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脐带来源间充质干细胞治疗异基因造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病
背景：间充质干细胞具有免疫调节作用，在治疗急性移植物抗宿主病中已取得成功，但是在治疗慢性移植物抗宿主病中，特别是肺部慢性移植物抗宿主病的研究报道还很少。
目的：评价脐带间充质干细胞治疗造血干细胞移植后慢性移植物抗宿主病的效果。
方法：10例接受异基因干细胞移植治疗患者，明确诊断为慢性移植物抗宿主病，常规免疫抑制治疗无效，给予脐带间充质干细胞治疗，每个治疗剂量2×107个细胞，每次1或2个剂量，每2周治疗1次，根据疗效标准评价疗效。
结果与结论：4例肺部慢性移植物抗宿主病患者3例显效，2例皮肤型慢性移植物抗宿主病患者1例进步，1例显效；4例肝脏排斥患者2例显效，2例无效，治疗总有效率70%(7/10)。结果表明脐带间充质干细胞治疗难治性慢性移植物抗宿主病是一个有效的疗法。 -
Corning? CellBIND?表面培养皿促进脐带源间充质干细胞生长
背景：培养体系微环境影响干细胞体外扩增，寻找有效的促进细胞贴壁和增殖的培养方法尤为重要。
目的：比较不同细胞培养材质对细胞体外扩增的影响。
方法：将5.0×104培养的人脐带源间充质干细胞分别接种于包被/不包被鸟氨酸Corning?聚苯乙烯培养皿或Corning? Cel BIND?表面培养皿中培养，分别观察细胞的贴壁、增殖状态、与细胞黏附和细胞增殖有关的蛋白的表达及细胞标志物的表达。
结果与结论：与其他类型的培养皿相比，包被多聚鸟氨酸的Corning? Cel BIND?表面培养皿在24 h内能够促进人脐带源间充质干细胞贴壁，同时也能使培养的人脐带源间充质干细胞较早的进入对数生长期，细胞增殖数量相对较多，虽然对人脐带源间充质干细胞表面标志物CD73， CD90和CD105的表达没有影响，但能促进细胞中黏附蛋白的表达。且Corning? Cel BIND?表面培养皿较Corning?聚苯乙烯培养皿更能促进人脐带源间充质干细胞的贴壁和增殖，同时也对细胞表型的表达无影响。提示Corning? Cel BIND?表面培养皿能够促进细胞吸附，增加细胞数量，且对细胞周期蛋白以及细胞表型的表达没有影响，且包被多聚鸟氨酸能够进一步促进细胞的贴壁和增殖，并稳定表达人脐带源间充质干细胞的细胞表型。 -
人血小板裂解液替代胎牛血清大规模扩增人脐带间充质干细胞
背景：目前国内外大多数实验仍采用经典的培养基和胎牛血清进行脐带间充质干细胞培养，血清培养潜在的不安全因素限制了未来临床应用的可行性。
目的：以人血小板裂解液替代胎牛血清培养、鉴定人间充质干细胞，以期进一步应用于临床低密度扩增人间充质干细胞。
方法：人血小板裂解液通过反复冻融、离心、过滤、浓缩等方法制备。以 IMDM 为基础培养基，添加5%浓缩血小板裂解液作为实验组培养基；以添加体积分数10%胎牛血清为对照组培养基。采用酶消化法分离培养人脐带间充质干细胞，以3000/cm2的浓度进行传代培养，待细胞扩增至P5代后，进行细胞形态与直径、免疫表型、成骨成脂分化、克隆形成率等细胞生物学特性检测，并比较两者之间的差别。
结果与结论：人血小板裂解液扩增的脐带间充质干细胞形态细长，有更高的细胞累积群倍数；克隆形成检测结果显示两者形成的克隆效率差异无显著性意义，流式细胞术检测结果显示两者有相似的细胞表型，体外诱导分化显示两者都具有成骨、成脂分化能力，但人血小板裂解液扩增的间充质干细胞成骨分化能力更强。提示人血小板裂解液可以取代胎牛血清用于临床低密度扩增人间充质干细胞。 -
人脐带间充质干细胞与乳鼠许旺细胞共培养向类神经元样细胞的分化
背景：间充质干细胞可以通过化学诱导或者共培养的方法分化为类神经细胞，但是对于间充质干细胞是与许旺细胞共培养分化为类神经元还是类许旺细胞，还存在争议。
目的：探索大鼠许旺细胞对人脐带间充质干细胞诱导分化作用。
方法：将1×109 L-1人脐带间充质干细胞通过Transwel 隔离小室与1×109 L-1SD乳鼠许旺细胞共培养2周，观察脐带间充质干细胞的形态变化，并用免疫荧光法检测其表型变化。
结果与结论：共培养2周后，部分间充质干细胞出现类似神经元的形态，且表达nestin，NF-200，β-Ⅲ-tubulin等神经元特异性标记物，不表达许旺细胞特异性表记物S100和胶质细胞特异性标记物MAB1580。提示人脐带间充质干细胞可以与大鼠许旺细胞非接触共培养分化为类神经元。 -
脐带间充质干细胞对裸鼠胸腺发育的作用及机制
背景：自身免疫性疾病的传统治疗方法很难有效解决患者免疫耐受机制缺失的问题。间充质干细胞具有再生修复实质组织器官和免疫调节的生物学特性。目的：探讨人脐带源间充质干细胞对裸鼠胸腺发育的影响及作用机制。方法：采用腹腔注射的方式向Foxn1-/-的BABL/c裸鼠体内注射人脐带源间充质干细胞，2×106/只，分析治疗后裸鼠胸腺残基的组织结构变化、胸腺上皮细胞的分布及成熟度，以及发育后的胸腺成熟淋巴细胞输出功能，并探讨人脐带源间充质干细胞发挥治疗作用的机制。结果与结论：胸腺残基出现了清晰的皮髓质结构，胸腺上皮细胞数量增加并且胸腺输出功能增强，外周血中调节性T细胞增多。其作用机制可能是由于人脐带源间充质干细胞能够定植在胸腺组织内并且表达多种促进胸腺发育的细胞因子，尤其是对胸腺发育非常重要的角质形成细胞生长因子。结果表明人脐带源间充质干细胞能够为裸鼠胸腺的结构发育和功能成熟提供合适的微环境，促进裸鼠胸腺残基的发育和功能成熟，为间充质干细胞治疗免疫性疾病的作用机制提出了新的理论观点。
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肝匀浆上清液诱导人脐带间充质干细胞分化为肝样细胞
背景：前期实验证明大鼠肝组织匀浆上清液能诱导人脐带间充质干细胞发生形态学变化，但诱导后细胞是否具有肝细胞的表型和功能特征尚不清楚。
目的：以人脐带间充质干细胞为研究对象，对肝组织匀浆上清液定向诱导分化后细胞是否具有肝细胞的表型和功能特性进行初步验证。
方法：选取第3代人脐带间充质干细胞，采用肝组织匀浆上清液作为诱导培养基，进行如下分组：单纯肝组织匀浆上清液作为阴性对照组，QSG-7701人肝细胞株作为阳性对照组，基础培养的人脐带间充质干细胞作为标准对照组；肝组织匀浆上清液处理3，5，7 d诱导组；在蛋白水平和转录水平对肝细胞特异性标志物甲胎蛋白、角蛋白18和色氨酸2，3-加双氧酶进行检测。
结果与结论：经肝组织匀浆上清液诱导后，细胞形态发生了显著变化，随诱导时间延长梭形干细胞逐渐减少，细胞呈三角形，多角形或不规则形。肝组织匀浆上清液诱导干细胞3，5，7 d后肝细胞标志物甲胎蛋白、人细胞角蛋白18和色氨酸2，3-加双氧酶在蛋白和mRNA水平均显著高于标准对照组(P<0.01)。实验结果提示在体外经肝组织匀浆上清液诱导后，人脐带间充质干细胞能够分化为具有肝细胞特异性标记的肝样细胞，并具有部分肝细胞功能。 -
人脐带间充质干细胞对宫颈癌Hela细胞增殖特性的影响
背景：间充质干细胞具有向炎症损伤部位和肿瘤组织特异性趋化的特性，深入研究间充质干细胞对肿瘤细胞生长增殖的影响成为亟需解决的问题。目的：探讨人脐带间充质干细胞对宫颈癌Hela细胞增殖特性的影响。方法：将不同细胞数的人脐带间充质干细胞或不同质量浓度的人脐带间充质干细胞条件培养基与宫颈癌Hela细胞共培养3 d，CCK-8检测Hela细胞的增殖抑制情况。结果与结论：Hela细胞与人脐带间充质干细胞比例分别为1︰3、1︰2、1︰1、2︰1、4︰1、8︰1的情况下，相对应的细胞增殖抑制率分别为67.12%、47.18%、31.15%、27.61%、15.55%、15.95%；利用5，10，20，40，60，100 mg/L人脐带间充质干细胞条件培养基对Hela细胞进行培养，相对应的细胞增殖抑制率分别为0.61%、40.1%、63.47%、80.61%、93.56%、90.65%，说明人脐带间充质干细胞和条件培养基呈一定的浓度依赖性抑制Hela细胞的增殖。
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人脐带间充质干细胞生物特性比较：胰酶冷消化和组织块法体外培养
背景：以往采用胰酶冷消化法培养脐带间充质干细胞的研究较少。目的：比较两种方法体外培养人脐带间充质干细胞的生物学特性。
方法：采用胰酶冷消化法和组织块法从人脐带中分离、纯化和传代培养人脐带间充质干细胞，记录首次出现贴壁细胞时间及原代培养周期，倒置相差显微镜观察脐带间充质干细胞的形态及生长情况，制作第3代脐带间充质干细胞生长曲线，流式细胞仪分析检测第3代脐带间充质干细胞表面标志的表达，第3代脐带间充质干细胞加入成神经诱导培养基诱导分化第3天行荧光免疫化学染色检测Nestin的表达。
结果与结论：使用上述两种方法均可获得脐带间充质干细胞，胰酶冷消化法首次出现贴壁细胞时间早于组织块法(P <0.05)；原代培养周期差异无显著性意义(P >0.05)。倒置相差显微镜下细胞均为贴壁生长，形态为成纤维细胞样，但胰酶冷消化法培养的少数原代细胞呈多角形，不规则，细胞的体积较组织块法大。组织块法获得第3代细胞的增殖速率显著快于胰酶冷消化法，在进入对数生长期后各个时间点细胞数量差异有显著性意义(P<0.05)。两种细胞具有均一的细胞表型，均表达CD29，CD105，不表达CD34，CD45。两种方法培养出来的第3代脐带间充质干细胞经诱导后，免疫荧光均显示神经干细胞特征性标志物nestin阳性表达。结果表明胰酶冷消化法与组织块法均能培养出脐带间充质干细胞，但组织块法更适合于此类细胞的培养，对细胞的伤害更低。 -
肝损伤大鼠血清诱导培养脐带间充质干细胞向肝样细胞的分化
背景：脐带间充质干细胞来源于新生个体脐带组织，来源广泛，无社会伦理学因素制约，有望代替骨髓间充质干细胞成为细胞移植和再生医学的理想种子细胞。目的：探讨肝衰竭大鼠血清对人脐带间充质干细胞肝向诱导分化作用，为临床上利用脐带间充质干细胞治疗终末期肝病提供实验依据。方法：腹腔注射10%四氯化碳溶液建立急性肝损伤大鼠模型，对照组腹腔注射等剂量的大豆油，48 h后腹主动脉取血离心分离血清。取第3代人脐带间充质干细胞，分别用体积分数为20%肝损伤大鼠血清和体积分数为20%胎牛血清诱导培养，观察诱导前后人脐带间充质干细胞形态学改变，检测培养液上清甲胎蛋白、白蛋白水平。结果与结论：肝损伤大鼠血清培养第1天细胞形态变化不大，呈梭形，仍呈编织状或漩涡状生长，第2天细胞呈短梭形，第3天细胞呈类圆形，第4天呈圆形，并有极少量细胞漂浮。肝损伤大鼠血清培养人脐带间充质干细胞4 d，其上清液白蛋白水平较诱导前和对照组均有升高趋势(P <0.001)，甲胎蛋白水平无明显变化。结果表明肝损伤大鼠血清可使脐带间充质干细胞向肝样细胞分化。
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右美托咪定对脐血间充质干细胞向神经细胞分化的影响
背景：大量研究证实右美托咪定在缺血再灌注损伤中具有显著的神经保护作用，但是其对神经系统的作用机制以及影响神经细胞功能的途径和方式鲜见报道。
目的：探讨右美托咪定对脐血间充质干细胞增殖及向神经细胞分化的影响。
方法：取第3代脐血间充质干细胞分为对照组、低浓度右美托咪定组(1μg/L)和高浓度右美托咪定组(10μg/L)， MTT法检测脐血间充质干细胞活性，Western blot法检测增殖期脐血间充质干细胞中ERK1/2磷酸化水平，免疫荧光法检测NeuN/DAPI、GFAP/DAPI和Nestin/DAPI双染细胞比例，观察细胞分化能力。
结果与结论：低浓度右美托咪定组干细胞活性及EKR1/2磷酸化水平较对照组明显增加(P <0.05)；高浓度右美托咪定组干细胞活性及EKR1/2磷酸化水平较对照组及低浓度右美托咪定组明显降低(P <0.05)；高、低浓度右美托咪定组中NeuN、GFAP阳性细胞数较对照组明显增加(P <0.05)，而Nestin阳性细胞则显著降低(P <0.05)。结果表明低浓度右美托咪定诱导脐血间充质干细胞增殖而高浓度右美托咪则抑制其增殖，其机制可能通过调节EKR1/2磷酸化而实现的；高、低浓度右美托咪定均诱导脐血间充质干细胞向神经细胞的分化。 -
脐血血浆替代胎牛血清培养脐带间充质干细胞及冷冻保存
背景：采用胎牛血清扩增培养及冷冻保存的间充质干细胞，在临床应用中存在一定的风险。目的：探讨以脐血血浆替代胎牛血清体外分离培养、扩增及冷冻保存脐带间充质干细胞的可行性。方法：选择符合广州脐血库供者合格性筛选标准的脐血，收集脐血干细胞制备过程中去除的血浆，经病原学及微生物检测合格，多份混合用于细胞培养。采用酶消化法从健康足月分娩新生儿的脐带组织分离获得脐带间充质干细胞，分为两组，分别以DMEM/F12为基础培养基，添加胎牛血清或混合脐血血浆，经培养扩增后，采用流式细胞仪检测细胞免疫表型，并进行间充质干细胞成骨、成脂分化鉴定。在含有10%二甲基亚砜的DMEM/F12培养基中，分别添加体积分数为20%的胎牛血清或混合脐血血浆作为冷冻保存液，对扩增至第3代的细胞冷冻保存至6个月以上，观察复苏后细胞的活率、贴壁情况、增殖、免疫表型及向成骨细胞分化的能力。结果与结论：两种培养体系下的脐带间充质干细胞均呈现典型的梭形漩涡状生长，间充质干细胞免疫表型的表达谱系基本无差异，均具有成骨、成脂分化的能力，但脐血血浆培养条件下细胞的增殖速度显著高于胎牛血清。冻存复苏后的细胞可正常贴壁，且具有向成骨细胞分化的能力，采用脐血血浆冻存的细胞具有更高的贴壁效率及扩增能力。上述结果表明，脐血血浆可以替代胎牛血清用于脐带间充质干细胞的扩增培养及冷冻保存，并维持了间充质干细胞的基本生物学特性，是大量扩增间充质干细胞用于临床治疗较为安全的选择。
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人脐带间充质干细胞联合番茄红素延缓比格犬的自然衰老
背景：实验室前期已初步表明干细胞联合番茄红素对D-半乳糖衰老模型小鼠的抗衰老作用显著，且能明显改变衰老机体的免疫功能。
目的：观察人脐带间充质干细胞联合番茄红素对自然衰老比格犬的抗衰老作用。
方法：选用自然衰老的健康比格犬(6至7岁龄)16只，随机分为衰老对照组和衰老治疗组，以健康青年犬(3至4岁龄)作为青年对照组。衰老治疗组给予人脐带间充质干细胞和番茄红素联合治疗，其余两组给予等量的DMEM/F12细胞培养液和等量葵花籽油。治疗过程中定期观察各组犬的一般状况，测定血清中超氧化物歧化酶活性、丙二醛浓度及谷胱甘肽过氧化物酶活性。治疗24周后处死全部动物，观察各器官组织结构的病理变化。
结果与结论：①治疗前，衰老对照组和衰老治疗组血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性均低于青年对照组，血清丙二醛浓度均高于青年对照组，差异有显著性意义(P均<0.05)，而衰老对照组和衰老治疗组之间差异无显著性意义(P >0.05)。②衰老治疗组经24周治疗后，比格犬皮毛明显光滑，活动力加强，食欲较好；与治疗前和衰老对照组比较，血清中超氧化物歧化酶活性从治疗第8周起显著升高，谷胱甘肽过氧化物酶活性从第6周起显著升高(P均<0.05)，血清丙二醛浓度从治疗第4周起显著降低(P均<0.05)。③实验结束后，与衰老对照组比较，衰老治疗组各组织器官结构清晰，基本无炎性浸润，无明显坏死及纤维化病变，与青年对照组组织器官表现基本一致。以上结果表明脐带间充质干细胞联合番茄红素治疗能不同程度提高自然衰老比格犬血清抗氧化物酶的活性，降低丙二醛浓度，且能促进修复改善组织器官结构及功能，故具有明显的抗衰老作用。 -
碱性成纤维细胞生长因子基因转染优化脐带间充质干细胞的培养
背景：目前多采取重组腺相关病毒作为载体介导碱性成纤维细胞生长因子基因转染的方法，将外源性碱性成纤维细胞生长因子基因转入脐带间充质干细胞内并持续表达，调控细胞增殖及定向分化，取得高效持久的治疗作用。
目的：了解采用重组腺相关病毒作为载体介导碱性成纤维细胞生长因子基因转染对体外培养的脐带间充质干细胞增殖及细胞周期的影响。
方法：体外培养脐带间充质干细胞，经重组腺相关病毒作为载体介导碱性成纤维细胞生长因子基因转染，分为对照组、空载病毒组、碱性成纤维细胞生长因子转染组。用RT-PCR，Western blot检测脐带间充质干细胞在转染前后碱性成纤维细胞生长因子基因和蛋白的表达。应用细胞生长曲线、CCK-8观察细胞生长的优化作用，采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化。
结果与结论：转染碱性成纤维细胞生长因子后，转染组与对照组、空载病毒组相比碱性成纤维细胞生长因子基因和蛋白水平均有表达，细胞的生长速度明显增快，细胞周期 G0/G1期减少，S 期细胞数增多，各组间差异有显著性意义(P<0.05)。说明，通过重组腺相关病毒作为载体介导碱性成纤维细胞生长因子基因转染能促进体外培养的脐带间充质干细胞增殖，对其培养有优化作用。 -
舒芬太尼复合丙泊酚全身麻醉在脐血间充质干细胞移植治疗脊髓损伤中的应用
背景：临床工作中发现，舒芬太尼及丙泊酚对神经系统损伤有很好的保护作用。
目的：观察丙泊酚联合舒芬太尼在脐血间充质干细胞移植治疗脊髓损伤中的作用。
方法：取Wistar大鼠45只，采用Al ens重物坠落法制备急性脊髓损伤模型，脊髓损伤后6 h随机分为3组，联合组尾静脉注射脐血间充质干细胞悬液0.5 mL(细胞浓度为1×105 L-1)，同时尾静脉注射舒芬太尼0.5μg/kg、丙泊酚1.0-1.5 mg/kg；干细胞组尾静脉注射脐血间充质干细胞悬液0.5 mL(细胞浓度为1×105 L-1)；对照组尾静脉注射含体积分数5%胎牛血清LDMEM培养液30μL。注射后15，60 min时，检测血清S100β蛋白水平；脊髓损伤后1，2，4，6，8周，检测斜板实验运动功能评分与BBB评分；脊髓损伤后第4周，观察脊髓组织病理变化；脊髓损伤后1，2周，检测血管内皮生长因子蛋白表达。
结果与结论：①干预后15，60 min时，联合组血清S100β蛋白水平低于干细胞组、对照组(P<0.05)，干细胞组低于对照组(P<0.05)；②脊髓损伤后2，4，6，8周，联合组斜板实验运动功能评分与BBB评分高于干细胞组、对照组(P<0.05)，干细胞组高于对照组(P<0.05)；③脊髓损伤后第4周，对照组脊髓组织损伤严重，神经纤维较少；干细胞组可见增生的脊髓组织及少量再生轴突、PKH-26标记的阳性干细胞；联合组可见大量的神经轴索样结构及PKH-26标记的阳性干细胞；④脊髓损伤后1，2周，联合组血管内皮生长因子蛋白高于干细胞组、对照组(P<0.05)，干细胞组高于对照组(P<0.05)；⑤结果表明，丙泊酚、舒芬太尼联合脐血间充质干细胞可加快脊髓损伤大鼠后肢功能的恢复，促进脊髓损伤的修复。 -
人脐带间充质干细胞通过IL-6/STAT3信号通路促进肝癌HepG-2细胞的增殖
背景：人脐带间充质干细胞能分泌多种细胞因子，参与调控肿瘤的增殖、转移及血管生成等生物学行为，其中白细胞介素6可能是重要的炎性因子之一。
目的：探讨人脐带间充质干细胞通过IL-6/STAT3信号通路对肝癌HepG-2细胞增殖和迁移的作用。方法：采用ELISA法检测人脐带间充质干细胞和肝癌HepG-2细胞中白细胞介素6的表达量。Western blot法检测肝癌HepG-2细胞内STAT3以及p-STAT3蛋白质的表达水平。RT-PCR法检测PCNA、CyclinD1、Survivin、STAT3基因的转录水平。细胞计数法和CCK-8法检测肝癌HepG-2细胞的增殖能力。划痕实验和Transwell实验检测肝癌HepG-2细胞的迁移能力。
结果与结论：①人脐带间充质干细胞白细胞介素6表达量明显高于肝癌HepG-2细胞(P<0.05)；②人脐带间充质干细胞的条件培养基和白细胞介素6均能激活STAT3，白细胞介素6中和抗体则明显削弱了人脐带间充质干细胞条件培养基的激活作用；③用白细胞介素6中和抗体或AG490抑制STAT3的活性后，肝癌HepG-2细胞的增殖相关基因PCNA、CyclinD1、Survivin的mRNA表达水平明显下调，其增殖和迁移能力明显下降；④结果表明，人脐带间充质干细胞能分泌白细胞介素6激活STAT3信号通路促进肝癌HepG-2细胞的体外增殖和迁移。 -
不同保存液及放置时间对脐带源间充质干细胞存活率的影响
背景：干细胞制备完成后的放置时间与其存活率的关系是临床应用安全、有效的基础。目的：观察不同保存液及不同保存时间对脐带源间充质干细胞存活率的影响，为干细胞有效期的确定提供重要依据。方法：选用脐带源间充质干细胞制备干细胞制剂，分别采用生理盐水、培养基、培养基+生理盐水、生理盐水含表皮生长因子、培养基含低分子肝素钙悬浮保存。使用冷藏箱模拟细胞运输条件，分别在第0，6，12，18，24，30，36，42，48小时取样，进行细胞总数和细胞活率的检测。结果与结论：各组在24 h内的细胞数量和细胞活率差别不大。24 h后，培养基组和培养基含低分子肝素钙组的细胞总数和细胞活率优于生理盐水含因子组、生理盐水组、培养基+生理盐水组。干细胞制剂制备完成后，冷藏运输24 h内细胞活率可达90%以上，保存液中的营养成分及合适的pH值，可使细胞活率显著提高。
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人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭
背景：多项基础研究证实人脐血干细胞治疗急性心肌梗死合并心力衰竭安全有效，但目前尚未有该方法用于临床治疗的报道。
目的：观察人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭患者的远期疗效。方法：入选2009年1月至2011年6月辽宁中医药大学心血管内科收治的心肌梗死合并心力衰竭患者共25例，其中12例患者冠脉造影后通过微导管将脐血单个核细胞悬液注入到冠状动脉远端，13例患者进行常规治疗。所有患者均规范应用药物治疗，急性期均行冠脉造影及经皮冠状动脉介入治疗。治疗前，治疗后12，24个月观察两组患者心功能改善情况，评价指标为左室射血分数、左室收缩末期容积及左室舒张末期容积。
结果与结论：与治疗前比较，移植组治疗后12，24个月左室射血分数显著增高，左室收缩末期容积、左室舒张末期容积显著降低(P <0.05)。与治疗前比较，对照组治疗后12，24个月左室射血分数、左室收缩末期容积、左室舒张末期容积差异均无显著性意义(P >0.05)。与对照组相比较，移植组各个时间点左室舒张末容积、左室收缩末容积均显著降低，左室射血分数增高(P <0.05)。各随访期间均未发现相关不良事件发生。结果表明利用人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭，可显著改善患者心功能及左室重构情况。 -
Cdc42参与脐带间充质干细胞向炎性因子的趋化
背景：间充质干细胞移植后的归巢能力关系到细胞移植的疗效，研究其趋化和迁移的调控将有助于提高间充质干细胞临床应用的价值。目的：观察Cdc42在人脐带间充质干细胞定向迁移中的作用。方法：首先以组织块法分离培养人脐带间充质干细胞，与炎性因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、转化生长因子β共培养后 Western 检测 Cdc42表达变化。化学合成 Cdc42的干扰 RNA，转染细胞后分别采用Transwel 和Matrigel胶观察细胞迁移和黏附能力。应用Western检测Cdc42下游靶分子ERK1/2的变化。结果与结论：与炎性因子共培养后的人脐带间充质干细胞中Cdc42表达明显增加，接近无因子对照组的2倍水平。siRNA下调Cdc42的表达能够显著抑制人脐带间充质干细胞的迁移和黏附，且其下游信号分子ERK1/2的表达以及磷酸化水平均相应受到抑制。提示体外培养环境下Cdc42参与了人脐带间充质干细胞的趋化过程。
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人脐血干细胞分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞
背景：鼻黏膜纤毛上皮细胞受损后导致鼻黏膜生物功能严重创伤。相对于其他成体干细胞，人脐血干细胞具有更好的诱导分化潜能。
目的：观察人脐血干细胞通过体外培养、诱导分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞的可行性。
方法：收集正常健康人脐血，分离人脐血干细胞，通过体外培养，鉴定干细胞表面标记物后进行传代培养；取第3代脐血干细胞，用携带增强型绿色荧光蛋白重组腺相关病毒进行感染，采用气液界面培养法，分别于诱导感染1，2周后对干细胞进行MUC8基因PCR检测。在脐血干细胞培养3周后进行FOXJ1免疫荧光染色。
结果与结论：①培养鉴定结果：原代人脐血干细胞传代至第3代时，细胞形态较均一，折光性良好，可表达干细胞表面标记物；②转染鉴定结果：细胞转染3 h后，可见第3代干细胞呈现出绿色荧光，培养48 h后，流式细胞仪检测细胞阳性率达96.2%，说明干细胞转染效果很好；③RT-PCR检测：人脐血干细胞MUC8 mRNA无表达，而鼻黏膜上皮细胞MUC8 mRNA呈现出强表达，培养1周时 MUC8 mRNA呈现弱表达，培养2周后有一定的增强；④免疫荧光染色：在转染的绿色荧光蛋白背景下可观测到FOXJ1红色荧光呈现阳性表达结果；⑤结果说明：人脐血干细胞在适宜培养条件下可分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞。 -
氯化钴模拟低氧环境下人脐带间充质干细胞增殖及基因蛋白的表达
背景：氯化钴可促进人脐带源性间充质干细胞的增殖，具有时间和浓度依赖性，并对其基因蛋白表达具有调控作用。目的：研究氯化钴模拟的低氧环境对人脐带源性间充质干细胞的增殖及基因蛋白表达的影响，旨在建立高效的间充质干细胞体外培养扩增体系。方法：采用组织块法提取人脐带间充质干细胞，氯化钴模拟化学低氧环境，在不同浓度(0，100，150，200，250μmol/L)和不同时间(0，1，2，3，4 d)条件下，用流式细胞仪进行细胞表面相关抗原的鉴定及细胞周期检测；CCK-8法测定细胞增殖情况；RT-PCR测定缺氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶、基质细胞衍生因子1、白细胞介素6、转化生长因子β mRNA的表达；Western blot测定缺氧诱导因子1α蛋白的表达。结果与结论：人脐带间充质干细胞表面相关抗原CD29、CD73、CD90、CD105表达阳性，CD31、CD14、CD34、CD45、CD11b、HLA-DR呈阴性表达，且不受氯化钴模拟的低氧环境影响。氯化钴模拟的化学性低氧可促进人脐带间充质干细胞增殖，且具有一定时间及浓度依赖性。RT-PCR检测到低氧组缺氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶、基质细胞衍生因子1 mRNA表达上调，而白细胞介素6及转化生长因子β mRNA表达下调，差异有显著性意义(P <0.05)。低氧组中缺氧诱导因子1α蛋白表达增高。结果表明氯化钴模拟的体外低氧环境能促进人脐带间充质干细胞增殖，佳浓度为200μmol/L，但过高浓度(250μmol/L)时反而抑制其增殖，机制可能与缺氧诱导因子1α基因与蛋白表达增加相关。
