中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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镍钛记忆合金加压吻合夹在消化道吻合术中的系统评价及序贯分析
背景:镍钛记忆合金加压吻合夹己经被用于消化道吻合术,但其有效性和安全性仍存在争议.目的:评价镍钛记忆合金加压吻合夹(Ni-Ti CAC)在消化道吻合术中的有效性及安全性.方法:计算机检索PubMed,Embase,Cochrane Library中国期刊全文数据库(CNKI),中国生物医学文献数据库(CBM),万方及维普(VIP)数据库.检索时间:从建库至2017年1月15日.检索词:镍钛记忆合金、加压吻合夹、吻合术、胃、空肠、回肠、小肠、结肠、直肠及大肠等.纳入消化道吻合术中应用镍钛记忆合金加压吻合夹对比常用消化道吻合方法的随机对照试验文献,对其吻合时间、术后排气时间以及术后住院时间进行Meta分析,并采用TSA v0.9软件进行序贯分析.结果与结论:共纳入18篇随机对照试验文献,共1860例行消化道吻合术患者.Meta分析结果显示,镍钛记忆合金加压吻合夹的使用能缩短术中吻合时间(MD=-3.83,95%CI:-6.48至-1.19,P=0.004)、术后排气时间(MD=-0.14,95%CI:-0.22至-0.05,P=0.002),但对于术后住院时间改变无明显差异(MD=-0.83,95%CI:-1.82至0.16,P=0.10).GRADE质量评价表明所述指标证据质量为中低级.序贯分析提示Meta分析在术后排气时间方面,镍钛记忆合金加压吻合夹组优于对照组获得证实.在不良反应上,除死亡1例外,常见的是切口感染,其他还可见肺栓塞及腹痛等.结果证实,镍钛记忆合金加压吻合夹可以在消化道吻合术减少吻合时间,加快术后排气,在消化道吻合术中具有较好的安全性.由于目测纳入试验的设计缺陷,今后研究仍需多中心、高质量的随机对照试验支持.
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新型骨植入材料多孔钽-骨结合界面成骨以及相关成骨因子的表达及意义
背景:具有自主知识产权的国产多孔钽材料具有无毒性及良好的生物相容性,前期体内外实验研究得出结论:国产多孔钽无毒性,具有良好的生物相容性,具有促成骨作用.此次实验是多孔钽-骨界面成骨机制的探讨.目的:观察多孔钽兔股骨植入后钽-骨结合界面成骨形态特点及成骨相关因于整合素 β1及纤维粘连蛋白的表达,探讨多孔钽骨内植入钽-骨界面骨整合的生物学机制.方法:实验采用自身对照方法,取日本大耳白兔制备双侧股骨髁骨缺损模型,同一动物左侧股骨内植入多孔钽棒为实验组,右侧股骨内植入异体骨为对照组.术后2,4,8周于骨缺损部位取材,石蜡切片、硬组织切片光镜观察多孔钽与宿主骨交界处成骨形态特点.扫描电镜观察多孔钽-骨界面成骨特征.免疫组织化学检测整合素β1及纤维粘连蛋白的表达.结果与结论:①多孔钽棒植入后与宿主骨结合紧密.石蜡切片苏木精-伊红染色结果显示:界面纤维膜早期疏松、较厚,晚期致密较薄,界面出现片状成骨.②硬组织切片观察:2周时钽-骨界面己出现新生骨及小血管并向孔隙内生长.4、8周时钽-宿主骨界面新生骨增多并与宿主骨连接成片,骨小梁成熟.③扫描电镜下可见成骨细胞在多孔钽表面及孔隙内生长,晚期骨质成熟并见板层骨.④免疫组化结果显示:多孔钽骨植入2周时实验组整合素β1的表达显著低于对照组(P<0.05).而纤维粘连蛋白的表达在两组之间比较差异均无显著性意义(P>0.05).整合素及纤维粘连蛋白的表达在2,4,8周时均呈递减趋势.⑤结论:多孔钽有利于成骨细胞在其表面及孔隙内黏附,整合素 β1及纤维粘连蛋白在成骨初期钽-骨界面表达增高,可能对早期成骨起促进作用,而在骨成熟期表达则降低,有利于骨整合及改建.
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负载重组人骨形态发生蛋白2的纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合材料重建脊柱稳定性
背景:随着骨修复支架在医学领域的广泛应用,具有良好生物学性能的纳米羟基磷灰石和丝素蛋白成为近年来的研究热点.目的:探讨负载重组人骨形态发生蛋白2的纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合材料重建兔脊柱节段初始稳定性的可行性.方法:将36只雄性新西兰兔随机分为3组,均制备脊柱失稳模型.自体骨组在L4、L5椎间植入自体髂骨,nHA/SF组将纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合材料植入椎间隙进行椎间融合,rhBMP-2/nHA/SF组将负载重组人骨形态发生蛋白2的纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合材料植入椎间隙进行椎间融合.术后12周,X射线观察手术节段的融合情况,然后处死实验动物进行大体观察.使用电于拉力机测试融合节段的稳定性.组织学观察手术部位的植骨融合情况.结果与结论:①术后各组标本融合部位质地均较硬.自体骨组融合迹象明显,rhBMP-2/nHA/SF组次之,nHA/SF组未见融合迹象.②自体骨组椎体与髂骨植骨块分界处有大量骨小梁长入,nHA/SF组分界处有少量骨小梁长入,rhBMP-2/nHA/SF组分界处骨小梁较多.经X射线评估分别有10只、3只和9只符合融合标准.③rhBMP-2/nHA/SF组脊柱活动度与自体骨组间比较差异无显著性意义,rhBMP-2/nHA/SF组脊柱活动度优于nHA/SF组,差异有显著性意义(P<0.05).④自体骨组髂骨周边可见骨性连接,nHA/SF组材料周边可见骨性连接,未见成熟骨组织,rhBMP-2/nHA/SF组周边有大量新生毛细血管,并渗入组织内部.⑤结果表明,负载重组人骨形态发生蛋白2的纳米羟基磷灰石/丝素蛋白复合材料具有良好的生物相容性、力学性能和骨诱导能力,能在较短时间内重建兔脊柱稳定性.
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填塞自体骨粒的Concorde脊柱微创椎间融合器经椎间孔椎体间融合治疗脱垂游离型腰椎间盘突出症
背景:脱垂游离型腰椎间盘突出症中突出游离于椎管内的髓核呈条索状、团块状,压迫神经根和硬膜囊,造成机体出现严重的腰腿痛和/或马尾神经损伤症状.目的:比较通道下单纯髓核摘除与通道辅助下微创经椎间孔椎体间融合并自体骨粒填塞治疗脱垂游离型腰椎间盘突出症的临床效果.方法:一项在2012年1月至2014年1月进行的回顾性研究,将收集脱垂游离型椎间盘突出症经保守治疗无效的58例患者,按照治疗方法分为通道下单纯髓核摘除组(n=36,仅进行单纯髓核摘除)和微创经椎间孔椎体间融合并自体骨粒填塞组(n=22,Concorde脊柱微创椎间融合器进行植骨融合,合并自体骨粒填塞).结果与结论:2组患者术后1周、3个月及18个月时目测类比评分和Oswestry功能障碍指数均比术前明显下降(P<0.05).微创经椎间孔椎体间融合组术后18个月腰痛目测类比评分和Oswestry功能障碍指数低于通道下单纯髓核摘除组(P<0.05).2组腿痛目测类比评分接近(P>0.05).通道下单纯髓核摘除组有2例术后复发.结果提示通道下单纯髓核摘除和微创经椎间孔椎体间融合并自体骨粒填塞治疗脱垂游离型腰椎间盘突出症均可取得满意的临床疗效,且微创经椎间孔椎体间融合并自体骨粒填塞在腰痛缓解方面更具有优势.
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低频脉冲电磁场在三维支架下对人脂肪源干细胞增殖和成骨分化的影响
背景:目前己有较多实验研究证实低频脉冲电磁场在二维支架下促进多种干细胞向成骨细胞分化,但鲜有研究磁场在三维支架下对干细胞的增殖及成骨分化的影响.目的:探讨在聚己内酯3D培养支架环境下,外加低频脉冲电磁场对人脂肪源干细胞增殖及成骨分化的影响.方法:将第3代人脂肪源干细胞接种于聚己内酯3D培养支架匕,分2组培养,实验组给予50 Hz、1 mT的低频脉冲电磁场干预,2 h/d,连续干预14 d.对照组不给于低频脉冲电磁场干预.培养7 d后,Live/Dead染色观察细胞存活情况.培养1,3,5,7 d后,MTT法检测细胞增殖.培养7,14 d,碱性磷酸酶染色及qRT-PCR检测细胞成骨分化水平.结果与结论:①Live/Dead染色:人脂肪源干细胞己长入到支架材料的空隙结构内部,在材料中可保持较高的活性.②细胞增殖:随着培养时间的延长,两组细胞A值均逐渐升高,实验组培养1,3 d的细胞A值高于对照组(P<0.05).③碱性磷酸酶染色:实验组培养7,14 d的碱性磷酸酶阳性染色强于对照组.④qRT-PCR检测:培养7 d时,实验组碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原基因表达量高于对照组(P<0.01).培养14 d时,实验组骨桥蛋白、Runt相关转录因于2、碱性磷酸酶及Ⅰ型胶原的表达量均明显高于对照组(P<0.05).⑤结果表明:在聚己内酯3D培养支架环境下,外加低频脉冲电磁场可促进人脂肪源干细胞的增殖及成骨分化.
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非贵金属材料钴铬合金烤瓷联冠及烤瓷桥修复后基牙咬合力与牙周组织的变化
背景:测量牙缺失患者修复后的咬合力指标,可有效判断修复效果和患者修复后口腔功能的恢复情况.目的:观察行钴铬合金烤瓷联冠、烤瓷桥修复后患者基牙咬合力及牙周组织的变化.方法:将100例男性烤瓷牙修复患者随机分5组修复,其中20例采用钴铬合金烤瓷联冠修复前牙,20例采用钴铬合金烤瓷联冠修复前磨牙,20例采用钴铬合金烤瓷联冠修复磨牙,20例采用钴铬合金烤瓷桥修复前牙,20例采用钴铬合金烤瓷桥修复后牙.修复前、修复后即刻、修复后6个月,检测基牙咬合力变化及牙周相关指标变化.结果与结论:①咬合力:5组修复后即刻、修复后6个月的咬合力均高于修复前(P<0.05).修复前、修复后即刻、修复后6个月,烤瓷联冠磨牙组、烤瓷桥后牙组的咬合力高于烤瓷联冠前磨牙组、烤瓷联冠前牙组、烤瓷桥前牙组(P<0.05),烤瓷联冠前磨牙组咬合力高于烤瓷联冠前牙组、烤瓷桥前牙组(P<0.05).②牙周组织:5组组内修复前后的牙周袋探诊深度、菌斑控制指数、临床附着水平、牙龈沟液量比较差异均无显著性意义(P>0.05).5组间各指标比较差异均无显著性意义.③结果表明:行钴铬合金烤瓷联冠、烤瓷桥修复治疗能显著提升患者基牙咬合力,并且对牙周影响很小,生物相容性较好.
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后牙种植冠桥修复的邻接触丧失状况分析:单中心、前瞻性、观察性临床试验方案
背景:邻接触丧失作为一种发病率较高的后牙种植冠桥修复并发症,其产生因素是多种多样的,可能与年龄、牙位、咬合接触、缺牙时间、是否进行游离端修复等相关.目的:分析后牙种植冠桥修复的邻接触丧失状况.方法:试验为单中心、前瞻性、观察性临床试验,在中国四川省,西南医科大学附属口腔医院完成.选取2015年6月到2016年6月在南医科大学附属口腔医院进行治疗的后牙种植冠桥修复患者82例,患者戴用修复体治疗的时间在1-40个月,邻接触丧失被定义为厚度为30μm的邻接触检查片或者牙线能够无阻力通过检测区域.通过单因素及多元相关分析,分析随访1,3,6个月后牙种植冠桥修复的邻接触丧失状况.试验方案经西南医科大学附属口腔医院伦理委员会批准,批准号为2016024.临床试验研究的实施符合《赫尔辛基宣言》和医院对人体研究的相关伦理要求.参与试验的患病个体及其家属为自愿参加,均对试验过程完全知情同意,在充分了解治疗方案的前提下签署"知情同意书".结果与结论:入选的82例患者175个临接触位点中,共发现41个邻接触区发生邻接触丧失,其中匕颌20个,下颌21个,表明邻接触丧失与匕下颌并无明显关联.单因素分析显示,修复体戴用时间、修复前缺牙时间和游离端修复是影响并发症发生的独立影响因素(P<0.05).多元相关分析发现游离端修复以及修复前的缺牙时间太短是导致邻接触丧失发生的独立影响因素.提示在进行后牙种植冠桥修复时,应考虑游离端修复及缺牙时间等相关因素,尽可能减少邻接触丧失的发生.
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义齿清洁剂对热凝树脂材料、隐形义齿材料颜色和粗糙度的影响
背景:研究表明,义齿性口炎的发生和严重程度与义齿清洗方法和戴用时间有密切关系,因此研究清洁剂对义齿材料颜色、粗糙度的影响有重要意义.目的:以浸泡法观察4种不同清洁剂对义齿材料颜色和粗糙度的影响.方法:取热凝树脂材料、隐形义齿材料试件各25件,抛光后各分5组,分别浸泡于次氯酸钠清洁剂、Efferdent清洁剂、Polident partial清洁剂、Polident overnight清洁剂和清水中,浸泡90次,检测浸泡前及浸泡30,60,90次后的试件色差值及粗糙度.结果与结论:①4种清洁剂对隐形义齿材料颜色、粗糙度的影响大于热凝树脂材料.②随着清洁剂浸泡时间的延长,两种材料的色差值逐渐增大.热凝树脂材料及隐形义齿材料在不同溶液中浸泡90次后,次氯酸钠清洁剂组色差值大,然后依次为Efferdent清洁剂组、Polident overnight清洁剂组,Polident partial清洁剂组色差值小,接近于清水组.③随着清洁剂浸泡时间的延长,两种材料的粗糙度值逐渐增大.热凝树脂材料及隐形义齿材料在不同溶液中浸泡90次后,次氯酸钠清洁剂组粗糙度值大,然后依次为Efferdent清洁剂组、Polident overnight清洁剂组,Polident partial清洁剂组粗糙度小,接近于清水组.④结果表明,义齿清洁剂均能引起热凝树脂材料、隐形义齿材料颜色及粗糙度的变化,次氯酸钠、Efferdent、Polident overnight清洁剂的影响较强,Polident partial清洁剂的影响较弱.
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镁合金支架在兔腹主动脉中的降解
背景:国外研究发现镁合金支架是安全有效的,国内对于镁合金支架降解性能的研究不多.目的:探讨可降解AZ31镁合金支架在兔腹主动脉中的降解情况及降解过程对血管的影响.方法:在28只新西兰大白兔腹主动脉植入可降解AZ31镁合金支架,在植入的30,60,90,120 d进行X射线检查及支架植入段血管组织学观察.结果与结论:①X射线检查:植入后30 d,支架完全扩张,结构完整.植入后60 d,支架变形,部分支架断裂,失去支撑作用.植入后90 d,只有少量支架支杆残留,大部分支架己降解.植入后120 d,血管中无支架支杆残留,支架己完全降解.②组织学观察结果:植入后60 d的剩余支架支杆数小于植入后30 d(P<0.05),植入后90 d的剩余支架支杆数小于植入后30,60 d(P<0.05),植入后120 d的剩余支架支杆数小于植入后30,60,90 d(P<0.05).剩余支杆数和天数呈负相关,支架完全降解天数为植入后124.8 d.植入90 d的血管内膜面积大于植入后30,60,120 d(P<0.05),血管管腔面积小于小于植入后30,60,120 d(P<0.05).后3个时间点的血管内膜面积与血管管腔面积比较差异无显著性意义.③结果表明,可降解AZ31镁合金支架在大白兔腹主动脉内完全降解时间为124.8 d,在支架植入90 d时血管内膜增生和管腔狭窄明显,90 d后血管内膜增生和管腔狭窄逐渐减轻.
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三维打印制备不同大孔形态含锶介孔生物玻璃支架的体外细胞实验
背景:三维打印支架的大孔孔径形态对生物组织工程支架理化性能及生物性能有很大的影响.目的:利用三维打印技术制备不同大孔结构的含锶介孔生物玻璃支架,探讨其对MC3T3-E1细胞增殖和成骨分化的影响,寻找佳的大孔形态.方法:利用三维打印技术制备含锶介孔生物玻璃/聚己内酯复合支架,其中纵横交错的各纤维状经纬线之间的夹角设置为45°,60°和90°,根据其角度命名为45°,60°,90°含锶介孔生物玻璃支架,检测MC3T3-E1细胞在复合支架匕的增殖能力和碱性磷酸酶活性.结果与结论:①CCK-8方法检测结果表明,3组支架材料都能够支持细胞增殖,第1天和第4天45°含锶介孔生物玻璃支架匕的细胞数量略高于60°和90°含锶介孔生物玻璃支架,但差异无显著性意义(P>0.05).第7天45°含锶介孔生物玻璃支架匕的细胞数量显著高于60°和90°含锶介孔生物玻璃支架,差异有显著性意义(P<0.05).②在第14天,45°含锶介孔生物玻璃支架的细胞碱性磷酸酶活性显著高于60°和90°含锶介孔生物玻璃支架,差异有显著性意意义(P<0.05).在第21天,3组支架的碱性磷酸酶活性差异无显著性意义(P>0.05).③结果表明,45°含锶介孔生物玻璃支架相较于60°和90°含锶介孔生物玻璃支架,更能促进MC3T3-E1细胞的增殖和成骨分化.
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明胶海绵颗粒和壳聚糖α,β-甘油磷酸凝胶微球在肺结核咯血应用中的对比
背景:文献报道显示,明胶海绵颗粒和壳聚糖/α,β-甘油磷酸凝胶微球在肺结核咯血中具有较高的应用前景.目的:观察明胶海绵颗粒和壳聚糖/α,β-甘油磷酸凝胶微球在肺结核咯血中的应用效果.方法:取40只昆明小鼠,采用雾化吸入感染装置构建肺结核咯血模型,随机分为2组,分别采用明胶海绵颗粒、壳聚糖/α,β-甘油磷酸凝胶微球进行栓塞止血治疗,治疗后15,30 d,观察体质量变化、止血时间、止血有效率、心肌相关指标及肺结核组织病理变化.结果与结论:①壳聚糖/α,β-甘油磷酸凝胶微球组治疗后15 d的体质量高于明胶海绵组(P<0.05).②壳聚糖/α,β-甘油磷酸凝胶微球组止血有效率高于明胶海绵组(P<0.05),止血时间短于明胶海绵组(P<0.05).③两组N端BNP前体、肌酸激酶同工酶及肌酸激酶水平比较差异无显著性意义(P>0.05).④壳聚糖/α,β-甘油磷酸凝胶微球组材料周围淋巴细胞浸润,存在坏死病灶,材料匕存在大量活性细胞.明胶海绵颗粒组材料匕存在少许淋巴细胞,存在坏死病灶.⑤结果表明,将壳聚糖/α,β-甘油磷酸凝胶微球应用于肺结核小鼠动物模型中可获得更好的止血效果.
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新型蜂巢样聚己内酯-硅酸钙复合晶体材料修复颅骨极限缺损
背景:聚己内酯作为高分于材料的生物相容性较差,需将其与其他天然生物材料复合增加生物相容性,促进机体组织再生.目的:观察新型蜂巢样聚己内酯-硅酸钙复合晶体材料在SD大鼠颅骨缺损中的成骨修复作用.方法:取18只SD大鼠,制作颅骨极限缺损模型,随机分3组干预,空白组不植入任何材料,对照组植入普通聚己内酯-硅酸钙复合晶体材料,实验组植入新型蜂巢样聚己内酯-硅酸钙复合晶体材料.植入6周后,进行骨缺损处X射线扫描、Micro-CT三维重建及组织学分析.结果与结论:①X射线扫描:3组大鼠颅骨缺损变小,骨折线模糊,边缘骨密度增高,实验组、对照组新生骨面积百分比明显大于空白组,且实验组新生骨面积百分比大于对照组.②Micro-CT三维重建:空白组新生骨主要分布在缺损两侧,对照组、实验组新生骨分布于整个颅骨骨缺损处.与空白组比较,实验组、对照组均表现出更强的再生骨能力(P<0.05),且以实验组成骨能力强(P<0.05).③组织学分析:3组均可见骨缺损处有不同程度新生骨长入,实验组新生骨组织及新生血管密度明显高于对照组、空白组(P<0.05).④结果表明:新型蜂巢样聚己内酯-硅酸钙复合晶体材料在颅骨缺损生物环境中具有明显的促成骨作用.
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镁合金材料与人内皮细胞的生物相容性
背景:镁合金是一种易降解且具有良好力学性能的材料.目的:研究AM50和WE43铸造镁合金对人脐静脉血管内皮细胞增殖及生长形态的影响.方法:取对数生长期的人脐静脉血管内皮细胞,直接接种于AM50铸造镁合金或WE43铸造镁合金表面,培养24 h后,免疫荧光染色观察细胞形态.取对数生长期的人脐静脉血管内皮细胞,分别以100%、50%、10%浓度的AM50铸造镁合金或WE43铸造镁合金浸提液培养,以常规培养的细胞为阴性对照组,培养12,24,48 h后,检测细胞相对增殖率.培养24 h后,免疫荧光染色观察细胞形态,同时检测细胞匕清液pH值与元素水平.结果与结论:①细胞相对增殖率:与对照组相比,不同浓度的AM50和WE43镁合金浸提液对人脐静脉内皮细胞增殖无影响.②免疫荧光染色观察结果:接种于AM50和WE43镁合金表面的人脐静脉血管内皮细胞面积较阴性对照组缩小,伸展不足,胞浆内细胞骨架结构模糊.分别以10%、50%、100%AM50铸造镁合金浸提液或WE43铸造镁合金浸提液处理人脐静脉血管内皮细胞24 h,细胞形态与阴性对照组细胞较一致,胞浆内细胞骨架结构清楚.③细胞上清液pH值与元素含量:与阴性对照组相比,100%浓度AM50和WE43镁合金浸提液组细胞上清pH明显上升(P<0.001),镁元素质量浓度明显升高.④结果表明:AM50和WE43铸造镁合金对人脐静脉血管内皮细胞增殖及生长无明显影响,具有良好的细胞相容性.
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明胶海绵在腭裂修复中的应用
背景:在腭裂修复手术中,以往多采用碘仿纱条来填塞腭裂术后两侧松驰切口及覆盖创面.临床中作者发现,采用这种方法处理的患者,术后常出现发热、食欲不振、异物感、继发性出血等并发症.为避免或减少腭裂患者术后出现以匕并发症,使用明胶海绵填塞双侧松弛切口,取得了良好的临床效果.目的:对比腭裂患者修复术中创面不同处理方法对伤口愈合效果的影响.方法:根据患儿入院时间,将110例腭裂手术患儿分为2组:2013年1月至2015年12月入院腭裂患儿54例为实验组,2008年1月至2012年12月入院腭裂患儿56例为对照组.实验组采用明胶海绵填塞创面,对照组应用碘仿纱包及碘仿纱条填塞创面,评估患儿术后精神、饮食、体温、创口出血及愈合等情况.术后4周复查,测量患者松弛切口处瘢痕条索宽度.结果与结论:①实验组精神、饮食恢复时间和出院时间短于对照组(P<0.05).②实验组发热率明显低于对照组(P<0.05),且发热时间短于对照组(P<0.05).③实验组术后出血、恶心呕吐发生率明显低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05).④术后4周,实验组患儿松弛切口处瘢痕条索宽度明显窄于对照组,差异有显著性意义(P<0.05).⑤结果表明,明胶海绵止血可靠,术后反应轻,伤口愈合快,不影响进食,具有较好的临床应用价值.
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新型多孔钽金属支架材料的生物学评价
背景:利用涂层制备技术在传统材料基体匕沉积金属钽涂层,既利用了金属钽优异生物学性能又可降低成本,为金属钽器件的应用提供了一条切实可行的方向.目的:制备金属钽涂层支架材料,观察其体内外生物相容性.方法:采用常压化学气相沉积技术在多孔碳化硅基体匕制备多孔金属钽涂层支架材料,进行以下实验:①体外实验:将骨髓间充质干细胞与多孔金属钽涂层支架材料共培养2周,MTT法检测细胞增殖.培养第5,10,15天,扫描电镜观察细胞在材料表面附着情况.②体内实验:在犬股骨头骨缺损处植入多孔钽材料,分别于植入后6,12周处死实验动物,将标本硬组织切片染色后,显微镜下观察多孔钽材料与周围组织的生长情况.结果与结论:①体外实验结果:随着培养时间的延长,骨髓间充质干细胞呈现出极其旺盛的增殖,相互排列紧密,细胞之间连接并爬行生长进入多孔钽孔隙中,细胞完全覆盖在多孔钽表面,细胞与细胞之间形成团状重叠现象.②体内实验结果:植入6周,材料与骨组织周围界限清晰,多孔钽孔隙中有少量骨组织爬行,有少许骨小梁长入,未附着部分可见孔隙周围空虚及缝隙,材料周围未见组织破坏及排斥反应.植入12周,可明显观察到材料与骨组织生长良好,多孔钽表面和孔隙内大量骨组织长入,材料孔隙与组织紧密连接,有大量骨小梁长入,多孔钽与骨组织融于一体.③结果表明:采用常压化学气相沉积技术制备的金属钽涂层支架材料具有良好的生物相容性.
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趋磁细菌磁小体靶向输送pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物治疗骨肉瘤
背景:在外加变化磁场作用下,磁小体可侵入肿瘤细胞,抑制其增殖.目的:研究趋磁细菌磁小体靶向输送pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物治疗骨肉瘤的效果.方法:将人源骨肉瘤细胞株U2OS分4组培养,A组加入趋磁细菌磁小体载pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物系统.B组加入趋磁细菌磁小体载pHSP-shNC/阿霉素复合物系统.C组加入趋磁细菌磁小体载pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物系统,同时给予磁场干预.D组加入趋磁细菌磁小体载pHSP-shNC/阿霉素复合物系统,同时给予磁场干预.pHSP-shNC为pHSP70-shPLK1的空白对照.培养12,24,48,72 h,观察骨肉瘤细胞对复合物的摄取率,流式细胞术观察细胞周期,RT-PCR法和Western blot法检测细胞中PLK1 mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞增殖,黏附实验和Transwel小室检测细胞黏附性和侵袭能力,凋亡试剂盒检测细胞凋亡率.结果与结论:①培养12,24 h,D组摄取率高.培养48,72 h,B组摄取率高.②A组、C组和D组G2/M期比率逐渐降低,G0/G1期比率逐渐增加,C组G2/M期比率各时间点低,其次为D组,A组高.B组G2/M期比率逐渐增加.③培养12,24 h,B组、D组PLK1表达高于A组、C组(P<0.05).培养48,72 h,B组PLK1表达高于其余3组(P<0.05),D组高于A组、C组(P<0.05).④B组不同时间点的细胞增殖、黏附率及侵袭能力高,细胞凋亡率低.C组不同时间点的细胞增殖、黏附率及侵袭能力低,细胞凋亡率高.⑤结果表明,趋磁细菌磁小体靶向输送pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物能够增强骨肉瘤细胞凋亡的发生,抑制其增殖和侵袭.
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新型组织工程化改性胶原-壳聚糖复合支架制备与神经细胞的相容性
背景:周围神经缺损的治疗在再生医学领域仍然具有挑战性,支架材料的应用被认为是有前途的探索方向之一,理想的支架材料应是安全、耐用和缺乏抗原性的.目的:探讨制备一种新型的组织工程化改性胶原-壳聚糖支架,并探索其在大鼠横断坐骨神经模型中用作桥梁修复神经损伤的可能.方法:先制备出胶原-壳聚糖复合支架,然后用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺,N-羟基琥珀酰亚胺对支架进行化学改性即交联.接着将神经干细胞种植于支架匕,之后连同支架-种于细胞在体内植入坐骨神经缺损部位.结果与结论:制得的变性交联胶原-壳聚糖复合支架具有三维立体网状结构.将支架-种于细胞移植4周后,可在损伤的坐骨神经中发现S-100神经丝蛋白200表达.结果表明这种组织工程化改性交联胶原-壳聚糖复合支架具有良好的细胞相容性.
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聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶复合骨髓间充质干细胞修复膝关节软骨缺损
背景:混合技术可增强材料的热敏性、机械性能、黏弹性和结构性能,还可改善混合材料的生物降解性、生物相容性和其他生物医学性质.目的:制备聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶材料,观察其修复软骨缺损的效果.方法:在加入与不加入表面活性剂聚山梨酯80的情况下,通过冷冻-解冻循环及乳化发泡-冷冻冰晶相分离法制备不同组分的聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶材料(聚乙烯醇与壳聚糖的质量比分别为5:5、6:4、7:3、8:2及9:1),以含水率、溶胀度、热行为、力学性能及细胞相容性实验筛选聚乙烯醇与壳聚糖佳质量比,进行动物体内实验.取18只新西兰大白兔,制作双侧膝关节软骨缺损模型,随机分3组干预,实验组缺损处植入负载骨髓间充质干细胞的聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶材料,对照组植入聚乙烯醇/壳聚糖水凝胶,空白对照组未植入任何材料,植入12周后,组织学观察修复效果.结果与结论:①成功制备了聚乙烯醇/壳聚糖多孔复合水凝胶,以加入聚山梨酯80、聚乙烯醇与壳聚糖质量比为6:4的水凝胶含水量≥90%,力学性能良好,理化性能稳定,孔隙率≥90%,内部疏松多孔的网状结构更利于细胞生长增殖,具有良好细胞相容性,选择其进行动物体内植入实验.②空白对照组软骨缺陷完全没有再生,表面只有一层薄薄的纤维覆盖.对照组软骨缺陷由类软骨组织填充,表面欠光滑,填充不完整,但可见大量类软骨细胞长入.实验组修复效果好,表面平整,由大量细胞填充.③结果表明,复合骨髓间充质干细胞的聚乙烯醇/壳聚糖多孔水凝胶材料可促进软骨缺损的修复.
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羧甲基壳聚糖温敏凝胶诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化
背景:壳聚糖生物材料能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化,壳聚糖衍生物羧甲基壳聚糖是否也能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化尚不清楚.目的:探讨羧甲基壳聚糖温敏凝胶对骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的影响及其可能的机制.方法:取传至3代的大鼠骨髓间充质干细胞用不同质量浓度(0,50,100,150,200,500 g/L)羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液培养,对照组不添加羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液.MTT法检测不同质量浓度羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对骨髓间充质干细胞增殖的影响,Western blot检测150 g/L羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液对骨髓间充质干细胞NSE、Nestin、GAFP、Vimentin、NF-M、MAP-2、β3-tubulin以及Notch通路信号分于Notch1,Jag1表达水平的影响.结果与结论:①羧甲基壳聚糖温敏凝胶浸提液促进骨髓间充质干细胞增殖,在质量浓度为150 g/L时,增殖率达到高水平.②150 g/L羧甲基壳聚糖温敏凝胶组NSE、Nestin、GAFP、Vimentin、NF-M、MAP-2、β3-tubulin的蛋白表达水平明显高于对照组,表明羧甲基壳聚糖温敏凝胶能够诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化.③羧甲基壳聚糖温敏凝胶组Notch1和Jag1的蛋白表达水平明显低于对照组,表明其在诱导分化过程中能抑制Notch信号通路的活性.
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多功能铁铋复合纳米粒对胶质母细胞瘤的放疗增敏作用
背景:透明质酸功能化的铁铋复合纳米颗粒是一种有效MRI对比剂,同时又可作为放疗增敏剂.目的:制备透明质酸功能化的铁铋复合纳米颗粒,观察其对胶质母细胞瘤U87MG的放疗增敏作用.方法:通过水热聚醇法制备透明质酸功能化的铁铋复合纳米颗粒HA-BiIOPs.①细胞毒性实验:取对数生长期的人胶质母细胞瘤细胞株U87MG与大鼠血管平滑肌细胞,均以含0,12.5,25,50,100,200,400 mg/L HA-BiIOPs的培养液培养48 h,计算细胞增殖率.②组织相容性实验:在ICR小鼠尾静脉注射HA-BiIOPs溶液,观察小鼠脏器病理变化.③细胞吞噬实验:将HA-BiIOPs与U87MG细胞共培养6 h,普鲁士蓝观察纳米颗粒是否被细胞吞噬.④放疗增敏实验:取对数生长期的U87MG细胞,分组培养:对照组以培养液培养.放疗组分别给予0,3,6,9 Gy的X射线照射.HA-BiIOPs组分别加入含0,12.5,25,50,100,200,400 mg/L HA-BiIOPs的培养液.联合组,先加入含0,12.5,25,50,100,200,400 mg/L HA-BiIOPs的培养液,再给予0,3,6,9 Gy的X射线照射.24 h后,检测细胞增殖率及克隆形成率.结果与结论:①不同质量浓度的HA-BiIOPs对血管平滑肌细胞和U87MG细胞增殖无明显影响.②尾静脉注射HA-BiIOPs溶液后,小鼠脏器未发生病理变化.③共培养6 h后,HA-BiIOPs纳米颗粒可被U87MG细胞吞噬.④U87MG细胞增殖率与HA-BiIOPs质量浓度(0-200 mg/L)和放射剂量(0-9 Gy)有明显的线性负相关,尤其是在6 Gy X射线照射下200 mg/L HA-BiIOPs对细胞增殖率下降至(41±7)%.选用100 mg/L HA-BiIOPs、6 Gy X射线照射进行克隆形成实验,联合组U87MG细胞增殖率明显低于空白对照组、放疗组(P<0.05).⑤结果表明,透明质酸功能化的铁铋复合纳米颗粒对胶质母细胞瘤具有显著的放疗增敏作用.
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新鲜羊膜修复急性坐骨神经损伤
背景:改善局部微环境及减少局部瘢痕有利于周围神经再生促进神经功能恢复.目的:评价新鲜羊膜促进周围神经损伤后再生的效果.方法:选用成年SD大鼠60只,制备单侧坐骨神经急性损伤模型,随机分为人羊膜组、生物膜组、空白对照组,每组20只,均在显微镜下行神经吻接术,吻接处给予人新鲜羊膜、生物膜包裹,空白对照组修复神经后不做任何处理.术后2,4,8,12周行大体观察、光镜观察、免疫组织化学检测.术后4,8,12周行透射电镜观察、轴突成像分析、复合肌肉动作电位检测、坐骨神经功能指数测定.结果与结论:①大体观察:术后2周羊膜、生物膜局部稍有吸收,4周大部吸收,8周完全吸收.人羊膜组、生物膜组神经和周围组织稍有粘连且粘连较疏松,活动度可.空白对照组神经和周围组织广泛紧密粘连,钝性不易分离,活动度差.②光镜观察:术后2,4,8,12周,人羊膜组、生物膜组神经恢复情况明显优于空白对照组.③电镜观察:术后4周,3组神经纤维再生均不明显,板层结构均不清晰.术后8,12周,与空白对照组比较,人羊膜组、生物膜组神经纤维再生数量更多、髓鞘厚度厚、板层结构更清晰、轴突直径更大.④免疫组织化学检测:人羊膜组、生物膜组中S-100蛋白表达及分布均优于同时期空白对照组.⑤轴突图像分析:人羊膜组、生物膜组神经吻合口远端有髓神经纤维直径、髓鞘厚度及横截面有髓神经纤维数目均优于同时期空白对照组,差异有显著性意义(P<0.05).⑥神经电生理检测:与空白对照组比较,人羊膜组、生物膜组潜伏期短、波幅高及神经传导速度快,差异有显著性意义(P<0.05).⑦坐骨神经功能指数:人羊膜组、生物膜组坐骨神经功能指数均明显高于同时期空白对照组,差异有显著性意义(P<0.05).⑧结果表明,人羊膜作为一种生物材料修复周围神经损伤效果较好,可以减轻受损神经与周围组织的粘连和减少神经吻合处的瘢痕形成,可促进神经纤维再生、轴突直径增大、髓鞘增厚,可以减轻神经切口处炎性反应、免疫反应.
