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  • Corning? CellBIND?表面培养皿促进脐带源间充质干细胞生长

    作者:宛莹;贲亮;官子楸;李超;张世冬;聂德志

    背景:培养体系微环境影响干细胞体外扩增,寻找有效的促进细胞贴壁和增殖的培养方法尤为重要。
      目的:比较不同细胞培养材质对细胞体外扩增的影响。
      方法:将5.0×104培养的人脐带源间充质干细胞分别接种于包被/不包被鸟氨酸Corning?聚苯乙烯培养皿或Corning? Cel BIND?表面培养皿中培养,分别观察细胞的贴壁、增殖状态、与细胞黏附和细胞增殖有关的蛋白的表达及细胞标志物的表达。
      结果与结论:与其他类型的培养皿相比,包被多聚鸟氨酸的Corning? Cel BIND?表面培养皿在24 h内能够促进人脐带源间充质干细胞贴壁,同时也能使培养的人脐带源间充质干细胞较早的进入对数生长期,细胞增殖数量相对较多,虽然对人脐带源间充质干细胞表面标志物CD73, CD90和CD105的表达没有影响,但能促进细胞中黏附蛋白的表达。且Corning? Cel BIND?表面培养皿较Corning?聚苯乙烯培养皿更能促进人脐带源间充质干细胞的贴壁和增殖,同时也对细胞表型的表达无影响。提示Corning? Cel BIND?表面培养皿能够促进细胞吸附,增加细胞数量,且对细胞周期蛋白以及细胞表型的表达没有影响,且包被多聚鸟氨酸能够进一步促进细胞的贴壁和增殖,并稳定表达人脐带源间充质干细胞的细胞表型。

  • 溶胶-凝胶法制备硅酸钙及其体外生物活性的研究

    作者:朱宏扬;尹光福;吴江;陈显春

    溶胶-凝胶法制备的硅酸钙粉体经成型,在1300℃下常压烧结,制备出高纯度的硅酸钙陶瓷,并且对其在体外的生物活性和细胞毒性及细胞生长进行了研究.通过X射线衍射(XRD)和扫描电镜(SEM)观察,在1300℃下烧结制得的硅酸钙陶瓷主晶相为p型硅酸钙(β-CS),在模拟体液中浸泡14 d后,其表面可见类骨羟基磷灰石生成,28 d后生成大量羟基磷灰石,证明其可诱导类骨羟基磷灰石生成.经细胞实验可知,硅酸钙无细胞毒性且具有良好的生物活性,具有促进成骨细胞生长的作用.

  • 体外培养成肌细胞贴壁速度与细胞物理性状及成熟度间的关系

    作者:车晓霞;郭杰;任超超;许妍;王邦康;白玉兴

    目的:探讨体外培养成肌细胞差速贴壁机制,研究成肌细胞不同贴壁速度与物理性状和成熟度间的关系.方法:分离SD大鼠后肢肌肉获得成肌细胞,体外培养第3代时采用差速贴壁法传代,分别在贴壁20min、1、2、26 h时收获细胞,流式细胞仪按照一定阈值检测细胞的前向角散射(forward scatter,FSC)、侧向角散射(side scatter,SSC)分布及CD34、Pax7、M-cadherin的表达情况.将原代成肌细胞进行六步Percoll密度梯度离心分离,流式细胞仪检测各组细胞CD34、Pax7、M-cadherin的表达.结果:流式细胞仪检测显示,成肌细胞第3代经差速贴壁法传代后快速贴肇细胞在阈值范围内FSC的阳性细胞少,SSC的阳性细胞多,而贴壁较慢的细胞则反之,26 h后还未贴肇的细胞在阈值范围内FSC、SSC细胞分布更少;说明早期贴壁细胞小,所含颗粒多,稍晚贴壁细胞面积大,所含颗粒少,26 h后还未贴壁是更为幼稚的细胞.CD34、Pax7等阳性细胞主要出现在较晚贴壁的细胞中.流式细胞仪检测Percoll密度梯度离心分离原代成肌细胞的不同亚群,结果显示在15%~25%Percoll分离组分中富集CD34、Pax7阳性细胞.结论:细胞贴壁速度与物理性状和成熟度密切相关,可以采用15%~25%Percoll密度梯度离心法快速分离具有干细胞特征的肌肉彤成细胞.

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