中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
膝骨性关节炎患者滑膜炎的发病机制及研究进展
背景:在膝骨性关节炎的发病机制研究中,逐渐认识到膝关节滑膜的炎性改变在膝骨性关节炎的发病过程中起到了重要的作用.目的:对近15年有关膝骨关节炎中滑膜炎发病机制的研究进行归纳,并对国内外在分子生物学领域进行的实验成果进行总结.方法:检索万方数据库、维普信息资源系统、CNKI数据库及PubMed数据库.以"骨关节炎"、"滑膜炎"、"发病机制"为关键词检索2000至2015年的文献,收集膝骨关节炎中滑膜炎发病机制研究的文献.共检索文献3446篇,经过筛选,终纳入36篇文献.结果与结论:膝关节滑膜炎可能是骨关节炎的超早期表现,滑膜炎的发展可能影响骨关节炎的进展.在骨关节炎的形成过程中,滑膜的自身炎性反应及释放的炎性介质和细胞因子、蛋白对疾病的发生起到重要作用,但直到今天,在分子水平还不能对滑膜炎症的发病途径进行公认的描述.
-
卵胞浆内单精子显微注射受精失败的原因及对策
背景:卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)已经成为治疗男性因素不育的首选方法,且具有很高的成功率,但卵胞浆内单精子显微注射周期的受精失败发生率仍有1％3％.目的:简要综述有关卵胞浆内单精子显微注射受精失败的相关因素及其对策.方法:检索万方数据库、中国知网及PubMed1994年1月至2015年6月与卵胞浆内单精子注射相关研究的文献.阅读文题和摘要,依据纳入排除标准对其中的60篇进行分析探讨.结果与结论:目前,研究发现卵母细胞激活失败与卵子异常、精子缺陷、患者年龄、显微操作技术及实验室环境等因素密切相关.辅助卵母细胞激活是解决卵胞浆内单精子显微注射后激活失败的关键技术.了解卵胞浆内单精子显微注射受精失败的相关因素后对其采取相应的对策,可以提高卵胞浆内单精子显微注射受精率及改善胚胎发育潜能.
-
膝关节后交叉韧带损伤的修复与重建
背景:膝关节后交叉韧带是维持膝关节稳定性的重要结构之一,损伤后引起膝关节稳定性下降,从而影响膝关节功能,严重可致膝关节病废.目的:就膝关节后交叉韧带损伤的新治疗进展进行讨论,旨在对膝关节后交叉韧带损伤的治疗有一个更好的理解.方法:应用计算机检索万方数据库、中国知网和PubMed近20年有关膝关节后交叉韧带损伤方面的文献,中文检索词为"后交叉韧带、韧带重建、损伤",英文检索词为"Posterior cruciate ligament;ligament reconstruction;Injury".结果与结论:目前后交叉韧带重建的效果仍不如前交叉韧带的重建.后交叉韧带重建关键在于移植物的选择、骨道的定位、移植物植入张力及周定方法,与患者的依从性及术后康复锻炼也密切相关.目前的研究显示缺少有力的随机对照试验(RCT)来对比不同治疗方式的疗效.
-
不同强度有氧运动对大鼠肝细胞的影响
背景:国内外大量实验研究证明,不同的运动强度容易造成大鼠肝脏的损伤,从而导致肝细胞凋亡,其具体机制尚不明确.目的:以期探讨长期不同强度运动对大鼠肝脏细胞形态和功能的影响,为缓解和预防运动性疾病提供一定的理论支撑.方法:由第一作者应用计算机检索中国期刊全文数据库(CNKI)、PubMed数据库和维普数据库有关有氧运动对肝脏细胞功能影响研究,在标题、摘要、关键词中以"运动强度;肝细胞;细胞凋亡;凋亡检测"或与"exercise intensity;hepatocytes;apoptosis;apoptosis detection"为检索词进行检索.选择与不同强度有氧运动对大鼠肝细胞影响研究有关的文献,且同一领域选择发表于权威杂志的文献.共纳入44篇文献进行分析.结果与结论:急性力竭运动可使大鼠肝细胞组织结构显著受损.大强度运动因自由基的生成和消除不均衡、肌浆网摄钙能力降低,启动大鼠肝细胞的凋亡,又因负荷量难以把握,因此研究难度较大,需要更多的实验来佐证.中等强度下大鼠的肝脏组织逐渐出现适应性改变,肝细胞的损伤减弱,机体趋向于恢复过程.递增强度和低氧状态下亦对大鼠肝细胞组织和功能产生了不同程度的损伤.结果表明,不同强度的有氧运动会对大鼠肝细胞的结构和功能造成不同程度的影响,提示在训练过程中遵循运动训练学的原则,以此缓解运动性疲劳和预防运动性疾病.
-
"3P"疗法与传统清创换药修复开放性四肢骨折创面的比较
背景:水动力清创系统联合银离子敷料和负压伤口治疗技术在治疗GustiloⅡ、Ⅲ型开放性四肢骨折中的疗效,简称"3P"疗法.目的:比较"3P"疗法与传统清创换药修复开放性四肢骨折创面的效果.方法:选择急诊就诊新疆医科大学第一附属医院开放性四肢骨折共30例,采用随机数字法分为采用"3P"疗法的试验组和传统清创换药的对照组.比较两组术后白细胞、超敏C-反应蛋白、细菌培养和药敏结果及疼痛程度.结果与结论:治疗后1,3,5,7d对照组白细胞显著高于"3P"治疗的试验组.治疗后1,7d对照组超敏C-反应蛋白显著高于试验组.细菌培养和药敏结果显示"3P"治疗可有效抑菌."3P"治疗试验组治疗后7d疼痛评分显著低于对照组(P＜0.05).结果表明水动力清创系统联合银离子敷料和负压伤口治疗技术在治疗GustiloⅡ、Ⅲ型开放性四肢骨折时可以有效的抗炎、抑菌并减少患者换药时产生的痛苦.
-
关节镜下经胫骨隧道入路与前内侧入路重建前交叉韧带效果的Meta分析
背景:一些随机对照研究试图回答关节镜下经胫骨骨道入路与前内侧入路重建前交叉韧带疗效优劣问题,得出结论各不相同.目的:关节镜下经胫骨骨道入路与前内侧入路重建前交叉韧带疗效Meta分析.方法:计算机检索PubMed、Embase、Cochrane图书馆及中国生物医学数据库、维普信息数据库、万方数据库,手工检索相关的中英文骨科杂志.收集关节镜下经胫骨骨道入路与前内侧入路重建前交叉韧带的对照试验,并评价纳入研究的方法学质量.统计软件用Cochrane协作网提供的RevMan 5.0.结果与结论:共纳入7个研究.Meta分析表明,与胫骨骨道入路相比,前内侧入路制作的股骨隧道的长度较短[RR 3.91,95％C/(1.49,6.34)]、[RR12.73,95％C/(11.91,13.55)]、股骨隧道冠状面骨道角度较垂直[RR18.18,95％CI(17.10,19.25)]、胫骨矢状面胫骨隧道位置较靠前[RR 6.16,95％CI(5.23,7.10)]、术后膝关节Lysholm功能评分高[RR 6.16,95％C/(-3.59,-2.63)],差异有显著性意义.分析结果说明,关节镜下通过前内侧入路比经胫骨隧道入路重建前交叉韧带更接近解剖重建,修复疗效更好.
-
激素性股骨头坏死过程中低氧诱导因子1α与骨细胞凋亡
背景:激素性股骨头缺血坏死发病机制未明,缺血缺氧是其根本原因,缺氧状态下低氧诱导因子1α参与多种信号通路传导.作者的前期研究发现,骨细胞凋亡与激素性股骨头缺血坏死存在关联.目的:分析低氧诱导因子1α和骨细胞凋亡是否与激素性股骨头缺血坏死存在关联.方法:选健康5月龄新西兰白兔20只,随机分为空白对照组和实验组,每组10只.实验组兔给予激素联合内毒素制备激素性股骨头缺血坏死模型.后一次给药后第4周处死所有实验动物,取双侧后肢股骨头,光镜与电子显微镜下观察形态与超微结构变化,计算各组空缺骨陷窝;应用免疫组织化学技术检测低氧诱导因子1α表达,应用TUNEL法检测骨细胞凋亡.结果与结论:实验组空缺骨陷窝率高于空白对照组(P＜0.01);实验组骨细胞凋亡高于空白对照组(P＜ 0.01);实验组低氧诱导因子1α低于空白对照组(P＜0.01);实验组中低氧诱导因子1α表达与细胞凋亡率呈负相关(r=-0.675),实验组中空缺骨陷窝率与细胞凋亡率呈正相关(r=-0.793).结果说明,在激素性股骨头缺血坏死早期,低氧诱导因子1α的低表达与骨细胞凋亡存在相关性,二者参与了激素性股骨头缺血坏死的病理变化过程,骨细胞的死亡方式为凋亡.
-
缓激肽B2受体基因多态性对膝关节骨关节炎易感性的影响
背景:据报道在膝骨关节炎患者中应用缓激肽B2受体拮抗剂能产生持久的镇痛效果,缓激肽B2受体(BDKRB2)在骨关节炎的发展中具有重要作用.目的:进一步明确缓激肽B2受体基因多态性与骨关节炎易感性的相关性.方法:共有278例膝关节骨关节炎患者和291名健康志愿者参与试验.测定受试对象的缓激肽B2受体基因多态性,根据基因型和放射学分型进行统计学处理.结果与结论:骨关节炎组和对照组中+9/-9 bp多态性的基因型分布和等位基因频率差异明显.-9/-9 bp多态性和+9/+9 bp相比,与骨关节炎的罹患风险和严重程度存在明显相关性.-9 bp等位基因的表达,与骨关节炎的Kellgren-Lawrence分型相关.结果提示缓激肽B2受体基因+9/-9 bp多态性可能成为骨关节炎易感性和严重性筛查的分子标记.
-
低骨密度和冠心病Gensini积分的相关性
背景:相关研究已经显示,冠心病和骨质疏松存在共同的病理生理机制,动脉粥样硬化和骨质疏松有明显的相关性.目的:分析骨质疏松症和冠心病患者冠脉病变严重程度的相关性.方法:回顾性分析首次行冠脉造影并明确诊断为冠心病的322例患者资料,将其分为骨质疏松组和非骨质疏松组患者,采用多元线性回归模型分析骨质疏松和反映冠脉病变严重程度的Gensini积分间的相关性.结果与结论:骨质疏松组比非骨质疏松组患者具有较少的冠脉单支病变(P＜ 0.001),更多的冠脉多支病变(P＜0.001)和更高的Gensini积分(P＜ 0.001).在校正可能的影响因素后,多元线性回归显示,骨质疏松是Gensini积分的危险因素(P＜ 0.001).相关性分析显示,骨密度和Gensini积分呈负相关关系(r=-0.36,P=0.004).结果表明,骨质疏松和冠心病冠脉病变严重程度密切相关.
-
超低频电磁场处理水对骨骼肌细胞糖脂代谢及线粒体功能的影响
背景:超低频电磁场处理水(简称频谱水)作用于生物体,在很多方面能够改善生物体的生理功能,但其对骨骼肌细胞糖脂代谢和线粒体功能的影响上,还需要更进一步的理论和实验研究.目的:探究频谱水培养对C2C12骨骼肌细胞糖脂代谢和线粒体功能的作用.方法:采用频谱水配制的DMEM培养C2C12骨骼肌细胞96 h后收样,甲基噻唑基四唑(MTT)细胞计数法检测细胞增殖,检测培养基中葡萄糖含量、细胞内三酰甘油浓度、线粒体ATP含量,线粒体膜电位,以及葡萄糖糖转运子1、4和细胞色素C氧化酶的蛋白水平.结果与结论:频谱水培养C2C12骨骼肌细胞96 h细胞葡萄糖消耗量增加2.4％(P＜0.05),三酰甘油浓度略有减少(P＞0.05),葡萄糖糖转运子1蛋白表达增加35.8％(P＜0.05),细胞色素C氧化酶1蛋白表达增加43.7％(P＜0.01),线粒体ATP含量和线粒体膜电位均没有明显变化(P＞0.05).结果提示:①频谱水培养C2C12骨骼肌细胞可通过增加骨骼肌细胞膜上葡萄糖糖转运子1的含量来提高骨骼肌细胞葡萄糖利用量.②频谱水不改变正常骨骼肌细胞线粒体膜电位.③频谱水可能通过提高线粒体中细胞色素C氧化酶1的表达量而在骨骼肌细胞能量需要增加时加强线粒体的产能功能.
-
改良细胞灌流分离装置提高心肌细胞分离效率
背景:成熟心肌细胞分离过程复杂,获得数量稳定、高质量的心肌细胞迄今仍无统一、高效、活性好、简便的方法可循.目的:通过改良Langendorff细胞灌流分离装置,探讨一种更高效的成熟心肌细胞分离方法.方法:采用细胞灌流分离装置,用Ⅱ型胶原酶经主动脉逆行灌流法分离成年SD大鼠心肌细胞.对照组采用传统Langendorff细胞灌流分离装置;实验组采用改良Langendorff细胞灌流分离装置.消化结束即刻在显微镜下观察细胞形态、杆状细胞比率并计算活细胞产量;通过锥虫蓝染色评价心肌细胞活性.结果与结论:实验组活细胞产量为(3.7±0.5)×10 7,显著高于对照组(2.1±0.4)×1 07,差异有显著性意义(P＜0.05).实验组锥虫蓝染色阴性的杆状细胞比率(85.6±5.5)％,显著高于对照组(71.8±5.7)％,差异有显著性意义(P＜0.05).提示采用改良Langendorff离体心脏灌流系统可获得高产量、高活性的心肌细胞,提高了成熟心肌细胞的分离效率,为成熟心肌细胞培养及研究奠定了基础.
-
婴幼儿增生期血管瘤内皮细胞观察:培养、鉴定及生长状况
背景:目前婴幼儿血管瘤的发病机制尚不明确,通过体外培养的血管瘤内皮细胞进行发病机制的研究为当前研究的热点.目的:探讨血管瘤内皮细胞体外培养的方法并观察其生物学特性.方法:采用组织块贴壁法原代培养血管瘤内皮细胞,第Ⅷ因子相关抗原、CD31、CD34免疫组织化学SP法鉴定内皮细胞并测出内皮细胞纯度;观察血管瘤内皮细胞的生物学特性.结果与结论:成功培养出血管瘤内皮细胞,第Ⅷ因子相关抗原、CD31、CD34均为阳性.检测纯度:CD34(+)数为(68.35±3.58)％.细胞形态为较规则的圆形、椭圆形或多角形,呈现特有"铺路石"特征,而且还具有血管瘤内皮细胞特有的"管腔形成"现象.结果表明,组织块贴壁法能成功培养较纯的婴幼儿血管瘤内皮细胞,传代后第3,4代适于体外实验研究.
-
适合人肌母细胞的无血清培养基
背景:肌母细胞体外培养大多使用添加胎牛血清培养基,存在很多不足,开发无血清培养基,更加稳定、安全、经济,有广泛的应用前景.目的:初步探索适合人肌母细胞培养的无血清培养基.方法:配制含胎牛血清培养基(DMEM/F12 1:1添加胰岛素样生长因子1、碱性成纤维细胞生长因子和体积分数20％胎牛血清),间充质干细胞无血清培养基组(无血清培养基、2％血清替代物、2 mmol/L L-谷氨酰胺,人脐带间充质干细胞,细胞纯度大于99％,UltraCULTURETM添加血清替代物,谷氨酰胺).自制无血清培养基组(GibcoTM添加胰岛素样生长因子1,碱性成纤维细胞生长因子,谷氨酰胺).3种培养基分别对人肌母细胞分别进行培养,观察肌母细胞的形态、免疫组织化学的鉴定,计算克隆的形成率,绘制细胞生长的曲线,MTT检测肌母细胞的活性,比较3种培养基培养肌母细胞增殖、分化的差异.结果与结论:各组细胞形态上无明显差异;各组免疫组织化学鉴定肌母细胞纯度均达99％;含胎牛血清培养基组和自制无血清培养基组克隆形成率显著高于间充质干细胞无血清培养基组(P＜ 0.01),含胎牛血清培养基组克隆形成率显著高于自制无血清培养基组(P＜0.01);含胎牛血清培养基组与自制无血清培养基组细胞数远高于间充质干细胞无血清培养基组;自制无血清培养基组细胞活性显著高于含胎牛血清培养基组和间充质干细胞无血清培养基组(P＜0.01).自制无血清培养基组可有效用于肌母细胞的培养,在促进肌母细胞早期贴壁、增殖上还需进一步优化.
-
程序性细胞死亡因子4是替代活化巨噬细胞的新分子标志物
背景:程序性细胞死亡因子4的表达水平与经典活化的巨噬细胞的表型负相关,但是程序性细胞死亡因子4的表达水平与巨噬细胞替代活化的关系仍不明确.目的:观察替代活化的巨噬细胞中程序性细胞死亡因子4的表达水平改变,及其对替代活化的影响.方法:用白细胞介素4、地塞米松单独刺激或联合刺激诱导NR 8383细胞的替代活化;采用qPCR检测巨噬细胞替代活化的分子标志物的表达水平,确定诱导巨噬细胞替代活化的适条件;采用qPCR和Western blot检测替代活化的巨噬细胞模型中程序性细胞死亡因子4表达的改变;分别用大鼠程序性细胞死亡因子4高表达质粒和程序性细胞死亡因子4干扰质粒转染NR 8383细胞株,采用荧光倒置显微镜观察转染的效率,并检测程序性细胞死亡因子4的表达水平;分别检测程序性细胞死亡因子4高表达和程序性细胞死亡因子4敲低后NR 8383细胞株中巨噬细胞经典活化和替代活化的分子标志.结果与结论:①白细胞介素4和地塞米松联合刺激比白细胞介素4或地塞米松单独刺激可更有效的诱导巨噬细胞的替代活化;10 μg/L白细胞介素4+50 nmol/L地塞米松刺激24 h可有效诱导巨噬细胞的替代活化.②在替代活化的巨噬细胞中程序性细胞死亡因子4的表达水平显著升高,是替代活化的分子标志.③程序性细胞死亡因子4高表达上调替代活化的分子标志的表达(P＜0.05);而敲低程序性细胞死亡因子4可下调CD206的表达(P＜0.05),并显著上调经典活化的分子标志诱导型一氧化氮合酶的表达(P＜0.05).结果表明程序性细胞死亡因子4上调是替代活化巨噬细胞的一个重要分子标志物.
-
柿鞣质水提取液对牙周膜细胞增殖的影响
背景:柿果实中含有丰富的鞣质类物质,鞣质具有抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、保护黏膜及收敛等多重种功效,其在口腔领域的实用性和安全性已得到多方面的认证.目的:观察不同浓度的柿鞣质水提取液对牙周膜细胞增殖的影响.方法:将青少年因正畸需要拔除的前磨牙放置于无菌的含有DMEM培养基中,体外培养牙周膜细胞.对全柿果实进行超声提取,牙周膜细胞与不同质量浓度(0.013 3,0.025 9,0.038 9,0.088,0.147,0.440,0 g/L)的柿鞣质水条件培养液分别培养24,48,72 h后,采用MTT法、考马斯亮蓝法和碱性磷酸酶法分别观察不同质量浓度柿鞣质水提取液在不同时间点对牙周膜细胞数量、细胞总蛋白合成以及绌胞活性的影响.结果与结论:在24,48,72h3个时间点,各质量浓度柿鞣质水提取液(0.013 3,0.025 9,0.038 9,0.08 8,0.147及0.440 g/L)均能促进人牙周膜细胞数量增长,促进蛋白质的合成,并使得细胞活性增强,且效应呈浓度依赖性和时间依赖性.结果提示柿鞣质水提取液具有促进人牙周膜细胞增殖的作用.
-
低氧训练时心肌组织细胞低氧诱导因子1α与凋亡相关蛋白的表达
背景:运动对心肌细胞凋亡的影响有了比较多的研究,但低氧训练对心肌细胞凋亡的研究不多见.低氧诱导因子1α是否控制了Bcl-2家族的表达而影响凋亡发生,尚未明确. 目的:分析低氧训练时心肌组织低氧诱导因子1α蛋白表达情况与凋亡蛋白的相互关系.方法:将健康雄性SD大鼠60只,随机分为6组:①对照组常温常氧下喂养,不运动.②低氧组在低氧环境下喂养,不运动.③运动组常温常氧下运动.④低住高练组常氧下居住,低氧、常氧训练交替进行.⑤高住低练组低氧下居住,常氧下训练.⑥高住高练低练组低氧下居住,低氧、常氧训练交替进行.运动组大鼠负荷跑台训练8周,训练每周6d,运动速度和运动时间连续递增,运动速度从开始的10 m/min、持续时间为15 min递增至第8周的25 m/min、持续时间为50 min.低氧程度由开始从海拔1 500 m增加到第8周达到海拔3 600 m.训练结束后,运用苏木精-伊红染色、TUNEL法和蛋白免疫组织化学方法检测大鼠心肌组织细胞低氧诱导因子1α、Bcl-2、Bax的表达变化.结果与结论:①常氧时低氧诱导因子1α几乎不表达,低氧可增加低氧诱导因子1α的蛋白表达,低氧复合运动,表达更多.②低氧组和低氧运动组大鼠心肌组织Bax表达变化不是很明显,但Bcl-2表达就远远低于常氧不运动组.③低氧组、运动组与低氧运动组心肌组织细胞凋亡较明显,但三者相互之间比较差别较小,说明低氧结合运动不会使细胞凋亡更加严重.结果表明各实验组Bcl-2表达显著低于对照组,Bax表达变化不明显.但低氧可增加低氧诱导因子1α的蛋白表达,低氧复合运动,表达更多.说明低氧诱导因子1α有可能调 节Bcl-2、Bax的表达,从而控制细胞凋亡的发生与否.
-
TeeTester与T-ScanⅢ咬合分析仪对正常(牙合)青年学生咬合力特征的比较
背景:TeeTester和T-ScanⅢ两种咬合分析仪在口腔临床各领域已被广泛应用,国内对两种仪器的使用尚未见到对比数据.目的:应用TeeTester与T-ScanⅢ两种咬合分析仪研究正常(牙合)青年学生的咬合特征,并比较两系统咬合分析的差异.方法:采用TeeTester咬合系统V3.2.0记录13例正常(牙合)受试者在牙尖交错位状态下的左右侧咬合力分布百分比、(牙合)力中心点位置、(牙合)力不对称指数、前牙咬合力占(牙合)力总值的百分比,采用T-ScanⅢV8.01咬合分析仪记录13例正常(牙合)受试者在ICP时的上述指标,并在25％,50％,75％,100％大咬合力时的4个时段对上述各项指标进行分析.检测数据导入SPSS19.0软件进行统计.结果与结论:①TeeTester与T-ScanⅢ两系统所测得的左右侧咬合力分布百分比差异均无显著性意义(P＞0.05).②两系统所测得的所有受试者(牙合)力中心点绝大多数在规定灰圈内,且均位于前磨牙区.两系统所测得(牙合)力中心点距中线的垂直距离、(牙合)力中心点偏移方向,差异均无显著性意义(P＞0.05).③两系统所测得的(牙合)力不对称指数差异无显著性意义(P＞0.05).④TeeTester所测得的前牙咬合力占总(牙合)力的百分比大于T-ScanⅢ所测结果,且在50％,75％,100％大咬合力时差异有显著性意义(P＜0.05).结果说明,①正常(牙合)者左右侧咬合基本平衡.②左右侧咬合力分布百分比、(牙合)力中心点、(牙合)力不对称指数可以作为临床上判断咬合是否正常的指标.③TeeTester与T-ScanⅢ在前牙咬合力占总(牙合)力百分比的测量方面存在差异,需要继续关注和研究.
-
转化生长因子β1刺激改良培养小鼠原代肝星状细胞的活化
背景:肝星状细胞是肝内分泌细胞外基质的关键细胞类型,因此在肝纤维化研究中很重要.目的:实验改良了肝星状细胞原代培养方法,获得充足的细胞量,用转化生长因子β1刺激活化,研究致纤维化的相关因子表达情况.方法:氯胺酮麻醉小鼠后采用门静脉穿刺原位灌注肝脏的方法分离肝脏,采用密度梯度离心获得肝星状细胞,利用形态学、免疫荧光染色等方法对原代肝星状细胞进行鉴定;将培养24 h肝星状细胞用质量浓度10 μg/L转化生长因子β1刺激48 h,同时设PBS组进行对比.结果与结论:通过原位灌注肝脏并且酶消化的方法可以成功获得小鼠原代肝星状细胞,并且锥虫蓝染色活率为(97.2±0.8)％,免疫荧光染色纯度为(90.4±1.2)％,细胞计数总量约2.5×106/只.实时荧光定量聚合酶链式反应检测显示,与PBS组比较,转化生长因子β1刺激组的肝星状细胞平滑肌肌动蛋白α、Ⅰ型胶原蛋白、转化生长因子β受体1、转化生长因子β受体2 mRNA表达水平明显升高(P＜0.05).结果证实,实验采用的改良的培养方法可更高效高质量的获得原代肝星状细胞,转化生长因子β1刺激可导致肝星状细胞活化,分泌致纤维化因子.
-
Nrf2介导姜黄素对软骨细胞氧化应激损伤的保护作用
背景:研究表明氧化应激在骨关节炎的发生发展中起重要作用,姜黄素具有抗氧化、清除自由基作用.目的:通过建立H2O2诱导软骨细胞损伤模型,观察姜黄素对软骨细胞的保护作用.方法:体外培养SD大鼠关节软骨细胞,随机分为正常组、模型组(H2O2)、姜黄素低、中、高剂量剂量组(20,40,80 μmol/L).姜黄素与软骨绌胞培养48 h后,加入H2O2,24 h后收集细胞,MTT法测定细胞存活率,测定细胞超氧化物歧化酶、丙二醛、过氧化氢酶含量,Real-Time PCR和Western blot法检测细胞Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平,荧光显微镜观察细胞核形态变化.结果与结论:与正常组比较,模型组软骨细胞存活率降低,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量降低,丙二醛含量增加,Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平下调,呈现出凋亡细胞的特征.经姜黄素预先处理,软骨细胞存活率升高,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶含量升高,丙二醛含量降低,Nrf2 mRNA及其蛋白表达水平升高,细胞核形态改善,随姜黄素浓度升高变化更明显.结果说明,姜黄素对H2O2所致软骨细胞氧化应激损伤保护作用可能是通过增强Nrf2表达来实现的.
-
骨形态发生蛋白复合物结合CAD/CAM技术原位修复喉甲状软骨缺损
背景:临床修复喉甲状软骨缺损时使用一定的支架材料.骨形态发生蛋白具有成骨诱导活性,与其他形式的载体联合起来进行复合应用可以更好的发挥出其诱导成骨作用.联合使用计算机辅助设计/计算机辅助制造技术能提高修复效果.目的:进一步验证骨形态发生蛋白复合物结合计算机辅助设计/计算机辅助制造技术在原位修复喉甲状软骨缺损中的应用效果.方法:纳入18只新西兰大白兔,对动物喉部进行三维扫描,建立兔甲状软骨三维数字模型.利用泡沫凝胶注模法制备羟基磷灰石支架,再制备骨形态发生蛋白复合物.18只动物随机分为观察组和对照组.两组兔行一侧甲状软骨切除后,观察组植入珊瑚羟基磷灰石支架;对照组填充明胶海绵.处理后4,8,12周,进行大体观察和评分;处理后12周,对动物行喉镜检查,喉组织常规切片后进行苏木精伊红染色,进行组织学观察.结果与结论:处理后12周,对照组兔的喉腔出现明显的变窄现象,且存在轻微充血;观察组喉腔黏膜光滑,且通畅、宽敞,未出现肉芽生长情况.处理后4,8,12周,两组喉甲状软骨评分均呈现出不断下降的情况,且不同时间点,观察组评分均显著低于对照组(均P＜0.05).处理后12周,对照组未出现成熟骨细胞和软骨细胞的生成;观察组则可见植入材料完全降解,存在大量多核样组织细胞增生和吞噬,手术区域软骨母细胞出现增生现象,并伴有成软骨区域形成情况,另外还以观察到软骨骨质形成以及软骨细胞增生现象.结果表明,利用骨形态发生蛋白复合物结合计算机辅助设计/计算机辅助制造技术进行原位喉甲状软骨缺损修复可以获得良好的效果,实验过程中所使用的复合物具有良好的骨诱导作用以及组织相容性.
-
MRI不同序列对骶髂关节软骨成像的比较
背景:平片及CT不能显示关节软骨的改变,磁共振虽可显示软骨,但常规序列软骨显像效果欠佳,因此若要提高MRI检出软骨病变的能力,序列的优化显得非常重要.目的:比较骶髂关节常用磁共振成像序列,筛选适合骶髂关节软骨MRI佳成像序列.方法:对45健康志愿者分别行骶髂关节MRI自旋回波T1Wl、T2Wl、T1-flash-3d-water-cor、T2-me3d-cor和T2-me2d-cor和T1-se-cor-water-fil扫描,比较各个序列显示骶髂关节软骨的清晰度、内部信号变化及软骨表面缺损.结果与结论:自旋回波T1Wl和T2Wl序列45均显示骶髂关节软骨为一条稍高信号带,关节间隙不清;梯度回波T1-se-cor-water-fil序列45均显示两侧关节面骨皮质与髂侧软骨、骶侧软骨及软骨间隙形成的5条平行线状结构;T2-me3d-cor、T1-flash-3D-water-cor-fil序列45例受检者关节软骨为一条明亮、清晰高信号,与周围骨皮质及骨髓分界非常清晰,但骶侧、髂侧软骨不能够区分.T2-me2d-cor序列37例能显示髂侧、骶侧软骨及软骨间关节间隙,8例分辨不清;弥散成像序列仅部分层面能显示关节软骨,诸结构显示较模糊,信号强度对比不鲜明.结果说明,T1-se-cor-water-fil在关节软骨显示程度、内部信号变化和软骨表面缺损程度等方面明显优于其他序列.T1-flash-3d-water-cor、T2-me3d-cor和T2-me2d-cor对软骨表显示方面优于常规MRI序列,但不如T1-se-cor-water-fil.
-
膝关节自体软骨细胞移植修复软骨缺损:MR成像评价生物力学指标
背景:磁共振(MR)检查目前被认为是关节软骨的佳无创性检查方法,通过MR检查可以发现软骨损伤及软骨下骨病变.目的:磁共振成像观察膝关节软骨缺损自体软骨细胞移植修复后软骨生物力学指标变化.方法:回顾性分析10例膝关节软骨损伤患者临床资料,均接受自体软骨细胞移植治疗.移植后随访12个月,分别于移植后3,6,12个月对患者进行膝关节损伤与骨关节炎评分(KOOS)和磁共振成像检查,了解软骨生物力学指标变化情况.结果与结论:①膝关节损伤与骨关节炎评分:经比较,移植后3,6,12个月患者的疼痛、症状、日常活动、运动和娱乐、生活质量各项指标评分较移植前均出现显著提高(P＜0.05).②患者软骨生物力学MR成像:移植后3个月,患者的软骨缺损部位均大的部分得到良好的填充;移植后6个月,移植软骨与周围软骨基本处于完全整合状态;移植后12个月复查,修复组织信号强度与周围组织呈现出良好的一致现象.随着时间的推移,移植区的T2值呈现出不断下降的情况.且移植后3,6,12个月的T2值均显著小于移植前(P＜0.05);移植后6,12个月的T2值均显著小于移植后3个月(P＜0.05);移植前与移植后3个月,移植区的T2值均显著大于正常区(P＜0.05).结果表明,磁共振成像检查可以了解膝关节软骨缺损自体软骨细胞移植后不同时间软骨修复的生物力学情况,掌握治疗效果,是一种安全、无创的随访方式.
-
体外培养条件下兔脊柱运动节段髓核组织的变化
背景:椎间盘器官体外培养模型作为体内试验和细胞培养的联系,能够在原生基质中维持细胞活性,从而保留了重要的细胞与细胞及细胞与基质的相互作用.目的:观察体外培养兔脊柱运动节段模型髓核组织的变化.方法:将13只新西兰白兔处死后在无菌条件下取出脊柱运动节段50个,在高渗培养基中进行整体培养(410 mOsm/kg),于培养前及培养后第3,7,14,21天,各取10个椎间盘分别进行苏木精伊红染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学、蛋白多糖含量和髓核细胞活力测定.结果与结论:培养14d苏木精-伊红显示椎间盘组织结构基本保持完整,21 d椎间盘组织形态学破坏;Ⅱ型胶原免疫组织化学染色强度14d无显著差异(P＞0.05),21 d染色变浅,与之前各时间点相比有显著差异(P＜0.05);蛋白多糖PAS/AB染色7d内强度无降低,14d强度有所减弱,21 d染色强度进一步减弱;髓核细胞荧光检测21 d髓核细胞荧光强度减弱,细胞活性降低,与之前各时间点比较差异明显(P＜0.05).结果表明,培养14 d兔脊柱运动节段椎间盘髓核组织退变不显著,培养21 d模型髓核退变明显,脊柱运动节段目前在14d内可作为研究生物力学对椎间盘影响的体外实验模型.
