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口服左旋精氨酸对血小板胞浆内钙离子浓度的影响
为观察口服左旋精氨酸对正常人血小板胞浆内钙离子浓度的影响并探讨其作用机制,选择了10名至少2周内未服用任何药物,不吸烟、喝酒的健康男性志愿者.受试者服药前做1次检测,然后口服左旋精氨酸4天,前3天每天服20克,分3次服用,第4天服用1次,服7克,3小时后抽血测试.结果表明,服用左旋精氨酸后,血小板胞浆内cGMP浓度(1.91±0.20pmol/109血小板vs 2.14±0.34pmol/109血小板,P<0.05)、血清一氧化氮代谢产物NO-3浓度(32.66±14.31μmol/L vs 49.02±9.75μmol/L,P<0.05)升高.ADP诱导的血小板[Ca2+]i升高幅度(A/B值0.45±0.14 vs 0.32±0.09, P<0.01)降低.研究结果表明,口服左旋精氨酸可以通过促进血管内皮细胞和血小板合成NO来降低血小板胞浆内钙离子浓度的升高,从而抑制正常人血小板的活化.
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莪术抑制晶状体上皮细胞增殖的信号转导机制
目的 探讨天然药物莪术(rhizoma curcumae,RC)对体外培养的晶状体上皮细胞(lens epithelial cell,LEC)增殖的抑制作用,并从信号转导方面研究其抑制LEC增殖的作用机制,为寻求防治后发性白内障(after cataract)的确切有效药物提供实验依据.方法 用牛LEC进行原代和传代培养,取第三代细胞.用10 ng/ml重组人碱性成纤维细胞生长因子(recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF)诱导LEC增殖.同时分别将5 mg/ml、10 mg/ml、20 mg/ml的莪术作用于增殖状态下的LEC 72小时.(1)通过四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色测定法检测莪术对LEC增殖的抑制程度;(2)用钙荧光指示剂Fura-2/AM测定莪术抑制LEC增殖时细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化;(3)用放射免疫分析法测定莪术抑制LEC增殖时细胞内环化腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)和环化鸟苷酸(cyclicguanosine monophosphate,cGMP)浓度变化.结果 莪术可明显抑制LEC增殖.抑制LEC增殖时细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)升高,细胞内cAMP浓度显著升高,细胞内cGMP浓度显著降低,cAMP/cGMP比值升高,并具有剂量依赖关系.结论 诱导[Ca2+]i升高,激活细胞内Ca2+信号转导途径;上调细胞内cAMP水平,下调细胞内cGMP水平,使cAMP/cGMP比值升高,激活细胞内cAMP-PKA、cGMP-PKG信号转导途径可能是莪术抑制LEC增殖的作用机制之一.莪术能够明显抑制LEC增殖的作用,有望成为防治后发性白内障的有效药物.
关键词: 莪术 晶状体上皮细胞 细胞内游离钙离子浓度 环化腺苷酸 环化鸟苷酸 -
牛磺酸及微量营养素对大鼠视网膜NOS表达及cGMP含量影响的研究
目的:探讨大鼠补充一定剂量牛磺酸及微量营养素后,能否通过影响视感受器或视中枢NO合成酶(NOS)表达及第二信使(cGMP)合成,影响视觉信号传导.方法:Wistar大鼠随机分为三组,即对照组(正常饲料组)、实验1组(5倍需要量组)和实验2组(10倍需要量组),喂养3周后,每组动物再随机分为光照组和暗适应组(平均照度为3.03LX),以正常饲料喂养72 h,大鼠活杀取样,以放射免疫方法分析cGMP含量,NDP 组化染色检测NOS表达.结果:在暗适应条件下,视网膜光感受体细胞NOS表达,视皮层、外侧膝状体、顶盖前区或海马cGMP含量增加,而在明适应状态下,NDP组化染色浅淡,牛磺酸及微量营养素的干预则能明显增强暗适应条件下NOS的着色反应,增加光照及暗适应条件下上述脑功能区cGMP含量.结论:不同的光适应状态下,NO S、cGMP在视觉感受器及视中枢的分布、表达及含量是不同的,牛磺酸及微量营养素能明显增加暗适应条件下NO合成及cGMP含量.
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三氧化二砷和莪术抑制晶状体上皮细胞增殖及其信号转导机制
目的:旨在探讨三氧化二砷(As2O3)和莪术(RC)对体外培养的晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用并研究其信号转导机制. 方法:用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导体外培养的晶状体上皮细胞(LEC)增殖.分别将三种不同浓度的As2O3和RC作用于增殖状态的LEC,进行以下研究:1、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测As2O3、RC对LEC增殖的抑制程度.2、流式细胞术(FCM)检测As2O3、RC对LEC核内增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达的影响.3、荧光分光光度法检测[Ca2+]i.4、放射免疫法检测细胞内环化腺苷酸(cAMP)和环化鸟苷酸(cGMP)浓度.
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天然药物抑制晶状体上皮细胞增殖及其信号转导机制
目的:探讨天然药物榄香烯(Ele)、姜黄素(Cur)、雷公藤内酯醇(Tri)对重组人表皮生长因子(rhEGF)诱导的晶状体上皮细胞(LEC)增殖的抑制作用及其信号转导机制.方法:用rhEGF诱导体外培养的牛LEC增殖,将高、中、低不同浓度的Ele、Cur、Tri与增殖状态的LEC共同孵育后,进行以下研究:1、四甲基偶氮唑蓝法(MTT)法检测LEC增殖情况.2、流式细胞仪(FCM)检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达.3、荧光分光光度法检测LEC内游离Ca2+浓度.4、放射免疫法检测LEC内环化腺苷酸(cAMP)和环化鸟苷酸(cGMP)含量.
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复方SZ滴眼液抑制晶状体上皮细胞凋亡及其信号转导机制的实验研究
目的:探讨复方SZ滴眼液(Co-SZ)抑制H2O2诱导的晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的作用及信号转导机制.为将Co-SZ作为防治白内障的有效药物提供科学的实验依据.方法:1、将H2O2与Co-SZ和SD大鼠晶状体共同孵育后:(1)TUNEL法检测LEC凋亡率.(2)透射电镜观察LEC凋亡形成.2、H2O2与Co-SZ和体外培养的牛LEC共同孵育后:(1)四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测不同浓度的Co-SZ抑制LEC活性的作用.(2)流式细胞仪(FCM)检测LEC细胞核内DNA含量.(3)荧光分光光度法检测LEC内游离Ca2+浓度.(4)放射免疫分析法检测LEC内环化腺苷酸(cAMP)和环化鸟苷酸(cGMP)浓度.