首页 > 文献资料
-
视觉诱发电位光学相干断层成像联合全自动视野计在青光眼诊断中的应用
青光眼是进行性视网膜神经节细胞丢失引起视神经及视野特征性改变的一组疾病,终将导致不可逆的视功能改变的损害,青光眼早期诊断使疾病早期治疗,使进行性视功能损害停止或延缓的关键.视网膜结构与功能检查对青光眼早期诊断及随访都相当重要.因此我们应用视觉诱发电位(VEP)、光学相干断层扫描成像(OCT)对青光眼患者视功能进行客观评价.1 资料与方法1.1 临床资料:我院2010年8月至2011年4月收治的青光眼患者31例,男性12例,女性19例,年龄9～75岁,平均46岁,所有患者经眼压、视力、视野、OCT、VEP确认为青光眼,诊断标准参考中华眼科学会1986年度"青光眼诊断标准".
-
微波对视网膜神经节细胞的过氧化损伤
目的:探讨微波对体外培养的猪视网膜神经节细胞的脂质过氧化损伤作用及耐受剂量,可为进一步研究微波的眼底损伤机理及其防护提供一定的实验依据.方法:体外培养猪视网膜神经节细胞,2450MHz连续波以不同强度和时间进行辐照,然后继续培养48小时,测定超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量.结果:微波辐照后,细胞MDA含量明显增高,SOD降低,经过48小时再培养,MDA含量有所恢复,SOD含量增高.结论是:微波可引起视网膜神经节细胞脂质过氧化损伤,在一定剂量范围内为可逆性损伤.
-
用MATLAB定量视网膜神经节细胞
视网膜神经节细胞的定量计数在眼科研究方面具有重要价值.用MATLAB软件对标记的SD大鼠视网膜神经节细胞图像进行定量计数,所编写的程序不仅操作简单,适合非计算机专业人员使用;而且可避免眼睛计数所造成的人为误差,提高计数效率,提高可靠性、稳定性、可重复性和精确性.
-
加味交泰丸对大鼠糖尿病视网膜病变的防治作用及其机制
目的:探讨加味交泰丸对大鼠糖尿病视网膜病变的防治作用及其作用机制.方法:将大鼠随机分为正常组、造模组,造模组大鼠采用小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,30 mg· kg-1)尾静脉注射加高脂饲料喂养的方法建立2型糖尿病模型,2周后筛选糖耐量异常者随机分为糖尿病模型组和治疗组,治疗组以加味交泰丸煎剂2.05 g·kg-1ig,干预100 d后分别进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),检测糖化血红蛋白(HbA1C)及氧化应激相关指标.观察视网膜超微结构和神经节细胞的凋亡情况.结果:与正常组比较,模型组大鼠OGTT异常(P＜0.01),HbA1C(P ＜0.01)及氧化相关指标活性升高、抗氧化相关指标活性下降(P＜0.01),视网膜毛细血管基底膜明显增厚、神经节细胞凋亡增多；与模型组比较,治疗组大鼠OGTT改善(P＜0.01或P＜0.05),HbA1C(P ＜0.01)及氧化相关指标活性下降、抗氧化相关指标活性升高(P＜0.01),视网膜毛细血管基底膜未见明显增厚、神经节细胞凋亡减少.结论:加味交泰丸可防治大鼠早期糖尿病视网膜病变,可能与其抗氧化应激及减少视网膜神经节细胞凋亡有关.
-
护网明目散对高眼压下视网膜神经节细胞保护作用的研究
目的:观察护网明目散对实验性高眼压下视网膜神经节细胞的保护作用.方法:将实验兔48只造模后随机分为3组,每组16只.分别为模型组,中药(护网明目散)组,西药(尼莫地平片)组.各组分别在用药第1、2、3、4周检测视网膜组织中一氧化氮(NO)、谷氨酸的含量.结果:视网膜组织中NO及谷氨酸含量从用药第1周开始均有升高,以模型组升高明显.用药第1周中药组与模型组比较有显著性差异(P＜0.05);中药组与西药组、西药组与模型组比较均无显著性差异;用药第2、3、4周,中药组与模型组比较有显著性差异(P＜0.01);中药组与西药组、西药组与模型组比较均有显著性差异(P＜0.05).结论:护网明目散对实验性高眼压下视网膜神经节细胞具有保护作用.
-
补肾活血中药血清对高糖状态下纯化培养的视网膜神经节细胞活力的影响
目的 探讨补肾活血中药血清对体外高糖状态下纯化培养的视网膜神经节细胞活力的影响.方法 体外纯化SD大鼠视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs),模拟稳定高糖(50 mmol/L)及糖波动环境进行培养,以补肾活血中药血清进行干预,检测RGCs乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)漏出量,以推测RGCs活力.结果 RGCs的LDH漏出量(U/L)稳定高糖组24 h(1 349.17±215.50)、48 h(1 220.24±124.53)及72 h(1 982.14±219.03)均较正常对照组(1 628.10±122.10、1 484.13±127.55及2 155.75±140.44)降低(P<0.05);而糖波动组的LDH漏出量在72 h(2 299.60±88.35)较正常对照组增加(P<0.05),且糖波动组各时段的LDH漏出量均较稳定高糖组增加(P<0.05);稳定高糖中药干预组的LDH漏出量在72 h(1 797.62±146.40)时较稳定高糖组减少(P<0.05);糖波动中药干预组的LDH漏出量在48 h(1 259.92±87.74)和72 h(1 940.40±155.47)时均较糖波动组减少(P<0.05).结论 糖波动能明显降低RGCs细胞膜的稳定性,增加细胞膜通透性,降低细胞活力;补肾活血中药血清能降低本实验中稳定高糖及糖波动条件下RGCs的细胞膜通透性,提高细胞膜稳定性,增强其细胞活力,这可能是补肾活血中药复方防治糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DRP)的药物干预途径之一.
-
荧光金逆行标记观察正常大鼠视网膜神经节细胞及轴突
使用荧光金通过立体定位仪逆行标记对正常大鼠视网膜神经节细胞及其轴突进行观察研究.成年SD大鼠6只(12眼),体重250±20g,按照标记后1周,2周分为2组,每组3只(n= 6眼).将荧光金注射到大鼠的外侧膝状体和上丘,观察视网膜神经节细胞(RGCs)的数量和视网膜神经节细胞及其轴突的形态.结果显示:视网膜铺片的节细胞边界清楚,易于观察和计数.荧光金标记1周后,RGCs密度为2210±128个/mm2;标记后2周,RGCs密度为2164±117个/mm2.视网膜神经节细胞的轴突内荧光分布均匀,呈线性.结论是使用荧光金逆行标记能够可靠、有效地研究视网膜神经节细胞及其轴突.
-
Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压致大鼠视网膜损伤中作用
目的 观察Müller细胞反应性胶质化在急性高眼压(AOH)大鼠视网膜中变化及其抑制对视网膜损伤的影响.方法 建立大鼠AOH青光眼模型,分为正常对照(Ctrl)、AOH和AOH+玻璃体内注射胶质毒素α-氨基己二酸(AAA)后再灌注1、3和5d组,以及单纯AAA和AOH+ PBS对照组.TUNEL染色检测细胞凋亡,GFAP免疫荧光染色反应Müller细胞反应性胶质化程度,Thy-1染色标记视网膜神经节细胞(RGCs).结果 AOH可致大鼠视网膜内丛状层和内核层明显变薄、神经节细胞层内细胞排列紊乱和数量减少,并诱发Müller细胞反应性胶质化(GFAP表达增加).同时,AAA抑制Müller细胞反应性胶质化可明显缓解AOH所致RGCs丢失和凋亡发生.结论 Müller细胞反应性胶质化参与AOH所致视网膜损伤,抑制其反应性胶质化可能是改善高眼压性青光眼视网膜病变的一种有效治疗方法.
-
持续高眼压对大鼠视网膜神经节细胞的损伤
目的观察持续高眼压对大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的损害.方法烙闭大鼠上巩膜静脉,制作大鼠持续性高眼压模型,分时点摘取眼球,光镜及TUNEL法观察大鼠视网膜各层厚度变化和RGCs凋亡率,电镜观察RGCs超微结构变化.结果随着高眼压时间持续,视网膜神经节细胞及纤维层逐渐变薄,节细胞及轴突的超微结构呈进行性损害,神经节细胞的细胞凋亡率增加.结论持续高眼压导致大鼠RGCs的病理改变过程及其结果符合青光眼视神经损伤的病理特点.
-
光照对哺乳类动物生物钟的调节机制
人体结构不仅存在于空间,而且存在于时间中.由于地球每24 h自转一周,因此生物体内的各种功能都有明显的24 h昼夜节律.在长期生物进化过程中,生物机体内发育分化出一个特殊的器官--生物钟来协调各种不同组织与器官的昼夜节律.人体的生物钟位于下丘脑的视交叉上核.由于体内生物钟是在地球昼夜环境周期性的变化中进化形成的,因此光照是影响生物钟节律重要的因素.外界环境的光照信息是由一条独特的神经通路,从视网膜直接投射到视交叉上核,称为视网膜-下丘脑束. 这条神经通路不同于经典的视觉成像通路,它不参与视觉成像功能.视锥细胞与视杆细胞全都退化的盲人或动物毫无光感, 但他们的生物节律仍然受光照调节. 这一现象有很重要的临床意义.本文主要讨论光照对哺乳类动物生物钟调节的神经生物学机制.
-
CPT-环磷酸腺苷对视网膜节细胞再生的影响
目的探讨玻璃体内插入外周神经和玻璃体内注射CPT-环磷酸腺苷对轴突损伤的视网膜节细胞再生的影响. 方法 20只成年金黄地鼠随机分4组,每组5只.切断视神经(ON)并缝接坐骨神经为再生对照组(attached graft,AG);ON切断并缝接坐骨神经后再于玻璃体内注射CPT-cAMP和/或插入一小段自体坐骨神经(SN)为实验组.采用逆行示踪标记术,观察视网膜平铺片节细胞数. 结果 1.对照组(AG),视网膜再生的节细胞数为:1428±284个;2.外周神经组(AG+SN):每个视网膜再生的节细胞平均数为2220±415个;3.CPT-cAMP组(AG+cAMP):每个视网膜再生的节细胞平均数为2175±364个;4.外周神经和CPT-cAMP联合组(AG+cAMP+SN):每个视网膜再生的节细胞平均数为4255±820个;其中,AG+SN、AG+CPT组同AG组相比存在差异显著性(P<0.01);AG+CPT+SN组同AG、AG+CPT和AG+SN组相比均有差异显著性(P<0.01). 结论研究结果提示玻璃体内注射CPT+cAMP或联合应用外周神经和CPT-cAMP可大幅提高受损视网膜节细胞的再生.
-
不同时期视网膜前体细胞的培养
目的 研究不同时期视网膜前体细胞的培养.方法 分离E14和E18 SD大鼠的视网膜前体细胞,用改进DMEM/F12无血清培养基悬浮培养并利用体外诱导分化、免疫细胞化学、扫描电镜和透射电镜等方法对细胞进行鉴定.结果 视网膜前体细胞在DMEM/F12无血清培养基中悬浮成球,贴壁后,细胞逐渐从细胞球向周围迁移分化.扫描电镜可见细胞球和分化细胞的形态,透射电镜可见细胞球和分化细胞的超微结构.免疫细胞化学显示,悬浮培养的细胞球中大部分细胞表达神经外胚层源性干细胞标志物nestin和细胞分裂增殖标志物BrdU.贴壁后,视网膜前体细胞能分化为多种视网膜细胞类型,包括Thy1.1阳性的视网膜神经节细胞.E14和E18视网膜神经节细胞的百分比分别为16.91%±4.05%和4.65%±1.88%,两组比较,差异有统计学意义(t=15.04,P＜0.001).结论 改进DMEM/F12无血清培养基可成功培养视网膜前体细胞,培养的细胞具有无限增殖和多向分化潜能.早期视网膜前体细胞向视网膜神经节细胞分化的百分比较高.
-
胶质细胞引导神经元建立突触
早在1997年，Barres等就报道过胶质细胞可以促进突触间的联系。与胶质细胞共同生长的神经元突触的活跃程度是独自生长的神经元的10倍。他们推测，胶质细胞在某种程度上放大了神经元发出的信号或者提高了神经元接受信号的敏感度。后来，Barres实验室又选定视网膜神经节细胞为实验对象，这些神经元细胞在体外可以不依赖胶质细胞而存活。结果表明，这些神经元生长在胶质细胞周围，即使没有接触到胶质细胞，对多种刺激的反应程度也比那些独自生长的神经元要强出7倍。研究组还发现了几种与突触建立相关的蛋白质，同样，前者聚集蛋白质的数量亦是后者的7倍。此外，在显微镜下其实两种神经元突触的大小、形状和包含神经递质的囊泡的数量都是一样的，但在胶质细胞存在的情况下突触的数量却是7倍之多。胶质细胞不仅引导神经元建立突触，同时也帮助神经元维持它们已经建立的突触，一旦脱离了胶质细胞，神经元在几天之内就会使突触脱落。神经元在发育的极早期就会向脑的适当部位发出树突和轴突，但是只到许多天以后，星形胶质细胞也发育成熟的同时，神经元相互之间联系的突触才会大量形成。一旦揭示了星形胶质细胞启动突触建立的信号机制，将有助于解释神经元保存记忆的原因，现在的事实证明，胶质细胞参与了这个过程。 (Science,2001，291:569～570a)(姚小皓李学军)
-
LASIK术中负压吸引对视神经及视网膜功能的早期影响
激光原位角膜磨镶术(laser in situ keratomileusis,LASIK)因其显著的矫治效果,已被广泛应用于临床.然而它的安全性和对眼部的不良影响,例如术中负压吸引造成的瞬时高眼压是否造成视网膜缺血和视神经纤维层的损害等始终是人们关心的问题.急性高眼压对眼组织的损伤,实质是缺血-再灌注的问题.高眼压可造成视网膜缺血,轴浆流运输在筛板处受阻,视网膜神经纤维层(retinal nerve fiber layer,RNFL)变薄、缺损,造成视网膜神经节细胞营养不良,节细胞发生凋亡[1].青光眼、一过性高眼压也可造成视网膜完全和部分缺血,在临床上常用视野的改变来测量这种损害.越来越多的研究表明,在检查出视野缺损之前,患者的视神经纤维可能已有40%丧失.本文就LASIK术中负压吸引导致的瞬时高眼压对神经纤维层、玻璃体、视网膜及视神经的影响进行简要综述.
-
活血化瘀法治疗视神经萎缩50例临床观察
视神经萎缩是指各种原因导致的视网膜神经节细胞轴索广泛损害出现萎缩变性,患眼视力下降、视盘色淡(或苍白)、视野缺损为主要特征.我院采用活血化瘀方法,运用中药葛根素注射液加血府逐瘀汤加减治疗视神经萎缩,疗效显著,现报告如下:
-
糖皮质激素对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的影响
糖尿病所致糖皮质激素增加对视网膜神经节细胞( RGC )的影响及机制尚不完全清楚。本实验利用链脲佐菌素腹腔注射建立1型糖尿病大鼠模型,再向眼球玻璃体内注射腺病毒( DM组)、腺病毒包装的糖皮质激素受体反义寡核苷酸( siGR组)或阴性核苷酸序列( ncRNA组),正常大鼠玻璃体腔注射腺病毒为对照组(CON组)。12周后,HE染色显示,DM组及ncRNA组大鼠视网膜RGC 密度下降,较CON组减少(P<0.01),siGR组大鼠RGC密度均匀,排列有序,较 CON 组无明显变化(P>0.05)；与 CON 组相比,DM 组及scRNA组大鼠视网膜鼻侧及颞侧4个象限的视网膜厚度均明显变薄( P<0.01),而siGR组无明显变化( P>0.05)。免疫组织化学染色可见DM组及ncRNA组大鼠ROCK阳性的RGC数量较多且深染,而siGR组及CON组大鼠视网膜ROCK阳性RGC数量较少,着色较浅。 Western-blot检测结果表明,与CON组相比,DM组及scRNA组大鼠视网膜ROCK表达上调(P<0.01),siGR组无明显变化(P>0.05)。本研究提示,拮抗糖皮质激素受体能下调ROCK在糖尿病大鼠视网膜RGC内的表达,恢复RGC密度及视网膜厚度。
-
NgR对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的影响
视网膜神经节细胞( RGC)轴突形成了视神经,RGC凋亡是糖尿病视网膜病变( DR)的主要病理表现之一。 Nogo蛋白受体( NgR)能抑制神经再生,NgR表达上调是多种致盲性疾病RGC凋亡的主要机制。本研究利用链脲佐菌素诱导了糖尿病大鼠模型,构建了抑制NgR表达的siNgR腺病毒。结果发现,在视网膜NgR仅存在于RGC细胞内,糖尿病大鼠视网膜变薄, RGC数量减少,凋亡增加,突触数量降低, NgR的下游分子ROCK蛋白及NR2 B随着NgR的表达增加而上调。糖尿病大鼠玻璃体内注射重组腺病毒抑制NgR表达之后,能恢复糖尿病大鼠视网膜的病理变化。进一步的离体研究发现, NgR/ROCK信号通路激活能导致RGC胞体缩小,突起萎缩；NgR/NR2 B信号通路激活,能导致RGC细胞活力下降甚至凋亡。因此我们认为,糖尿病状态下,NgR表达上调通过ROCK信号通路影响了视网膜RGC细胞形态,通过NR2B信号通路导致了RGC细胞凋亡,RGC数量和形态的变化影响了视网膜突触数量,这可能是DR视力受损的重要机制之一。
-
超声微泡介导bcl-xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡作用的实验研究
目的 评价超声微泡介导bcl-xl基因抗视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的作用.方法 体外混合培养LongEvans大鼠RGCs,并建立N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)损伤的RGCs凋亡模型.将体外培养的RGCs分为A组(正常对照组),B组(NMDA组),C组(bcl-xl转染+NMDA组);其中C组在加入NMDA前48 h用超声微泡介导bcl-xl转染RGCs.转染48 h后采用免疫组化分析转染细胞和未转染细胞的bcl-xl蛋白水平;加入NMDA 36 h后采用吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双荧光染色检测细胞凋亡的形态特征,琼脂糖电泳检测细胞凋亡DNA片断.结果 免疫组化检测表明转染细胞与未转染细胞的bcl-xl蛋白表达水平有差异,AO/EB检测发现B组可见大量凋亡小体,C组可见少许凋亡细胞.琼脂糖电泳检测亦发现B组呈典型的DNA"梯度"条带,而A组和C组无明显的DNA"梯度"条带.结论 超声微泡介导bc1-xl基因抗视网膜神经节细胞凋亡有一定作用,有可能为视网膜视神经疾病的基因治疗提供一种新的方法.
-
瞬时高眼压对兔视网膜BDNF/TrkB浓度影响的研究
目的 观察准分子激光原位角膜磨镶术(LASIK)术中负压吸引对兔视网膜BDNF/TrkB浓度的影响,从神经营养因子被剥夺的角度分析LASIK术中负压吸引引起视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的发生机制.方法 48只健康新西兰大耳白兔随机分为实验对照组、负压吸引20 s组、吸引45 s组和吸引3 min组.实验对照组只进行激光治疗,负压吸引各组先用负压发生器吸引眼角巩膜缘,持续20 s、45 s及3 min,分别于术后即刻、7 d、10 d、14 d各时间点处死白兔,取视网膜组织检测脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB的浓度.结果 视网膜BDNF/TrkB浓度的动态观察:与实验对照组相比,负压吸引20 s和45 s组视网膜BDNF/TrkB的浓度变化无统计学意义(P>0.05).而负压吸引3 min组视网膜BDNF和TrkB的浓度都有所增加,与实验对照组差异有统计学意义(P<0.05),且都于术后7 d达到高峰,10 d则明显下降,14 d回到接近正常对照组水平.负压吸引3 min后各时间点BDNF和TrkB的浓度变化与实验对照组比较,术后即刻和7 d差异有统计学意义(P<0.05),术后10 d和14 d差异无统计学意义(P>0.05).结论 LASIK术中负压吸引引起的眼压急剧升高,可以导致视网膜中BDNF/TrkB浓度变化,但这种改变为可逆的;负压吸引持续时间越长改变越明显.神经营养因子被剥夺是高眼压引起RGCs凋亡的机制之一.
-
甲钴胺对青光眼视神经保护作用的临床研究
青光眼是一种隐匿性致盲性疾病，目前它的发病率和致盲率在世界范围内都呈上升趋势［1］。关于青光眼的危害，认为是高眼压状态下对视网膜神经节细胞造成损害。对于青光眼的治疗主要是将眼压降至安全的靶眼压范围。当眼压控制后，如何阻止视网膜神经节细胞的进一步凋亡和挽救被高眼压损害功能的神经节细胞，越来越引起眼科临床医师的重视。
