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反复妊娠失败患者种植窗期子宫内膜调节性T细胞功能相关因子的表达
目的 分析反复妊娠失败患者种植窗期子宫内膜调节性T细胞相关生物标记物的表达情况.方法 利用免疫组织化学技术分析反复种植失败(repeated implantation failure,RIF)(n=23)、复发性流产(recurrent miscarriage,RM)(n=33)与对照组(n=15)女性FOXP3、CTLA-4和TGF-β3水平.通过Vectra 自动病理成像定量分析系统计算其阳性细胞率.结果 RIF组、RM组患者子宫内膜CTLA-4阳性细胞率显著高于对照组(P<0.01),而TGF-β3阳性细胞率显著低于对照组(P<0.01).FOXP3阳性细胞率与CTLA-4阳性细胞率显著正相关(r=0.68,P<0.01).结论 RIF、RM患者子宫内膜种植窗期TGF-β3、CTLA-4表达异常,表明TGF-β3、CTLA-4可能参与RIF、RM种植窗期子宫内膜免疫耐受调节,影响其子宫内膜容受性.
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双酚A对发育期大鼠免疫器官及调节性T细胞功能影响的研究
目的 探讨发育期大鼠暴露低剂量双酚A(BPA)对免疫器官及调节性T细胞功能的影响及机制.方法 初断乳20只雄性大鼠按照体重随机分为2组,分别为对照组(含1％无水乙醇的水)和双酚A染毒组(1μg/ml),每组10只,通过饮水方式进行BPA染毒8周.实验结束后,计算大鼠胸腺系数和脾脏系数;EHSA方法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)的含量;流式细胞术检测大鼠脾脏CD4 +T细胞中调节性T细胞(Treg)数量和脾细胞线粒体膜电位.结果 与对照组比较,BPA组(1μg/ml)大鼠胸腺系数和脾脏系数未见明显差异;血清TNF-α和IFN-γ水平明显升高(P＜0.01和P＜0.05),IL-4水平没有明显差异;脾脏细胞中Treg数量降低(P＜0.05),脾细胞线粒体膜电位下降(P＜0.05).结论 低剂量BPA(1μg/ml)暴露对发育期雄鼠的免疫器官脏器系数未见显著影响,但可影响Th1免疫应答;其机制可能与BPA增加机体炎症反应和诱导脾细胞凋亡有关.
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邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对调节性T细胞分化和功能的影响
目的 研究环境持久性有机污染物邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(Di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)对调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)分化比例及其抑制功能的影响.方法 构建生长期小鼠DEHP暴露模型,采用流式细胞术检测脾脏CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞数量；免疫磁珠分选法制备CD4+ CD25+T细胞和CD4+ CD25-T细胞,CCK法检测CD4+ CD25+T细胞和CD4+ CD25-T细胞增殖能力,混合淋巴细胞反应检测CD4+ CD25+T细胞对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制作用.结果 生长期小鼠经DEHP暴露处理后,CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg细胞数量逐渐减少,CD4+ CD25+T细胞体外增殖能力及其抑制CD4+ CD25-T细胞增殖的作用均逐渐降低.结论 DEHP能够从数量和功能两方面下调CD4+ CD25+ Treg细胞分化比例及其对效应性细胞的抑制功能.
关键词： 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 调节性T细胞 免疫抑制 -
ICU脓毒症患者的T淋巴细胞亚群与调节性T细胞的检验结果分析
目的:分析ICU脓毒症患者的T淋巴细胞亚群与调节性T细胞的检验结果.方法:选择2016年8月～2018年8月我院ICU收治的60例脓毒症患者作为研究组,选择同期于我院进体检的60例健康者作为对照组.比较两组T淋巴细胞亚群与调节性T细胞结果.结果:研究组CD3+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+高于对照组(P<0.05),CD4+低于对照组(P<0.05).两组CD8+对比无明显差异(P>0.05).结论:脓毒症患者T淋巴细胞亚群与调节性T细胞检验结果明显异常,可能在免疫发病机制中具有重要的作用.
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桥本甲状腺炎患者外周血调节性T细胞计数及临床意义分析
目的 本文主要研究对于桥本甲状腺炎患者进行外周血的调节性T细胞计数的临床意义方法 选取我院2010年1月至2013年1月的90例患者调节性T细胞数进行汇总分析,同时,选择40例非甲状腺炎患者作为对照组,同样对患者进行相关的细胞计数,对比两组患者之间的差异结果 通过对桥本甲状腺炎患者以及对照组患者的外周血相关细胞进行计数发现,和非毒性的甲状腺肿患者的外周血中 CD4+T 细胞数量、CD8+T 细胞数量和 CD4+/ CD8+T细胞的比值之间差异不具有统计学的意义( P > 0.05),而通过对桥本甲状腺炎的患者进行外周血计数调节性 T 细胞,和非毒性的甲状腺肿患者调节性 T 细胞数量相比,显著较低,差异具有统计学意义( P < 0.01) 结论 通过实验可以显示发生桥本甲状腺炎患者的调节性T细胞数量发生异常,对于检测疾病具有重要意义.
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调节T细胞在甲氨喋呤治疗葡萄膜炎患者中的表达及其意义的临床研究
目的:为了研究调节T细胞在甲氨喋呤治疗葡萄膜炎患者中的表达及其意义.方法 本文通过采用三色免疫荧光染色,免疫荧光染色与流式细胞检测相结合来探讨葡萄膜炎患者服用甲氨蝶呤不同时期外周血液中的调节性T细胞CD4+,CD25+,CTLA-4细胞比例以及CD4+胞内因子IFN-γ,TNF-αIL-2的表达与体检正常者之间关系.结果 甲氨蝶呤对患者具有较好的疗效,且对患者体内的免疫细胞的分化与表达起到一定直接或间接的抑制作用来避免自身免疫体液反应的发生.结论 实验表明甲氨蝶呤对葡萄膜炎患者具有较好临床疗效.
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艾拉莫德对类风湿关节炎患者Th17细胞与Treg细胞失衡的调节作用
目的 探讨艾拉莫德对类风湿关节炎患者17型辅助性T细胞(Th17)与调节性T细胞(Treg)失衡的调节作用.方法 选取2016年6月至2017年1月住院的活动期类风湿关节炎患者74例,随机分为A组44例和B组30例.B组给予安慰剂口服,A组给予艾拉莫德口服,两组均坚持服药24周.采用流式细胞术检测外周血Th17和Treg细胞比例;采用酶联免疫吸附技术检测血浆Th17和Treg细胞分泌的相关细胞因子;治疗前后对患者进行DSA28,ACR20,ACR50和ACR70等综合疾病临床评分.结果 A组治疗24周后DSA28评分较治疗前有明显改善,差异有统计学意义(P<0.05);治疗24周后A组DSA28评分及ACR20,ACR50,ACR70改善情况均优于B组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗24周后,A组外周血中Th17细胞(CD4+IL-17+)比例相较于治疗前降低,但差异无统计学意义(P>0.05),而Treg细胞(CD4+CD25+)比例相较于治疗前显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);治疗24周后,B组外周血中Th17细胞比例无明显改变,Treg细胞比例略有升高,但与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05).治疗24周后,A组促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A水平较治疗前显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗24周后,B组促炎细胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-17A水平较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 艾拉莫德可通过下调Th17细胞,上调Treg细胞来恢复类风湿关节炎患者内环境细胞稳态,从而缓解疾病进展.
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CD4+CD25+调节性T细胞治疗反复性流产的动物实验研究
目的:通过动物实验,探讨CD4+ CD25+调节性T细胞用于反复性流产免疫治疗的效果.方法:密度梯度离心法从正常昆明白新生鼠的血液和能正常生育的BALB/c雄鼠血液中分别分离单核淋巴细胞,再用免疫磁珠法筛选出CD4+ CD25+调节性T细胞;以CBA/J雌鼠×DBA/2J雄鼠交配组合作为反复自然流产的动物模型,于孕期给予鼠尾静脉注射不同种类的淋巴细胞;采用独立样本t检验对各组得到的数据进行分析和处理.结果:注射CD4+ CD25+T细胞组小鼠CD4+ CD25+T细胞在CD4+T细胞中的占比为(17.49±0.60)％,高于注射单核淋巴细胞组的(14.68±0.83)％、无菌PBS组的(9.54±0.85)％和不注射组的(9.28±0.68)％(t=4.754,P＜0.05;t=13.242,P＜0.05;￡=15.621,P＜0.05).CD4+ CD25+调节T细胞中的Foxp3蛋白相对表达量(5.85±0.45)高于注射单核淋巴细胞组(2.86士0.54)、无菌PBS组(1.08土0.16)和不注射组(1.00±0.00)(t=7.276,P＜0.05;￡=17.227,P＜0.05;t=18.635,P＜0.05).在第4天和第8天分别注射调节T细胞得到了较好的效果,胚胎吸收率为(4.92±0.08)％,低于注射单核淋巴细胞组的(13.07±0.06)％、注射无菌PBS组的(23.11±0.12)％和不注射组的(25.47±0.11)％(t=-2.603,P＜0.05;t=-4.012,P＜0.05;t=-4.700,P＜0.05).结论:给反复性流产小鼠于孕期进行多次CD4+ CD25+T细胞注射,免疫治疗效果好于传统的注射单核淋巴细胞.
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自身免疫性肝炎患者外周血Foxp3+调节性T细胞表达变化及临床意义
目的:检测自身免疫性肝炎(AIH)患者外周血Foxp3+调节性T细胞水平变化,并探讨其在AIH中的意义.方法:选取30例AIH患者(AIH组)及20例健康志愿者(对照组).采用流式细胞仪分析两组外周血中Foxp3+调节性T细胞的比例;采用ELISA法检测两组血清白介素-10(IL-10)水平.分析外周血Foxp3+调节性T细胞及血清IL-10水平与AIH肝功指标及免疫球蛋白的相关性.结果:①AIH组外周血中Treg、Tfr的比例及血清中IL-10水平均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05).②AIH组血清中IL-10水平与外周血Treg细胞比例呈正相关,与Tfr无相关性.③AIH组血清中IL-10水平与免疫球蛋白水平呈负相关.结论:AIH患者外周血中Foxp3+调节性T细胞及血清中IL-10表达下降,与AIH的发生、进展有关.
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他克莫司联合激素对激素耐药难治性肾病综合征患儿调节性T细胞的影响及其临床疗效观察
目的：探讨他克莫司联合激素治疗激素耐药难治性肾病综合征患儿的临床疗效。方法：收治激素耐药难治性肾病综合征患儿30例，采用他克莫司联合激素治疗，观察治疗效果。结果：治疗前后，血肌酐差异无统计学意义(P＞0.05)，血清蛋白和尿蛋白差异有统计学意义(P＜0.05)，天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)差异无统计学意义(P＞0.05)，胆固醇和甘油三酯差异有统计学意义(P＜0.05)。蛋白质尿、低蛋白血症、严重水肿和高脂血症都得到显著缓解。结论：他克莫司联合激素治疗激素耐药难治性肾病综合征患儿的临床疗效显著。
关键词： 他克莫司联合激素 激素耐药难治性肾病综合征 调节性T细胞 -
探讨周围Th17细胞和调节性T细胞在儿童过敏性鼻炎与支气管哮喘中的失衡及临床意义
目的 研究周围Th17细胞和调节性T细胞在儿童过敏性鼻炎与支气管哮喘中的失衡及临床意义.方法 将2016年8月—2017年12月青岛大学附属医院收治的120例支气管哮喘、 过敏性鼻炎患儿作为观察对象,分成支气管哮喘组(BA组)、单纯性过敏性鼻炎组(AR组)、支气管哮喘合并过敏性鼻炎组(BA+AR组),各40例.对比3组儿童外周血Th17细胞、Treg细胞及FEV1％、IgE、TGF-β1表达水平;分析BA+AR组患儿的FEV1％、IgE和Th17、Treg、IL-17、TGF-β1相关性.结果 BA组、AR组、BA+AR组患儿的周围Th17细胞水平为(7.9±1.3)％、(7.7±1.2)％、(15.6±2.0)％,BA+AR组高于BA组、AR组,差异有统计学意义(t=20.416、21.422,P<0.05);而3组Treg表达水平分别为(2.1±1.2)％、(2.1±1.4)％、(1.0±0.2)％,BA+AR组低于BA组、AR组,差异有统计学意义(t=5.719、4.919,P<0.05);BA+AR组外周血FEV1％、TGF-β1表达水平低于BA组、AR组,差异有统计学意义(P<0.05);BA+AR组患儿的血浆IgE水平明显高于BA组、AR组,差异有统计学意义(P<0.05);BA+AR组患儿的血浆IgE水平和Th17、IL-17的表达水平显示为正性相关,和Treg、TGF-β1的表达水平显示为负性相关;而FEV1％水平和Th17、IL-17的表达水平显示为负性相关,和Treg、TGF-β1的表达水平显示为正性相关.结论 儿童过敏性鼻炎与支气管哮喘的周围Th17细胞和调节性T细胞存在失衡情况,并表达水平和IgE、FEV1％具有一定相关性,能为临床诊治提供参考.
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褪黑素对哮喘大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响及抗炎作用
目的:研究褪黑素对哮喘大鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响及抗炎作用.方法:32只SPF级SD大鼠随机分成4组造模,哮喘组、MT组、地塞米松组、正常组,每组8只.各组于后一次雾化激发后取外周血涂片染色,计数外周血中嗜酸性粒细胞(EOS)百分比;收集肺泡灌洗液(BALF),计数炎症细胞总数;制作肺组织石蜡切片,HE染色计数气道周围EOS数目;用免疫增强浊度法检测血清中IgE水平;用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+ Tr数目变化.结果:①哮喘组外周血中CD4+CD25+Tr/CD4+T细胞比值与气道周围EOS细胞数呈现高度负相关(r=-0.73,P<0.05),与BALF细胞总数亦高度负相关(r=-0.78,P<0.05),与血清IgE水平未见显著相关;②CD4+CD25+ Tr/ CD4+T细胞比值哮喘组显著高于其他各组(均为P<0.01),其他三组差异无统计学意义;③MT组气道周围EOS计数、外周血EOS比例、BALF细胞总数及IgE水平明显低于哮喘组(均为P<0.01).结论:CD4+CD25+Tr参与了哮喘的发病.褪黑素能显著降低哮喘大鼠CD4+CD25+ Tr的数目,有效减轻哮喘大鼠气道炎症和血清IgE上升水平.
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宫颈鳞癌与腺癌微环境中Foxp3的表达及临床意义
目的 观察宫颈鳞癌与腺癌微环境中Foxp3的表达情况.方法 采用免疫组化方法检测宫颈鳞癌(FIGOⅠ期或ⅡA期,26例)、宫颈腺癌(FIGOⅠ期或ⅡA期,19例)及正常宫颈(20例)组织中Foxp3的表达情况.结果 Foxp3阳性细胞主要分布在宫颈间质部;各组病例中,间质部Foxp3阳性细胞数量均明显高于上皮内,差异具有统计学意义;宫颈鳞癌组间质部Foxp3阳性细胞数量明显多于正常宫颈组与宫颈腺癌组,差异有统计学意义;正常宫颈组与宫颈腺癌组间质部Foxp3阳性细胞数量比较及各组之间宫颈上皮内Foxp3阳性细胞数量比较,差异均无统计学意义.结论 CD4+CD25+调节性T细胞可能在宫颈鳞癌患者免疫耐受中发挥重要作用,而在宫颈腺癌发生方面可能作用不大.
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调节性T细胞、叉状头螺旋转录因子与肿瘤的关系
调节性T细胞(regulatory T cells,Tregs)是具有免疫抑制的T细胞亚群.在肿瘤微环境中,Tregs分泌多种抑制性细胞因子,抑制免疫活性细胞的增殖及淋巴细胞的分化、同时促进抗凋亡分子的表达,使肿瘤细胞能抵御免疫效应细胞的诱导凋亡的作用.叉状头螺旋转录因子(forkhead box protein 3,FOXP3),为XP染色体11,23染色体上的X连锁基因,在Tregs的发育及功能表达上起着决定性的作用.本综述将讨论调节性T细胞的种类及其与FOXP3的免疫抑制机制及与肿瘤之间的关系.
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多发性硬化症的治疗展望
多发性硬化症(MS)的发病原因到目前为止尚不清楚,同时也没有发现行之有效的治疗方法.但是,有几个关于它的发病机理已被阐明,围绕这些机理研发一些治疗方法.目前,国际上已被公认有效的药物仅仅有干扰素β (IFN-β)一种.近,在我们的研究中,T细胞入侵时与重要的α-整合蛋白相对应的单克隆抗体,和与B细胞上抗原CD52相对应的单克隆抗体,阿仑单抗等等都作为新型药物来用于治疗.我们期待这些药物能使预期复发次数变少,以减少患者的门诊复诊次数[1].这种治疗方法,是从根本上起到治疗的效果,用于抑制多发性硬化症(MS)的发病机制,这些正是我们所期待的.另外,近多发性硬化症(MS)可以引起轴突损伤的研究也被关注,与炎症性脱髓鞘相比较,如何抑制轴突变性显得更为重要.在本次讨论中,调节性自体免疫功能的T细胞在免疫系统中具有很强的防御功能,它将作为一种新的尝试,抑制多发性硬化症(MS)疾病的发生,同时我们还要讨论如何抑制轴突变性来尝试开发多发性硬化症(MS)的药物治疗.
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非酒精性脂肪性肝病患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的变化及意义
目的 观察非酒精性脂肪性肝病患者外周血单个核细胞(PBMC) CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞的变化及与胰岛素抵抗的关系,初步探讨其意义.方法 46例非酒精性脂肪性肝病患者根据体质指数分为肥胖组(21例)及非肥胖组(25例),42名健康医务工作者作为健康对照.检测空腹胰岛素及空腹血糖水平,计算胰岛素抵抗指数；采用流式细胞术检测患者外周血PBMC CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞数目,并计算CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比;分析CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞与胰岛素抵抗间的关系.结果 与健康对照组相比,非酒精性脂肪性肝病患者外周血PBMCCD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞数及其占CD4+T淋巴细胞的百分比均显著下降(P＜0.01,P＜0.05),但在肥胖组与非肥胖组间差异均无统计学意义(P＞0.05)；肥胖者胰岛素抵抗指数较非肥胖者显著升高(P＜0.01)；肥胖组内PBMC CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞数值及其占CD4+T淋巴细胞的百分比均与胰岛素抵抗指数呈明显负相关(r=-0.989,P＜0.01).结论 非酒精性脂肪性肝病患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞数目和比例减少,可能存在自身免疫调节功能的紊乱；PBMC CD4+ CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过调节胰岛素抵抗参与非酒精性脂肪性肝病的形成和发展.
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冠心病慢性心力衰竭心肾阳虚证患者免疫功能及血浆细胞因子水平的研究
目的 探讨冠心病慢性心力衰竭心肾阳虚证患者的免疫激活状态及细胞因子水平.方法 收集2013年8月-2014年2月间中国中医科学院广安门医院心内科慢性心力衰竭的住院患者68例,其中心肾阳虚证56例,非心肾阳虚证12例,采用流式细胞技术测定外周血CD4+ CD25+ Foxp3+Treg细胞比例,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆细胞因子白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平.结果 冠心病慢性心力衰竭心肾阳虚证患者外周血CD4+ CD25+Foxp3+ Treg细胞比例低于非心肾阳虚证患者,而血浆IL-10、TGF-β1水平无明显差异.结论 冠心病慢性心力衰竭心肾阳虚证患者存在较强的免疫激活状态.
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黄芪甲苷在体外对高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T淋巴细胞免疫功能的影响
目的 在前期实验基础上,明确经高迁移率族蛋白B1(HMGB1)刺激的小鼠调节性T细胞(Treg)对CI4+CD25-T淋巴细胞免疫功能的影响,观察黄芪甲苷(AST Ⅳ)对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用.方法 随机将CD4+ CD25-T细胞分为对照组、Treg组、(HMGB1+ Treg)组、(HMGB1+ AST Ⅳ+Treg)组.4组均于培养后72 h检测脾脏CD4+ CD25-T细胞增殖活性及CD4+ CD25-T细胞孵育上清液中IL-4、IFN-γ表达水平.结果 Treg组CD4+ CD25-T细胞增殖活性受到抑制(P＜0.01),其上清中IFN-γ表达水平较对照组明显下降(P＜0.01),IL-4表达水平较对照组显著增加(P＜0.01);HMGBI+ Treg组CD4+ CD25-T细胞增殖活性受抑制程度明显逆转(P＜0.01),与Treg组比较,(HMGB1+Treg)组IFN-γ表达水平明显升高(P＜0.01),IL-4表达水平显著下降(P＜0.01);与(HMGB1+ Treg)组比较,(HMGB1+ AST Ⅳ+ Treg)组CD4+ CD25-T细胞增殖受抑制程度显著加重(P＜0.01),IFN-γ表达水平明显降低(P＜0.01),IL-4水平显著上升(P＜0.01).结论 HMGB1在体外可明显降低小鼠Treg免疫抑制能力,而黄芪甲苷可拮抗此抑制作用,表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用.
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补肾温阳中药对哮喘小鼠Foxp3-mRNA表达及CD4+CD25+调节性T细胞水平的影响研究
目的 建立哮喘样气道炎症小鼠动物模型.观察补肾温阳中药对哮喘小鼠Foxp3-mRNA表达与活化以及对CD4+CD25+调节性T细胞的数量、分化与功能的影响,探讨补肾温阳法在防治过敏性哮喘气道炎症的作用机制.方法 100只BALB/c小鼠随机分成4组:正常对照组、哮喘模型组、中药干预组及中药+抗体干预组,除正常对照组外,其余各组均以卵白蛋白(OVA)致敏激发方法建立小鼠哮喘模型,中药+抗体干预组小鼠于激发前30min事先给予抗IL-10&抗TGF-β抗体滴鼻.同时,中药干预组组、中药+抗体干预组于实验的第1天至第21天,每只小鼠给予补肾温阳中药(用淫羊藿、巴戟天、补骨脂免煎颗粒配制500μl)灌胃qod,哮喘模型组、正常对照组予等量的生理盐水作对照.观察各组支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞分类及计数结果;取小鼠左肺组织作病理切片观察炎症改变;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组BALF上清细胞因子IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度及血清IgE水平;分离小鼠脾脏细胞,以流式细胞仪方法检测CD4+CD25+Treg细胞比例;用RT-PCR方法检测转录因子Foxp3-mRNA的表达.结果 哮喘模型组、中药+抗体干预组小鼠BALF中细胞总数以及淋巴细胞、中性粒细胞和EOS百分比分别均高于正常对照组、中药干预组(分别为P<0.01、P<0.05、P<0.05 和P<0.01),而巨噬细胞百分比与正常对照组、中药干预组相比较,则分别有所降低(P<0.05).正常对照组、中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度分别高于哮喘模型组(P<0.01)和中药+抗体干预组(P<0.05);中药干预组BALF中IL-10、IFN-γ、TGF-β1浓度低于正常对照组(P<0.05) ;哮喘模型组BALF上清细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)浓度高于中药+抗体干预组(P<0.05).血清IgE水平正常对照组、中药干预组均分别低于哮喘模型组(均为P<0.01)及中药+抗体干预组(均为P<0.05);中药干预组血清IgE水平低于正常对照组(P<0.05).哮喘模型组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平较正常对照组、中药干预组均明显减低,差异有统计学意义(分别为P<0.01,P<0.05);与哮喘模型组、中药+抗体干预组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平显著增高,差异有统计学意义(均为P<0.05);与正常对照组比较,中药干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平较低,差异有统计学意义(P<0.01);与哮喘模型组比较,中药+抗体干预组小鼠脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞数量、FoxP3-mRNA表达水平降低,差异有统计学意义(均为P<0.05).结论 CD4+CD25+调节性T 细胞、FoxP3-mRNA、细胞因子(IL-10、IFN-γ、TGF-β1)均参与了支气管哮喘的发病过程,补肾温阳中药可通过上调CD4+CD25+调节性T细胞数量、诱导FoxP3-mRNA的表达与活化、降低血清IgE水平及增加IL-10、IFN-γ、TGF-β1含量等机制来达到减轻哮喘炎症的作用.
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黄芪甲苷对体外高迁移率族蛋白B1介导小鼠调节性T细胞免疫功能的影响
目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）刺激的小鼠调节性T细胞（CD4＋CD25＋Treg）对CD4＋CD25-T细胞免疫功能的影响及黄芪甲苷（AST Ⅳ）对HMGB1介导Treg免疫功能的拮抗作用。方法采用清洁级BALB/c小鼠，活杀后分离脾脏的CD4＋CD25＋Treg、CD4＋CD25-T细胞，将CD4＋CD25-T细胞在48孔板上随机分为4组（每组12孔）培养，对照组：单纯CD4＋CD25- T细胞；Treg实验组：CD25＋∶CD25-按照1∶10比例加入100μl CD4＋CD25＋Treg与CD4＋CD25-T细胞共同培养；HMGB1＋Treg组：按CD25＋∶CD25-比例为1∶10加入100μl经HMGB1（1μg/ml）刺激72 h的Treg与CD4＋CD25-T细胞进行共培养；HMGB1＋AST IV＋Treg组： CD25＋∶CD25-按照1∶10比例加入100μl经HMGB1（1μg/ml）、AST IV（100μg/ml）刺激72 h的CD4＋CD25＋Treg与CD4＋CD25-T细胞共同培养。以上4组均于培养后72 h重新分离收集CD4＋CD25-T细胞及其上清液，采用噻唑蓝（MTT）法检测脾脏CD4＋CD25-T细胞增殖活性；ELISA法检测CD4＋CD25-T细胞活化核因子（NFAT）活性、孵育上清液IL-2表达。结果将CD4＋CD25＋Treg加入CD4＋CD25-T细胞培养后，CD4＋CD25-T细胞增殖活性受到抑制（0.166±0.039），P＜0.01，NFAT活性（0.156±0.035）、IL-2水平（2.38±0.58）pg/ml均较对照组下降（P＜0.01）。加入经HMGB1刺激的Treg后，CD4＋CD25-T细胞增殖活性受抑制程度逆转（0.477±0.097），P＜0.01。与CD4＋CD25＋Treg组比较，HMGB1＋Treg组NFAT活性（0.409±0.094）、IL-2（4.55±0.96）pg/ml均升高（P＜0.01）。与HMGB1＋Treg组比较，HMGB1＋AST Ⅳ＋Treg组CD4＋CD25-T细胞增殖受抑制程度加重（0.287±0.052）、NFAT活性（0.261±0.046）、IL-2水平（2.73±0.62）pg/ml降低（P＜0.01）。结论 HMGB1在体外可抑制小鼠Treg免疫功能发挥，而ASTⅣ可拮抗HMGB1对Treg免疫功能的抑制作用，表明其对HMGB1介导的促炎效应具有治疗作用。
