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围产期暴露壬基酚对仔鼠肝脏增殖细胞核抗原表达的影响
目的 观察母鼠孕期和哺乳期暴露于壬基酚(NP)对子代肝脏增殖细胞核抗原(PCNA)的影响.方法 试验分为2组:包括NP染毒组(NP 200 mg/kg·bw)和对照组(花生油).母鼠受孕第6d到仔鼠出生后21 d灌胃染毒壬基酚,60 d后剖杀仔鼠,检测肝脏PCNA的表达,并检测肝脏功能(包括血总蛋白TP、白蛋白ALB、前白蛋白PA、球蛋白GLB).结果 与对照组比较,NP暴露组60 d PCNA阳性细胞数明显增多(P＜0.01),积分光密度增高(P＜0.01).经检测仔鼠的TP、ALB(P＜0.05)与对照组差异有统计学意义,而PA、GLB(P =0.194、0.644)与对照组相比较差异无统计学意义.结论 NP暴露使仔鼠肝脏组织PCNA的表达增加,即处于增殖状态的细胞增多,并且可能对肝脏功能产生一定影响,提示NP对肝脏具有损伤作用.
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甲状腺肿瘤cyclin E蛋白与PCNA免疫组化的定量研究
近年来,随着人们对细胞周期的研究深入,人们逐渐认识到细胞周期的调控异常与细胞癌变密切相关,细胞周期蛋白(cyclin)及其依赖性激酶(CDKs)形成的复合物是细胞周期的核心调控装置[1],在cyclin家族中,cyclin E是其中较重要的一种[2],其含量异常不仅将导致细胞周期的调控失常,也与肿瘤细胞的增殖、发展相关.Wang以Western Blot法研究38例结直肠癌,发现35例癌组织的cyclin E水平显著高于癌旁粘膜,并同时平行应用增殖细胞核抗原(PCNA)测定增殖指数,发现41%的病例中增殖指数也同时增高,提示cyclin E可作为结直肠癌组织的又一细胞增殖指标.我们利用免疫组化和图像定量分析研究cyclin E在甲状腺"正常"与良恶性病变中的表达情况,并同时平行检测PCNA的表达,将两者对比分析,旨在探讨cyclin E与PCNA在甲状腺肿瘤中的相关性及cyclin E的异常表达.
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基底细胞癌中p16、bcl-2基因蛋白的检测
基底细胞癌,又称基底细胞上皮瘤,是皮肤的恶性上皮瘤,可能有起源于表皮及其附件的基底细胞.近年来的研究发现,一些与凋亡有关的基因如p53、Bax、bcl-x及增殖细胞核抗原等在基底细胸癌中表达异常,提示基底细胞癌可能有异常的细胞凋亡[1-7].
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"河车助孕方"对不育症子宫内膜雌激素受体、孕激素受体、增殖细胞核抗原及血管内皮生长因子的影响
目的:探讨补肾调经中药治疗不育症的机理.方法:应用免疫组织化学方法,观察服用"河车助孕方"前、后增殖晚期子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、增殖细胞核抗原(PCNA)及血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化,并以服药前作为自身对照.结果:服药前ER、PR、PCNA、VEGF在子宫内膜腺上皮细胞核的表达分别为0.18±0.39、0.88±0.38、1.76±0.50、0.15±0.29;在内膜间质细胞核的表达分别为0.71±0.44、0.79±0.47、1.12±0.47、0.26±0.36;服药后在子宫内膜腺上皮细胞核的上述各项表达分别为2.12±0.40、2.32±0.35、3.15±0.49、1.79±0.44,与服药前比较,P均<0.001;在内膜间质细胞核的表达分别为1.53±0.41、1.88±0.38、2.18±0.50、2.06±0.39,与服药前比较,P均<0.001;服药后子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞的PCNA、VEGF表达亦明显增强.结论:补肾调经中药"河车助孕方"可增加子宫内膜ER、PR的合成,并使激素依赖性的PCNA、VEGF表达增强,从而促进内膜正常生长、发育,有效地改善不育症患者子宫内膜的微环境.
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阴囊升温对大鼠睾丸生精细胞凋亡及增殖细胞核抗原表达的影响
目的研究阴囊升温对大鼠睾丸生精细胞凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响,探讨其在升温引起生精细胞变化中的意义. 方法应用原位末端标记(TUNEL)法和免疫组化法,检测大鼠睾丸局部升温至43℃、30 min后,经0.5、1、3、6、10和50 d观察生精细胞凋亡和PCNA表达情况. 结果大鼠睾丸局部升温至43℃、30 min后生精上皮受到损伤,生精细胞凋亡增加(P<0.01),生精细胞PCNA表达下降(0.5～10 d组P<0.01,50 d组P<0.05). 结论 43℃、30 min作用后生精细胞PCNA表达与细胞凋亡呈负相关,联合检测两者对评估热作用后生精功能的变化有重要意义.
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激素替代治疗后子宫内膜组织形态学与增殖细胞核抗原指数变化
目的：探讨激素替代治疗后子宫内膜组织形态变化与增殖指标增殖细胞核抗原(PCNA)指数之间的关系。方法：选择正常增殖期、分泌期、绝经后的子宫内膜及接受激素替代治疗(HRT)后的子宫内膜，根据病理诊断分为增殖期与分泌期，分别检测其中的PCNA水平。结果：正常月经周期子宫内膜组织形态与PCNA指数二者皆能反映子宫内膜的增殖与抑制状态。HRT后子宫内膜的形态，增殖期与分泌期与PCNA指数所反映的内膜增殖与抑制状态有差异，PCNA水平与用药情况相符合。结论：HRT后子宫内膜的增殖与抑制状态需要综合判断。
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自然流产小鼠蜕膜组织中PCNA、Ki-67和survivin表达水平的研究
目的 比较正常妊娠和自然流产小鼠模型蜕膜组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞增殖标记物Ki-67和凋亡蛋白抑制因子suvivin的表达情况,探讨自然流产的发病机制. 方法 建立正常妊娠模型CBA×BALB/c和自然流产模型CBA×DBA/2.采用免疫组化SP法测定两组模型孕13 d蜕膜细胞PCNA、Ki-67和suvivin的表达. 结果 与正常妊娠模型相比,自然流产模型蜕膜细胞PCNA的表达显著降低(P<0.05);Ki-67和survivin表达降低非常显著(P<0.01).结论 自然流产小鼠蜕膜细胞PCNA、Ki-67和survivin表达水平低下可能与自然流产的发生有关.
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PCNA在L-02肝细胞用氢醌处理后的表达
氢醌(Hydroquinone,HQ),是一种重要的工业化学物,同时也是苯在生物体内的代谢产物之一.HQ可经消化道、呼吸道和皮肤吸收,主要在肝脏内代谢.动物实验表明,HQ对肝、肾、造血系统和中枢神经系统等均可造成损害,并导致肿瘤的形成.体外研究也表明,HQ可导致动物及人体细胞染色体及DNA的异常改变,如引起染色体断裂、DNA链断裂,以及产生DNA加合物等 [1-3].此外,还有研究发现氢醌能够干扰T细胞的细胞周期而引起G1期阻滞,并能诱导HL-60细胞发生凋亡 [4-5].然而,目前关于HQ的毒性作用机制仍不太清楚.因此,本研究以体外培养的L-02肝细胞为研究对象,以HQ为受试物,旨在探讨L-02肝细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)在HQ所致肝细胞毒性过程中的分子作用机制.
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亚硫酸钠对人胚肾293细胞的毒性作用与胞内蛋白水平变化的关系
目的 研究食品添加剂亚硫酸钠(Na_2SO_3)对人胚肾293细胞(HEK293)的毒性作用与胞内重要蛋白质p53、增殖细胞核抗原(PCNA)和三磷酸腺苷(ATP)结合转运子G_2(ABCG_2)含量改变之间的关系.方法 采用细胞毒性试验(MTS)法观察Na_2SO_3对HEK293细胞的毒性作用,用蛋白印记法检测HEK293细胞中p53、PCNA和ABCG_2蛋白水平.结果 0.625～10 mmol/L NaSO_3处理组的细胞活性与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01),说明NaSO_3对HEK293细胞有明显的毒性作用;蛋白印记分析发现高剂量组10 mmol/L Na_2SO_3可同时降低细胞内p53、PCNA和ABCG_2蛋白水平,而其余剂量组0.039～2.5 mmol/L Na_2SO_3对HEK293细胞内p53、PCNA和ABCG_2蛋白的水平无明显影响.结论 在本试验条件下,当Na_2SO_3的接触浓度达到一定水平时对人胚肾293细胞具有明显的毒性作用,这种毒性作用很可能与其降低肾细胞内的蛋白水平,干扰肾细胞的正常功能相关.
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锰对大鼠生精细胞凋亡与增殖的影响
目的 研究氯化锰(MnCl2·4H20)对大鼠生精细胞凋亡与增殖的影响.方法 健康雄性SD大鼠24只随机分为3组,每组8只.染锰组分别腹腔注射15和30 mg/kg MnCl2·4H20,对照组腹腔注射等容生理盐水,1次/d,每周5 d,共4周,停药2周后处死大鼠取材.透射电子显微镜观察凋亡细胞形态;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)技术检测生精细胞凋亡;免疫组化S-P法检测生精细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达.结果 (1)电子显微镜下各组大鼠均可见生精细胞凋亡表现.(2)15和30 mg/kg染锰组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数(apoptosis index,AI)分别为(1.05±0.19)%和(1.80±0.21)%,均明显高于对照组(0.48±0.01)%(P＜0.01),且AI随染锰剂量的增加而升高(P＜0.01).(3)生精细胞增殖指数(proliferating index,PI)在15和30 mg/kg染锰组分别为(22.68±2.62)%和(14.25±2.33)%,均明显低于对照组(33.25±3.59)%(P＜0.01),且PI随染锰剂量的增加而显著降低(P＜0.01).(4)AI与PI呈显著负相关(r=-0.88,P＜0.01).结论 锰可使大鼠生精细胞凋亡增加及PCNA表达减弱.
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镉的雌激素样作用及相关机制体内的实验
目的研究镉的雌激素样作用及其相关机制,为镉的雌性性腺生殖毒性机制的阐明提供科学依据.方法 (1)未成年雌性SD大鼠分别给予0、1、2和4mgCd2+/kg及30μg/kg β-雌二醇,皮下注射,1次/d,共3 d,第4 d时剖杀观察子宫湿重、子宫内膜厚度、子宫内膜腔上皮厚度、子宫内膜增殖细胞核抗原(PCNA)表达.
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吸烟对雄性小鼠睾丸组织中增殖细胞核抗原表达的影响
吸烟是严重的公共卫生问题,长期吸烟可导致呼吸系统疾病和多种脏器病变[1].
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丙硫氧嘧啶致甲状腺组织增生的时效关系研究
目的 初步建立以染毒(PITU)为模型的甲状腺激素干扰物体内短期甄别实验系统.方法 PTU(5mg/kg bw)灌胃染毒,分别设丙硫氧嘧啶染毒3、6、9、12天实验组及溶剂对照组,每组10只大鼠,在染毒期满后处死动物,取血清,用全自动化学发光法测量TL,TT4和TSH,同时观察甲状腺组织病理改变,PAS染色观察胶质的改变,免疫组化法和Western-blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 与对照组相比,染毒3天组,TT3开始出现显著的降低(P<0.05),6.9、12天组,TT3、TT4浓度均显著降低,并伴TSH浓度显著升高(P<0.05).甲状腺脏器系数在6.9、12天组均显著高于对照组(P<0.05).组织学观察发现3天组甲状腺滤泡上皮复层化;6天组弥漫性增生,大量增生斑、实心芽形成(P<0.05);9天组纤维母细胞和毛细血管内皮细胞大量增生,大量实心继发滤泡形成;12天组有大量的空心继发滤泡形成.PAS染色显示,3、6、9天组的甲状腺滤泡胶质染色弱阳性,12天组甲状腺滤泡胶质染色阴性.免疫组织化学检测的PCNA标记指数和Western-blot检测的PCNA/β-actin的相对值随时间变化的规律完全一致,即3天组开始显著增加(P<0.05);而6天组达到高峰(P<0.05);9天组开始减少(P<0.05);12天组与对照组相比则差异无显著性.结论 初步确定甲状腺激素干扰物体内短期甄别实验实验观察终点为增生斑和实心芽,以及IHC检测的PCNA标记指数,佳实验期为6天.
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葡多酚对小鼠肝细胞蛋白激酶C和增殖细胞核抗原表达的影响
目的 观察葡多酚(GPC)对小鼠肝细胞蛋白激酶C(PKC)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响.方法 每日给小鼠经口灌胃不同剂量的GPC,30天后取肝组织,用MTT法测各组小鼠肝细胞的增殖活性水平,免疫组化的方法检测各组PKC和PCNA的表达.结果 高剂量GPC组PKC和PCNA阳性表达率分别为47.62%和82.76%,阴性对照组则分别为6.42%和32.62%,经χ2检验,差异有显著性(P＜0.05).各组肝细胞的PKC和PCNA阳性表达率随GPC剂量的增高而增高.结论 葡多酚可促进小鼠肝细胞PKC的表达,提高肝细胞增殖活性.
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试验性非特异性免疫反应对大鼠睾丸功能的影响
目的 探讨碳粒诱导的全身非特异性免疫反应对大鼠血清激素以及睾丸生精细胞增殖变化的影响.方法 利用磁分离均相酶联免疫技术检测血清睾酮、黄体生成素(LH)水平,运用免疫组织化学技术观察睾丸内增殖细胞核抗原(PCNA)、α-catenin表达的变化,另外用原位杂交技术检测动物睾丸内雄激素结合蛋白(ABP)mRNA量的改变.结果 与对照组相比实验组血清睾酮、LH含量显著降低(P＜0.05)以及睾丸内PCNA、α-catenin表达明显减少(P＜0.05),而ABP mRNA表达差异无显著性.结论 印度墨水(碳粒)诱发的试验性全身非特异性免疫反应可影响血清LH以及睾酮的水平,进而导致生精细胞的发生、发展成熟障碍.
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HMGB1、Notch1、PCNA在宫颈癌组织的表达及临床意义
目的:探究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、人跨膜蛋白(Notch1)和增殖细胞核抗原(PCNA)在宫颈癌组织的表达及临床意义.方法:选取2015年1月-2018年1月于本院确诊为宫颈鳞癌并行手术治疗的患者60例宫颈组织(宫颈癌组),另取同期本院确诊为宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅲ期的患者40例(CIN组)和参加体检的健康志愿者20例(对照组)宫颈组织.采用免疫组化方法检测各组标本组织中HMGB1、Notch1和PCNA,探究宫颈癌组织不同临床病理特征下3种细胞因子的表达差异及相关性.结果:HMGB1、Notch1和PCNA的阳性表达率宫颈癌组＞CIN组＞对照组(P均＜0.05).宫颈癌组患者分化程度低、临床病理分期(TNM)高的标本HMGB1、Notch1和PCNA的阳性表达程度高,且HMGB1、Notch1和PCNA在表达上两两间均呈正相关(P均＜0.05).结论:与对照组和CIN组宫颈组织相比,在宫颈癌组的HMGB1、Notch1和PCNA表达显著提高,其表达程度随分化程度下降、TNM分期增加而提高.
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68 例喉鳞癌中PCNA的检测及意义
目的:探讨PCNA与喉癌的关系.方法:用免疫组化SP法检测68例喉癌(鳞状细胞癌)中PCNA的表达.结果:PCNA高增殖频率者,倾向于低分化鳞癌(III级)、III、IV期临床分期及有淋巴结转移.结论:PCNA在喉癌中的表达与其分级、临床分期、淋巴结转移密切相关PCNA可作为喉癌肿瘤进展的重要参考指标.
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胃溃疡患者Hp感染与PCNA和IL-I、IL-8检测的临床意义
目的:探讨胃溃疡患者Hp感染与PCNA、IL-1和IL-8含量变化的临床意义.方法:应用免疫组化SABC法测定胃黏膜PCNA的含量;应用ELISA法测定胃溃疡患者血清IL-1、IL-8的含量.结果:Hp感染的胃溃疡患者PCNA、IL-1和IL-8含量显著高于无Hp感染的胃溃疡患者.结论:胃溃疡患者的Hp感染是其发作和反复发作不愈的重要原因.
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瘤内注射消痔灵、生长抑素治疗大鼠移植性肝肿瘤的实验研究
目的:探讨瘤内注射消痔灵、生长抑素对大鼠移植性肝肿瘤的治疗作用.方法:30只大鼠移植性肝肿瘤模型随机分为3组,分别瘤内注射生理盐水、消痔灵和生长抑素-善宁,3天及8天后测定肿瘤体积、血清白蛋白、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AsT)、碱性磷酸酶(ALP)及肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况.结果:3天后消痔灵、善宁组肿瘤体积明显小于生理盐水组(P＜0.05);生理盐水、消痔灵组ALT及AST明显低于善宁组(P＜0.05);消痔灵组ALP、PCNA表达明显低于生理盐水、善宁组(P＜0.05);生理盐水组血清肌酐明显低于善宁组(P＜0.05);生理盐水组肿瘤坏死程度明显低于消痔灵和善宁组(P＜0.05).8天后消痔灵、善宁组的肿瘤体积明显小于生理盐水组(P＜0.05);消痔灵、善宁组间肿瘤体积差异无显著性,3组的血清白蛋白、ALT、AST和肌酐水平无统计学意义;消痔灵组ALP、PCNA表达明显低于生理盐水、善宁组(P＜0.05);生理盐水组肿瘤坏死程度明显低于消痔灵和善宁组(P＜0.01).结论:瘤内注射消痔灵对大鼠移植性肝肿瘤的杀灭作用与善宁相当,但瘤内注射消痔灵对肝功能的损害明显较小,且对肿瘤的生长有一定的抑制作用.
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瘤内注射消痔灵、生长抑素治疗大鼠移植性肝肿瘤的实验研究
目的:探讨瘤内注射消痔灵、生长抑素对大鼠移植性肝肿瘤的治疗作用.方法:30只大鼠移植性肝肿瘤模型随机分为3组,分别瘤内注射生理盐水、消痔灵和生长抑素-善宁,3天及8天后测定肿瘤体积、血清白蛋白、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况.结果:3天后消痔灵、善宁组肿瘤体积明显小于生理盐水组(P＜0.05);生理盐水、消痔灵组ALT及AST明显低于善宁组(P＜0.05);消痔灵组ALP、PCNA表达明显低于生理盐水、善宁组(P＜0.05);生理盐水组血清肌酐明显低于善宁组(P＜0.05);生理盐水组肿瘤坏死程度明显低于消痔灵和善宁组(P＜0.05).8天后消痔灵、善宁组的肿瘤体积明显小于生理盐水组(P＜0.05);消痔灵、善宁组间肿瘤体积差异无显著性,3组的血清白蛋白、ALT、AST和肌酐水平无统计学意义;消痔灵组ALP、PCNA表达明显低于生理盐水、善宁组(P＜0.05);生理盐水组肿瘤坏死程度明显低于消痔灵和善宁组(P＜0.01).结论:瘤内注射消痔灵对大鼠移植性肝肿瘤的杀灭作用与善宁相当,但瘤内注射消痔灵对肝功能的损害明显较小,且对肿瘤的生长有一定的抑制作用.
