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人脐血干细胞治疗小儿脑瘫的安全性探讨
目的：：分析人脐血干细胞治疗小儿脑瘫的安全性。方法：选择23例脑瘫患儿作为研究对象,所有患儿均采用蛛网膜下腔注射人脐血干细胞进行治疗,对所有患儿的治疗效果进行分析。结果：经过治疗后,23例患儿的白细胞计数、总胆红素、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平均得到明显改善,与治疗前相比差异显著( P<0.05)。结论：在对脑瘫患儿进行治疗的过程中,采用人脐血干细胞进行治疗,效果较好,可对患儿的各项指标起到良好的改善作用,且具有较高的安全性,值得临床推广使用。
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人脐血干细胞的特性及其神经分化的研究进展
寻找一种合适的细胞来源进行移植以代替受损的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞来修复神经损伤已成为人们的研究热点.早在20年以前,Ogawa等人就发现在人脐带血(human umbilical cord blood,HUCB)中存在原始的造血干细胞,随着近年来研究的深入,发现脐带血中不但含有丰富的造血干细胞,而且还含有大量的多潜能干细胞,可以向内皮、血管以及神经等组织分化,由于其具有来源丰富、采集方便且无伦理学等问题,人脐血干细胞(HUCBC)的研究逐渐引起研究者的广泛兴趣.
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蒙药广枣三种粗提物对人脐血干细胞体外分化的影响
背景:目前,人脐血干细胞在脊髓损伤治疗中的研究较多,但人脐血干细胞的体外分化由许多因素所限制.蒙药广枣提取物对神经细胞有保护作用,但其作用机制不清楚.目的:观察蒙药广枣3种粗提取物促进人脐血干细胞体外分化的影响.方法:获取临床健康产妇的新鲜脐带血,制备人脐血干细胞悬液,将纯化的人脐血干细胞接种于40个培养皿中进行传代,根据蒙药广枣3种粗提取物分为:样品1组:乙醇提取,醋酸乙酯萃取,生药质量浓度为8.25 g/mL;样品2组:乙醇提取,NKA树脂分离,体积分数为10%乙醇淋洗浓缩,生药质量浓度为1.72 g/mL;样品3组:乙醇提取,NKA树脂分离,体积分数为70%乙醇淋洗浓缩,生药质量浓度为2.41 g/mL;对照组:用80%的DMEM,含体积分数为20%的小牛血清培养.观察不同质量浓度蒙药广枣提取物对人脐血干细胞增殖的影响;24,72 h后流式细胞仪测定S期的比例.结果与结论:样品3组人脐血干细胞的增殖作用不明显,10 d时样品1组和样品2组明显高于样品3组和对照组(P < 0.01).样品1组和样品2组的人脐血干细胞在24,72 h后处于S期的明显增多.提示生药质量浓度8.25,1.72 g/mL蒙药广枣粗提取物能促进人脐血干细胞的体外增殖.
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黄芪注射液促进脐血干细胞向肝细胞分化:具有增强移植干细胞治疗大鼠肝衰竭的效果
背景:在脐血干细胞移植治疗肝功能衰竭研究中,文献报道黄芪制剂可刺激造血干/祖细胞的增殖.目的:观察黄芪注射液在体内外促进脐血干细胞向肝细胞的分化,以及增强脐血干细胞移植治疗大鼠肝衰竭的效果.方法:取传至三四代的人脐血干细胞,药物筛选实验设立4组,分别加入0,40,200,400 mg/L黄芪,筛选适宜脐血干细胞生长的黄芪浓度;干细胞分化实验设立2组,分别加入肝细胞生长因子10 μg/L、肝细胞生长因子10 μg/L+黄芪200 mg/L.采用腹腔内注射D-氨基半乳糖法制备大鼠肝衰竭模型,建模48 h后仍存活的大鼠随机分为6组:模型对照组、黄芪组、鼠外周血单个核细胞组、联合组、联合+环磷酰胺组、联合+地塞米松组.RT-PCR法检测大鼠肝脏组织甲胎蛋白及白蛋白mRNA的表达,观察相关肝功能指标的变化.结果与结论:不同质量浓度的黄芪制剂对人脐血干细胞生长影响不同,200 mg/L黄芪适宜细胞生长和增殖.与单纯加入肝细胞生长因子的人脐血干细胞比较,另加入200 mg/L黄芪的人脐血干细胞白蛋白免疫组化染色阳性细胞数明显增加(P < 0.05).随干预时间的延长,联合组、联合+环磷酰胺组、联合+地塞米松组肝脏组织白蛋白mRNA的表达均强于鼠外周血单个核细胞组;而甲胎蛋白mRNA的表达在早期均强于鼠外周血单个核细胞组,在后期则表达消失.干预7 d后,联合组、联合+环磷酰胺组、联合+地塞米松组的丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶及总胆红素下降幅度均明显大于模型对照组、黄芪组、鼠外周血单个核细胞组(P < 0.05),而此3组间各项指标的变化无明显差异(P > 0.05).提示200 mg/L黄芪在体内及体外均可以促进人脐血干细胞生长并分化为肝细胞,减轻肝脏损害,增强脐血干细胞移植治疗肝衰竭的效果.
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脑源性神经营养因子基因修饰的人脐血干细胞移植对损伤脊髓组织的保护
目的:观察损伤脊髓组织经脑源性神经营养因子基因修饰的人脐血干细胞移植后,细胞内环境的改善及下肢运动功能、电生理指标的变化.方法:实验于2005-10/2006-09在广东医学院实验动物中心完成.①选取清洁级SD大鼠96只,随机数字表法分为4组:基因修饰细胞移植组、单纯细胞移植组、损伤对照组、正常对照组,24只/组.新鲜脐带血来源于广东医学院妇产科健康产妇,产妇及其家属均知情同意.脑源性神经营养因子的DNA由解放军第二军医大学提供.②基因修饰细胞移植组、单纯细胞移植组、损伤对照组大鼠制备脊髓半横断损伤模型,无菌条件下显露T7～9棘突及椎板,暴露T8平面脊髓,用弯刀将左侧半脊髓横向切断,再用负压吸引器吸除脊髓组织,形成一个2 mm×2 mm×2 mm的间隙.③采集人脐血单个核细胞,以1×109L-1密度接种于含10 mL DMEM,F12的培养皿中,同时以终浓度5μmol/L的Brdu标记,置于含体积分数为0.05的CO2细胞培养箱中,48 h后磷酸盐缓冲液反复离心洗涤,制备密度为6×109L-1的人脐血干细胞悬液,进行脑源性神经营养因子DNA质粒的提取、鉴定、纯化,转染.④将转染的人脐血干细胞悬液重悬为2.5×1010 L-1,取3μL浸透在与宿主脊髓损伤间隙大小一致的明胶海棉上,并将其植入基因修饰细胞移植组大鼠脊髓损伤处,确认植入后缝合硬脊膜、肌层及皮肤.单纯细胞移植组单纯植入含2.5×1010L-1高纯化的人脐血干细胞3μL的明胶海绵.损伤对照组仅植入明胶海绵.⑤移植术后24 h,每组取8只大鼠进行脊髓水肿程度及离子含量检测.移植术后6,12周,每组各取8只大鼠以爬坡试验检测其下肢运动功能情况,并采用颅刺激法检查运动诱发电位.结果:各组24只SD大鼠均进入结果分析.①脊髓水肿程度及离子含量:脊髓损伤后组织水肿及Na+、Ca2+含量升高,K+、Mg2+含量降低,经脑源性神经营养因子基因修饰的人脐血干细胞脊髓内移植后可显著改善上述指标.与损伤对照组比较,基因修饰细胞移植组脊髓含水量及Na+、Ca2+含量显著降低(t=1.77～1.79,P均＜0.05),K+、Mg2+含量升高(t=2.05～2.41,P均＜0.05).②下肢运动功能评估:移植术后6周,除正常对照组外各组大鼠左下肢均瘫痪,爬坡试验为0级.移植术后12周,基因修饰细胞移植组大鼠肌力恢复至Ⅱ级,单纯细胞移植组恢复至Ⅰ级.损伤对照组0级.③电生理检查:移植术后6周,基因修饰细胞移植组记录到运动诱发电位,而单纯细胞移植组、损伤对照组未记录到.术后12周,基因修饰细胞移植组、单纯细胞移植组大鼠均记录到运动诱发电位,但与基因修饰细胞移植组比较,单纯细胞移植组运动诱发电位潜伏期延长,波幅降低;损伤对照组仍未记录到运动诱发电位.结论:脑源性神经营养因子基因修饰的人脐血干细胞脊髓内移植对脊髓损伤起保护作用,其机制可能与减少神经细胞离子失衡、改善细胞内环境有关.
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CD133+细胞联合人脐血干细胞在心力衰竭小鼠中的作用
背景：目前常规方法治疗心力衰竭效果不佳。
目的：研究CD133+细胞联合人脐血干细胞在心力衰竭小鼠中的效果，为心力衰竭治疗提供依据。
方法：采集足月妊娠顺产婴儿脐血，并利用淋巴细胞分离液法提取 CD133+细胞和人脐血干细胞。将20只Balb/C裸小鼠随机等分为单个核细胞组和CD133+细胞联合人脐血干细胞组。2组小鼠均建立心力衰竭模型。单个核细胞组经尾注射单个核细胞治疗，CD133+细胞联合人脐血干细胞组经尾注射CD133+细胞联合人脐血干细胞治疗。
结果与结论：①治疗后14 d时：CD133+细胞联合人脐血干细胞组小鼠体质量及肝脏、心脏和肺脏质量显著大于单个核细胞组(P<0.05)；②治疗30 d后：CD133+细胞联合人脐血干细胞组小鼠心肌排列整齐，而单个核细胞组小鼠的心肌排列紊乱，CD133+细胞联合人脐血干细胞组小鼠心肌胶原纤维平均面积显著小于单个核细胞组(P <0.05)，血清基质金属蛋白酶9浓度显著低于单个核细胞组(P <0.05)， Masson 染色结果显示，CD133+细胞联合人脐血干细胞组小鼠蓝色胶原纤维较少，排列相对整齐；单个核细胞组小鼠心内膜出现不同程度胶原纤维增多，排列紊乱；③结果提示：CD133+细胞联合人脐血干细胞治疗小鼠心力衰竭效果理想，具有较高的临床应用价值。 -
人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭
背景：多项基础研究证实人脐血干细胞治疗急性心肌梗死合并心力衰竭安全有效，但目前尚未有该方法用于临床治疗的报道。
目的：观察人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭患者的远期疗效。方法：入选2009年1月至2011年6月辽宁中医药大学心血管内科收治的心肌梗死合并心力衰竭患者共25例，其中12例患者冠脉造影后通过微导管将脐血单个核细胞悬液注入到冠状动脉远端，13例患者进行常规治疗。所有患者均规范应用药物治疗，急性期均行冠脉造影及经皮冠状动脉介入治疗。治疗前，治疗后12，24个月观察两组患者心功能改善情况，评价指标为左室射血分数、左室收缩末期容积及左室舒张末期容积。
结果与结论：与治疗前比较，移植组治疗后12，24个月左室射血分数显著增高，左室收缩末期容积、左室舒张末期容积显著降低(P <0.05)。与治疗前比较，对照组治疗后12，24个月左室射血分数、左室收缩末期容积、左室舒张末期容积差异均无显著性意义(P >0.05)。与对照组相比较，移植组各个时间点左室舒张末容积、左室收缩末容积均显著降低，左室射血分数增高(P <0.05)。各随访期间均未发现相关不良事件发生。结果表明利用人脐血单个核细胞移植治疗心肌梗死合并心力衰竭，可显著改善患者心功能及左室重构情况。 -
人脐血干细胞分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞
背景：鼻黏膜纤毛上皮细胞受损后导致鼻黏膜生物功能严重创伤。相对于其他成体干细胞，人脐血干细胞具有更好的诱导分化潜能。
目的：观察人脐血干细胞通过体外培养、诱导分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞的可行性。
方法：收集正常健康人脐血，分离人脐血干细胞，通过体外培养，鉴定干细胞表面标记物后进行传代培养；取第3代脐血干细胞，用携带增强型绿色荧光蛋白重组腺相关病毒进行感染，采用气液界面培养法，分别于诱导感染1，2周后对干细胞进行MUC8基因PCR检测。在脐血干细胞培养3周后进行FOXJ1免疫荧光染色。
结果与结论：①培养鉴定结果：原代人脐血干细胞传代至第3代时，细胞形态较均一，折光性良好，可表达干细胞表面标记物；②转染鉴定结果：细胞转染3 h后，可见第3代干细胞呈现出绿色荧光，培养48 h后，流式细胞仪检测细胞阳性率达96.2%，说明干细胞转染效果很好；③RT-PCR检测：人脐血干细胞MUC8 mRNA无表达，而鼻黏膜上皮细胞MUC8 mRNA呈现出强表达，培养1周时 MUC8 mRNA呈现弱表达，培养2周后有一定的增强；④免疫荧光染色：在转染的绿色荧光蛋白背景下可观测到FOXJ1红色荧光呈现阳性表达结果；⑤结果说明：人脐血干细胞在适宜培养条件下可分化为鼻黏膜纤毛上皮细胞。 -
人脐血干细胞在局灶性脑缺血大鼠体内的迁移与分化
目的 观察人脐血干细胞(human umbilical cord blood stem cells,HUCBSCs)在局灶性脑缺血大鼠体内的迁移与分化,探讨HUCBSCs移植对缺血性脑损伤大鼠神经功能恢复可能的作用机制.方法 采用线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型,将造模成功的20只大鼠随机分为2组:移植组15只,造模成功后24 h,经尾静脉移植1 ml(2×106个)DAPI/CM-Dil荧光染料标记的HUCBSCs;模型组5只,造模成功后24 h,经尾静脉移植等量生理盐水.分别于移植前及移植后3、7、15 d进行神经功能缺损评分(neurological severity score,NSS),并取脑组织,制备冰冻切片,HE染色观察脑组织形态,荧光显微镜观察HUCBSCs在脑组织中的迁移和分布,免疫荧光法检测脑组织中巢蛋白(Nestin)和神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolase,NSE)的表达.结果 移植组大鼠HUCBSCs移植后7d起,其改良的NSS(mNSS)显著低于对照组(P＜0.05).移植后15 d,大鼠脑组织病理改变明显减轻.移植后3d起,可见病灶及其周围部位有阳性细胞存在,随着时间的推移,脑缺血病灶部位的阳性细胞增多;移植后7d,迁移至病灶部位的细胞数增加;移植后15 d,迁移至病灶部位的细胞数量达观察期内的高峰,各时间点阳性细胞数差异有统计学意义(P＜0.05).移植后15 d,大鼠脑组织中CM-DiI/NSE-FITC和CM-DiI/Nestin-FITC双阳性细胞率分别为85.2％和81.6％.结论 HUCBSCs经静脉移植后,能在大鼠体内存活,并向损伤部位迁移,具有向神经元细胞方向分化的潜能,对脑缺血大鼠的神经功能恢复具有促进作用.
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人脐血干细胞移植治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的研究
目的 研究人脐血干细胞(HUCBCs)移植治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的效果以及HUCBCs在EAE大鼠脑和脊髓的状况.方法 从新生儿脐带血分离出单个核细胞,体外培养并予5-溴脱氧嘧啶尿苷(Brdu)标记48 h.用豚鼠全脊髓匀浆免疫Wistar大鼠制备EAE模型. 在免疫后14 d将3 ×106 HUCBCs经尾静脉注射移植入EAE大鼠(移植组)体内,观察大鼠移植后不同时间的神经功能缺损评分、脑和脊髓脱髓鞘病灶数的变化;用免疫组化技术观察移植后的HUCBCs在EAE大鼠脑和脊髓内存活、迁徙、分化的状况,并与对照组比较.结果 移植组大鼠移植后21 d、28 d的神经功能缺损评分显著低于对照组(均P<0.05);移植后7 d、14 d、21 d、28 d脑和脊髓中均可见Brdu染色阳性细胞,移植后21 d、28 d明显多于移植后7 d、14 d(均P<0.05);植入的HUCBCs在大鼠脑和脊髓内能向损伤区域迁徙并能分化为星形胶质细胞、少突胶质细胞和神经元.移植后14 d、21 d、28 d脑和脊髓内脱髓鞘病灶数明显少于对照组(均P<0.05).结论 HUCBCs移植能显著改善EAE大鼠的神经功能,并能在其脑和脊髓内存活、迁徙和分化,减少脱髓鞘病灶数.
关键词： 人脐血干细胞 移植 实验性自身免疫性脑脊髓炎 -
人脐血干细胞移植治疗大鼠脑缺血的实验研究
目的研究人脐血干细胞(HUCBCs)移植治疗脑缺血大鼠的疗效及HUCBCs在缺血大鼠脑内的状况.方法采集足月新生儿脐带血60～100 ml,分离出其中的单个核细胞,体外培养并予5-溴脱氧嘧啶尿苷(Brdu)标记48 h.采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注模型,1 d后将3×106 HUCBCs经缺血侧侧脑室注射入大鼠脑内.在移植后不同时间对大鼠进行神经损害严重程度评分(NSS),用免疫组化技术观察移植后的HUCBCs的存活、迁徙、分化状况.结果 HUCBCs在体外具有增殖能力;移植组大鼠自移植后3周起其NSS显著低于对照组(均P<0.05);移植后2周、4周、6周脑组织切片中均可见Brdu染色阳性细胞,缺血侧明显多于对侧(均P<0.05),移植后4周、6周明显多于移植后2周(均P<0.05);移植组各时间点脑组织切片中均可见神经巢蛋白阳性细胞;植入的HUCBCs在大鼠脑内能向损伤区域迁徙并能分化为星形胶质细胞、少突胶质细胞和神经元.结论 HUCBCs能在缺血大鼠脑内存活、迁徙和分化,并能改善其神经功能.HUCBCs移植可作为脑梗死的有效治疗手段.
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人胚神经干细胞及人脐血干细胞治疗大鼠脑缺血的实验研究
目的:观察人胚神经干细胞(hNSCs)、人脐血干细胞(hUCBCs)治疗脑缺血大鼠的效果及其在缺血大鼠脑内的增殖、分化情况.方法:从自然流产的孕10～13周的人胚脑组织中分离、培养hNSCs;采集足月新生儿脐带血60-100 ml,分离出其中的单个核细胞:治疗前hNSCs、hUCBCs均经5-溴脱氧嘧啶尿苷(BrdU)标记48 h.采用线栓法制作大鼠脑缺血模型,1天后经尾静脉注射未分化的hNSCs、hUCBCs至脑缺血大鼠体内.对治疗后大鼠进行神经损害严重程度评分(NSS),用免疫组化方法观察hNSCs、hUCBCs的存活、迁移、分化状况.结果:从人胚脑中成功培养出hNSCs,培养条件下呈悬浮状态生长,形成神经球;hUCBCs在体外也具有增殖能力.两治疗组大鼠均自治疗后21天起其NSS显著低于对照组(P<0.05),两治疗组间比较各时间点NSS无显著性差异(P>0.05).治疗后14、21、28、35天脑组织切片中均可见BrdU染色阳性细胞,缺血侧明显多于对侧(P<0.05),治疗后21、28、35天明显多于治疗后14天(P<0.05);hNSCs组BrdU染色阳性细胞数多于hUCBCs组(P<0.05);治疗组各时间点脑组织切片中均可见nestin染色阳性细胞;在BrdU阳性细胞群中,hNSCs组73.8%为胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性细胞,16.7%为2.3-环核苷酸磷酸二脂酶(CNPase)染色阳性细胞,9.5%为神经元特异性烯醇化酶(NSE)染色阳性细胞;hUCBCs组74.5%为GFAP染色阳性细胞.15.4%为CNPase染色阳性细胞,10.1%为NSE染色阳性细胞;两组间差异无显著性(P>0.05).结论:hNSCs、hUCBCs均具有多分化潜能,受缺血部位微环境信号的影响分化成3种主要类型的神经细胞;静脉注射hNSCs、hUCBCs能有效改善脑梗死大鼠的神经功能评分;除了hNSCs外,hUCBCs也是治疗缺血性脑血管病的一种可能手段.
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以脑源性神经营养因子等干预视神经损伤大鼠视神经拉伸力学的特性分析
以拉伸力学性能指标研判以人脐血干细胞、脑源性神经营养因子干预视神经损伤动物模型的效果.以钳夹法制备视神经损伤大鼠模型,于视神经损伤大鼠模型造模7d后,分别以人脐血干细胞、脑源性神经营养因子进行干预治疗,对各组大鼠于造模30 d后取出眶内段视神经进行组织形态观察和拉伸实验.视神经组织形态观察结果表明,视神经损伤动物模型以BDNF干预组一部分神经纤维排列较整齐,胶质细胞可见少量细胞空泡,一部分细胞核排列不规则,但视神经轴突直径改变不明显.视神经损伤动物模型以hUCBSC干预组视神经纤维排列较密集,胶质细胞核增多,多数轴突形态正常.各组动物视神经拉伸实验结果表明,视神经损伤动物模型组视神经的大载荷、大应力、大应变、弹性限度载荷、弹性限度应力小于视神经损伤模型以hUCBSC、以BDNF干预组,差异显著(P<0.05),视神经损伤模型以BDNF干预组的大载荷、大应力、大应变、弹性限度载荷、弹性限度应力小于以hUCBSC干预组,差异显著(P<0.05).视神经损伤动物模型以BDNF和以hUCBSC干预后动物视神经的拉伸力学性能指标得到了显著提高.提示,视神经损伤模型大鼠通过BDNF、hUCBSC干预治疗后,具有明显的疗效.
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扇贝多肽对人脐血干细胞体外分化的影响
[目的]观察扇贝多肽(polypeptides from chlamys farreri,PCF)对人脐血干细胞(human umbilical cord blood cells,HUCBCs)中的酪氨酸蛋白酶(PTKs)活性的影响.[方法]取新鲜人脐血干细胞原代培养,贴壁2 d后,分别用1∶1 600、1∶3 200、1∶6 400、1∶12 800稀释的扇贝多肽液37℃继续培养,至第24、48、72、96 h收集细胞,进行形态学观察;以神经营养因子(NGF)作为阳性对照;以DMEM作阴性对照.使用[1y-32p]ATP掺入,液闪计数法测定酪氨酸蛋白激酶(PTK)活性.[结果]阴性对照组HUCBCs的PTK无活性,阳性对照组PTK活性升高.PCF组48 h PTK活性升高(P＜0.01),随后逐渐降低,至96 h PTK无活性.[结论]扇贝多肽液具促进人脐血干细胞分化的功能.
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干细胞移植联合电针治疗对脊髓损伤修复的影响
目的：研究人脐血干细胞移植联合电针刺激治疗脊髓损伤过程中对于类胰岛素样生长因子-1（IG F-1）表达的影响。方法将SD大鼠利用随机数字表法随机分成3组，所有大鼠均为脊髓横断损伤。脊髓损伤（SCI）组，干细胞移植（UCBSC ）组，干细胞移植＋电针刺激（UCBSC＋EA）组，每组均为12只。UCBSC、UCBSC＋ EA组在损伤处注射脐血干细胞，SCI组以等量PBS缓冲液代替，UCBSC＋EA组每天固定时间取损伤处上、下部位的“大椎”“命门”进行电针刺激。各组均在损伤后的7天、14天和28天于损伤处取材，观察神经元细胞的形态、数量及IG F-1表达。结果常规 H E组织学检查发现横断处灰质内神经元细胞变性、减少，并伴星形胶质细胞增生，细胞体肥大。免疫组化显示，损伤后IGF-1表达均上调，UCBSC、UCBSC＋EA两组表达进一步上调，IGF-1的表达在前14天显著上调，14天后表达放缓。Western Blot结果显示，与单纯的人脐带血移植（UCBSC）相比较，UCBSC＋EA更能促进IGF-1的表达，且有统计学意义（P＜0.05）。RT-PCR电泳结果显示UCBSC＋EA组，IGF-1 mRNA的表达明显高于其他两组，有显著性差异（P＜0.05）。结论 UCBSC＋ EA在大鼠脊髓损伤处可更有效分泌神经营养因子IG F-1，弥补脊髓损伤后维持神经元细胞生存所匮乏的营养因子，促进神经元细胞存活。
关键词： 脊髓损伤 电针 人脐血干细胞 胰岛素样生长因子-1 -
人脐血干细胞玻璃体腔移植对大鼠外伤性视神经损伤的保护作用
目的 观察人脐血干细胞(human umbilical cord blood stem cells,hUCBSC)移植对视神经部分受损SD大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGC)的保护作用.方法 将48只健康成年SD大鼠随机分为2组,2组SD大鼠暴露视神经,应用40 g夹持力的视神经夹在大鼠眼球后2 mm处夹视神经30 s造成部分视神经损伤模型,均损伤左眼.A组:伤后1周玻璃体腔注射脐血于细胞载体PBS,24只.B组:伤后1周玻璃体腔注射hUCBSC,24只;2组均于注射后7d、14 d、21 d、28 d处死动物.处死前7d双上丘注射50 g· L-1荧光金逆行标记双眼RGC.然后按时间先后处死大鼠分离视网膜置于荧光显微镜下,计数2组RGC并计算RGC标识率.结果 A、B两组视神经损伤眼RGC计数均低于未损伤眼(均为P＜0.05),且随时间延长两组RGC标识率均呈下降趋势(均为P＜0.05),但B组注射后7d、14 d、21 d、28 d RGC标识率(77.52±6.33)％、(74.12±8.23)％、(64.78 ±5.21)％、(59.93±9.00)％下降幅度明显较A组(75.68±8.74)％、(68.21±10.59)％、(56.24±9.34)％、(48.91±8.81)％平缓.同时间段B组RGC标识率均高于A组,且差异均有统计学意义(均为P＜0.05).结论 玻璃体腔注射hUCBSC可减缓外伤性视神经损伤大鼠视网膜中RGC的凋亡,对RGC具有一定的保护作用.
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人脐血干细胞对大鼠部分性视神经损伤保护作用机制的研究
背景 视神经损伤后将导致视网膜神经节细胞(RGCs)的凋亡，而凋亡的重要机制是内质网应激(ERS)，减弱ERS可能对RGCs起到保护作用。 目的 探讨ERS在大鼠视神经损伤中的机制及人脐血干细胞对大鼠部分性视神经损伤后RGCs的保护作用。方法 采用40 9自制夹钳夹持102只SD大鼠的左眼视神经制作部分性视神经钳夹伤动物模型，用随机数字表法将动物分为模型损伤组和人脐血干细胞组，每组51只，均取左眼为视神经损伤眼，右眼为正常对照眼。人脐血干细胞组大鼠左眼造模后立即将10 μl人脐血干细胞注入玻璃体腔。分别在造模后3、7、14、21、28 d各处死3只大鼠，苏木精-伊红染色后光学显微镜下观察大鼠RGCs形态学的改变，并对存活的RGCs进行计数。在造模后3、12、24、48、72 h及1周各处死6只大鼠，分别进行TUNEL法检测2组大鼠RGCs的凋亡率及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上述时间点GRP78 mRNA和CHOP mRNA在2组大鼠视网膜中的表达。 结果模型损伤组和人脐血干细胞组随造模时间的延长，RGCs存活的数量明显下降，差异均有统计学意义(F时间=20.100，P=0.007)，与模型损伤组相比，人脐血干细胞组RGCs存活的数量下降缓慢。各时间点间模型损伤组及人脐血干细胞组RGCs存活的数量明显低于正常对照组，差异均有统计学意义(P＜0.01)，而人脐血干细胞组RGCs的数量明显高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)。TUNEL检测表明，人脐血干细胞组在造模后24 h内未见RGCs凋亡，而模型损伤组可见大量TUNEL阳性细胞出现，造模后48 h～1周人脐血干细胞组RGCs凋亡率明显低于模型损伤组，差异有统计学意义(P＜0.01)。人脐血干细胞组视网膜GRP78 mRNA表达较强，CHOP mRNA表达微弱，与模型损伤组比较差异均有统计学意义(P＜0.01)。 结论 ERS参与了大鼠部分性视神经损伤后RGCs的凋亡机制，人脐血干细胞对大鼠部分性视神经损伤后RGCs起保护作用。
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人脐血干细胞移植治疗失代偿期肝硬化
目的 探讨人脐血干细胞(UCBSC)外周静脉移植治疗失代偿期肝硬化临床疗效及可行性.方法 26例失代偿期肝硬化患者采用UCBSC外周静脉血移植治疗,治疗后定期复查血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBiL)、白蛋白(AIB)、凝血酶原时间(PT)水平变化,观察患者临床症状变化与不良反应.结果 UCBSC治疗2周肝功能指标与治疗前比较差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗4周后,除ALT和AST差异有统计学意义(P＜0.05),其余指标比较差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗8～ 24周后TBiL明显改善(P＜0.05),ALB及TP治疗过程中均有改善,但差异无统计学意义(P＞0.05).4周后各临床症状明显改善,乏力改善20例(76.9％),食欲改善16例(61.5％),腹水减少或完全消失19例(73.1％).治疗10周后有1例患者死于食管静脉曲张破裂大出血.治疗过程中2例患者出现低热,不影响治疗,其余患者未发现与细胞移植相关不良反应.结论 UCBSC外周静脉治疗是短期内治疗失代偿期肝硬化一种有效安全的方法,值得临床推广应用.
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干细胞移植联合钽棒植入治疗股骨头骨坏死的护理体会
股骨头缺血坏死是由于不同病因破坏股骨头的血液循环,终导致股骨头塌陷、髋关节功能障碍的一种疾病.钽棒被设计用来干预治疗股骨头坏死,可限制或延缓股骨头塌陷时间,延迟全髋关节置换的时间.我院于2010年10月对1例股骨头坏死患者采用股骨头髓芯钻孔减压、人脐血干细胞局部移植联合多孔钽棒植入治疗,经过精心护理,取得的效果,现将护理体会报告如下.
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人脐血干细胞移植治疗股骨头坏死的护理体会
股骨头缺血坏死是由于不同病因破坏股骨头的血液循环,终导致股骨头塌陷、髋关节功能障碍的一种疾病[1],传统治疗效果不佳.
