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丹酚酸B对骨髓间充质干细胞分化方向的影响
背景:随着组织工程学的不断发展,骨髓间充质干细胞的多向分化潜能为多种疾病的治疗带来了新的希望.近年来的研究发现,丹参的主要有效成分丹酚酸B具有多种药理活性,可以影响骨髓间充质干细胞的定向分化.目的:综述丹酚酸B对骨髓间充质干细胞分化方向的影响及具体机制.方法:分别以"丹酚酸B、骨髓间充质干细胞/骨髓基质干细胞、分化""Salvianolic acid B,differentiation/osteogenic/adipogenesis,mesenchymal stem cels"为检索词,由第一作者检索2000年1月至2017年9月在中国期刊全文数据库、PubMed数据库及万方数据库发表的相关文章,其中中文102篇,英文136篇,终选取具有代表性的49篇文献进行归纳总结.结果与结论:目前发现,丹酚酸B可以促进骨髓间充质干细胞成骨分化、成神经分化、成心肌细胞分化,抑制骨髓间充质干细胞成脂分化.丹酚酸B是否可以促进骨髓间充质干细胞向其他方向分化及在促进不同分化方向上的有效浓度仍有待于进一步研究.
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组织工程技术修复关节软骨：如何构建新型复合模式？
背景：关节软骨缺损自我修复能力有限，传统手段难以修复，关节软骨组织工程为修复大面积关节软骨缺损提供了崭新的方法和途径。目的：综述组织工程技术修复关节软骨的现状、问题及前景。方法：检索PubMed数据库1982至2015相关文献，以“Articular cartilage，repair，tissue engineering”为检索词进行检索。纳入与关节软骨组织工程修复相关的文献，排除重复性研究。根据纳入标准，排除无关联或重复的文献，终保留39篇文献进行综述。结果与结论：优良的种子细胞具有软骨细胞分化潜能，目前用于关节软骨修复的种子细胞主要有间充质干细胞、胚胎干细胞、脂肪源干细胞及前软骨干细胞等4大类。生长因子趋向于联合应用，生长因子具有诱导宿主实质细胞在体内生长，提高种植的细胞稳定性，加快组织再生的作用。复合支架材料有利于促进细胞接种和细胞的空间分布，促进细胞增殖，是研究的热点。如何优化种子细胞、支架材料和细胞因子的选择和匹配，建立新型复合模式，以获得佳的关节软骨修复效果，是未来的重要发展方向。
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脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病下肢血管病变
背景：与骨髓和自体外周血干细胞相比，脐带间充质干细胞更原始，扩增能力更强，且免疫原性弱，无伦理问题，对于年老体弱的糖尿病患者更具有重要意义。目的：分析脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病下肢血管病变的有效性和安全性。方法：56例中老年2型糖尿病下肢血管病变患者，随机分为对照组和观察组，对照组采用常规药物治疗，观察组采用脐带间充质干细胞移植治疗。结果与结论：观察组临床显效率高于对照组的临床显效率，差异有显著性意义(P<0.05)；两组治疗后皮温、经皮氧、踝肱指数值均有好转表现，观察组踝肱指数值好转更明显(P<0.05)；两组均未发现明显的不良反应。结果可见脐带间充质干细胞移植治疗糖尿病下肢血管病变是一种简便、安全、有效的治疗方法，近期疗效显著。
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过表达缺氧诱导因子1α心肌干细胞能提高心肌梗死后心功能及移植细胞的存活率
背景:干细胞移植后大的障碍是细胞在缺血、缺氧等恶劣环境下极低的存活率.为解决这一难题,人们尝试基因修饰的方法,即在细胞移植前将抗凋亡基因通过转染或转导的方式,使其基因结构发生改变,进而可能会从根源上解决干细胞的存活、代谢及增生或分化等能力.目的:经缺氧诱导因子1α基因修饰的心肌干细胞移植入大鼠心肌梗死边缘区后,观察移植后心肌干细胞的存活率及大鼠心功能的变化.方法:将24只SD大鼠随机等分为3组:缺氧诱导因子1α转染心肌干细胞组、心肌干细胞组和模型组,以开胸结扎冠脉的方法制备心肌梗死模型,2周后分别注射经Ad-HIF1α-eGFP转染的心肌干细胞、Ad-eGFP转染的心肌干细胞及PBS液.结果与结论:心肌干细胞移植可提高心功能;经缺氧诱导因子1α基因修饰的心肌干细胞移植可较单纯心肌干细胞移植更显著改善心功能;梗死后左室射血分数的改善与梗死边缘区心肌干细胞密度呈正相关.说明过表达缺氧诱导因子1α的心肌干细胞能有效改善心肌梗死大鼠心功能及移植细胞的存活.
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辛伐他汀对骨髓基质干细胞特异性成骨分化基因表达的影响
背景：以往研究表明降脂类药物辛伐他汀具有促进体外培养骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的潜能，有望成为新型促成骨类药物，但干预不同时间点相应特异性成骨分化基因的表达是否有差异尚不得而知。目的：观察辛伐他汀体外刺激不同时间点大鼠骨髓基质干细胞骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原的表达。方法：取第1代骨髓基质干细胞分为两组，对照组加入成骨诱导培养基培养，辛伐他汀组在对照组基础上加入终浓度为10-7 mol/L的辛伐他汀培养，干预第7天检测第3代细胞碱性磷酸酶的表达。取第4代骨髓基质干细胞分为两组，对照组加入成骨诱导培养基培养，辛伐他汀组在对照组基础上加入终浓度为10-7 mol/L的辛伐他汀培养，干预12 h和36 h提取细胞RNA及蛋白，采用Realtime PCR 和Western blot 法检测骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原的表达。
结果与结论：①两组细胞均有碱性磷酸酶分泌，辛伐他汀组大鼠碱性磷酸酶阳性细胞比例显著高于对照组(P <0.05)；②辛伐他汀组2个时间点骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原mRNA表达均显著高于对照组(P<0.05)；③Western blot 法检测辛伐他汀组2个时间点骨形态发生蛋白2的表达均显著高于对照组(P<0.05)；辛伐他汀组Ⅰ型胶原蛋白的表达于12 h显著高于对照组(P<0.05)，36 h无显著差别；④以上结果提示，辛伐他汀可以促进大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化晚期特异性标志蛋白骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原的表达，药物刺激12 h较36 h作用更显著。 -
纯钛表面阳极氧化增强成骨细胞生物活性及护骨素基因的表达
背景：纯钛阳极氧化改性后形成的纳米结构与骨组织具有良好的生物相容性。目的：观察纯钛表面纳米孔结构的形貌和物相构成，以及其对MC3T3-E1小鼠前成骨细胞增殖、黏附等生物学行为和促成骨基因护骨素表达的影响。方法：取纯钛片24份，其中12份仅进行机械抛光，作为对照组；另外12份进行机械抛光后，应用阳极氧化技术在纯钛表面制备纳米孔结构，作为实验组。将小鼠前成骨细胞MC3T3-E1分别接种于两组试件表面，接种7 d后扫描电镜下观察细胞形态，采用MTT法检测细胞增殖情况，绘制生长曲线；同时检测细胞促成骨基因护骨素的表达。结果与结论：阳极氧化后钛片表面形成规格统一的纳米孔结构，但是物相构成并未发生变化。与接种于对照组试件上的成骨细胞相比，实验组试件表面的细胞密度变大，覆盖金属的面积更多，呈现多边形结构，突触向周围移行，可见板状伪足向周围材料伸出；接种第7天时，实验组细胞数目约为对照组的1.4倍，同时纳米孔表面成骨细胞护骨素基因的表达高于对照组(P<0.01)。结果表明阳极氧化后形成纳米孔结构的钛片更有利于成骨细胞的黏附、增殖和护骨素基因的表达，进而促进成骨细胞生长，具有良好的生物相容性。
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辛伐他汀干预卵巢切除大鼠骨密度和生物力学性能的变化
背景：降脂类药物辛伐他汀表现出成骨作用潜能，有望成为新型促成骨类药物，但其体内干预作用效果尚存争议，观察部位的选择是否影响实验结论尚无确切证据。
目的：观察辛伐他汀体内给药对卵巢切除大鼠骨丢失模型股骨及椎体骨量和生物力学性能的影响。
方法：6月龄雌性SD大鼠24只，随机分为3组，每组8只。卵巢切除组、卵巢切除加辛伐他汀干预组大鼠在双侧卵巢切除后第2天分别接受安慰剂和辛伐他汀5 mg/(kg/d)干预；假手术组只暴露卵巢，不予切除，直接缝合。8周后处死所有大鼠，采用ELISA法检测血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽水平，取第4，5腰椎和股骨，双能X射线法检测大鼠第5腰椎和左侧股骨骨密度，压缩试验(椎骨)和三点弯曲试验(股骨)检测第4腰椎和右侧股骨大载荷、弹性模量等生物力学指标。
结果与结论：①卵巢切除组和卵巢切除+辛伐他汀组Ⅰ型前胶原氨基端前肽水平显著高于假手术组。②卵巢切除大鼠第5腰椎和股骨骨密度均显著低于假手术组(P <0.05)，卵巢切除+辛伐他汀第5腰椎骨高于卵巢切除组(P <0.05)，股骨骨密度高于卵巢切除组，但差异无显著性意义。③卵巢切除组大鼠第4腰椎大载荷、弹性模量均显著低于假手术组和卵巢切除+辛伐他汀组；卵巢切除组股骨弹性模量显著低于假手术组和卵巢切除+辛伐他汀组。结果证实辛伐他汀可部分阻止卵巢切除大鼠骨量丢失，对椎体骨的作用较股骨更显著，椎体较股骨更适于分析生物力学性能。 -
银屑病患者损伤处皮肤间充质干细胞对T细胞增殖的影响
背景：有研究发现银屑病患者骨髓间充质干细胞生物学活性异常，细胞因子分泌水平也有差异，但有关银屑病患者皮肤损伤处间充质干细胞的生物学活性研究较少。
目的：探讨银屑病患者皮损间充质干细胞对T细胞增殖的影响。
方法：分离和培养银屑病患者损伤皮肤间充质干细胞和正常皮肤间充质干细胞，分别与外周血 T 细胞共培养，MTT法检测外周血T细胞增殖能力。ELISA法检测皮肤间充质干细胞上清液中表皮细胞生长因子和转化生长因子β1水平。
结果与结论：①银屑病患者皮肤间充质干细胞和正常皮肤间充质干细胞对 T 细胞增殖均有抑制作用，与T细胞自然增殖组比较差异均有显著性意义(P<0.05)，银屑病患者皮肤间充质干细胞对T细胞增殖的抑制作用较弱；②银屑病患者皮肤间充质干细胞组上清液中表皮细胞生长因子水平高于正常皮肤间充质干细胞组(P<0.05)，银屑病患者皮肤间充质干细胞组上清液中转化生长因子β1水平低于正常皮肤间充质干细胞组(P<0.05)；③结果表明，银屑病患者皮肤间充质干细胞对T淋巴细胞的抑制作用减弱，可能为皮损处微环境中生长因子水平失衡所致。 -
酶消化法和组织块法培养心肌干细胞的比较
背景：目前国内动物研究中提取心肌干细胞方法不统一，分离培养及提纯未形成规范化的流程。目的：探讨酶消化法和组织块法培养大鼠心肌干细胞的差异。
方法：取清洁级1 d龄SD大鼠心脏组织，分为组织块组与酶消化组，分别使用酶消化法和组织块法体外培养心肌干细胞。
结果与结论：酶消化法和组织块法均能培养出心肌干细胞，但组织块组培养的细胞中心肌干细胞比例显著高于酶消化组。提示在心肌干细胞培养过程中，组织块法优于酶消化法。 -
高脂饲料配合链脲佐菌素诱导2型糖尿病模型大鼠的椎间盘形态
背景:高脂饲料配合低剂量链脲佐菌素诱导大鼠2型糖尿病模型是目前常用的2型糖尿病动物模型,目前尚无此模型对椎间盘结构影响的相关报道.椎体终板硬化是造成椎间盘退变的重要因素之一.目的:评估高脂饲料配合低剂量链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型是否适用于2型糖尿病相关椎间盘退变研究.方法:32只3月龄雌性SPF级SD大鼠随机分为4组,即假手术组、双侧卵巢切除组、糖尿病组、双侧卵巢切除+糖尿病组,每组8只.分别进行双侧卵巢切除术和/或高脂饲料配合低剂量链脲佐菌素处理.监测各组大鼠体质量、血糖及糖耐量,链脲佐菌素处理后8周检测骨密度后处死动物,取L5-6节段脱钙后正中矢状位切片行VG染色并进行椎间盘退变评分,分析椎间盘高度和终板厚度.结果与结论:①糖尿病组和双侧卵巢切除+糖尿病组大鼠空腹血糖、随机血糖分别显著高于假手术组和双侧卵巢切除组(P<0.05),糖尿病组和双侧卵巢切除+糖尿病组大鼠胰岛素敏感性分别显著低于假手术组和双侧卵巢切除组(P<0.05);②双侧卵巢切除组L4-L6椎体骨密度显著低于假手术组(P<0.05),糖尿病组和双侧卵巢切除+糖尿病组L5-L6椎体骨密度均显著低于假手术组(P<0.05);③双侧卵巢切除组和双侧卵巢切除+糖尿病组L5-L6椎间盘退变评分分别显著高于假手术组和糖尿病组(P<0.05);双侧卵巢切除+糖尿病组表现与双侧卵巢切除组相仿,可见髓核细胞软骨化生及黏液变性,其评分结果显著高于假手术组和糖尿病组(P均<0.05),但与双侧卵巢切除组相比差异未见显著性意义;④与假手术组相比,双侧卵巢切除组和双侧卵巢切除+糖尿病组椎间盘高度明显降低(P<0.05);4组间终板厚度差异无显著性意义;⑤综上所述,虽然高脂饲料配合低剂量链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型具备糖尿病特征表现,但未观察到其间盘组织较正常大鼠有显著改变,可能不适于2型糖尿病相关椎间盘退变研究.
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人工听骨链重建材料生物相容性、特性及修复喉软骨缺损的效果
背景：喉软骨缺损替代品较多，包括自体软骨、同种异体软骨以及金属支架等，这些材料在喉软骨缺损中均能取得理想效果，但是也存在许多不足。目的：研究人工听骨链重建材料生物相容性及其特性，探讨人工听骨链重建材料在喉软骨缺损中的修复效果。方法：①从新鲜人骨中提取骨形态发生蛋白，将羟基磷灰石高温煅烧后制备多孔羟基磷灰石，将获得的多孔羟基磷灰石听骨放入骨形态发生蛋白溶液中，制备骨形态发生蛋白-羟基磷灰石人工听骨链重建材料，分析材料的生物相容性及特性。②将40只新西兰雄性成年白兔随机分为多孔羟基磷灰石组和人工听骨链重建材料组，每组20只。制备新西兰雄性成年白兔喉软骨缺损模型，多孔羟基磷灰石组采用多孔羟基磷灰石材料进行修复，人工听骨链重建材料组采用骨形态发生蛋白-羟基磷灰石人工听骨链重建材料修复。结果和结论：①不同孔隙率人工听骨重建材料抗压强度和抗压强度差异有显著性意义；②骨形态发生蛋白-羟基磷灰石人工听骨链重建材料外表面空洞未形成对称性球状，外观表现为多边形，空隙尺寸为100-200μm；③2组大鼠分别植入骨形态发生蛋白-多孔羟基磷灰石和骨形态发生蛋白-羟基磷灰石人工听骨链重建材料后未见明显的不良反应。但人工听骨链重建材料组出现较多的结缔组织及明显骨性结节，且材料降解速度较快。④提示骨形态发生蛋白-羟基磷灰石人工听骨链重建材料具有良好的生物相容性和特性，利用其修复喉软骨缺损效果理想，具有较高的临床应用价值。
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新鲜羊膜修复急性坐骨神经损伤
背景:改善局部微环境及减少局部瘢痕有利于周围神经再生促进神经功能恢复.目的:评价新鲜羊膜促进周围神经损伤后再生的效果.方法:选用成年SD大鼠60只,制备单侧坐骨神经急性损伤模型,随机分为人羊膜组、生物膜组、空白对照组,每组20只,均在显微镜下行神经吻接术,吻接处给予人新鲜羊膜、生物膜包裹,空白对照组修复神经后不做任何处理.术后2,4,8,12周行大体观察、光镜观察、免疫组织化学检测.术后4,8,12周行透射电镜观察、轴突成像分析、复合肌肉动作电位检测、坐骨神经功能指数测定.结果与结论:①大体观察:术后2周羊膜、生物膜局部稍有吸收,4周大部吸收,8周完全吸收.人羊膜组、生物膜组神经和周围组织稍有粘连且粘连较疏松,活动度可.空白对照组神经和周围组织广泛紧密粘连,钝性不易分离,活动度差.②光镜观察:术后2,4,8,12周,人羊膜组、生物膜组神经恢复情况明显优于空白对照组.③电镜观察:术后4周,3组神经纤维再生均不明显,板层结构均不清晰.术后8,12周,与空白对照组比较,人羊膜组、生物膜组神经纤维再生数量更多、髓鞘厚度厚、板层结构更清晰、轴突直径更大.④免疫组织化学检测:人羊膜组、生物膜组中S-100蛋白表达及分布均优于同时期空白对照组.⑤轴突图像分析:人羊膜组、生物膜组神经吻合口远端有髓神经纤维直径、髓鞘厚度及横截面有髓神经纤维数目均优于同时期空白对照组,差异有显著性意义(P<0.05).⑥神经电生理检测:与空白对照组比较,人羊膜组、生物膜组潜伏期短、波幅高及神经传导速度快,差异有显著性意义(P<0.05).⑦坐骨神经功能指数:人羊膜组、生物膜组坐骨神经功能指数均明显高于同时期空白对照组,差异有显著性意义(P<0.05).⑧结果表明,人羊膜作为一种生物材料修复周围神经损伤效果较好,可以减轻受损神经与周围组织的粘连和减少神经吻合处的瘢痕形成,可促进神经纤维再生、轴突直径增大、髓鞘增厚,可以减轻神经切口处炎性反应、免疫反应.
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脐带间充质干细胞促血管新生在治疗下肢缺血中的研究与应用
背景：干细胞在一定诱导条件下可分化成为血管性内皮细胞，促进缺血下肢血管新生和有效循环的建立，改善糖尿病远端缺血肢体供血。
目的：概述脐带间充质干细胞生物学特性、促血管新生的机制，探讨脐带间充质干细胞修复神经病变及慢性创面等基础研究和临床研究现状。
方法：检索2000至2015年PubMed 数据库、维普中文科技数据库及万方数据相关文献。英文检索词为“stem cel s transplantation，umbilical Cord Mesenchymal Stem Cel ，diabetic angiopathies”；中文检索词为“干细胞移植，脐带间充质干细胞，糖尿病血管病变”。
结果与结论：与目前外周血干细胞及骨髓间充质干细胞移植相比，脐带间充质干细胞来源更广泛，采集方便，扩增能力强，无免疫原性，不存在伦理学争议，成为促血管新生和基因治疗缺血性疾病的理想靶细胞和种子细胞。脐带间充质干细胞能够分化为血管内皮细胞和成纤维细胞参与创面愈合，也可促进神经营养因子表达，促进缺血组织神经再生，并通过旁分泌与自分泌细胞因子、抗炎及免疫调节等参与受损组织的组织修复，加快溃疡面愈合，对于改善糖尿病下肢缺血、修复糖尿病周围神经病变和促进慢性溃疡创面愈合等治疗中具有广阔的应用前景。与单纯的干细胞移植比较，脐带间充质干细胞联合细胞因子基因治疗可进一步提高干细胞存活率及促进血管新生。 -
高脂喂养2型糖尿病下肢缺血模型大鼠的构建
背景：目前普遍采用结扎或切除大鼠后肢股动脉或髂动脉的方法来制备后肢缺血模型，但对于如何建立及评估糖尿病高脂高血糖慢性动脉硬化闭塞症的缺血状态，尚无一个稳定有效慢性缺血模型及方法。目的：构建及评价高脂喂养2型糖尿病下肢缺血模型大鼠。方法：将大鼠20只随机分为2组，糖尿病组10只予以高脂喂养6个月，腹腔注射链硫脲菌素50 mg/kg诱发糖尿病模型，对照组10只予以普食喂养6个月，两组大鼠均结扎股动脉建立右下肢缺血模型。结果与结论：建模后第1天，两组大鼠多普勒血流及CT 血管造影均呈显著降低提示缺血造模成功，两组建模后第7，14天行激光多普勒检测发现血流有逐渐恢复趋势，建模后第28天糖尿病组血流恢复较对照组显著迟缓(P <0.05)。CT血管造影检测显示，建模后第28天，糖尿病组右下肢股动脉结扎处近端仅有少量血管代偿性增加，远心端仍无明显血流。病理组织及免疫组织化学染色染色显示，建模后第28天，糖尿病组缺血部位肌肉组织出现结构组织破坏，炎性细胞浸润，毛细血管密度患侧低于健侧；糖尿病组缺血肌肉组织血管内皮生长因子较对照组的蛋白表达明显增加(P <0.05)。结果显示，长期高脂喂养糖尿病大鼠，通过股动脉结扎及CT血管造影技术可成功构建糖尿病下肢缺血模型。
