中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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机械因素对组织工程干细胞增殖和分化的影响
背景：随着组织工程技术的发展和再生肌腱研究的深入，将解决传统肌腱移植所引起的诸多问题。
目的：依据肌腱自身性质、干细胞的优缺点、机械力学系统的特点以及相应的力学系统对种子细胞的影响进行评价与展望。
方法：检索中国生物医学文献数据库(CBM)、中国知识资源总库(CNKI)系列数据库、中文科技期刊数据库、PubMed 数据库2005年1月至2015年12月收录的肌腱组织工程相关综述和论文报告，检索词为组织工程(tissue engineering)，肌腱(tendon)，肌腱干细胞(tendon stem cel )，力学刺激(mechanical stimulation)，种子细胞(seeding cells)，终纳入63篇文献进行分析。
结果与结论：①各种干细胞及相应的力学系统在组织工程的应用中各有优势和不足，研究者可根据研究需要加以选择；②肌腱干细胞在再生肌腱领域里应用有着广阔的前景，通过合适、精确、温和的机械力学刺激将肌腱干细胞培养成为满足需要的肌腱组织，将为医生和患者改善肌腱损伤后临床愈合效果提供另一种选择。 -
牙髓干细胞在再生医学中的应用研究与进展
背景：牙髓干细胞是具有良好分化与增殖能力的干细胞，因其取材方便，具有多向分化潜能等特征正逐渐为再生医学研究领域重视。
目的：通过分析整理国内外牙髓干细胞的研究进展，对其目前在再生医学领域的应用研究加以总结，为进一步研究提供线索和方向。
方法：以“dental pulp stem cel , regenerative medicine, tissue engineering”为英文检索词，以“牙髓干细胞，再生医学，组织工程”为中文检索词，由第一作者检索Medline，PubMed，万方，维普，中国知网数据库2000至2015年牙髓干细胞及再生医学相关文献，经过筛选终获得46篇文献进行综述。结果与结论：牙髓干细胞具有自我更新与多向分化潜能，获取方法简便，在再生医学领域拥有巨大发展潜能。牙髓干细胞在骨组织修复领域已进入临床研究阶段，在向其他组织分化方向的研究，尚处于起步阶段或基础研究阶段，有待进一步研究拓展。 -
脐血间充质干细胞移植修复急性肠缺血再灌注损伤
背景：研究表明，骨髓间充质干细胞对肠缺血/再灌注有一定的修复作用，其机制为干预肠缺血/再灌注后的炎性反应从而对肠道屏障功能的完整性起到保护作用。近年来脐血间充质干细胞逐渐成为骨髓间充质干细胞很好的替代来源。
目的：探讨脐血间充质干细胞移植对大鼠急性肠缺血再灌注损伤的修复作用。
方法：体外诱导分离脐血间充质干细胞，观察CM-DiI荧光标记后脐血间充质干细胞的去向。63只SD大鼠随机分为3组，每组20只。缺血/再灌注损伤组及脐血间充质干细胞移植组采用TNBS(乙醇稀释)灌肠制备肠缺血/再灌注损伤模型；脐血间充质干细胞移植组在TNBS建模后1 h，于尾静脉输入1×1010 L-1脐血间充质干细胞悬液；对照组仅采用生理盐水灌肠。移植后3 d，分别于各组大鼠取结肠组织行苏木精-伊红染色，观察肠道的病理变化；RT-PCR法检测结肠组织中leptin mRNA的表达；利用免疫组化法检测肠黏膜中环氧化酶2表达。
结果与结论：①荧光示踪结果显示，移植的脐血间充质干细胞分布于肠黏膜淋巴组织内和腺上皮细胞间,表明脐血间充质干细胞可能参与了肠缺血再灌注损伤的修复过程；②苏木精-伊红染色观察到与对照组相比，缺血/再灌注损伤组肠道损伤明显加重，肠黏膜上皮细胞脱落较多，脐血间充质干细胞移植组肠道损伤明显减轻，细胞脱落也明显见少；leptin mRNA在缺血/再灌注损伤组呈现高表达，其表达量明显大于对照组及脐血间充质干细胞移植组，脐血间充质干细胞移植组又明显大于对照组，各组间比较，差异有显著性意义(P<0.05)；③免疫组化结果显示，缺血/再灌注损伤组肠黏膜环氧化酶2表达明显高于对照组(P <0.05)，脐血间充质干细胞移植组环氧化酶2表达明显低于缺血/再灌注损伤组(P <0.05)；④提示leptin及环氧化酶2可能参与了大鼠急性肠缺血再灌注损伤的发生过程，脐血间充质干细胞移植干预后明显减轻了大鼠肠缺血再灌注的损伤程度，为人类急性肠缺血损伤的治疗提供了实验依据。 -
人脐血间充质干细胞移植联合神经节苷脂注射治疗脑性瘫痪
背景：近研究证实神经节苷脂在体外能促进脐血间充质干细胞存活及分化。
目的：观察侧脑室注射人脐血间充质干细胞及神经节苷脂对脑性瘫痪大鼠神经功能恢复的影响。
方法：受孕17 d大鼠腹腔注射脂多糖2 d，放回笼中饲养，孕鼠分娩出脑性瘫痪乳鼠60只，随机分5组：模型组10只，假移植组10只，脐血间充质干细胞移植组18只，神经节苷脂组10只，联合移植组12只。在立体定位仪下，将脐血间充质干细胞或神经节苷脂注入左侧侧脑室，假移植组注入同样体积的PBS。在移植后7，14，21，28 d分别处死2只脐血间充质干细胞移植组大鼠，移植后14 d处死2只联合移植组大鼠，进行脑组织免疫荧光染色。移植后28 d进行神经功能评估。
结果与结论：①脐血间充质干细胞能存活、迁移、分化，主要分布在侧脑室、海马、皮质。移植后14 d，联合移植组BrdU、GFAP阳性细胞数明显高于脐血间充质干细胞移植组，差异有显著性意义(P<0.05)；②神经功能评估：与模型组比较，脐血间充质干细胞移植组、神经节苷脂组、联合移植组的握持时间延长、足错误次数减少，差异有显著性意义(P<0.05)。联合移植组优于脐血间充质干细胞移植组及神经节苷脂组，差异有显著性意义(P<0.05)；③结果表明，脐血间充质干细胞及神经节苷脂均能改善脑性瘫痪大鼠神经功能，神经节苷脂能够提高脐血间充质干细胞在大鼠脑内存活及分化，联合应用效果更好。 -
针刺联合胎盘间充质干细胞治疗脑性瘫痪大鼠模型
背景：针刺和间充质干细胞移植均对脑性瘫痪有一定的治疗效果。
目的：探讨针刺联合胎盘间充质干细胞移植对脑性瘫痪模型大鼠的治疗效果。
方法：将35只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、针刺组、移植组和针刺联合移植组，除对照组外，其他4组建立脑性瘫痪模型。造模后7 d移植组大鼠在右侧纹状体区和大脑皮质下移植10μL胎盘间充质干细胞(1×1011 L-1)；针刺组在水沟、大椎、百会、关元、承浆和气海6个穴位针刺治疗；针刺联合移植组按上述方法给予胎盘间充质干细胞移植和针刺治疗；模型组和对照组不做任何处理，干预7d后，测量大鼠的体质量、神经功能，并观察脑组织的病理形态学变化。
结果与结论：①大鼠的体质量增长率：对照组>针刺联合移植组>针刺组及移植组>模型组，针刺组和移植组大鼠的体质量增加相似，其他组间比较差异有显著性意义(P<0.05)；②握持牵引、足错误实验和迷宫觅水实验结果：对照组>针刺联合移植组>针刺组、移植组>模型组，针刺组和移植组大鼠的神经功能改善相似，其他组间比较差异有显著性意义(P<0.05)；③病理形态学变化：模型组大鼠大脑组织和海马区脑组织的细胞数量减少，排列紊乱，有炎性细胞聚集，细胞结构模糊。针刺组、移植组和针刺联合移植组大脑组织和海马组织病理改变介于对照组和模型组之间，其中针刺联合移植组的病理改变较针刺组和移植组好，有向正常大脑组织接近的趋势；④由此可见，单纯针刺、单纯胎盘间充质干细胞移植和针刺联合胎盘间充质干细胞移植均能改善脑性瘫痪大鼠的神经功能，其中针刺联合胎盘间充质干细胞移植治疗的效果好。 -
神经干细胞移植治疗老年痴呆
背景：神经干细胞移植已应用于临床治疗脑瘫等脑损伤疾病，但对老年痴呆的相关研究并未深入。目的：观察神经干细胞移植对老年痴呆大鼠行为学及免疫调节系统的影响。
方法：选取SD大鼠35只，切开脑后皮肤，在脑内海马区注射鹅膏蕈酸，建立老年痴呆模型；另取SD大鼠10只，切开脑后皮肤，在脑内海马区注射生理盐水，作为假手术组。将造模成功的32只老年痴呆大鼠随机分为2组，每组16只，实验组于脑内海马区注射5×109 L-1的同种异体神经干细胞悬液；模型组仅穿刺，不注射任何物质，移植后4周，对3组大鼠进行Morris水迷宫实验，连续5 d；水迷宫实验1周后，检测3组大鼠脑组织匀浆白细胞介素1、白细胞介素10水平，观察脑组织病理形态学变化。
结果与结论：①Morris水迷宫实验：模型组认知和记忆能力均明显低于假手术组(P<0.01)，实验组空间学习能力、记忆能力均显著高于模型组(P <0.05，P <0.01)。②脑组织匀浆炎炎性因子：模型组白细胞介素1、白细胞介素10水平明显高于假手术组(P <0.01)，实验组白细胞介素1、白细胞介素10水平明显低于模型组(P<0.01)。③脑组织病理：模型组神经元细胞明显少于假手术组，实验组神经细胞数目明显多于模型组。④结果表明，神经干细胞移植对老年性痴呆大鼠神经元具有补充和保护作用，可明显改善动物的学习和记忆能力。 -
胚胎来源肝干细胞肝内移植后在小鼠体内的分布及分化
背景：多种原因会导致肝损伤的出现，临床治疗中，可以尝试使用“治疗性肝再生”技术，通过肝干细胞移植方式实现肝再生，达到治疗疾病的目的。
目的：探讨胚胎来源肝干细胞肝内移植治疗后在小鼠体内的分布、分化情况。
方法：纳入20只BALB/c小鼠，均制备肝损伤模型，随机分为2组，每组10只。对照组为70%肝部分切除肝损伤模型+胚胎来源肝干细胞1×105肝内移植，观察组为治疗性肝再生模型+胚胎来源肝干细胞1×105肝内移植。细胞移植后1，2周，观察受体小鼠肝实质内情况；细胞移植2周后，对两组进行共焦荧光免疫组化检测，另外分别采集两组动物的尾静脉血检测血清白蛋白水平。
结果与结论：①细胞移植后1周对两组受体小鼠肝实质内情况进行观察，均可观察到存在绿色荧光散落分布的情况，且分布密度无明显差异；②移植后2周，经观察对照组肝实质内可见类似肝索样结构，但绿色荧光分布区域扩大情况有限；观察组肝实质内可见类似肝索样结构，绿色荧光分布区域出现显著扩大的情况；③细胞移植后2周，共焦荧光免疫组化检测结果显示，在两组受体小鼠肝组织内均可观察到标记细胞白蛋白阳性表达的情况，但观察组的阳性表达细胞数量显著多于对照组；④移植后2周，两组小鼠的血清白蛋白水平基本一致，观察组略高于对照组，但经比较差异无显著性意义(P>0.05)；⑤实验结果表明，对治疗性肝再生模型小鼠实施肝内胚胎来源肝干细胞移植治疗后，细胞可以有效的整合入宿主肝板，在肝内发生分化，并部分表达肝细胞功能。 -
异丙酚预处理联合脐血间充质干细胞移植治疗脑缺血再灌注损伤
背景：异丙酚具有脑保护作用，而脐血间充质干细胞具有较高分化潜能，两者联用可能对脑缺血再灌注损伤有更好的治疗效果。
目的：评价异丙酚预处理与脐血间充质干细胞移植联用对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经再生的影响。方法：将63只SD大鼠随机等分为模型组、异丙酚组和联合组。所有大鼠以内栓线法建立脑缺血再灌注损伤模型。异丙酚组大鼠于损伤前1 d腹腔注射100 mg/kg异丙酚。联合组大鼠损伤前1 d注射异丙酚(100 mg/kg)，并于大鼠尾部静脉静注脐血间充质干细胞(2×109 L-1)0.5 mL。
结果与结论：①与模型组相比，异丙酚组和联合组大鼠脑组织病理损伤明显减轻，海马组织中survivn基因表达水平上升，神经功能明显改善；②联合组大鼠上述指标优于异丙酚组，同时与异丙酚组相比，联合组大鼠血清中丙二醛含量较低，而超氧化物歧化酶含量较高；③说明异丙酚预处理联合脐血间充质干细胞移植有效改善脑缺血再灌注损伤，且效果优于单纯异丙酚预处理。 -
葛根芩连汤联合人羊膜间充质干细胞移植治疗糖尿病早期视网膜病变
背景：研究发现人羊膜间充质干细胞可以向胰岛素分泌细胞分化，还具有免疫调节作用。临床证实葛根芩连汤有明确降低血糖的作用。
目的：探讨葛根芩连汤联合人羊膜间充质干细胞移植对糖尿病大鼠早期视网膜病变形态学、相关血清学指标及血管内皮生长因子基因表达的影响。
方法：以腹腔注射链脲佐菌素方式制作糖尿病模型，将造模成功的42只Wistar大鼠随机分为模型组、人羊膜间充质干细胞移植组和联合组(人羊膜间充质干细胞移植+葛根芩连汤)，移植后4周测定糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素水平；移植后4周苏木精-伊红染色镜下观察糖尿病大鼠视网膜的病理形态；免疫组织化学方法检测视网膜组织CD45的表达水平；RT-PCR法检测视网膜血管内皮生长因子mRNA的表达。结果与结论：①与模型组比较，人羊膜间充质干细胞移植组和联合组大鼠血糖降低，血清胰岛素浓度增加，联合组改善更为明显，组间比较差异有显著性意义(P<0.05)；②模型组大鼠有明显视网膜水肿、层次紊乱，细胞排列不规则；与模型组比较，人羊膜间充质干细胞移植组大鼠视网膜病变相对轻微，联合组视网膜病变明显好转；③模型组视网膜CD45的表达明显增加，人羊膜间充质干细胞移植组CD45的表达量明显小于模型组(P<0.05)，但大于联合组(P<0.05)；④联合组和人羊膜间充质干细胞移植组血管内皮生长因子mRNA表达低于模型组，联合组降低幅度更大，差异有显著性意义(P<0.05)；⑤结果表明，葛根芩连汤联合人羊膜间充质干细胞移植可能通过抑制 CD45和血管内皮生长因子在视网膜组织表达，从而改善糖尿病视网膜病损严重程度。 -
瑞舒伐他汀联合脐血间充质干细胞移植改善急性心肌梗死后心功能
背景：近年来通过干细胞移植诱导梗死区心肌细胞的再生用以治疗急性心肌梗死后心功能不全，成为较为热议的一种新的治疗手段。
目的：观察瑞舒伐他汀联合脐血间充质干细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心功能的改善作用。
方法：选取45只SD大鼠采用结扎左冠状动脉前降支方法制备心肌梗死模型，随机分为模型组、脐血间充质干细胞移植组和联合组，每组15只。大鼠冠脉结扎后第7天，脐血间充质干细胞移植组及联合组经尾静脉注射脐血间充质干细胞悬液300μL(15.0×108个细胞)，模型组注射相同剂量LG-DMEM培养液，联合组给予瑞舒伐他汀1 mg/kg灌胃×28 d(从术后第1天开始灌胃，1次/d)，脐血间充质干细胞移植组及模型组同步灌胃相同剂量的生理盐水。造模后5周(细胞移植4周)采用彩色多普勒超声仪检测心功能改善情况，酶联免疫吸附法检测血浆Lp-PLA2水平，苏木精-伊红染色观察心肌组织病理变化；Western blot方法检测心肌梗死区热休克蛋白70表达。
结果与结论：①联合组大鼠的左心室射血分数、左心室收缩末压明显高于脐血间充质干细胞移植组(P<0.05)，脐血间充质干细胞移植组明显高于模型组(P<0.05)；联合组大鼠的左心室舒张末压明显低于脐血间充质干细胞移植组(P <0.05)，脐血间充质干细胞移植组明显低于模型组(P <0.05)；②联合组Lp-PLA2水平明显低于脐血间充质干细胞移植组(P<0.05)，脐血间充质干细胞移植组明显低于模型组(P<0.05)；③联合组梗死区的心肌细胞数量较模型组、脐血间充质干细胞移植组明显增加；④心肌梗死区HSP70蛋白表达在联合组明显升高，各组间的表达差异有显著性意义(P <0.05)；⑤结果表明，瑞舒伐他汀联合脐血间充质干细胞移植干预后能确切改善心肌梗死大鼠心功能。 -
骨髓单个核细胞移植治疗脑出血
背景：研究证实，骨髓单个核细胞移植能够明显改善脑出血大鼠的神经功能。
目的：观察骨髓单个核细胞移植对大鼠脑出血后神经功能损伤及血肿脑组织细胞凋亡的影响。
方法：将36只SD大鼠随机分为3组，每组12只，正常对照组不进行任何干预；采用立体定向仪向模型组、移植组大鼠尾状核注射Ⅳ型胶原酶，建立脑出血模型，造模成功后6 h，移植组通过股静脉注射同种异体骨髓单个核细胞3×1010 L-1，模型组注射等量PBS。造模成功后1，4，8，16 d，评估大鼠神经功能；移植后16 d，观察大鼠脑损伤部位的病理变化；移植2，4 d后，采用流式细胞仪检测大鼠血肿脑组织内神经元细胞凋亡率。
结果与结论：①神经功能：移植组8，16 d的神经功能缺损评分低于模型组(P<0.05)。②脑组织病理变化：正常对照组脑组织各层细胞排列紧密、结构完整，神经细胞和胶质细胞形态正常；模型组大鼠脑组织血肿周围组织疏松，细胞间出现间隙，出血部位神经细胞、胶质细胞大部分坏死；移植组大鼠脑组织细胞各层排列交紧密，较整齐，可见增生胶质细胞。③神经元细胞凋亡率：移植组血肿脑组织内细胞凋亡率低于模型组(P<0.05)。④结果表明，骨髓单个核细胞可明显促进脑出血后大鼠神经功能的恢复，降低大鼠脑组织内神经细胞凋亡。 -
骨髓间充质干细胞体外向子宫内膜上皮细胞的分化
背景：以往研究表明，骨髓干细胞是子宫内膜细胞的子宫外来源，参与损伤后子宫内膜的再生功能重建。目的：探讨小鼠骨髓间充质干细胞在体外能否向子宫内膜上皮细胞方向分化。
方法：将第2代骨髓间充质干细胞、子宫内膜间质细胞分别进行以下4组不同处理：①第1组为单纯小鼠骨髓间充质干细胞，用含体积分数为2%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养；②第2组为单纯小鼠骨髓间充质干细胞，用含体积分数为2%胎牛血清、10-7 mol/L β-雌二醇、10μg/L表皮生长因子的DMEM/F12培养液培养；③第3组为用Transwel 小室进行骨髓间充质干细胞与子宫内膜间质细胞共培养，用含体积分数为2%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养；④第4组为用Transwel 小室进行骨髓间充质干细胞与子宫内膜间质细胞共培养，用含体积分数为2%胎牛血清、10-7 mol/L β-雌二醇、10μg/L表皮生长因子的DMEM/F12培养液培养。上述各组处理第5天，收集培养板底部骨髓间充质干细胞，RT-PCR检测上皮细胞标记(CK7，CK18，CK19，EMA)的基因表达，免疫荧光化学方法检测角蛋白表达。第3组细胞共培养后的第1，3，5，7天，RT-PCR检测上皮细胞标记(CK7，CK18，CK19，EMA)的基因表达。
结果与结论：①CK7 mRNA表达在各组中依次上升，并在第4组中达到高，各组之间经比较差异有显著性意义。第2，3，4组CK18，CK19 mRNA的表达均较第1组显著升高，且第2，3，4组间比较差异无显著性意义。EMA mRNA在第2，4组的表达比第1，3组升高，但组间比较差异也无显著性意义。②第4组角蛋白呈强阳性表达，第3组呈弱阳性表达，第1，2组呈阴性表达。③随着时间的推移，CK7 mRNA表达量不断上升，且第5，7天的表达量显著高于第1，3天，不同时间经比较差异有显著性意义。CK18，CK19，EMA mRNA在不同时间的表达量差异无显著性意义。④实验结果表明，小鼠骨髓间充质干细胞在一定条件下可向子宫内膜上皮细胞方向分化。外源性因素和内源性间质细胞分泌因子联合作用下，其促进小鼠骨髓间充质干细胞向子宫内膜上皮细胞方向分化的作用显著。 -
人前脑啡肽基因修饰骨髓间充质干细胞系的生物学特性
背景：有研究发现修饰的细胞株移植能够有镇痛效果，但人前脑啡肽基因修饰骨髓间充质干细胞系的生物学特性的研究较少。
目的：观察人前脑啡肽基因修饰骨髓间充质干细胞的生物学特性。
方法：分离培养骨髓间充质干细胞，建立人前脑啡肽基因修饰的人骨髓间充质干细胞系。
结果与结论：①锥虫蓝染色：冻存复苏后的P4代人骨髓间充质干细胞、人骨髓间充质干细胞-pBABE和人骨髓间充质干细胞-人前脑啡肽细胞活力差异无显著性意义(P>0.05)；②流式细胞仪检测：P4代人骨髓间充质干细胞、人骨髓间充质干细胞-pBABE 和人骨髓间充质干细胞-人前脑啡肽细胞的 CD29和CD44的表达均呈阳性，CD34和CD45的表达均呈阴性；③成脂和成骨诱导：P4代人骨髓间充质干细胞、人骨髓间充质干细胞-pBABE和人骨髓间充质干细胞-人前脑啡肽细胞之间脂肪细胞占总细胞的比例比较差异无显著性意义(P>0.05)，成骨诱导分化后，茜素红染色可见红色钙沉积；④PCR检测：人前脑啡肽基因在P4代骨髓间充质干细胞-pBABE细胞中高表达，在P4代人骨髓间充质干细胞中低表达；⑤免疫荧光染色：转染重组质粒pBABE-人前脑啡肽的人骨髓间充质干细胞中可见脑啡肽蛋白表达；⑥结果表明，人前脑啡肽基因修饰的人骨髓间充质干细胞系保持了骨髓间充质干细胞的多向分化潜能或分裂增殖能力，并可分泌脑啡肽蛋白。 -
辛伐他汀对骨髓基质干细胞特异性成骨分化基因表达的影响
背景：以往研究表明降脂类药物辛伐他汀具有促进体外培养骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的潜能，有望成为新型促成骨类药物，但干预不同时间点相应特异性成骨分化基因的表达是否有差异尚不得而知。目的：观察辛伐他汀体外刺激不同时间点大鼠骨髓基质干细胞骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原的表达。方法：取第1代骨髓基质干细胞分为两组，对照组加入成骨诱导培养基培养，辛伐他汀组在对照组基础上加入终浓度为10-7 mol/L的辛伐他汀培养，干预第7天检测第3代细胞碱性磷酸酶的表达。取第4代骨髓基质干细胞分为两组，对照组加入成骨诱导培养基培养，辛伐他汀组在对照组基础上加入终浓度为10-7 mol/L的辛伐他汀培养，干预12 h和36 h提取细胞RNA及蛋白，采用Realtime PCR 和Western blot 法检测骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原的表达。
结果与结论：①两组细胞均有碱性磷酸酶分泌，辛伐他汀组大鼠碱性磷酸酶阳性细胞比例显著高于对照组(P <0.05)；②辛伐他汀组2个时间点骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原mRNA表达均显著高于对照组(P<0.05)；③Western blot 法检测辛伐他汀组2个时间点骨形态发生蛋白2的表达均显著高于对照组(P<0.05)；辛伐他汀组Ⅰ型胶原蛋白的表达于12 h显著高于对照组(P<0.05)，36 h无显著差别；④以上结果提示，辛伐他汀可以促进大鼠骨髓基质干细胞向成骨细胞分化晚期特异性标志蛋白骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原的表达，药物刺激12 h较36 h作用更显著。 -
关节腔内骨髓间充质干细胞与同种异体骨的共培养
背景：构建组织工程软骨的时候，同种异体骨与骨髓间充质干细胞是常用的支架材料和种子细胞，以往大多采用体外培养的方式。膝关节内游离体可以长期存在于关节腔中，并维持一定的软骨组织学特性。因此，关节腔可能为软骨细胞的生长和发育提供良好的环境条件。
目的：探讨在关节腔内骨髓间充质干细胞与同种异体骨复合培养的效果。
方法：纳入5只新西兰新生白兔进行骨髓间充质干细胞分离与培养，利用1只成年新西兰白兔制备同种异体骨，进行骨髓间充质干细胞与同种异体骨复合。实验分组：腔内培养组将骨髓间充质干细胞与同种异体骨复合物培养于动物关节腔内，正常对照组设为同腔内正常软骨，体外培养组实施常规体外培养。培养4，8，12周进行组织学苏木精-伊红染色观察及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色观察。
结果与结论：①培养12周进行苏木精-伊红染色和观察，正常对照组细胞质和软骨基质出现红染，细胞核出现蓝染，软骨细胞按照一定的方向呈紧密状有序排列。腔内培养组细胞质和软骨基质出现红染，细胞核出现蓝染，支架材料基本吸收。软骨细胞长入支架之中，细胞按照一定应力方向排列，且形态变小。体外培养组软骨细胞出现大量增殖，但呈无序状排列；②经免疫组织化学染色和观察，计数可得，随着培养时间的推移，腔内培养组的 A 值呈现出不断上升的情况，体外培养组和正常对照组均未出现明显的改变。且培养4，8，12周，正常对照组和腔内培养组的 A 值均显著高于体外培养组(P <0.05)。培养4，8周，腔内培养组的A值均显著低于正常对照组(P <0.05)。但培养12周，腔内培养组与正常对照组A值差异无显著性意义(P>0.05)；③实验结果表明，在体外和关节腔内环境下，均可以利用同种异体骨与骨髓间充质干细胞复合培养获得组织工程软骨，且关节腔内培养可以获得更好的培养效果。 -
骨髓间充质干细胞联合血管内皮祖细胞修复骨质疏松性牙槽骨缺损
背景：国内外已有多项研究证实雌激素可以调控血管内皮祖细胞的增殖和迁移能力，同时血管内皮祖细胞也可提高体外培养骨髓间充质干细胞的活性与功能。
目的：评价骨髓间充质干细胞联合血管内皮祖细胞复合膜片修复去势大鼠牙槽骨缺损的能力。
方法：将制备好的骨髓间充质干细胞/血管内皮祖细胞复合膜片、骨髓间充质干细胞膜片、血管内皮祖细胞膜片植入去势大鼠牙槽骨缺损处，或不植入作为空白对照。植入后2，4，8周分别取材，通过Micro-CT扫描的方法评价牙槽骨缺损的修复效果。
结果与结论：相对于单一的正常骨髓间充质干细胞膜片以及单一的正常血管内皮祖细胞膜片，正常骨髓间充质干细胞/血管内皮祖细胞复合膜片具有更强的成骨活性以及骨修复能力。 -
角膜缘干细胞缺乏是否可导致归巢因子基质细胞衍生因子1水平变化
背景：如何提高细胞移植的效率，促进来源有限、数量稀缺的角膜缘干细胞走向组织修复的第一步即归巢，是提高移植效率的关键。在视网膜色素上皮细胞的损伤修复中基质细胞衍生因子1可发挥着重要作用。
目的：观察大鼠及小鼠眼局部角膜缘干细胞缺乏是否会引起外周血中归巢因子基质细胞衍生因子1质量浓度的变化，以期明确角膜缘干细胞缺乏是否会启动外周血中该因子产生变化，从而吸引外周血干细胞向角膜方向归巢。
方法：剖切法制作大鼠和小鼠角膜缘干细胞缺乏模型眼，在为期1个月的观察期内连续抽取外周血， ELISA法检测基质细胞衍生因子1质量浓度。
结果与结论：①大鼠外周血基质细胞衍生因子1质量浓度：在建模后24 h即发生变化，呈增长态势，在建模后第3天达到增长峰值，其后逐渐下降，但在第25天又出现1个增长峰值，较第3天的峰值低，其后恢复至正常数值；②小鼠外周血中基质细胞衍生因子1质量浓度：在建模后12 h即发生变化，呈增长态势，在建模后第3天达到增长峰值，其后逐渐下降，但在第20天又出现1个增长峰值，较第3天的峰值低，其后恢复至正常数值；③结果说明：外周血中基质细胞衍生因子1水平与角膜缘干细胞缺乏造成的损伤刺激存在一定关联，可能在干细胞迁移修复角膜损伤中起重要的作用。 -
神经干细胞在新型复合支架中的生长和分化
背景：神经干细胞具有自我增殖和多向分化潜能，是中枢神经组织工程理想的种子细胞。胶原蛋白和丝素蛋白作为生物支架材料已得到广泛应用，但是两者单独使用时均具有不足。那么能否将二者结合起来构建一个新的神经组织工程支架？该新型支架对神经干细胞的生长和分化又会有什么影响呢？
目的：观察新型复合支架中神经干细胞的生长和分化情况。
方法：将大鼠胚胎神经干细胞接种于新型复合支架中，通过光镜和扫描电镜观察其在支架中生长和分化情况。以常规悬浮培养作为对照组，使用CCK-8检测两组中神经干细胞的活力。对神经干细胞与新型复合支架的三维空间复合体进行石蜡切片，并进行苏木精-伊红染色和免疫荧光染色，观察神经干细胞在材料表面及内部的生长、分化情况。
结果与结论：①新型复合支架中的神经干细胞可以很好地生长、分化，细胞与细胞之间形成突触；②CCK-8检测显示，神经干细胞在支架中生长良好，新型复合支架中神经干细胞活力要优于对照组(P <0.05)；③石蜡切片的苏木精-伊红染色和免疫荧光染色进一步证明神经干细胞在支架中能够很好的生长和分化；④结果说明，制备的新型复合支架具有良好的生物相容性，有利于神经干细胞生长及分化，有良好的应用前景。 -
骨髓间充质干细胞促进肺癌转移的机制
背景：从目前研究来看，间充质干细胞对肿瘤细胞的增殖、转移具备促进或抑制作用存在较大的争议。目的：探讨骨髓间充质干细胞促进肺癌转移的机制。
方法：釆用全骨髓直接贴壁法获得原代大鼠骨髓间充质干细胞，差速贴壁结合消化控制法纯化细胞。培养肺癌细胞株，采用划痕实验、细胞侵袭实验及迁移实验观察骨髓间充质干细胞对肺癌细胞迁移、侵袭、转移能力的影响，建立大鼠肺癌原位肿瘤模型，左侧肺接种骨髓间充质干细胞，移植后14 d观察肺组织病理改变。
结果与结论：①划痕后肺癌细胞迁移速率较大，随着时间的不断延长，划痕处愈合；②加入骨髓间充质干细胞后肺癌细胞迁移数增多；③加入骨髓间充质干细胞后肺癌细胞穿透 Matrigel 的能力增强；④肺癌组织周围存在明显的纤维结缔组织，且与周围组织边界清楚，肿瘤细胞核大；转移病灶组织出现明显的浸润，坏死比较明显，肿瘤细胞核大；⑤结果提示，骨髓间充质干细胞能提高肺癌细胞株的侵袭、迁移以及转移能力。 -
Nanog慢病毒载体构建及在胚胎干细胞分化调控中的应用
背景：在胚胎干细胞分化调控研究中，仍缺少安全有效的组织特异性启动子介导的荧光报告基因的慢病毒表达载体。
目的：构建一个表达多能干细胞组织特异性启动子Nanog同时携带荧光报告基因和抗生素筛选基因的慢病毒表达载体Puro-Nanog-hrGFP，建立小鼠胚胎干细胞转基因细胞系，并观察其在小鼠胚胎干细胞细胞诱导分化过程中的表达。
方法：利用 PCR 扩增 Nanog 基因，通过 LR 反应连接荧光报告基因 hrGFP 构建慢病毒表达载体Puro-Nanog-hrGFP。慢病毒包装并转导小鼠胚胎干细胞后运用嘌呤霉素筛选得到小鼠胚胎干细胞转基因细胞系并进行鉴定，然后诱导其分化，观察随着小鼠胚胎干细胞的分化Nanog的表达情况。
结果与结论：通过特定引物PCR鉴定证实，慢病毒表达载体Nanog-hrGFP构建成功，将其成功导入小鼠胚胎干细胞，经筛纯化得到表达绿色荧光的小鼠胚胎干细胞单克隆细胞系，并通过诱导其分化可观察到绿色荧光表达逐渐减弱，可为进一步调控干细胞分化奠定基础。
