中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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甲壳素及其衍生物抑制瘢痕形成:研究与进展
背景:甲壳素及其衍生物抑制瘢痕形成方面的作用及机制成为近年来研究的热点。
目的:综述就近年来甲壳素及其衍生物抑制瘢痕形成的研究进展。
方法:应用计算机检索中国知网、万方数据库、维普数据库及PubMed数据库,检索有关甲壳素抑制瘢痕治疗进展的文献,检索中文关键词为“甲壳素,衍生物,瘢痕形成”,英文关键词为“Chitin; Derivatives; Scar Formation”。
结果与结论:甲壳素及其衍生物能直接或通过改变如生化因子、干扰素、肿瘤坏死因子、白细胞介素等各种因子,抑制瘢痕中成纤维细胞的增殖、分化及分泌功能;能改变伤口及瘢痕中免疫细胞的作用;能减少胶原形成,促进胶原降解;促进伤口肉芽血液循环的建立,减轻组织缺氧;促进表皮细胞和内皮细胞的生长,加速伤口愈合;抑制创面细菌繁殖,减轻感染,加速愈合。 -
可降解高分子纳米空心粒子载中药血竭的工艺方法及体外释放
背景:血竭不溶于水,很难制成注射剂,而一般的血竭口服制剂、灌肠剂等由于血竭颗粒粗大,在体内吸收量很少,生物利用度极低;高分子纳米空心粒子具有比表面积大、吸附性强的特性,且其空心部分可容纳大量的客体分子,因而产生一些奇特的基于微观包裹效应的性质。
目的:综述可降解高分子纳米空心粒子附载中药血竭的工艺方法及体外释放。
方法:应用计算机检索PubMed数据库、中文科技期刊数据库(1989至2014年)、中国学术会议论文数据库(1986至2014年)、中国学位论文数据库(1986至2014年)、中国专利数据库(1985至2014年)、中国科技论文统计分析数据库(1999至2014年)、中国期刊全文数据库(1979至2014年)、中国优秀硕士学位论文全文数据库(1999至2014年)、中国博士学位论文全文数据库(1999至2014年)相关文献,检索关键词为“血竭,纳米粒子,空心粒子,降解高分子”。
结果与结论:将中药血竭溶解于良溶剂乙醇、异丙醇或者酯类溶剂中,配成接近饱和的溶液,然后将预先制备的高分子空心纳米粒子分散于此溶液之中,超声振荡一定时间,用高速离心机分离,可以制得附载血竭成分的纳米粒子。将中药血竭制成纳米级的微乳颗粒,可以形成以水为介质的“溶液”,提高血竭的可吸收性和生物利用度,而且其微乳化缓释作用使血竭不良反应小、用药量低、作用时间长,有望制成粉剂、片剂、膏剂、胶囊剂甚至针剂等剂型。纳米级微乳化血竭针剂有望可进行静脉注射,随着血液有效到达病灶,治疗血瘀、心脑血管等多种疾病。进一步通过调控纳米空心粒子壳的厚度和孔隙率,可以控制药物的释放速率;通过粒子表面的生物化学修饰可以使载药粒子具有靶向特性。 -
玻璃酸钠治疗髌骨软骨软化症
背景:玻璃酸钠本身特殊的理化性质决定了其非常重要的生理作用,如构成细胞基质、润滑关节、促进组织损伤修复等。
目的:观察玻璃酸钠注射治疗不同病程髌骨软化症的疗效。
方法:76例髌骨软化症患者关节腔内注射玻璃酸钠2 mL(以髌骨内侧缘为进针点,每周1次,5周为1个疗程),根据病程分两组,病程<3个月32例,病程>3个月44例,随访1年观察远期疗效。
结果与结论:随访1年发现病程<3个月组的优良率达94%,远期疗效优于病程>3个月组(优良率73%)。治疗期间无明显毒副作用,其中有5例注射后疼痛加重,可能与髌下积液未抽尽和早期穿刺技术不熟练有关,休息后一两天均得到缓解,未发生感染。结果可见玻璃酸钠是治疗髌骨软化症的有效药物,早期治疗及合理的进针点是保证疗效的关键。 -
Neuroform3自膨式支架在弹簧圈介入栓塞宽颈前交通动脉瘤中的作用
背景:近年来,采用支架辅助弹簧圈栓塞保持载瘤动脉通畅,防止弹簧圈脱入载瘤动脉,可显著提高疗效和安全性。
目的:探讨Neuroform3自膨式支架在弹簧圈介入栓塞治疗宽颈前交通动脉瘤中的应用。
方法:回顾性分析在Neuroform3自膨式支架辅助下,采用弹簧圈介入栓塞32例宽颈前交通动脉瘤患者的临床资料,其中男15例,女17例,年龄41-71岁,随访观察治疗效果及不良反应情况。
结果与结论:32例患者技术操作顺利,宽颈前交通动脉共置入32枚Neuroform3支架,弹簧圈置入顺利,释放位置满意,技术成功率达到100%。在Neuroform3支架辅助水解脱弹簧圈栓塞完成后造影显示,32枚动脉瘤完全栓塞30枚,占94%;部分栓塞2枚,占6%。术后患者恢复良好,平均住院6.3 d。32例患者术后随访3-6个月,再行全脑血管造影未见再次脑出血、脑血管栓塞或动脉瘤复发。表明在Neuroform3自膨式支架辅助下采用弹簧圈介入栓塞治宽颈前交通动脉瘤,材料与宿主生物相容性好且安全有效。 -
玻璃酸钠注射膝骨关节炎关节液中一氧化氮及滑膜厚度的变化
背景:关节腔内注射玻璃酸钠已成为膝骨关节炎的预防和补充疗法,可有效缓解疼痛,保护关节软骨,恢复关节功能。
目的:观察关节腔内注射玻璃酸钠对膝骨关节炎关节液中一氧化氮水平、滑膜厚度的影响。
方法:随机选择膝骨关节炎患者80例(86膝),根据日本膝骨关节炎指征等级分为轻、中、重度3组,关节腔内每周注射1次玻璃酸钠25 mg,连续5周。治疗4,12周后按照日本膝骨关节炎指征等级对所有患者治疗前后行临床评分;将在4周后还能抽出关节液和完成超声测定的37例(40膝)患者定为完整监测组,亦分轻、中、重度3组,测定治疗前和治疗4周后关节液一氧化氮水平和滑膜厚度。
结果与结论:治疗4周后,轻、中、重度组有效率分别为93%,77%,47%,总有效率为79%;治疗12周后,轻、中、重度组有效率分别为95%,84%,33%,总有效率为80%。膝骨关节炎完整监测组中,轻、中、重度组治疗4周后关节液一氧化氮水平较治疗前明显下降(P<0.05),轻、重度组治疗4周后滑膜厚度与治疗比较差异无显著性意义(P>0.05),中度组治疗4周后滑膜厚度较治疗前减少(P<0.05)。表明玻璃酸钠治疗膝骨关节炎可降低患膝关节液一氧化氮水平,改善临床疗效,对轻、中度膝骨关节炎患者为佳。 -
硫酸钙人工骨椎弓根植骨修复胸腰段椎体爆裂性骨折
背景:硫酸钙人工骨是一种椎体内植骨材料,具有较好的融合效果,可有效纠正矢状位畸形和序列,维持椎体高度。
目的:探讨硫酸钙人工骨椎弓根植骨治疗胸腰段椎体爆裂性骨折的临床疗效。
方法:将46例胸腰段椎体爆裂性骨折患者随机分为植骨组(n=21)和非植骨组(n=25),分别进行硫酸钙人工骨椎弓根植骨治疗与单纯椎体成形治疗,比较两组患者术后卧床时间、末次随访目测类比评分、伤椎前缘高度、空壳现象发生率、内固定失效率等差异。
结果与结论:46例患者术后均完成12个月随访,植骨组和非植骨组患者平均随访时间分别为18.70个月和17.48个月。非植骨组患者术后卧床时间明显长于植骨组(P=0.002),空壳现象和内固定失效发生率显著高于植骨组(P=0.036,P=0.038)。然而,两组患者末次随访目测类比评分及不同时间伤椎前缘高度百分比比较,差异均无显著性意义(P均>0.05)。结果表明硫酸钙人工骨椎弓根植骨治疗胸腰段单椎体爆裂性骨折的临床疗效及安全性优于单纯椎体成形治疗。 -
富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物修复骨缺损及骨整合的作用
背景:异种冻干骨具有很好的骨引导性及低抗原性,但骨诱导性相对较差;自体富血小板纤维蛋白具有很好的诱导成骨能力。
目的:观察富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物在修复种植体周骨缺损及骨整合过程中的作用。
方法:取新西兰大白兔12只,于双侧下颌无牙区造极限骨缺损模型。在两侧缺损区的近中、远中端骨壁各植入1枚钛螺纹钉,使种植体临近缺损侧无骨支持,右侧缺损区填压入自体富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物,作为实验组;左侧缺损区填入异种冻干骨,作为对照组。植入4,8,12周后取完整下颌骨标本进行大体形态观察、植体扭矩测试及组织学观察。
结果与结论:植入4周时,实验组可见新生血管,成骨细胞数量多,呈单层紧密排列在新生骨小梁的表面;对照组可见炎性细胞浸润,纤维组织增多,新生血管稀疏,成骨细胞及新生骨数量较实验组少。植入8周时,实验组见大量新生血管,骨小梁密集,呈网状连接,部分已逐渐融合成岛状;对照组新生血管较实验组少,骨小梁纤细,散乱。植入12周时,实验组新生骨组织成熟,骨小梁钙化程度高,可见形成板状新骨;对照组骨小梁融合成片,趋向成熟,但成熟度不及实验组。实验组不同时间点种植体-骨结合强度高于对照组(P <0.05)。表明富血小板纤维蛋白/异种冻干骨复合物具有很好的骨修复与骨整合能力。 -
经皮骨水泥注入椎体成形修复骨质疏松性胸腰椎压缩骨折
背景:经皮椎体成形通过注入骨水泥材料强化压缩骨折椎体的稳定性,防止椎体进一步塌陷,发挥显著的止痛效果,但易出现骨水泥渗漏等并发症。
目的:进一步评估聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥经皮椎体成形治疗骨质疏松性胸腰椎压缩骨折的疗效及安全性。方法:65例骨质疏松性胸腰椎椎体压缩骨折患者在 DSA 机引导下行聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥经皮椎体成形治疗,对比治疗前后目测类比评分、Oswesty 功能障碍指数、椎体高度、椎体后凸角度变化,以及骨水泥渗漏情况。
结果与结论:治疗后1 d目测类比评分和Oswesty功能障碍指数较治疗前降低(P<0.01),治疗后1个月时目测类比评分和Oswesty功能障碍指数进一步降低,与治疗后1 d比较差异有显著性意义(P<0.05),治疗后1,3,6个月时间点两两比较差异无显著性意义(P>0.05)。与治疗前比较,治疗后3 d椎体前缘高度和中央高度明显恢复(P<0.05),Cobb角明显矫正(P <0.05),至6个月后大部分椎体高度和Cobb角仍保持稳定。影像学复查显示椎旁骨水泥少量渗漏6例,其中椎旁软组织内渗漏2例,相邻椎间盘内渗漏4例,均无明显临床症状,未见神经损伤病例。提示聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥经皮椎体成形可迅速缓解骨质疏松性椎体压缩骨折患者的疼痛,提高多数椎体的高度,改善后凸畸形且不良反应少。 -
聚乙烯界面结核分枝杆菌黏附力及生物膜的形成
背景:研究证实结核杆菌对钴铬钼、钛合金的黏附力低,且不形成生物膜,但其对聚乙烯的黏附力及生物膜形成情况未见报道。
目的:观察利福平干预对聚乙烯界面结核杆菌黏附力及生物膜形成的影响。
方法:将聚乙烯和钴铬钼实验材料在无菌条件下分别置于Middlebrook 7H9液体培养基中,与结核杆菌共同培养2周,随机取出2块后,再加入1 mg/L的利福平溶2 mL,继续培养2周后,用激光共聚焦显微镜观测利福平干预前后材料界面单位面积菌落数及菌落厚度,扫描电镜观察利福平干预前后材料界面细菌生物膜结构。
结果与结论:利福平干预前,聚乙烯界面单位面积菌落数及菌落厚度均大于钴铬钼组(P <0.05);利福平干预后,聚乙烯界面单位面积菌落数及菌落厚度较干预前明显减少(P <0.05)。利福平干预前,聚乙烯界面可见结核杆菌黏附,形成似“雪花状”、“云雾状”,可见生物膜结构;钴铬钼界面可见散在结核杆菌菌落,未见生物膜结构形成。利福平干预后,聚乙烯界面黏附菌落数减少,部分结核杆菌出现干瘪、裂解,生物膜有不同程度的破坏;钴铬钼界面未见菌落形成,偶见单个结核杆菌黏附,未见生物膜形成。表明结核杆菌可在聚乙烯界面形成生物膜,但利福平可抑制甚至破坏结核生物膜。 -
不同药物洗脱支架置入老年急性非ST段抬高型冠脉综合征后的炎症因子反应
背景:雷帕霉素及其衍生物依维莫司洗脱支架能改善急性冠脉综合征患者支架置入后的炎症反应,减少再狭窄的发生率。Firebird支架是目前中国使用广泛的国产雷帕霉素药物洗脱支架,XIENCE.V支架是目前使用多的雷帕霉素衍生物依维莫司洗脱支架。
目的:比较国产雷帕霉素洗脱Firebird支架及进口XIENCE.V支架对老年非ST段抬高型急性冠脉综合征患者经皮冠状动脉介入后炎症因子高敏C-反应蛋白及白细胞介素6影响的差异。
方法:选取2012年9月至2014年7月间老年非ST段抬高型急性冠脉综合征患者112例,其中不稳定心绞痛47例,非ST段抬高型心肌梗死65例。经药物治疗病情72 h后,行经皮冠状动脉介入治疗,其中Firebird支架组58例,XIENCE.V支架组54例。
结果与结论:与置入前相比,两组高敏C-反应蛋白及白细胞介素6置入后24 h显著升高(P <0.01),置入后1个月显著下降(P <0.05)。置入后24 h、1周、1个月,两组高敏C-反应蛋白及白细胞介素6差异无显著性意义。两组术中及置入后1个月均无心脏意外事件发生,两组安全性及组织相容性相似。结果证实,Firebird支架与XIENCE.V支架治疗均能抑制老年非ST段抬高型急性冠脉综合征患者支架置入后炎症反应,且临床疗效相似。 -
医用新型Mg-Li-Ca合金材料体外生物相容性及生物活性评价
背景:新型Mg-Li-Ca合金是否具有生物相容性和生物活性,目前还未被证实。
目的:通过体外实验评价新型医用Mg-Li-Ca合金的组织相容性及生物活性,初步探讨其作为医用植入材料的可行性。
方法:分别采用Mg-Li-Ca合金浸提液、纯Mg浸提液、AZ31B合金浸提液与α-MEM培养液培养第3代小鼠胚胎成骨细胞,培养1,3,5 d,采用MTT法检测细胞A值并计算相对增殖率;培养5,7 d,使用碱性磷酸酶试剂盒检测细胞碱性磷酸酶活性。将第3代小鼠胚胎成骨细胞与Mg-Li-Ca合金、纯Mg、AZ31B合金分别共培养于24孔板,培养1 d后扫描电镜观察材料表面黏附及增殖情况。
结果与结论:Mg-Li-Ca合金、纯Mg和AZ31合金对成骨细胞的细胞毒性为Ⅰ级,无细胞毒性,且Mg-Li-Ca合金对细胞毒性明显小于纯Mg和AZ31B合金,对成骨细胞生长增殖无显著影响,呈现出良好的生物相容性。Mg-Li-Ca合金和纯Mg对成骨细胞正常合成碱性磷酸酶无影响,具有良好的生物活性;AZ31B对成骨细胞正常合成碱性磷酸酶有显著影响。成骨细胞可在Mg-Li-Ca合金、纯Mg和AZ31合金表面正常黏附生长。表明新型Mg-Li-Ca合金有望成为新型骨科植入材料。 -
羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料的制备及体外生物相容性
背景:利用传统固相复合工艺难以将纳米级羟基磷灰石粉体与聚苯硫醚进行复合,从而无法发挥纳米材料的优势,并且目前缺少羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料生物相容性的相关研究。
目的:应用液相复合工艺制备纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料,评价其体外生物相容性。
方法:应用液相复合工艺制备纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料粉体和片材,利用红外光谱分析仪及扫描电镜分析复合材料的成分结构;利用接触角测试仪评估材料的亲水性,利用兔血及L929小鼠成纤维细胞进行材料的溶血实验及体外细胞毒性实验。
结果与结论:通过液相复合工艺制备的羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料混合均匀,结合紧密;聚苯硫醚粉体的接触角为81.25°,而纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料粉体接触角为16.1°;聚苯硫醚片材的接触角为83.5°,纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料片材的接触角为42.5°,对比可知,纳米羟基磷灰石的加入明显改善了单纯聚苯硫醚材料的亲水性能。纳米羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料的溶血率为1.66%(<5%),提示材料血液相容性良好;L929细胞在材料浸提液中生长良好,CCK-8法检测提示体外细胞毒性属无毒范畴(0至1级)。以上结果表明羟基磷灰石/聚苯硫醚复合材料制备成功,体外生物相容性良好。 -
钛基表面纳米银复合涂层体外抗菌活性及生物安全性评价
背景:羟基磷灰石是骨的主要成分,具有诱导成骨细胞的功能。纳米银具有广谱和高效的抗菌效果,钛基表面羟基磷灰石/纳米银复合涂层材料既有生物活性又具有抗菌特性。
目的:研究钛基表面羟基磷灰石/纳米银复合涂层体外抗菌作用及影响因素,评价钛基表面羟基磷灰石/纳米银复合涂层的生物相容性和安全性。
方法:选取浓度0,0.5,1.0 mmol/L银溶液制备钛基表面沉积的羟基磷灰石/纳米银复合涂层样品,将其浸提液与金黄色葡萄球菌与材料共培养,进行体外抗菌定性分析。按照国家和国际标准化组织对生物材料相容性检测标准,对健康成年昆明小鼠、新西兰兔进行热原试验、溶血试验、急性毒性试验、皮肤刺激试验,综合评价材料的生物相容性和安全性。
结果与结论:钛基表面沉积制备的羟基磷灰石/纳米银复合涂层材料体外对金黄色葡萄球菌有明显抗菌作用,复合材料中银含量越高抗菌作用越明显,且动物实验中未出现明显的热原反应、溶血反应、急性毒性反应、皮肤刺激反应,与不含银的纯羟基磷灰石材料相比,生物相容性差异无显著性意义。说明钛基表面沉积制备的羟基磷灰石/纳米银复合材料,体外对金黄色葡萄球菌具有良好的抗菌作用,且具有良好的生物相容性。 -
表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米粒荷载紫杉醇的制备及鉴定
背景:紫杉醇是临床常用的广谱抗肿瘤植物药,但其不良反应较多,因此迫切需要合适的载体以减小紫杉醇本身的毒性,同时达到更好的靶向性。
目的:研究表皮生长因子偶联牛血清白蛋白纳米粒荷载紫杉醇的制备及其理化性质的鉴定。
方法:采用超声乳化和溶剂挥发技术制备白蛋白纳米粒,通过化学交联试剂将表皮生长因子与白蛋白纳米粒偶联,制得表皮生长因子偶联白蛋白纳米粒,使用表皮生长因子偶联白蛋白纳米粒荷载125I 标记紫杉醇,作为实验样品。在白蛋白纳米粒与表皮生长因子偶联白蛋白纳米粒中分别加入100,200,400,800 mg/L的125I标记紫杉醇,进行包封率和载药量检测;检测实验样品、荷载125I标记紫杉醇白蛋白纳米粒的药物释放率;检测实验样品、荷载125I标记紫杉醇白蛋白纳米粒与125I标记紫杉醇的室温稳定性及血清稳定性。
结果与结论:荷载125I标记紫杉醇的白蛋白纳米粒组和实验样品组的包封率和载药量随着紫杉醇药量的增加,包封率呈现下降趋势,载药量呈现上升趋势。实验样品、荷载125I标记紫杉醇白蛋白纳米粒释药趋势基本相同,表现为包载药物缓慢释放。实验样品、荷载125I标记紫杉醇白蛋白纳米粒的室温稳定性与血清稳定性均高于125I标记紫杉醇(P<0.05)。表明表皮生长因子偶联白蛋白纳米粒荷载紫杉醇具有良好的载药率、释药率和稳定性。 -
聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯载生长因子的缓释纳米微球
背景:骨形态发生蛋白2可增加软骨细胞和祖细胞基质的产生,可增强组织金属蛋白酶抑制因子1、sox9基因、Ⅱ型胶原以及聚集蛋白聚糖的表达,具有诱导间充质细胞迁徙、增殖、分化,终促使软骨、骨形成的作用。目的:制备重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球缓释系统,观察微球生长因子形态和粒径分布、载药量、包封率、体外缓释时间及生物活性。
方法:采用复乳-干燥法制备重组人骨形成蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统,体外分离培养猪软骨细胞。实验分为3组:第1组培养液不添加药物做为对照;第2组培养液中添加含20μg/L重组人骨形态发生蛋白2;第3组培养液中添加20μg/L重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球;其中在第2组和第3组又将重组人骨形态发生蛋白2和重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球系统纳米微球分别设为55,100μg/L两种的有效浓度,采用MTT法检测微球对软骨细胞增殖的影响,模拟体内条件观察纳米微球的体外缓释性及生物活性。
结果与结论:该纳米微球表面光滑圆整,球体大小均匀,粒径为231-415 nm,扫描电镜平均粒径323 nm。微球的包封率和载药量分别为(79.63±0.16)%和(1.92±0.16)%。根据15 d内对重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球的体外释药的观察,保持持续释放重组人骨形态发生蛋白2,且释放的浓度呈增长水平。该微球缓释系统有生物活性,能显著促进猪软骨细胞的增殖,其效应高于单纯重组人骨形态发生蛋白2的效应。提示重组人骨形态发生蛋白2聚羟基丁酸-羟基辛酸共聚酯纳米微球缓释系统包封率、载药量、体外释药性以及生物活性符合纳米微球的一般规律,能够满足相应的软骨缺损修复要求。 -
次氯酸钠溶液对不同时期粪肠球菌生物膜的药物作用
背景:有研究指出粪肠球菌能在营养物质缺乏、抗菌药存在的恶劣环境中生存,形成再感染而影响根管再治疗效果。也有实验表明次氯酸钠溶液作为根管冲洗液对残留的粪肠球菌具有很强的清除作用。
目的:建立不同时期粪肠球菌生物膜,研究不同浓度次氯酸钠溶液对其的作用效果。
方法:建立对数期、稳定期、饥饿期粪肠球菌生物膜模型,以1%,2.5%,5.25%次氯酸钠溶液分别作用于各时期粪肠球菌生物膜表面30 s、5 min、10 min,同时用激光共聚焦显微镜观察用药后生物膜情况。
结果与结论:在相同浓度次氯酸钠溶液作用下,饥饿期粪肠球菌生物膜中的活菌降低量低于稳定期与对数期粪肠球菌生物膜中的活菌降低量(P<0.05);在1%次氯酸钠溶液作用下,稳定期与对数期粪肠球菌生物膜中的活菌降低量差异有显著性意义(P <0.05);在2.5%,5.25%次氯酸钠溶液作用下,稳定期与对数期粪肠球菌生物膜中的活菌降低量差异无显著性意义(P>0.05)。在同一时期生物膜模型下,5.25%次氯酸钠溶液作用下的活菌降低量高于2.5%、1%次氯酸钠溶液作用下的活菌降低量(P<0.05);2.5%次氯酸钠溶液作用下的活菌降低量高于1%次氯酸钠溶液作用下的活菌降低量,但仅在药物作用30 s时差异有显著性意义(P<0.05)。结果表明,在相同药物浓度、相同作用时间内,饥饿期粪肠球菌生物膜较对数期、稳定期粪肠球菌生物膜对次氯酸钠溶液更具耐药性;在相同作用时间内,5.25%次氯酸钠溶液对饥饿期粪肠球菌生物膜的杀菌效果佳。 -
改性丝素蛋白支架与生长因子基因修饰脂肪间充质干细胞构建组织工程脂肪
背景:构建工程化的脂肪组织,适宜的种子细胞和性能优良的支架材料缺一不可。
目的:探讨携带重组人血管内皮细胞生长因子165基因的慢病毒载体感染人脂肪间充质干细胞后,与壳聚糖修饰的丝素蛋白支架材料体外构建组织工程脂肪的可行性。
方法:选取生长良好的第3代人脂肪间充质干细胞,用携带重组人血管内皮细胞生长因子165基因的慢病毒进行感染。将慢病毒感染与未感染的第3代人脂肪间充质干细胞成脂诱导14 d,油红O染色观察细胞的成脂能力;将慢病毒感染和未感染的第3代人脂肪间充质干细胞分别接种于壳聚糖修饰丝素蛋白支架材料上,MTT法检测细胞增殖能力;成脂诱导14 d后进行油红O染色,RT-PCR检测成脂特异性基因过氧化物酶增殖物活化受体γ2的表达。
结果与结论:成脂诱导14 d后,慢病毒感染与未感染的第3代人脂肪间充质干细胞均可见成熟脂肪细胞,组间差异不明显。慢病毒感染和未感染的第3代人脂肪间充质干细胞在改性丝素蛋白支架的生长曲线相近;成脂诱导后,油红O染色及RT-PCR均显示生成大量成熟脂肪细胞。表明携带重组人血管内皮细胞生长因子基因的慢病毒感染人脂肪间充质干细胞后,不影响其生长及成脂能力,与壳聚糖修饰的丝素蛋白支架材料可成功构建组织工程化脂肪。 -
新型可降解吻合夹吻合血管的生物力学特点
背景:目前国内外应用于临床的血管吻合器均可以克服传统血管吻合方法操作复杂、吻合时间长和内膜损伤等严重缺陷。但其不可吸收的针环影响了吻合口处血管正常收缩与舒张的生理功能,从而限制血管的生长,不适宜未成年患者。
目的:分析新型可降解的吻合夹吻合血管的生物力学特点。
方法:剪断新西兰大白兔双侧颈静脉,一侧应用新型可完全降解的吻合夹吻合,另一侧行针线吻合对照,测定术后当天,第7,14,30天时离体血管吻合口的平均破裂压。
结果与结论:吻合夹组吻合时间短于针线吻合法(P <0.05),吻合夹组平均破裂压与针线吻合法组比较差异无显著性意义(P >0.05)。生物力学表明新型可降解的吻合夹安全可靠。 -
可生物降解聚乳酸-乙醇酸共聚物腰椎横突间融合器的体内生物力学
背景:为增加腰椎后路横突间植骨融合率,进一步减少并发症,李开南等用聚乳酸-乙醇酸共聚物材料制成了可吸收横突间融合器(中华人民共和国知识产权局专利号:200810148018.0)。
目的:研究聚乳酸-乙醇酸共聚物腰椎横突间融合器在动物体内的生物力学变化情况。
方法:采用电脑将96只波尔山羊随机分均为实验组和对照组,咬除L4横突下缘和L5横突上缘的皮质骨,实验组在羊右侧L4、5横突间隙置入填有自体髂骨的聚乳酸-乙醇酸共聚物腰椎横突间融合器;对照组在相应位置植入同融合器大小相当的自体髂骨块,分别于术后1,3,6,9,12,18个月取整个腰椎制成标本,用脊柱三维运动测量系统测算各组标本L4、L5节段前屈、后伸、侧屈、旋转的运动范围。
结果与结论:两组前屈、后伸、侧屈、旋转运动分别于术后1,3,6,9,12,18个月依次减少;实验组术后3,9,12个月前屈运动范围小于对照组(P <0.05),术后1,3,9,12个月后伸、旋转、右侧弯运动范围小于对照组(P<0.05),术后9,12个月左侧弯运动范围小于对照组(P <0.05)。说明可生物降解聚乳酸-乙醇酸共聚物腰椎横突间融合器置入山羊体内后,在早期能够提供初始力学稳定,中期可以避免应力遮挡,同时可以为骨形成提供支架作用,有利于骨的爬行替代,生物力学性能优于自体髂骨植骨。 -
含肝细胞生长因子水凝胶修复家兔股骨颈部缺损
背景:肝细胞生长因子可促进骨组织再生,在骨组织修复方面有着巨大的潜力,但是在体内较短的半衰期限制了其在临床的应用。
目的:观察含有肝细胞生长因子的半合成细胞外基质样水凝胶体内促进股骨颈骨缺损修复的作用。
方法:取12只兔制作双侧股骨颈骨缺损模型,采用自体配对对比,左侧为对照侧不对骨缺损做任何处置,右侧为实验侧植入含有肝细胞生长因子的半合成细胞外基质样水凝胶。
结果与结论:苏木精-伊红染色见2周时实验侧缺损修复区血管分布较对照侧均匀;4周时实验侧缺损区均匀填充新生骨小梁,而对照侧由外向内骨小梁形成减少;8周时实验侧缺损区皮质骨形成,并且骨髓腔再通,有骨髓细胞填充,对照侧仍有粗大骨痂填充缺损区,堵塞髓腔。钼靶X射线观测到8周时,实验侧难以区分正常骨质与新生骨质交界线,而对照侧缺损区与周围骨质分界明显。证实含有肝细胞生长因子的半合成细胞外基质样水凝胶可以促进家兔股骨颈部骨缺损的骨组织修复。 -
鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用
背景:胶原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。
目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。
方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2诱导。24 h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT 比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL 法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot 检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。
结果与结论:两组培养皿中,随着过氧化氢浓度的增高,均可见细胞凋亡状态明显加重,细胞存活率及细胞内过氧化氢活力明显下降,细胞凋亡率及细胞内丙二醛水平明显增高,Bcl-2/Bax比值显著降低,呈剂量依赖性。而在相同浓度过氧化氢诱导下,与对照组相比,实验组细胞凋亡状态明显减弱,细胞存活率、超氧化物歧化酶活力及Bcl-2/Bax比值增高,细胞凋亡率和丙二醛水平明显减低。表明鼠尾胶原对过氧化氢所致的心肌细胞氧化损伤具有保护作用,其机制可能与提高超氧化物歧化酶活力,减少丙二醛产生及提高Bcl-2的表达有关。 -
自产氧型人发角蛋白/丝素蛋白复合材料体外制备及生化评估
背景:组织工程修复重建材料的研究已开始逐步进入到所谓的智能化阶段,其意味着相关生物材料将被赋予更多的功能。如果能够使生物材料在体内外能够释放氧气,可明显提升材料在修复组织缺损方面的成功率,但目前在仅有的蛋白源性生物材料的相关研究中尚未见到有类似自产氧功能的成功报道。
目的:观察自产氧型人发角蛋白/丝素蛋白复合材料的制备技术并评估其理化及生物学特性。
方法:人发及蚕丝中分别提取人发角蛋白及丝素蛋白,按固定浓度比例(60/40)将两种蛋白进行混合,并加入不同比例(5%-25%)的过氧化钙。对终制备完成的复合材料进行释氧能力测试筛选出佳的过氧化钙浓度组合,采用力学拉伸法测试终复合材料的生物力学特性,红外光谱法检测复合材料蛋白空间结构变化。兔皮下埋植复合材料观察其生物相容性,并于体外接种平滑肌细胞以观察支架对细胞增殖的影响。
结果与结论:经过提取纯化技术,人发角蛋白及丝素蛋白浓度及纯度达到满足后续实验水平。释氧能力测试显示,当过氧化钙浓度为20%时,支架材料的释氧时间长(P <0.05),且后期释氧水平较为平稳。力学拉伸测试显示,添加过氧化钙后,其复合材料的生物力学强度较少受到影响,尤其是大应力及断裂伸长率方面和未加入过氧化钙的复合材料差异无显著性意义(P >0.05)。红外光谱法检测结果显示,复合材料各蛋白组分的空间结构基本不受影响。动物皮下埋植实验显示复合材料具有较为理想的生物相容性及降解速率。体外细胞增殖实验显示,含有过氧化钙的复合材料在体外能够更好的支持接种其上的细胞生长。结果证实,利用过氧化钙可对现已报道的人发角蛋白/丝素蛋白复合材料进行进一步的改良,使其具备长期释氧的能力,因而能够更适合后续的组织工程修复重建的基础研究及临床应用需要。 -
胶原补片上生长因子释放及对人骨髓干细胞增殖与分化的影响
背景:动物实验证明心肌细胞移植可改善心脏功能,但移植细胞效率较低,为减少移植细胞的流失,构建合适的移植载体与细胞共同移植于受体心脏已成为学界的共识。
目的:观察经碳化二亚胺法处理,共价结合生长因子胶原补片上生长因子的释放情况,以及其对人骨髓干细胞增殖与分化的影响。
方法:采用碳化二亚胺法将胶原补片激活后,对照组胶原补片直接保存于PBS内,实验组胶原补片继续浸于含有血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的PBS内,使其与生长因子共价结合,检测共价结合于胶原补片上生长因子的量;保存后1 d、3 d、7 d、2周、3周、4周,采用ELISA法检测上清液内血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的含量。将0.5×106的人骨髓间充质干细胞均匀接种于两组补片上,采用苏木精-伊红染色计数细胞,MTT法及Brdu增殖实验对比补片上的细胞增殖情况;以RT-PCR法检测两组细胞内Ⅰ、Ⅲ型胶原表达情况,SMA免疫荧光染色对比两组补片上的细胞分化情况。
结果与结论:胶原补片上血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的共价结合率分别为42.4%,24.5%。保存4周内,胶原补片上的血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子均呈现持续、缓慢的释放模式。与单纯胶原补片比较,共价结合生长因子的胶原补片可在体外有效促进人骨髓间充质干细胞的增殖并抑制其分化。 -
凝胶型胶原敷料修复糖尿病皮肤缺损及促进血管再生
背景:胶原已经被证实能够促进受损组织创面的修复,加速创面愈合。
目的:观察凝胶型活性胶原敷料对糖尿病皮肤缺损愈合的影响,以及在促进毛细血管再生方面的作用。
方法:取SD大鼠160只,其中40只为正常对照,另120只腹腔注射链脲佐菌素制作糖尿病模型。造模9周后将120只大鼠随机均分为模型组、阳性对照组、实验组,连同正常对照组在大鼠背部制作全层皮肤缺损创面,正常对照组和模型组创面外敷灭菌凡士林,实验组外敷凝胶型胶原敷料,阳性对照组外敷重组人表皮生长因子凝胶,观察各组创面愈合面积及毛细血管新生情况。
结果与结论:给药第1周,除正常对照组动物愈合较快外,其余各组动物创面愈合速度差异不大;给药第2周,正常对照组愈合速度快,阳性对照组、实验组创面未愈合面积小于模型组;给药第3周,正常对照组及实验组创面未愈合面积小于模型组和阳性对照组;给药第4周,正常对照组及阳性对照组未愈合面积小于模型组和实验组;并且实验组给药第2,3周的创面愈合效果好于阳性对照组。实验组给药第1,2,3周的毛细血管数均多于其余3组。结果表明凝胶型胶原敷料可促进糖尿病缺损创面愈合速度并提高愈合质量。 -
聚羟基脂肪酸酯和聚酰胺-胺树状高分子构筑的经皮给药系统
背景:聚羟基脂肪酸化合物具有黏着性及与药物分子混合、分散的特性,可作为体外给药剂型的基质;树状高分子具有独特的物理、化学性质,能够作为药物的载体。
目的:将聚羟基脂肪酸化合物与聚酰胺-胺树状高分子混合,构筑能够促进难溶型药物的透皮的经皮给药系统。方法:将恶臭假单胞菌 KT2442在含有NH4Cl的培养基中30℃培养72 h,然后在培养体系中添加5 g/L辛烷酸培养24 h,用氯仿抽提聚羟基脂肪酸化合物。各取10 mg聚羟基脂肪酸化合物基质与含聚酰胺-胺与苯乙胺树状高分子的聚羟基脂肪酸化合物基质,分别与5 mg磺酰胺衍生物Tamsulosin混合,构建经皮给药系统;同时构建体外渗透研究装置,研究基质促进药物渗透的效果。X射线衍射分析Tamsulosin、聚羟基脂肪酸化合物基质、基质聚羟基脂肪酸化合物-Tamsulosin 及含聚酰胺-胺树状高分子聚羟基脂肪酸化合物基质-Tamsulosin的内部原子空间分布状况。
结果与结论:聚羟基脂肪酸化合物及聚羟基脂肪酸化合物与聚酰胺-胺树状高分子的混合物都能作为经皮给药的基质,促进难溶药物的透皮作用;并且在相同的条件下,聚羟基脂肪酸化合物与聚酰胺-胺树状高分子的混合物作为基质的经皮给药系统能够满足药物的临床血药浓度。聚羟基脂肪酸化合物与聚酰胺-胺树状高分子的混合物能够使模型药物很好地晶体化并呈现高度有序的方向性。 -
仿生组装淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石骨修复材料的体外释药行为
背景:淫羊藿苷性质稳定,可促进成骨细胞的增殖,可作为一种骨诱导活性因子用于骨组织工程的研究。目的:探讨淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石骨修复材料的体外释药行为。
方法:将载药量分别为10-7,10-6,10-5 mol的淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石材料置于盛有PBS的密闭玻璃离心管中,37℃恒温振荡,分别于1,2,3,10,15,20,30,60,90 d定时收集全部溶液进行超高效液相色谱检测。通过精密度实验、重复性实验、加样回收率实验、稳定性实验考查实验方法的精密度、灵敏度和淫羊藿苷的稳定性,通过标准曲线换算供试品每次释药量,并将其进行累积绘制成释药曲线,采用Logarithmic模型对释药行为进行曲线拟合。
结果与结论:实验方法的精密度、准确度与重复性良好;淫羊藿苷性质稳定,可在室温避光的环境下保存至少90 d;在1-2000 ng质量范围内,淫羊藿苷的色谱峰面积与进样量之间呈良好的线性关系。释药初期(0-3 d),药物从支架材料中突释,约达载药量的25%,而后释药速度迅速下降,至第20天有40%-60%的药物释出,之后以低速持续释放,90 d后仍有部分药物存留于支架材料中。3种载药量淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石材料的释药行为遵循一级方程模型,所有模型均有统计学意义(P=0)。表明仿生组装淫羊藿苷-壳聚糖/羟基磷灰石骨修复材料对淫羊藿苷具有良好的控释效果,其体外释药行为符合一级方程。