中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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聚乙醇酸生物支架与胰岛的共培养
背景:以往的研究表明,胰岛细胞体外培养的时间不宜过长,否则会出现纤维组织过度增生,使胰岛大量死亡,而导致移植失败,所以改善胰岛细胞体外培养环境是非常重要的.目的:将大鼠胰岛种植在聚乙醇酸生物支架上,并进行胰岛与支架共培养,观察支架上胰岛细胞的生长状态、胰岛细胞的形态和胰岛细胞的分泌功能,以寻找胰岛细胞体外生存的良好环境.设计、时间及地点:体外培养,对比观察实验,于2005-06/2008-12在哈尔滨医科大学附属第一医院,卫生部细胞移植重点实验室完成.材料:聚乙醇酸支架纤维直径15 μ m,网孔100~150 μ m,空隙率为97%,厚度为1.0~2.0 mm.细胞培养前将支架浸泡入体积分数为75%乙醇溶液中 30 min,PBS冲洗3次,吹干后放入2 g/L多聚赖氨酸中浸泡30 min,消毒后备用.方法:采用胶原酶V分离和消化大鼠胰岛,对照组胰岛加入含体积分数20%胎牛血清、10 g/L肯霉索-链霉素-两性霉素、10 mmol/L Hepes的RPMI-1640培养液;支架组胰岛放在多聚赖氨酸包被的聚乙醇酸支架上,再加入同样的培养基,每个培养肌中细胞浓度为0.6×103,将两组细胞置于体积分数5%CO2、37℃的恒温培养箱中培养.主要观察指标:应用双硫腙胰岛特异性染色,计算胰岛的数量及检测胰岛的纯度;MTT法检测胰岛的成活率;放射免疫法测定胰岛细胞培养上清液中的胰岛素含量;并用扫描电镜对支架上胰岛的黏附生长进行观察.结果:分离和消化后的胰岛被双硫腙染成红色,胰岛外分泌腺不着色,胰岛纯度≥85%:MTT及胰岛功能检测结果显示,支架组的胰岛成活率及胰岛功能明显增高,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05);扫描电镜观察,胰岛紧密黏附存聚乙醇酸支架上,支架卜胰岛成三维立体生长.结论:聚乙醇酸支架与大鼠胰岛共培养可改善胰岛的成活率、胰岛的功能及形态,并使胰岛体外生存期延长.
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纤维蛋白支架三维培养人羊膜细胞的生物学特性
背景:未足月胎膜早破是产科常见的妊娠期并发症,三维培养可使组织缺损恢复解剖学上的完整性,使得细胞培养成为更有实用价值的技术.目的:通过观察人羊膜细胞在纤维蛋白支架上三维培养后的生物学特性变化,探讨细胞/支架复合物模拟体内羊膜组织用于未足月胎膜早破破口修复的可能性,并与普通平面二维培养结果进行比较.设计、时间及地点:细胞~支架学体外观察,于2007-12/2008-11在重庆医科大学基础研究所完成.材料:剖宫产孕妇的羊膜组织,由重庆医科大学附属第一医院妇产科提供.纤维蛋白原为Sigma公司产品.方法:将酶消化法和反复贴壁法相结合,体外分离培养并纯化羊膜上皮细胞和羊膜问质细胞.纤维蛋白原聚合后,取处于对数生长的上皮细胞,接种于纤维蛋白支架表面,模拟胶上型二维立体培养;在纤维蛋白原聚合前,将处于对数生长的间质细胞和纤维蛋白溶液混合,模拟胶内型三维立体培养.同时将上皮细胞年间质细胞接种于24孔板中,进行普通平面二维培养.主要观察指标:倒置显微镜及电镜下观察细胞的形态学特征,不同培养条件下间质细胞的增殖情况,间质细胞和支架的相互作用.结果:在纤维蛋白支架表而,上皮细胞形态较平面培养圆润,细胞间可见伪足伸出,表面微绒毛丰富;在纤维蛋白胶中,间质细胞呈梭形,沿支架伸展,可见细胞在不同平面形成刚络状.三维立体培养下,间质细胞增殖活性平稳,但增长幅度较平面培养缓慢.在胶内型三维立体培养中,随时间的延长纤维蛋白胶发生收缩,凝胶厚度逐渐降低,至第5天纤维蛋白胶厚度占原厚度的40%左右,第15天收缩到原厚度的10%左右.结论:羊膜上皮细胞和羊膜间质细胞能够在纤维蛋白支架上立体生长,增殖活性平稳:在细胞-纤维蛋白支架复合物中,可观察到纤维蛋白胶随着时间推移而发生收缩的现象,提示羊膜细胞-纤维蛋白支架复合物可模拟体内组织,作为胎膜早破破口修复的生物学材料.
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改性小肠黏膜下层组织构建仿生小口径人造血管
背景:采用血液相容性良好的小肠黏膜下层,通过仿生技术构建小口径人造血管,以期望既能及时修复血管缺损,又能形成生物血管结构保持长期通畅.目的:观察利用改性小肠黏膜下层组织构建仿生小口径人造血管修复股动脉缺损的效果.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-01/2008-05在上海市第六人民医院,上海市四肢显微外科研究所完成.材料:自犬隐动脉分离出血管内皮细胞和平滑肌细胞,与胶原蛋白凝胶均匀混合,分别种植于改性小肠黏膜下层膜表面,制成3mm仿生3层人造血管.方法:15只成年犬制备4 cm长的双侧股动脉缺损动物模型.实验组植入3层血管支架于一侧股动脉缺损处,端端外翻吻合;对照组植入单层小肠黏膜下层血管于另一侧股动脉缺损处,端端吻合.主要观察指标:①彩色多酱勒超声检测血管支架的通畅情况、血管内径及血流状态.②苏木精-伊红染色后观察管壁血栓附着情况、管壁内皮覆盖和管壁平滑肌细胞生长排列情况.③扫描和透射电镜观察血管壁内皮细胞和平滑肌细胞分布情况.结果:实验组14个人造血管早期吻合口轻度狭窄,后来管腔逐渐平滑,保持通畅,通畅率93.3%,对照组有6个发生狭窄、栓塞、破裂,通畅率60%.组织学及电镜检测实验组管腔面有完整内皮细胞覆盖,管壁中有较多平滑肌细胞,捧列规则;对照组管壁见少量细胞,排列紊乱.结论:改性小肠黏膜下层仿生小口径人造血管修复动脉缺损效果满意.
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PHEA-MTX和PHEA-suc-MTX的合成与表征
背景:在大分子药物的设计中,往往需要在载体与药物之间引入新的基团,即连接基.选择合适的连接基,可以控制药物在体内的释放形式和释放速率.目的:制备和表征一种新的大分子靶向抗肿瘤药物.设计、时间及地点:观察实验,于2007-06/2008-11在南京大学生命科学院医药生物技术国家重点实验室完成.材料:L-天冬氨酸,无水N,N-二甲基甲酰胺,BOP试剂购自美国Sigma公司,其余均为国产试剂.甲氨蝶呤出连云港恒瑞制药有限公司赠送.方法:实验把甲氨喋呤与PHEA和PHEA-suc偶联,制备琥珀酰化的α,β-聚-(2-羟乙基)-D.L-天冬酰胺-甲氨喋呤(PHEA-Suc-MTX)和α,β-聚-(2-羟乙基)-D,L-天冬酰胺-甲氨喋呤(PHEA-MTX).主要观察指标:采用红外图谱、核磁共振、元素分析方法检测大分了靶向药物的结构,紫外分光光度法测定PHEA-Suc-MTX和PHEA-MTX中甲氨喋呤的含量.结果:PHEA-MTX和PHEA-suc-MTX的结构通过红外光谱和核磁共振分析确认.甲氮喋呤与PHEA及PHEA-suc共价偶联,其甲氨喋呤含量分别为5.80%及5.86%.结论:合成的大分子靶向药物PHEA-MTX、PHEA-SUC-MTX结构稳定.
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富含酸性成纤维细胞生长因子纤维蛋白凝胶预防失神经支配运动终板退行性变的免疫组织化学研究
背景:作者前期研究证实酸性成纤维细胞生长因子纤维蛋白凝胶植入大鼠失神经支配肌肉可以明显减轻运动终板退行性改变及肌萎缩.目的:采用免疫组织化学研究方法进一步探索酸性成纤维细胞生长因子纤维蛋白凝胶预防失神经支配运动终板退行性改变的作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/12在南方医科大学珠江医院完成.材料:选取清洁级SD大鼠24只,随机分为3组:酸性成纤维细胞生长因子+纤维蛋白凝胶组、单纯植入纤维蛋白凝胶组、空白对照组,每组8只.方法:各组大鼠全麻状态下切断右侧腓总神经(距神经入肌点约1 cm处).酸性成纤维细胞生长因子+纤维蛋白凝胶组缝合神经外膜,失神经支配胫前肌神经区周围肌间隙植入酸性成纤维细胞生长因子纤维蛋白凝胶;单纯植入纤维蛋白凝胶组修复神经肌肉植入纤维蛋白凝胶:空向对照组修复神经肌肉不给药.主要观察指标:6周后分离切取腓总神经胫前肌分支神经肌肉接头及其附近肌肉,采用SP法免疫组织化学进行酸性成纤维细胞生长因子受体染色,观察酸性成纤维细胞生长因子受体表达部位:酸性成纤维细胞生长因子受体阳性毛细血管计数,采用图像分析测定毛细血管壁酸性成纤维细胞生长因子受体灰度值.结果:①光镜下见酸性成纤维细胞生长因子受体主要定位存毛细血管壁:酸件成纤维细胞生长因子+纤维蛋白凝胶组毛细血管酸性成纤维细胞生长因子受体表达数量多,血管壁内酸性成纤维细胞生长因子受体表达广泛、密度高,毛细血管密集;单纯植入纤维蛋白凝胶组及空白对照组毛细血管酸性成纤维细胞生长因子受体表达数量少,血管壁内酸性成纤维细胞生长因子受体表达范围少、密度低,毛细血管稀少:酸性成纤维细胞生长因子+纤维蛋白凝胶组毛细血管酸性成纤维细胞生长因子受体表达阳性率高于单纯植入纤维蛋白凝胶组及空白对照组.③酸性成纤维细胞生长因子+纤维蛋白凝胶组酸性成纤维细胞生长因子受体表达量高于单纯植入纤维蛋白凝胶组及空白对照组.结论:酸性成纤维细胞生长因子作用于毛细血管,通过改善运动终板附近微循环而保护运动终板.
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海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化大鼠卵巢细胞腹腔异体移植以及对肾上腺的影响
背景:应用海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊技术包裹细胞进行异体移植,被证明是一种可避免受体产生免疫排异的有效方法.目的:观察海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊化卵巢细胞种植于去卵巢大鼠腹腔后对受体大鼠肾上腺的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-03/2008-09在首都医科大学生殖医学研究中心完成.材料:取Wistar大鼠卵巢分离培养卵巢细胞,进行微囊化处理,制备包裹卵巢细胞的海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊.方法:将40只雌性Wistar大鼠随机分为4组:去势组于无菌条件下切除双侧卵巢;微囊移植组手术摘除双侧卵巢后腹腔移植包裹卵巢细胞的海藻酸钠-多聚赖氨酸-海藻酸钠微囊;雌激素替代治疗组手术摘除双侧卵巢后腹腔注射乙烯雌酚 0.2 mg/kg,每3 d注射1次.正常对照组不进行任何处理.主要观察指标:干预后30 d放射免疫法检测大鼠血清中雌激素水平,观察肾上腺切片的形态学特点,并利用免疫组织化学SP法检测各组大鼠肾上腺皮质各层增殖细胞核抗原表达变化.结果:①放射免疫法检测正常对照组,雌激素替代治疗组以及微囊移植组雌激素水平明显高于去势组,而正常对照组,微囊移植组,雌激素替代治疗组之间雌激素水平差异无显著性意义.②去势组肾上腺皮质网状带增厚,网状带与球束状带比值增大,束状带和网状带增殖细胞核抗原阳性表达都增加;而微囊移植组及雌激素替代治疗组增殖细胞核抗原阳性细胞明显低于去势组,差异具有显著性意义.结论:微囊化大鼠卵巢细胞异体移植后,可在受体大鼠体内继续合成和分泌雌二醇,所分泌的雌激素可以纠正肾上腺皮质因卵巢摘除而导致的形态改变,并与雌激素替代治疗疗效相近.
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壳寡糖对大肠杆菌的抑制作用
背景:已有实验证明,抗菌抑菌作用是壳寡糖的主要活性之一.目的:研究壳寡糖对大肠杆菌的抑菌效果.设计、时间及地点:生物工程实验,于2007-06/2008-10在河南师范大学微生物实验室完成.材料:壳聚糖为郑州世纪百川食品添加剂有限公司产品,脱乙酰度93%,相对分子质量290 000.方法:高产壳聚精酶菌株接种至5 L的发酵罐中发酵培养,所得壳聚糖酶粗酶液经乙醇沉淀获得壳聚精混合酶.壳聚糖混合酶经过HiTrap SP刚离了交换柱分离纯化得壳聚糖外切酶和壳聚糖内切酶,分别用壳聚糖混合酶,壳聚糖外切酶和壳聚糖内切酶降解质量浓度10.0 g/L壳聚精,终制备5种不同相对分子质量壳寡糖S 1,S 2,S 3,S 4,S 5,相对分子质量分别为500.2 100,3 700,5 200,9 000,在不同浓度不同pH值下对大肠杆荫抑菌活性进行实验分析.主要观察指标:不同相对分子质量的壳寡糖对大肠杆菌生长的影响;不同质量浓度壳寡糖对大肠杆菌抑菌活性;pH值对壳寡糖抑菌活性的影响.结果:在8 h之内,5种壳寡糖对大肠杆菌均有明显的抑菌效果.培养8 h之后:S1,S4和S5的抑菌效果逐渐减弱.培养16 h之后:S1培养基中大肠杆菌的数量超过正常状态.相对分子质量2 100的壳寡糖对火肠杆菌抗菌作用强.其抑菌作用随壳寡糖质量浓度的增加而增强.测得pH值5.0,5.5,6.0,6.5和7.0壳寡糖S2溶液对大肠杆菌抑菌活性分别为0.097,0.086,0.061,0.081,0.091,在pH值6.0附近,壳寡糖S2对大肠杆菌抑制作用好.结论;壳寡糖的相对分子质量大小是抑制大肠杆菌生长的主要影响因素.
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有机蒙脱土抗菌剂的制备及表征
背景:课题组已经对季铵盐蒙脱土抗菌剂进行了系统的研究,但具有耐热性不足的缺点.季鳞盐是新一代高效、广谱、低毒杀菌剂,与对应的结构相似的季铵盐比较,季鳞盐的热稳定性更好.目的:观察新型有机蒙脱土抗菌剂结构、表面性能和抗菌活性.设计、时间及地点:体外观察实验,于2008-09/12在暨南大学化学系科研实验室完成.材料:将十二烷基三甲基季鳞阳离子插入蒙脱土层问制备新型有机蒙脱土抗菌剂.方法:反应体系中按季鳞刚离子与钠基蒙脱土的阳离子交换容量的摩尔比分别为0.5∶1,1:1和1.5∶1加料,采用离子交换法制备了3种不同季鳞阳离子含量的有机蒙脱上抗菌剂.主要观察指标:分别通过热分析仪,X射线衍射仪,zeta 电位仪,比表面积和孔隙度分析仪测定样品的季鳞刚离了含量和热稳定性、层间距的变化、zeta电位、比表面积.采用二倍稀释法测定样品对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的低抑菌浓度.结果:有机蒙脱土抗菌剂中季鏻阳离子的热分解起始温度都大于300℃,具有良好的热稳定性.而且随着季鳞阳离子含量的增加,有机蒙脱土抗菌剂的层间距增大,zeta电位越正,比表面积越低,抗菌活性越好,但是当季镜阳离子的添加量超过其阳离子交换容量时,对应有机蒙脱土抗菌剂中的季鳞阳离子含晕增加不大.因此实验中季鳞阳离子与钠基蒙脱土的阳离子交换容苗的合适摩尔比为1∶1,对应的有机蒙脱土抗菌剂中的季鳞阳离子含量为21.93%,zeta电位为-19.75 mV,比表面积为47.36 m2/g,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的低抑菌浓度分别为250和120 mg/L.结论:季鳞阳离子含量为21.93%的宵机蒙脱土抗菌剂的热稳定性好、抗菌活性高.
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纤维蛋白胶与异种骨复合支架中立体培养的免骨髓基质细胞
背景:单一的支架材料往往具有一些自身难以克服的缺点,拟构建一种具有较多优越性的复合支架,希望能够解决种子细胞与支架材料黏附的问题.目的:应用纤维蛋白胶、异种无机骨构建骨组织工程复合支架材料,探讨兔骨髓基质细胞在这种复合支架材料中立体培养情况.设计、时间及地点:观察实验,于2007-11/2008-03在吉林大学中日联谊医院骨科研究室、天津理工大学机械工程学院完成.材料:纤维蛋白原与凝血酶按比例制备纤维蛋白胶,牛松质骨经去脂去蛋白等无机化处理后与纤维蚩自胶复合,制成复合骨支架材料.方法:将兔骨髓基质细胞作为种子细胞进行传代培养,收集后在纤维蛋白胶、异种无机骨构成的复合支架中进行立体培养.主要观察指标:采用相差显微镜、透射电子显微镜等手段观察骨髓基质细胞在纤维蛋白胶中的生长状况.结果:相差显微镜下观察见骨髓基质细胞均匀分布于复合支架中,具有良好活性,细胞不断增殖、分化,培养4周骨髓基质细胞形成密集立体网状.透射电子显微镜下见复合支架中培养4周的基质细胞内细胞器结构完整,局部有细突起,胞质内可见线粒体,核糖体,粗面内质网.结论:在纤维蚩白胶与异种无机骨构建的复合支架中骨髓基质细胞具有良好活性,可迅速扩增生长.
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表面封闭剂在复合树脂充填中对微渗漏的影响
背景:许多学者在改进复合树脂和粘接剂的性能进行了大量的实验工作,但仍不能完全消除复合树脂充填体材料与牙体之间的微渗漏,微渗漏是影响牙体修复远期疗效的上要障碍之一.目的:观察Fortify Light-Cured表皿封闭剂减少复合树脂修复体边缘微渗漏的作用.设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-01/08在解放军四五八医院口腔科完成.材料:选择因正畸拔除的前磨牙45个,在每个牙齿的颊血颈部分别制洞,大小为3 mm×3 mm×2 mm的长椭圆形窝洞,窝洞颌壁位于釉质,颈壁位于牙骨质.Fortify Light-Cured表面封闭剂为美国Bisco公司产品.方法:将实验牙随机分为3组:表面封闭剂组、粘结剂组、空白对照组,15颗/组.表面封闭剂组:用可乐丽菲露SE BOND牙质粘合用处理剂处理20 s,中弱气流彻底于燥,涂布粘接剂,光照射10 s,可乐丽菲露复合树脂允填,光照40 s,调磨抛光后,牙质粘合用处理剂处理牙一树脂充填体表面,中弱气流彻底十燥,均匀涂布表面封闭剂,光照20 s.粘结剂组:与表面封闭剂组处理方式相同,粘接剂均匀涂布代膂表面封闭剂.空白对照组:也以同样的方式处理但调磨抛光后,将所有实验牙置于37℃生理盐水24 h备用.主要观察指标:体式显微镜下测量染料渗入洞壁的深度,扫而电镜下观察树脂与牙体组织粘结面的情况.结果:复合树脂充填修复后使用表面封闭剂、粘接剂封闭充填体表面,边缘微渗漏明显减少.Kruskal-Wallis检验对3组树脂进行比较,差异均有显著性(P<0.05).各组内冠侧壁与龈壁侧相比,冠侧壁略低于龈侧壁,但差异无显著性(P>0.05).扫描电镜下观察可见,表面封闭剂组:树脂与牙体组织结合良好;粘结剂组:树脂与牙体组织间出现裂隙;空白对照组:树脂与牙体组织间出现裂隙,裂隙较粘结剂组明显.结论:使用表而封闭剂可减少微渗漏的程度.
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新型纳米自组装短肽KVDV-16作为生物支架材料的可行性
背景:设计合成和构建纳米生物材料如纳米自组装短肽是以一种"从下而上"的方式完成,其在生物医学工程方面潜在的应用价值引起了众多研究团队越来越广泛的兴趣.目的:初步探讨纳米自组装短肽KVDV16水凝胶在细胞三维培养方面的可行性.设计、时间和地点:体外观察实验,于2007-11/2008-11在四川大学纳米生物医学技术与膜生物学研究所纳米生物实验室进行.材料:短肽KVDV16(纯度为95%,为了保护肽的两端,对其N端和C端分别进行乙酰化和酰胺化);人肝细胞系L-02和肝癌细胞系SMMC7721.方法:圆二色谱仪和傅里叶红外光谱检测短肽KVDV16水凝胶在不同理化条件下的二级结构;原子力显微镜检测其水凝胶形成的纳米级结构特征;扫描电子显微镜观察其形成的纳米三维支架.主要观察指标:β折叠二级结构,纳米纤维结构特征,细胞在肽支架材料中的生长、增殖情况.结果:短肽KVDV16形成的β折叠二级结构在高温下很稳定.在不同的pH(3,7,10)甚至变性剂1%十二烷基磺酸钠的作用下,β折叠二级结构也只发生轻微的变化.原子力显微镜证实其由纳米纤维结构组成.L-02和SMCC7721细胞进入了KVDV16支架材料,镶嵌在纳米纤维网中,并很好地在此三维环境中生长.结论:实验设计的短肽KVDV16是对自组装系统的一个补充,此短肽表现出来的性质使其能发展成为组织工程中细胞培养的三维支架材料.
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三种不同脱脂方法对猪骨脱脂的效应
背景:异种骨的脱脂处理是骨移植的首要步骤,超临界CO2,氯仿/甲醇和乙醚是骨脱脂的3种常用方法.目的:比较超临界CO2,氯仿/甲醇和乙醚的脱脂方法对猪骨的脱脂效采,探索异种猪骨的佳脱脂方案.设计、时间及地点:对比实验观察,2006-09/2007-05在四川人学移植免疫实验室完成.材料:猪骨均取自于-头6月龄的内江猪,去软组织和骨膜,修整成5 mm×5 mm×5 mm大小骨块,共15个.方法:将15个骨块随机分成3组:超临界CO2脱脂组、氯仿/甲醇脱脂组、乙醚脱脂组,5个/组,脱脂前各组骨块用天平称取质量.超临界CO2脱脂组采用CO2超临界设备脱脂,16~18 kg/h的CO2流动率,压力为8 MPa,温度为50℃,时间为5 h.氯仿/甲醇脱脂组采用1∶1甲醛/氯仿37℃,浸泡24 h脱脂.乙醚脱脂组采用乙醚37℃,浸泡24 h脱脂.主要观察指标:用质量丢失百分比和红外光谱比较脱脂效果,凯氏氮定量比较脱脂后蛋白质含量情况.结果:结果超临界CO2和氯仿/甲醇脱脂效果相似,均显著较乙醚脱脂效果好.结论:超临界CO2作为一种无污染、无毒的高效脱脂方法,在异种骨的脱脂处理中具有广阔的应用前景.
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Cercon氧化锆材料的反射光谱
背景:Cercon氧化锆仝瓷修复系统是近年兴起的一种氧化锆陶瓷修复系统.该技术以氧化锆作为底层材料,低温陶瓷作饰面瓷修复患牙,其底层材料的透射率直接影响修复的整体效果.目的:通过对Cercon氧化锆底层材料光谱反射率的测定和分析,对其颜色变化特点作一定的研究.设计,时间及地点:2008-10/2008-11在四川大学华西口腔医学院,口腔疾病研究国家重点实验室完成.材料:Cercon base氧化锆陶瓷材料为德国DeguDent公司产品.方法:将Cercon氧化锆底层材料切割成标准试件,使用Cercon Heat氧化锆高温烧结炉完全烧结后,打磨抛光,并按照饰面瓷烧结程序烧结,使用PR650光谱光度/色度计测定其烧结前后的光谱反射率,后采用spss12.0统计学分析软件数据进行统计分析.主要观察指标:对Cercon氧化锆底层材料在烧结前后反射光谱的相关颜色参数进行观察,包括主波长(色相)、兴奋纯(彩度)和光谱反射率.结果:氧化锆粗胚烧结时只是晶相变化,少有化学反应和分子结构的变化,烧结前后为同一物质.氧化锆粗胚烧结时兴奋纯升高(P<0.05),而反射率则下降(P<0.05).结论:烧结对Cercon氧化锆底层材料的兴奋纯及反射率均有一定影响,氧化锆材料机械性能改变对显色有一定影响.
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磁性纳米颗粒-Pluronic携带神经节苷脂1对急性完全横断性脊髓损伤修复的影响
背景:温度敏感性磁性纳米颗粒即磁性纳米颗粒-Pluronic具有温度响应药物控制释放能力,并能穿透血脑屏障.目的:实验检测其携带神经节苷脂(GM-1)能力及在活体组织中药物释放能力,以及对脊髓损伤修复再生的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-09/2007-02在首都医科大学北京神经科学研究所和中国科学院过程工程研究所完成.材料:神经节苷脂由阿根廷Trb Pharma药厂生产.磁性纳米颗粒-Pluronic的制备及其负载神经节苷脂由中国科学院过程工程研究所制备.方法:将20只SD大鼠制作急性完全横断脊髓损伤模型,随机分为4组:①治疗组:于脊髓断端间注射磁性纳米颗粒-Pluronic-GM-1100 μ L+纤维蛋白胶100 μL.②对照组1:于脊髓断端间注射磁性纳米颗粒-Pluronic100 μ L+纤维蛋白胶100μL.③对照组2∶于脊髓断端间注射纤维蛋白胶100 μ L.④空白组:单纯横断不予以任何治疗.主要观察指标:4周后,应用免疫组织化学方法结合图像分析方法,对脊髓横断处远端、近端进行神经纤维计数及胶质细胞网格框架结构定分析,以了解神经再生情况.结果:20只大鼠均进入结果分析.①脊髓横断区神经纤维数量∶治疗组近端、远端均高于其他3组(P<0.05),2个对照组高于空白组(P<0.05),对照组2高于对照组1(P<0.05).②脊髓横断区胶质纤维面积比:治疗组近端、远端均高于其他3组(P<0.05),2个对照组近端明显高于空白组(P<0.05),对照组2远端高于空白组(p<0.05).结论:磁件纳米颗粒-Pluronic具有药物携带及释放作用,其携带神经节苷脂对脊髓损伤具有一定程度的修复及促进神绛再生的作用.
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应用肌膜瓣包裹、羊膜管预置聚乳酸-羟基乙酸微丝模拟周围神经再生微环境修复周围神经缺损的实验
背景:周围神经损伤部位的微环境状况足影响神经再生的重要因素之一.周围神经损伤后,良好的神经再生微环境有利于保护受损神绛元、促进轴突的有效再生.目的:应用肌膜瓣包裹、羊膜管预置聚乳酸-羟基乙酸微丝,充填大鼠自体周围神经组织浆模拟周围神经再生微环境,探讨其修复坐骨神经缺损的可行性.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-10在广东医学院实验动物中心完成.材料:清洁级2月龄SD大鼠30只,随机分为实验组、对照组、标准组3组,每组10只,右侧为实验侧,左侧为正常对照侧.取健康、足月、顺产的新鲜胎儿羊膜(产盘知情同意)制备羊膜基质膜.用医用Vicryl缝线和羊膜基质膜制备聚乳酸-羟基乙酸微丝桥接物.方法:大鼠切除坐骨神经6.0 mm,自然同缩建立坐骨神经缺损模型.实验组采用带蒂肌膜瓣、人羊膜管预置Vicryl微丝并充填大鼠白体坐骨神经组织浆;对照组采用单纯人羊膜管允填大鼠白体坐骨神经组织浆;标准组采用自体神经移植,桥接大鼠坐骨神经缺损.主要观察指标:术后8,12周行大体观察、组织学榆查、胫前肌湿质量、有髓神经纤维通过率及神经电生理学检测.结果:术后12周,实验组、标准组肌萎缩有所恢复,对照组则恢复不明显.实验、标准组中侧胫前肌色泽红润,饱满富有弹性;对照组色泽相对较暗,弹性度较差.术后8,12周3组胫前肌恢复率组间比较,术后12周3组有髓神经纤维总数、截面积,神经移植体血管数利血管截面积组间比较,以及小腿三头肌复合肌动作电位幅值组间比较,差片均有显著性意义(P<0.05),其中标准组神经纤维再生质量佳,实验组优于对照组.结论:肌膜转位、羊膜管预置聚乳酸-黔基乙酸微丝,并填允大鼠自体周围神经组织浆导管能较好的模拟周围神经再生之微环境,促进神经纤维再生,但与自体神经移植尚有差距.
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聚合酶链式反应变性温度与产物假阴性的研究
背景:虽然聚合酶链反应方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速的特点,但同时也发现用聚合酶链反应技术进行生物化学实验和医学检验时,经常会出现假阴性的现象.目的:探讨聚合酶链反应变性温度与产物假阴性关系.设计、时间及地点:观察实验,于2008-03在占林大学第二医院中心实验室完成.材料:重组质粒pUC-19(含有HBV完整基因组)和人肠杆菌JM109由吉林人学第二医院中心实验室提供.质粒DNA小量抽提试剂盒购自爱思进AXYGEN生物技术(杭州)公司.方法:以含有HBV完整基因组的蕈组质粒pUC-19为模板进行聚合酶链反应扩增,人为改变聚合酶链反应循环变性温度,观察其对聚合酶链反应扩增结果的影响.主要观察指标:以不加模板的反应体系为阴性对照,以加2倍于正常反应体系的模板反应体系为阳性对照,肉眼在紫外灯下观察小到产物判为阴性.结果:随着变件温度的降低,聚合酶链反应扩增效率降低,产物量明显减少.当变性温度低至85℃及85℃以下,琼脂糖凝胶电泳肉眼观察小到扩增产物.结论:较低的变性温度可导致扩增效率降低甚至假阴性的结果.
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表皮生长因子受体靶向纳米载体荷载c-erbB2反义寡脱氧核苷酸对人乳腺癌SK-BR3细胞的摄取与滞留
背景:结合肿瘤的分子靶向技术和纳米技术,制备出一种新的具有靶向作用的纳米载体,以达到对肿瘤更好靶向作用的目的.目的:制备表皮生长因了偶联牛血清白蛋白纳米载体,联合核素标记的c-erbB2反义寡脱氧核苷酸,体外观察人乳腺癌SK-BR3细胞对其摄取情况.设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-09/2008-03在重庆医科大学生物化学和分子生物学教研窀,重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆医科大学放射医学教研室完成.材料:生血清白蛋白(生物技术级)由美围Amresco公司提供,表皮生长因子由英国PeproTech EC LTD提供,125Ⅰ由成都中核高通同位素股份有限公司提供.寡脱氧核苷酸由上海生工生物工程技术服务有限公司提供.方法:采用超声乳化-化学交联及羧和反应制备表皮生长因子偶联白蛋白靶向纳米载体,通过核素标记示踪技术检测表皮生长因子偶联白蛋白靶向纳米载体的相关性质.主要观察指标:测量表皮生长因子靶向纳米载体荷载c-erbB2反义寡脱氧核苷酸的载药量、包封率及释药率,人乳腺癌SK-BR3细胞对表皮生长因子靶向纳米载体的摄取率及滞留率.结果:表皮生长因子靶向纳米载体包载125Ⅰ标记的反义寡脱氧核苷酸组的摄取率及滞留率高于正义寡脱氧核苷酸组和无义寡脱氧核昔酸组.同时c-erbB2寡脱氧核苷酸使用纳米载体荷载组的摄取率及滞留率均高于未使用纳米载体组,差异有显著性意义(P<0.05).结论:125Ⅰ标记的表皮生长因子靶向纳米载体能够提高乳腺癌SK-BR3细胞对o-erbB2反义寡脱氧核苷酸的摄取和滞留,能达到更好的靶向作用.
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种植牙用钛合金Ti-30Nb-8Zr-2Mo硬度及弹性模量
背景:目前广泛应用于临床的纯钛和Ti-6AI-4V种植体材料中存在着铝和钒的潜在毒性及弹性模量太大易造成界面应力屏障等问题.目的:对自行研制的新型钛合金Ti-30Nb-8Zr-2Mo进行硬度及弹性模量性能测试.设计、时间及地点:观察实验,于2003-03/2006-02在河北工业大学材料学实验室完成.材料:钛合金制备用原材料海绵钛纯度≥99%、钼粉纯度≥99%、铌条≥99.9%、海绵锆≥99.4%.方法:在均匀化退火、热煅、固溶后对试样显微硬度进行测量,对时效后的样品进行压缩试验.主要观察指标:硬度值和应力应变曲线.结果:研究显示800℃0.5 h固溶后得到大程度的强化合金,固熔合金硬度变化不大,时效后硬度显著增强,试样的抗压强度为1 054 MPa,压缩弹性模量达到16.5 GPa.结论: 自行研制的新型钛合金Ti 30Nb-8Zr-2Mo硬度和弹性模量均达到种植体材料的性能要求.
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纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合微球的制备及性能
背景:羟基磷灰石与高分子复合材料作为组织工程材料的报道很多,但多为粉体材料或块状材料,用于修复治疗时均存在一定的局限件.目的:制备纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合缓释微球,观察其体外释药特性.设计、时间及地点:重复测域设计,于2008-01/10在北京工业大学材料科学与工程学院生物功能高分子实验室完成.材料:纳米羟基磷灰石、壳聚糖、明胶、庆大霉素.方法:利用微波辅助法,在pH=7的条件下,制备了针状羟基磷灰石.采用W/O型复乳化-交联技术制备纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球.主要观察指标:①纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶复合微球的表面形貌、粒径分布.②载药复合微球的载药量、包封率及药物累积释放率.结果:①纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球形态均匀,其粒径主要集中在10-30μm,壳聚糖-明胶对羟基磷灰石形成了很好的包覆.②复合微球平均载药量32.97%,平均包封率49.20%,在3 d内对庆大霉素的释放达到88%左右.结论:所制各的纳米羟基磷灰石/壳聚糖-明胶载药复合微球形态均匀,粒径分布窄,再分散性好,3d内能维持有效的约物浓度.
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三种齿科后牙充填材料与牙釉质耐磨损的性能
背景:目前,研究AgHg合金及后牙树脂材料耐磨性能的实验方法各异,结论不一,特别是在对磨物的选择及与牙釉质匹配性研究方面,尚无统一结论.目的:观察口腔常用后牙充填材料的生物摩擦学特性及与牙釉质的匹配件.设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-07/12在天津医科大学附属口腔医院口腔生物材料实验室完成.材料:FiltekTMP60,FiltekTMZ350光固化复合树脂由美国明尼苏达矿业制造贸易有限公司提供;齿科用AgHg合金由上海齿科材料厂提供;滑石瓷由海门市天补高频陶瓷厂提供.方法:使用MMV-1立式万能摩擦磨损试验机,以滑石瓷为对磨物,天然牙釉质为对照,对AgHg合金、FiltekTTMP60、FiltekTMZ350树脂与滑石瓷组成的摩擦副在人工唾液润滑工况下进行摩擦磨损实验.主要观察指标:磨损体积量,动态摩擦系数,材料表面形貌.结果:磨损体积量AgHg合金<牙釉质
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去细胞组织工程异种瓣膜支架制备方法的比较
背景:采用何种去细胞方法以获取良好的低抗原异种生物瓣膜支架是构建组织工程瓣膜的前提.目的:通过测试不同脱细胞方法的效果及保留脱细胞支架的能力米探讨异种组织工程心脏瓣膜生物支架的佳制备方法.设计、时间及地点:前瞻性随机对照实验,于2007-01/2008-06在泰安市中心医院中心实验室完成.材料:16个新鲜猪主动脉瓣分为4组,对照组,NaCl-SDS组、胰蛋白酶组、曲拉通组,每组4个.方法:对照组未经去细胞处理,3个实验组分别用NaCI、胰蛋白酶、Triton-100脱细胞处理.主要观察指标:各种方法处理后的猪心脏瓣膜支架大体标本结构,光学和电子显微镜观察超微结构.采用免疫组化法检测血管内皮细胞MHC-Ⅰ类抗原的表达.结果:NaCI-SDS法脱细胞处理的瓣膜内皮细胞去除不彻底,细胞外基质的三维网状结构虽完整但纤维模糊,肿胀.胰蛋白酶法处珲的瓣膜内皮细胞基本去除,但瓣膜支架结构改变很明显,胶原纤维肿胀,边缘毛糙,纤维网状间隙增宽、不规则.曲拉通法处坪的瓣膜内皮细胞去除彻底,支架结构保存完好.NaCI-SDS法、胰蛋白酶法和曲拉通法脱细胞后的瓣膜均存在一定的免疫原性,但用胰蛋白酶法和曲拉通法脱细胞后的瓣膜支架所表达的免疫原性较NaCI-SDS法显著降低.结论:应用曲拉通法制作的瓣膜支架去内皮细胞较为彻底,不改变瓣叶支架结构,而且免疫原性小.
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牛松质骨植骨体复合骨形态发生蛋白修复贵州小型猪下颌骨缺损
背景:建立贵州小型猪人造下颌骨骨缺损动物模型,期望利用值骨材料的骨诱导和骨传导作用来修复缺损部位.目的:探讨骨形态发生蛋白复合牛松质骨植骨体修复下颌骨缺损的可行性.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-09/2007-07在贵阳中医学院动物研究所、遵义医学院中心实验室、四川人学组织工程实验室完成.材料:天津中津生物发展有限公司提供棒状复合骨形态发生蛋白的牛松质骨植骨体及单纯牛松质骨,规格:1.0g:0.6 cm×2.5 cm,其中每块植骨体骨形态发生蛋白的含量为4 mg.方法:选用贵州小型猪16只,人工制造0.5 cm×0.6cm×2.5cm大小的下颌骨缺损,随机分为复合材料组和单纯材料组,分别植入骨彤态发生蛋白复合植骨体和单纯牛松质骨.主要观察指标:术后1周升始,用二甲酚橙、荧光索钠、四环素荧光标记物依次连续给药,通过×射线、组织学、激光共聚焦显微镜观察成骨情况.结果:①X射线片显示:10周时复合材料组植骨区和宿丰骨密度基本相近,原缺损区所形成的新骨骨小粱明显,新骨改建良好:单纯材料组缺损区面积缩小,但中间仍见有周边较毛糙的透射区,宿主骨边缘所形成的新骨密度与宿主骨之间差别较大.②组织学和激光共聚焦显微镜显示:术后4周复合材料组胶原纤维丰富,成骨明显,8,10周时成骨继续增加,骨诱导明显,植骨区有大量的荧光标记物:单纯材料组4周时宵少量的胶原纤维生成,10周时宵少量的新骨形成,荧光标记物较弱,量少.结论:骨形态发生蛋白复合植骨体能较好地修复下颌硬骨组织缺损.
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基于快速成形和冷冻干燥技术制备β-磷酸三钙骨组织工程支架
背景:利用先进的制造技术和各种生物材料可构造具有良好生物相容性、可降解性与一定外形及具有合理三维内部结构的支架,这种崭新的医学与工程技术相结合的方法,越来越多地应用到大段骨缺损研究中.目的:应用快速成形技术和冷冻干燥工艺制备多孔β-磷酸三钙,评价其结构性能并分析结构影响因素.设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-05/08 在上海大学快速制造中心实验室完成.材料:β-磷酸三钙浆料由上海组织工程研究与发展中心提供.方法:应用CAD软件设计具有圆柱形内腔的组合式负型,将负型三维CAD数据进行快速成形前处理后导入到FDM成形机加工,获得负型的实物模型.负型组装后,充填β-磷酸三钙浆料,经冷冻、干燥及高温焙烧制备终的生物陶瓷支架.主要观察指标:①应片X射线衍射技术进行物相分析.②扫描电镜观察不同浓度浆料和不同预冻温度制备支架截面的微观形貌.③计算不同浓度浆料和不同预冻温度制备支架的孔隙率.结果:①X射线衍射曲线显示制备β-磷酸三钙支架与标准β-磷酸三钙的特征衍射峰位置基本一致.②扫描电镜显示支架内部的孔隙分布沿径向呈梯度结构,边缘地带孔径为10~30 μm,内部孔径为100~300 μ m.③浆料质量浓度低,支架孔隙小、分布均匀、孔隙率高;预冻温度低,支架孔隙小.结论:通过冷冻干燥技术结合快速成形技术可以得到具备精确外形和良好孔隙结构的骨支架.
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盐酸哌唑嗪缓释贴片的释药行为及其生物相容性评价
背景:盐酸哌唑嗪半衰期短,首剂效应明显,国内仅有普通片上市.目的:研制以聚乙烯醇和明胶为骨架材料的盐酸哌唑嗪缓释贴片,并考察其释药行为和生物相容性.设计、时间及地点:随机设计,动物对照实验,于2007-01/08在重庆医科大学约学院实验室进行.材料:采用水性分散体法,以聚乙烯醇、明胶为骨架材料制备盐酸哌唑嗪亲水性凝胶骨架缓释贴片.方法:①随机选用新两兰大白兔6只,取腹部皮肤进行体外透皮实验,以氮酮、丙二醇、骨架材料配比、载药量为影响因素,稳态透皮速率、时滞为指标,采用正交设计筛选侍处方.②验证佳处方,考察贴片物理特性、黏性及透皮行为,并采用差示扫描量热法对其进行差热分析.③随机选用新两兰大白兔12只,通过皮肤刺激性实验,考察贴片的生物相容性.主要观察指标:①贴片佳处方筛选及验证.②贴片的物理特性评价.③贴片的差热分析.④皮肤刺激性反应.结果:①正交实验筛选的佳处方为氮酮2%,丙二醇15%,骨架材料配比为5∶4,载药昔1.0%.②按佳处方制备的贴片外观、黏性良好;其稳态透皮速率、时滞和综合评分分别为(8.92±0.58)μg?(cm2·h),(3.38±1.17)h,81.58±8.42,其体外72 h内释药行为符合Higuchi方程模式(r=0.995 7),并趋近于零级释药模式(r=0.987 3),经皮渗透曲线重现性良好(P>0.05);差热分析表明,盐酸哌唑嗪在骨架材料中以分子或无定形存在.③贴片生物相容性良好,对兔皮肤无刺激性.结论:制备的亲水性凝胶骨架盐酸哌唑嗪缓释贴片生物相容性良好,具有持续平稳释药的特性.
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聚羟基烷酸酯与犬骨髓间充质干细胞的体外相容性
背景:聚羟基烷酸酯是将具有良好生物相容性的高强度高模量的聚羟基丁酸脂与聚羟基戊酸脂按一定比例组合,采用熔铸颗粒沥取法制备的新犁支架,经检测其具有高孔隙度的三维网状结构、良好的生物降解性能等优良特性.目的:评价聚羟基烷酸酯作为组织工程支架与犬骨髓间充质干细胞的生物相容性.设计、时间及地点:体外对比观察实验,于2003-06/2004-03在中山大学组织胚胎实验室完成.材料:聚羟基烷酸酯支架和膜的孔隙率>85%,孔径大小为100~350 μm.方法:原代培养犬骨髓间充质干细胞,传至三四代后,接种至聚羟基烷酸酯膜和泡沫样三维支架上,以单纯细胞培养为对照组.主要观察指标:倒置显微镜下观察细胞形态;于培养1,2,3周采用40g/L多聚甲醛固定,常规组织切片,苏木精-伊红染色:在培养5,10,14 d用Hoechs33258荧光法定量测定细胞内DNA含量,BCA泫测定蛋白质含量.结果:倒置显微镜观察聚羟基炕酸酯纤维较粗,且透光性差,在相差显微镜下不易观察.第3,4代骨髓间充质干细胞接种全聚羟基烷酸酯膜上2 h后即大部分黏附,3 d后伸展良好,呈纺锤彤或梭形,培养接种1周后,取2个膜状聚羟基烷酸酯固定,苏木精-伊红染色后,见骨髓间充质干细胞增殖可.培养接种2周后,骨髓基质千细胞增殖明显,呈梭形密布于膜状聚羟基烷酸酯上.细胞在聚羟基烷酸酯三维支架的孔隙内立体生长,1周开始细胞间连接,3周广泛连接,分泌大量基质;培养接种3周后,骨髓间充质干细胞增殖较第2周无明显变化.定量测定接种的细胞内DNA含量和蛋向质含量与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05).结论:聚羟基烷酸酯作为骨髓间充质干细胞的组织工程支架材料,具有良好的生物相容性.
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壳聚糖和软骨细胞外基质复合组织工程骺软骨支架的性能观察
背景:在组织工程骺软骨构建过程中,采用何种载体承载已经扩增了的软骨细胞越来越受到人们的关注.目的:探讨软骨细胞外基质与壳聚糖复合构建组织工程骺软骨支架的可行性并对其性能进行初步观察.设计、时间及地点:体外观察实验,于2007-12/2009-03在解放军总医院骨科研究所完成.材料:壳聚糖(脱乙酰度90%,Mr10×105)由青岛海汇生物工程公司提供.市售猪关节软骨.方法:将新鲜的猪关节软骨在液体中粉碎,梯度离心后制备成3%软骨微丝悬液,将其按1∶1的比例与2%的壳聚糖溶液混合,采用冷冻冻干法制备脱细胞软骨基质三维多孔支架.主要观察指标:对梯度乙醇处理再次干燥后支架材料进行组织学及扫描电镜观察,测定支架孔径和孔隙率、吸水率,并采用MTT法分析支架浸提液毒性.分离培养兔骨髓间充质干细胞,用转化生长因子β 1成软骨诱导后种植至支架,倒置显微镜、电镜观察细胞在支架上的生长、分化情况.结果:支架内孔洞相互连通,孔大小(161±31)μm,孔隙率为(90.1±1.6)%,吸水率为(2 361±132)%.组织学观察显示,三维多孔支架甲苯胺蓝染色、番红O染色、Ⅱ犁胶原免疫组织化学染色均呈阳性.MTT法结果显示支架无细胞毒性.细胞在支架表面黏附良好,分布均匀,并有基质分泌.结论;制备的软骨细胞外基质和壳聚糖复合三维多孔支架结合良好,含有软骨细胞外基质主要成分,无毒,具备合适的孔径和孔隙率,生物相容性良好.
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纳米银植入大鼠皮下组织亚慢性毒性及在不同组织中的分布
背景:有实验报道纳米银的生物材料直接与人体接触或植入体内,能够产生不良的生物学效应.目的:验证纳米银对人体是否存在潜在的不良生物学反应,评价其生物安全性.设计、时间及地点:动物实验观察,2005-06/2006 06在中国药品生物制品检定所以来器械检测中心完成.材料:纳米银粉和微米银粉为美国Sigma化学试剂公司产品.方法:将大鼠随机分为3组:纳米银组,微米银组,空白对照组,10只/组,雌雄各半.纳米银粉组和微米银粉组皮下植入进行亚慢性毒性试验.实验开始时植入1次,植入剂昔为0.33 g/kg.对照组只做手术,不给药.同时,每组随机选择4只大鼠,对12只大鼠的血清和部分脏器使用等离子体质谱分析仪进行银在大鼠各脏器中分布的测定.主要观察指标:血液生化学指标,脏器系数,银含量.结果:与对照组比较,给药组大鼠的个别脏器系数与对照组比较有显著性差异,但各给药组脏器的绝对质量与对照组比较没有湿著性差异,结合起来分析脏器系数的异常不具有临床意义.其它各脏器系数均在正常值范围内,与对照组比较尤显著性差芹.末见与受试物毒性作用有关的病理组织学改变,给予纳米银粉大鼠末见毒件反应.结论:纳米银对人体可能存在潜在的不良生物学效应.
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模拟微重力培养骨髓间充质干细胞定向诱导复合改良纤维蛋白原支架修复兔关节软骨缺损
背景:模拟微重力培养系统通过模拟细胞生存的体内微重力环境,使细胞承受较低的剪切力, 提高细胞内外、细胞间物质传递效率,从而提高细胞分化质量.目的:观察微重力培养环境在构建组织工程模块修复关节软骨缺损中的作用.设计,时间及地点:体外实验采用自身对照;体内实验采用随机分组比较,于2007-12/2008-06在广东省构建与检测实验室及南方医院动物实验中心进行.材料:3周普通级龄新西兰兔1只用于骨髓间充质干细胞培养;3月龄新西兰兔48只用于体内验证实验.方法:以纤维蛋白胶粉、凝血酶、氯化钙、抑肽酶、氨甲环酸制备纤维蛋白原支架.体外培养新西兰大白兔骨髓间充质干细胞3周,使之吸附于改良纤维蛋白原支架上在微重力环境下三维立体培养3周.48只兔做软骨钻孔制备软骨缺损动物模型,每只兔4孔.实验分为4组,每组48孔,微重力培养组在孔内植入微重力培养下的软骨细胞组织模块;普通培养组在孔内植入普通培养下的软骨细胞组织模块;单纯支架组在孔内植入空白支架;空白组孔内不植入任何材料,分别于2,6,12周处死动物,取相应标本.主要观察指标:通过生长曲线、倒置相差显微镜、组织学检测微重力培养环境在三维立体培养对软骨细胞增殖及功能的影响,以及用组织工程学评分检测微重力环境下培养的软骨模块对缺损的修复效果.结果:模拟微重力培养条件下构建的模块体外培养3周,细胞数量明显增多,并分泌较多的细胞基质,包裹在软骨细胞周围.组织工程学评分显示微重力培养组修复软骨缺损的效果明显好于其他组.结论:模拟微重力培养环境对三维立体培养软骨细胞模块有比较良好的效果.
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小口径人工血管表面的改性
当人工血管移植体内后,材料表面会吸附γ-球蛋白或纤维蛋白原,易于使血液中细胞成分如血小板黏附于表面,血小板-旦被吸附,可以变成扁平状而被激活,从而导致血小板不可逆聚集而产生血栓.在大于6 mm口径人工血管移植中,有较高的血管通畅率,而在小口径人工血管(<6 mm)移植中,由于低血流量状态,易形成血栓.因此有必要对小门径人工血管进行表面改性,增加血液相容性,主要改性方法有改变人工血管材料表面结构,增加人工血管表面内皮细胞黏附及人工血管材料表面的接技改性等.
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壳聚糖载氟喹诺酮类药物缓释微球的制备及应用
壳聚糖载氟喹诺酮类药物微球有多种制备方法,如沉淀析出法、乳化交联法、喷雾干燥法和离子凝胶法等.不同的制备方法具有各自的优点和不足,但其释药机制基本相同.这类药物微球具有增强氟喹诺酮类药物抗耐药菌的能力,主要用于局部及全身组织的消炎与抗感染.文章以近儿年国内外论文为依据,进行分析,归纳和总结.介缁了壳聚糖载氟喹诺酮类药物缓释微球的制备方法和释约机制,探讨了缓释微球作用特点及应用状况.壳聚糖载氟喹诺酮类药物微球具有良好的缓释、抗菌性能,对其进行纳米化,开发纳米粒新剂型,具有重要的科研和应用价值.
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生物膜预防肌腱粘连的系统评价
目的:探讨生物膜于肌腱粘连预防中的作用.方法:收集1990-2008年发表的生物膜预防肌腱粘连的随机动物对照实验和临床应用的中文文献40篇,从生物膜预防肌腱粘连的实验动物、实验分组、实验材料、观察办法、实验结果、实验结论方面加以整理.同时对生物膜预防肌腱粘连的临床应用进行研究对象基本情况的分析,同时结合其随访和功能评价等方面,进行生物膜颅防肌腱粘连的临床应用的全面总结.结果:从9篇有关生物膜预防肌腱粘连的动物实验选出6篇, 从中可以看出实验动物均以鸡为主,实验结论均显示生物膜可以有效预防肌腱粘连,组织相容性良好,通透性良好,不影响肌腱正常愈合,是较理想的防粘连材料.从12篇有关生物膜预防肌腱粘连的临床应用中选出 8篇,从中可以显示出生物膜任临床应用中无年龄、性别和损伤肌腱区域的影响,从评估标准(总主动活动度和各关节主动活动度)上可以证实生物膜能够达到满意的防粘连效果.结论:生物膜是一种良好的防粘连材料,组织相容性和通透性良好.
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生物补片在妇产科临床中的应用
女性盆底障碍性疾病,由于盆腔组织缺陷的部位不同,可导致不同类型的盆底器官脱垂,如子宫脱乖,阴道前、后壁脱垂或州道穹窿膨出等,同时可伴有压力性尿失禁.传统的手术方式多将薄弱组织反复加固,并不能真正提高对抗腹压的强度.随着人炎寿命的延长和对生活质量要求的提高,盆底手术日的不仪仪足修补缺陷,还应实现盆底结构和功能的重建.近年来,盆底缺陷修复和重建手术有了较大进步,补片是重要的盆底组织替代物,能够替代薄弱受损的盆底筋膜组织,在盆底重建手术中的应用越来越广泛.
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不同材料在年轻恒牙根尖诱导成形过程中的比较
背景:氢氧化钙及其制剂是诱导根尖形成的首选药物,近年来随着口腔材料的发展,三氧化聚合物作为新的根尖诱导材料已在临床上得到越米越多的重视.但足对上述材料的优缺点目前尚缺少系统报道.目的:比较三氧化聚合物及Vitapex、氢氰化钙根充糊剂在年轻恒牙根尖诱导成形过程中的疗效.设计、时间及地点:对比观察,于2005-04/2007-07在辽宁医学院第二临床学院口腔内科完成.方法:选择2005-04/2007-07在辽宁医学院第二临床学院口腔内科就诊的患有严重牙髓病变或根尖周炎108颗患牙,分成3组,Vitapex组、氢氧化钙组、三氧化聚合物组,每组36颗.经牙髓炎、根尖周病治疗后,分别采用氢氧化钙、Vitapex及三氧化聚合物根充糊剂作暂时性根管充填,促使其根尖的形成或封闭.3组患者于术后3,6,12,18个月复查.疗效评定标准:①成功:尖周病变消失,牙根延长,管腔缩小,根尖形成.②进步:尖周病变消失,牙根延长,根尖未完全形成或形成极不规则,根管内可探测到有明显阻力.③失败:牙根未能延长或尖周病变未见缩小或消失.成功与进步为有效,失败为无效.主要观察指标:3组材料根尖诱导有效率和诱导宵效所需时间.结果:氢氧化钙组与Vitapex糊剂组总的有效率摹本相同,差异无显著性意义(P>0.05);而三氧化聚合物组有效率高于氢氧化钙组与Vitapex糊剂组(P<0.01);三氧化聚合物治疗根尖孔未闭合的患牙周期短.结论:三氧化聚合物作为根尖诱导材料治疗根尖孔未闭合的患牙优于Vitapex、氢氧化钙根充糊剂.
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硫酸钙骨粉混合抗生素钛笼植入治疗胸椎化脓性脊椎炎骨缺损
背景:关于椎间隙感染的治疗方案存在许多争议,在保守治疗方面,多数学者主张卧床制动、理疗,对症处理,同时应用大剂量抗生素控制感染,但有些学者对抗生素的应用存有异议.目的:探讨硫酸钙骨粉混合抗生素在胸椎化脓性脊柱炎治疗中的作用.设计、时间及地点:回顾性病例分析,病例来自2000-10/2008-08广东医学院附属医院骨科.对象:选择广东医学院附属医院骨科收治的胸椎化脓性脊椎炎患者24例,男9例,女15例:年龄42~71岁;病灶位于T6/7节段9例,T6/7节段6例,T8/9节段3例,T10/11节段4例,T6/8>节段2例.24例患者中8例疼痛剧烈,不能忍受,背肌痉挛,被动体位,转侧困难,伴一侧或双侧下肢痛;11例伴食欲减退、消瘦:2例伴双下肢不仝瘫,自主排尿困难:3例伴糖尿病.方法:全部患者均采取侧前办经胸腔病灶清除后,将填入混合有抗生素的硫酸钙骨粉的钛笼植入骨缺损区,两钉一棒内固定.术后大量应用抗生素及腰背部支具外固定.主要观察指标:JOA评分标准评价患者功能的恢复率,并观察血沉及骨性愈合情况.结果:24例患者全部获得随访,平均随访5.8年.1例患者没有恢复,其余23例均有明显恢复,恢复率30%~100%.血沉从术前甲均(86.74±10.56)mm/h下降到术后5个月时的(26.40±5.42)mm/h.24例患者全部获得骨性融合,融合时间3-8个月.无手术直接相关的死亡及其他并发症,随访期间无感染复发.结论:将填入混合有抗生素的硫酸钙骨粉的钛笼植入胸椎病灶清除术后骨缺损区,结合两钉一棒内固定及腰背部支具外固定足治疗胸椎化脓性脊椎炎的有效方法.
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球囊撑开纳米人工骨注入微创平足矫正增高术的临床应用
目的:探讨球囊撑开纳米人工骨注入微创跟骨增高的技术方法与治疗效果.方法:2005-02/2009-03大连大学修复重建外科研究所与全国多家医院合作完成该项目.入选平足患者62例124足,全部为女性,年龄18~52岁,平均28.5岁.身高145~165 cm,平均身高154.1 cm.所宵患者足跟无创伤、破溃感染和皮肤疾病,长时间负重行走有疼痛等不适感.采用纳米磷酸钙胶原基人工骨材料,行球囊撑开纳米人工骨注入微创跟骨增高术.术后定期随访,X射线摄片,观察纳米人工骨成骨的进展情况,纳米骨是否有移位、变形,患者在负重行走情况下是否有疼痛感,以及切口足否有红肿渗出等感染症状.结果:所有患者创口均完全愈合,无明显瘢痕,无感染破溃等并发症.术后当天复查X射线片,人工骨材料降解不明显.随着时间的延长,人工骨材料逐渐降解.3个月后X射线片显示自体跟骨组织与人工材料融合,显影清晰,3年后X射线片显影清晰,自体跟骨组织与人工材料完全融合,无移位及压扁.增高幅度为2.0~4.2 cm,平均增高3.0 cm,所有病例平足不适感消失,长时间负重行走无疼痛感.结论:球囊撑开纳米人工骨注入微创跟骨增岛的技术定位准确、疗效确切、创伤小、恢复快,是安全有效的跟骨微创增高技术,同时能够有效地改善平足畸形.
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不同植骨材料及方法对腰椎滑脱植骨融合的影响
背景:影响脊柱融合的因素有合适的植骨部位、良好的植骨床、充足的植骨量、严格的固定措施和充足的固定时间.植骨方式中采用椎间植骨还是横突间植骨,植骨材料采用白体骼骨还足术中切除的自体棘突及椎板,日前仍有争议.目的:比较采用不同植骨材料及方法进行植骨融合治疗的腰椎滑脱患者的融合率以及植骨后症状改善情况.设计:对比观察.对象:纳入接受植骨融合治疗的腰椎滑脱患者92例,滑脱按Meyerding分类,其中Ⅰ度滑脱50例,Ⅱ度滑脱40例,Ⅲ度1例,Ⅳ度1例.L3滑脱1例,L4滑脱58例,L5滑脱33例.方法:对92例腰椎滑脱患者进行椎管减压,采用提拉复位内固定系统进行复位固定.提拉复位后,进行植骨融合,根据不同的植骨方法和材料分为4组,自体棘突、椎板横突间移植组21例,自体棘突、椎板椎体间移植组27例,自体骼骨横突问移植组21例,自体髂骨椎体间移植绀23例.主要观察指标:根据植骨前后X射线片和日本骨科协会评分评价植骨融合率及临床症状改善情况.结果:植骨后6个月随访,自体髂骨椎体间移植组患者的植骨触合率显著高于自体棘突、椎板横突间移植组、自体棘突、椎扳椎体间移植组及自体髂骨横突间移植组(P<0.05).植骨后9,12个月各组植骨融合率差异无显著性意义(P>0.05).植骨后各组日本骨科协会评分差异无显著性意义(P>0.05).结论:后路椎体间或者后外侧横突间植骨融合直接用咬除的白体椎板、棘突骨质和取自体骼骨植骨内固定均是有效的植骨方法.同样的植骨方法中取髂骨植骨比直接用咬除的椎板、棘突骨质植骨后6个月的融合率高:而应用同样的植骨材料椎体间植骨比后外侧横突间植骨后6个月的融合率高.
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同种异体骨材料复合自体浓缩红骨髓移植治疗良性骨肿瘤和瘤样病变
背景:同种异体骨足临床常用的骨移植材料,但缺乏诱导成骨能力是人的问题.目的:评价良性骨肿瘤及瘤样病变刮除或切除后应用同种异体骨复合白体红骨髓修复骨缺损的效果.设计、时间及地点:回顾性病例对比分析,于2004-05/2006-05在华中科技人学同济医学院附属同济医院骨科进行.对象:选择良性骨肿瘤及瘤样病变108例患者,男58例,女50例:年龄10-58岁,平均32岁.其中采用异体骨复合自体浓缩红骨髓植骨52例(复合红骨髓植骨组);单纯异体骨植骨56例(单纯植骨组).方法:复合红骨髓植骨组惠者根据预计植骨量从每位患者两侧的骼前上棘或髂后上棘抽取红骨髓40~100 mL,在植骨前将同种异体骨与红骨髓充分混匀.肿瘤刮除或切除后,用电刀烧灼骨缺损腔,将同种异体骨剪成细小的短棒状或修成2 mm见方的块状,植入骨缺损区内.单纯植骨组将相同比例的生理盐水与同种异体骨充分混匀后植入骨缺损区内.主要观察指标:术后定期进行植骨区X射线检查及骨密度检测,比较两组间移植骨颗粒界限模糊、消失的时间及不同时间骨密度的情况.同时观察术后并发症如免疫排斥反应、感染等发生情况.结果:100例患者达骨性融合(复合红骨髓植骨组49例,单纯植骨组51例),并获得24个月随访,数据进入结果分析.复合红骨髓植骨组移植骨界限模糊时间和消失时间均短于单纯植骨组(P<0.05~0.01).术后3,6,12个月时复合红骨髓植骨组骨密度高于单纯植骨组(P<0.05~0.01).复合红骨髓植骨组2例,单纯植骨组3例出现排异反应,使用免疫抑制剂治疗两三周后痊愈.结论:同种异体骨复合自体红骨髓米源相对丰富,抗原件减弱,能明显促进骨融合和骨缺损的愈合.