中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
不同增稠载体过氧化脲漂白凝胶对口腔黏膜的刺激性
背景:牙齿漂白剂影响的部位主要是口腔黏膜及牙体硬组织,课题组前期已进行细胞毒性试验和短期全身毒性试验,参照国家标准YY/T0279-1995中规定的口腔黏膜刺激试验作进一步生物安全性评价.目的:评价以Carbopol或PVP为增稠载体配制的10%过氧化脲漂白凝胶对口腔黏膜的刺激性,并与同类商品Opalescence 漂白剂进行比较.设计、时间及地点:材料学体外对照观察,于2005-10在解放军第四军医大学口腔医学院材料教研室完成.材料:60-70 d龄的雄性金色仓鼠30只,颊囊无痫变,由兰州生物制品研究所提供.以Carbopol或PVP为增稠载体的10%过氧化脲漂白凝胶由解放军第四军医大学口腔医学院材料教研室配制,进口漂白剂Opalescence为美国Ultradent公司产品.方法:将直径5 mm的棉片分别浸透3种受试材料:以Carbopol为增稠载体配制的10%过氧化脲漂白凝胶、以PVP为增稠载体配制的10%过氧化脲漂白凝胶、以进口漂白剂Opalescence配制的10%过氧化脲漂白凝胶,每种受试材料取10只大鼠.同时选片j新调和的熟石膏作为对照材料.用无创缝线将3种受试材料浸透的棉片随机固定于一侧颊黏膜极低处,将对照材料熟石膏固定于另一侧颊黏膜极低处,24 h后处死.主要观察指标:大体观察结果,组织学评价.结果:各组试样均固定良好.与对照组相比,试验组黏膜粗糙,局部轻微充血、肿胀,未见糜烂渗出及溃疡反应,反应程度为轻度.对照材料不具有口腔黏膜刺激性,而3种受试材料均具有口腔黏膜刺激性,组问比较无明显差异.与受试材料接触的颊黏膜上皮完整,角化层增厚;局部上皮细胞轻度增生,黏膜下结缔组织巾有少量血管扩张、充血,少量炎性细胞浸润:细胞各层排列整齐,局部出现空泡变性.结论:以Carbopol或PVP为增稠载体的10%过氧化脲漂白凝胶具有口腔黏膜刺激性,但与临床常用的Opalescence 10%漂白凝胶的刺激性无明显差别,并不会导致组织长期永久性改变.
-
纳米自组装肽作为液体栓塞剂在大鼠动脉瘤模型中的应用
背景:使用液体栓塞剂栓塞动脉瘤是治疗动脉瘤的一种有效的方法.理想的栓塞剂应具有无毒,组织相容性好,并能有效诱导相应的细胞向材料内生长而达到永久性栓塞动脉瘤的特性.目的:探讨纳米自组装材料RADA16-Ⅰ在大鼠颈总动脉瘤中作为液体栓塞剂的可行性.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/09在四川大学华西医院科技园完成.材料:RADA16-Ⅰ粉末由上海波泰生物公司合成,醋酸纤维素聚合物购自国药集团化学试剂有限公司.方法:①体外实验:流变仪频率扫描测量短肽10 g/LRADA 16-Ⅰ水溶液与PBS等体积混合前后的流变学特性.②动物手术:16只Wistar大鼠随机分为3组,10 g/L RADA16-Ⅰ组,醋酸纤维素聚合物组,假手术组各5只.麻醉后,小心剥离右侧颈总动脉,并向颈总动脉结扎处2 mm近心端注入RADA16-Ⅰ或醋酸纤维素聚合物溶液.假手术组只结扎动脉,不进行栓塞治疗.主要观察指标:①应用TA Instruments Advantage软件分析10 g/L RADA 16-Ⅰ流变学特性.②术后14 d取右侧颈总动脉,制备切片进行苏木精-伊红染色和Masson染色;同时10 g/L RADA 16-Ⅰ组进行抗平滑肌α-actin抗体免疫组织化学检测.结果:①加入PBS的10 g/L RADA16-Ⅰ水凝胶更接近标准的弹性体行为.②假手术组大鼠颈总动脉血管壁明显增厚;醋酸纤维素聚合物组血管壁变薄,管腔内为呈粉色(苏木精-伊红染色)或蓝色(Masson染色);RADA 16-Ⅰ组血管擘增厚,血管壁新生内膜细胞向管腔内生长,栓塞材料降解,长入动脉瘤管腔的细胞主要为α-actin阳性的血管平滑肌细胞.结论:RADA16-Ⅰ作为一种液体栓塞剂是可行的.
-
表面修饰二氧化硅的脂质体对阿霉素的包埋与释放性质木水
背景:脂质体药物载体近年来被用以增加药物的稳定性,提高药效,降低药物的毒副作用.然而研究发现由于稳定性较差,脂质体药物载体难以实现药物缓释与长效给药.大量研究表明,二氧化硅无毒,具有化学惰性和生物相容性,是很好的修饰材料.目的:为了提高脂质体药物载体的稳定性,延长给药时间,采用二氧化硅对脂质体进行表面修饰并用于抗癌药物盐酸阿霉素的包埋.设计、时间及地点:体外观察实验,于2007 05/2008-06在哈尔滨工业大学生物医学工程中心的纳米医药与生物传感器实验室完成.材料:L-α-二棕榈酰磷酯酰胆碱购自南京康森特化工有限公司,正硅酸乙酯购自美国Aldrich公司,盐酸阿霉素购自北京华奉联博科技有限公川,葡聚糖凝胶G-50购自瑞典Amersham公司,其他化学试剂均为分析纯.方法:通过溶胶-凝胶沉积二氧化硅的方法修饰模板L-α-二棕榈酰磷酯酰胆碱脂质体.主要观察指标:通过激光粒度仪与Zeta电位仪测定二氧化硅修饰后的脂质体粒径分布与表面电荷;通过透射电镜观察二氧化硅修饰后脂质体的形态;通过傅里叶变换红外光谱表征材料的化学结构;通过荧光光谱仪测定溶液中阿霉素浓度;通过阿霉素浓度回归方程计算脂质体药物包封率与脂质体体外释放速率.结果:①成功制备了二氧化硅包裹修饰的脂质体.②傅里叶变换红外光谱结果显示在1 166cm-1,1 080cm-1,859cm-1和526cm-1存在Si-O-Si振动峰.③二氧化硅修饰的脂质体对阿霉素的包封率为72.4%.④药物体外释放结果显示二氧化硅包裹修饰的脂质体使阿霉索达到缓释效果.结论:由于在脂质体的表面形成纳米级厚度的无机Si-O-Si网络作为保护层,使得脂质体的稳定性显著提高,并且对阿霉素有缓释效果.
-
乙烯基聚硅氧烷义齿软衬材料的配方设计
背景:乙烯基聚硅氧烷是一种性能优异的硅橡胶材料,适宜作为口腔医用义齿软衬材料.但现有的工业用乙烯基聚硅氧烷并不完伞符合临床应用要求,因而需要通过配方设计过程获得具备相应特性的乙烯基聚硅氧烷义齿软衬材料.目的:研发一种性能优异的乙烯基聚硅氧烷义齿软衬材料.设计、时间及地点:有机高分子口腔医用材料配方设计研究,于2008-01/12在口腔疾病研究国家重点实验室(四川大学)及中蓝晨光化工研究院国家有机硅工程技术研究中心完成.材料:乙烯基封端的聚二甲基硅氧烷、含氢硅油、铂的乙烯基络合物及乙烯基MQ硅树脂均由中蓝晨光化工研究院提供;N2O气相白炭黑为德国Wacker公司产品.方法:从现有的工业用乙烯基聚硅氧烷配方出发,结合义齿软衬材料的特殊应用要求,调整助剂的搭配及用量,获得性能配方;进而对按照性能酉己方制各的少量样品进行性能测试,并依据测试结果对其进行反复修改,直全获得满意的乙烯基聚硅氧烷材料配方.主要观察指标:按照相关国际及国家标准测试样品的拉伸强度、断裂伸长率、硬度及黏度.结果:确定采用质量分数为0.7%的封端乙烯基作为乙烯基聚硅氧烷义齿软衬材料的基础聚合物;确定含氢硅油用量为6PHR,白炭黑用量为19~20 PHR,乙烯摹MQ硅树脂用量为15 PHR.结论:经过配方调试确定了乙烯基聚硅氧烷义齿软衬材料的终性能配方.按此配方制备的乙烯基聚硅氧烷义齿软衬材料相关性能较为理想.
-
聚β-羟基丁酸酯材料的鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验
背景:鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验具有一定的预测致癌物的能力,其敏感性、特异性、准确性较高.目的:通过对聚β-羟基丁酸酯材料进行鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验,评价该材料的潜在致突变性.设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2009-02/03在国家沈阳新药安伞评价研究中心实验室完成.材料:聚β-羟基丁酸酯(10mm×10mm)由中国科学院金属研究所提供,组氨酸营养缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97,TA98,TA100,TA102由沈阳市安全计价中心遗传毒性室提供.方法:采用标准平板掺入法,计数TA97,TA98,TA100,TA102标准测试菌株在4个不同浓度浸提下,计算于37℃培养48 h后的回复突变菌落数.加S9混合液作为体外代谢活化系统.主要观察指标:各甲皿细菌回复突变菌落数,凡高于阴性对照2倍以上者即为阳性结果.结果:聚β-羟基丁酸酯细菌回复突变试验显示,各剂量组细茼回复突变数小于阴性对照组细菌回复突变数的2倍.各菌株对应各剂量组无论代谢活化与否,皆为阴性试验结果.结论:聚β-羟基丁酸酯经细菌回复突变试验末见潜在致突变性.
-
内吗啡肽-1类似物HDAPC聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的镇痛活性
采用界面聚合法制备聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒,吸附药物内吗啡肽-1类似物HDAPC后孵育包衣聚山梨酯80.采用透射电镜观测纳米粒粒径为(150.00±9.75)nm,高效液相色谱法测定包封率为(87.64±3.02)%.静脉注射后小鼠甩尾镇痛法检测镇痛效果,包衣聚山梨酯80的HDAPC-NP-P80比HDAPC及末包衣聚山梨酯80的HDAPC-NP镇痛效果更有效,人镇痛时间延后在12.5 min,大可能效应百分数达100,剂量减半在同样时间点大可能效应百分数也能达到76.64.结果提示纳米粒是一种有效的将肽类药物传递进入大脑的载体,空白纳米粒吸附药物后,必须包农聚山梨酯80才有镇痛增强的效果.
-
新型材料3M Ketac Molar超硬玻璃离子与银汞合金充填后牙窝洞的对比
背景:近年来,传统的银汞合金充填修复的缺点已日益显现.寻找其替代产品是目前研究的热点,而新型材料3M Ketac Molar 超硬玻璃离子充填修复的报道尚不多见.目的:比较3M Ketac Molar超硬玻璃离子与银汞合金充填后牙窝洞的临床效果.设计、时间及地点:回顾性分析,对照观察,于2002-02/2006-04在南昌市第九医院口腔科完成.对象:选择南昌市第九医院口腔科门诊就诊的后牙龋病患者187例307颗牙,平均年龄45岁.方法:用3M Ketac Molar后牙超硬玻璃离子填162颗后牙窝洞,银汞合金充填145颗后牙窝洞,连续观察1,2年,评价其临床效果,以充填材料完好,边缘密合,无继发龋、无磨损者为治疗成功.主要观察指标:两种材料修复后牙窝洞1,2年临床疗效.结果:3M Ketac Molar后牙超硬玻璃离子和银汞合金充填1年复查,成功率分别为96.30%,91.03%;2年复查,成功率分别为91.36%,90.34%.两组疗效差异无显著性意义(P>0.05).结论:3M Ketac Molar后牙超硬玻璃离子既能修复缺损牙面,而且改善美观,防龋,是替代银汞合金的较好材料.
-
4种镍钛正畸弓丝镍离子析出的体外实验
背景:由于镍钛正畸弓丝镍含量较高,且镍又具有较高的毒性、致敏性和致畸性,因此其在口腔内的生物安全性逐渐引起重视,但日前研究结果并不完全一致.目的:比较不同品牌镍钛正畸弓丝的镍离子析出量,以评价其生物安全性.设计、时间及地点:材料学体外实验,于2008-09/10在在新疆医科大学基础医学院科研中心实验室及新疆维吾尔自治区矿产实验研究所完成.材料:0.09×0.025热激活型镍钛合金矫形丝,上颌卵圆形,生产厂家分别为北京圣玛特科技有限公司(缩略为SMT)、深圳市速航科技有限公司(缩略为SL)、3M Company U.S.A(缩略为3M)、托博正畸器械(无锡)有限公司(缩略为TP).方法:选择临床常用的4种品牌镍钛正畸弓丝SMT、SL、3M、TP,剪取弓丝两侧术端较直的部分(约2 cm)放入EP树脂管中,加入配置好pH值为4.0,6.75的人工唾液1 mL,37℃恒温培养.分别于浸泡1,7,28 d时取出样本,测试各试管中的镍离子含量.主要观察指标:分别于浸泡1,7,28 d时取出样本,测试各试管中的镍离子含量.结果:在pH 4.0和pH 6.75的人工唾液中,4种品牌镍钛弓丝的镍离子析出量均随浸泡时间延长而逐渐增加(P<0.05),且pH4.0情况下镍离子析出量明显高于pH6.75(P<0.05).实验中4种镍钛弓丝每天大的镍离子析出量分别为3.578 μ g(TP组),0.106 μg(SMT组),0.148 μg(SL组)和0.036 μg(3M组),远低于镍离子引起过敏的浓度600~2500 μg和健康成人镍离子的口常摄入量300~500μg,说明此4种镍钛弓丝均在镍离子安仝摄入范围之内,TP镍钛弓丝的镍离子析出量明显高T-SMT、SL、3M镍钛弓丝(P<0.05),3M镍钛弓丝的镍离子析出量少.结论:在不同品牌、不同浸泡时间、不同pH值条件下,镍钛正畸弓丝镍离子析出量不同,酸性介质明显加速了镍离子的析出.尽管4种镍钛正畸弓丝均具有良好的生物安全性,但仍建议镍过敏史患者应慎用镍钛正畸弓丝.
-
类细胞膜仿生药物缓释涂层冠状动脉支架材料
背景:金属冠状动脉支架植入后发生再狭窄的概率高达20%~30%,为了降低再狭窄发生率,在863项目支持下,探索新型药物涂层支架治疗冠状动脉狭窄的可能性.目的:将约物涂层支架植入小猪冠状动脉狭窄模型,观察其安全性和有效性,以及与金属裸支架的差异性.设计、时间及地点:随机对照,动物实验于2003-11/2004-04在阜外心血管病医院完成.材料:由单体2-(甲基丙烯酰氧基)乙基-2-(三甲基氨基)乙基磷酸酯、甲基丙烯酸十八酯、甲基丙烯酸羟丙酯和甲基丙烯酸(三甲氧)硅基丙酯合成了一种新型类细胞膜涂层材料.方法:21只猪随机分为3组:裸支架组,涂层携载雷帕霉素(120 μ g,支架)组,单纯涂层支架组.将支架预装到输送系统,使用Toshiba CSⅡ型C臂成像仪造影条件下,将药物支架置入小型猪冠状动脉血管,每只猪置入2枚支架.主要观察指标:使用图像分析仪检测管腔直径,管腔面积,支架上平均内膜厚度,支架间平均内膜厚度,内膜面积,面积再狭窄百分比,损伤指数.结果:置入后28 d时,涂层携载雷帕霉素组和裸支架组相比,支架上内膜厚度、支架间内膜厚度、新生内膜面积差异均有显著性意义(P<0.05),其中新生内膜面积涂层携载雷帕霉素组比裸支架组减少了44.87%:虽面积狭窄百分比差异无显著性意义,但P值(0.053)接近0.05;且涂层携载雷帕霉素组无再狭窄发生.结论;涂层携载雷帕霉素支架可显著抑制支架置入后血管内膜增生和再狭窄发生.
-
力学刺激对人骨髓间充质干细胞/聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物生物学性状的影响
背景:研究表明离心力等力学刺激对细胞的功能活动及人体组织器官的正常发育具有重要影响,而且力学刺激也影响骨髓间充质干细胞的分化.目的:观察施加不同稃度离心力对人骨髓问充质干细胞,聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物生物学件状的影响.设计、时间及地点:细胞-组织工程学体外实验,于2008-05/12在解放军南京军区福州总医院实验科及病理科完成.材料:骨髓来源于因骨不连行自体髂骨移植的患者,由解放军南京军区福州总医院骨二科提供.聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物为济南岱罡生物公司产品.方法:自人体髂骨抽取骨髓15 mL,密度梯度离心法体外分离培养骨髓间充质干细胞,传至第3代制成2×1010L-1细胞悬液,均匀接种到聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物上,5 d后加入软骨细胞诱导液.设立4组:3个受力组于离心管内培养,分别施加100g,200g,300g离心力,2次/d,30 min/次.间隔 12 h,受力4周;静止组于6孔板内常规培养.主要观察指标:骨髓间充质干细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物的黏附情况,复合物Ⅱ型胶原的表达及蛋白聚糖含量.结果:人骨髓间充质干细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物黏附性良好,能在聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物上生长并分泌基质.离心培养4周后,各受力组形成的复合物体积无收缩,且200 g受力组体积大,弹性较好;静止组复合物体积收缩,弹性也较各受力组差.200 g受力组苏木精-伊红染色后出现大量的软骨陷窝样结构,偶见同源细胞群,Ⅱ型胶原免疫组化染色后可见较多呈黄色的软骨细胞特异性基质Ⅱ型胶原;余3组形成的陷窝样结构及Ⅱ型胶原均较少.与静止组比较,体外培养4周各受力组复合物分泌的蛋白聚糖含量均明显升高(P<0.05):与200 g受力组比较,100 g,300 g受力组复合物分泌的蛋白聚糖含量均明显降低(P<0.05):100 g,300 g受力组间比较无明显差异.结论:入骨髓间充质干细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物具有良好的黏附性能.在软骨细胞诱导液存在的前提下,加适当的力学刺激更有利于骨髓间充质干细胞向软骨细胞转化,200 g离心力是较佳的力学刺激条件.
-
转染碱性成纤维生长因子基因的骨髓间充质干细胞在珊瑚骨表面生长状况
背景:颌面骨缺损是临床上常遇到的问题,寻找理想的种子细胞同支架材料复合构建组织工程化人工骨成为该类疾病治疗的发展趋势.目的:将转染碱性成纤维生长因子基因的骨髓间充质干细胞与珊瑚骨的复合培养,观察转染碱性成纤维生长因子基凶的骨髓间充质干细胞在珊瑚支架材料上生长状况.设计、时间及单位:骨组织工程实验,于2006-0312008-06 在中山大学口腔医学研究所完成.材料:选用海南省浅海滩产石头状滨珊瑚为原料,将其制成8mm×8mm×2mm的珊瑚人工骨小块.方法:采用密度梯度离心法分离新西兰大白兔骨髓间充质干细胞,采用贴壁筛选法对分离出的骨髓间充质下细胞进行纯化,利用脂质体转染bFGF-pcDNA3到骨髓间充质干细胞.取生长良好的转染碱性成纤维生长因子基因骨髓间充质干细胞和未转染的骨髓间充质干细胞,分别接种于不同珊瑚表面.主要观察指标:MTT法观察细胞-支架联合培养骨髓间充质干细胞的增殖情况和利用扫描电镜观察珊瑚支架上细胞的生长状况.结果:MTT法检测显示细胞-支架联合培养转染组细胞与联合培养未转染组细胞增殖相比差异有显著性意义(P<0.05),联合培养转染组细胞生长增殖强于未转染组细胞.而联合培养的转染组细胞同单纯培养转染组细胞增殖相比差异无显著性意义(P>0.05).扫描电镜观察显示复合骨髓间充质干细胞细胞贴附在珊瑚上,并在材料上完全铺展,形态多样,细胞向孔内长入或跨越微孔表面,部分区域有细胞外基质形成.结论:转染碱性成纤维生长因子基因的骨髓间充质干细胞在珊瑚支架材料上生长状况较未转染组好,珊瑚人工骨不影响骨髓间充质干细胞的增殖,可以作为骨髓间充质干细胞支架材料构建组织工程骨.
-
制备工艺对同种异体骨生物力学特性的影响
背景:同种异体骨材料经过灭菌和降低免疫原性等物理方式和化学方法处理后,要求其保留一定的生物活性和生物力学特性.目的:观察5种不同制备工艺对同种异体骨生物力学特性的影响.设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-10在上海理工大学生物力学与康复工程研究所完成.材料:新鲜尸体的股骨,由上海亚朋生物技术有限公司合作医院提供.方法:将新鲜尸体的股骨经过预处理后,制成形状大小相同的骨块移植材料,采用Y射线辐照、高压冲洗后短超声、切割后长时间超声、化学处理后短超声和常规工艺5种不同制各工艺进行处理,经深低温冷冻保存1个月后取出,在Instron实验机上进行轴向压缩实验,加载过程为匀速准静态,速度为0.1 mm/min.主要观察指标:同种异体骨轴向压缩下载荷一位移曲线和应力-应变曲线.结果:不同制备工艺下同种异体骨所承受的大压缩载荷范围在1.1~2.1 kN,其中,Y射线辐照骨承受的载荷大,常规工艺处理骨承受的载荷小,高压冲洗后短超声骨的承载能力与v射线辐照骨的承载能力较接近.在骨的弹性限度范围内,化学处理后短超声骨的弹性变形区小,刚度大,切割后长时间超声骨的刚度小,其余处理方法位于这两者之间.此外形状和结构相似的同种异体骨,应力一应变曲线的变化趋势相同,所承受的大屈服应力值为4.5~9.5 MPa.结论:不同制备工艺对骨的屈服应力、弹性应变量及弹性模量等生物力学参数均有不同程度的影响.
-
胸腺五肽-聚乳酸-羟基乙酸微球的制备及释药性能
背景:国内外所用的胸腺肽多为注射液,其保存、运输困难,成本升高,给患者带来不便,限制了它的广泛使用.因此胸腺肽口服缓释制剂的研究正逐步受到人们的关注.目的:观察胸腺五肽-聚乳酸-羟基乙酸缓释微球的释药性能.设计、时间及地点:体外观察实验,于2005-02/2007-10在武警医学院化学教研室科研室完成.材料:胸腺五肽标准品(含量99.17%)由成都川抗派德生物医药科技有限公司提供,胸腺五肽(含量97.16%)由杭州中肽生化有限公司提供,聚乳酸-羟基乙酸共聚物(50:50,Mr10 000)由山东省医疗器械研究院提供,聚乙烯醇(聚合度1 750±50)由天津市天大化工实验厂提供,三氟乙酸由上海吉尔生化公司提供,二氯甲烷(分析纯).方法:称胸腺五肽溶丁二聚乙烯醇溶液为内水相;溶解于二氯甲烷中,超声形成W/O初乳;将初乳加入聚乙烯醇溶液快速搅拌到W/ONV复乳,再缓慢搅拌,待二氯甲烷完全挥发后得固化胸腺五肽-聚乳酸-羟基乙酸缓释微球.主要观察指标:①扫描电镜观察微球的形态.②反相高压液相色谱法测定胸腺五肽含量,计算微球载药量、包封率.③体外释药情况.结果:制备的微球表面光滑,球体均匀:微球中胸腺五肽的载药量和包封率分别为1.87%和67%左右;微球在10d内累积释药率达70%.结论:胸腺五肽-聚乳酸-羟基乙酸缓释微球对胸腺五肽具有明显的缓释作用.
-
外消旋聚乳酸/神经生长因子复合导管对失神经肌萎缩的早期作用
背景:前期实验已验证外消旋聚乳酸/神经生长因子复合导管对大鼠周围神经缺损再生确有促进作用,导管可在体内逐步降解.目的:探讨外消旋聚乳酸,神经生长因子复合导管中神经生长因子的释放在促进神经再生的同时能否有效防治肌萎缩,促进靶肌肉的功能恢复.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-04/2008-03在南方医科大学解剖学教研室实验室完成.材料:利用溶剂挥发法,制成内径1.5 mm,壁厚0.3 mm,长14 mm的微孔单纯外消旋聚乳酸及外消旋聚乳酸,神经生长因子导管,每根复合导管含神经生长因子400 U.方法:SD大鼠32只,随机分为单纯导管桥接组、复合导管桥接组,每组16只.制作右侧坐骨神经缺损模型,分别以单纯外消旋聚乳酸导管及外消旋聚乳酸,神经生长因子复合导管桥接修复,保留神经缺损10 mm.主要观察指标:术后第5,10,15,20天大体观察右后肢肌肉萎缩程度及关节运动情况,测量三头肌湿质量恢复率,组织学观察肌细胞变化.并对小腿三头肌肌细胞直径和截面积进行量化分析比较.结果:所有大鼠术侧后肢跛行,小腿变细,随时间延长而加重.术侧小腿三头肌湿质量下降,恢复率随时间延长而降低,各时间段两组间比较差异均无显著性意义(P>0.05).术后第5天术侧三头肌即开始萎缩变细,至第20天时肌细胞明显广泛萎缩,肌束间纤维组织增生.图像分析显示三头肌肌细胞直径和截面积随观察时间延长而进行性下降,4个时间段两组比较差异均无显著性意义(P>0.05).结论:外消旋聚乳酸/神经生长因子复合导管局部释放神经生长因子对于早期(伤后20 d内)失神经肌萎缩没有显著的抑制作用.
-
化学法制备猕猴去细胞同种异体神经支架
目的:应用化学萃取法制备的同种异体神经移植物存小动物及低等哺乳类动物实验中取得良好的效果,但在萃取猕猴粗大、长段周围神经方面尚末形成标准化程序.目的:研究猕猴化学去细胞同种异体神经制备方法,以期获得低免疫反应的同种异体神经移植物.设计、时间及地点:观察实验,于2003 01/09在中山大学动物实验中心完成.材料:取2.5岁,3.5 kg左右,雄性健康猕猴2只,由广州九佛动物研究中心提供.方法:取4段长5 cm,直径3.5~4.0 mm的坐骨神经,以4%triton-100和4%脱氧胆酸钠溶液按一定浓度和程序进行萃取,萃取神经及未萃取神经于中段取材,行苏木精-伊红染色,纤维素染色,砂罗铬花青染色,S-100免疫组织化学染色,在扫描电镜及透射电镜下舰察超微结构.主要观察指标:神经的组织学及形态学观察.结果:萃取2次后的去细胞神经具有良好的黏性和弹性,细胞和髓鞘被彻底清除,神经纤维支架被保留,成为一种没有细胞髓鞘及其碎片的空的基底膜管架结构.而萃取1次不能完全去除抗原成分,萃取3次则破坏神经纤维支架.结论:应用4%triton-100及4%脱氧胆酸钠萃取2次,可去除猕猴长段、粗人周围神经中的细胞和髓鞘而保留神经的基底膜管和纤维支架结构.
-
不同分散介质对壳聚糖载药微球缓释性能的影响
背景:壳聚糖因其具有独特的物理、化学及牛物学特性,目前已经成为制备缓释和控释制剂十分理想的天然高分子材料,且壳聚糖微球作为药物缓释形式也受到越来越多的关注.目的:观察液体石蜡和苯甲酸乙酯作为分散介质对壳聚糖载药微球缓释性能的影响.设计、时间及地点:对比观察,于2008-03/07在四川大学逸大楼实验室完成.材料:壳聚糖(Mw=6.5×105,脱乙酰度80%)为上海卡博试剂有限公司产品:四环素医用级为武汉天运科技有限公司产品.方法:配制2%醋酸溶解的壳聚糖溶液,置于水浴中搅拌乳化一段时间,再加入配好的壳聚糖溶液继续搅拌一段时间后加入交联剂戊二醛搅拌反应交联,制得用液体石蜡和苯甲酸乙酯作为分散介质的载药壳聚糖微球.主要观察指标:利用红外光谱和扫描电镜观察粒径形态、大小及其体外释药的特性.结果:以石蜡为分散介质制得的微球平均粒径为5.574 μm,载药率为38.7%,包封率为78.3%,有效释放时间37 d;以苯甲酸乙酯为分散介质的微球平均粒径为254 μm,载药率为30.7%,包封率为72.8%,有效释放时间15 d.结论:石蜡作为分散介质分散效果更好,粒径大小更符合要求,载药率和包封率高,释放时间长,但苯甲酸乙酯作为分散介质合成后分离更容易些.
-
微囊化儿茶素对环磷酰胺致免疫低下小鼠的免疫调节作用
背景:儿茶素具有强抗氧化活性已成共识,但其对免疫调节作用报道甚少;同时,儿茶素存在不稳定性及脂溶性差等缺陷,微胶囊技术是解决这一问题的一种有效途径.目的:观察微囊化儿茶素与儿茶素对环磷酰胺致免疫低下小鼠特异性细胞免疫、特异性体液免疫、非特异性体液免疫及胸腺与脾脏脏器系数的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-1 1/12在中南大学湘雅二医院医学实验动物中心完成.材料:安化小叶种儿茶素由湖南会农生物资源股份有限公司提供;儿茶素的微囊化由中南大学湘雅二医院小儿肾脏病研究室完成.环磷酰胺由上海华联制药有限公司生产.方法:600只昆明种小鼠随机分生理盐水组,儿茶素500,250,125 mg/kg组,乙基纤维素500,250,125 mg/kg组;微胶囊化儿茶素500,250,125 mg/kg组,环磷酰胺组,环磷酰胺+微胶囊化儿茶素500,250,125 mg/kg组,环磷酰胺+儿茶素500,250,125 mg/kg组:环磷酰胺+乙基纤维素500,250,125 mg/kg组共20组.生理盐水、儿茶素、乙基纤维素、微胶囊化儿茶素均灌胃给药,连续给药14 d;环磷酰胺自第11天起腹腔注射给药80 mg/kg,连续4 d.主要观察指标:利用小鼠迟发型超敏反应测定特异性细胞免疫功能,血清溶血素实验测定特异性体液免疫功能,小鼠碳粒廓清指数测定非特异性体液免疫功能以及脾指数与胸腺指数衡量机体免疫功能.结果:与生理盐水组比较,微胶囊化儿茶素与儿茶素500,250 mg/kg组的耳肿胀度明显增加:微胶囊化儿茶素500,250,125 mg/kg组半数溶血值、碳粒廓清指数和吞噬指数、脾指数、胸腺指数均明显增高(P<0.01,P<0.05);儿茶素500 mg/kg组小鼠的半数溶血值有一定的提高,儿茶素500,250,125 mg/kg组小鼠的碳粒廓清指数和吞噬指数、脾指数、胸腺指数均明显提高(P<0.05,P<0.01).与环磷酰胺模型组小鼠比较,环磷酰胺+儿茶素500,250 mg/kg组及环磷酰胺+微胶囊化儿茶素500,250 mg/kg组小鼠耳片肿胀度、半数溶血值、碳粒廓清指数、吞噬指数、脾指数、胸腺指数均显著增加(P<0.05,P<0.01).各微胶囊化儿茶素组耳片肿胀度、半数溶血值、小鼠脾指数、胸腺指数、碳粒廓清指数和吞噬指数均高于其对应的儿茶素组.结论:儿茶素可显著提高正常小鼠及环磷酰胺致免疫低下型小鼠的特异性细胞免疫、特异性体液免疫、非特异性体液免疫、胸腺与脾脏的脏器系数,微囊化儿茶素效应强丁游离儿茶素.
-
活性胶原基纳米骨修复下颌骨缺损的组织学检测
背景:单纯胶原基纳米骨在骨缺损修复过程中仅起支架和骨传导作用,不具备骨诱导能力.目的:通过动物实验进行组织学光镜及扫描电镜检测,观察复合重组人骨形态发生蛋白2的活性胶原基纳米骨材料促进下颌骨骨缺损的愈合能力.设计、时间及地点:同体对照动物实验,于2008-08/12在南方医科大学动物实验中心、病理实验室以及电镜中心完成.材料:采用浸泡抽吸法将重组人骨形态发生蛋白2与胶原基纳米骨相复合,形成复合重组人骨形态发生蛋白2的活性胶原基纳米骨材料.方法:建立兔下颌骨双侧缺损模型,随机选取一侧缺损应用复合重组人骨形态发生蛋白2的活性胶原基纳米骨修复,作为活件材料组;另一侧缺损应用单纯胶原基纳米骨修复,作为单纯材料组.主要观察指标:术后5,10,20周,获取整块下颌骨标本作组织学光镜苏木精-伊红染色和Masson染色及扫描电镜超微结构检测,观察骨缺损愈合效果和新骨形成情况.结果:两组骨缺损区均愈合良好,未见移植骨周围炎症发生.①单纯材料组:术后5周时与宿主骨结合不紧密,有大量纤维结缔组织:10周时出现疏松的骨样组织,材料残留较多,降解缓慢;20周时骨样组织增多明显,但缺损中心区骨组织仍较少且不成熟,材料部分降解.②活件材料组:成骨过程较早,术后5周时与宿主骨结合良好,有明显骨样组织长入;10周时骨样组织显著增多且更加成熟,材料部分降解;20周时新骨组织与宿主骨完全融合,缺损中心区为致密骨样组织充满,材料降解充分,只有少量残留.结论:胶原基纳米骨具有良好的骨传导作用和生物相容性,可作为理想的修复下颌骨缺损的人工材料.复合重组人骨形态发生蛋白2后具有一定的骨诱导作用,愈合加快,成骨可靠.
-
不同比例脱钙骨基质颗粒和骨水泥复合物修复免股骨骨缺损
背景:新近研究表明骨水泥诱导成骨能力较差、在体内降解过慢,其单独应用的效果并不理想.因此,需要对其进行改型,希望研制出一种能克服上述缺点的新型材料运用于临床.目的:观察脱钙骨基质颗粒、丙烯酸树脂骨水泥复合物填充修复股骨骨缺损的能力,从而确定该复合材料的佳配方.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-05/09在重庆医科大学动物实验中心完成.材料:将脱钙骨基质颗粒和丙烯酸树脂骨水泥按不同质量比例(2∶8,3∶7,4∶6,5∶5,6∶4)构成复合材料.方法:在新西兰大白兔双侧股骨制备骨缺损填充模型,将各比例复合材料植入骨缺损处,以单纯丙烯酸树脂骨水泥材料作为对照.主要观察指标:对复合材料和单纯材料进行扫描电镜观察及生物力学测试.在术后4,8,12周时进行大体标本观察、组织病理学、X射线片观察,比较其修复填允骨缺损的能力.结果:脱钙骨基质颗粒与丙烯酸树脂骨水泥质量比在3∶7~6∶4的范围内,复合材料中存在较多100 μm以上的裂隙,当质量比小于3∶7时,材料内部的大部分间隙<100 μ m,质量比大于6∶4时两种材料不能有效地凝固在一起.随质量比的增加,材料抗压极限强度递减,各组数据经方差分析,差异具有显著性意义(P<0.05).在各时间点大体标本观察、组织病理学、X射线片观察显示骨缺损填充部位均有不同程度新骨形成.12周时脱钙骨基质颗粒与丙烯酸树脂骨水泥质量比在4∶6时骨结合率高.结论:随着脱钙骨基质颗粒质量比的增加,孔隙越丰富而材料力学强度逐渐降低.脱钙骨基质颗粒与丙烯酸树脂骨水泥质量比为4∶6时修复低承重部位松质骨的骨缺损效果较好.
-
骨髓基质细胞在胞外基质涂层钛表面的黏附和铺展
背景:为模拟胞外基质对生物行为的调控功能,通常采用基质中的活性成分对钛表面进行改性,但这些单一的活性成分与天然基质仍有差距.目的:在体外观察成骨细胞自身分泌的胞外基质修饰的钛表面对骨髓基质干细胞生物学行为的影响,为进一步指导钛种植体表面的仿生构建提供实验依据.设计、时间及地点:细胞-材料学体外对照观察,于2008-12/2009-02在安徽医科大学医学生物工程实验室完成.材料:SPF级新生1~3 d龄SD乳鼠2只,SD大鼠2只,由安徽省实验动物中心提供.TA2纯钛棒为宝鸡金埠钛设备有限公司产品.方法:取SD乳鼠,采用改良组织块法培养成骨细胞.取直径12 mm的钛棒,加工成厚1 mm纯钛片,消毒后放入24孔培养板中,用DMEM培养液将成骨细胞浓度调整为3×10.L-1,取1 mL/孔接种于钛片上,经过反复冻融脱玄细胞留下基质,即为基质化钛片.取SD大鼠,采用全血贴壁法培养骨髓摹质干细胞,取传至第3代的细胞,分为基质化钛片组、纯钛片组,用DMEM培养液将其浓度调整为1×108L-1,分别接种于基质化钛片和纯铁片上,1 mL/孔.主要观察指标:通过荧光免疫组化、扫描电镜观察和MTT检测,评价两组钛片上骨髓基质细胞的早期黏附及铺展情况.结果:接种4 h时与纯钛片组比较,基质化钛片组细胞黏附率显著升高(P<0.05).接种4 h后,骨髓基质干细胞在基质化钛片表面已呈现出一定的附着形态:24 h后细胞呈良好的铺展形态,紧贴附于基质化钛片表面,出现伪足突起,细胞间以这种突起建立相互联系;72 h后细胞充分铺展,胞体平铺面积迅速扩大.结论:胞外基质的存在能够促进骨髓基质细胞的早期黏附,并且有利于细胞的进一步铺展.
-
氟橡胶246B制成仿生阀门人工胆管植入犬体内的生物学效应
背景:寻找合适的材料并制作成能与人体正常生理功能相契合的人工胆道目前需要解决两个问题,即材料选取与仿生阀门的定向开放.目的:观察氟橡胶246B制成的具有仿生阀门的人工胆管植入犬体内后的生物学特性,分析其作为胆道替代物的可行性.设计、时间及地点:材料学体内对照观察,于2007-10/2008-10在吉林大学超分子结构与材料教育部重点实验室、吉林大学第一医院外科实验室完成.材料:雄性杂交犬12只,按随机区组原则分为普通直管组、带瓣膜直管组、带活瓣直管组,4只/组.氟橡胶246B购于扬中市橡胶塑料厂.方法:将氟橡胶246B溶于四氧呋喃后重新塑形,制成长3.0 cm、半径0.5 cm的普通直管;带瓣膜直管的管壁内带有3个类似静脉瓣的瓣膜结构,按胆汁定向流动起到抗返流作用:带活瓣直管在管道一端套以管形橡胶薄膜,发挥单向活瓣作用.各组人麻醉后,切开肝十二指肠韧带浆膜层显露游离胆总管,将胆总管末端以丝线结扎横断,分别将3种人工胆管植入犬体内,生存30d后处死.主要观察指标:肝功能指标的变化,管道通畅性及抗返流情况,胆囊的炎症反应.结果:12只犬均进入结果分析.与术前1 d比较,术后7 d各组血清总胆红素、丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶含量均无明显变化(P>0.05);术前1 d及术后7 d时,上述各指标组间比较亦无明显差异(P>0.05).术后30 d普通直管组处于半瘀塞状态,管道壁有较多黄绿色沉淀物;带瓣膜直管组瓣膜上方管壁略成黄绿色沉淀物,管腔内少许白色絮状物,瓣膜上无明显沉淀物;带活瓣直管组靠近活瓣的胆管壁有少许黄绿色沉淀物,胆汁内混有少许白色絮状物.术后30 d普通直管组黏膜上皮不完整,有腺体的轻度增生;带瓣膜直管组黏膜上皮尚完好,未见明显腺体增生;带活瓣直管组黏膜上皮保持完好,腺上皮细胞无异型性.结论:具有瓣膜结构和活瓣结构的人工胆管均具有良好的通畅性,短期观察具有一定的抗返流性能,提示瓣膜结构和活瓣结构均起到了类似Oddis括约肌的仿生阀门功能.
-
人发角蛋白非神经移植材料的解剖学特点及组织相容性
背景:人发角蛋白非神经移植材料是一种生物性制晶,经特殊的牛物化学方法处理后具有抗原性小、可被吸收和可刺激神经纤维生长等优点,预计其效果较其他非神经移植材料佳.目的:观察人发角蛋白非神经移植材料的解剖学特点和组织相容性,及其对周围神经缺损的修复效果.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-11/2008-06在青岛大学医学院附属医院动物中心实验室完成.材料:人发角蛋白非神经移植材料是以经特殊控制性生物化学方法处理后的人发为基质,外包一层生物膜构成的复合体,经特殊的生物化学方法处理后具有抗原性小,可被吸收和可刺激神经纤维生长等优点.方法:Wistar大鼠18只随机分成3组,将其坐骨神经切取10 mm,分别用人发角蛋白非神经移植材料、大白鼠自体骨骼肌和未经特殊处理的人发连接神经两断端.主要观察指标:术后8,12,24周进行组织形念及解削学观察.结果:术后第8周非神经移植材料组坐骨神经两断端之间出现白色新生组织;第12周白色新生组织出现于移植材料腔隙;第24周移植材料腔隙被充满,人发被初步降解,光镜下可见人发周围有大量呈无序排列的再生神经纤维,透射电镜下可见人发周围许旺细胞增殖并形成髓鞘.肌肉组和普通人发组未出现上述变化.结论:人发角蛋白非神经移植材料的组织相容性好,并可诱导神经纤维再生.
-
仿松质骨的胶原/纳米羟基磷灰石人工骨治疗免股骨头坏死的动物实验
背景:自体松质骨因具有促进骨再生的3大要素:良好的骨引导性、骨诱导件和骨细胞,目前仍然足骨缺损修复的佳移植材料.目的:观察自主研发的仿松质骨纳米人工骨修复股骨头坏死的效果.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-05/08在广东省医学实验动物中心完成.材料:新西兰大白兔10只,体质量1.5~2.0 kg,用注入液氮的方法制备股骨头坏死模型.方法:10只大白兔随机分为2组,每组5只.实验组:骨坏死处植入HA/CO纳米人工骨,对照组:坏死处不加任何植入物.主要观察指标:在植入材料即刻及之后的7,14 d摄X射线观察、大体积及组织学观察评判骨坏死的发展及治愈情况.结果:实验组骨坏死破抑制并被修复,所钻骨孔因松质骨和皮质骨的再生而完全愈合,纳米人工骨被逐渐降解吸收;而空白对照组骨坏死逐渐恶化,所钻骨孔处无任何骨组织再生.结论:该纳米人工骨不仅能替代自体骨作为移植物,而且还具有抑制骨坏死发展的功能,可望成为临床治疗Ⅱ期及较早期股骨头坏死的替代疗法.
-
新型可注射性磷酸钙骨水泥在皮质骨内的降解和成骨作用
背景:液态骨移植材料是一种新型的牛物材料,它可充分填充于任何不规则的骨缺损部位,并可通过局部注射的方式来进行临床及实验操作.因此目前成为国内外研究的热点之一.目的:观察可注射性磷酸钙骨水泥在皮质骨缺损周围的生物降解和成骨特性.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-04-12/2008 12-05在华南理工大学材料学院教育部重点实验室和南方医科大学珠江医院中心实验室完成.材料:根据相关文献合成一种含有β-磷酸二钙、磷酸二氢钙、碳酸钙和纳米相羟基磷灰石的磷酸钙骨水泥,并用含藻酸钠的液相成分将该骨水泥调制成可用注射器和16号穿刺针操作的沣射物.方法:取12只新两兰大白兔,在双下肢股骨髁部钻取直径为2 mm的骨洞,左侧骨洞注入该骨水泥0.5~1.0 mL为实验组,右侧骨洞作为空白对照组.主要观察指标:术后4,8,12,16周取材,于光镜下观察该骨水泥在皮质骨内的降解及再生新骨情况;扫描电镜观察新生骨超微结构.X射线衍射图谱分析不同阶段骨水泥的成分,能谱分析测定降解区的钙磷比.结果:骨水泥在体内相容性良好,8周时降解反应明显,12周为降解反应的高峰期,16周降解反应基本完成;降解同时有大量的骨小梁生成.空白对照组无新骨形成.X射线衍射图谱证实骨水泥的主成分是β-磷酸三钙,能谱分析提示降解区钙离子含量显著升高.结论:该型磷酸钙骨水泥具有可注射性,骨皮质内相容性、骨传导和骨诱导作用良好等特性,是一种较好的骨替代产品.
-
骨复合材料结合生物膜即刻修复免下颌骨缺损
背景:近年来虽然有用不同方法处理过的异体骨、异种骨及各种组织工程材料骨问世,但临床上对颌骨缺损后骨量不足的治疗仍然没有较理想的解决方法.目的:通过动物实验观察较大下颌骨缺损及伴牙脱位的下颌骨缺损后骨复合材料结合生物膜即刻修复的效果.设计、时间及地点:对比观察动物实验,于2006-03/07在浙江大学动物实验室完成.材料:Bio-oss骨代卡于料与自体骨骨粉混合的比例为1:1,重组入骨形成蛋白2冻干粉溶于自体新鲜血液的比例为0.25 mg:1 mL.将骨粉混合物用含人骨形成蛋白的血液湿润,以容易粘到药匙上方便塑形为度.方法:取10只新西兰大白兔,在双侧下颌骨体部下缘各造成15 mm×6 mm×5 mm连续性骨缺损,随机选取一侧植入骨复合材料加Bio-gide膜,该侧作为骨复合材料加Bio-gide膜组.另一侧缺损直接拉拢缝合作为空白对照组.其余30只新西兰大白兔为骨复合材料加Bio-gide膜及再植牙组,在一侧下颌骨下缘上方造成15 mm×6 mm×8 mm的骨缺损伴牙脱位,植入骨复合材料加Bio-gide膜,并将脱位牙齿再植于原处.主要观察指标:大体观察植入材料部位和材料结合情况及有无成骨、再植牙松动等.×射线摄片和组织学观察骨缺损处新骨形成情况.结果:术后12周空白对照组下颌骨缺损处形成一较原截骨范围略小的骨缺损,骨复合材料加Bio-gide膜组下颌骨缺损区基本由新生骨组成,X射线观察骨缺损区密度接近正常骨组织,组织学观察骨植入物基本形成板状骨,骨复合材料加Bio-gide膜及再植牙组动物自体再植牙有17只无明显松动,X射线观察有13只根尖无透射区,组织学观察有13只出现替代性吸收.结论:该种骨复合材料结合牛物膜即刻修复较大下颌骨缺损效果良好,在其上自体牙再植近期效果尚可.
-
不同强度纤维蛋白胶作为免骨髓基质细胞培养支架材料的比较
背景:骨组织工程的支架材料主要作用为模拟细胞体内生长的空间环境,为细胞形成骨组织提供三维支架载体,但目前尚缺乏理想载体材料.目的:应用纤维蛋白胶作为细胞支架进行兔骨髓基质细胞立体培养,探讨其作为骨组织工程支架材料的可行性.设计、时间及地点:单一样本观察,于2007 09/2008 01在吉林大学中日联谊医院及天津科技大学机械工程学院完成.材料:将纤维蛋白原和凝血酶按不同比例混合,制备不同强度的纤维蛋白胶.1月龄雄性新两兰大耳白兔1只,体质量0.25 kg.方法:以兔骨髓基质细胞作为种子细胞在CO2孵箱中进行传代培养后,收集扩增的骨髓基质细胞与支架材料纤维蛋白胶复合后再进行培养4周.主要观察指标:采用相筹显微镜观察纤维蛋白胶中培养的骨髓基质细胞的生长状况,以苏木精伊红染色观察不同时期纤维蛋白胶中骨髓基质细胞的活性,以电子显微镜观察培养4周后骨髓皋质细胞超微结构变化.结果:骨髓基质细胞在不同强度的纤维蛋白胶中的牛长状态不同,在低强度纤维蛋白胶中活性好,扩增迅速,而在高强度纤维蚩白胶中细胞生长缓慢,数量少或逐渐死亡.电镜观察纤维蛋白原和凝血酶比例为4:1的纤维蛋白胶培养4周的基质细胞,各细胞器清晰可见,细胞具有良好活性.结论:骨髓基质细胞在低强度形成固体时的纤维蛋白胶中能够良好扩增生长,以纤维蛋白原和凝血酶比例为4:1的效果佳.
-
双相磷酸钙/聚乳酸复合生物材料的生物相容性
背景:双相磷酸钙生物陶瓷与聚乳酸复合材料具有优良的生物活性和生物降解性.适宜孔隙结构的双相磷酸钙具有骨诱导性能,故与目前广泛报道的羟基磷灰石/聚乳酸相比,可望成为一类有前途的骨缺损修复材料.目的:制备双相磷酸钙/聚乳酸复合材料并对其生物相容性进行体内及体外评价.设计、时间及地点:动物观察,生物相容性实验,于2008-03/12在四川大学材料科学与工程学院及四川大学华西口腔医学院完成,部分检测在解放军成都军区总医院完成.材料:以溶液浇铸,粒子沥滤法制备多孔双相磷酸钙/聚乳酸复合材料.方法:以肌内植入实验、致敏实验、皮肤刺激实验、急性毒性实验、短期毒性实验验证复合材料的生物相容性.主要观察指标:复合材料孔隙结构及抗压强度、肌内植入组织学切片观察、急性毒性及短期全身毒性评级、致敏实验分级、皮肤刺激计分.结果:双相磷酸钙/聚乳酸复合材料无急性毒性作用对皮肤无刺激性、无短期全身毒性.复合材料孔径为200~400 μm且相互贯通,具有适宜的孔隙结构及力学强度.结论:双相磷酸钙/聚乳酸复合材料具有优良的生物相容性.
-
藻酸盐凝胶三维培养条件下体外定向诱导骨髓间充质干细胞成软骨
背景:目前有关诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的研究不少,但选用何种生长因子调节以及如何保证其持续高效刺激尚处于探索阶段.目的:实验以软骨源性形态发生蛋白1(cartilage-derived morphogenetic protein 1,CDMP1)和转化生长因子β1(transforming growth factor-β 1,TGF-β1)作为主要诱导因子,通过三维培养微环境诱导,观察独立及联合应用时,促进骨髓间充质干细胞向软骨细胞表型分化的能力.设计、时间及地点:体外观察实验,于2007-04/2008-04在辽宁医学院附属医院耳鼻喉实验室完成.材料:选择辽宁医学院附属第一医院自然流产或咪嗦流产的12-20周胚胎,胚胎的使用经孕妇同意.实验经医院医学伦理委员会批准.方法:无菌条件下取出胚胎股骨,用密度梯度离心法和贴壁法分离纯化人胚骨髓间充质干细胞,体外培养传代.采用特定的诱导培养液使骨髓间充质干细胞向软骨分化,按培养基内添加生长因子的为同分成4组:①联合诱导组:无血清的软骨诱导液+CDMP1(300 μ g/L)+TGF-β1(10 μg/L).②TGF-β1诱导组:无血清的软骨诱导液+TGF-β1(10 μg/L).③CDMP1诱导组:无血清的软骨诱导液+CDMP1(300μ g/L).④对照组:无血清的软骨诱导液.先进行单层细胞培养10 d,再置干藻酸盐凝胶中继续培养11 d.主要观察指标:①于培养21 d后倒置显微镜观察细胞在凝胶球中的生长和增殖情况.②二甲基亚甲基蓝比色法测定各组标本的铵聚糖含量.③免疫组织化学染色检测Ⅱ型胶原的表达.结果:第21天后,倒置显微镜观察藻酸盐凝胶呈现透明胶冻状,有黏性.加入不同生长因子的藻酸盐凝胶,细胞呈散在分布于凝胶介质中,呈现"悬浮"状态.第21天时联合诱导组铵聚糖含量、Ⅱ型胶原表达阳性率高于其他3组,差异有显著性意义(P<0.05);TGF-β1诱导组、CDMP1诱导组铵聚糖含量、Ⅱ型胶原表达阳性率高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05).结论:骨髓间充质干细胞在三维培养条件下,TGF-β1和CDMP1联合作用促进骨髓间充质干细胞成软骨的作用明显.
-
等离子体处理脱细胞血管支架的血液相容性
背景:由于脱细胞方法去除了血管内表面的内皮细胞层,容易引发血栓形成,因此有必要对脱细胞支架表面进行改性处理.目的:观察兔腹丰动脉脱细胞支架等离子体处理后血液相容性的改变.设计、时间及地点:血管支架的血液相容性实验,2007-12/2008-05在南京大学医学院附属鼓楼医院实验室完成.材料:新西兰大白兔24只由鼓楼医院实验动物中心提供;富含血小板血浆由南京血液中心提供.方法:新两兰大白兔盐酸氯胺酮麻醉后,仰位固定,腹部正中切口,仔细游离腹主动脉,直径约2 mm.阻断血流后,剪下一段腹丰动脉长约20 mm,肝素生理盐水冲洗,再用Tris缓冲生理盐水冲洗,酶解方法制备兔腹主动脉脱细胞支架,利用等离子体处理引发脱细胞支架表面改性.主要观察指标:通过光镜观察兔腹主动脉脱细胞支架等离子体处理前后结构的变化;电镜观察处理前后支架表面形态的改变;通过表面接触角仪测定两组支架表面的亲水性;血小板黏附实验观察处理前后支架表面血液相容性.结果:兔腹主动脉脱细胞处理后,光镜和电镜检测见血管壁保留胶原纤维和弹力纤维,未见明显细胞残留;兔腹主动脉脱细胞支架等离子体处理前后光镜检测末见明显异常,电镜检测见脱细胞支架表面呈沟槽样,沟槽间表面光滑,经等离子体处理后表面仍呈沟槽样,但沟槽间表面粗糙;兔腹主动脉脱细胞支架经等离子体处理后接触角明显减小(P<0.01);血小板黏附实验中,脱细胞血管组见多量血小板黏附,而等离子体处理脱细胞支架组有相对较少血小板黏附.结论:兔腹主动脉脱细胞支架通过等离子体处理后,具有良好的亲水性和抗凝血性.
-
可注射性透明质酸苄基酯凝胶在软骨组织工程中的应用
软骨组织工程学足关节软骨损伤修复研究的热点,其中生物载体的选择和构建是关键问题.生物材料不仅作为一种细胞生存载体,还要具有体内或异位诱导软骨组织修复和再牛的功能.天然的软骨细胞外基质支架的开发有可能成为组织工程化软骨进一步发展的关键,透明质酸凝胶就具备了上述的要求.透明质酸苄基酯足一种在透明质酸凝胶基础上开发的半合成可吸收性生物材料.实验证明它能够为软骨细胞提供三维的生长空间,使其不断增殖的同时,还能够保持固有的表型,脂溶性的增强以及生物作用半衰期的延长,更使其在保持原有流动性优势的情况下,又具备了相对增强的机械强度,是一种更加符合组织工程学要求的生物材料.
-
生物材料和细胞因子对人牙周膜细胞的影响
牙周组织再生的基础是牙周膜细胞,牙周膜细胞的来源非常有限,以致牙周组织很难有效再生和重建,而组织工程技术有望解决这一难题.文章分别介绍了几种常见的生物材料和细胞因子对牙周膜细胞的影响,以探讨组织工程技术对牙周组织再生、修复的影响和意义,为组织工程在牙周领域的应用奠定实验基础.
-
不同类型人工心脏瓣膜质量及安全性的评价
目的:评价不同类型人工心脏瓣膜质量及安全性,通过观察瓣膜置换中的超声多普勒血流动力学表全面评价不同类型人工心脏瓣膜的生物相容件和血流动力学表现并与未使用的同类瓣膜进行比较.方法:以计算机检索方法在检索中国期刊全文数据库中(CNKl:1990/2008)检索关于不同类型人工心脏瓣膜置换的临床研究与实验研究的随机对照实验,检索词为"人工心脏瓣膜、血流动力学".检索后对每项研究的资料结果进行提取、分析.结果:共有13项实验476例人工心脏瓣膜置换患者、6项建立人工心脏瓣膜置换的动物模型的实验研究符合纳入标准,随访结果显示国产机械瓣是一个可靠的心脏瓣膜,与传统机械瓣相比,生物瓣具有更好的血流动力学性能,但其远期在体对血流动力学的影响尚有待进一步随访观察.结论:人工瓣膜包括机械瓣膜和牛物瓣膜,作为替代严重受损瓣膜工作的人工瓣膜置换术目前已成为临床改善患者血流动力学异常、提高生活质量的有效治疗方式.但限于实验时间限制,目前还没有更长时间的实验数据,其他有效性指标和安全性,有待更多证据加以评价.
-
义齿软衬材料在口腔修复中的应用及其组织相容性
全口义齿修复中常能遇到一些疑难问题,例如牙槽嵴高度吸收后,支持骨受力不均或集中于局部;或者牙槽嵴呈刃状,其上黏膜过薄;戴义齿后义齿组织面看似密合,但有反复压痛;软硬组织倒凹大,义齿摘戴时基托边缘压迫产生疼痛;义齿下牙槽嵴受压不均匀造成义齿性口炎;义齿不密合产生压痛或崮位力减低.义齿软衬材料做为粘附存基托基托组织面,固化后有一定弹性的义齿衬垫材料,很好的解决这些问题.文章介绍了义齿软衬材料在口腔修复中的应用与相容性研究.
-
两种生物可吸收缝合线在腹壁手术中的应用比较
背景:近年来,随着生物材料学的发展,不同化学成分和生物学特性的缝线被广泛应用于临床,不同缝线的选择是临床医生必须考虑和权衡的问题.目的:对比观察抗菌可吸收线和聚对二氧环已酮可吸收线在腹部切口的应用效果.设计、时间及地点:对比观察,病例来自2005-01/2007-08汕头大学医学院第二附属医院普外科.对象:选择剖腹手术患者450例,男230例,女220例,年龄18~78岁,甲均年龄(40±9)岁.方法:450例患者随机分为3组,抗菌可吸收缝线组:采用顶涂有抗菌剂三氯生的可吸收缝线全层连续缝合腹壁切口(皮肤层除外);可吸收缝线组:采用可吸收缝线聚对二氧环己酮伞层连续缝合腹壁切口(皮肤层除外);对照组;采用普通丝线分层间断缝合腹壁切口,每组患者150例.术后随访12~24个月.主要观察指标:3组患者术后疼痛评分(采用目测类比评分:0分为无痛,10分为剧痛)、切口愈合分级及术后并发症发生情况(切口感染、排异反应、瘢痕形成、切口裂开、切口疝).结果:450例剖腹手术患者均进入结果分析.抗菌可吸收缝线组和可吸收缝线组术后疼痛评分明显低于对照组,差异有显著性意义(P<0.05):对照组150例患者中有6例切口乙级愈合,明显高其他两组(P<0.05);抗菌可吸收缝线组和可吸收缝线组术后并发症低于对照组(P<0.05),其中抗菌可吸收缝线组切口感染率低(P<0.01).结论:可吸收缝线缝合腹壁切口安全可靠,无排异反应;能减轻切口疼痛,减少异物残留和瘢痕形成,减少切口裂开和切口疝的发生率:抗菌可吸收缝线能明显降低切口感染率.
-
应用多孔磷酸三钙植骨治疗胫骨平台骨折的组织学特性
目的:观察胫骨平台粉碎性骨折内固定治疗中采用磷酸三钙多孔生物陶瓷植骨后的组织学变化.方法:自2004-01/2007-01于上海交通人学瑞金医院集团闵行医院骨科收治胫骨平台粉碎性骨折患者34例,其中男19例,女15例;年龄24~65岁;骨折类型按Schatzker分型:Ⅱ型7例,Ⅲ型12例,Ⅳ型6例,Ⅴ型6例,Ⅵ型3例.进行切开撬拨复位、磷酸三钙多孔生物陶瓷植骨、接骨板内固定治疗.结果:34例患者随访12~28个月,平台塌陷部分均解剖复位,其下所植磷酸三钙多孔生物陶瓷材料3~6个月后逐渐与自体相邻骨密度接近,显示逐渐被自体骨替代,无冉塌陷发生,无排异渗出、感染等发生.取内固定的同时,植骨区骨组织组织学观察可见材料部分溶解,成骨细胞分泌大量骨基质包埋其中,形成骨陷窝,出现大量新生骨小梁,骨小梁之间形成骨髓腔.结论:磷酸三钙多孔生物陶瓷具有良好的生物相容性和骨传导作用,影像学观察、组织学观察均显示其生物降解效应与骨组织的改建塑性基本同步.