation were enroled from the Military Institute of Organ Transplantation, Changzheng Hospital, Second Military Medical University of Chinese PLA. They were randomly divided into the treatment group (n=78) and the control group (n=74). Patients in the treatment group received 500 mg of calcium dobesilate three times daily for eight weeks. Al patients were treated with calcineurin inhibitor-based triple immunosuppressive protocols and comprehensive therapies. RESULTS AND CONCLUSION: For patients receiving calcium dobesilate, serum creatinine, blood urea nitrogen and uric acid decreased significantly at two weeks after treatment and maintained a stable level (P < 0.05). However, serum creatinine and blood urea nitrogen returned to the original level soon after drug withdrawal. No significant difference was observed in blood cel count, liver function, blood lipids, electrolytes, blood pressure and 24-hour urine output between the two groups before and after therapy (P > 0.05). Administration of calcium dobesilate did not change the general condition of patients with renal insufficiency, nor did it affect blood concentrations of the immunosuppressive agents. Calcium dobesilate may help to delay the progress of graft injury in patients with chronic renal graft dysfunction by conjugating with creatinine, ameliorating the impaired microcirculation and its antioxidant property. The decline in serum creatinine aleviates patients’ anxiety and concern arising from the elevation of creatinine. However, the negative interference with serum creatinine caused by calcium dobesilate should be cautious in order to avoid misjudgment of patients’ condition.

力竭运动后24 h模型大鼠肾脏结构和炎症因子对黑加仑提取物干预的反应

背景：急性运动后肾脏组织易出现运动性肾缺血再灌注现象，自由基生成增加，发生炎症反应，导致肾功能异常。目的：观察黑加仑提取物对力竭运动后24 h大鼠肾脏结构、肿瘤坏死因子α和核因子κB表达的影响。方法：30只雄性Wistar健康大鼠随机分为3组，每组10只，黑加仑提取物组给予0.44 g/kg黑加仑提取物灌胃，安静对照组、力竭运动后24 h组灌服同等体积的蒸馏水，连续灌胃6周。力竭运动后24 h组和黑加仑提取物组于末次灌胃后进行无负重游泳运动直至力竭疲劳，于24 h后取材，电镜和光镜观察肾脏组织形态和超微结构变化，免疫组化法检测肿瘤坏死因子α蛋白和核因子κB蛋白表达，RT-PCR检测肿瘤坏死因子α mRNA和核因子κB mRNA的表达。结果与结论：与安静对照组比较，力竭运动后24 h组中肾脏核因子κB蛋白和肿瘤坏死因子α蛋白高表达，核因子κB mRNA和肿瘤坏死因子α mRNA表达水平极显著增加(P <0.01)；与力竭运动后24 h组比较，黑加仑提取物组中肾脏核因子κB蛋白和肿瘤坏死因子α蛋白低表达，核因子κB mRNA表达水平显著性降低(P <0.05)；肿瘤坏死因子α mRNA表达水平极显著性下降(P<0.01)。力竭运动后24 h组大鼠肾脏发生明显的形态变化和超微结构损伤，黑加仑提取物组大鼠肾脏结构趋于正常。结果表明黑加仑提取物可修复力竭运动后24 h肾脏组织结构，减少炎症因子的表达，防止肾脏发生炎症性损伤。

构建人基质金属蛋白酶1基因重组腺病毒载体及体外降解Ⅲ型胶原的检测

背景：基质金属蛋白酶1能够降解以Ⅰ型胶原为主的细胞外基质，有望逆转纤维化组织。目的：利用Gateway技术构建含人基质金属蛋白酶1基因的重组腺病毒载体，并观察其在体外降解Ⅲ型胶原蛋白的能力。方法：从携带人基质金属蛋白酶1基因片段的pcDNA3.1质粒中PCR扩增出人基质金属蛋白酶1基因片段，双酶切连接入门载体pENTERTM 1A形成入门克隆，利用LR反应与目的载体pJTITM R4 Dest CMV-N-EmGFP pA Vector同源重组构建表达克隆pAd- hMMP-1-eGFP。经PacⅠ酶切线性化转入HEK293A细胞包装获得重组腺病毒 Ad-hMMP-1-eGFP，RT-PCR 及 Western-Blot 法分别检测目的基因与蛋白表达。细胞分为3组：①空白对照组：HEK293A细胞。②AD-EGFP组：Ad-eGFP感染HEK293空白对照组。③AD-HMMP1-EGFP组：Ad-hMMP-1-eGFP感染HEK293空白对照组。分别加入相同含量Ⅲ型胶原蛋白，在24，48，72 h用ELISA试剂盒检测Ⅲ型胶原蛋白水平。结果与结论：经酶切及测序鉴定证实入门载体和目的载体中均含有人基质金属蛋白酶1目的基因。重组腺病毒Ad- hMMP-1-eGFP感染293A细胞后4 d观察到绿色荧光表达，10 d荧光强度达高，12d收集病毒液；测定病毒滴度为4.84×1010 PFU/mL，Western-Blot法检测目的蛋白高效表达。随时间延长，空白对照组和AD-EGFP组胶原蛋白含量无明显变化，AD-HMMP1-EGFP组24，48，72 h胶原蛋白降解率分别为24%，56%，81%，与空白对照组、AD-EGFP组相比AD-HMMP1-EGFP组降解胶原效果显著(P <0.01)。利用Gateway技术成功构建含人基质金属蛋白酶1基因的重组腺病毒载体，与传统构建方法相比具有高效性和特异性，分泌基质金属蛋白酶1检测其降解Ⅲ型胶原蛋白效果显著。