首页 > 文献资料
-
脐血干细胞移植与神经生长因子联合治疗小儿脑性瘫痪的安全性分析
背景：脐血干细胞移植联合神经生长因子治疗小儿脑性瘫痪是临床研究热点。目的：分析脐血干细胞移植联合神经生长因子治疗小儿脑性瘫痪疗效及安全性。方法：选取天津红桥医院儿科2011年11月至2013年2月收治的脑性瘫痪患儿80例，按治疗方法分别分为试验组(n=40)和对照组(n=40)，分别接受脐血干细胞移植与神经生长因子联合治疗和单独神经生长因子治疗。结果与结论：与治疗前相比，2组患儿治疗后脑性瘫痪综合功能评定表及粗大运动功能测量量表分值均有所提高(P<0.05)，且白细胞计数、中性粒细胞分数、总胆红素、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶明显升高(P <0.05)，且试验组患儿的治疗效果优于对照组(P <0.05)。所有患儿未见严重不良反应。说明脐血干细胞移植联合神经生长因子治疗小儿重症脑性瘫痪疗效显著，安全性高。
-
脐带间充质干细胞移植对不同证型系统性红斑狼疮患者的效果分析
背景：系统性红斑狼疮按中医辨证分为热毒炽盛等4个症型，治疗以补肾养阴，清化淤毒为主，但仍有许多患者治疗效果不佳。间充质干细胞具有多向分化、造血支持和免疫调节的功能，目前已有多项研究用于治疗难治性、复发性系统性红斑狼疮，取得良好疗效。目的：探讨脐带间充质干细胞移植对不同证型系统性红斑狼疮患者的疗效。方法：系统性红斑狼疮患者21例，经中医辨证分成热毒炽盛证、肝肾阴虚证、脾肾阳虚证及气滞血瘀证4型，分别统计患者脐带间充质干细胞移植前后各型的临床及实验室指标变化。结果与结论：脐带间充质干细胞移植1，3，6个月均可有效减少系统性红斑狼疮患者实验尿蛋白含量，降低系统性红斑狼疮疾病活动指数评分(P<0.01)。与移植前比较，移植脐带间充质干细胞后1，3，6个月可显著减少肝肾阴虚型患者尿蛋白含量(P <0.01)，移植后1，3个月对热毒炽盛及气滞血瘀型尿蛋白含量为轻度减少(P <0.05)，脾肾阳虚型患者在植后1个月时的尿蛋白含量轻度减少(P <0.05)。脐带间充质干细胞移植可提高所有中医分型患者的血浆白蛋白含量(P <0.01)，其中对热毒炽盛型效果稍差(P <0.05)。脐带间充质干细胞移植后各型患者外周血血小板有上升趋势，但与移植前相比差异无显著性意义。结果说明，脐带间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮有效，对不同症型的系统性红斑狼疮患者的疗效有一定的差异。
-
肌肉注射异种脐带间充质干细胞大鼠心肌肌钙蛋白I及血清相关因子的表达
背景：目前关于肌肉注射异种脐带间充质干细胞是否安全缺乏理论依据。
目的：观察异种脐带间充质干细胞肌肉注射对大鼠心肌血管内皮生长因子、肌钙蛋白I及血清血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子1和粒-巨噬细胞集落刺激因子表达的影响。
方法：正常Wistar大鼠分为6组，分别于大鼠四肢肌肉肌注磷酸盐缓冲液、DMEM液、培养人脐带间充质干细胞上清液、0.25×105，1.0×105和4.0×105人脐带间充质干细胞。4周后重复注射，8周后取血和心肌组织， ELISA法检测血清血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子1和粒-巨噬细胞集落刺激因子水平，免疫组化法检测大鼠心肌肌钙蛋白I及血管内皮生长因子表达情况。
结果与结论：肌注前后各组间大鼠血清血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子1和粒-巨噬细胞集落刺激因子水平差异无显著性意义(P>0.05)；同组大鼠肌注前后血清血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子1和粒-巨噬细胞集落刺激因子水平差异亦无显著性意义(P>0.05)。肌注后8周，各组大鼠肌钙蛋白I在心肌细胞胞浆中均匀分布且呈强阳性表达；血管内皮生长因子亦在心肌细胞胞浆中分布，但呈弱阳性表达；各组间大鼠心肌组织肌钙蛋白I及血管内皮生长因子水平比较差异无显著性意义(P>0.05)。提示肌注人脐带间充质干细胞或其培养上清液对正常大鼠血清血管内皮生长因子、肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、粒-巨噬细胞集落刺激因子水平及心肌组织肌钙蛋白I及血管内皮生长因子的表达无影响。 -
脐带间充质干细胞鞘内注射治疗脊髓小脑性共济失调
背景：脊髓小脑性共济失调是以小脑共济运动障碍为主要临床表现的遗传性变性疾病，迄今为止缺乏有效的药物治疗。目的：观察脐带间充质干细胞鞘内注射治疗脊髓小脑性共济失调的临床疗效。方法：38例脊髓小脑性共济失调患者给予脐带间充质干细胞鞘内注射治疗，1×106/(kg?次)，1次/周，4次为1个疗程。38例患者共接受52个疗程治疗，其中27例接受1个疗程治疗，8例接受2个疗程，3例接受3个疗程。采用世界神经病联合会国际合作共济失调量表(ICARS)对患者治疗前后神经功能进行评定，分值越高表示神经功能缺损越严重，采用日常生活能力量表(ADL)对患者治疗前后的日常生活能力量进行评估，分值越低，日常生活能力越强。治疗后对患者进行随访。结果与结论：38例脊髓小脑性共济失调患者52个疗程治疗总有效率为84.6%。治疗结束1个月与治疗前比较 ICARS及ADL评分均明显降低(P<0.01)。有效患者行走不稳、站立不稳、运动迟缓、上肢精细动作障碍、书写困难、构音障碍、眼球运动障碍等临床症状得到改善。治疗后常见的不良反应有头晕(1例)，腰痛(2例)，头痛(1例)，发热(2例)，均在1-3 d内消失。在中位随访39个月(11-59个月)治疗过程中，无治疗相关的不良反应发生。有效患者疾病稳定时间在1-19个月，平均(5.95±4.84)个月。结果表明脐带间充质干细胞鞘内注射治疗是安全的，可在一定时间内一定程度上改善脊髓小脑性共济失调患者的临床症状，延缓疾病进展，多疗程治疗有助于多数患者神经功能的进一步改善。
-
肌肉注射人脐带间充质干细胞健康大鼠心肌组织ki-67、phh3及cTnT的表达
背景：肌肉注射人脐带间充质干细胞是否会增加正常心肌细胞的再生能力，对正常心肌是否会产生不良影响，尚不明确。目的：观察肌肉注射人脐带间充质干细胞对健康Wistar大鼠心肌组织中ki-67、phh-3及cTnT表达的影响。方法：将60只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组，培养液组，上清液组，脐带间充质干细胞低、中、高剂量组，每组分别给予大鼠四肢肌肉注射不同液体，分别为：PBS、DMEM培养液、培养人脐带间充质干细胞的上清液、0.25×105人脐带间充质干细胞、1.0×105人脐带间充质干细胞、4.0×105人脐带间充质干细胞，间隔4周共注射2次，第8周处死大鼠，取心肌组织固定、包埋及切片，应用免疫组织化学方法检测大鼠心肌组织中ki-67、phh-3及cTnT的表达。结果与结论：正常组中ki-67在心肌组织细胞胞核呈阴性表达，phh3在心肌组织细胞胞核呈弱阳性表达，cTnT在心肌细胞胞浆中呈强阳性表达；与正常组相比，培养液组、上清液组及脐带间充质干细胞低、中、高剂量组间ki-67、phh-3及cTnT的表达差异无显著性意义(F=1.076、0.167及0.300；P>0.05)。提示经肌肉注射人脐带间充质干细胞或其培养上清液对健康Wistar大鼠心肌组织ki-67、phh-3及cTnT的表达无影响。
-
富血小板血浆及脐带间充质干细胞修复软骨损伤
背景：研究者直接将富血小板血浆作为支架材料与骨髓基质干细胞、软骨细胞等复合后体外培养发现软骨细胞在富血小板血浆三维支架呈现增殖生长，骨髓基质干细胞在增殖的同时有向软骨细胞分化的倾向。目的：观察富血小板血浆和人脐带间充质干细胞对受损软骨修复的影响。方法：正常健康新西兰大白兔40只，制备兔软骨损伤模型。2次离心法制备富血小板血浆，制备3代人脐带间充质干细胞。随机将动物分为4组，造模后生理盐水组关节腔一次性注入生理盐水0.5 mL；富血小板血浆组注入12.5%富血小板血浆0.5 mL；人脐带间充质干细胞组注入1×107人脐带间充质干细胞0.5 mL；富血小板血浆(12.5%)联合人脐带间充质干细胞(1×107)组注入两种物质0.5 mL。造模后第12周，大体观察软骨损伤修复情况；苏木精-伊红染色光镜下观察损伤部位细胞修复情况；根据O’Driscol组织学评分标准对造模后第12周切片进行组织学评分。结果与结论：软骨损伤后大体观察、苏木精-伊红染色组织学观察及组织学评分均显示富血小板血浆组、人脐带间充质干细胞组、富血小板血浆联合人脐带间充质干细胞组对软骨损伤的修复效果优于生理盐水组，差异有显著性意义(P<0.05)，富血小板血浆组、富血小板血浆联合人脐带间充质干细胞组的修复效果优于人脐带间充质干细胞组，差异有显著性意义(P<0.05)。结果说明富血小板血浆、人脐带间充质干细胞均能促进软骨损伤的修复，而且富血小板血浆、富血小板血浆联合人脐带间充质干细胞较单独应用人脐带间充质干细胞效果好。
-
脐带间充质干细胞移植急性脑创伤大鼠损伤区域微血管密度的变化
背景:脐带间充质干细胞是一种多能干细胞,能够减轻损伤区域的炎性反应,促进微血管再生.目的:探讨脐带间充质干细胞移植对急性颅脑创伤大鼠脑组织微血管密度的影响.方法:30只SD大鼠采用随机数字法分为3组:对照组(未损伤组)、脑创伤模型组和细胞移植治疗组,每组10只.采用自由落体方法复制颅脑创伤模型,经脑室途径输注脐带间充质干细胞1.5×106个.细胞移植后24 h进行神经损伤评分.细胞移植后14 d,采用免疫组化法检测受损脑组织附近微血管密度.结果与结论:①与脑创伤模型组比较,细胞移植治疗组微血管密度升高明显(P<0.05);②细胞移植治疗组神经损伤评分优于脑创伤模型组(P<0.05);③结果表明,脐带间充质干细胞移植治疗急性颅脑创伤大鼠,可有效改善脑损伤区域血管重建,促进受损脑组织神经功能恢复.
-
人脐带间充质干细胞治疗膝关节骨性关节炎的临床试验方案
背景:骨关节炎是一种严重危害人类健康的慢性骨关节疾病.细胞治疗骨关节炎近年来发展较快,并得到了广泛关注.脐带来源的间充质干细胞治疗骨关节炎既具有其他来源间充质干细胞扩增分化容易,具有抗炎和招募作用等优势,又具有细胞年轻化、获得量大、无伦理问题、取材过程无痛苦、高增殖特性、多能分化特性、低免疫源性、无致瘤性等特点,是目前临床细胞治疗常用的种子细胞.目的:拟利用同种异体脐带来源间充质干细胞治疗人膝关节骨关节炎,获得脐带来源间充质干细胞治疗骨关节炎的有效性和安全性数据,以期为干细胞治疗骨关节炎提供必要的理论基础和临床依据.方法:试验在中国北京市,北京大学人民医院关节病诊疗研究中心完成.在获得受试者的知情同意以及伦理委员会审批后(该试验前两部分均已注册(https://register.clinicaltrials.gov/),编号分别为 NCT03357770及NCT03358654,第三部分需要根据前两部分安全性评价后再行进行),按照既定的纳入/排除标准招募受试者.临床试验共分为3个部分:第一部分纳入3组受试者,每组3人,分别接受高、中、低3种等级的细胞剂量治疗,3组受试者在注射后进行随访,评价剂量限制性毒性,确立大耐受剂量.第二部分即单臂临床试验,继续招募9名受试者进行干预试验,注射剂量为第一步试验确定的高剂量,受试者在注射后进行随访,评价治疗的安全性及有效性.第三部分采用随机对照研究的试验设计,按照随机化的原则将受试者随机分为2组,每组7人,分别给予干细胞治疗和传统的透明质酸治疗,在试验期间,保证评价者盲、受试者盲以及干预者盲.在术后既定时间点进行随访,评价干预措施的安全性和疗效数据.主要终点是参考 NCI-CTCAE 标准,出现不明原因的局部及全身症状或死亡终止试验.预期结果:参考既往文献报道,经过该干预措施治疗后随访1至2年,受试者膝关节疼痛程度降低,关节功能评分提高,MRI检查见软骨缺损面积减小.预计试验时间共3年6个月.
-
人软骨细胞培养上清诱导脐血间充质干细胞向软骨细胞分化
背景：人脐血间充质干细胞作为软骨缺损修复的种子细胞日益受到关注，现有常用诱导方法无论是应用诱导培养基还是诱导因子，因其价格昂贵、用量大等因素限制了实际应用。
目的：验证人软骨细胞培养上清诱导人脐血间充质干细胞向软骨细胞分化的可行性。
方法：利用密度梯度离心法和贴壁培养法分离新生儿脐血，获取并培养人脐血间充质干细胞，流式细胞仪鉴定细胞表面抗原。切取股骨头置换或全髋关节置换患者透明软骨组织，体外分离培养软骨细胞，利用其培养上清培养人脐血间充质干细胞，培养2周后观察细胞表型外观变化，免疫组化染色检测Ⅱ型胶原表达结果。
结果与结论：密度梯度离心法与贴壁培养法可以分离获取人脐血间充质干细胞，流式细胞仪鉴定表面标记CD90，CD105高表达，不表达CD34，CD45。软骨细胞培养上清诱导2周后，人脐血间充质干细胞向多角形、圆形转变，Ⅱ型胶原免疫组化检测表达阳性。提示软骨细胞培养上清可诱导人脐血间充质干细胞表达Ⅱ型胶原，向软骨细胞分化。 -
脐带间充质干细胞联合番茄红素的抗衰老作用
背景：研究证实脐带间充质干细胞、番茄红素均有不同程度的抗衰老作用，而关于二者联合抗衰老作用的研究国内外研究甚少，目前基本处于空白状态。
目的：观察人脐带间充质干细胞联合番茄红素对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老作用。
方法：实验选用ICR小鼠，通过颈背部皮下注射D-半乳糖复制亚急性衰老小鼠模型，分为对照组、模型组、干细胞治疗组、番茄红素治疗组和干细胞联合番茄红素治疗组。实验8周后处死，测定各组小鼠血清、肝脏、脑组织中丙二醛含量及超氧化物歧化酶活性及皮肤中羟脯氨酸含量。
结果与结论：与对照组相比，模型组小鼠超氧化物歧化酶活性、羟脯氨酸含量降低，丙二醛含量升高，差异有非常显著性意义(P ≤0.01)。与3个治疗组相比，模型组超氧化物歧化酶活性、羟脯氨酸含量偏低，丙二醛含量偏高，且差异有显著性意义(P ≤0.05)，但模型组大脑中丙二醛含量与番茄红素治疗组差异无显著性意义(P>0.05)。3个治疗组相比，干细胞联合番茄红素治疗组中超氧化物歧化酶活性、羟脯氨酸含量较高、丙二醛含量较低，差异有显著性意义(P ≤0.05)。提示干细胞、番茄红素具有不同程度的抗衰老作用，且二者联合的抗衰老作用优于单独使用。 -
人脐带间充质干细胞对异位子宫内膜细胞增殖及凋亡的影响
背景：间充质干细胞可以分泌多种细胞因子和生长因子，促进周围细胞的存活，发挥旁分泌作用。目的：探讨人脐带间充质干细胞对异位子宫内膜细胞增殖及凋亡的影响。方法：分离培养人脐带间充质干细胞和异位子宫内膜细胞，以异位子宫内膜细胞单独培养作为对照组，人脐带间充质干细胞与异位子宫内膜细胞共培养作为观察组。培养24，48，72 h时采用MTT法检测异位子宫内膜细胞增殖情况，流式细胞仪检测异位子宫内膜细胞凋亡情况，RT-PCR检测异位子宫内膜细胞PTEN基因表达情况。结果与结论：与对照组比较，培养24，48，72 h时观察组异位子宫内膜细胞增殖受到显著抑制，亚二倍体峰占细胞总数的比例显著升高(P <0.05)。随着时间的推移，观察组细胞抑制率逐渐下降，各时间点比较差异有显著性意义(P均<0.05)。与同期对照组比较，观察组细胞PTEN基因表达显著上调(P <0.05)。培养48，72 h观察组细胞PTEN基因表达显著高于培养24 h (P <0.05)。以上结果表明人脐带间充质干细胞可以通过上调PTEN基因表达，抑制异位子宫内膜细胞增殖，并促进其凋亡。
-
胎儿脐血间充质干细胞治疗大鼠急性心肌梗死
背景：胎儿脐血间充质干细胞对病变心肌有修复和再生能力，胎儿脐血间充质干细胞移植是治疗心肌梗死的一种新途径。目的：探讨胎儿脐血间充质干细胞移植治疗大鼠心肌梗死的效果。方法：选取32只大鼠结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死动物模型，随机等分为移植组和梗死组，从胎儿脐血中分离培养脐血间充质干细胞，制备脐血间充质干细胞悬液，对移植组大鼠进行脐血间充质干细胞移植。结果与结论：胎儿脐血间充质干细胞在体外可以被成功分离培养；与梗死组相比，移植组大鼠心肌梗死边缘区的微血管密度、左室收缩末压、左室内压大上升和下降速率显著增加(P <0.05)，左室舒张末压显著下降(P <0.05)，心电图情况稍有好转。表明胎儿脐血间充质干细胞治疗心肌梗死大鼠可以促进心肌血管再生，改善心脏功能。
-
人端粒酶反转录酶基因修饰脐带间充质干细胞移植治疗急性肾损伤
背景：人端粒酶反转录酶(hTERT)是调控增殖及定向分化的首选生长因子之一，具有多重生物学效应，为建立基因工程的永生化干细胞系奠定了基础。目的：探讨人端粒酶反转录酶基因修饰脐带间充质干细胞移植对大鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤的治疗作用。方法：体外培养人脐带间充质干细胞，构建缺血再灌注诱导的大鼠急性肾损伤模型，建模后将大鼠随机分为3组：对照组尾静脉注射1 mL L-DMEM培养液；空载病毒组：尾静脉注射1 mL经空载病毒转染人脐带间充质干细胞悬液；hTERT转染组尾静脉注射1 mL经PLXSN-hTERT转染的人脐带间充质干细胞悬液。结果与结论：移植后第3，28天苏木精-伊红染色检查示hTERT转染组的肾小管损伤评分<空载病毒组<对照组(P <0.05)。移植后第28天，CM-Dil阳性细胞数为hTERT转染组>空载病毒组>对照组(P <0.05)。移植细胞后第1，3，14，28天血肌酐、尿素氮水平均为hTERT转染组<空载病毒组<对照组(P <0.05)。结果证实，hTERT基因修饰脐带间充质干细胞移植对大鼠急性肾损伤具有明显的修复作用。
-
人脐带间充质干细胞分化胰岛样细胞过程中胰岛素和巢蛋白的表达
背景：国内外研究证实脐带间充质干细胞可定向诱导分化为胰岛样细胞，但分化过程中胰岛素与巢蛋白表达的变化等相关研究甚少。
目的：观察人脐带间充质干细胞向胰岛素样细胞分化过程中胰岛素与巢蛋白表达的变化。
方法：采用UltraCULTURE培养基在体外培养人脐带间充质干细胞，取培养的第3代细胞，按照两阶段诱导方案将其定向诱导分化为胰岛样细胞，第1阶段：在UltraCULTURE培养基中加入4 nmol/L 活化素A，25μg/L表皮生长因子，100μg/Lβ-神经生长因子，10 mmol/L尼克酰胺，诱导培养至14 d。第2阶段：在UltraCULTURE培养基中加入1%胰岛素-转铁蛋白-硒，10 mmol/L尼克酰胺，10μg/L碱性成纤维细胞生长因子，继续诱导培养14 d。在诱导分化过程中，采用流式细胞技术检测分化细胞巢蛋白及胰岛素的表达，双硫腙染色鉴定胰岛样细胞团中锌离子的表达。
结果与结论：①诱导分化为胰岛样细胞过程中胰岛素水平逐渐增高，至28 d达到较高水平，未诱导组胰岛素表达呈阴性；②诱导分化第14天，巢蛋白表达水平达到大，随着诱导时间延长表达水平逐渐下降；③脐带间充质干细胞诱导28 d形成胰岛样细胞团，双硫腙染色阳性；④实验将脐带间充质干细胞成功诱导分化为胰岛样细胞，并且随着定向分化细胞的变化，细胞胰岛素与巢蛋白表达水平也出现相应的变化。 -
胰岛素促进脐带间充质干细胞成骨分化的作用
背景：如何有效快速的诱导脐带间充质干细胞成骨分化是当前干细胞研究的重点。既往研究表明生长因子如骨形成蛋白2对脐带间充质干细胞的分化有重要作用，但是生长因子费用较高，不利于普遍使用。胰岛素在细胞培养及诱导过程中广为使用，胰岛素对脐带间充质干细胞有何作用当前未见研究。目的：观察胰岛素对脐带间充质干细胞成骨分化的影响，探讨脐带间充质干细胞治疗糖尿病性骨折愈合延迟的可行性。方法：将第3代人脐带间充质干细胞分别接种于2个细胞培养瓶中，分为实验组与对照组。实验组加入10-7 mmol/L胰岛素的培养液，对照组未加胰岛素培养，采用细胞增殖活性检测试剂盒分别绘制两组细胞的增殖曲线来评价增殖能力，采用细胞碱性磷酸酶活性比色法定量检测碱性磷酸酶的活性，采用免疫细胞化学方法与实时荧光定量聚合酶链反应方法检测Ⅰ型胶原蛋白、mRNA的表达及骨钙素mRNA含量。结果与结论：诱导一两周后，同对照组相比，实验组脐带间充质干细胞的数量增加；胞内碱性磷酸酶的活性提高，Ⅰ型胶原蛋白 mRNA 表达和骨钙素mRNA含量增加(P <0.05)。结果说明胰岛素能够促进脐带间充质干细胞的增殖与成骨分化。
-
脐带和胚胎肝来源间充质干细胞生长特性的比较
背景：不同来源的干细胞具有不同的分子特征及生长特性，对疾病治疗的机制及效果可能会有所差异。目的：比较两种来源间充质干细胞的生物学特性。方法：分离培养人脐带源、胚胎肝来源的间充质干细胞，传至第5代时分别进行细胞形态观察，细胞群体倍增时间计算，细胞表面标志鉴定，诱导分化能力检测。另外将脐带源间充质干细胞继续培养至第10，15代，绘制生长曲线并计算细胞群体倍增时间。结果与结论：两种来源的间充质干细胞在对数生长期均为梭形，旋涡状生长，均具有成骨、成脂、成软骨分化的能力。两种间充质干细胞的生长曲线均为S形。第5代胎肝来源间充质干细胞的倍增时间为(34.37±0.31) h，脐带源间充质干细胞的倍增时间为(35.63±0.38) h，差异无显著性意义(P>0.05)。第10代和第15代脐带源间充质干细胞的倍增时间分别为(52.6±0.53) h和(53.27±0.92) h，与第5代比较差异有显著性意义(P<0.05)。结果可见两种来源间充质干细胞生物学特性基本相同，肉眼观察胎肝来源间充质干细胞比脐带源间充质干细胞形态稍小，增殖较快，但统计学上差异无显著性意义。
-
蛛网膜下腔阻滞不影响脐血单个核细胞向神经细胞的分化
背景：有学者认为麻醉状态可提高脐血采集分离质量，目前尚无蛛网膜下腔阻滞对脐血单个核细胞向神经干细胞及星形胶质细胞分化影响的研究。
目的：观察蛛网膜下腔阻滞对新生儿脐血单个核细胞向神经干细胞及星形胶质细胞方向分化的影响。
方法：选择顺产新生儿及蛛网膜下腔阻滞剖宫产新生儿脐血标本各20份，分别列为对照组及研究组，在胎儿娩出后抽取脐血分离接种脐血单个核细胞，并进行体外培养，每份标本常规培养3 d后分别进行非诱导分化培养和向神经细胞方向诱导分化培养。对培养前后细胞进行神经干细胞、星形胶质细胞标志性Nestin、GFAP抗原免疫组化鉴定。
结果与结论：蛛网膜下腔阻滞剖宫产新生儿脐血单个核细胞诱导分化培养后表达 Nestin、GFAP 抗原阳性细胞，与顺产新生儿比较差异无显著性意义(P >0.05)。结果显示蛛网膜下腔阻滞对新生儿脐血单个核细胞向神经干细胞及星形胶质细胞方向分化没有影响。 -
Wistar大鼠肌肉注射异种脐带间充质干细胞的安全性
背景：到目前为止，脐带间充质干细胞通过肌肉注射到体内后各器官的短期变化反应已有相关报道，但多次肌肉注射后，健康大鼠各器官远期变化的研究极少。
目的：观察大鼠肌肉注射异种脐带间充质干细胞的安全性。
方法：健康雄性SPF级Wistar大鼠60只随机均分为6组：正常组(肌肉注射脐带间充质干细胞的悬浮液--0.01 mol/L PBS)，培养液组(肌肉注射脐带间充质干细胞的培养液--DMEM培养液)，上清液组(肌肉注射培养脐带间充质干细胞的上清液)，脐带间充质干细胞注射低剂量组(肌肉注射脐带间充质干细胞0.25×105个)，脐带间充质干细胞中剂量组(肌肉注射脐带间充质干细胞1.0×105个)，脐带间充质干细胞高剂量组(肌肉注射脐带间充质干细胞4.0×105个)。每只大鼠四肢各注射0.2 mL，共0.8 mL，于实验第1周和第4周分别注射1次，注射前后留取空腹血作生化检查。实验第8周末解剖大鼠，作肝脏、肺脏、脑、脾脏、肾脏及注射部位肌肉病理切片。
结果与结论：所有大鼠肌肉注射前后的肝功、肾功，肝脏、肺脏、脑、脾脏、肾脏及注射部位肌肉的病理切片均在正常范围内。肌肉注射异种脐带间充质干细胞对肝脏、肺脏、脑、脾脏、肾脏及注射部位肌肉无不良影响。说明在一定的肌注剂量范围内，大鼠肌肉注射异种脐带间充质干细胞安全可靠。 -
体外诱导骨髓与脐血间充质干细胞向成骨细胞分化及其成骨活性的比较
背景：脐血与骨髓来源的间充质干细胞在一定诱导条件作用下均具有多向分化的能力。目的：比较脐血与骨髓来源间充质干细胞向成骨细胞诱导分化能力的差异。方法：采用密度梯度法分离培养人脐血间充质干细胞和骨髓间充质干细胞，当细胞汇合90%后胰蛋白酶消化传代，取第3代脐血间充质干细胞和骨髓间充质干细胞，以细胞密度为8×104/孔接种，当细胞达80%融合时，加入含体积分数为10%胎牛血清、0.1μmol/L地塞米松、50μmol/L维生素C、10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠的低糖型DMEM成骨细胞诱导液培养。结果与结论：两种来源间充质干细胞的形态和生物学特性无明显差异，细胞表面均强表达CD44，CD29，不表达 CD34；两者均具有向成骨细胞诱导分化的潜能，稳定表达了成骨细胞标志性的产物碱性磷酸酶、骨矿化结节，而且两种细胞的成骨活性差异无显著性意义。结果表明脐血和成人骨髓来源间充质干细胞向成骨细胞诱导分化能力相似，均可作为骨组织工程的种子细胞。
-
脐带采集液中添加美罗培南对脐带间充质干细胞生物学特性的影响
背景：为避免脐带采集过程中发生细菌污染，常在脐带采集液中加入抗生素，实验旨在探索可以抑制污染同时又不会对细胞生长增殖造成影响的新型抗生素。目的：观察美罗培南抗生素对脐带间充质干细胞增殖和分化潜能的影响。方法：实验分2组，使用传统添加青霉素链霉素(终浓度均为100 U/mL)的脐带采集液采集的标本为对照组，使用添加美罗培南(终质量浓度为1.0 mg/L)的脐带采集液采集的标本为实验组，分别采集脐带标本100份，统计两组标本采集液的阳性率。两组脐带分离培养后取第3代细胞绘制生长曲线，流式细胞术分析其表型以及检测成骨、成脂分化能力。结果与结论：经统计，实验组的采集液污染率为3%(3/100)，对照组的采集液污染率为20%(20/100)，可见含有美罗培南的采集液标本污染率明显降低。使用含有美罗培南的采集液采集脐带，经培养后获得的第3代脐带间充质干细胞形态、分化能力以及细胞表型均正常，且细胞增殖能力与对照组相比无差异，因此该抗生素可用于脐带采集液。
