中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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磁场对骨髓间充质干细胞分化的影响
背景：骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能，其中磁场对骨髓间充质干细胞分化的影响近年来吸引了相当多的关注。目的：综述磁场对骨髓间充质干细胞向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、神经细胞和心肌细胞方向分化的影响，为组织工程种子细胞的研究应用和临床应用磁场的治疗提供参考。方法：由第一作者检索2000至2015年PubMed 数据库以及中国知网数据库有关磁场对骨髓间充质干细胞分化影响的文献，并进行系统整理、总结和分析，终保留40篇文献进行分析。结果与结论：磁场可以促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞、软骨细胞、神经细胞和心肌细胞等方向的分化，可以抑制骨髓间充质干细胞向脂肪细胞方向分化。磁场对骨髓间充质干细胞的诱导分化作用有适频率和磁场强度，一般来说，较低强度、较低频率的磁场有更明显的诱导作用，磁场对骨髓间充质干细胞分化的影响也具有一定的时间依赖性。
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诱导多能干细胞在骨外科组织再生修复中：如何尽快实现临床应用？
背景：干细胞结合替代材料修复骨科组织缺损具有良好的应用前景，其中诱导多能干细胞有着比其他干细胞更优的来源及细胞特性，已成为干细胞领域的研究热点。目的：综述诱导多能干细胞的研究历史、制备方法、细胞特性及目前在骨科领域的研究进展。方法：利用计算机检索中国知网、PubMed等数据库1999至2014年间关于诱导多能干细胞及其应用于骨科领域研究的文献，选取具有代表性、创新性的研究成果进行内容论证。结果与结论：研究表明诱导性多能干细胞在骨组织修复工程中表现出了相当有应用前景的优势，诱导性多能干细胞与各种支架材料都有着良好的相容性，在不同的支架中都保持着良好的成骨分化潜能。软骨再生方面的各种检测技术、小分子化合物等已逐步被发现，但如何有效地将诱导性多能干细胞向软骨方向诱导分化并实现临床应用仍需进一步研究。
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吡格列酮联合骨髓间充质干细胞移植治疗改善大鼠心肌梗死后的心功能
背景：前期研究发现骨髓间充质干细胞移植能够改善心肌梗死大鼠的心功能，但整体效果并不太理想。目的：拟采用PPAR-γ激动剂吡格列酮联合骨髓间充质干细胞移植治疗以进一步改善心肌梗死大鼠的心功能并探讨相关机制。方法：开胸结扎20只SD大鼠左前降支冠状动脉并随机分为2组：骨髓间充质干细胞组和骨髓间充质干细胞+吡格列酮组。2周后在局部梗死心肌内注射PKH26标记的由PBS悬浮的骨髓间充质干细胞，联合治疗组在注射骨髓间充质干细胞后予以吡格列酮3 mg/(kg?d)连续灌胃2周。细胞移植后2周进行超声心动图检测，免疫荧光染色、Western blot、qRT-PCR检测左心室心肌组织不同区域PPAR-γ、TGF-β1/SMAD通路相关因子和Cx43的表达情况。结果与结论：两组大鼠基础心功能参数无明显差异性。细胞移植2周后，骨髓间充质干细胞+吡格列酮组左室舒张末径、左室收缩末径明显减小，左室射血分数明显增高；左心室心肌组织不同区域PPAR-γ和Cx43的表达量显著增加；TGF-β1、SMAD2、SMAD3在梗死区和梗死边缘区表达明显下降。以上结果提示 PPAR-γ激动剂吡格列酮干预能够增强骨髓间充质干细胞移植对心功能的改善作用，其机制可能与 PPAR-γ抑制TGF-β1/SMAD通路进而提高Cx43的表达有关。
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经气管移植骨髓间充质干细胞在染矽尘大鼠体内的归巢
背景：骨髓间充质干细胞经气管途径注入大鼠体内能减轻染矽尘大鼠的肺部损伤，但其在大鼠体内的分布、迁移情况尚不清楚。目的：观察经气管途径移植的骨髓间充质干细胞在染矽尘大鼠体内的分布和归巢情况。方法：用携带增强型绿色荧光蛋白基因的慢病毒(Lv-eGFP)转染 SD 大鼠骨髓间充质干细胞，锥虫蓝染色和CCK-8法检测转染前后细胞的活力及增殖情况。将SPF级SD大鼠随机分为染矽尘组和对照组，染矽尘组大鼠经气管内注入40 g/L无菌矽尘混悬液1 mL，对照组大鼠注入生理盐水1 mL。造模后第2天每只大鼠经气管注入2.5×106个Lv-eGFP转染的骨髓间充质干细胞，分别于移植后的1，2，3，4周处死大鼠，取心、肝、脾、肺、肾、脑组织冰冻切片，荧光显微镜观察各组织荧光表达，图文分析软件计算组织荧光强度。结果与结论：感染复数为50时，转染与未转染Lv-eGFP的骨髓间充质干细胞在活细胞率及增殖力上差异无显著性意义(P >0.05)。注入细胞后两组肺组织切片均可见广泛、强烈的绿色荧光，以支气管、血管周围明显，各时间点染矽尘组的荧光强度均高于对照组(P <0.05)，到第4周荧光仍较强。两组其余各脏器在第1周均可见荧光，肝、脾、心脏荧光强、分布广，肾、脑组织荧光相对较弱、分布较少；随时间推移，荧光均逐渐减弱，分布逐渐减少。结果提示骨髓间充质干细胞经气管途径进入染矽尘大鼠体内后可归巢至受损肺部。
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真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞植入再生障碍性贫血小鼠
背景：真性红细胞增多症患者骨髓的高增殖低凋亡特性使其造血干细胞植入NOD/SCID小鼠后成功分化出粒红系细胞，但其能否植入并改善再生障碍性贫血小鼠造血功能，目前国内外尚未有报道。目的：探讨JAK2阳性真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞植入后对再生障碍性贫血小鼠造血重建的影响。方法：应用注射用重组人γ-干扰素联合白消安的方法建立再生障碍性贫血小鼠模型，随机分为实验组(n=10)和对照组(n=10)，给药结束后第5天实验组经尾静脉输注真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞悬液，对照组同法输注等容积生理盐水。输注后第14天检测小鼠外周血常规、骨髓细胞形态、骨髓组织病理变化以及小鼠外周血和骨髓内CD45+细胞的百分含量。结果与结论：输注后第14天，实验组小鼠血细胞计数三系减少，骨髓涂片可见散在淋巴细胞和早期造血细胞，骨髓组织活检可见骨髓增生减低，少量粒系细胞及幼红细胞，未见巨核细胞，与对照组比较，造血功能无明显改善。对照组小鼠外周血及骨髓均未检测到CD45+细胞，实验组小鼠外周血及骨髓均可检测到人源化的CD45+细胞，且骨髓中CD45+细胞比外周血高，提示JAK2V617F阳性真性红细胞增多症患者骨髓单个核细胞能成功植入再生障碍性贫血小鼠体内，但血常规、骨髓涂片及活检结果显示未能明显改善骨髓造血功能。
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人脐带间充质干细胞移植肝硬化大鼠肝脏miRNA的差异表达
背景：研究表明脐带间充质干细胞可以显著改善肝硬化的程度，进而修复肝损伤，但其治疗肝硬化的分子调控机制，尤其是非编码RNA调控的肝内基因变化，目前并没有得到详细的阐释。目的：分析人脐带间充质干细胞移植肝硬化大鼠肝细胞中微小RNA基因表达的变化。方法：采用四氯化碳皮下注射联合乙醇喂服方法建立肝硬化大鼠模型，造模8周后经尾静脉输注人脐带间充质干细胞，每周1次，连续注射4周。后一次注射治疗1周后收集大鼠肝脏组织进行石蜡切片和提取肝脏RNA进行表达谱基因芯片分析，同时收集血清利用自动生化分析仪测定肝功能指标变化。结果与结论：人脐带间充质干细胞治疗可以显著降低谷丙转氨酶、谷草转氨酶和转肽酶水平，脂肪病变和肝细胞坏死显著减少。微小RNA表达谱芯片杂交分析和PCR验证结果显示rno-miR-369-5p、rno-miR-3584-5p和rno-miR-153*这3种微小RNA基因在造模过程中先下调表达，并在人脐带间充质干细胞治疗后显著上调；而rno-miR-93、rno-miR-199a-3p、rno-miR-195、rno-let-7a和rno-miR-19a这5种微小RNA基因在造模过程中先上调表达，并在人脐带间充质干细胞治疗后显著下调。以上结果表明人脐带间充质干细胞逆转肝硬化和肝细胞损伤过程中，可能通过上调rno-miR-369-5p、rno-miR-3584-5p和rno-miR-153*等miRNA基因表达，下调rno-miR-93、rno-miR-199a-3p、rno-miR-195、rno-let-7a和rno-miR-19a等相关miRNA基因表达发挥治疗作用。
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脐带沃顿胶干细胞移植对脊髓损伤大鼠炎症因子表达的影响
背景：免疫炎症反应促使大量炎症因子的产生和释放是继发性脊髓损伤的其对主要原因。目的：探讨脐带沃顿胶干细胞移植对急性脊髓损伤大鼠的神经修复作用及其对炎症因子单核细胞趋化蛋白1和白细胞介素10表达的影响。方法：81只健康成年雄性SD大鼠，随机分为假手术组、模型组和脐带沃顿胶干细胞移植组(n=27)，后两组以脊髓半切方法建立急性脊髓损伤模型，造模后脐带沃顿胶干细胞移植组经尾静脉移植1×106个脐带沃顿胶干细胞。移植后不同时间通过BBB评分评价各组大鼠的运动功能；ELISA检测不同时间点各组大鼠血清中单核细胞趋化蛋白1的含量；qRT-PCR和Western分析不同时间点损伤脊髓组织中单核细胞趋化蛋白1及白细胞介素10的表达；免疫组织化学检测损伤组织中脐带沃顿胶干细胞的迁移和神经分化情况。结果与结论：与假手术组和模型组相比，脐带沃顿胶干细胞移植组大鼠的神经功能明显恢复(P <0.05)。脐带沃顿胶干细胞移植组大鼠血清中单核细胞趋化蛋白1水平显著低于模型组(P <0.05)。脐带沃顿胶干细胞移植组脊髓组织单核细胞趋化蛋白1 mRNA和蛋白表达显著低于模型组(P <0.05)，白细胞介素10 mRNA和蛋白表达显著高于模型组(P <0.05)。移植组中脐带沃顿胶干细胞可迁移至损伤部位，并表达神经胶质纤维酸性蛋白。这些结果提示脐带沃顿胶干细胞可能通过调控脊髓损伤组织的炎症反应，促进神经修复，这也可能是脐带沃顿胶干细胞治疗脊髓损伤的机制之一。
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自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎：5年随访
背景：慢性缺血性疾病的长期疗效评估较短期疗效评估更为重要，关系患者远期生活质量及长期生存率。目的：分析自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管炎的5年随访结果。方法：收集新疆医科大学第一附属医院血管甲状腺外科自2007年8月至2010年1月行自体骨髓干细胞移植的血栓闭塞性脉管炎患者43例。移植后1，2，3，4，5年电话定期随访疼痛、冷感、间歇性跛行距离，并观察患肢溃疡的变化情况。移植后1年复查患肢静脉血氧分压和血氧饱和度。结果与结论：有完整随访资料的血栓闭塞性脉管炎患者38例进入结果分析。38例患者的疼痛、冷感、间歇性跛行情况较移植前明显好转，差异有显著性意义(Z值分别为-4.277、-5.086、-3.574，P <0.001)。移植后1-5年间相比，患者的疼痛、冷感情况差异无显著性意义(P >0.05)，间歇性跛行距离逐渐增加，差异有显著性意义(Z=43.898，P<0.001)。患肢静脉血氧分压和血氧饱和度移植前与移植后1年对比差异有显著性意义(t值分别为36.790、43.964，P值分别为0.040、0.037)。以上结果表明自体骨髓干细胞移植治疗血栓闭塞性脉管长期效果稳定。
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骨髓间充质干细胞参与肝星状细胞凋亡的机制
背景：控制肝星状细胞的激活和增殖是抗肝纤维化研究的重点，人类或鼠的骨髓间充质干细胞可通过旁分泌的肝细胞生长因子诱导肝星状细胞凋亡。目的：探讨骨髓间充质干细胞在肝星状细胞凋亡中的参与机制。方法：构建共培养体系，于半透膜上下层在细胞培养板上对肝星状细胞和骨髓间充质干细胞进行接种和培养，单纯肝星状细胞组设为空白对照组，共培养的肝星状细胞和骨髓间充质干细胞组为共培养组，以3 mg/L c-Met阻滞剂干预的肝星状细胞和骨髓间充质干细胞为c-Met阻滞剂组，以3 mg/L RhoA阻滞剂干预的肝星状细胞和骨髓间充质干细胞为RhoA阻滞剂组。结果与结论：c-Met阻滞剂质量浓度为3.0 mg/L，RhoA阻滞剂浓度为30μmol/L时比其他浓度的细胞抑制率大。共培养组、c-Met阻滞剂组和RhoA阻滞剂组细胞中RhoA mRNA和蛋白表达水平均显著低于空白对照组，且以 RhoA 阻滞剂组为显著。各组肝细胞生长因子浓度均随着时间的延长出现逐渐下降的情况，肝细胞生长因子激活物浓度均随着时间的延长出现逐渐上升的情况，且 c-Met 阻滞剂组变化为显著。随着时间的延长，各组肝星状细胞凋亡率均出现逐渐上升的情况，其中RhoA阻滞剂组凋亡率高，c-Met阻滞剂组低。表明骨髓间充质干细胞会参与到肝星状细胞的凋亡机制中，并通过对肝细胞生长因子的激活以及Rho通路的下调达到促进肝星状细胞凋亡的目的。
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骨髓间充质干细胞联合还原型谷胱甘肽对肺损伤小鼠的保护
背景：大量实验证明骨髓间充质干细胞治疗肺部疾病或改善肺损伤方面具有良好的效果，其治疗作用主要以减少炎性反应为主。目的：观察骨髓间充质干细胞移植联合还原型谷胱甘肽对博来霉素诱导的小鼠肺损伤的保护效果。方法：取1只雄性NOD/SCID小鼠制备骨髓间充质干细胞，并观察其形态、表型。将64只雌性NOD/SCID小鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、骨髓间充质干细胞组和骨髓间充质干细胞+还原型谷胱甘肽组，每组16只。对照组气管内注入生理盐水，模型组气管内注入博来霉素，骨髓间充质干细胞组气管内注入博来霉素2 h后尾静脉内注入培养的骨髓间充质干细胞，骨髓间充质干细胞+还原型谷胱甘肽组气管内注入博来霉素2 h后尾静脉注入培养的骨髓间充质干细胞与还原型谷胱甘肽，7 d后处死动物，按照试剂盒说明测定肺组织匀浆肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、丙二醛水平，同时留取肺组织进行病理检查，确认骨髓间充质干细胞联合还原型谷胱甘肽对肺损伤的保护效果。结果与结论：雄性小鼠骨髓间充质干细胞呈上皮细胞样，其CD34、CD45阴性表达，CD10、CD13、CD44阳性表达。雌性小鼠中，与对照组相比，模型组肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及丙二醛水平上升，骨髓间充质干细胞组和骨髓间充质干细胞+还原型谷胱甘肽组肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β及丙二醛水平下降(P <0.05)，骨髓间充质干细胞+还原型谷胱甘肽组较骨髓间充质干细胞组下降更明显(P <0.05)。病理切片显示，骨髓间充质干细胞+还原型谷胱甘肽组肺损伤较模型组及骨髓间充质干细胞组轻。以上结果表明骨髓间充质干细胞联合还原型谷胱甘肽能更有效保护博来霉素诱导的肺损伤。
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人参皂苷Rh2干预催产素诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞的转化
背景：课题组前期实验已证明了10μmol/L催产素能诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化。目的：观察人参皂苷Rh2在催产素诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化过程中的作用。方法：采用贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞。实验共分为5组，空白对照组细胞常规培养2周；催产素诱导组：10μmol/L催产素连续诱导培养2周；人参皂苷Rh2低、中、高剂量组：分别加入0.5，1，2μmol/L人参皂苷Rh2，培养24 h后加入10μmol/L催产素，连续诱导培养2周。结果与结论：光学显微镜下观察显示，与空白对照组相比，催产素诱导组的细胞部分细胞体积变大，部分细胞密集重叠生长，随人参皂苷Rh2剂量增大细胞密集重叠生长的范围增大。免疫组织化学染色和免疫印迹法结果显示，催产素诱导组和人参皂苷Rh2低、中、高剂量组中心肌肌钙蛋白T，连接蛋白43的蛋白表达均显著高于空白对照组(P <0.05)；人参皂苷Rh2剂量增大而阳性表达增强，并显著高于催产素诱导组(P <0.05)。激光共聚焦检测结果显示，催产素诱导2周后，催产素诱导组骨髓间充质干细胞中游离钙的相对荧光强度显著升高(P <0.05)，而人参皂苷Rh2处理组的荧光强度高于催产素诱导组，与剂量呈正相关(P <0.05)。结果证实，人参皂苷Rh2在体外可显著增强催产素诱导大鼠骨髓间充质干细胞向心肌细胞转化的作用。
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构建人端粒酶反转录酶修饰的永生化大鼠骨髓间充质干细胞株
文章亮点：骨髓间充质干细胞存在含量有限以及复制衰老等问题，制约其在镇痛研究中的应用。实验成功构建了人端粒酶反转录基因修饰的永生化大鼠骨髓间充质干细胞株，并证实该细胞株的端粒酶活性以及增殖能力有明显提高，同时保留了干细胞特性和转化特性，为将来转基因细胞移植镇痛研究提供了性状均一稳定的安全载体细胞。
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骨髓间充质干细胞诱导胆管内皮细胞与电纺纳米纤维的生物相容性
背景：胆管损伤修复是腹部外科手术的难题，组织工程胆管是解决这一难题的理想方法，而构建性能优异的组织工程胆管支架是这一研究的关键。目的：观察猪骨髓间充质干细胞诱导分化的胆管内皮细胞与电纺纳米纤维的生物相容性。方法：将猪骨髓间充质干细胞于体外定向分化为肝干细胞，再进一步分化为胆管内皮细胞，并通过形态学及RT-PCR对分化完成的细胞加以鉴定。用静电纺丝方法制备聚乳酸-羟基乙酸纳米纤维膜，通过扫描电镜观察其形态，并测定其短期(2周)内体外降解率。将分化的胆管内皮细胞与纳米纤维复合培养，观察细胞在纳米纤维表面的黏附、增殖能力，荧光染色观察细胞形态及在材料表面的分布情况，扫描电镜观察细胞在纳米纤维表面生长形貌。结果与结论：骨髓间充质干细胞体外定向分化4周后，细胞呈现典型树枝状胆管内皮细胞形态学改变，并且有CK19的表达。扫描电镜照片显示电纺材料为连续的纳米纤维，纤维直径均分布在200-500 nm范围内，在2周内聚乳酸-羟基乙酸纳米纤维没有发生明显的降解。通过细胞黏附率计算、MTT 法检测、荧光染色及扫描电镜观察证明猪骨髓间充质干细胞诱导分化后的胆管内皮细胞与聚乳酸-羟基乙酸纳米纤维具有良好的生物相容性。
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骨形态发生蛋白7转染骨髓间充质干细胞再生骨组织
背景：骨形态发生蛋白7具有促进骨髓间充质干细胞分裂增殖的作用，在诱导新骨形成方面有重要的研究意义。目的：观察携带人骨形态发生蛋白7慢病毒载体转染后骨髓间充质干细胞骨形态发生蛋白7蛋白及mRNA的表达。方法：提取并培养大鼠骨髓间充质干细胞，通过形态学和细胞表面标记进行鉴定；构建携带人骨形态发生蛋白7的慢病毒载体，转染大鼠骨髓间充质干细胞，提取RNA后采用RT-PCR的方法检测骨形态发生蛋白7 mRNA水平相对表达量的变化，Western blotting检测骨形态发生蛋白7蛋白水平相对表达量的变化。结果与结论：成功构建了携带骨形态发生蛋白7基因的慢病毒载体PLV-sfGFP(2A)-BMP7，重组载体质粒成功转染至大鼠骨髓间充质干细胞中，转染组的骨形态发生蛋白7 mRNA和蛋白表达高于空载体组和空白组，差异有显著性意义(P <0.05)，说明外源性骨形态发生蛋白7基因被有效整合到骨髓间充质干细胞并进行表达。
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血小板裂解液对人间充质干细胞生物学特性的影响
背景：血小板裂解液是自体或异体血小板富集物经裂解后获得的产物，不仅去除了残余的细胞结构，降低了免疫原性，而且保留了其中的多种生长因子，有研究表明它可替代传统培养基中的胎牛血清，对间充质干细胞进行体外扩增。目的：观察血小板裂解液对人骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞生物学特性的影响，为临床细胞治疗及再生医学提供科学的实验数据。方法：采集新鲜血液，经冻融获取血小板裂解液；采集健康成人骨髓和脂肪组织，分别采用密度梯度离心法和Ⅰ型胶原酶消化法获得骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞；对血小板裂解液培养后的骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞的细胞形态、细胞表型、分化能力、增殖能力、集落形成能力和细胞因子分泌水平进行检测。结果与结论：应用血小板裂解液在体外成功地培养扩增了骨髓间充质干细胞和脂肪间充质干细胞，两种细胞的细胞形态、细胞表型、集落形成能力、细胞因子分泌水平、成软骨、成骨和成脂肪分化能力等生物学特性无明显差异。脂肪间充质干细胞的累积群倍数高于骨髓间充质干细胞(P <0.05)，表明脂肪间充质干细胞具有更强的增殖能力，在体外血小板裂解液培养体系下更适宜进行大规模扩增。
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釉基质蛋白衍生物对人牙周膜干细胞分化、增殖的影响
背景：釉基质衍生物已经在临床上用于治疗严重的牙周炎，发现其可促进牙周组织修复、再生，但其中的机制还未阐明。目的：探讨釉基质衍生物对牙周膜干细胞分化和增殖的作用。方法：分离培养人牙周膜干细胞，检测其克隆形成率、表面抗原表达情况，鉴定其多向分化潜能。将不同质量浓度的釉基质衍生物(20，50或100 mg/L)作用于牙周膜干细胞培养2，4周，用Trichrome和Von Kosa’s染色法检测牙周膜干细胞胶原合成及矿化结节形成情况，Real time RT-PCR方法检测成骨分化相关基因Ⅰ型胶原、骨钙素、RUX2的表达，MTT法和生长率法检测牙周膜干细胞的增殖情况。结果与结论：牙周膜干细胞呈梭形，其克隆形成率较牙周膜细胞高，表面抗原CD105，CD29，CD45，CD44的表达率分别为99.8%，99.7%，1.26%，98.8%，具备多向分化潜能。釉基质衍生物呈现一定的时间剂量效应关系促进牙周膜干细胞胶原合成及矿化结节形成，促进成骨分化相关基因Ⅰ型胶原、骨钙素、RUX2的表达，促进牙周膜干细胞的增殖，可能在牙周组织修复、再生中发挥作用。
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肿瘤干细胞表面标记物CD44在胃癌浸润和淋巴结转移中的作用
背景：肿瘤干细胞不仅能启动肿瘤发生，还参与肿瘤细胞的侵袭和转移。对肿瘤干细胞来说，识别其特异性细胞表面标志物已成为研究热点。目的：探讨肿瘤干细胞表面标记物CD44在胃癌浸润和淋巴结转移中的临床意义。方法：采用免疫组化 SABC法检测胃癌组织标本CD44蛋白表达，应用Pearsonχ2检验和Cox回归多因素分析，确定CD44表达与胃癌生物学特性及其预后的相关性。结果与结论：100例胃癌标本中，59例(59.0%)标本CD44蛋白呈阳性表达。CD44蛋白在距胃癌原发灶边缘5 cm以上的正常胃黏膜组织中呈阴性表达。胃癌组织中CD44蛋白广泛表达，主要表达于细胞膜，少量表达于细胞浆。胃癌组织中 CD44蛋白的表达和患者性别、年龄无关(P >0.05)，但与肿瘤分期和淋巴管浸润、组织学分级、肿瘤大小等有关(P <0.05)，其中，肿瘤浸润越深、组织学分级越高、肿瘤直径越大、有淋巴结转移，则CD44蛋白表达阳性率越高，CD44阳性表达是影响患者术后生存的独立预后因素(P <0.05)。以上结果表明肿瘤干细胞表面标记物 CD44在胃癌组织中的表达与胃癌的浸润和淋巴结转移密切相关，表达越高患者预后越差。
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人端粒酶反转录酶基因修饰脐带间充质干细胞移植治疗急性肾损伤
背景：人端粒酶反转录酶(hTERT)是调控增殖及定向分化的首选生长因子之一，具有多重生物学效应，为建立基因工程的永生化干细胞系奠定了基础。目的：探讨人端粒酶反转录酶基因修饰脐带间充质干细胞移植对大鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤的治疗作用。方法：体外培养人脐带间充质干细胞，构建缺血再灌注诱导的大鼠急性肾损伤模型，建模后将大鼠随机分为3组：对照组尾静脉注射1 mL L-DMEM培养液；空载病毒组：尾静脉注射1 mL经空载病毒转染人脐带间充质干细胞悬液；hTERT转染组尾静脉注射1 mL经PLXSN-hTERT转染的人脐带间充质干细胞悬液。结果与结论：移植后第3，28天苏木精-伊红染色检查示hTERT转染组的肾小管损伤评分<空载病毒组<对照组(P <0.05)。移植后第28天，CM-Dil阳性细胞数为hTERT转染组>空载病毒组>对照组(P <0.05)。移植细胞后第1，3，14，28天血肌酐、尿素氮水平均为hTERT转染组<空载病毒组<对照组(P <0.05)。结果证实，hTERT基因修饰脐带间充质干细胞移植对大鼠急性肾损伤具有明显的修复作用。
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人肺腺癌细胞株SPC-A1诱导球体形成及肺癌干细胞致瘤能力评估
背景：目前关于肺癌干细胞是否可以形成球体及其致瘤能力尚缺乏明确的定论。目的：观察人肺腺癌细胞株SPC-A1诱导球体形成及肺癌干细胞的致瘤能力。方法：利用无血清-DF12培养液培养增殖期肺癌细胞株SPC-A1，加入重组人胰岛素样生长因子1和重组人表皮生长因子及重组人成纤维细胞生长因子10诱导球体形成，获得球体细胞沉淀物，进行免疫荧光检测和PCR 扩增，了解干细胞相关标志的表达情况。将肺球体细胞植入 NOD-SCID 免疫缺陷小鼠皮下，观察肿瘤生长情况，并利用活体荧光成像仪进行摄片。结果与结论：培养肺腺癌细胞SPC-A15-10 d获得肺球体。RT-PCR检测发现，肺球体细胞表达肺癌干细胞及细支气管肺泡干细胞标志物，CD24、CD221、CCSP和SP-C；另外，肺球体细胞与纯化的CD24+、CD221+肺癌干细胞同样表达肺干细胞的主干基因TTF-1、胚胎干细胞主干基因OCT4、Nanog和Bmi-1肺干细胞的主干基因TTF-1。荧光检测显示，80%以上的肺球体细胞中表达CCSP和OCT4；SPC-A1细胞具有肺泡Ⅱ型细胞特征，并表达SP-C蛋白，但仅约5%的细胞表达CCSP和OCT4。肺球体细胞皮下植入50 d，活体荧光成像可清晰显示小鼠体内肿瘤直径达1 cm。表明人肺腺癌细胞株SPC-A1可诱导球体形成，球体中富含肺癌干细胞并具有致瘤能力。
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体外诱导骨髓与脐血间充质干细胞向成骨细胞分化及其成骨活性的比较
背景：脐血与骨髓来源的间充质干细胞在一定诱导条件作用下均具有多向分化的能力。目的：比较脐血与骨髓来源间充质干细胞向成骨细胞诱导分化能力的差异。方法：采用密度梯度法分离培养人脐血间充质干细胞和骨髓间充质干细胞，当细胞汇合90%后胰蛋白酶消化传代，取第3代脐血间充质干细胞和骨髓间充质干细胞，以细胞密度为8×104/孔接种，当细胞达80%融合时，加入含体积分数为10%胎牛血清、0.1μmol/L地塞米松、50μmol/L维生素C、10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠的低糖型DMEM成骨细胞诱导液培养。结果与结论：两种来源间充质干细胞的形态和生物学特性无明显差异，细胞表面均强表达CD44，CD29，不表达 CD34；两者均具有向成骨细胞诱导分化的潜能，稳定表达了成骨细胞标志性的产物碱性磷酸酶、骨矿化结节，而且两种细胞的成骨活性差异无显著性意义。结果表明脐血和成人骨髓来源间充质干细胞向成骨细胞诱导分化能力相似，均可作为骨组织工程的种子细胞。
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肝损伤大鼠血清诱导培养脐带间充质干细胞向肝样细胞的分化
背景：脐带间充质干细胞来源于新生个体脐带组织，来源广泛，无社会伦理学因素制约，有望代替骨髓间充质干细胞成为细胞移植和再生医学的理想种子细胞。目的：探讨肝衰竭大鼠血清对人脐带间充质干细胞肝向诱导分化作用，为临床上利用脐带间充质干细胞治疗终末期肝病提供实验依据。方法：腹腔注射10%四氯化碳溶液建立急性肝损伤大鼠模型，对照组腹腔注射等剂量的大豆油，48 h后腹主动脉取血离心分离血清。取第3代人脐带间充质干细胞，分别用体积分数为20%肝损伤大鼠血清和体积分数为20%胎牛血清诱导培养，观察诱导前后人脐带间充质干细胞形态学改变，检测培养液上清甲胎蛋白、白蛋白水平。结果与结论：肝损伤大鼠血清培养第1天细胞形态变化不大，呈梭形，仍呈编织状或漩涡状生长，第2天细胞呈短梭形，第3天细胞呈类圆形，第4天呈圆形，并有极少量细胞漂浮。肝损伤大鼠血清培养人脐带间充质干细胞4 d，其上清液白蛋白水平较诱导前和对照组均有升高趋势(P <0.001)，甲胎蛋白水平无明显变化。结果表明肝损伤大鼠血清可使脐带间充质干细胞向肝样细胞分化。
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不同保存液及放置时间对脐带源间充质干细胞存活率的影响
背景：干细胞制备完成后的放置时间与其存活率的关系是临床应用安全、有效的基础。目的：观察不同保存液及不同保存时间对脐带源间充质干细胞存活率的影响，为干细胞有效期的确定提供重要依据。方法：选用脐带源间充质干细胞制备干细胞制剂，分别采用生理盐水、培养基、培养基+生理盐水、生理盐水含表皮生长因子、培养基含低分子肝素钙悬浮保存。使用冷藏箱模拟细胞运输条件，分别在第0，6，12，18，24，30，36，42，48小时取样，进行细胞总数和细胞活率的检测。结果与结论：各组在24 h内的细胞数量和细胞活率差别不大。24 h后，培养基组和培养基含低分子肝素钙组的细胞总数和细胞活率优于生理盐水含因子组、生理盐水组、培养基+生理盐水组。干细胞制剂制备完成后，冷藏运输24 h内细胞活率可达90%以上，保存液中的营养成分及合适的pH值，可使细胞活率显著提高。
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CD133脐血干细胞对妊娠期糖尿病的影响
背景：脐血中含有大量的造血干细胞、丰富的间充质干细胞，与外周血及骨髓干细胞相比，新生儿脐血干细胞的异体排斥反应小，免疫原性低。目的：观察CD133脐血干细胞植入治疗小鼠妊娠期糖尿病的可行性，为临床妊娠期糖尿病的治疗提供新的途径。方法：采用高糖高脂喂养方法对孕鼠进行妊娠期糖尿病造模，流式细胞分选技术对脐血干细胞进行分离筛选。将筛选出的CD133脐血干细胞通过尾静脉植入妊娠期糖尿病小鼠体内，移植7 d后，测定小鼠空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇和三酰甘油水平，采用苏木精-伊红染色观察小鼠胰腺组织的损伤和修复情况，采用胰岛素抵抗稳态模型分析小鼠胰岛素抵抗指数和胰岛功能。结果与结论：采用流式细胞分选技术可以从脐血单核细胞中分选出 CD133脐血干细胞，分选纯度可达到(90.24±2.56)%；尾静脉移植脐血干细胞7 d后，妊娠期糖尿病孕鼠总胆固醇、三酰甘油水平、空腹血糖和空腹胰岛素水平均明显下降(P <0.05)，胰岛素抵抗指数下降，胰岛功能改善(P <0.05)，孕鼠胰腺组织萎缩情况逆转，炎性浸润减少。结果表明脐血干细胞移植可以使妊娠期糖尿病病情得到改善，可能与其修复胰腺损伤、降低胰岛素抵抗指数、改善胰岛功能有关。
