首页 > 文献资料
-
IL-8对肺癌NCI-H157细胞增殖和迁移的影响
目的 研究IL-8对肺癌细胞增殖和迁移的影响,初步探讨IL-8调控肺癌细胞的分子机制.方法 体外培养肺癌NCI-H157细胞,用不同浓度的IL-8刺激肺癌细胞,分别用MTT法检测IL-8对肺癌细胞的增殖作用;划痕损伤实验和Transwdl小室两种方法检测肺癌细胞的迁移能力;Western blot检测Rac1和Cdc 42蛋白的表达变化.结果 IL-8促进NCI-H157细胞增殖,但随浓度增加,细胞增殖活性差异无统计学意义;细胞划痕损伤和Transwell实验均表明IL-8可诱导NCI-H157细胞迁移,且具有浓度依赖性;Western blot结果显示,随着IL-8浓度增加,Rac1和Cdc 42的表达水平逐渐升高,以Cdc42变化为显著.结论 IL-8可促进肺癌细胞增殖和迁移,可能与Rac1和Cdc42表达有关.
-
介导细胞迁移与转化的Cdc42下游效应子信号途径分析
目的 制备Cdc42定点突变体,检测各种突变体与Cdc42下游效应子的相互结合能力以及细胞迁移、转化活性,分析效应子对Cdc42诱导的细胞迁移与转化的影响.方法 以含突变位点的多聚寡核苷酸为引物,通过PCR法合成Cdc42突变体.以Cdc42效应子为探针,通过下拉实验检测Cdc42突变体与Cdc42效应子的结合能力.通过transwell小室法检测表达Cdc42突变体的细胞的迁移能力.通过计数表达Cdc42突变体的细胞在软琼脂糖胶里形成的集落检测Cdc42突变体的细胞转化活性.结果 活化的Cdc42 (Cdc42F28L)能与所有被检测效应子(PAK1、WASP、IQGAP1、BORG3及PAR6B)结合.氨基酸100、160、183-184位点突变不影响Cdc42 F28L与任何效应子的结合,而其余突变选择性地影响Cdc42F28L与以上5个效应子结合.细胞的迁移活性不受Cdc42突变体与效应子结合能力的影响,但部分突变体抑制Cdc42F28L重建与细胞迁移能力相关的细胞骨架.细胞的转化活性受到突变体与部分效应子的结合能力的影响.一些突变体能抑制Cdc42F28L激活与细胞转化相关的转录因子c-Jun,但不抑制细胞的转化.结论 效应子PAK1、WASP、IQGAP1、BORG3及PAR6B均非Cdc42(活化的Cdc42,即Cdc42F28L)诱导的细胞迁移所必需;PAK1及PAR6B为Cdc42诱导的细胞转化的必备效应子.Cdc42诱导的细胞骨架重建不足以引起细胞的迁移,Cdc42对c-Jun的激活不足以诱导细胞转化.Cdc42调节的细胞转化和迁移可能涉及到截然不同的信号途径,细胞转化和迁移可能都受到多个Cdc42效应子的协同调控.
-
CDC42与癌症
细胞分裂周期蛋白42（cell division cycle 42，CDC42）是Rho蛋白鸟苷三磷酸酶（guanosine triphosphatase， GTPase）家族成员之一，在细胞增殖、迁移、转化等过程发挥重要作用。与大多数GTPase一样，CDC42的活性受到鸟嘌呤核苷酸转换因子（ guanine nucleotide exchange factors ， GEF ）、GTP 酶激活蛋白（ GTPase activating proteins ， GAP）和鸟苷酸解离抑制因子（ guanine nucleotide-dissociation inhibitors ，GDI）的调控。目前研究表明，CDC42在大多数人癌症组织中表达异常，对癌症的发生发展具有复杂而重要的调控作用。该文就CDC42自身活性变化、CDC42调节因子的变化及其下游效应因子的变化在癌症中的作用进行综述，旨在深入理解CDC42在人类癌症中的作用机制。
-
CDC42在HBx介导肝细胞恶性转化中作用的定量蛋白质组学研究
目的寻找在乙肝病毒 X 蛋白（HBx）诱发肝细胞恶性转化过程中 CDC42信号通路发挥作用的介导因子。方法利用基于质量亏损的准等重二甲基标记（pIDL）的定量蛋白质组学方法，检测 CDC42基因敲除前后HBx 转基因细胞蛋白质组的差异。筛选差异蛋白并对差异蛋白进行基因本体（gene ontology，GO）功能分析。结果与结论共定量到3409个蛋白，筛选出220个差异蛋白，通过 GO 分析发现与细胞骨架组织相关的 palladin、成蛋白样亚家族1（formin-like 1，FMNL1）和角蛋白-19均发生显著下调。该研究为 CDC42在 HBx 介导 Huh7细胞恶性转化的机制研究提供了候选基因和蛋白。
-
侯氏黑散对脑缺血大鼠神经导向因子及Rho GTP酶的影响
目的 探讨侯氏黑散对脑缺血大鼠神经导向因子Netrin-1/DCC和分子开关Rac1/Cdc42/RhoA表达的影响.方法 采取线栓法制备永久性大脑中动脉栓塞(permanent middle cerebral artery occlusion,pMACO)模型.大鼠采用数字表法随机分为假手术组、模型组、侯氏黑散小剂量组、侯氏黑散中剂量组、金纳多组.运用Western blotting法和RT-PCR法检测术后7d大鼠缺血侧皮质Netrin-1、DCC、Rac1、Cdc42、RhoA蛋白和基因的表达.结果 与模型组相比,侯氏黑散中剂量组、金纳多组大鼠Netrin-1蛋白的表达明显升高(P＜0.01),侯氏黑散中剂量组大鼠Netrin-1基因的表达升高(P＜0.05);侯氏黑散小剂量组、侯氏黑散中剂量组、金纳多组大鼠DCC、Rac1、Cdc42蛋白和基因的表达明显升高(P＜0.05);侯氏黑散小剂量组、侯氏黑散中剂量组、金纳多组大鼠RhoA蛋白和基因的表达则明显下降(P＜0.01).结论 侯氏黑散通过对脑缺血大鼠神经导向因子Netrin-1/DCC和分子开关Rac1/Cdc42/RhoA的调节促进脑缺血后神经功能的修复.
-
P21活化激酶家族的研究进展
P21活化的激酶(p21-activated kinase,PAK)家族,为一类进化上保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,可以和Rho家族中的小GTP酶,CDC42和Rac1结合,并被激活.在哺乳动物中根据结构特征可将PAKs分为两个亚家族(PAKI和PAKII),PAKI类包括PAK1,PAK2,PAK3,PAKII类包括PAK4,PAK5,PAK6.本文就PAK亚家族成员的结构,表达部位及功能的相似性和不同点等方面进行简要综述.
-
Cdc42和WAVE1在非小细胞肺癌中的表达及临床病理意义
目的：探讨Cdc42和WAVE1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组织化学法检测106例经石蜡包埋的NSCLC组织及46例癌旁正常肺组织中Cdc42和WAVE1的表达情况。结果：Cdc42和WAVE1在NSCLC组织中的表达明显高于正常肺组织。Cdc42的表达强度与肿瘤的分化程度、TNM分期及淋巴结转移情况之间差异有统计学意义（P<0.05）；WAVE1的表达强度与TNM分期及淋巴结转移情况之间差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。NSCLC组织中Cdc42和WAVE1的表达呈正相关（r=0.469，P<0.01）。Cdc42高表达组的3年生存率（44.16%）低于低表达组（72.41%），WAVE1高表达组的3年生存率（39.44%）亦低于低表达组（77.14%），且差异均有统计学意义（P<0.01）。淋巴结转移、Cdc42和WAVE1共同高表达是影响NSCLC患者预后的独立因素。结论：Cdc42和WAVE1在NSCLC组织中异常高表达，且呈现较好的相关性，可能共同参与并促进NSCLC的恶性进程，检测两者的表达会对NSCLC患者的临床病理学特征及预后起一定的提示作用。
-
滋阴填精中药治疗慢性再生障碍性贫血疗效及对CDC42、Rho A、Rac水平的影响
目的 探讨滋阴填精中药治疗慢性再生障碍性贫血疗效及对细胞分裂周期蛋白(CDC42)、Rho家族成员A(Rho A)、Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物(Rac)水平的影响.方法 将120例慢性再生障碍性贫血患者随机分为2组,对照组60例给予西药治疗,观察组60例在此基础上加用滋阴填精中药治疗,观察2组治疗前后中医证候积分、外周血指标、骨髓增生程度、CDC42、Rho A、Rac水平的变化情况,统计2组近期疗效及不良反应发生情况.结果 2组治疗后心悸、头晕、周身乏力、盗汗、出血及形寒肢冷积分均显著低于治疗前(P均<0.05),外周血指标水平,骨髓增生程度,CDC42、Rho A及Rac水平均显著高于治疗前(P均<0.05),且观察组治疗后各项指标改善情况均显著优于对照组(P均<0.05);观察组近期治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05),不良反应发生率显著低于对照组(P<0.05).结论 滋阴填精中药治疗慢性再生障碍性贫血可有效减轻症状体征,改善外周血指标和骨髓增生程度,上调CDC42、Rho A及Rac水平,并有助于降低不良反应发生风险.
-
Cdc42参与脐带间充质干细胞向炎性因子的趋化
背景：间充质干细胞移植后的归巢能力关系到细胞移植的疗效，研究其趋化和迁移的调控将有助于提高间充质干细胞临床应用的价值。目的：观察Cdc42在人脐带间充质干细胞定向迁移中的作用。方法：首先以组织块法分离培养人脐带间充质干细胞，与炎性因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、转化生长因子β共培养后 Western 检测 Cdc42表达变化。化学合成 Cdc42的干扰 RNA，转染细胞后分别采用Transwel 和Matrigel胶观察细胞迁移和黏附能力。应用Western检测Cdc42下游靶分子ERK1/2的变化。结果与结论：与炎性因子共培养后的人脐带间充质干细胞中Cdc42表达明显增加，接近无因子对照组的2倍水平。siRNA下调Cdc42的表达能够显著抑制人脐带间充质干细胞的迁移和黏附，且其下游信号分子ERK1/2的表达以及磷酸化水平均相应受到抑制。提示体外培养环境下Cdc42参与了人脐带间充质干细胞的趋化过程。
-
Cdc42在种植体纳米化影响成骨细胞功能中的作用
目的 研究Cdc42在纳米化种植体促进成骨细胞功能中的作用.方法 将纳米化种植体与成骨细胞联合培养,通过Western Blot检测Cdc42活性蛋白含量,以及荧光染色检测成骨细胞内F-actin分布,扫描电镜观察成骨细胞形态,MTT检测成骨细胞增殖.结果 纳米化种植体使成骨细胞内Cdc42活性蛋白含量明显增多,Toxin B抑制后其活性明显下降,纳米化种植体表面成骨细胞形态不规则,细胞骨架明显,伸出较多伪足,采用Toxin B处理后细胞形态变圆,伪足减少.成骨细胞增殖功能随种植体纳米化而明显增高,在Toxin B处理后下降.结论 种植体粗化使Cdc42表达增加,可能通过Cdc42调节成骨细胞的黏附及增殖.
-
Cdc42小干扰RNA对肺癌A549细胞增殖及EGFR蛋白表达的影响
目的 本文研究针对细胞周期分裂蛋白(cell division cycle 42,Cdc42)小干扰RNA(siRNA)对人肺癌细胞增殖及EGFR蛋白表达的影响.方法 设计并合成靶向Cdc42编码区的siRNA及阴性对照,将其瞬时转染至A549细胞中.48 h后应用RT-PCR和Western-blot分别检测细胞转染siRNA后Cdc42 mRNA及蛋白的表达.CCK8实验检测细胞增殖能力的变化.同时检测EGFR蛋白表达情况.结果 RT-PCR和Western-blot检测显示Cdc42-siRNA能显著下调A549细胞中Cdc42 mRNA及其蛋白表达水平(P<0.01).Cdc42-siRNA转染后A549细胞增殖能力受到明显抑制(P<0.01),且EGFR蛋白表达表达水平显著降低(P<0.01).结论 Cdc42小干扰RNA可以有效抑制A549细胞的增殖,其机制可能与Cdc42沉默导致EGFR表达下调有关,提示Cdc42可能成为抑制肺癌A549细胞增殖的新靶点.
-
Cdc42小干扰 RNA对乳腺癌 MCF7细胞增殖的影响
目的：观察细胞周期分裂蛋白Cell division cycle 42（ Cdc42）小干扰RNA （ siRNA）对人乳腺癌细胞增殖的影响。方法设计并合成靶向Cdc42编码区的siRNA，将其瞬时转染至MCF7细胞中。48 h后应用RT－PCR和Western－blot分别检测细胞转染siRNA后Cdc42 mRNA及蛋白的表达。 CCK8及饱和密度实验检测Cdc42小干扰RNA对MCF7细胞增殖能力的影响。结果 RT－PCR和Western－blot检测显示Cdc42－siRNA能显著下调MCF7细胞中Cdc42 mRNA及其蛋白表达水平。 Cdc42－siRNA转染后MCF7细胞增殖能力受到明显抑制。结论 Cdc42小干扰RNA可以有效抑制MCF7细胞的增殖能力，提示Cdc42可能成为抑制乳腺癌MCF7细胞增殖的新靶点。
-
Rac1和Cdc42在鼻咽癌组织中的表达及预后相关性研究
目的 观察鼻咽癌组织中Rac1和Cdc42的表达,探讨Rac1和Cdc42细胞信号分子可能参与鼻咽癌侵袭转移过程的机制.方法 采用免疫组织化学S-P法检测鼻咽癌标本肿瘤组织与鼻咽正常上皮组织中Rac1和Cdc42的表达,并探讨其表达与临床指标的关系,以及标志物之间的相互关系及其在鼻咽癌侵袭转移中的作用,分析Racl和Cdc42各分子表达情况与鼻咽癌患者预后的关系.结果 (1)鼻咽正常上皮组织Rac1和Cdc42表达显著低于鼻咽癌组,两者差异有统计学意义(P＜0.05).(2)Rac1和Cdc42与患者的年龄、性别以及肿瘤原发部位和大小均无关(P＞0.05),而在分化程度浸润深度和TNM分期等临床病理指标之间的差异比较则显示统计学意义显著(P＜0.05).(3)通过相关分析,Rac1和Cdc42之间为正相关.(4)Rac1的低表达组5年总生存率和无瘤生存率明显高于高表达组,其差异具有统计学意义(P＜0.05).Cdc42的低表达组和高表达组5年总生存率和无瘤生存率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Racl和Cdc42在鼻咽癌的恶性表型及侵袭和转移中起促进作用,他们的表达同TNM分期呈正相关,Racl的表达水平可以作为鼻咽癌患者预后判断的生物学指标.
-
慢性脑缺血大鼠海马区Cdc42表达及其与认知功能障碍的相关性
目的 研究慢性脑缺血大鼠海马组织中细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)表达的变化,探讨其在慢性脑缺血所致认知功能障碍中可能发挥的作用.方法 大鼠40只,随机分为假手术组、持久性双侧颈总动脉结扎(2VO)8、10、12w组,每组各10只.应用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,用免疫组织化学及Western印迹两种方法检测各组大鼠海马区Cdc42的表达.结果 Morris水迷宫显示手术组大鼠较假手术组大鼠逃避潜伏期明显延长(P＜0.05)；免疫组化及Western印迹均显示手术组大鼠海马区Cdc42表达明显低于假手术组(P＜0.05).结论 Cdc42表达量的降低可能参与了慢性脑缺血所致认知功能障碍的形成.
-
骨髓间充质干细胞移植对慢性脑缺血大鼠海马区Cdc42表达及认知功能的影响
目的 观察骨髓间充质干细胞移植后慢性脑缺血大鼠海马区表达Cdc42表达的变化,探讨其对慢性脑缺血大鼠认知功能的影响.方法 SD大鼠72只,随机分为假手术组、永久性双侧颈总动脉结扎(2VO)模型组、实验组(2VO模型+干细胞移植),每组分8、10、12w3个时间点,每个时间点8只,用Morris水迷宫筛选出造模成功的大鼠并检测大鼠的空间记忆能力,用Western印迹和免疫组化检测大鼠海马区Cdc42的表达.结果 实验组和模型组大鼠海马区Cdc42的表达随时间延长逐渐降低(P＜0.05),其逃避潜伏期逐渐延长(P＜0.05)；较之2VO模型组,同一时间点实验组Cdc42表达明显增高(P＜0.05),逃避潜伏期显著缩短(P＜0.05).结论 骨髓间充质干细胞移植可显著改善大鼠认知功能,这可能与其能促进慢性脑缺血大鼠海马区Cdc42的表达有关.
-
细胞极性相关蛋白CDC42和PAR3在小鼠牙胚发育过程中的表达
目的:研究细胞极性相关蛋白CDC42和PAR3在小鼠牙胚发育过程中的表达,探讨其在牙胚发育中的可能作用.方法:取13.5、14.5、16.5和18.5 d(E13.5、E14.5、E16.5和E18.5)的小鼠胚胎以及出生后1和5d(PN1和PN5)的小鼠,分离头部,固定、脱钙、脱水、石蜡包埋、切片,HE染色观察牙胚的组织形态表现,采用免疫组织化学染色方法观察CDC42及PAR3在牙胚发育过程中的表达.结果:HE染色观察,E13.5～E18.5分别为小鼠牙胚发育的蕾状期、帽状期、钟状早期和钟状晚期,PN1小鼠的牙胚中可见分化成熟的成牙本质细胞和成釉细胞,PN5小鼠牙胚可见牙冠部发育完成.免疫组织化学染色,CDC42在E13.5、E14.5和E16.5小鼠牙胚中有广泛表达,在E18.5小鼠牙胚中表达较E13.5、E14.5和E16.5减少,在PN1和PN5小鼠牙胚中主要表达于成牙本质细胞和成釉细胞的分泌端;PAR3弱表达于E13.5和E14.5小鼠牙胚,在E16.5和E18.5小鼠牙胚上皮处表达明显增强,在PN1和PN5小鼠牙胚中表达较E18.5减弱.结论:CDC42和PAR3参与小鼠牙发育的过程,在牙胚发育早期可能参与小鼠牙胚的增殖及迁移,在牙胚发育晚期可能参与了成牙本质细胞和成釉细胞的分化,尤其在成牙本质细胞和成釉细胞极性的形成与维持中可能具有重要作用.
-
黄芪对髓鞘膜蛋白影响神经生长的干预作用和小G蛋白的关系研究
目的:探讨黄芪干预髓鞘膜蛋白(MMP)影响神经生长的作用效果,以及黄芪干预机制和小G蛋白的关系.方法:研究对象分为对照组(control)、髓鞘膜蛋白组(M)、髓鞘膜蛋白＋黄芪组(B)、黄芪组(H),用有血清培养基原代培养新生2天sD大鼠大脑皮层神经元,银染色观察神经轴突,网格计数法定量神经生长,通过westembloting检测激活RhoA、Cde42.结果:①在各时间点,M2组神经突起点密度下降(P<0.05或P<0.01),H2组神经突起点密度升高(P<0.05或P<0.01),在B2组显示黄芪具有对抗髓鞘膜蛋白抑制神经生长的作用(P<0.05或P<0.01);②在动态观察中,MMP促进RhoA的激活,抑制Cdc42激活(P<0.05);黄芪抑制RhoA激活和促进Cdc42激活(P<0.05).结论:黄芪通过抑制RhoA激活和促进Cdc42激活,而具有对抗髓鞘膜蛋白抑制神经生长的作用.
-
Rac1和Cdc42在乳腺癌中的表达和临床意义
目的:研究Rac1和Cdc42在人乳腺癌中的表达及临床意义.方法:收集339例人乳腺癌组织样本,通过免疫组化的方法检测Rac1和Cdc42的表达情况,并分析其与乳腺癌临床病理学特征间的相关性.结果:Rac1和Cdc42在正常乳腺组织中几乎不表达,而在肿瘤组织的阳性表达率分别为35.9％和38.5％,均较正常乳腺组织显著升高,差异均具有统计学意义(P＜0.001和P＜0.05).卡方检验分析表明,二者的表达与患者的年龄、肿瘤大小、组织分化程度、HER2状态无关(P＞0.05),而与TNM分期、淋巴结转移、肿瘤侵袭、ER状态和Ki-67表达有相(P＜0.05).相关性分析表明,Rac1和Cdc42的表达与高TNM分期(r分别为0.443和0.295;P均＜0.001)、淋巴结转移阳性(r均为0.480和0.562;P均＜0.001)、肿瘤侵袭壮分别为0.412和0.440;P均＜0.001)、ER阴性表达(r分别为-0.517和-0.342;P均＜0.001)以及Ki-67高表达(r分别为0.338和0.454;P均＜0.001)呈正相关.结论:在乳腺癌组织中,Rac1和Cde42作为癌基因表达增加,可能在乳腺癌恶性进程中发挥重要作用.
-
CDC42抑制剂ML141对喉癌Hep-2细胞增殖的抑制作用
目的:探讨CDC42抑制剂ML141对喉癌细胞增殖的抑制作用,为喉癌的分子治疗提供新的靶点.方法:体外培养人喉癌Hep-2细胞.实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测CDC42在Hep-2细胞中的表达.利用GLISA法检测ML141对CDC42活性的抑制效果.利用CCK8法检测ML141对Hep-2细胞增殖能力的抑制效果.结果:①Real-time PCR结果显示在人喉癌Hep-2细胞中CDC42显著高表达(P＜0.001),证明全基因组的结果准确.②)GLISA结果显示表皮生长因子作用的Hep-2细胞中CDC42的活性明显高表达,但加入ML141的Hep-2细胞中CDC42的活性受到明显抑制.(P＜0.001).③CCK8结果显示24h,48h和72h时,ML141处理的Hep-2细胞的增殖能力与对照组相比均受到明显抑制.(P＜0.001).结论:促癌基因CDC42抑制剂ML141能够抑制人喉癌Hep-2细胞增殖,具有成为抗喉癌新药的潜力,为喉癌的分子治疗提供新的切入点.
-
SLP-2和CDC42蛋白在结直肠癌组织中的表达及临床意义
SLP-2基因是新近发现的肿瘤相关基因,属stomatin基因超家族的一个新成员,在人食管癌、肺癌、喉癌、子宫内膜癌组织中高表达,并发现其与肿瘤的发生、发展关系密切.
