中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
淫羊藿苷促进间充质干细胞成骨分化：为治疗骨缺损提供一个良好的方向
背景：近年来研究表明，淫羊藿苷能够促进间充质干细胞成骨分化，是一种良好的骨性诱导因子，给骨缺损的治疗提供了新的希望。
目的：综述近年来淫羊藿苷对骨组织代谢的药理作用及对间充质干细胞成骨分化影响的研究成果。
方法：由第一作者用中国知网数据库和PubMed数据库，检索词分别为“淫羊藿苷；干细胞；成骨”和“icariin，stem cel ，osteogenesis”，语言分别设定为中文和英文。纳入与“淫羊藿苷、干细胞、成骨”相关的研究。共检索到754篇文章，按纳入和排除标准文献进行筛选，共纳入41篇文章进行综述分析。结果与结论：淫羊藿苷是中国传统中药淫羊藿的主要成分，能够促进骨髓间充质干细胞成骨分化，是一种良好的骨性营养因子。近年来研究表明，淫羊藿苷亦可促进脂肪、脐带以及牙周膜等组织来源的间充质干细胞成骨分化，但是这类研究尚少。目前各间充质干细胞成骨实验效果欠佳，良好的骨性营养因子促进间充质干细胞体内成骨是一种较好的解决方法。因此，淫羊藿苷促进间充质干细胞成骨将可能为治疗骨缺损提供一个良好的方向。 -
从进化论角度探讨干细胞分化及其干细胞巢分布规律
背景：造血干细胞、神经干细胞和诱导多能干细胞等越来越多的干细胞被发现，目前尚未出现关于干细胞分类和干细胞分化的统一理论；造血干细胞巢、肠上皮干细胞巢和毛囊干细胞巢等越来越多的干细胞巢被发现，目前尚未出现公认的干细胞巢形成和分布的统一理论；20年过去了，“不同种类干细胞巢的有序分布构成中医经络系统”的观点未能得到干细胞研究者(特别是中国的)重视。
目的：从进化论角度探讨干细胞分化及其干细胞巢分布规律。
方法：参阅《黄帝内经》等中医经典理论著作和人体解剖学著作，再一次从中医经络学说方向阐明干细胞巢在组织中的分布规律。参阅现代动物分类学著作，根据生物重演律、物种进化树和中医经络学说等探讨干细胞分化的规律。
结果与结论：高等动物胚胎发育的三胚层阶段以极其简洁的方式直接跨越其无脊椎动物祖先的演化史，生物重演律描述的基本对象首先应该是两条干细胞分化链C11→C132→C164→C1448→C1448×C1n=C1448n(n≤7)和C11→C17→C1448(n≤7)和经络系统中干细胞巢分布的演变。现今公认的物种进化树将后口动物的祖先设想为某种原始两侧对称动物是完全错误的，从干细胞分化角度来看违背了达尔文进化论原理，物种进化树不可能分叉形成顶部互不相干的两大分支--原口动物和后口动物，蟑螂、矛尾鱼和银杏等不可能是活化石，物种的起源是多源的，物种的进化是多层次波浪式向前推进。 -
骨髓间质干细胞减轻收缩期高血压的心肌损伤
背景：研究发现骨髓间质干细胞可以用于多种损伤性疾病的治疗，但关于骨髓间质干细胞治疗收缩期高血压的研究不多。
目的：探讨骨髓间质干细胞对收缩期高血压大鼠的治疗作用。
方法：24只大鼠等分为对照组、模型组和骨髓间质干细胞移植组。模型组和骨髓间质干细胞移植组采用维生素K和华法林纳制备单纯收缩期高血压大鼠模型。骨髓间质干细胞移植组大鼠左心室注射骨髓间质干细胞，模型组和对照组注射生理盐水。
结果与结论：与模型组相比，骨髓间质干细胞移植组大鼠的左心室质量指数降低，心脏组织中Ⅰ型胶原容积分数、胶原容积分数和血管周围胶原容积分数上升，但舒张末期容积/体质量比没有明显改变。表明骨髓间质干细胞移植治疗收缩期高血压大鼠能够改善大鼠的心肌肥厚状况，改善大鼠的心脏纤维化程度。 -
脂肪间充质干细胞移植联合人工虫草多糖改善肾病综合征的高凝血状态及肾功能
背景：临床上常将人工虫草多糖作为肾病综合征的辅助药。采用阿霉素建立SD大鼠肾病综合征模型是经典的实验性肾病综合征模型之一，该模型的临床表现及病理变化均类似于人类微小病变肾病。
目的：观察人工虫草多糖与脂肪间充质干细胞联合应用对肾病综合征大鼠肾功能及凝血的影响。
方法：体外培养脂肪间充质干细胞制备细胞悬液，并对悬液进行PKH26标记。50只SD大鼠随机取10只为正常组(不予任何处理)，余40只SD大鼠静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型，随机均分为4组，模型组不作处理；脂肪间充质干细胞组尾部静脉注射脂肪间充质干细胞连续3d；人工虫草多糖组灌胃人工虫草多糖连续12周；联合组连续3 d尾静脉注射干细胞，同时灌胃人工虫草多糖连续12周。实验12周测定各组大鼠24 h 尿蛋白定量、血清血脂指标、肌酐、尿素氮及凝血指标变化；光镜下观察双肾组织病理学变化；荧光显微镜观测PKH26标记的脂肪间充质干细胞存活及分布情况，采用RT-PCR技术检测肾组织中Hpa基因表达情况。
结果与结论：①检测指标：脂肪间充质干细胞组、人工虫草多糖组及联合组的24 h 尿蛋白定量及血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、肌酐、尿素氮水平均明显低于模型组(P<0.05)，而血清总蛋白、白蛋白、高密度脂蛋白水平则明显高于模型组(P<0.05)。联合组各项指标与脂肪间充质干细胞组及人工虫草多糖组比较，差异有显著性意义(P<0.05)；②血液高凝状态：脂肪间充质干细胞组、人工虫草多糖组大鼠的血液高凝状态较模型组明显缓解，联合组进一步缓解(P<0.05)；③双肾组织病理变化：联合组的双肾组织病理改善情况明显优于脂肪间充质干细胞组和人工虫草多糖组，脂肪间充质干细胞组和人工虫草多糖组较模型组稍有改善，但不及联合组；④荧光显微镜观测PKH26标记的脂肪间充质干细胞：联合组多于脂肪间充质干细胞组及人工虫草多糖组；⑤Hpa基因表达：模型组较正常组明显增加，脂肪间充质干细胞组、人工虫草多糖组较模型组减少，联合组明显减少(P<0.05)；⑥结果提示，脂肪间充质干细胞移植联合人工虫草多糖能够改善肾病综合征大鼠的肾功能及血液高凝状态，减轻肾组织的病理学损害。 -
骨髓间充质干细胞调节心脏移植大鼠的免疫功能
背景：心脏移植是治疗终末期心力衰竭等疾病的有效手段，但移植后容易出现免疫排斥反应，严重影响到移植效果。
目的：探讨骨髓间充质干细胞对心脏移植大鼠免疫功能的调节作用。
方法：Lewis大鼠20只作为供体，Wistar大鼠20只作为受体，采用套管法建立大鼠颈部心脏移植模型。模型制备后，20只Wistar大鼠随机分为细胞移植组与空白对照组，每组10只。心脏移植后48 h，细胞移植组经尾静脉注射骨髓间充质干细胞悬液1 mL(细胞浓度为2×108 L-1)，空白对照组经尾静脉注射等量的生理盐水注射液。细胞移植后7 d，ELISA法检测血清白细胞介素2、白细胞介素10水平，流式细胞术检测大鼠静脉血中CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、CD4+CD25high、CD4+CD25high Foxp3+T细胞百分含量，获取心肌组织进行病理学观察。
结果与结论：①细胞移植组心脏存活时间显著长于空白对照组(P<0.05)；②两组血清白细胞介素2水平差异无显著性意义(P>0.05)，细胞移植组血清白细胞介素10水平显著高于空白对照组(P<0.05)；③细胞移植组CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25high、CD4+CD25high Foxp3+T细胞占总淋巴细胞的比例均显著高于空白对照组(P<0.05)，CD8+T细胞占总淋巴细胞的比例显著低于空白对照组(P<0.05)；④细胞移植组心肌组织中有少量淋巴细胞浸润，心肌间质可观察到轻微出血和水肿，较空白对照组炎性反应程度较轻；⑤结果表明，对心脏移植大鼠实施骨髓间充质干细胞治疗可以有效减轻排斥反应。 -
高压氧对慢性应激抑郁模型大鼠行为及神经干细胞移植的影响
背景：高压氧治疗缺血缺氧性疾病的效果已得到公认，但需要与其他手段进行联合治疗。目的：观察高压氧联合神经干细胞移植治疗大鼠慢性应激抑郁的效果。
方法：将60只SD大鼠随机分为4组，正常组不进行任何处理；神经干细胞组、联合组、模型组建立慢性应激抑郁模型。造模成功后24 h，联合组尾静脉注射神经干细胞悬液1 mL(细胞数3×106)，同时给予高压氧治疗，4次/d，持续1周；神经干细胞组尾静脉注射神经干细胞悬液1 mL(细胞数3×106)。造模成功后72 h，TUNEL法测定神经细胞凋亡情况；治疗后2周，观察神经干细胞的存活和分布情况，尼氏染色法检测大鼠海马神经元形态；治疗后1，2周，进行体质量测量、蔗糖水消耗实验；治疗后5 min内进行旷场实验，观察大鼠行为学改变。
结果与结论：①与正常组比较，模型组大鼠体质量、蔗糖水消耗量、矿场实验垂直直立次数与水平运动距离明显减少(P<0.05)，神经细胞凋亡数量明显增加(P<0.05)；②与模型组比较，神经干细胞组、联合组大鼠体质量、蔗糖水消耗量、矿场实验垂直直立次数与水平运动距离明显升高(P<0.05)，神经细胞凋亡数量明显减少(P<0.05)，联合组的效果优于神经干细胞组(P<0.05)；③联合组移植神经干细胞存活数量明显多于神经干细胞组(P<0.05)；④模型组神经元数目相对较少，结构不完整；神经干细胞组及联合组神经元数目多，结构完整；联合组神经元数目较神经干细胞组多，但少于正常组；⑤结果表明，神经干细胞联合高压氧可改善慢性应激抑郁模型大鼠的抑郁行为及海马神经元凋亡情况。 -
复合骨髓间充质干细胞生物学特性及修复皮肤缺损
背景：组织工程皮肤是利用来源于肢体或异体的皮肤细胞，选择合适的生物材料直接进行复合，在体外构建皮肤类似物，并将其移植到缺损的皮肤创面，加速缺损皮肤修复，能巧妙的解决皮肤不足等问题。目的：分析复合骨髓间充质干细胞生物学特性，探讨复合骨髓间充质干细胞在皮肤缺损修复中的应用效果。
方法：28只SPF级SD大鼠，随机分为2组，每组14只。调节温度、时间、压力以及面积的数控电烫仪，建立大鼠皮肤烫伤缺损模型，复合骨髓间充质干细胞组采用复合骨髓间充质干细胞进行修复，凡士林油修复组采用凡士林纱布覆盖进行修复，比较两组大鼠修复效果。
结果与结论：①复合骨髓间充质干细胞培养72 h后细胞分散分布，外形为小圆形；培养5 d后细胞开始伸展，细胞形态不稳定，传代第3代后细胞形态趋于稳定。抗原鉴定显示：复合骨髓间充质干细胞中存在CD44以及CD29表达，CD45以及CD34表达较低；②复合骨髓间充质干细胞组大鼠修复28 d后创面基本愈合并未见明显瘢痕；凡士林油修复组修复28 d后创面愈合，但是创面存在创面存在少量的收缩，瘢痕明显；凡士林油修复组创面处皮肤表皮相对较厚，基底层与真皮层交接局部连接效果欠佳。复合骨髓间充质干细胞组表皮细胞分层明显，排列相对比较整齐，且表皮与真皮连接比较紧密；③结果提示：分离鉴定的细胞为复合骨髓间充质干细胞，较容易获得。该细胞修复皮肤缺损效果理想，能促进皮肤缺损部位的早期愈合，改善缺损部位血液循环，具有较高的临床应用价值。 -
过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤
背景：为解决骨髓间充质干细胞体内分化效率低的问题，拟联合Shootin1基因修饰，希望能有效提高脊髓损伤区内骨髓间充质干细胞神经分化的能力，增加细胞移植治疗脊髓损伤的效果。
目的：探讨过表达Shootin1的骨髓间充质干细胞移植修复脊髓损伤模型大鼠的神经再生能力。
方法：①通过腺病毒转染48 h，使骨髓间充质干细胞过表达Shootin1；②在体外进行神经诱导分化，免疫荧光检测神经巢蛋白(Nestin)与神经元特异性核蛋白(NeuN)的表达；③运用改良Al en 撞击装置制备脊髓撞击损伤模型，造模后半小时在蛛网膜下腔注射Shootin1转染的骨髓间充质干细胞和未转染骨髓间充质干细胞，脊髓损伤对照组仅进行脊髓损伤手术。脊髓损伤5周后取脊髓样本进行冰冻切片检测神经相关标记。结果与结论：①腺病毒转染48 h，免疫荧光与Western Blot检测骨髓间充质干细胞内已成功表达Shootin1蛋白；②体外神经诱导分化7 d，3组细胞形态上均发生了变化，Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组Nestin与NeuN的表达差异不明显；③脊髓撞击损伤大鼠体内实验发现，与对照组相比，细胞移植组BBB评分增高。移植Shootin1转染的骨髓间充质干细胞组和未转染骨髓间充质干细胞组均有Nestin，NeuN，GFAP，MAP-2，ChAT，SYN表达的升高，神经再生能力增强。④实验再次认证了骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的显著性效果，Shootin1蛋白对脊髓损伤后的神经再生及神经功能性恢复起到一定作用，但其对于骨髓间充质干细胞直接移植来说修复差异仍不太明显，优化骨髓间充质干细胞对脊髓损伤的治疗仍需进一步研究。 -
同种异体骨髓间充质干细胞移植在心肌梗死后心室重建中的作用
背景：心肌梗死会导致心肌出现缺血性改变，引发心室重构的出现，成为导致死亡的重要原因。心肌梗死在中老年群体中多发，但患者自体骨髓间充质干细胞的增殖、分化能力较弱，为此需要积极的尝试予以同种异体干细胞移植，以获得更好的治疗效果。
目的：探讨同种异体骨髓间充质干细胞移植在心肌梗死后心室重建中的作用机制。
方法：取10只SD乳鼠与10只SD大鼠，进行骨髓间充质干细胞分离培养与鉴定。另取40只SD大鼠，随机分为4组，每组10只。模型组和乳鼠骨髓间充质干细胞移植组、大鼠骨髓间充质干细胞移植组均制备心肌梗死模型，假手术组予以假手术处理，造模后2个干细胞移植组分别予以相应的干细胞移植治疗。术后4周，检测各组大鼠的心功能；收集心脏组织标本，检测心脏梗死区胶原变化及梗死区血管密度。
结果与结论：①心功能指标：术后4周，模型组各项指标与其他3组比较差异均有显著性意义(P<0.05)；乳鼠骨髓间充质干细胞移植组和大鼠骨髓间充质干细胞移植组各组指标均优于模型组，但2组间差异无显著性意义(P>0.05)；②心肌梗死区胶原含量：术后4周，模型组梗死区可观察到存在大量胶原组织形成，乳鼠骨髓间充质干细胞移植组和大鼠骨髓间充质干细胞移植组的胶原组织明显减少(P<0.05)；③心肌梗死区血管密度：术后4周，假手术组梗死区血管密度均显著大于其他各组(P<0.05)，乳鼠骨髓间充质干细胞移植组、大鼠骨髓间充质干细胞移植组梗死区血管密度均显著大于模型组(P<0.05)；④结果表明，心肌梗死后实施成年鼠、乳鼠同种异体骨髓间充质干细胞移植均可以有效改善大鼠心功能，减少心肌梗死区胶原的形成，延缓梗死后心室重构。 -
盐霉素联合脐血间充质干细胞干预对乳腺癌MCF-7细胞的影响及作用机制
背景：间充质干细胞分泌的因子所形成的的微环境能够抑制肿瘤细胞的恶性增殖，而盐霉素也对肿瘤细胞生长有抑制作用。
目的：探讨盐霉素联合脐血间充质干细胞干预对乳腺癌MCF-7细胞的影响及作用机制，为乳腺癌的治疗寻找新的靶点和治疗策略。
方法：选取对数生长的MCF-7乳腺癌细胞，将其随机分为对照组、脐血间充质干细胞组及联合组。对照组细胞不做任何处理，干预组加入脐血间充质干细胞悬液，联合组细胞同时加入脐血间充质干细胞悬液和盐霉素。
结果与结论：干预48 h后，与对照组及脐血间充质干细胞组相比，联合组乳腺癌MCF-7细胞的增殖与侵袭能力抑制作用更为明显；细胞中POSTN蛋白的表达水平也较低。提示脐血间充质干细胞与盐霉素联合干预能有效抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖与迁移，为乳腺癌的治疗提出一种新的治疗方法。 -
人脐带间充质干细胞移植治疗急性肺损伤
背景：研究发现，人脐带间充质干细胞可通过减轻炎症损害改善肺通气功能。
目的：观察人脐带间充质干细胞移植治疗急性肺损伤的效果。
方法：将30只SD大鼠随机分为3组，正常组不做任何处理；模型组、实验组通过向气管内滴注脂多糖建立急性肺损伤模型，成功造模1 h 后，实验组于气管内滴注第4代人脐带间充质干细胞悬液0.1 mL(含细胞1×106)，正常组及模型组气管内滴注等量生理盐水。细胞移植后24 h，检测血清中白细胞介素1、白细胞介素8水平，苏木精-伊红染色观察大鼠肺组织病理改变，检测大鼠肺组织干湿质量比。
结果与结论：①与正常组比较，模型组白细胞介素1、白细胞介素8水平及肺组织干湿质量比显著升高(P<0.05)；与模型组比较，实验组白细胞介素1、白细胞介素8水平及肺组织干湿质量比显著降低(P<0.05)；②正常组肺泡腔结构清晰，肺泡间隔完整；模型组肺泡间隔明显增厚，肺毛细血管出现充血、水肿，肺毛细血管及肺泡腔可见大量炎性细胞浸润，部分肺泡内可见有富含蛋白质的水肿液，肺泡腔内广泛透明膜形成；实验组肺泡结构基本清晰，肺泡间隔较厚，肺间质内有红细胞及少量炎性细胞浸润漏出；③结果表明，人脐带间充质干细胞移植治疗急性肺损伤，可降低炎症因子水平、减轻肺损伤。 -
移植不同剂量脐带间充质干细胞提高老年痴呆大鼠学习记忆能力的比较
背景：移植有活力、分化能力强的干细胞修复神经组织来延缓老年痴呆症的发病进程是研究人员的重要目标。
目的：探讨不同剂量脐带间充质干细胞移植对老年痴呆大鼠学习记忆能力的影响。
方法：选取50只7月龄SD大鼠随机分为正常组、模型组以及高、中、低剂量脐带间充质干细胞移植组，每组10只。模型组和移植组腹腔注射D-半乳糖150 mg/kg建立老年痴呆模型，正常组腹腔注射生理盐水，连续90 d。收集第3代脐带间充质干细胞，以低、中、高3个剂量(1×105/0.2 mL/20 g、5×105/0.2 mL/20 g、1×106/0.2 mL/20 g)通过尾静脉进行移植，移植45 d后，Morris水迷宫实验检测其学习记忆能力，苏木精-伊红染色观察大鼠脑海马CA1区的病理变化。
结果与结论：①与正常组比较，模型组大鼠学习记忆能力明显降低；与模型组比较，细胞移植中剂量组水迷宫逃避潜伏期显著缩短(P<0.05)，穿越平台次数显著增加(P<0.05)；②模型组脑海马CA1区细胞排列紊乱，核仁不清，部分细胞浓缩深染；移植中剂量组细胞排列整齐，核仁明显，染色质分布均匀，个别细胞深染；③结果表明，中剂量的脐带间充质干细胞移植能增强老年痴呆大鼠的学习记忆能力。 -
5-氮胞苷诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化中的作用
背景：骨髓间充质干细胞在体外经5-氮胞苷诱导后可分化为心肌样细胞这一研究成果使细胞移植治疗心脏疾病成为可能。
目的：探讨不同浓度5-氮胞苷在大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化中的诱导作用。
方法：取第3代骨髓间充质干细胞，分别采用含0，5，10，20μmol/L 5-氮胞苷的DMEM培养液孵育24 h，去除诱导培养液，用含体积分数为5%胎牛血清的LG-DMEM培养28 d，采用免疫细胞化学方法检测心肌肌钙蛋白I表达。
结果与结论：①第3代骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷诱导24 h后出现细胞死亡现象。5，10μmol/L 5-氮胞苷组细胞死亡相对较少，20μmol/L 5-氮胞苷组细胞死亡较多；②5μmol/L 5-氮胞苷组肌钙蛋白I染色阳性率显著低于10μmol/L 5-氮胞苷组和20μmol/L 5-氮胞苷组(P<0.05)，10μmol/L和20μmol/L 5-氮胞苷组肌钙蛋白Ι阳性率差异无显著性意义(P>0.05)；③结果表明，5-氮胞苷可以在体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化，且10μmol/L 5-氮胞苷诱导效果较好。 -
冠心病与非冠心病患者骨髓间充质干细胞基本生物学特性比较
背景：不同类型心脏病患者机体的差异是否会影响干细胞的特征和表现尚不清楚。目的：探讨不同类型心脏病患者骨髓间充质干细胞基本生物学特性。
方法：纳入27例冠心病患者与20例非冠心病患者，收集胸骨骨髓液采用密度梯度离心法进行骨髓间充质干细胞体外培养，观察两组细胞的形态，流式细胞术鉴定CD13、CD34、CD44、CD45、CD54、CD106阳性表达率，MTT 法检测细胞生长增殖情况，描绘两组细胞的生长曲线。
结果与结论：①两组患者骨髓间充质干细胞均呈现出长梭形纤维状，形态无明显差异；②两组患者骨髓间充质干细胞CD34、CD455阳性表达率均小于3.0%，CD13、CD44阳性率均大于95.0%。非冠心病组CD54、CD106阳性表达率显著低于冠心病组(P<0.05)；③两组细胞的体外生长曲线基本一致，非冠心病组的增长速度略快，但与冠心病组比较差异无显著性意义；④结果表明，不同类型心脏病患者的骨髓间充质干细胞形态和增殖情况均无明显差异，但是与功能相关的某些蛋白表达存在一定的差异。 -
小分子药物Kartogenin诱导骨髓间充质干细胞定向分化中基质金属蛋白酶2的表达
背景：体外实验发现小分子药物Kartogenin(KGN)能诱导间充质干细胞转变成为软骨细胞，KGN的发现为人们找到了修复软骨的新途径，未来很有希望成为新型骨关节炎治疗药物。
目的：通过体外实验观察小分子药物KGN 在骨髓间充质干细胞定向分化为软骨细胞的过程中的诱导作用。
方法：体外传代培养人骨髓间充质干细胞至对数生长期，分为空白对照组、1μmol/L KGN组和10μmol/L KGN组，3组KGN的终浓度分别为0，1和10μmol/L，培养72 h后通过显微镜检骨髓间充质干细胞的增生和分化情况，用酶联免疫吸附实验检测上清中软骨代谢降解标记物基质金属蛋白酶2水平，用免疫荧光染色技术观察Ⅱ型胶原蛋白表达情况。
结果与结论：镜检发现随着KGN药物浓度的增高能明显促进骨髓间充质干细胞的增生和分化；免疫荧光染色结果显示随着KGN浓度的增高Ⅱ型胶原蛋白的表达增加；而随着KGN药物浓度增加，基质金属蛋白酶2的表达随之降低。提示小分子药物KGN能诱导人骨髓间充质干细胞向软骨细胞定向分化，且随着药物浓度的增加，软骨细胞外基质的破坏也随之被抑制。 -
酶消化法和组织块法培养心肌干细胞的比较
背景：目前国内动物研究中提取心肌干细胞方法不统一，分离培养及提纯未形成规范化的流程。目的：探讨酶消化法和组织块法培养大鼠心肌干细胞的差异。
方法：取清洁级1 d龄SD大鼠心脏组织，分为组织块组与酶消化组，分别使用酶消化法和组织块法体外培养心肌干细胞。
结果与结论：酶消化法和组织块法均能培养出心肌干细胞，但组织块组培养的细胞中心肌干细胞比例显著高于酶消化组。提示在心肌干细胞培养过程中，组织块法优于酶消化法。 -
FAT10基因沉默对人食管癌细胞凋亡及肿瘤干细胞特性的影响
背景：人类白细胞抗原F介导转录因子10(human leukocyte antigen F-associated transcript 10，FAT10)在结肠癌等很多种肿瘤细胞中会发生高表达，但其与食管癌的关系报道较少。
目的：观察siRNA干扰技术沉默类泛素蛋白(FAT10)基因表达对人食管癌细胞EC9706细胞的侵袭、凋亡及及肿瘤干细胞特性的影响。
方法：根据FAT10 mRNA编码序列设计并合成干扰siRNA序列，瞬时转染EC9706细胞。将人食管癌细胞EC9706细胞分为3组，设FAT10 siRNA组，阴性对照组、空白对照组。用RT-PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测FAT10及bcl-2的表达；CCK-8法测定细胞体外增殖能力；流式细胞技术观察细胞凋亡及肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达；TUNEL染色检测各组细胞的的凋亡、细胞侵袭小室法检测各组细胞的体外侵袭力。
结果与结论：①RT-PCR和Western blot显示，FAT10 siRNA组较阴性对照组和空白对照组FAT10及bcl-2 mRNA和蛋白表达都明显下降(P<0.05)；②肿瘤干细胞标志物CD44+CD133+的表达比例显著降低(P<0.05)；③与阴性对照组和空白对照组相比，FAT10 siRNA组细胞的凋亡率明显升高(P<0.01)，增殖、侵袭力显著下降(P<0.05)。④结果表明，特异性沉默FAT10基因表达能够降低食管癌细胞的侵袭力，抑制细胞的增殖，促进bcl-2表达降低，使其凋亡显著增加，使具有CD44+CD133+肿瘤干细胞特性的细胞比例降低。 -
人脐带间充质干细胞分化胰岛样细胞过程中胰岛素和巢蛋白的表达
背景：国内外研究证实脐带间充质干细胞可定向诱导分化为胰岛样细胞，但分化过程中胰岛素与巢蛋白表达的变化等相关研究甚少。
目的：观察人脐带间充质干细胞向胰岛素样细胞分化过程中胰岛素与巢蛋白表达的变化。
方法：采用UltraCULTURE培养基在体外培养人脐带间充质干细胞，取培养的第3代细胞，按照两阶段诱导方案将其定向诱导分化为胰岛样细胞，第1阶段：在UltraCULTURE培养基中加入4 nmol/L 活化素A，25μg/L表皮生长因子，100μg/Lβ-神经生长因子，10 mmol/L尼克酰胺，诱导培养至14 d。第2阶段：在UltraCULTURE培养基中加入1%胰岛素-转铁蛋白-硒，10 mmol/L尼克酰胺，10μg/L碱性成纤维细胞生长因子，继续诱导培养14 d。在诱导分化过程中，采用流式细胞技术检测分化细胞巢蛋白及胰岛素的表达，双硫腙染色鉴定胰岛样细胞团中锌离子的表达。
结果与结论：①诱导分化为胰岛样细胞过程中胰岛素水平逐渐增高，至28 d达到较高水平，未诱导组胰岛素表达呈阴性；②诱导分化第14天，巢蛋白表达水平达到大，随着诱导时间延长表达水平逐渐下降；③脐带间充质干细胞诱导28 d形成胰岛样细胞团，双硫腙染色阳性；④实验将脐带间充质干细胞成功诱导分化为胰岛样细胞，并且随着定向分化细胞的变化，细胞胰岛素与巢蛋白表达水平也出现相应的变化。 -
人脐带间充质干细胞通过IL-6/STAT3信号通路促进肝癌HepG-2细胞的增殖
背景：人脐带间充质干细胞能分泌多种细胞因子，参与调控肿瘤的增殖、转移及血管生成等生物学行为，其中白细胞介素6可能是重要的炎性因子之一。
目的：探讨人脐带间充质干细胞通过IL-6/STAT3信号通路对肝癌HepG-2细胞增殖和迁移的作用。方法：采用ELISA法检测人脐带间充质干细胞和肝癌HepG-2细胞中白细胞介素6的表达量。Western blot法检测肝癌HepG-2细胞内STAT3以及p-STAT3蛋白质的表达水平。RT-PCR法检测PCNA、CyclinD1、Survivin、STAT3基因的转录水平。细胞计数法和CCK-8法检测肝癌HepG-2细胞的增殖能力。划痕实验和Transwell实验检测肝癌HepG-2细胞的迁移能力。
结果与结论：①人脐带间充质干细胞白细胞介素6表达量明显高于肝癌HepG-2细胞(P<0.05)；②人脐带间充质干细胞的条件培养基和白细胞介素6均能激活STAT3，白细胞介素6中和抗体则明显削弱了人脐带间充质干细胞条件培养基的激活作用；③用白细胞介素6中和抗体或AG490抑制STAT3的活性后，肝癌HepG-2细胞的增殖相关基因PCNA、CyclinD1、Survivin的mRNA表达水平明显下调，其增殖和迁移能力明显下降；④结果表明，人脐带间充质干细胞能分泌白细胞介素6激活STAT3信号通路促进肝癌HepG-2细胞的体外增殖和迁移。
