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  • 一起EIEC污染水引起小学腹泻暴发的调查分析

    作者:陈尚林;郭仕平;赵廷明

    2002年10月8日,通江县曲滨乡小学发生一起急性腹泻病暴发疫情,经流行病学调查,患者临床症状和实验室检验证实为肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)028ac:K73型污染饮用水所致腹泻病暴发.现将暴发情况报告如下.

  • 与痢疾志贺菌8型发生交叉凝集的O29:K? EIEC的分离鉴定

    作者:李新文;金健潮;曹春远;何云

    肠侵袭性大肠埃希菌(EIEC)所致疾病很象细菌性痢疾,又称志贺样大肠埃希菌,主要侵犯较大儿童和成人,EIEC为国际公认的食物中毒病原菌.

  • 大肠埃希菌(EHEC/EPEC)紧密黏附素基因的分型分析

    作者:陈强;卢珊;赵爱兰;熊衍文

    目的 了解大肠埃希菌分离株eaeA基因的多态性.方法 对不同来源的60株大肠埃希菌分离株的eaeA基因进行聚合酶链反应扩增后直接测序,测序结果在NCBI中进行BLASTn比对,根据比对相似性判定eaeA基因的型别.将获得型别的序列与GenBank中肠致病性大肠埃希菌(Enteropathogenic Escherichia coli,EPEC)和肠出血性大肠埃希菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)代表性菌株型别的序列用Neighbor-joining法构建系统发生树,分析其进化关系.结果 所有EHEC分离株的eaeA基因均为γ型,且序列完全一致.EPEC分离株的eaeA基因型以β1型为主,同时存在ε,κ,ι2,θ型.结论 EHEC分离株的eaeA基因相对保守,型别单一,而EPEC分离株的eaeA基因表现出较大的多态性.

  • 浙江省台州地区不同来源的大肠埃希菌耐药性分析及产超广谱β-内酰胺酶、头孢菌素酶的基因分型

    作者:王红戟;王冬国;石庆新;陈巧明

    目的 了解浙江省台州地区的分散式供水、食品从业人员粪便及临床标本分离的大肠埃希菌耐药状态、产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)情况及相关耐药基因的类型.方法 从分散式供水标本、食品从业人员肛拭及临床标本中分离培养的各100株大肠埃希菌进行药敏试验,用ESBLs确证试验、AmpC酶检测试验检测实验菌株的表型,以PCR扩增和序列分析检测相关的耐药基因.结果 从食品从业人员肛拭分离到的菌株耐药性高于分散式供水中分离的菌株,而临床标本分离到的菌株耐药性更高;从100株集中式供水分离的菌株中检测出产ESBLs菌6株,基因型为TEM-1合并CTX-M-9.100株食品从业相关人员肛拭分离的菌株中检测出产ESBLs 17株,基因型为TEM-1合并CTX-M-9,CTX-M-9;检出产AmpC酶3株,基因型为MOX-1、DHA-1.100株临床标本中分离出产ESBLs 33株,基因型为TEM-1合并CTX-M-9、CTX-M-9、CTX-M-25;检出产AmpC酶9株,基因型为MOX-1、DHA-1、FOX-1.结论 在分散式供水及正常食品从业相关人员粪便中检出产ESBLs、AmpC酶的大肠埃希菌与在临床分离的标本中的产ESBLs、AmpC酶的大肠埃希菌携带的基因型有一定的相似性.

  • 儿童脑膜炎大肠埃希菌毒力基因ibeC的分析研究

    作者:刘莎;金东;王艺婷;王怡婷;杨晶;周娟;许彦梅;白向宁;濮吉

    目的 对GenBank的1620株大肠埃希菌基因组中儿童脑膜炎大肠埃希菌毒力基因ibeC的分布进行研究.方法 下载GenBank现存并公开释放的1620株大肠埃希菌基因组数据,构建数据库,通过序列比对程序BLAST查找分析各菌株携带ibeC情况,使用Clustal Xl.83软件对大肠埃希菌代表菌株的ibeC基因序列进行多序列比对.同时应用多位点序列分型方法(multi locus sequence typing,MLST)对1620株大肠埃希菌菌株的分布特点进行分析.用BioNumerics V4.0软件,对342株不同来源、不同致病性代表菌株及MLST数据库中已经明确分群的72株大肠埃希菌菌株的不同ST型别构建小生成树,分析菌株之间的种群结构.结果 1620株大肠埃希菌基因组中全部携带ibeC基因,ibeC序列平均相似值为98.21%,MLST将1620株大肠埃希菌菌株分成261个已知ST型,ECOR菌株共有49个ST型别,菌株ST型别与菌株来源关联性不强,不同来源、不同致病型别的菌株分布在不同家系.结论 ibeC基因广泛分布在各类大肠埃希菌中,脑膜炎相关大肠埃希菌与其他致病型大肠埃希菌所携带ibeC基因差异微小,菌株MLST聚类分析显示所有菌株分布广泛,来源复杂,进一步说明ibeC基因非常保守.

  • 血液感染大肠埃希菌的耐药性及其产超广谱β-内酰胺酶分析

    作者:陆红;朱丽青;吴庆;周铁丽

    目的 分析2005-2007年3年间温州医学院附属第一医院住院患者血液中大肠埃希菌的检出率,研究其对常用抗菌药物的耐药情况及其产超广谱β-内酰胺酶(extended.spectrum β-lactamases,ESBLs)菌株的耐药特性,为临床用药提供参考.方法 用BacT/ALERT 3D血培养仪进行血液培养,VITEK-60系统、GNI+卡、GNS-143卡进行菌种鉴定、ESBLs检测和药敏试验.结果 3年间送检的9513份血培养标本中,检出132株大肠埃希菌,其中产ESBLs菌株67株,检出率为50.8%,明显高于非产ESBLs菌,其对β-内酰胺类药物100%耐药,对喹诺酮类、氨基糖苷类、磺胺类药物耐药性高,对哌拉西林他唑巴坦、呋喃妥因耐药率分别为6.0%,9.0%;所有受试菌对亚胺培南均敏感.结论 产ESBLs菌的检出率高,血液中感染大肠埃希菌对常用抗菌药物的耐药性日益严重;要重视ESBLs的检测,治疗时应根据药敏结果选择抗菌药物.

  • 2017年6-7月美国亚利桑那州和犹他州农村社区与动物粪便接触有关的大肠埃希菌O157∶H7暴发疫情调查

    作者:龚甫哲

    2017年6月26日,美国犹他州南部的一家医院向犹他州卫生局报告了来自亚利桑那州-犹他州边境一个小社区2名儿童感染产志贺样毒素的大肠埃希菌(STEC)O157∶H7疫情情况.2名儿童均出现了溶血性尿毒综合征,表现为溶血性贫血,急性肾功能衰竭和血小板减少症,并在发病后几天内死亡.在接下来的几天里,社区居民报告了更多与STEC相关的疾病.为确定疫情来源并防止出现更多病例,美国疾病预防控制中心(CDC)会同亚利桑那州和犹他州的地方和州卫生机构开展了联合调查;调查共发现12例病例,其中包括2名死亡儿童.调查人员分析探讨了多种潜在的疾病来源:流行病学和环境调查信息显示,接触牛粪可能是暴发疫情的初来源,随后是人与人之间的传播.其中1株暴发疫情菌株是从2例患儿社区家庭附近的一个院子里采集的公牛和马粪中分离出来的.当地卫生机构向公众发布了与动物接触和手部卫生有关的建议,以降低STEC传播的风险.在饲养反刍动物社区发生暴发疫情期间,接触动物或动物粪便是STECO157∶H7感染的潜在来源.

  • 致泻性大肠埃希菌诱发细胞肌动蛋白聚集的研究

    作者:白莉;徐建国

    人类重要的肠道致病菌,肠致病性大肠埃希菌(EPEC)和肠出血性大肠埃希菌(EHEC),在细菌黏附细胞周围形成肌动蛋白聚集的杯垫样结构来黏附并定植到肠道黏膜上,完成侵入宿主细胞的第一步.同时,被感染的肠道黏膜上皮细胞刷状缘脱落并失去微绒毛,这种特殊的病理损伤过程,称为黏附抹平效应(A/E效应).通过细胞培养感染模型对典型菌株的研究显示,尽管EHEC和EPEC都能激活下游N-WASP蛋白,Arp2/3蛋白,终引起有效肌动蛋白的聚集,但是它们却采取了不同的途径引起肌动蛋白的聚集.EPEC运用Tir-Nck途径,而EHEC运用是Tir-TccP途径来激活N-WASP蛋白.近通过细胞培养感染模型研究发现,EHEC和EPEC菌株存在一种既不依赖TccP也不依赖Nck但能引起微弱肌动蛋白聚集的途径.在体内实验(in vivo)和体外组织实验(ex vivo)中,黏膜组织感染也显示不依赖TecP或Nck同样能产生典型的A/E损伤.

  • 大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶基因型及毒力因子相关性研究

    作者:徐春泉;吴庆;张雪青;陈栎江;王赛芳;虞丹丹

    目的 分析温州医科大学附属第一医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrum BetaLactamase,ESBLs)大肠埃希菌耐药情况,研究大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的不同基因型与所含的毒力因子的关系.方法 普通聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测不同标本来源大肠埃希菌的毒力因子papC、sfa/foc、afa/dra、iutA、aer 、fimH、hly、cnf1、kpsMTII、fyu;纸片扩散确证法检测超广谱β-内酰胺酶,PCR方法检测ESBLs不同基因型的分布情况.结果 产ESBLs大肠埃希菌株中,毒力因子iutA 、fyu的检出率较高,均>50%;毒力因子fimH、aer的检出率为20%~40%,而毒力因子papC、sfa/foc、afa/dra和kpsMTII的检出率均较低<20%;经x2检验产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的毒力因子分布率差异均无统计学意义(P>0.5).92株产ESBLs大肠埃希菌中,毒力因子papC在CTX-M-9群中的阳性率高于TEM群和CTX-M-1群,差异有统计学意义(P<0.05);毒力因子aer在CTX-M-1群中的阳性率高于TEM群和CTX-M-9群,差异有统计学意义(P<0.05).结论 各种毒力因子检出率与细菌是否产ESBLs无相关性.但ESBLs阳性菌株中不同的基因型与某些毒力因子的存在与否存在一定关系,毒力因子与产CTX-M酶大肠埃希菌耐药情况可能有关.

  • 脓毒症常见病原菌多重实时PCR检测方法的建立

    作者:郑皓;李文革;杨海英;吴媛;车洁;陈小萍;卢金星

    目的 建立可同时检测脓毒症患者血液中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和白假丝酵母菌的多重实时PCR方法.方法 根据各病原菌基因组保守序列设计引物和探针,建立多重实时PCR检测方法.对建立的多重实时PCR检测方法进行特异性、敏感性和灵敏度分析,并使用该法对112份脓毒症血培养阳性标本进行验证.结果 成功建立脓毒症常见病原菌的多重实时PCR检测方法.此方法特异性、敏感性良好,灵敏度达10-5 ng/μl,与标准检测方法(血培养加生化鉴定)相比,缩短了20 h.112份临床血培养阳性标本中,目标病原菌83例,多重实时PCR检出80例阳性;非目标病原菌29例,多重实时PCR检测均为阴性.检测结果显示,该方法特异性达100%,敏感性达96.39%.结论 该多重实时PCR检测方法具有快速、高效、灵敏、特异的优点,可用于临床重症监护室患者血液常见感染病原菌的诊断.

  • 从患者胆汁分离的大肠埃希菌中质粒介导的氟喹诺酮类耐药基因的检测

    作者:汪群水;周学琴;李丽民

    目的 分析浙江省衢州市开化县第二人民医院消化内科胆汁分离的大肠埃希菌的耐药特点并调查质粒介导的喹诺酮类耐药基因的分布情况和流行特点.方法 收集该院消化内科患者2011年1月至2013年6月分离的大肠埃希菌724株,均为非重复性菌株,采用全自动微生物分析仪器VITEK 2 COMPACT进行细菌鉴定及药物敏感性分析,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)分析质粒介导的氟喹诺酮类耐药基因(plasmidmediated quinolone resistance genes,PMQR)如qnrA、qnrB、qnrS、aac(6’)-Ib-cr和qepA基因的流行特点.结果 胆源性大肠埃希菌的构成比达18.65% (135/724),其对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率高达61.5% (83/135)和55.6%(75/135),未检出碳青霉烯类抗生素耐药菌株;PCR检测PMQR基因结果显示:135株胆源性大肠埃希菌中,121株(89.63%) qnrA1基因阳性,45株(33.33%) qnrB4基因阳性,32株(23.70%) qnrB6基因阳性,43株(31.85%) qnrS1基因阳性,34株(25.19%) aac(6’)-Ib-cr基因阳性菌株,未检出qepA基因;其中45株(33.33%)同时携带qnrA1、qnrB4基因,32株(23.70%)同时携带qnrA1、qnrB6,25株(18.52%)同时携带qnrA1、qnrB4、qnrS1,21株(15.56%)同时携带qnrA1、qnrB4、qnrS1、acc(6’)-Ib-cr,12株(100%)同时携带qnrA1、qnrB6、qnrS1、acc(6’)-Ib-cr,且环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率随着PMQR基因组合种类的增多而增多.结论 消化内科胆汁分离的大肠埃希菌氟喹诺酮类抗生素耐药严重,耐药基因主要以qnrA1为主,qnrB4和qnrB6次之,且存在多种PMQR基因组合形式,这些潜在播散的氟喹诺酮耐药基因对于临床胆道感染的治疗有很大的挑战.

  • 2007-2011年浙江萧山地区尿路感染患者大肠埃希菌的分离及产超广谱β-内酰胺酶和耐药性分析

    作者:郭远瑜;董华丽;窦琳琳;徐洁颖

    目的 调查和分析浙江萧山医院尿路感染患者中大肠埃希菌的临床分布、产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamase,ESBLs)和耐药特性,为临床合理利用抗菌药物提供依据.方法 调查2007-2011年尿培养检出的大肠埃希菌,对其临床分布进行分析;使用VITEK-60全自动微生物分析仪作细菌鉴定;采用K-B琼脂扩散法检测耐药情况.结果 共分离出771株大肠埃希菌,其中52.5% (405/771)产ESBLs,主要来源于泌尿外科、内科和肾病科等科室,超过总分离菌株的60.0%,产ESBLs大肠埃希菌检出率从2007年的44.2%增高到2011年的61.2% (P<0.01),且2007-2011年大肠埃希菌对多种抗菌药物的耐药率都有增高趋势,尤以对三、四代头孢菌素的增幅更为明显.ESBLs阳性株对氨苄西林、头孢唑啉、头孢他啶等16种药物的耐药率均高于ESBLs阴性株,差异有统计学意义(P<0.01).结论 尿路感染大肠埃希菌对头孢类药物耐药率逐年升高,产ESBLs菌株检出率也呈逐年增高趋势,且表现为多重耐药,临床应合理使用抗生素.

  • 2013-2017年云南省某医院抗菌药物使用情况及其对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

    作者:黄艳梅;李德璇;汪坚;华鹏;谭红丽

    目的 分析2013-2017年云南省某医院抗菌药物使用情况及其对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药影响,为临床合理使用抗菌药物、降低细菌耐药率提供指导依据.方法 对常用抗菌药物的使用频度和强度及同期分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药情况进行回顾性调查分析.结果 2013-2017年该医院抗菌药物总使用强度逐年上升,2016年后有所下降.大肠埃希菌耐药率与头孢他啶和头孢呋辛使用频度呈正相关,与其他常用抗菌药物使用频度均负相关.肺炎克雷伯菌耐药率与美洛培南和左氧氟沙星使用频度呈正相关(r=0.980、0.902,P=0.003、0.036),与头孢他啶、头孢吡肟、庆大霉素和头孢哌酮/舒巴坦使用频度呈正相关,与头孢呋辛、亚胺培南和哌啦西林/他唑巴坦使用频度呈负相关.结论 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌与临床常用抗菌药物的使用频度有一定相关关系,特别是肺炎克雷伯菌的耐药率与医院使用量较大的美洛培南、左氧氟沙星的使用频度具有相关性,应引起临床足够重视.

  • 临床来源碳青霉烯耐药大肠埃希菌药物敏感性及分子流行病学特征分析

    作者:贾园春;袁敏;陈东科;周海健;陈霞;赵晓菲;李娟;陈会波

    目的 探讨临床分离的碳青霉烯耐药大肠埃希菌药物敏感性特征及分子流行病学特征,为院内感染控制及临床治疗提供基础数据.方法 收集某医院临床分离的21株对碳青霉烯类药物耐药的大肠埃希菌,采用琼脂稀释法测定菌株对11种临床常用药物的低抑菌浓度(MIC);Carba NP试验检测菌株产碳青霉烯酶情况;采用PCR扩增及序列比对检测耐药基因(包括blaNDM、blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaOxA)携带状况;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)对菌株进行分子分型.结果 21株碳青霉烯耐药大肠埃希菌中,对哌拉西林、头孢吡肟、头孢曲松、头孢他啶等β-内酰胺类药物和左氧氟沙星耐药率为100.00%;对甲氧苄啶-磺胺甲恶唑的耐药率也高达76.19%;对米诺环素、阿米卡星和磷霉素的耐药率相对较低,分别为23.81%、23.81%和19.05%.Carba NP试验阳性菌株17株,均携带blaNDM-1基因,其余4种基因检测均为阴性.MLST显示21株菌株共有9种ST型别,其中携带blaNDM-1基因的大肠埃希菌主要为ST167型和ST540型.PFGE显示来自泌尿外科的3株菌株电泳图谱完全相同,另外来自不同病房的2株菌株电泳图谱也完全相同,提示医院内存在同一克隆菌株传播的可能.结论 该医院碳青霉烯耐药大肠埃希菌基因型分布呈现多态性;对碳青霉烯类药物耐药的机制主要是携带blaNDM-1基因;携带该基因的大肠埃希菌对临床常用抗菌药物往往呈现多重耐药,给临床治疗带来了困难.加强对碳青霉烯耐药菌株基因型和耐药基因的检测,将对减缓或阻断耐药菌的传播具有重要意义.

  • 大肠埃希菌感染的临床分布及耐药特性研究

    作者:吴莲凤;陈栎江;周铁丽

    目的 通过对浙江省温州医学院附属第一医院近5年临床分离大肠埃希菌的临床分布和耐药特性分析,为临床合理利用抗菌药物和减少ESBLs的产生提供依据.方法 回顾性调查2006 -2010年该院住院患者标本分离的657株大肠埃希菌,使用VITEK - 60全自动微生物分析仪专用药敏检测卡及K-B琼脂扩散法做药敏实验,对其临床分布及耐药情况进行总结分析.结果 5年间分离出657株大肠埃希菌,各类感染标本中的分离率以尿液标本占首位,为47.5%(312株).所检出的大肠埃希菌主要来源于重症监护病房(ICU)、普外科等科室,超过总分离菌株的60%,温州医学院附属第一医院产ESBLs大肠埃希菌的检出率从2006年的54.5%增高到2010年的70.7% (P <0.05),且2006-2010年该院大肠埃希菌对多种抗菌药物的耐药率都有增高趋势,尤以对三、四代头孢菌素的增幅更为明显.ESBLs阳性株对氨苄西林、头孢唑啉、头孢曲松等11种药物的耐药率均高于ESBLs阴性株.结论 大肠埃希菌所致感染日趋严重,耐药率逐年升高,产ESBLs大肠埃希菌的检出率也呈逐年增高趋势,且表现多重耐药,临床应加强对此类细菌的监测.

  • 医院感染菌455株的耐药性分析

    作者:陈映;乔岩;聂庆兰

    为了更好地控制细菌感染,指导临床合理使用抗菌药物,本研究笔者对所在医院2011年全年临床分离的455株细菌进行了分析,现报告如下.1 资料与方法1.1 资料:取自南京市浦口区中心医院2011年1月1日至12月31日住院患者各类细菌学标本中分离的细菌455株,剔除同一患者相同部位的重复菌株.1.2 方法:应用法国生物-梅里埃公司鉴定及药敏测试仪及配套微生物榆测试剂进行细菌鉴定和药敏试验.同时用标准菌株金黄色葡萄球菌ATCC25923,大肠埃希菌ATCC25922,铜绿假单胞菌ATCC27853作室内质量控制.标准菌株均山卫生部临床检验中心提供.

  • 左氧氟沙星无菌检查方法的研究

    作者:矫丽洪

    正常的无菌检查法:取本品适量,按薄膜过滤法过滤,以0.1%无菌蛋白胨水溶液冲洗.以金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003],大肠埃希菌CMCC(B)44102为阳性对照,依法检查(<中国药典>2005年版二部附录XIH),应符合规定.

  • 336株大肠埃希菌的耐药性分析

    作者:薛桂芹;黄莹华;陈童

    了解我院痰培养中大肠埃希菌的耐药情况,以便指导临床医生合理用药.方法:运用回顾性调查方法统计2012年1月至2012年12月我院痰培养中大肠埃希菌的耐药情况.结果:大肠埃希菌的耐药清况非常严重,大肠埃希菌对包括头孢唑啉,头孢呋辛,头孢曲松,头孢噻肟等第一代、第二代及第三代头孢菌素类的抗菌药物的耐药率明显上升,甚至超过了80%,亚胺培南仍是所有被测药物中对大肠埃希菌抗菌作用强的抗生素.结论:大肠埃希菌对各种抗菌药物的耐药性逐渐增强,产ESBLs菌株占相当高的比重,临床医生应根据药敏结果指导用药,以减少耐药菌株的产生和播散.

  • 产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌耐药性分析与研究

    作者:杨宗桥

    目的:分析研究大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酸(ESBLs)的耐药性,并了解它的流行情况.方法对154株大肠埃希菌先后采用美国临床实验室标准化委员会规定的表型筛选和确证试验分别检测ESBLs.结果154株大肠埃希菌中检出75株检出ESBLs(48.7%)菌株.产ESBLs菌株对所有青霉素类抗生素产生耐药,第一、第二代头孢菌素耐药率100%,对第三代头孢菌素中头孢噻肟、头孢哌酮和头孢曲松的耐药率在80%以上,未检测到亚胺培南耐药株.结论产ESBLs大肠埃希菌株对多类药物表现出较高的耐药率,临床应该加强对ESBLs大肠埃希菌耐药性监测.

  • 用测试片法快速检测金黄色葡萄球菌

    作者:孙霞;陈娟丽

    金黄色葡萄球菌是一种人畜共患病的重要致病菌,由于其形状为球型,在显微镜下排列成葡萄串状而得名,该菌广泛存在于空气、水、尘埃及人和动物的排泄物中.因而,食品及食品原料受其污染的机会很多.金黄色葡萄球菌能产生多种致病性物质,如肠毒素及凝固酶等.金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒是一个全球性公共卫生问题,据美国疾病预防控制中心报告,由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒仅次于大肠埃希菌,居第2位,占细菌性食物中毒的33%,加拿大的发生率更高,占细菌性食物中毒的45%.我国每年发生的此类中毒事件也非常多,容易感染金黄色葡萄球菌的食物包括肉类、禽类、蛋类、水产类、奶及其制品等,因此大多数食品及食品原料,均须按国家规定要求进行金黄色葡萄球菌的检测.

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