体外膜式氧合支持治疗患者血乳酸浓度的变体

背景:体外膜肺氧合的核心部分膜肺采用了肝素涂层氧合器,是在人工材料表面与肝素一端的黏多糖进行共价键结合,使人工材料部分模拟人体血管内皮功能,减少乳酸的产生,增加材料的生物相容性,避免血栓的形成及减轻术后炎症反应.目的:探讨应用了肝素涂层氧合器的体外膜肺氧合支持治疗后,患者血乳酸浓度变化及其与预后的关系.设计:按年龄及存活预后分组,自身对照临床实验.单位:中国医学科学院阜外心血管病医院体外循环科.对象:选择2004-12/2006-09在中国医学科学院阜外心血管病医院40例进行体外膜肺氧合支持治疗的患者,入组条件为脱离体外循环困难的心脏外科术后患者、扩张性心肌病发生心源性休克的患者、冠心病心源性休克的患者.按年龄和存活预后分为4组:成人存活组、成人死亡组、儿童存活组、儿童死亡组.方法:所有患者采用静脉-动脉体外膜肺氧合灌注系统支持治疗,体外膜肺氧合灌注系统由离心泵、变温水箱、肝素涂层氧合器(Jorstra Novalung,德国)及配套管道(Bioline Coating,德国,批号是:SFDA(I)20063450801)等组成.主要观察指标:抽取各组患者体外膜肺氧合建立时、运转6 h、运转中间时点、停机前6 h、停机时患者的血乳酸浓度.结果:①成人组26例,20例脱机,16例生存,10例死亡,脱机率76.9%,生存率61.5%;儿童组14例,7例脱机,5例生存,9例死亡,脱机率50.0%,生存率35.7%.②2个存活组的乳酸浓度均明显低于死亡组(P＜0.05或0.001).组内比较,中间时点、停止前6h、停止时的乳酸浓度低于体外膜肺氧合建立时(P＜0.01),血乳酸浓度逐渐降低.结论:①经体外膜肺氧合治疗的患者血乳酸浓度明显下降.②撤机时血乳酸仍高的患者预后不良.

胚胎干细胞在可降解聚合三维支架上的生长增殖与分化

目的:三维可降解生物材料是组织工程的重要载体,观察胚胎干细胞在聚合三维支架上的生长、增殖和分化状态,为胚胎干细胞分化形成任何组织修复替代治疗机体组织器官的损伤和功能衰竭提供实验学依据.方法:实验于2007-05109在解放军第三军医大学西南医院感染病研究所人工肝实验室完成.①材料:鼠胚胎干细胞CCE株为加拿大Stem Cell Technologies公司产品,由聚乳酸和聚乙醇酸聚合而成的非编织型三维支架为美国Synthecon公司产品,细胞外基质MatrigelTM由BD Biosciences公司提供.②实验方法:将鼠胚胎干细胞株接种于被覆明胶的培养瓶内,加入含0.1 mmol/L非必需氨基酸、2 mmol/L L-谷酰胺、0.1 mmol/L二羟基丙硫醇、15%胎牛血清、1000 U/mL白血病抑制因子的IMDM培养液.3 d后采用"悬滴法"使细胞在不含白血病抑制因子的上述IMDM培养液中形成胚胎体,6 d后胰酶消化得到胚胎干细胞,浓度调整为(3～4)×109L-1,与MatrigelTM按1:1混合并接种于剪成5 mm×4 mm×1 mm小片的三维支架内,加入含1%二甲基亚酚、10-7 mol/L地塞米松、5mg/L ITS、15%胎牛血清的IMDM培养液进行诱导分化.③实验评估:激光共聚焦显微镜观察胚胎干细胞在三维支架上的生长与增殖情况;应用荧光染色检测细胞活性;苏木精-伊红染色光镜下观察胚胎干细胞的组织分化情况.结果:①细胞牛长与增殖:接种培养1 d多数胚胎干细胞粘连在一起形成聚集体,状似球形,附着于三维支架的纤维上.7 d时聚集的胚胎干细胞开始沿纤维支架生长,互相粘连,呈片状和网状.细胞数随培养时间延长而不断扩大,至14d细胞交织在一起呈现多层面立体景象,布满整个三维支架.②活细胞观察:接种培养1,7,14 d的胚胎干细胞绝大多数发出绿色荧光,始终保持良好的细胞活性.⑨胚胎干细胞的组织分化:在非特异诱导培养液作用下,胚胎干细胞可向原始血细胞样细胞、血管样结构、软骨样结构和腺样结构分化.结论:胚胎干细胞能够附着于可降解聚合三维支架上生长增殖,并在保持细胞活性的情况下呈现向多细胞、多组织分化的良好态势.

牙科全瓷修复用长石瓷的生物相容性评价

背景:可加工的长石瓷材料结合计算机辅助设计,计算机辅助加工技术,促进了牙科快速修复技术的进步.修复用全瓷材料不仅应具有合适的机械性能,同时还需要具有良好的生物相容性.目的:通过急性溶血实验、体外细胞毒实验初步评价牙科全瓷修复用长石瓷的生物相容性.设计、时间及地点:单一样本开发性实验.于2004-08/2006-03在首都医科大学附属北京口腔医学院动物实验室完成.材料:长石瓷材料为自制:健康新西兰大白兔1只;小鼠结缔组织成纤维细胞(L929细胞)为ISO推荐.方法:①急性溶血实验:以长石瓷材料浸提液为实验组、生理盐水为阴性对照组,蒸馏水为阳性对照组3组,分别测定吸光度值,计算被测材料的溶血程度.②体外细胞毒实验:设立100%和50%长石瓷材料浸提液两个浓度的实验组,空白对照组划区分组,每组样本5孔.测定各孔光吸收值,计算细胞增殖率和细胞毒性级.主要观察指标:各组材料的溶血程度及细胞毒性分级.结果:①长石瓷材料的溶血程度值为1.52%,与阴性对照组比较无显著性差异(P＞0.05),可认为长石瓷无溶血现象,初步检验合格.②100%和50%长石瓷材料浸提液组A值均与空白对照组无显著性差异(P＞0.05),细胞毒性级别均为1级,,满足生物安全要求.结论:自制长石瓷材料的急性溶血实验、体外细胞毒实验结果均满足临床要求,反映其生物相容性初筛实验合格.

骨髓间充质干细胞在膀胱脱细胞基质上的生长及分化

背景:传统方法多采用平滑肌细胞和移行上皮细胞构建组织工程膀胱,并进行支架材料的双面种植,但由于平滑肌细胞取材培养困难,且体外传代有限,双面种植较为困难.目的:实验拟验证以骨髓间充质干细胞及膀胱脱细胞基质构建组织工程膀胱的可行性.设计:基础实验研究.单位:中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心.材料:实验于2006-03/2007-05在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心完成.实验室级别为卫生部部属医院开放实验室.1月龄SD大鼠,雌雄不限,体质量80～100g,由中山大学实验动物中心提供.新鲜猪膀胱取自南方医科大学动物实验中心.方法:采用全骨髓培养连续贴壁法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,并应用流式细胞仪检测其表面抗原.采用去污剂洗涤法制备猪膀胱脱细胞基质,并测定其纯度及特性.将第3代骨髓间充质干细胞接种到膀胱脱细胞基质上,以添加25 ng/L血管内皮生长因子(VEGF165)的培养液进行体外、体内复合培养,检测其相容性.体内实验以细胞单独培养为对照,体外实验以未植入细胞的材料为对照,并模拟合适的微环境诱导骨髓间充质干细胞生长分化,分别在4,8周后取出动物体内的复合材料行组织切片检查,并进行免疫组织化学角蛋白染色,检测上皮细胞再生情况.主要观察指标:骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质的生物相容性.结果:①采用全骨髓法成功培养出骨髓间充质干细胞,行流式细胞仪检测细胞表面抗原显示,传代第3代细胞CD29阳性细胞为99.43%.②制备的膀胱脱细胞基质具有良好的生物特性,镜下见均质状态的基质和细丝状的胶原纤维.体内外相容性实验表明骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的相容性,细胞生长状态良好.③4周后组织切片检查可见组织中较多炎症细胞浸润,胶原及弹性纤维排列紧密,免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、不连续的单层上皮生长,8周后可见组织中已无明显炎症细胞浸润反应,胶原及弹性纤维排列紧密,免疫组织化学角蛋白染色见有薄层、连续的多层上皮生长.结论:骨髓间充质干细胞与膀胱脱细胞基质具有良好的生物相容性,并且在体内与周围组织有良好的生物相容性,可以作为构建组织工程膀胱的材料.

25#超微孔膨体聚四氟乙烯人工二尖瓣体外脉动流性能评价

背景:超微孔膨体聚四氟乙烯是新型血液相容性高分子材料,具有不降解、抗钙化功能,用其制作的人工柔性瓣叶心脏瓣膜理论上可有良好的抗血栓、抗钙化性能和流体力学特性.目的:对自行研制的四瓣叶、无支架、带腱索人工二尖瓣--25#超微孔膨体聚四氟乙烯人工二尖瓣(UPMV)进行体外脉动流检测.设计、时间及地点:体外对比实验,于2003-05/2005-02在南方医科大学南方医院胸心血管外科实验室及湘雅二院胸心血管外科实验室进行.材料:25# UPMV的制作材料选用超微孔膨体聚四氟乙烯片状材料,由W.L.GORE & Associates,Inc.Medical Products Division 制造.CL-Ⅲ型人工机械心脏瓣膜为兰州飞供仪器总厂医疗器械制造厂制造.方法:25# UPMV组为6例自行缝制成的UPMV,安装直径为25 mm;25#人工机械瓣组采用6例CL-Ⅲ型人工机械心脏瓣膜,安装直径为25mm.主要观察指标:使用TH-1200型人工心脏瓣膜体外脉动流试验台对两组瓣膜进行检测,观察流量为2,3,4,5,6 L/min时的甲均跨瓣压差、开口面积和返流量.结果:①平均跨瓣压差:25#UPMV组在不同流量时均小于10 mm Hg,不同流量下25# UPMV组平均跨瓣压差均低于25#人工机械瓣组(P=0.000).②有效开口面积:25# UPMV组在不同流量时均高于1.5 cm2,流量为3,5,6 L/min时,25# UPMV组有效开口面积大于25# 人工机械瓣组(P＜0.01).③返流百分比:25# UPMV组在不同流量时均小于10%,流量为2,3L/min时,25# UPMV组返流百分比低于25#人工机械瓣组(P＜0.01).结论:25#UPMV在体外脉动流下的平均跨瓣压差、有效开口面积和返流百分比均符合国家标准,总体表现优于25#CL-Ⅲ型人工机械心脏瓣膜.

3T3-L1前脂肪细胞与蚕丝支架的体外共培养

蚕丝具各较好的力学性能,生物相容性优于传统的人工合成的可降解高分子材料.实验拟观察蚕丝对3T3-L1前脂肪细胞吸附作用及对细胞形态和功能的影响.将原料蚕丝与经胰蛋白酶消化后的原料蚕丝制成蚕丝复合物三维支架:制备3T3-L1前脂肪细胞悬液,调整细胞浓度为6×1010 L1;将3T3-L1前脂肪细胞悬液接种在支架上,培养1～4周,倒置显微镜观察可见3T3-L1前脂肪细胞伸出细长的突起沿着蚕丝不断向前迁移延伸,细胞首尾相互融合,渐渐连成一片分布于蚕丝网眼内;扫描电镜观察可见细胞与支架紧密贴附,适度伸展,并有基质分泌.结果表明蚕丝复合物三维支架对3T3-L1前脂肪细胞具有良好的吸附作用,并能维持3T3-L1前脂肪细胞正常形态和功能.

玻璃纤维桩与Ni-Cr合金桩核在前牙桩拆除后再修复中的比较

对比观察玻璃纤维桩与Ni-Cr合金桩核在前牙桩拆除后再修复中的应用效果.选取89例共103颗拆除桩后需要再修复的前牙,分别用玻璃纤维桩(54颗)和Ni-Cr合金桩(49颗)作桩核修复,患者两年后复诊,观察修复效果.其中玻璃纤维桩组有3例出现中度牙龈炎性反应,2例桩核折断,1例桩脱落;Ni-Cr合金桩核组有8例和6例分别出现牙龈中、重度反应,6例出现边缘色泽改变,7例出现根折,5例出现桩核脱落.结果表明玻璃纤维桩比铸造金属桩更适合应用于前牙的再次修复,但不能完全代替Ni-Cr合金桩.

两种镍铬烤瓷合金的致突变性观察

实验对自制镍铬烤瓷合金和含铍镍铬合金的致突变性进行检测和比较.选取健康小白鼠64只,随机分为8组,即阴性对照组(生理盐水),阳性对照组(环磷酰胺,40mg/kg),自制镍铬烤瓷合金高剂量(0.769 g/L)、中剂量(0.390g/L)、低剂量组(0.077 g/L)组,含铍镍铬合金高、中、低剂量组(剂量同镍铬烤瓷合金组),每组8只.采用腹腔注射给药(25 μL/g).24 h后以同样剂量第2次注射,给药后6 h麻醉下处死采集骨髓.在油镜下用双盲法计数1 000个嗜多染红细胞的微核细胞数.结果两种样品之间及与阴性对照组相比骨髓细胞的微核率差异均无显著性(P＞0.05);样品组与阳性对照组数据相比差异均有显著性(P＜0.000 1);表明两种镍铬烤瓷合金均不具有明显致突变作用,可作为金属烤瓷冠的基底材料.

壳聚糖/纳米多层结构羟基磷灰石/明胶复合膜的性能

背景:壳聚糖和明胶具有良好生物相容性和生物可降解特性.壳聚糖/羟基磷灰石和明胶/羟基磷灰石复合材料作为骨组织支架的应用研究也越来越多得到人们的关注.目的:制备一种生物相容性好的壳聚糖/纳米多层结构羟基磷灰石/明胶复合膜,探讨其是否可作为潜在的骨修复和再生的组织支架材料.设计:对比观察.单位:江汉大学化学与环境工程学院.材料:实验于2007-02/08在江汉大学化学与环境工程学院精细化工实验室完成.壳聚糖(浙江玉环海洋生物化学有限公司,重均相对分子质量为1.344×105,脱乙酰度为93%),明胶(上海医药公司).方法:壳聚糖/氯化钙溶液在玻璃板上通过流延法形成壳聚糖/氯化钙复合膜.壳聚糖/氯化钙复合膜分别浸泡在磷酸二氢钾溶液,0.1 mol/L氢氧化钠溶液和质量分数为0.03的明胶溶液中,所得的复合膜洗涤并干燥得到壳聚糖/羟基磷灰石/明胶复合膜.重复上述过程,得到具有多层纳米羟基磷灰石的壳聚糖/羟基磷灰石/明胶复合膜.扫描电镜观察复合膜的断裂面及膜内羟基磷灰石的形貌.用GMT6503型微机控制电子万能试验机测定壳聚糖膜和复合膜的拉伸强度和断裂伸长率.用WCT-2C微机差热天平测定复合膜的热稳定性.主要观察指标:扫描电镜下复合膜的断裂面及膜内羟基磷灰石的形貌.测定复合膜的力学性能及热稳定性.结果:①扫描电镜下复合膜内羟基磷灰石晶体为厚400 nm的多层结构.②随着沉积次数逐渐增加,复合膜的拉伸强度和断裂伸长率分别为3.83～10.25 MPa,3.97%～10.14%.③复合膜的热分解温度为310℃,高于壳聚糖/明胶复合膜的热分解温度(305℃).结论:通过在壳聚糖/氯化钙溶液、磷酸二氢钾溶液、氢氧化钠溶液和明胶溶液中交替沉积方法制备的壳聚糖/羟基磷灰石/明胶复合膜具有良好的生物相容性和较大的界面积,可作为一种潜在的组织支架材料.

金属框架打包植皮法在面部植皮中的应用

背景:颜面部打包植皮是传统的皮片固定方法,但在皮片的固定、成活质量、术后皮片挛缩及外观上存在不足,应不断完善.目的:试验拟观察应用改进的金属框架打包植皮法对提高颜面植皮成活质量的影响.设计、时间及地点:观察性试验,于2003-01/2007-12在北京积水潭医院烧伤科完成.对象及材料:选择本科收治的颜面部烧伤和烧伤后瘢痕畸形的患者23例,男16例,女7例,平均年龄(37±18)岁.手术植皮部位32处,面颊部8处,跟睑部20处、口周部4处.手术中应用的金属框架材料为医用不锈钢材质的1.0～1.5号克氏针,消毒后术中根据植皮创面形状用钳子弯制而成;术中应用的橡皮筋和回形针为普通文具用品,经环氧乙烷消毒后应用.方法:所有患者均应用金属框架打包植皮法于32处面部进行植皮,大植皮面积为18 cm×10 cm.常规植皮缝合后周边应用1.0～1.5号克氏针按创面形状制成环形金属框架,随后打包固定移植皮片,三四周拆除金属框架.主要观察指标:于术后拆除打包包扎时,观察记录皮片成活情况,包括皮片成活率、植皮边缘是否有边缘突起中央凹陷的"火山口现象";术后三四周拆除金属框架时,观察皮片是否有小于框架的早期挛缩现象,并照相记录.对有可能进行长期随访的病例观察皮片长期的挛缩情况.结果:23例患者32处创面,除1处因基底扩创不彻底部分皮片坏死外,其余31处创面植皮均成活良好,皮片平整,未出现边缘突起中央凹陷的"火山口现象",至术后三四周拆除金属框架时,移植皮片面积与手术时维持一致,未出现早期挛缩.随访1年以上的病例皮片挛缩轻,外观满意.结论:改进的金属框架打包植皮法可提高颜面植皮的成活质量,减轻皮片挛缩.

二乙烯基砜交联透明质酸钠凝胶的制备及其生物相容性

背景:透明质酸在体内易降解,通过对天然透明质酸进行结构改造和修饰,获得具有更优异的物理化学特性,同时保留透明质酸原有良好生物相容性的透明质酸衍生物.目的:选用二乙烯基砜为交联剂制备交联透明质酸钠凝胶,分析物料比、pH值及温度对交联密度的影响,并观察其在小鼠体内的生物相容性.设计、时间及地点:于2007-03/12在北京泰克美科技有限公司生物医用材料与药物分析实验室完成皮下移植对比观察实验.材料:选择健康KM小鼠40只,制作动物模型.方法:①碱性条件下制各二乙烯基砜交联透明质酸钠凝胶,利用Flory-Rehner公式计算交联点间的平均分子质量Mc值衡量交联密度.分析物料比、pH值、温度对Mc值的影响.②KM小鼠背部中线右侧皮下注射0.5 mL交联透明质酸钠样品,左侧皮下注射0.5 mL对照品,形成圆形皮丘.主要观察指标:注射后5～60 d观察二乙烯基砜交联透明质酸钠凝胶的生物相容性和体内降解率.结果:制备体内注射填充用二乙烯基砜交联透明质酸钠凝胶的优条件为透明质酸和二乙烯基砜物料比为40:1,NaOH为0.200mol/L,温度40℃.KM小鼠皮下注射60d体内降解率为41%,未发现局部刺激反应.结论:改变物料比、pH值及温度条件可以制备不同交联密度的二乙烯基砜交联透明质酸钠凝胶,体内存留实验显示二乙烯基砜交联透明质酸钠凝胶具有良好的生物相容性,具有成为组织充填剂的特性.

悬吊复合式防敏透气石膏夹板材料临床应用与3种夹板的比较

背景:传统的外固定材料石青绷带、小夹板及OCL夹板材料在临床应用中存在着组织相容性较差的缺点.目的:观察新型医用悬吊复合式防敏透气石膏夹板临床应用中在皮肤过敏、压疮、肢体骨筋膜室综合征等组织相容性方面的特点,并与普通石膏、小夹板及OCL夹板材料相比较.设计、时间及地点:病例回顾性分析,于2006-01/2008-01在深圳市宝安区石岩医院骨外科完成.参试者:应用石膏夹板治疗片获得随访的四肢骨折患者225例,按使用外固定材料的不同分为4组,普通小夹板组42例,普通石青绷带组83例,悬吊复合式防敏透气石膏组78例,OCL石青夹板组22例.干预:悬吊复合式防敏透气石膏组采用自行设计、由辽宁省大连市安力特医疗设备有限公司生产的悬吊复合式防敏透气石膏夹板进行外固定:OCL石膏夹板组采用美国产OCL石膏夹板进行外固定:其他2组采用普通小夹板及普通石膏绷带进行固定.主要观察指标:肢体骨筋膜室综合征发生率、皮肤过敏、肢体压疮等组织相容性指标.结果:225例肢体固定时间4～12周,平均6.2周.悬吊复合式防敏透气石膏组患者肢体骨筋膜室综合征、皮肤过敏及肢体压疮发生率低于其他3组(P＜0.05).结论:悬吊复合式防敏透气石膏夹板的组织相容性好,安全可靠,适用于骨折外固定.

聚乳酸膜等离子接枝聚合聚乙烯基吡咯烷酮及表面性能研究

背景:由于聚乳酸表面亲水性差、缺乏天然分子识别位点等缺点而限制了其应用.通过复合、化学接枝等方法试图引进亲水性基团,但过程比较复杂,并应用大量有机试剂,影响材料的生物相容性.目的:利用低温等离子技术对聚乳酸进行表面改性,改善其亲水性.设计:对比观察.单位:暨南大学科学与工程系.材料:实验于2004-10/2005-10在广州人工器官和材料工程研究中心实验室完成.实验用主要材料:聚乳酸(Mr 29 000,山东医疗器械研究所),乙烯基吡咯烷酮(美国Acros公司,使用前经重蒸纯化).方法:通过改变不同的工作条件(功率=150 W,时间=3,2,1 min;功率=30 W,t=10,8,5,3,1 min)选择优化条件,然后通过气相法和常压液相法进行PLA-乙烯基吡咯烷酮接枝反应.主要观察指标:通过扫描电镜和原子力显微镜观察材料的表面形态;水接触角测量仪测定材料等离子处理和等离子接枝前后亲水性的变化;傅里叶变换红外光谱仪测定材料的结构变化;通过材料改性前后质量变化分析材料的接枝情况.结果:①扫描电镜显示等离子处理和接技后的材料表面呈现大小不一的气孔和沟痕.②接枝后的水接触角由原来的78°下降到50°.③傅里叶变换红外光谱图表征1750cm-1吸收峰的低波数侧1 637.19 cm-1出现新的吸收峰,该峰对应于聚乙烯基吡咯烷酮链段上酰胺基团中的羰基伸缩振动吸收.④聚乳酸膜材料经低温等离子处理后,材料的质量变化百分数为-0.6.结论:等离子处理和接枝后材料的亲水性有明显变化,材料表面呈现大小不一的气孔和沟痕.此表面有利于细胞的黏附.

纳米羟基磷灰石胶体的制备及工艺特征

背景:各种形式的羟基磷灰石如粉末、薄膜和复合物等在医学应用方面得到广泛的关注,但羟基磷灰石制备过程中粒子易团聚的问题还没有彻底解决.目的:实验拟制备透明的、稳定存在的纳米羟基磷灰石水溶胶,并探索羟基磷灰石胶体的制备工艺条件.设计、时间及地点:分组对比观察实验,于2007-03/06在四川大学高分子科学与工程学院生物材料实验室及迪康中科生物医学材料有限公司完成.材料:磷酸铵[(NH4)3PO4·3H2O],分析纯,广东汕头市西陇化工厂产品;硝酸钙[Ca(NO3)2·4H2O],分析纯,天津市东升化学试剂厂产品:柠檬酸三钠(C6H5O7Na3·2H2O),分析纯,成都科龙化工试剂厂.方法:在传统的湿化学方法即用硝酸钙、磷酸铵和氨水合成羟基磷灰石的基础上,引入柠檬酸钠作为分散剂,制备纳米羟基磷灰石水溶胶.主要观察指标:磷酸铵滴加时间、磷酸铵滴加温度和柠檬酸钠用量对羟基磷灰石粒径的影响.结果:①合成产物的谱图中所有的衍射峰与羟基磷灰石标准衍射图的峰位基本相同,没有加分散剂的对照样峰形更加完整,而采用柠檬酸钠作分散剂得到的羟基磷灰石的衍射峰相对较弱,结晶不完全.②在保持其他合成条件不变的情况下,随着磷酸铵溶液滴加温度的增加,所得羟基磷灰石胶体的小粒径逐渐增大.在其他实验条件不变的情况下,当分散剂浓度低的时候,得到的羟基磷灰石粒径较大;当分散剂浓度过高的时候,得到的羟基磷灰石粒径也较大.结论:用柠檬酸钠制备羟基磷灰石胶体的适宜条件:磷酸铵滴加速度7.8 mL/min,滴加温度15℃,柠檬酸钠浓度0.227 mol/L,氨水浓度0.066 mol/L.

银离子敷料联合水凝胶局部治疗犬咬伤Ⅲ级创面:随机分组对照

背景:银离子敷料联合水凝胶在其他创面治疗中目前已取得较多临床证据,但在犬咬伤创面的作用研究较少.目的:评价银离子敷料联合水凝胶治疗严重犬咬伤创面的效果.设计、时间及地点:随机对照实验,2005-01/2007-02兰州大学第一医院急诊科收治的犬咬伤患者40例.对象:犬咬伤Ⅲ级创面患者40例,按随机数字表法分为干预组(n=20)和对照组(n=20).银离了敷料(AQUACEL(R)Ag,ConvaTec,LOT:6A20132)及水凝胶(DuoDerm(R) Hydroactive(R) GEL,ConvaTec,LOT:6G09153)为中国施贵宝康复宝医疗有限公司产品.方法:治疗前3 d,两组均按照常规处理创面并进行免疫治疗和抗生素治疗.治疗第4天,干预组序贯应用银离子敷料(＞10 d)、水凝胶治疗,对照组采用生理盐水纱条治疗.动态观察创面愈合情况.主要观察指标:于治疗后3,10,17 d记录创面愈合情况.结果:干预组犬咬伤创面的平均痊愈时问明显短于对照组.差异有显著性意义(P＜0.05).同时,治疗10,17d干预组创面范围差值高于对照组,差异有显著性意义(P＜0.05).干预组在使用银离子敷料阶段部分创面肉芽表面色泽略暗,使用水凝胶阶段部分伤口肉芽有过度生长,患者身体及创面均无不适表现,去除敷料无疼痛,肉芽无损伤;对照组去除敷料疼痛,且肉芽组织有不同程度损伤,未发现其他副作用.术后9个月随访患者9例,干预组5例,对照组4例,随访患者均未发生伤口复发与狂犬病症状,仅于患部皮肤出现局部色素沉着、皮肤瘢痕.结论:银离子敷料联合水凝胶治疗犬咬伤创面的临床效果较好,且无明显副作用.

Friedel与Eshelby弹性能模型对医用Ti合金形成焓理论计算结果的影响

①合金形成焓可以看成由三部分构成:第一部分是化学贡献,第二部分是弹性能的贡献,第三部分是合金结构对能量的贡献,因结构因素的效应很小,作为一级近似,在计算时将不予考虑.②选取43种商用医用Ti基合金及4个组分连续变化的合金系进行了计算,其中化学组分形成焓用改进型miedema模型计算;弹性形成焓用Fricdel模型和Eshelby模型进行计算,将计算结果与已有的实验数据进行比较.③结果表明对医用钛基合金的形成焓来说,弹性形成焓较化学形成焓的贡献要大,Friedel模型计算的弹性形成焓比Eshelby模型结果更接近实验数据.

山莨菪碱白蛋白微球与明胶海绵颗粒行子宫动脉栓塞的比较

背景:子宫动脉栓塞治疗子宫肌瘤常出现腹部痉挛性疼痛,影响了这一技术的开展.目前常用栓塞剂有聚乙烯醇、明胶海绵、真丝线段、钢圈等.目的:以明胶海绵为对照,观察山莨菪碱白蛋白微球子宫动脉栓塞的效果及对子宫收缩的影响.设计、时间及地点:自身交叉对照实验,于1999-1012001-05在解放军总医院第二附属医院实验室完成.材料:选用月龄12～18个月雌性杂种犬10只.采用加热固化法制备山莨菪碱微球.将实验犬按随机数字表法分为2组,先行明胶海绵栓塞组和先行山莨菪碱微球栓寒组,每组5只.方法:各实验犬栓塞前肌注宫缩素,宫腔造影观察并记录子宫痉挛频率,作为子宫收缩的参照标准.先行明胶海绵栓塞组先用明胶海绵颗粒为栓塞剂,行一侧髂内动脉造影及栓塞,15 d后采用山莨菪碱微球行选择性对侧髂内动脉栓塞.15 d后切除子宫观察大体和镜下病理改变.先行山莨菪碱微球栓塞组操作同上,只是一侧髂内动脉先用山莨菪碱微球栓塞,另一侧后用明胶海绵颗粒栓塞.主要观察指标:每次栓寒后1,3,24h造影观察动脉栓塞情况及宫缩情况;病理观察子宫组织坏死情况和范围.结果:10只实验犬肌注宫缩素后8只出现宫缩.先行明胶海绵栓塞组实验犬5只,明胶海绵颗粒子宫动脉栓塞后4只出现宫缩,动脉造影显示山莨菪碱白蛋白微球具有栓塞作用,栓塞后实验犬均未出现宫缩;先行山茛菪碱微球栓塞组实验犬5只,山茛菪碱白蛋白微球子宫动脉栓塞后实验犬均未出现宫缩,明胶海绵颗粒子宫动脉栓塞后5只出现宫缩.子宫病理观察大体标本均未见明显坏死,镜下见小动脉内有微球栓塞及血栓形成,子宫内膜坏死.结论:明胶海绵子宫动脉拴塞可引起较为强烈的子宫痉挛,山茛菪碱白蛋白微球可缓解动脉栓塞所致剧烈宫缩.

四环素-胶原生物衍生骨缓释材料修复骨缺损

背景:各种基质材料单独应用时成骨能力有限,为增强材料的成骨能力,应用复合材料修复骨缺损是组织工程的发展方向.目的:探讨四环素-胶原生物衍生骨材料植入体内后的成骨能力.设计、时间及地点:于2004-09/2005-01在四川大学华西医学中心组织工程实验室完成随机分组设计的对照观察实验.材料:选择新西兰大白兔24只,按随机数字表法分为2组,每组12只.制备兔桡骨中段1.5 cm骨缺损模型.新鲜人骨自行制备四环素-胶原衍生骨材料.方法:将两种材料分别植入兔桡骨缺损部位.实验组为四环素-胶原生物衍生骨,对照组为胶原生物衍生骨.术后6,12周动物麻醉后处死取材.主要观察指标:X射线观察和组织学检测缺损部位的成骨情况.结果:纳入动物24只,均进入结果分析.①X射线结果:术后6周,实验组整个缺损区均可见到骨痂生成,对照组仅在缺损两端有骨痂生成.术后12周,实验组缺损部位已完全被新生成骨组织所填充,与自体骨基本相近,已有骨髓腔出现,对照组骨缺损区可见明显的骨生成影像.②组织学结果:术后6周,实验组在材料内部孔隙区可见到新生类骨质形成,对照组缺损区无骨组织形成.术后12周,实验组可见大量的编织骨样组织,已形成板层骨样结构,骨髓腔已贯通,对照组缺损区可见有骨样组织形成.结论:胶原生物衍生骨与四环素-胶原生物衍生骨材料均可促进骨再生,四环素-胶原生物衍生骨材料对兔骨缺损修复效果优于胶原生物衍生骨材料.

纳米双相磷酸钙陶瓷组织工程支架复合大鼠自体骨髓基质干细胞修复极量颅骨缺损

背景:传统生物陶瓷材料作为组织工程支架材料的脆性大,不易加工成形且在体内降解困难,影响新骨的长入和后期的改建,故其应用受到一定限制.目的:观察纳米双相磷酸钙陶瓷(Biphasic calcium phosphate nanocomposite,NanoBCP)用于组织工程支架修复颅骨缺损的成骨性能.设计、时间及地点:随机分组、动物对照实验,于2004-09/2005-05在四川大学口腔生物医学工程教育部重点实验室完成.材料:选择2月龄雄性体健SD大鼠48只,体质量180～200 g,在颅骨上制成直径为8mm的颅骨全层缺损区为极量骨缺损模型,实验用孔径100～400 μ m,含孔率为60%～80%的NanoBCP陶瓷及SD大鼠自体骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)由四川大学口腔生物医学工程教育部重点实验室提供.方法:按随机数字表法将模型人鼠分为3组,NanoBCP/BMSCs组16只,BMSCs经含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的诱导液培养后与NanoBCP复合植入SD大鼠颅骨缺损区;单纯NanoBCP组16只,仅在相同部位单纯植入NanoBCP支架材料:空白对照组16只不植入任何材料.主要观察指标:植入后4,16,24周取材,通过X射线片分析、大体和组织学观察评价其成骨性能.结果:SD大鼠48只均进入结果分析.①植入后4,16周,NanoBCP/BMSCs组新生骨组织逐渐增多,Ⅰ型胶原免疫组织化学染色阳性.植入后24周,NanoBCP,BMSCs组SD大鼠颅骨缺损完全修复,单纯NanoBCP组部分修复,空白对照组未修复.②植入后4,24周,NanoBCP/BMscs组骨缺损区X射线阻射影像密度逐渐增加,新骨充填,接近于正常骨;单纯NanoBCP组骨缺损区亦见X射线阻射影像,与颅骨邻接区的环形透光影密度逐渐增加,骨缺损中央部密度不均匀.结论:NanoBCP与BMSCs复合物能够有效地修复颅骨缺损.

生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸仿生复合支架的成骨及矿化效应

背景:研制具有结构与功能化仿生作用的骨修复替代材料,应在模拟体内细胞生长环境中进行.目的:观察生物活性玻璃,胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸仿生复合支架材料植入体内后诱导成骨和促进矿化的能力.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-0612006-02在南方医科大学珠江医院血液科实验室完成.材料:生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸支架、生物活性玻璃,胶原蛋白支架和58S生物玻璃支架为自制.40只健康成年日本大耳白兔制造两侧桡骨10 mm骨缺损模型.干预:将40只模型兔随机分成4组,生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸组12只、生物活性玻璃,胶原蛋白组12只、58S生物玻璃组12只分别植入相应支架材料,空白对照组4只不植入任何物质.主要观察指标:检测植入材料2,4,8,12周后缺损部位X射线、硬组织切片、骨形成率和矿化沉积率.结果:40只模型兔80条桡骨全部进入结果分析.①术后所有动物伤口愈合良好,未发生骨折.②生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸,磷酸丝氨酸组术后4周硬组织切片可见大量玫瑰红色新骨和绿色骨小梁形成,术后12周支架已基本由新生骨组织替代,哈弗系统形成:术后8周X射线显示骨皮质连接完整,12周缺损完全修复,髓腔基本再通.③生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸组术后4周的矿化沉积率和新骨形成速率比58S生物玻璃组高出了2.85倍和3.16倍,且明显优于生物活性玻璃/胶原蛋白组(P＜0.001).结论:生物活性玻璃/胶原蛋白/透明质酸/磷酸丝氨酸仿生复合支架在诱导成骨和促进生物矿化方面性能优越,其矿化机制有待进一步观察探讨.

滨珊瑚及富血小板血浆复合材料修复兔下颌骨缺损

背景:近年来的一些研究表明自体来源的富血小板血浆可能对骨缺损修复具有促进作用.目的:观察复合富血小板血浆的滨珊瑚对兔下颌骨缺损的修复作用.设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,2005-07/2006-03在中山大学附属第三医院动物实验室完成.材料:采用海南产滨珊瑚,孔径为150～200 μm,孔隙率40%～50%,碾磨及筛选出直径200～400 μm大小颗粒.方法:选择新西兰兔24只,采用自身对照方法,在每只动物的两侧下颌骨体部分别作1处洞穿型骨缺损,大小15 mm×5 mm,随机选择一侧为实验侧,另一侧为对照侧.植入滨珊瑚/富血小板血浆的复合物作为实验组,植入滨珊瑚/贫血小板血浆的复合物作为对照组.主要观察指标:术后2,4,8,12周通过大体观察、X射线片、组织学染色观察兔两侧下颌骨愈合情况.结果:新两兰兔24只均进入结果分析.术后2,4,8周,加入富血小板血浆的材料区比较对照侧可以看到更多的间充质细胞和成骨细胞,并且有更多的新生骨形成.术后12周,两侧缺损区植骨床生长没有区别,骨质均成熟和致密.结论:富血小板血浆能起到很好的促进骨生长的效果,滨珊瑚与富血小板血浆的复合物能显著促进兔下颌骨缺损的修复.

亚甲蓝磁性明胶微球在外磁场作用下对家兔痛阈及体感诱发电位的影响

背景:靶向给药系统是一种安全高效的药物传递途径和技术,是一种新的制剂技术和工艺,这种制剂能将药品运送到靶器官或靶细胞,而正常部位几乎不受药物的影响.目的:实验拟观察亚甲蓝磁性明胶微球在外磁场作用下对家兔痛阈及体感诱发电位的影响,探讨其对脊髓背根神经结靶向神经阻滞的可行性.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-03/2005-04在解放军总医院实验动物中心完成.材料:雄性新西兰兔24只,体质量2.3～2.8 kg:空白明胶微球(自制);亚甲蓝磁性明胶微球(自制,载药量为9.8%).微球系院内药理学实验室高级技师协助制备.干预:24只家兔随机数字表法分为亚甲蓝磁性微球15 mg组:在外磁场作用下家兔蛛网膜下腔注射亚甲蓝磁性明胶微球15 mg:空白磁性微球15 mg组注射单纯磁性微球15 mg:假手术对照组:麻醉和手术步骤同其他组,每组8只.主要观察指标:连续观察注射药物后家兔下肢的电痛阈、运动功能及脊髓体感诱发电位的变化,后取脊髓腰骶端作病理切片观察.结果:24只新西兰兔均进入结果分析.①亚甲蓝磁性微球15 mg组家兔后肢电痛阈值在给药后第1～6天明显升高,与自身给药前及其他组相比,差异显著(P＜0.05).②亚甲蓝磁性微球15mg组家兔体感诱发电位N1波潜伏期第1～11天明显延长,与自身给药前及其他组相比,差异显著(P＜0.05):术后13 d恢复正常.③病理观察显示各组脊髓背角结构、形态正常,神经轴索排列正常,灰白质界限清楚,除假手术对照组外其他组背角均有少数未完全降解的微球,各组的脊髓前角可观察到形态正常的前角运动神经细胞及神经轴索,结构完整.结论:亚甲蓝磁性明胶微球在外磁场作用下可靶向阻滞脊髓背根神经结,提高家兔的痛阈并延长体感诱发电位,具有"感觉-运动"分离阻滞作用,是一种有效的长效靶向神经阻滞剂.

新型生物复合材料聚乙烯醇/纳米羟基磷灰石+聚酰胺66修复关节软骨及软骨下骨缺损

背景:聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol hydrogel,PVA)水凝胶目前普遍被认为是关节软骨良好的替代材料,纳米羟基磷灰石(nano-hydroapatite,n-HA)修复骨缺损已取得公认,聚酰胺66(PA66)是一种具有高强度、高韧性和良好稳定性的聚合物,在工程和医学领域己获得广泛应用.目的:实验仿照关节软骨理化特性,制备新型生物复合材料PVA/n-HA+PA66,观察新型生物复合材料PVA/n-HA+PA66修复兔关节软骨及软骨下骨缺损的效果.设计、时间及地点:随机分组设计的动物对照实验,于2006-07/2007-07在四川大学华西医院骨科组织工程实验室完成.材料:成年健康新西兰大白兔72只,在兔股骨关节面上打孔(5 mm×5 mm×5 mm)制备兔关节软骨及软骨下骨缺损模型.PVA/n-HA+PA66生物复合材料由四川大学纳米分析测试中心提供,规格:直径5 mm,高5 mm,圆柱体,上层PVA高度为1.5 mm,乳白色,光滑,质韧,下层n-HA+PA66表面粗糙,质硬,高度为3.5 mm.PVA为多孔网状结构,孔径为5-40 μm,孔隙率为75.3%,含水率为71.6%,n-HA+PA66为多孔网状结构,孔径100～400 μm,孔隙率61.7%.方法:72只模型兔按随机数字表法分为3组,PVA/n-HA+PA66植入组、单纯PVA植入组、空白对照组,每组24只.PVA/n-HA+PA66植入组在兔关节软骨及软骨下骨缺损处植入PVA/n-HA+PA66材料,单纯PVA植入组在缺损处植入PVA材料、空白对照组不做任何处理.主要观察指标:植入4,8,12,24周后观察兔行为形态、兔膝关节局部组织形态学变化,免疫组织化学染色检测Ⅱ型胶原,扫描电镜观察生物材料与周边软骨及软骨下骨连接界面的反应.结果:72只兔全部进入结果分析.①术后大体形态观察伤口无感染,关节活动度好.②植入后24周,PVA/n-HA+PA66植入组下层材料与周边组织融为一体,周边软骨未见明显退行性变;单纯PVA植入组PVA与部分周边软骨间隙加大,周边软骨部分退行性变;空白对照组缺损部位大部分已钙化.③植入后24周,PVA/n-HA+PA66植入组PVA周边软骨Ⅱ型胶原阳性染色,PVA边缘及表面Ⅱ型胶原阳性染色增多;单纯PVA植入组PVA与周边组织间隙中Ⅱ型胶原阳性染色有少量增加,PVA表面阳性染色减弱,周边软骨阳性染色减弱;空白对照组缺损处表面组织中Ⅱ型胶原染色减低,周边关节软骨染色减低.④植入后24周,扫描电镜见PVA/n-HA+PA66植入组下层材料网孔中充满大量类骨质成分,上层材料PVA与下层材料嵌合紧密;单纯PVA植入组材料周边骨质有部分退缩,间隙加大;空白对照组缺损处下部由骨质充填,上部为纤维瘢痕样组织,组织结构排列紊乱.结论:双相生物复合材料PVA/n-HA+PA66具有良好的组织相容性及良好的替代关节软骨及软骨下骨的功能.

ZSM-5分子筛填充壳聚糖膜的制备及性能

背景:有机高分子膜中添加无机物可以改善渗透汽化膜性能,但添加物对物料渗透膜的影响及其相关机理尚需进一步的研究.目的:采用液相共混的方法制备了ZSM-5分子筛填充壳聚糖膜.考察了填充膜中分子筛对渗透汽化膜分离性能的影响.设计:对比观察实验.单位:中国科学院大连化学物理研究所.材料:实验于2006-05在中国科学院大连化学物理研究所新型膜分离技术实验室完成.壳聚糖,脱乙酰度为75%～85%,购自美国Aldrich Chemical Company;碳酸二甲酯购自美国Fluka公司,纯度99%;ZSM-5分子筛由大连化学物理研究所提供;甲醇由沈阳市联邦试剂厂提供,纯度＞99.5%.方法:用液相共混的方法制备ZSM-5分子筛填充壳聚糖膜.主要观察指标:①填充膜在碳酸二甲酯/甲醇混合液中的溶胀和吸附行为.②填充膜分子筛含量及操作温度对渗透汽化膜分离性能的影响.结果:①扫描电镜表征表明分子筛在膜中分散均匀,膜表面没有明显缺陷.②膜优先吸附甲醇,其分离性能主要由溶解过程控制.③随着膜中分子筛含量的增加,膜的溶胀度增大,渗透通量大幅度提高.④渗透通量与操作温度符合Arrhenius关系式.结论:ZSM-5分子筛填充壳聚糖膜渗透汽化分离甲醇/碳酸二甲酯混合物,大大提高了壳聚糖膜的渗透通量,渗透汽化分离指数远远大于壳聚糖均质膜,具有良好的分离效果.

低温等离子体肝素化改性后小肠黏膜下层的血液相容性及其构建小口径血管的可行性

背景:栓塞是小口径血管植入后失败的主要原因,目前常常对血管支架材料进行抗凝改性,以期提高其血液相容性,从而提高血管的有效通畅性.目的:观察低温等离子体肝素化改性后的内植物修复材料小肠黏膜下层的血液相容性,并探讨其体内构建小口径血管的可行性.设计:单一样本实验.单位:上海交通大学附属第六人民医院骨科、上海市四肢显微外科研究所.材料:实验于2006-01/10在上海市四肢显微外科研究所实验室进行.小肠黏膜下层来自农场猪.方法:①改性:将猪小肠黏膜下层用氩等离子体处理器照射处理,氩气流量20mL/min,照射时间分别为0,2,4,6,8,10,12,14 s,接着浸入肝素钠溶液24 h.②体内抗凝血实验:将20条狗分为2组,分别植入经过改性或未改性的小肠黏膜下层缝合成的3 mm口径血管支架,与股动脉直接吻合,观察6周.主要观察指标:①血液相容性检测:通过扫描电镜观测表面形态,并通过液滴接触角、凝血时间及血小板黏附实验检测小肠黏膜下层改性前后的抗凝性.②体内抗凝血:通过彩色多普勒和组织学检测,评价血管支架直接在体内循环血流下的长期通畅性和形成血管的可行性.结果:①改性小肠黏膜下层膜表面呈现出均匀的微结构改变,随着等离子体照射时间增加,表面液滴接触角降低;改性后凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间和凝血酶时间延长:血小板黏附减少.②植入体内后未改性小肠黏膜下层血管支架3 d内栓塞,改性组在6周内仍保持通畅,管腔内表面有完整内皮细胞覆盖.结论:经低温等离子体肝素化改性后小肠黏膜下层的亲水性、抗凝性有明显提高.

壳聚糖纳米混悬剂的研制和表征

背景:实验于2006-07/2007-06在浙江省医学科学院生物工程研究所完成.壳聚糖(脱乙酰度为87.85%,黏度为195 mPa·s,水分7.13%,灰分0.82%,批号:050621160)由浙江金壳生物化学有限公司提供.运用化学酸解、60Co γ射线辐照、高压、超声波及稳定剂等综合理化手段制备壳聚糖纳米粒子.透射电镜观察制备的壳聚糖纳米粒子为类圆球形;激光动态光散射仪检测壳聚糖纳米粒子平均粒径25.3 nm,占总粒子数99.1%,粒径分布图形较窄,表明颗粒大小均匀.实验结果表明运用以60Co γ射线辐照为主要手段进行壳聚糖纳米混悬剂的制备,是一种简便、快速、无污染、重复性好的方法,具备可行性.

丝素肽/壳聚糖聚合物涂层316L不锈钢的制备

背景:金属支架本身的致血栓性使对其进行表面改性研究极具应用意义.目的:利用层层静电自组装形成丝素肽壳聚糖聚合物膜.设计、时间及地点:材料改性体外实验,于2006-07/2007-07在中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所实验室完成.方法:通过层层静电自组装方法将丝素肽和壳聚糖交替涂层至医用316L不锈钢表面,对不锈钢表面进行改性.主要观察指标:应用扫描电镜观察涂层前后316L不锈钢表面形貌变化,通过傅里叶红外光谱分析涂层前后波谱变化,测定材料表面接触角分析涂层结果,并进行体外降解实验观察涂层的稳定性.结果:扫描电镜显示涂层后不锈钢表面均匀、致密;傅里叶变换红外光谱测定显示复合膜分子间存在强的离子键结合作用,也存在着强的氧键作用;接触角测定结果显示丝素肽和壳聚糖被交替涂层至不锈钢表面;体外降解实验证实了涂层不锈钢的降解过程相对稳定.结论:丝素肽与壳聚糖可通过静电自组装在不锈钢表面形成薄膜.

基因修饰骨髓间充质干细胞复合珊瑚羟基磷灰石支架材料修复骨质疏松性下颌骨缺损

背景:近年来基因修饰干细胞与支架材料复合形成组织工程化骨为修复骨缺损提供了骨组织重建的全新思路.目的:实验拟观察转染人骨形态发生蛋白2基因转染骨髓间充质干细胞复合珊瑚羟基磷灰石支架材料修复骨质疏松症下颌骨缺损的效果.设计、时间及地点:随机对照动物实验.于2005-06/2006-10在教育部门腔生物医学工程重点实验室完成.材料:6月龄未孕雌性SD大鼠24只,SPF级,体质量250～300 g,构建绝经后骨质疏松症动物模型.含人骨形态发生蛋白2基因的pcDNA3.1-hBMP-2重组质粒由解放军第三军医大学提供;支架材料珊瑚羟基磷灰石由卫生部口腔生物医学工程重点实验室提供.方法:24只SD模型大鼠随机数字表法分为实验组和对照组,每组12只.3个月后分别取其骨髓间充质干细胞培养.实验组骨髓间充质干细胞通过脂质体Lipogen介导转染pcDNA3.1-hBMP-2质粒,对照组细胞未作处理.3 d后将每只大鼠骨髓间充质干细胞与珊瑚羟基磷灰石支架材料复合,再分别对应地植入取材动物的自体下颌骨极限性骨缺损区.主要观察指标:术后第4,8周组织切片行免疫组织化学染色,观察新骨形成情况.术后8周进行成骨量的半定量检测.结果:24只SD模型大鼠均进入结果分析.①术后4周实验组在珊瑚羟基磷灰石材料边缘有新生骨质形成,8周时见相互连接的层板状成熟骨基质形成,对照组4周时只在材料边缘有少量骨基质形成,8周时新生骨质数量上明显少于实验组,且材料边缘及中央处有脂肪样结构形成.②对照组术后8周新生骨所占面积百分比为(0.046±0.004)%,实验组为(0.233±0.015)%,各组成骨量差异具有显著性意义(P＜0.01).结论:人骨形态发生蛋白2基因修饰的骨髓间充质干细胞复合珊瑚羟基磷灰石支架形成的组织工程化骨修复骨质疏松症下颌骨的成骨量较无基因修饰明显增加.

壳聚糖-小干扰RNA纳米粒对U251细胞增殖及凋亡的影响

目的:预防胶质瘤术后复发采取化学疗法和放射治疗,因敏感性低及胶质瘤对其产生抵抗,并未提高恶性胶质瘤患者的预后.目前广泛开展的基因治疗研究,有望取得突破.观察靶向端粒反转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的壳聚糖(chitosan,CS)- 小干扰RNA(small interferening RNA,siRNA)纳米粒在体外进行RNA干扰对胶质瘤U251细胞增殖及凋亡的影响.方法:实验于2006-09/2007-07在广东省神经外科研究所(重点实验室)完成.制各针对hTERT基因的CS-siRNA纳米粒,原子力显微镜观察纳米粒的形态及大小.按转染试剂的不同分为8组.空白对照组(不含转染试剂及siRNA),阳性对照组(LipofectamineTM 2000转染siRNA),阴性对照组(含30 nmol/L阴性对照siRNA的纳米粒),裸siRNA对照组(含30 nmol/L siRNA),空白CS纳米粒对照组,10,30,90 nmol/L siRNA纳米粒组.取对数生长期的U251细胞转染后,采用CCK-8法绘制细胞增殖曲线并计算抑制率;Hoechst 33342/碘化丙啶双荧光染色后,荧光显微镜下观察细胞核形态;流式细胞仪检测细胞周期;反转录-聚合酶链反应法检测hTERT-mRNA表达变化.结果:①原子力显微镜下CS-siRNA纳米粒,呈球形,形状一致,大小约87 nm.②阳性对照组、30,90 nmol/L siRNA纳米粒组细胞增殖明显受抑制,与其余各组比较差异有显著性(P＜0.05).③Hoechst 33342/碘化丙啶双染荧光显微镜下可见空白对照组、阴性对照组、裸siRNA对照组和空白CS纳米粒对照组大多为低蓝色的正常细胞;阳性对照组、10,30,90nmol/L siRNA纳米粒组以高蓝色的凋亡细胞为主.④阳性对照组、10,30,90 nmol/L siRNA纳米粒组与空白对照组、阴性对照组、裸siRNA对照组、空白CS纳米粒对照组相比,G0/G1期细胞显著增加,S期细胞明显减少,阳性对照组为明显(P＜0.05),G2/M期细胞变化不明显(P＞0.05).⑤阳性对照组、10,30,90 nmol/L siRNA纳米粒组hTERT mRNA表达明显下调,30,90 nmol/L siRNA纳米粒组表达下调较10 nmol/L siRNA纳米粒组更明显.结论:CS-siRNA在体外明显抑制了胶质瘤U251细胞增殖并促进其凋亡.

肝素/聚乙烯醇凝胶灌注修饰的小口径膨体聚四氟乙烯人工血管

背景:小口径(直径小于6 mm)膨体聚四氟乙烯人工血管由于血栓形成和内膜增生等原因,在冠状和外周血液循环中的应用受到了限制,而生物活性表面肝素涂层是解决上述问题的一条有效途径.目的:为了提高膨体聚四氟乙烯人工血管的抗凝血性能,采用新型肝素涂层--共价交联的聚乙烯醇/重氮树脂/肝素凝胶修饰小口径膨体聚四氟乙烯人工血管以提高其通畅性,并观察其血液相容性.设计、时间及地点:观察性实验,于2006-05/2007-06在哈尔滨工业大学生物医学工程中心的纳米医药与生物传感器实验室完成.材料:膨体聚四氟乙烯人工血管(直径4 mm),全氟磺酸和聚乙烯醇购于美国Aldrich公司,肝素购于Calbiochem公司(Mw12 000～14 000),重氮树脂由实验室自己合成.方法:①用全氟磺酸修饰膨体聚四氟乙烯表面.②用聚乙烯醇/重氦树脂/肝素凝胶进行灌注修饰,在紫外光照射的条件下,重氮树脂作为交联剂,将肝素和聚乙烯醇分子进行共价交联.主要观察指标:①接触角.②衰减全反射-傅里叶变换红外光谱表征材料表面的化学结构.⑨活化部分凝血激酶时间、凝血酶原时间.④溶血试验.⑤血小板黏附试验.⑥凝血酶失活试验.结果:①修饰后的人工血管的接触角降低,衰减全反射-傅立叶变换红外光谱显示在2 172 cm-1和2 224 cm-1处出现了重氮基团的特征峰位.②与未修饰的人工血管相比,修饰后的人工血管具有较长的活化部分凝血激酶时间和凝血酶原时间、较低的溶血度、很少数量的血小板黏附.③与未修饰的人工血管相比,修饰后的人工血管对凝血酶的活性有较强的抑制作用,且涂层稳定.结论:聚乙烯醇/重氮树脂/肝素凝胶形成的肝素涂层不仅具有很好的抗血栓形成的性能,而且具有较低的溶血度,因此显著提高了人工血管的血液相容性.

多孔壳聚糖微球的佳制备条件

背景:天然状态的壳聚糖大部分为粉末状,比表面积小,作为吸附载体,使载体和吸附物都难以回收,从而限制其应用.目的:分析制备多孔壳聚糖微球的佳条件.设计、时间及地点:重复测量设计,于2006-11/2007-05在陕西理工学院应用化学实验室完成.材料:壳聚糖脱乙酰度为95.62%.方法:以环己烷作致孔剂,戊二醛作交联剂,采用反液相悬浮交联法,改变加入环己烷和戊二醛用量,调节反应温度,改变搅拌速度和提取时间.主要观察指标:观察反应温度、提取时间、搅拌速度、环己烷用量和戊二醛用量对制备多孔壳聚糖微球的影响.结果:多孔壳聚糖微球佳制备条件为:添加10mL环己烷,戊二醛2 mL,反应温度60～70℃,搅拌速度中速(100～120 r/min)时,提取时间不小于48 h,可得到90%粒径大小为3～12 μm的多孔壳聚糖微球.结论:此制备方法具有耗时短,制备的壳聚糖微球粒径小、粒度分布窄、多孔性等特点.

组织工程人工韧带运动状态下的生物力学特征

膝关节韧带的生物力学是近年来研究的热点之一,膝关节韧带的力学属性,主要集中在膝关节韧带的结构属性、线性硬度、黏弹性、对力学刺激的反应以及与年龄、性别的关系等方面.力学刺激对调控韧带功能、韧带组织愈合和重建有着重要的作用.近年来,组织工程学的发展为韧带损伤的治疗提供了新的可能途径,在人工韧带等方面取得了较大进展,但与临床要求仍有一段距离,在很多方面需要继续改进和探索.如设计有良好力学性能和降解性能的支架材料等.

新型内固定材料的生物学特性及临床应用

检索Pubmed数据库、中国期刊全文数据库及万方数据库1991-01/2007-12期间文献33篇,总结新型内固定材料聚乳酸及镍钛记忆合金的生物学特性及临床应用特点.文献显示新型内固定材料聚乳酸及镍钛记忆合金因其良好的生物学特性已广泛应用于临床;而形状记忆合金具有优异的记忆效应和超弹性性能、优良的生物相容性、低的生物退行性变性,且弹性模量与人体骨头相近,临床已在管径较小的管状骨及髌骨骨折中作为首选;聚乳酸及其复合材料内固定物,几乎没有毒性作用,亦不需再次手术取出,适用在松质骨骨折的治疗中;生物降解可吸收和形状记忆合金骨折内固定物存在一些并发症,需要进一步的深入观察和研究.

心肌组织工程可降解支架材料的新研究

健康细胞移植到心肌损伤部位是当前关注的热点.组织工程的三维支架材料可替代丢失和损伤的细胞外基质,对自我或移植细胞提供支持,避免或减少梗死区移植细胞被冲洗掉或死亡,并通过微环境线索获得组织的再生和修复,从而预防和改善心功能.就生物活性可降解材料的设计、修饰及目前常用的类型的研究现状做一综述,为可降解材料的应用研究提供理论依据.

生物可降解聚氨酯的合成及应用

生物可降解聚氨酯材料具有优异的机械性能,良好的血液相容性、组织相容性和生物可降解性,因而在生物医学上得到了广泛的应用.聚氨酯的设计自由度很大,可以通过选择不同嵌段和调节软硬段间的比例,从而合成出具有不同化学结构、机械性能和热性能的聚氨酯以满足不同的应用要求.生物可降解聚氨酯在医学上的应用主要集中在药物缓释载体材料、手术缝合线、人造皮肤、伤口敷料、医用粘合剂、组织工程修复及细胞培养支架等.

缓释镇痛药物的种类及载体材料

检索Pubmed数据库和中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库等,对资料进行整理,研究缓释镇痛药物载体材料的特点.结果表明目前此类高分子材料有生物降解型和非生物降解型两大类.生物降解型高分子材料因其能在生物体内经水解、酶解等过程逐渐降解成低分子量化合物或单体,进而能被排出体外或参加体内正常代谢而消耗掉,故而更具有优势,其中聚乳酸及其共聚物就是此类材料的代表品种.聚乳酸及其共聚物在人体内的代谢是通过水解或酶解终被完全降解为CO2和水,在人体内无积聚问题,且人体对此类材料有很强的耐受性,故成为人们广泛关注的药物缓释高分子材料.

硬脑膜替代材料的研究与应用

硬脑膜替代材料修补缺损的硬膜对于维持解剖学的完整和保护脑组织是十分必要的.目前用于硬脑膜替代的材料主要有3种:异种材料(常见的为牛心包)、同种异体材料(尸体硬脑膜)、人造材料(主要是膨体聚四氟乙烯材料).各种材料有其不同的优势的同时也存在着不同的缺点.例如自体膜材取材有限、容易引起二次创伤,强度较硬脑膜差;同种异体膜易引起病毒感染;异种生物膜都经过戊二醛处理材料表面残留毒性;明胶海绵类降解速度快、强度差、不能缝合.利用三者的优势,克服缺点,以异体、异种材料为基础,辅以人工合成材料可能是将来的发展方向.

牙种植材料生物学特性及生物相容性对骨结合强度的影响

口腔种植是修复牙列缺损、缺失有效的手段之一,已在临床上得到了广泛的应用和发展.随着医用生物材料的开发,金属、陶瓷、高分子及其复合材料在口腔种植方面发挥了重要作用,但目前所使用的生物材料未能在材料与材料之间、材料与机体之问产生有效的化学性与生物性结合,难以适应人体生长与发育、修复与改建的立体动态变化的复杂环境,不能达到长期使用的目的.白骨结合概念提出以来,种植体的骨结合已被公认为是种植成功的标志之一.

组织工程支架材料在泌尿外科应用中的生物相容性评价

泌尿系组织由于先天性异常或后天性损害造成缺失,需要进行修复与重建.以往利用自身某些组织作为替代材料,存在取材操作复杂、材料来源局限、并发症多等问题;而且这种修复很少能完全替代原组织器官的结构和功能.随着组织工程学技术的发展,组织工程支架材料给泌尿系统组织的修复与重建带来了新的希望.组织工程支架材料根据来源不同可以分为人工合成支架成材料、天然支架材料以及细胞外基质材料三类.天然支架材料有良好的生物相容性、低抗原性,但来源相对少.人工合成支架材料不仅具有良好的物理机械性能,但是聚乳酸等人工合成材料不具备细胞可识别的特定位置信息,从而不具备良好的细胞亲和性.细胞外基质材料同其他材料相比与泌尿系局部组织的生物相容性更好.但其组织观察时间短,在体内是否会产生副作用或其它问题,还需长时间的观察和研究.文章分析以上三种组织工程支架材料在泌尿外科修复重建中的应用特点,探讨其应用前景.

热塑膜片式暂时性赝复体修复硬软腭缺损9例

Etrotic公司生产的热塑型膜片(ERKOLODC-pro,595115),可在真空加热加压状况下根据牙弓形态成形,提供良好的固位和阻挡作用.对2006-09/2007-01解放军总医院口腔科收治的拟因切除肿瘤造成的硬软腭联合洞穿型缺损,需进行即时阻塞修复的9例患者,以热塑型膜片制作设计暂时性赝复体,厚度为1.5 mm,并根据患者的牙周状况选择不同类型的膜片.患者初戴后有不适感1例,为缺损软腭部分较多者,基托靠咽近者,适应1周后恶心反应消失.3例疼痛均因局部创口边缘软组织水肿,基托压迫,经调整后疼痛消失.结果显示,热塑膜片材料与宿主无生物相容性不良反应,所设计的暂时性赝复体可封闭鼻腔,使硬软腭缺损患者的吞咽功能和发音功能均得到恢复.

脂微球化氟比洛芬酯的镇痛效应

将酯化氟比洛芬封闭于脂肪微球中,比较不同剂量氟比洛芬酯(凯纷)与芬太尼配伍用于患者自控静脉镇痛的效果及相关副作用.184例择期手术患者,按随机数字表法分为4组,术后自控静脉镇痛分别使用芬太尼1.0 mg;凯纷50 mg+芬太尼1.0 mg;凯纷100 mg+芬太尼0.5 mg;术前静脉予充凯纷50 mg,继而凯纷50 mg+芬太尼0.5 mg.结果表明凯纷与芬太尼联合用于术后自控静脉镇痛的镇痛效果明确,副作用较少,以先静脉预充凯纷50 mg+自控静脉镇痛(凯纷50 mg+芬太尼0.5 mg)为较好的组合.

学科带头人叶志中教授

抚顺市中医院田卢峰副院长