中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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高纯度银杏黄酮注射液对记忆功能及心肌组织超氧化物歧化酶的影响
背景:银杏黄酮的多种药用价值已被国内外认可,许多西方国家大量进口银杏叶提取物制成注射液出口,国内银杏叶产量大,但应用少,且没有注射制剂.目的:观察银杏黄酮注射液中总黄酮甙含量的提高和槲皮素甙含量的提高对小鼠记忆力、家兔缺血再灌注损伤心肌组织超氧化物歧化酶含量及家兔血液流变学的影响.设计:随机对照动物实验.单位:河北省职工医学院.材料:实验动物选择昆明种小白鼠(三四个月)90只.日本大耳白家兔(四五个月)32只.自制高纯度银杏黄酮注射液(5 mL含银杏叶提取物17.5 mg,其中银杏黄酮甙8.7 mg,占提取物的49.8%,萜内酯4.61%);德国产银杏黄酮注射液(金纳多):德国威玛舒培大药房生产(标明物含5 mL含银杏叶提取物17.5 mg,其中银杏黄酮甙4.2 mg,占24%).方法:实验于2002-09/11在河北省职工医学院实验中心动物室完成.①将90只小鼠随机分为6组:自制银杏黄酮注射液1,2 mL/kg组,德国产银杏黄酮注射液l,2 mL/kg组,模型组和对照组,每组15只.各组分别腹腔注射所试药物,模型组和对照组采用生理盐水腹腔注射.连续10 d.于第10天用药Ih后,腹腔注射氢溴酸东莨菪碱2 mL/kg,复制学习记忆障碍模型.10 min后,将其置于跳台仪中,适应后给予36 V电压刺激.训练5 min,24 h复测,记录触电潜伏期及5 min内触电次数.②取日本大耳白家兔32只,随机分为正常对照组、德国产银杏黄酮注射液1 mL/kg组、自制银杏黄酮注射液1.0,0.5 mL/kg组,每组8只.耳缘静脉注射所试药物,3 d后取血测血液流变学指标.③将32只家兔随机分为4组,自制银杏黄酮注射液组1,2 mL/kg组,德国产银杏黄酮注射液2 mL/kg组,生理盐水组,每组8只.制备家兔心肌缺血再灌注损伤模型,家兔冠状动脉结扎30 min再松解方法造成心肌缺血灌注损伤,并于再灌注时即刻由颈动脉插管按不同组推注所试药物.于再灌注前分别注射所试药物,于再灌注前、再灌注30min、60min股动脉取血,测定血浆超氧化物歧化酶.处死动物后取心肌组织测定超氧化物歧化酶.主要观察指标:①记忆实验中触电潜伏期及5 min内触电次数.②血液流变学指标和心肌组织超氧化物歧化酶含量侧定结果.结果:在实验过程中各组实验动物无死亡,全部进入结果分析.①记忆实验:自制银杏黄酮注射液组与德国产银杏黄酮注射液组跳台实验潜伏期和5 min错误次数均明显好于对照组,差异具有显著性意义(P＜0.01/0.05).自制银杏黄酮注射液1 mL/kg组5 min错误次数少于同剂量德国产银杏黄酮注射液组,差异有显著性意义.②血流变学:自制银杏黄酮注射液1.0,0.5 mL/kg组,德国产银杏黄酮注射液组1 mL/kg组均可降低全血黏度低切值、红细胞刚性指数、红细胞压积等指标.③超氧化物歧化酶含量:自制银杏黄酮注射液1,2 ml/kg与对照组比较均能明显提高缺血心肌超氧化物歧化酶含量,并呈剂量依赖关系.德国产银杏黄酮注射液1 ml/kg组能明显提高缺血心肌超氧化物歧化酶含量,自制银杏黄酮注射液1 mL/kg组较德国产银杏黄酮注射液2 mL/kg组缺血心肌超氧化物歧化酶含量提高显著.结论:自制高纯度银杏黄酮注射液和德国产银杏黄酮注射液均能提高记忆力;且同剂量下自制高纯度银杏黄酮注射液作用优于德国产银杏黄酮注射液.
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别隐品碱对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响
目的:观察中药伏生紫堇块茎夏天无中提取的生物碱别隐品碱对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响.方法:实验于2003-11/2005-09在解放军总医院老年心血管病研究所病理生理实验室完成.采用酶解法制备SD大鼠心室肌单细胞,采用全细胞膜片钳记录大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流.①保持电位-80 mV,施予-40 mV,20 ms的预刺激失活钠通道,紧接着给予+50 mV,300ms的去极化脉冲,记录外向钾电流.记录正常电流后,与细胞池灌流含别隐品碱的细胞外液,药物终浓度分别为3,10,30,100μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变,观察瞬时外向钾电流对别隐品碱浓度依赖性.②保持电位-80 mV,施予-40 mV,20 ms的预刺激,紧接着给予-40～+60 mV,300 ms的去极化脉冲,记录外向钾电流.记录正常电流后,与细胞池灌流含别隐品碱的细胞外液,药物终浓度为10 μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变.分别测量各膜电位下的瞬时外向钾电流,以各脉冲下电流幅值对相应膜电位作图得各电流Ⅰ-Ⅴ曲线.③保持电位-80 mV,施予-40 mV,20 ms的预刺激,紧接着给予-40～+60 mV,500 ms的去极化脉冲,记录外向钾电流.记录正常电流后,与细胞池灌流含别隐品碱的细胞外液,药物终浓度为10 μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变.将各电位下电流换算成电导,以标准化电导对各膜电位作图得稳态激活曲线.④保持电位-80mV,施予-40 mV,20 ms的预刺激,紧接着给予-100～+20 mV,1 000 ms的去极化脉冲,在每一条件脉冲后紧跟一固定去极化至+50 mV,50 ms的测试脉冲,记录瞬时外向钾电流.记录正常电流后,与细胞池灌流含别隐品碱的细胞外液,药物终浓度为10μmol/L,待药物浓度在细胞池稳定后记录电流的改变.以标准化电流对各膜电位作图得稳态失活曲线.结果:①去极化+50 mV时,别隐品碱10μmol/L使瞬时外向钾电流从给药前的(21.3±4.6)pA/pF降至(16.4±3.3)pA/pF(P＜0.01,n=19).别隐品碱3～100μunol/L浓度依赖性地阻滞瞬时外向钾电流,IC50为12.7 μmol/L(95%可信范围:9.7～15.5 μmol/L).②别隐品碱10μmol/L使各膜电位瞬时外向钾电流幅值降低,降低幅度Ⅰ-Ⅴ曲线上移,虽然各电压下降低幅度有所不同,但差异无显著性.③别隐品碱10 μmol/L使激活曲线右移,V1/2从(-1.5±1.8)mV移至(8.9±2.6)mV(P＜0.01,n=16),k值基本无变化,给药前为(13.9±2.2)mV,用别隐品碱后为(13.04±1.87)mV.④别隐品碱10 μmol/L使曲线左移,V1/2从(-29.37±3.01)mV移至(-35.32±4.01)mV(P＜0.05,n=16),给药前k值为(11.25±2.76)mV,用别隐品碱后为(9.94±1.48)mV,虽有差异但不显著(P＞0.05,n=16).结论:别隐品碱具有抑制心室肌细胞瞬时外向钾电流的作用.
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大枣多糖对气血双虚模型小鼠全血细胞和血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平的影响
目的:观察大枣多糖对气血双虚小鼠全血细胞、血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平的影响,分析大枣补血作用的可能途径.方法:实验于2002-02/06在河南中医学院动物实验中心完成.①选用昆明种小鼠60只,体质量20～22 g,雄性,6周龄.随机选用50只造成气血双虚模型:每鼠尾部放血0.025 mL/g,分别于第2,4,6,8天,腹腔注射环磷酰胺80,40,40,40 mg/kg(给环磷酰胺前禁食不禁水12 h);其余10只小鼠为空白对照组(仅注射同体积生理盐水).将50只气血双虚模型小鼠随机分为5组:大、中、小剂量大枣多糖组[分别灌胃400,200,100 mg/kg剂量的大枣多糖(由河南中医学院药物化学学科提供.本品为鼠李科植物枣Ziziphus jujuba Mill.干燥成熟果实经乙醇回流脱脂、水提取、浓缩、醇沉、除蛋白、透析、醇沉、真空干燥等程序提取的精制物)水溶液,灌胃体积0.02 mL/g],当归补血口服液组[灌胃6.6 mL/kg当归补血口服液(郑州市协和制药厂生产,批号010301,10 mL/支),原药液稀释3倍]及模型组(灌胃等体积生理盐水).空白对照组仅灌同体积生理盐水.1次/d,连续给药10 d.②于末次给药后2 h,各组动物均尾部取血,采用库尔特细胞全自动分析仪测血液中红细胞、白细胞、血红蛋白和血小板数;然后,每组各取5只小鼠,眼眶取血,采用由解放军总医院科技开发中心提供(批号020126)的粒-巨噬细胞集落刺激因子试剂盒测血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平.组间计量资料差异比较采用t检验.结果:小鼠60只均进入结果分析.①空白对照组、各剂量大枣多糖组、归补血口服液组小鼠血红细胞计数、白细胞计数、血小板计数明显高于模型组(P＜0.01);空白对照组,大、中剂量大枣多糖组、归补血口服液组小鼠血红蛋白含量高于模型组(P＜0.01),小剂量大枣多糖组血红蛋白含量与模型组相近.②模型组小鼠血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平明显低于空白对照组、当归补血口服液组、各剂量大枣多糖组(P＜0.01).结论:大枣多糖可通过升高气血双虚小鼠血清粒-巨噬细胞集落刺激因子水平,改善全血细胞检测结果,起到补血作用.
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川芎嗪对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶表达及细胞凋亡的影响
目的:观察大鼠脊髓损伤后应用盐酸川芎嗪注射液对诱导型一氧化氮合酶表达及细胞凋亡的影响.方法:实验于2005-07/2005-11在华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科实验室完成.采用Allen's法将72只成年SD大鼠造成脊髓中度损伤模型,随机分为两组:损伤组和川芎嗪组,分别给予生理盐水及川芎嗪治疗,损伤后不同时间点(8 h,1 d,3 d,1周,2周,3周)处死大鼠,用苏木精-伊红染色观察损伤脊髓组织病理变化,用免疫组化染色检测诱导型一氧化氮合酶阳性细胞,原位末端标记法标记凋亡细胞.观察各组大鼠各时间点组织学检查、诱导型一氧化氮合酶表达阳性细胞率和凋亡指数.结果:72只大鼠全部进入结果分析.①川芎嗪组大鼠与损伤组比较,脊髓出血明显减少,可见点灶状出血、坏死,范围较局限,神经细胞肿胀较轻,组织水肿较轻,空泡变性较少.②川芎嗪组与损伤组均发现诱导型一氧化氮合酶表达阳性细胞,可见于神经元、神经胶质细胞、血管内皮细胞、室管膜细胞,均在1周时达高峰,在8 h,1 d,3 d,1周,2周,3周的时间点间进行阳性细胞率比较,差异均有显著性意义(t=2.234～13.412,P＜0.05).③川芎嗪组与损伤组均发现凋亡细胞,1周达高峰,在8 h,1 d,3 d,1周,2周,3周时间点间进行细胞凋亡指数比较,差异均有显著性意义(t=2.417～3.689,P＜0.05).结论:川芎嗪注射液能抑制脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶表达及神经细胞凋亡.
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氦氖激光穴位照射后缺氧缺血性脑损伤新生大鼠体质量及学习记忆能力的变化
目的:观察氦氖激光穴位照射对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠体质量、学习和记忆能力的影响.方法:实验于2003-12/2004-05在郑州大学基础医学院人体解剖学实验室进行,①取7 d龄Wistar大鼠56只随机分为假手术组(12只)、模型组(12只)、激光非穴位照射组(16只)、激光穴位照射组(16只)4组.除假手术组外,其他3组大鼠结扎新生鼠左颈总动脉后,再吸入低浓度氧(体积分数为0.08的O2,体积分数为0.92的N2)制成缺氧缺血性脑损伤大鼠模型,氦氖激光照射治疗于模型制备后第2天开始,穴位及非穴位定位参照大鼠常用的针灸穴位.②模型制备前12 h、后3,10,22 d记录各组大鼠体质量.③大鼠于第2疗程结束后(每个疗程10 d,疗程间隔2 d)第2和3天做迷宫实验,用Y-型迷宫检测各组大鼠条件反射形成的次数代表其学习记忆能力.④迷宫实验后取脑进行微管关联蛋白2免疫组织化学染色.结果:56只大鼠全部进入结果分析.①体质量:模型组大鼠增长速度明显低于其他各组,而激光穴位照射组虽稍低于假手术组但比模型组和激光非穴位照射组增长快.②激光穴位照射组大鼠的条件反射产生次数低于模型组和激光非穴位照射组(P＜0.05),与假手术组比较差异不显著(P＞0.05).③激光穴位照射组微管关联蛋白2阳性染色的表达明显高于模型组和激光非穴位照射组.结论:氦氖激光穴位照射对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有确切的保护作用,能够促进大鼠生长发育,提高其学习记忆能力,且具有明显的穴位特异性.
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针刺预处理对全脑缺血大鼠脑组织细胞凋亡的影响
目的:观察手针和电针预处理对全脑缺血大鼠脑组织细胞凋亡的影响,并与缺血预处理结果进行比较.方法:①实验于2005-02/2005-9在黑龙江中医药大学实验中心完成.①选用雄性健康Wistar大鼠108只.采用4-动脉阻断法复制大鼠全脑缺血模型.按随机抽签法将大鼠分为6组(每组18只):正常组(正常饲养,不予任何处置),假手术组(仅暴露双侧椎动脉及双侧颈总动脉),脑缺血组(热凝双侧椎动脉及动脉夹夹闭双侧颈总动脉10 min),脑缺血预处理组(热凝双侧椎动脉及动脉夹夹闭双侧颈总动脉3 min,24 h后全脑缺血10 min),手针预处理组(术前7 d用0.25 mm×40mm毫针针刺大鼠双侧足三里穴,直刺进针5 mm;双侧曲池穴,直刺进针4 mm,0.25 mmX25 mm毫针针刺百会穴,平刺约3 mm.针刺预处理组间歇5 min捻转一次,平补平泻,1次/d,干预30 min,预处理后24 h全脑缺血10min),电针预处理组(术前7 d采用全能脉冲电疗仪,对足三里、曲池穴进行电针针刺,频率为1 Hz,电压为2 V,强度以肢体轻微抖动为度,1次/d,干预30 min.预处理后24 h全脑缺血10 min).②术后24,48,72 h各组各处死鼠6只,取脑,采用细胞凋亡原位末端标记法检测大鼠脑组织的细胞凋亡情况.③组间计量资料比较采用方差分析.结果:大鼠108只均进入结果分析.大鼠大脑皮质及海马CA1区细胞凋亡数:脑缺血预处理组、手针预处理组、电针预处理组、假手术组、正常组明显少于脑缺血组(P＜0.05);电针预处理组大鼠大脑皮质细胞凋亡数明显少于手针预处理组(P＜0.05),与脑缺血预处理组相近.结论:针刺预处理可以通过抑制神经细胞凋亡,且电针干预效果与脑缺血预处理相近,优于手针干预后.
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人参对老年大鼠脑组织β肾上腺素能受体含量的影响
目的:观察具有大补元气、生津止渴、安神益智功效的人参对老年大鼠不同脑区β肾上腺素能受体含量的影响,分析该作用是否有剂量依赖性.方法:实验于2003-05/2004-12在中山大学中山医学院人体解剖学教研室的脑研究室完成.①选用清洁级健康SD大鼠30只,雌雄不拘,体质量400～600 g,18～20月龄.按随机数字表法将大鼠分为3组:对照组、高剂量人参水煎液组、低剂量人参水煎液组,每组10只.②高剂量人参水煎液组:灌胃含生药1.5g/(kg·d)人参水煎液(吉林生晒参,均购于广州药材公司.分别第1次用8倍水分煎2 h,第2次6倍水分煎1.5h,浓缩至含生药2 kg/L)3 mL;低剂量人参水煎液组:灌胃含生药0.5 g/(kg·d)人参水煎液3 mL;对照组:灌胃蒸馏水3 mL,连续3周.③3周后,麻醉大鼠,开颅分离前额皮质、海马、小脑皮质、丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段.用放射配基受体结合分析法测定各组大鼠前额皮质、海马、小脑皮质、丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量.④先行单因素方差分析,再用Student-Newman-keals方法对各组数据进行统计学处理.结果:老年大鼠30只均进入结果分析.①中枢皮质结构各脑区肾上腺素能受体含量:给药3周后,高、低剂量人参水煎剂组大鼠前额皮质、海马、小脑皮质的β肾上腺素能受体含量均明显高于对照组(t=2.71～4.21,P＜0.05～0.01),其中高剂量人参水煎剂组作用更为明显.②中枢皮质下结构各脑区β肾上腺素能受体含量:给药3周后各组大鼠丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量比较,差异不明显(P＞0.05).结论:人参可选择性提高老年鼠前额皮质、海马、小脑皮质β肾上腺素能受体含量,且高剂量人参水煎液[含生药1.5g/(kg·d)]作用更为明显,但对丘脑、下丘脑、脑桥、脊髓颈段β肾上腺素能受体含量无明显影响.
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人参二醇皂甙对内毒素诱导休克大鼠模型肺组织超氧化物歧化酶和丙二醛水平的影响
目的:观察人参二醇皂甙对内毒素诱导休克大鼠模型肺组织的保护作用.方法:实验于2003-05/12在吉林大学基础医学院机能科学实验中心实验室完成.①选用健康Wistar大鼠100只,雌雄不拘,鼠龄2.5～3月.按随机抽签法将大鼠分为5组:模型组,地塞米松组,人参二醇皂甙低、中、高剂量组.每组再分别于休克后120和240 min处死10只大鼠.②实验开始前,人参二醇皂甙3个剂量组:分别舌下静脉注射22.5,45.0,90.0 mg/kg剂量的人参二醇皂甙(由吉林大学基础医学院天然药物研究室提供,将人参加水煮三四次,过滤,水洗脱致无色,再用乙醇洗脱,回收乙醇得浸膏,用乙醇静止2 h,回收乙醇得人参二醇皂甙)注射液2.5 mL/kg;地塞米松组:舌下静脉注射2 mg/kg剂量地塞米松(天津药业集团新郑股份有限公司提供,1 mL/支,国药准字H14022804)注射液2.5 mL/kg;模型组注射等容量的50g/L葡萄糖注射液.10 min后各组分别舌下静脉注射5 mg/kg内毒素,建立内毒素休克模型.血压下降至实验前基础血压的2/3时判定为休克状态.③按购自南京建成生物工程公司的相应试剂盒操作,采用722S型分光光度计测定休克后120和240 min大鼠肺组织超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量.④组间计量资料比较采用t检验.结果:大鼠100只均进入结果分析.①地塞米松组和人参二醇皂甙中剂量组大鼠休克后240 min肺组织超氧化物歧化酶活性明显高于模型组(P＜0.05),丙二醛含量明显低于模型组(P＜0.05).②人参二醇皂甙各剂量组和地塞米松组大鼠休克后120 min肺组织超氧化物歧化酶活力高于模型组,但差异不明显(P＞0.05).结论:人参二醇皂甙中剂量(45 mg/kg)能提高内毒素诱导休克后240 min大鼠肺组织抗氧化能力,对肺组织有保护作用,该作用与地塞米松相当.
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柴胡黄芩不同配伍比例干预急性酒精性肝损伤大鼠肝脾、胸腺、肾上腺指数及肾上腺中维生素C含量的变化
背景:现代医学对酒精性肝损伤的发病机制尚未完全清楚,除了戒酒、支持、对症治疗外,尚无特效的治疗方法.中医药对本病的治疗有着明显的优势,既能改善临床症状又能调理机体免疫功能,有着较好的发展前景.目的:从整体观念出发探讨柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍(2:1,1:1,1:2)对大鼠急性酒精性肝损伤的防治作用.设计:完全随机分组设计,空白对照实验.单位:河南中医学院药学院临床中药学实验室.材料:实验于2002-09/11在河南中医学院临床中药学实验室完成.选用健康Wistar大鼠96只,雄性.随机将96只大鼠分为8组:空白组,模型组,柴胡组,黄芩组,小柴胡组,柴胡黄芩2:1组,柴胡黄芩1:1组,柴胡黄芩1:2组,每组12只.方法:①按质量比2:1,1:1,1:2分别称取柴胡、黄芩(480g,240g;360g,360g;240g,480 g)制备柴胡水煎液.除空白组(以等体积的生理盐水溶液灌胃)外,其余各组均灌胃给予56度二锅头白酒7 mL/kg,2次/d,连续10 d造模结束.自造模第1天起,每日灌胃给药2次.空白组和模型组灌服等体积的蒸馏水,其余各组分别灌胃给予相应的药物水煎液,小柴胡组剂量为10 g/kg,其余各给药组剂量皆为12 g/kg.②末次给酒后16 h,腹主动脉取血制备血清.迅速摘取肝脏、脾脏、胸腺、肾上腺.计算脏器指数:脏器指数脏器质量(g)/体质量(g)×100%.计算肾上腺维生素C含量(mg/g):{[(测定管A值-空白管A值)/(标准管A值-空白管4值)]x标准管浓度(6 mg/L)×样品测试前的稀释倍数/组织中蛋白含量(g/L)}.③组间计量资料比较采用方差齐性检验及单因素方差分析.主要观察指标:各组大鼠肝脏、脾脏、胸腺、肾上腺(右侧)指数及右侧肾上腺中维生素C含量比较.结果:实验过程中模型组大鼠死亡3只,柴胡组、柴胡黄芩1:1组各死亡2只,其余各组均死亡1只,进入结果分析空白组12只,模型组9只,柴胡组、柴胡黄芩1:1组各10只,其余各组11只.①各组大鼠肝脏、脾脏、胸腺、肾上腺(右侧)指数的比较:各组大鼠肝脏指数差异不明显.模型组脾脏指数、胸腺指数、肾上腺指数均明显低于空白组(P＜0.05～0.01).柴胡组脾脏指数明显高于模型组,能使降低的脾脏指数趋于正常(P＜0.05);黄芩组、柴胡黄芩1:1组、1:2组、小柴胡组胸腺指数明显高于模型组(P＜0.05);柴胡黄芩1:2组、小柴胡组肾上腺指数明显高于模型组(P＜0.05).②各组大鼠右侧肾上腺中维生素C含量比较:模型组肾上腺组织中维生素C含量与空白组比较,差异不明显.柴胡组、小柴胡组、柴胡黄芩配伍组肾上腺中维生素C含量均明显低于模型组(P＜0.05～0.01),以柴胡黄芩1:1组的作用趋势显著(P＜0.01).结论:干预肝脾、胸腺、肾上腺功能损伤可能是柴胡黄芩配伍抗急性酒精性肝损伤的机制之一;各配伍比例中以柴胡黄芩1:2组作用明显.
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益肾通痹方对膝关节骨性关节炎兔血清和膝关节腔液中炎性细胞因子和一氧化氮含量的影响
目的:观察中药益肾通痹方对实验性兔膝关节骨性关节炎模型动物血清和关节腔液中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、一氧化氮含量,以及膝关节软骨病理形态的影响,分析益肾通痹方防治膝关节骨性关节炎的免疫学机制.方法:实验于2004-08/12在新疆医科大学动物实验中心完成.①选用成年雄性新西兰兔24只.分别于实验第1,4,7天于兔右膝关节腔内注射40g/L木瓜蛋白酶0.3 mL,建立膝骨关节炎模型.②将造模成功的24只兔按随机抽签法分为3组:模型组、益肾通痹方组、布洛芬组,每组8只.从造模后第15天开始,益肾通痹方组:灌胃益肾通痹方含生药7.2g/(kg·d)(主要成分狗脊、骨碎补、牛膝、鸡血藤、川芎等,自行配制)20 mL;布洛芬组:灌胃布洛芬混悬液(中美史克制药有限公司生产,生产批号:04080081,300mg/片)28.44mg/(kg·d);模型组:灌胃生理盐水;1次/d,连续15 d.③于实验第31天,采用光学显微镜(苏木精-伊红染色×100)观察软骨病理形态学变化.采用放射免疫分析法,根据由解放军总医院放免研究所提供的试剂盒检测血清及关节腔液中白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α含量.按南京生物建成公司生产的一氧化氮试剂盒说明,测定血清及关节腔液中一氧化氮含量.④计量资料差异比较采用方差分析.结果:新西兰兔24只均进入结果分析.①病理形态观察结果:益肾通痹方组软骨及滑膜病变程度较其他2组有不同程度的减轻.②血清细胞因子水平:益肾通痹方组血清白细胞介素1β水平明显低于模型组(F=2.778,P＜0.05),其余各组间血清各细胞因子水平差异不明显(P＞0.05).③关节腔液中细胞因子含量:益肾通痹方组关节腔液中白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、一氧化氮含量明显低于模型组(F=3.225～5.038,P＜0.05～0.01).布洛芬组与模型组,益肾通痹方组与布洛芬组关节腔液中细胞因子含量比较,差异不明显(P＞0.01).结论:中药益肾通痹方通过抑制关节液中炎性细胞因子和一氧化氮的产生,起到减轻膝关节骨性关节炎兔软骨损伤的作用.
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中药落地生根对小鼠血液系统及免疫功能的调节作用
目的:观察中药落地生根对小鼠血液系统及免疫功能的调节作用.方法:实验于2005年在滨州医学院免疫教研室完成.实验用落地生根水溶液由滨州医学院药理教研室制备,内含枸橼酸、苹果酸、琥珀酸、延胡索酸、乙醛酸、丙酮酸、草乙酸等14种氨基酸和槲皮素-3-双阿托伯糖甙及紫云英甙等.实验选用清洁级昆明种小鼠56只,随机分为高剂量落地生根组、低剂量落地生根组、地塞米松组和生理盐水组,每组14只.高剂量落地生根组采用800 mL/L落地生根水溶液(0.01 mL/g)灌胃;低剂量落地生根组用500 mL/L落地生根水溶液(0.01 mL/g)灌胃;地塞米松组给予5 mL/L地塞米松(0.01 mL/g)灌胃;生理盐水组给予等量的生理盐水灌胃.1次/d,灌胃15 d后观察落地生根对小鼠脾淋巴细胞增殖、白细胞介素2、骨髓细胞增殖反应以及血液系统的影响.结果:56只小鼠全部纳入结果分析.①高浓度的落地生根明显促进小鼠淋巴细胞增殖反应,与生理盐水组比较差异有显著性(P＜0.01);低浓度的落地生根对小鼠淋巴细胞增殖反应无明显的影响;地塞米松组与生理盐水组比较差异明显(P＜0.05).②高浓度的落地生根能促进细胞因子白细胞介素2的产生,与生理盐水组比较差异有显著性意义(P＜0.05);低浓度的落地生根对白细胞介素2的产生无明显的影响;地塞米松组与生理盐水组比较差异不显著(P＞0.05).③落地生根对骨髓细胞增殖反应无明显影响;地塞米松组与生理盐水组比较差异有显著性(P＜0.01).④高浓度落地生根组血小板的浓度为(711.33±234.05)×109 L-1,生理盐水组为(684.20±539.53)×109 L-1,两组比较差异有显著性意义(P＜0.01),低浓度落地生根对血小板浓度无明显影响.结论:中药落地生根可以增强小鼠的免疫功能,并有促进血液凝固的作用.
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强肌健力口服液对脾虚小鼠DNA合成的影响
目的:观察强肌健力口服液对实验性脾虚证小鼠DNA合成的影响,探讨该方防治脾胃虚损型重症肌无力的作用途径及中医脾肾相关的分子生物学基础.方法:实验于2005-06/07在广州中医药大学核医学实验室完成.选择健康雄性NIH小鼠69只,随机分为5组,即正常对照组(n=12)、脾虚模型组(n=15)、强肌健力口服液26 g/kg组(n=14)、强肌健力口服液13 g/kg组(n=15)及四君子汤组(n=13).除正常对照组外,各组小鼠均采用利血平复制脾虚证动物模型,腹腔注射利血平0.2 mg/(kg·d).①正常对照组腹腔注射生理盐水0.1 mL/(只·d).②强肌健力口服液26g/kg,13 g/kg组灌胃强肌健力口服液(由北芪、党参、升麻、白术、甘草等组成,每毫升含生药1.204g),给药剂量分别为26,13g/kg,1次/d.③四君子汤组灌服四君子汤(由党参、白术、茯苓、灸甘草组成)26g/kg,1次/d.各组均连续用药16 d.给药结束后,测定各组小鼠脾、胸腺、肾、肝、小肠等组织DNA含量的变化;并测定各组小鼠造模前及用药结束后体质量和脾、肾、胸腺、肝脏质量/体质量比值的变化.结果:69只小鼠全部进入结果分析,无脱失.①用药16 d后脾虚模型组脾脏、胸腺、小肠DNA含量均比正常对照组显著降低(q=3.45～4.96,P＜0.05～0.01),而肾脏组织DNA含量则升高(q=3.81,P＜0.05).②用药16 d后强肌健力口服液26,13g/kg组脾脏、胸腺DNA含量显著高于脾虚模型组[(20.73±4.44,12.30±4.61,7.37±4.43;12.76±2.12,11.58±2.46,8.41±3.86)DPMx104/g(q=3.22～12.43,P＜0.05～0.01)];强肌健力口服液13g/kg组肾脏、肝脏DNA含量显著升高(q=3.50,3.76,P＜0.05);而且体质量也显著高于脾虚模型组(q=9.98,9.94,P＜0.01),脾脏、胸腺、肾脏、肝脏组织质量/体质量比值也显著高于脾虚模型组(q=3.53～7.41,P＜0.05～0.01).结论:脾虚证的发生与DNA合成减少有关,强肌健力口服液能促进DNA合成,从而发挥其健脾益气、强肌健力的作用,但发现强肌健力口服液26g/kg组能促进DNA合成,而13g/kg组则有抑制DNA合成的倾向,其调控途径有待于进一步研究.而脾肾相关理论有助于指导临床辨证施治.
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应用单光子发射计算机断层扫描观察家兔"风门"穴皮下、皮内及静脉注射核素钼锝的走行通路
目的:应用单光子发射计算机断层扫描观察家兔通过皮下、皮内、静脉3种不同途径注射核素钼锝"风门"穴的皮部腧穴通路,分析腧穴与皮肤感受器的关系.方法:实验于2005-10/11在徐州医学院附属连云港医院肿瘤生物实验室完成.将6只家兔分为皮下注射组,皮内注射组和静脉注射组3组,每组2只,皮下注射组在已确定的家兔胃伤害性刺激的皮肤牵涉区,取双侧"风门"穴,左侧皮内、右侧皮下注射核素钼锝(99TcmO4-,99Tcm)为示踪剂,皮内注射组取双侧"风门"穴,双侧皮内注射99Tcm,静脉注射组经静脉注射99Tcm.各组均应用单光子发射计算机断层扫描成像,分别从兔冠状面和矢状面收集示踪剂图像,示踪剂选择绿色成像,示踪剂集中区呈白色.每次连续收集图象16幅,成像时间为7 min,开始每隔15 min连续收集图像1次,1 h后每隔30 min连续收集图像1次,3 h后每隔60 min连续收集图像1次,6 h后每隔120min连续收集图像1次,观察至注射核素后12～14 h.结果:①实验家兔6只均成功按设计方案进行了示踪剂的注射,3组实验共获单光子发射计算机断层扫描图像1 280幅.②皮下、皮内、静脉3种不同途径注射核素钼锝通过SPECT观察不同的形态学变化:"风门"穴皮内注射的99Tcm沿纵向行走,延长约2～5倍,注射12～14 h后仍清晰可见;"风门"穴皮下注射的99Tcm逐渐缩小,8～10 h消失;静脉注射的99Tcm,8～10 h大部分经肾脏排泄.结论:①家兔皮内注药有两条吸收途径,即血液和神经末梢感受器吸收途径.②皮下注射主要通过血液吸收.③腧穴部位皮内示踪剂沿纵向行走,有可能与皮内神经末梢感受器的逆行吸收有关,与交感感受器关系有可能更密切,皮部腧穴有可能是皮内感受器的密集点或片,皮部经络有可能是皮内感受器密集点的有序排列.
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紫花龙胆水煎液对气管纤毛运动的影响
目的:观察紫花龙胆水煎液对大鼠离体气管纤毛运动的影响,以及对10g/L博莱霉素引起纤毛损伤的保护作用.方法:实验于2004-08/2005-02在解放军第四军医大学基础部药理科完成.①选用15只雌性SD大鼠,8周龄.取出喉头至气管分叉处的整段气管.每条气管分成4段,每段气管纵向剪成两半,分别在3个培养皿中倒入龙胆花水煎液[称取干燥龙胆花2.2 g,加300 mL冷蒸馏水浸泡15 min,煮沸30 min,过滤药渣加100mL水继续煎煮,煮沸10 min,过滤合并两次滤液水浴浓缩成80 mL,加NaCl 8 mg药物浓度27.5g/L(相当于生药2.2gl,10g/L博莱霉素[15 mg(效价)日本化药株式会社生产,用时用生理盐水配制成10g/L溶液],生理盐水.每只大鼠可获取4个标本.②将15只大鼠的60个标本随机分为4组:生理盐水组、紫花龙胆组、博莱霉素组和博莱霉素+紫花龙胆花组.用20倍解剖显微镜直接观察气管片,用秒表及两脚规测量墨汁运行速率,每次观察1 min.每观察1次后,将气管片漂洗2次,以除去墨汁,5 min后将相应离体气管片分别在生理盐水(生理盐水组)、紫花龙胆水煎液(紫花龙胆水煎液组)、10g/L博莱霉素液(博莱霉素组)中浸沾2 min按上方法观察不同药物对气管纤毛墨汁运行速率的影响.博莱霉素+紫花龙胆花组:先将标本在10g/L博来霉素溶液中浸沾2 min后,漂洗10 min,再浸入紫花龙胆水煎液中2 min后记录墨汁运行速率.墨汁清除率(%)=(给药后运行速率-给药前运行速率)/给药前运行速率.③组间计量资料差异比较采用方差分析及Dunnett-t检验,组内差异比较采用配对t检验.结果:大鼠15只均进入结果分析.①离体气管纤毛运行速率:紫花龙胆组较用药前明显加快,博莱霉素组较用药前明显减慢.②墨汁清除率:紫花龙胆组较用药前增加了37%,明显高于生理盐水组(P＜0.05),博莱霉素组较用药前降低了44%,明显低于生理盐水组(P＜0.01),博莱霉素+紫花龙胆组明显高于博莱霉素组(P＜0.01).结论:10 g/L博莱霉素液可致气管黏膜纤毛上皮对墨汁清除能力减退,紫花龙胆水煎液则有增强气管纤毛上皮清除墨汁的能力,可显著改善由10g/L博莱霉素溶液所致纤毛上皮运动能力受损,增强排痰功能.
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复方郁金胶囊抗抑郁抗焦虑的作用
目的:以抑郁和焦虑模型小鼠为实验对象,观察复方郁金胶囊的抗抑郁和抗焦虑作用.方法:实验于2004-10/2004-12在北京大学基础医学院药理学系神经精神药理实验室完成.选择雄性ICR小鼠250只,随机分成5组,每组50只,即对照组、复方郁金胶囊0.9,1.8,3.6 g/kg 3个剂量组、阳性药物组(丙咪嗪或地西泮),每组再均分为5组,分别进行小鼠强迫游泳、小鼠悬尾实验、小鼠自主活动、高台十字迷宫、孤养应激实验.复方郁金胶囊是将中药郁金、酸枣仁、合欢和茯苓的干燥水提取物,按30.5:29.5:32:8的配比制成(样品由石家庄七月七生物高科技制品有限公司提供,批号:20041017).评估方法和条件:①在强迫游泳实验中,观察小鼠在水中呈漂浮状态或仅有细小肢体运动以保持头部浮在水面的不动时间.②悬尾实验"不动时间"以计算机上小鼠活动曲线在6 min内呈直线部分的累计之和.③在高台十字迷宫实验记录小鼠进入开臂的次数和停留时间.④在孤养小鼠应激实验采用电子体温计测定小鼠肛温变化,测定时体温计插入小鼠体内的深度和保留时间应一致.统计5组实验数据,分析复方郁金胶囊对小鼠的抗抑郁和抗焦虑作用.结果:实验小鼠250只全部进入结果分析.①强迫游泳实验结果:复方郁金胶囊1.8,3.6 g/kg剂量组小鼠不动时间分别为70,48 s,与对照组(130 s)比较,差异有显著性意义(P＜0.05).②悬尾实验结果:复方郁金胶囊1.8,3.6 g/kg剂量组小鼠不动时间比对照组明显缩短(49,48,86 s,P＜0.05).③高台十字迷宫实验结果:复方郁金胶囊1.8,3.6g/kg剂量组小鼠在开臂内停留的时间和进入开臂内次数比对照组显著增加(74,66,37 s;8.9,8.6,4.9次;P＜0.05).④孤养小鼠应激实验结果:复方郁金胶囊1.8,3.6 g/kg剂量组小鼠体温分别升高0.42,0.37℃,对照组体温平均升高0.75℃;与对照组比较,差异有显著性意义(P＜0.05).⑤各组自主活动次数比较:复方郁金胶囊各剂量组小鼠不比对照组增加.结论:复方郁金胶囊在不增加小鼠自主活动基础上,可改善抑郁和焦虑模型小鼠行为,具有抗抑郁和抗焦虑作用.
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发酵虫草菌粉对糖尿病大鼠肾脏结构的影响
目的:观察发酵虫草菌粉对糖尿病肾病模型大鼠的治疗效果.方法:实验于2004-02/05在新乡医学院第一附属医院中心实验室完成.①选用纯系SD大鼠45只,雄性23只,雌性22只.随机将大鼠分为3组:正常对照组、模型组、发酵虫草菌粉治疗组,每组15只.模型组和发酵虫草菌粉组:于禁食24 h后行四氧嘧啶125 mg/kg的剂量左下腹腔一次性注入制成糖尿病大鼠模型.正常对照组:注入同等剂量的生理盐水.72 h后,随机血糖≥16.7 mmol/L者为糖尿病模型造模成功.发酵虫草菌粉治疗组:给予发酵虫草菌粉[商品名:百令胶囊,主要成分为发酵虫草菌粉,杭州中美华东制药有限公司生产,批准文号:(91)卫药准字Z-81号,0.2g/粒]0.2g/(kg·d)灌胃,1次/d,共12周.模型组和正常对照组:灌入同等量的生理盐水,1次/d,共12周.②12周后,采用BACKMAN全自动生化分析仪测定血糖、血脂、肾功能、24 h尿蛋白排泄量.测定双侧肾脏质量,计算肾重/体质量.采用Paisey方法测定组织中蛋白糖基化产物.采用光镜检查,HPIAS-1000型图像分析系统对病理切片进行分析,检测肾小球平均截面积,计算肾小球硬化指数(采用Raij等的半定量方法估计肾小球硬化程度,每张切片均观察20个肾小球,根据肾小球硬化灶占肾小球比例分为0～4分:0分,肾小球无病变;1分,受损范围≤25%;2分,受损范围26%～50%;3分,受损范围51%～75%;4分受损范围≥76%).电镜观察肾小球滤过屏障情况,测定肾小球基底膜平均厚度和平均肾小球截面积,并观察肾小管病变情况.③组间比较采用方差分析.结果:大鼠45只均进入结果分析.①模型组大鼠空腹血糖、三酰甘油和总胆固醇水平,肾质量/体质量,24 h尿蛋白排泄量,肾脏组织中蛋白糖基化产物含量明显高于正常对照组(P＜0.05～0.01).发酵虫草菌粉治疗组大鼠症状明显较模型组减轻,空腹血糖、三酰甘油和总胆固醇水平,肾质量/体质量,24 h尿蛋白排泄量,肾脏组织中蛋白糖基化产物含量低于模型组(P＜0.05～0.01).各组大鼠血尿素氮及血肌酐水平均在正常范围,组间比较,差异不明显(P＞0.05).②光镜检查结果显示,模型组大鼠肾小球截面积明显大于正常对照组(P＜0.01),系膜区基质增生扩大,发酵虫草菌粉治疗组明显小于模型组(P＜0.01);模型组大鼠肾小球硬化明显,平均肾小球硬化指数明显高于正常对照组(P＜0.01),发酵虫草菌粉治疗组明显小于模型组(P＜0.01).③电镜结果显示,模型组大鼠肾小球基底膜显著的不均匀增厚,明显高于正常对照组(P＜0.01),并伴有广泛的肾小管上皮细胞的髓样变性及胞浆空泡化变性.发酵虫草菌粉治疗组上述病变明显减轻(P＜0.05～0.01).结论:发酵虫草菌粉能显著改善糖尿病大鼠肾脏结构,防止系膜区扩大和基底膜增厚,具有显著地抗肾小球纤维化和防止肾小管病变的作用.
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电针与褪黑素合用对大鼠应激性胃溃疡的影响
目的:观察电针与褪黑素合用对束缚-浸水应激大鼠胃溃疡指数、胃黏膜超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量的影响,并与电针或褪黑素单独使用结果做比较.方法:实验于2004-10/2005-06在咸宁学院医学院生理教研室完成.①选用70只雄性SD大鼠,2～3月龄,体质量(250±30)g.将动物按随机抽签法分为5组:正常组、应激组、褪黑素+应激组、电针+应激组、电针+褪黑素+应激组.②正常组:不造模,不予处理.褪黑素+应激组、电针+应激组、应激组:分别于造模前30min腹腔注射褪黑素(Sigma公司产品,20mg/kg)、电针干预、腹腔注射含体积分数0.05乙醇的等体积生理盐水.电针+褪黑素+应激组:腹腔注射褪黑素(20 mg/kg)后电针干预(用CDM1-2型双频针麻治疗仪电针刺激大鼠双侧后肢足三里穴位,电刺频率为4～16 Hz,强度按1,2,3V顺序增递电压,每个强度电针干预10 min,共30 min)再造模.③应激性溃疡模型制备:用乙醚轻度麻醉大鼠,将四肢及头部束缚于木板上.大鼠清醒后,将木板垂直浸于23℃水中,水面平胸骨剑突处.④浸水6 h后处死大鼠剖腹,于胃幽门和贲门两处用线结扎,并向胃腔内注入40 g/L甲醛溶液8～10mL.30min后沿大弯侧将胃剪开展平,观察溃疡发生情况.计算溃疡指数(损伤面的长度＜1.0 mm为1分;1.0～2.0 mm为2分;2.0～3.0 mm为3分;3.0～4.0 mm为4分,＞4.0 mm将其分割若干段,每段按上法计算,溃疡宽度＞1.0mm则分值×2,全胃得分之和为胃溃疡指数).⑤取大鼠胃黏膜,制成组织匀浆液,取出上清液按南京建成生物工程研究所提供的试剂盒说明书检测超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量.⑥组间计量资料差异比较采用t检验.结果:大鼠70只均进入结果分析,每组14只(进行胃溃疡指数计算7只,胃组织匀浆超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量测定7只).①胃溃疡指数:应激组明显高于褪黑素+应激组和电针+应激组(P＜0.01),褪黑素+电针+应激组明显低于褪黑素+应激组和电针+应激组(P＜0.01).②胃黏膜超氧化物歧化酶活性:应激组明显低于正常组(P＜0.01),褪黑素+应激组和电针+应激组明显高于应激组(P＜0.01),明显低于电针+褪黑素+应激组(P＜0.05,0.01).③胃黏膜丙二醛含量:应激组明显高于正常组(P＜0.01),褪黑素+应激组和电针+应激组明显低于应激组(P＜0.01,0.05),明显高于电针+褪黑素+应激组(P＜0.05).结论:褪黑素或电针对应激性胃黏膜损伤有保护作用,该作用的发挥可能与抑制体内的过氧化反应有关,且电针与褪黑素合用对胃黏膜的保护作用更为显著.
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葡萄籽原花青素与酪蛋白对辐照大鼠肠黏膜屏障的保护作用
目的:观察单独应用葡萄籽原花青素及其与酪蛋白联合对60Co-γ射线照射损伤大鼠肠黏膜屏障的保护作用.方法:实验于2004-06/07在解放军第三军医大学野战外科研究所三室完成.①选用80只清洁级健康Wistar大鼠,鼠龄3周,雌雄各半.按随机抽签法将大鼠分为4组:正常对照组、照射组、葡萄籽原花青素组、联合干预组,每组20只.②正常对照组及照射组:喂食常规饲料.葡萄籽原花青素组:常规饲料基础上添加10g/L的葡萄籽原花青素(天津尖峰天然产物研究开发公司提供,产品批号:20031226).联合干预组:常规饲料基础上添加10 g/L的葡萄籽原花青素和50 g/L的酪蛋白(兰州同键生物科技股份有限公司惠赠,产品批号:20040415),各组自由进食.饲养10 d后除正常对照组外,其余大鼠均于解放军第三军医大学辐照中心接受60Co-γ全身一次性照射,照射距源心1.52 m,剂量为7 Gy,时间为460 s.③照射后第7天,采用鲎试剂法测定,按照上海伊华医学科技有限公司提供试剂盒说明书测定血清内毒素水平.扫描电镜下(400倍)观察肠黏膜表面形态变化.④计量资料差异比较采用两样本均数的t检验.结果:辐照后7 d之内共造成15只大鼠死亡,照射组、葡萄籽原花青素组、联合干预组因辐射损伤分别死亡9,4,2只,正常对照组无死亡.终各组抽取6只用于实验.①小肠黏膜扫描电镜观察结果:正常对照组大鼠小肠黏膜形态结构正常,照射组小肠黏膜表面结构不完整,有广泛的破损现象.葡萄籽原花青素组和联合干预组与照射组相比,小肠黏膜损伤程度比照射组轻.②血清内毒素水平:照射组大鼠高[(343.5±35.0)kEu/L],葡萄籽原花青素组和联合干预组明显低于照射组[(293.0±22.0),(261.5±24.7)kEu/L,t=2.25,3.52,P＜0.05,0.01],联合干预组虽低于葡萄籽原花青素组,但差异不明显(P＞0.05).结论:单独应用葡萄籽原花青素和葡萄籽原花青素+酪蛋白联合应用均可有效减轻放射对大鼠肠黏膜屏障的损害作用.
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淫羊藿、鹌鹑复方对免疫力低下小鼠免疫功能的影响
目的:观察验方淫羊藿、鹌鹑复方对免疫力低下小鼠免疫功能的影响.方法:实验于2005-09/10在三峡大学医学院天然药物实验室完成.①选用昆明系雄性小鼠30只,鼠龄三四个月,体质量(20±2)g.将昆明系雄性小鼠随机分为3组:空白对照组、模型组和中药复方治疗组,每组10只.②空白对照组:实验进程中正常饲养不作任何处理;模型组:腹腔内注射80 mg/kg环磷酰胺造成免疫力低下模型,1次/d,同时灌服生理盐水25 mL/(kg·d);中药复方治疗组:腹腔内注射80 mg/kg环磷酰胺造成免疫力低下模型,1次/d,同时灌胃淫羊藿、鹌鹑复方粉剂溶解液(复方粉末来源于淫羊藿、鹌鹑复方胶囊,由三峡大学第一临床医学院和长阳县人民医院制备,其主要成分为淫羊藿、鹌鹑、肉苁蓉等中药材.淫-鹑胶囊为医院制剂,2g/粒)25g/(lg·d).3组均连续干预10 d.③用药10d后,取其脾制成脾细胞悬液,采用流式细胞仪检测脾组织T细胞亚群.④组间计量结果差异比较采用t检验.结果:30只小鼠均进入结果分析.①模型组小鼠脾脏CD3+,CD4+T细胞亚群百分比和CD4+/CD8+明显低于空白对照组[(36.95±2.17)%,(26.27±2.58)%,1.61±0.21;(47.11±1.72)%,(36.14±1.95)%,1.89±0.12,P＜0.05～0.01];中药复方治疗组明显高于模型组[44.04±2.02)%,(28.20±1.37)%,2.23±0.11,P＜0.05～0.01].②模型组小鼠脾脏CD8+T细胞亚群百分比明显低于空白对照组[(16.34±1.72)%,(19.16±2.02)%,P＜0.05],高于中药复方治疗组[(12.65±1.12)%,P＜0.01].结论:淫羊藿、鹌鹑复方能够显著改善免疫力低下小鼠的免疫功能.
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夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠右心房收缩特性的影响
目的:观察夜来香树属植物夜来香正丁醇提取物对豚鼠离体右心房收缩性的影响,并分析其可能的作用途径.方法:实验于2005-06/2005-09在赣南医学院机能实验室完成.取豚鼠8只,开胸迅速取出心脏,在持续充以纯氧的条件下,用眼科剪仔细游离出右心房,两端穿线结扎,置于麦氏浴槽中,加入Krebs营养液,保持一定的静息张力、温度、pH值.采用累积给药前后对照的实验方法,采用JZ100型张力换能器分别测定给药前及质量浓度为0.1,0.3,1,3,10,30,100g/L的夜来香正丁醇提取物对其离体右心房收缩幅度、收缩速度、舒张速度的影响,记录于Medlab-U/4CS生物信号采集处理系统,计算右心房收缩幅度、收缩和舒张速度影响的变化率[变化率%=(给药前值-给药后值)/给药前值×100%].分析其对豚鼠离体右心房收缩性的影响.结果:实验动物8只全部进入结果分析,无脱失.①夜来香正丁醇提取物低浓度(0.1,0.3g/L)对右心房收缩幅度具有轻度增加作用,但差异无显著性意义;1g/L时明显增加其收缩幅度的作用,增加率达15.2%,而在高浓度(3,10,30,100g/L)时,则呈明显的浓度依赖性负性作用,抑制率分别为12.2%,20.9%,23.7%,37.3%(P＜0.05～0.01).②夜来香正丁醇提取物在低浓度(0.1,0.3,1g/L)时对右心房收缩速度具有轻度增加的作用,但差异无显著性意义;而在高浓度(3,10,30,100g/L)时,则呈明显的浓度依赖性负性作用,其中10,30,100 g/L 3个浓度作用明显,抑制率分别为19.6%,33.5%,53.4%(P＜0.05～0.01).③夜来香正丁醇提取物在低浓度(0.1,0.3,1g/L)时对右心房舒张幅度具有增加的作用,但无统计学意义;而在高浓度(3,10,30,100 g/L)时,则呈明显的负性作用,抑抑制率分别为6.75%,19.11%,20.36%,41.64%(P＜0.05～0.01).结论:不同质量浓度夜来香正丁醇提取物对离体豚鼠右心房的收缩性呈双相调节作用.
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高强度聚焦超声热疗联合消积止痛散对胰腺癌患血清血管内皮生长因子的影响及意义
目的:观察高强度聚焦超声热疗联合中药消积止痛散对胰腺癌患者血管内皮生长因子的影响.方法:纳入2001-01/2004-12常州中医院、常州第一人民医院肿瘤科门诊或入院胰腺癌患者61例,男42例,女19例;随机分为观察组31例和对照组30例.观察组采用高强度聚焦超声热疗联合中药消积止痛散治疗(中药消积止痛散为天江制药厂提供的配方颗粒,由全蝎0.5 g,蛇六谷3.0 g,仙鹤草2.0 g,土鳖虫1.0 g,粉防己0.5 g组成).热疗两次治疗间隔48 h以上.每例患者接受3～12次高强度聚焦超声热疗治疗,平均6次;配合服用消积止痛散3.5g/次,2次/d,28 d为1周期,连用两周期.对照组30例采用吉西他滨(商品名泽菲,江苏豪森药业股份有限公司生产,批号:040902,1.0g/支,粉针剂)化疗,吉西他滨1.0 g/m(第1,8,15天)或1.0g/m2(第1,8天)加5-FU 350 mg/m2(第1～5天),每4周重复1次,至少两个周期.采用双抗体夹心ELISA法测定两组患者治疗前后血清血管内皮生长因子的含量,并比较变化.结果:参与观察的胰腺癌患者61例全部进入结果分析.①观察组和对照组治疗前血清血管内皮生长因子含量比较,差异无显著性意义[(531.99±561.67),(491.07±483.68)ng/L;t=0.30,P＞0.05].②治疗后,观察组血清血管内皮生长因子含量较治疗前明显降低,差异有显著性意义[(285.40±323.13)ng/L,t=2.12,P＜0.05],对照组较治疗前略上升,但差异无显著性意义[(285.40±323.13)ng/L,t=0.41,P＞0.05].③治疗后观察组血清血管内皮生长因子含量较对照组明显降低,差异有显著性意义(t=2.55,P＜0.05).结论:与吉西他滨化疗比较,高强度聚焦超声热疗联合中药消积止痛散治疗胰腺癌可明显降低患者血清血管内皮生长因子水平.
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茶色素对吗啡依赖小鼠和大鼠的戒毒作用
目的:观察茶叶中提取物茶色素对吗啡依赖小鼠和大鼠催促戒断症状的抑制作用并分析其可能的作用机制.方法:实验于2003-03/2004-03在大连医科大学药理教研室完成.选择昆明种小鼠110只;SD大鼠40只,将小鼠随机分为正常对照组(n=20)、吗啡依赖组(n=20)、茶色素高、中、低剂量组(n=20),左旋咪唑阳性对照组(n=10).将所有大鼠随机分为正常对照组、吗啡依赖组、茶色素高、低剂量组,每组10只.所有动物均采用皮下注射吗啡的方法建立小鼠及大鼠吗啡依赖模型.采用催促戒断治疗试验测定10 min内小鼠及大鼠出现的跳跃反应次数及潜伏期,比较跳跃反应前后1 h的体质量变化,同时进行免疫功能测定,超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的测定.结果:各实验组小鼠及大鼠全部进入结果分析.①催促戒断治疗试验结果:与小鼠吗啡依赖组比较,高剂量组的小鼠跳跃次数明显减少(P＜0.05),高、中剂量组的小鼠跳跃反应潜伏时间均明显延长(P＜0.05).跳跃反应后,高剂量组体质量明显下降(P＜0.05),与大鼠吗啡依赖组比较,大鼠茶色素高、低剂量组的戒断症状分值均明显降低,高剂量组的体质量明显下降.②吗啡依赖小鼠免疫功能的测定结果:与吗啡依赖组比较,茶色素高、中、低剂量组及左旋咪唑组的血清半数溶血值均有提高,并具有显著性差异(P＜0.05),茶色素高、中剂量组及左旋咪唑组能显著提高小鼠对二硝基氟苯所致足掌肿胀值(P＜0.01～0.05),茶色素高剂量组及左旋咪唑组的胸腺指数提高(P＜0.05).③超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的测定结果:与正常对照组比较,吗啡依赖组小鼠超氧化物歧化酶活力明显降低,丙二醛含量明显升高(P＜0.05).与吗啡依赖组相比,茶色素高剂量组能显著提高小鼠的超氧化物歧化酶活力,中剂量组虽也提高了小鼠血清中超氧化物歧化酶活力但差异无显著性,高、中剂量组丙二醛含量显著降低(P＜0.05),但低剂量组降低不明显.结论:茶色素对吗啡依赖小鼠及大鼠有戒毒作用,其作用可能与增强免疫功能和抗自由基作用有关.
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苦豆子对豚鼠内脏平滑肌收缩活动的干预
目的:观察苦豆子水煎剂对豚鼠离体内脏平滑肌作用的影响,分析其发挥作用途径.方法:实验于2004-12在宁夏医学院基础学院生理实验室完成.①选用健康成年三色毛豚鼠24只,雌雄不拘.②苦豆子(由银川市中医院提供,由该院检定)被制备成1kg/L的水煎剂,实验的系列质量浓度为1×10-4,3×10-4,1×10-3,3×10-3,1×10-2,2×10-2kg/L.③实验方法:实验时分别取出豚鼠胆囊、胃、小肠及膀胱.每个胆囊制备3条平滑肌肌条,共72条;胃、小肠及膀胱各制备12条平滑肌肌条.累积于置胆囊、胃、小肠及膀胱平滑肌肌条各12条的肌槽中加入1×10-4,3×10-4,1×10-3,3×10-3,1×10-2,2×10-2 kg/L苦豆子水煎剂,加药间隔2 min,容量50 μL.④按随机抽签法将其余60条胆囊肌条分为5组:阿托品+苦豆子组、酚妥拉明+苦豆子组、维拉帕米+苦豆子组、苯海拉明+苦豆子组、吲哚美辛+苦豆子组,每组12条.上述5组分别加入拮抗剂阿托品(胆碱能M受体阻断剂)1×10-6mol/L,酚妥拉明(肾上腺素能d受体阻断剂)1×10-6 mol/L,维拉帕米(Ca2+拮抗剂)1×10-7mol/L,苯海拉明(组织胺H1受体阻断剂)1×10-6 mol/L,吲哚美辛(前列腺素受体阻断剂)1×10-6 mol/L后2 min再依次加入前述"累积加药"中各质量浓度苦豆子.⑤通过JH-2肌肉张力换能器将信号输出BL-410生物机能实验系统读出标本的张力、收缩波平均振幅及收缩频率的变化值.⑥数据间差异性比较采用均数t检验.结果:①累积加入苦豆子水煎剂1×10-4,3×10-4,1×10-3,3×10-3,1×10-2,2×10-2 kg/L后,胆囊肌条张力逐渐增高、收缩频率逐渐加快、收缩波平均振幅逐渐减小.②当苦豆子水煎剂累积质量浓度为2×10-2 kg/L时,酚妥拉明+苦豆子组离体胆囊肌条张力和收缩频率明显低于或慢于苦豆子组(t=2.340 1,2.140 4,P＜0.05),而收缩波平均振幅明显高于苦豆子组(t=2.825 6,P＜0.05).维拉帕米+苦豆子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组(t=2.346 4,P＜0.05).③当苦豆子水煎剂累积质量浓度为1×10-2 kg/L时,酚妥拉明+苦豆子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组(t=2.430,P＜0.05),而收缩波平均振幅明显高于苦豆子组(t=2.227 9,P＜0.05).维拉帕米+苦豆子组离体胆囊肌条张力明显低于苦豆子组(t=2.657 6,P＜0.05).④累积加入不同质量浓度苦豆子水煎剂后对豚鼠胃、小肠及膀胱肌条的张力、收缩波平均振幅及收缩频率无明显影响(P＞0.05).结论:①苦豆子水煎剂可呈剂量依赖性增高胆囊平滑肌肌条的张力、加快收缩频率、减小收缩波平均振幅,其作用可被酚妥拉明及维拉帕米部分阻断,且该种作用可能与胆囊平滑肌细胞膜上的肾上腺素能d受体和细胞膜上的Ca2+通道有关.②苦豆子水煎剂对豚鼠胃、小肠及膀胱平滑肌的收缩活动无明显影响.
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心脉通对大鼠异丙肾上腺素性缺血心肌的保护作用
目的:观察心脉通预防性给药对异丙肾上腺素诱导的大鼠急性心肌缺血损伤的保护作用.方法:实验于2005-11/12在暨南大学医学院中心实验室完成.①选用清洁级健康SD大鼠24只,雄雌不拘.大鼠被随机分为4组:对照组,模型组,心脉通高、低剂量组,每组6只.心脉通低、高剂量组:按大鼠体表面积换算量(10 mL/kg)灌胃162,324 mg/(kg·d)心脉通(用蒸馏水制成混悬液)药液.对照组和模型组:灌胃同容量生理盐水.均1次/d,连续7d.②于末次灌胃给药后30～60 min,将除对照组外的大鼠麻醉后,皮下多点注射异丙肾上腺素4 mg/(kg·d),连续2 d,建立急性心肌缺血模型,以心电图J点偏移≥0.1 mV为造模成功.③采用BL-420E生物机能实验系统检测注射异丙肾上腺素后30 min和12 h心电图ST-junction(J点)的位移.采用BECKMAN全自动生化分析仪,以酶法测定血清肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶活力;分别按照TBA显示法和黄嘌呤氧化酶法等方法测定血清丙二醛水平和超氧化物歧化酶活力.④多组均数比较用单因素方差分析和组间q检验.结果:大鼠24只均进入结果分析.①注射异丙肾上腺素后30 min和12 h,模型组心电图J点偏移程度明显高于对照组,心脉通高、低剂量组(P＜0.05).②模型组大鼠血清肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶活力明显高于对照组、心脉通低、高剂量组(P＜0.05).③模型组大鼠血清超氧化物歧化酶活力明显低于对照组和心脉通低、高剂量组(P＜0.05),丙二醛水平明显高于对照组和心脉通低、高剂量组(P＜0.05).结论:心脉通药物可保护由异丙肾上腺素诱导的缺血心肌,该作用的发生与改善心肌缺血、减少自由基产生、提高抗过氧化酶活性有关.
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柴胡、黄芩组方合剂对糖尿病肾病大鼠尿蛋白、脂质代谢的影响
目的:观察柴胡、黄芩组方合剂对糖尿病肾病大鼠尿蛋白、脂质代谢的影响.方法:实验于2003-06/12在解放军第一军医大学中医系完成.将32只Wistar大鼠随机分为模型对照组、大剂量药物治疗组、中剂量药物治疗组和小剂量药物治疗组,每组8只.用链脲佐菌素腹腔注射法诱导大鼠制备糖尿病肾病模型,模型对照组用生理盐水灌胃,小剂量药物治疗组用1.8 g/kg柴胡、黄芩组方合剂灌胃,大、中剂量组用药剂量分别是小剂量药物的4倍和2倍.治疗12周后检测大鼠血糖、24h尿蛋白、24h尿白蛋白排泄率、胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的含量变化.柴胡、黄芩组方合剂为广州一方制药厂生产的,小四五颗粒主要成份:柴胡、黄芩、半夏、人参、白术等.结果:32只大鼠纳入结果分析.①小、中、大剂量药物治疗组24 h尿蛋白定量分别为(56.20±11.30,44.22±10.68,39.22±18.44)mg/24h,模型对照组为(64.74±16.34)mg/24 h,中剂量和大剂量药物治疗组的24 h尿蛋白定量比模型对照组低(P均＜0.05),小剂量药物治疗组与大剂量药物治疗组之间差异有显著性意义(P＜0.05).②各剂量组24 h尿白蛋白定量分别为(0.27±0.43,1.07±0.26,1.08±0.29)mg/24 h,均显著低于糖尿病模型对照组(1.84±0.74)mg/24 h(P均＜0.05),各剂量组之间差异不明显.③各剂量组和模型对照组胆固醇含量分别为(1.48±0.15,1.21±0.12,1.13±0.12,1.19±0.11)mmol/L,三酰甘油分别为(1.10±0.27,0.74±0.17,0.65±0.13,0.70±0.12)mmol/L,各剂量组均显著低于对照组(P＜0.05),但各剂量组间比较差异不显著.结论:柴胡、黄芩组方合剂可以降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白、白蛋白排泄,对其脂质代谢也具有调节作用.
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柴胡、丹参复方对非酒精性脂肪肝大鼠的干预
目的:观察中药柴胡、丹参复方治疗非酒精性脂肪肝大鼠血脂、脂质过氧化系统、肝功能、过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白和mRNA表达、肝组织病理变化及炎症反应的影响,分析影响非酒精性脂肪肝大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA表达相关因素,了解柴胡、丹参复方治疗非酒精性脂肪肝的作用途径.方法:实验于2004-09/2005-03在大连医科大学附属第二医院中心实验室完成.①选用雄性SD大鼠30只,体质量(130±10)g.正常喂养1周后,按随机抽签法将大鼠分为3组:正常组、模型组、柴胡、丹参复方组,每组10只.正常组:普通饲料喂养;模型组和柴胡、丹参复方组:喂高脂饲料(普通饲料加质量分数0.1猪油、质量分数0.02胆固醇)造成非酒精性脂肪肝模型.②造模开始后第13周,正常组和模型组:灌胃生理盐水10 mL/kg,1次/d;柴胡、丹参复方组:灌胃柴胡、丹参复方溶液10mL/kg(由柴胡15 g,丹参15 g,泽泻15 g,半夏15 g,生山楂15 g组成,药材购自大连药材集团公司,水煎剂制成浓浸膏,加蒸馏水稀释成含生药0.17g/mL灌胃溶液),1次/d.③实验第16周末处死大鼠.用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活力和总胆固醇、三酰甘油水平.采用放免法测定血清肿瘤坏死因子α水平.按照试剂盒说明测定肝组织匀浆总胆固醇、三酰甘油、丙二醛含量和超氧化物歧化酶活力.④苏木精-伊红染色,光镜下评估脂肪变性程度(判断标准:以肝小叶内未见脂滴肝细胞为阴性,脂滴肝细胞占肝细胞总数＜1/3为+,1/3～2/3为++,＞2/3为+++,几乎均呈脂滴肝细胞为+++)和计算炎症活动度计分[计分标准为汇管区炎症(P)、小叶内炎症(L)、碎屑坏死(PN)及桥接坏死(BN)4项指标,每项依据病变程度分别计为1,2,3,4分,计分公式为:P+L+2(PN+BN)].⑤采用免疫组织化学染色检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达.计算每张切片阳性细胞所占百分率进行分级:0为-,＜10%为+,10%～50%为++,＞50%为+++.⑥采用蛋白质免疫印迹法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ蛋白表达.⑦采用反转录聚合酶链反应检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达.⑧两组间实验数据的比较采用成组设计的两样本均数t检验;等级资料采用秩和检验;两变量间相关性分析采用直线相关分析法.结果:大鼠30只均进入结果分析.①柴胡、丹参复方组肝脂肪变性程度明显轻于模型组(P＜0.01).正常组基本无炎症细胞浸润;模型组肝小叶内出现汇管区炎症,炎症活动度计分明显高于正常组(P＜0.01);柴胡、丹参复方组炎症活动明显轻于模型组(P＜0.01).②模型组血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活力和总胆固醇、肿瘤坏死因子α水平明显高于其他2组(P＜0.01).③模型组大鼠肝匀浆总胆固醇、三酰甘油、丙二醛含量明显高于其他2组(P＜0.01),超氧化物歧化酶活力明显低于其他2组(P＜0.01).④正常组见棕黄色颗粒主要分布在汇管区周围肝细胞胞核内,中央静脉周围肝细胞阳性表达少;模型组过氧化物酶体增殖物激活受体γ阳性表达细胞明显少于其他2组(P＜0.05～0.01).⑤模型组大鼠肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达明显低于正常组和柴胡、丹参复方组(P＜0.01).⑥模型组肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达与血清肿瘤坏死因子α和肝匀浆三酰甘油、丙二醛含量呈显著负相关(-0.917,-0.727,-0.763,P＜0.05～0.01),与肝匀浆超氧化物歧化酶活力呈显著正相关(r=0.859,P＜0.05).结论:①柴胡、丹参复方可使肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达增强,能显著降低肝脏内三酰甘油储存、减轻脂质过氧化反应,使肝细胞脂肪变性及炎症程度显著减轻.②柴胡、丹参复方可通过增强核转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ的表达,抑制非酒精性脂肪肝大鼠肝组织脂质过氧化反应和炎症介质的释放,有效逆转高脂饮食造成的肝损伤.
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痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质组学研究
目的:观察痹肿消汤干预胶原诱导性关节炎大鼠滑膜病变的蛋白质改变,分析痹肿消汤治疗类风湿关节炎可能的作用机制.方法:实验于2004-05/2005-02在中南大学湘雅医院中西医结合研究所实验室、卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室完成.70只SD大鼠随机分为3组,正常组10只,其余60只大鼠采用牛Ⅱ型胶原与完全福氏佐剂诱导SD大鼠实验性关节炎模型,选取造模成功者再随机分为两组,即痹肿消汤组和模型组.痹肿消汤煎液制备:白花蛇舌草15 g,肿节风30 g,丹参15 g,络石藤20 g,骨碎补15 g,苡米30 g等15味中药,双蒸水煎2次,30min/次,两煎混合,G4滤器过滤,于60℃水浴中浓缩成每毫升药液含生药116 g.痹肿消汤组灌服痹肿消汤煎液10 mL/kg(相当于生药62.1 g),2次/d灌服;模型组灌服生理盐水10 mL/kg,2次/d灌服.正常组自由进水.应用双向凝胶电泳技术分别分离正常组、模型组及痹肿消汤组大鼠关节滑膜的总蛋白后,经胶体考染显色、图像分析、识别差异表达的蛋白质点,应用MALDI-TOF-MS质谱仪得到相应的肽质量指纹图谱,然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点.结果:纳入实验的70只大鼠,造模不成功被淘汰7只,终痹肿消汤组26只、模型组27只、对照组10只,共63只大鼠进入结果分析.①建立了正常组、模型组和痹肿消汤组关节滑膜的双向凝胶电泳图谱,其平均蛋白质点数分别为947±39,994±41,1031±52,其匹配率为92%,91%,94.2%.②发现并鉴定了正常组、模型组和痹肿消汤组大鼠滑膜的差异表达大于2倍的蛋白质点55个,这些差异表达蛋白质的功能涉及物质代谢、能量产生、物质转运、抗氧化应激、信号转导及细胞骨架蛋白,随即用免疫印迹的方法差异蛋白质annexin 1、aldolase A在正常组、模型组、痹肿消汤组中的表达,其结果也显示了类似的表达差异.结论:类风湿关节炎模型关节滑膜病变是一个多种蛋白质参与的复杂过程.滑膜组织的比较蛋白质组学分析是一种筛选病变相关蛋白的可靠方法之一.annexin 1、aldolase A可能与实验性关节炎的关节滑膜病变有关;痹肿消汤可能通过对实验性关节炎大鼠滑膜蛋白质表达的调控达到治疗目的.
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不同中医治法对脑出血患者神经功能缺损与血清神经元特异性烯醇化酶水平的影响
目的:观察不同中医治法对脑出血患者血清神经元特异性烯醇化酶水平.及对症候和神经功能缺损评分的影响,比较不同中医治法对脑出血的疗效差异.方法:选择2002-08/2003-06湘雅医院收治的76例脑出血患者,随机分为6组:①镇肝息风汤组12例.②血府逐瘀汤组11例.③涤痰汤组13例.④大承气汤组11例.⑤平肝息风汤组14例.⑥西药治疗组15例.各中药组分别采用镇肝熄风汤、血府逐瘀汤、涤痰汤、大承气汤、平肝熄风汤治疗,西药组采用甘露醇降颅压,调控血压,对症支持治疗.于入院后1,10 d采集血标本,用放射免疫法测定血清神经元特异性烯醇化酶水平,同时进行症候评分(9项,共52分,评分越低症状越轻)和神经功能缺损评分(总分45分,评分越高,神经功能缺陷越重),并进行相关行分析.另设正常对照组8例,测定血清神经元特异性烯醇化酶水平.结果:84例全部进入结果分析.①血清神经元特异性烯醇化酶水平:治疗前各组脑出血患者均高于正常对照组(P＜0.01),治疗10 d后仍高于正常对照组(P＜0.01);与其他各组比较,平肝熄风汤组治疗后下降明显(P＜0.01,0.05).②各组脑出血患者治疗后神经功能缺损积分和主证积分均较治疗前显著下降(P＜0.01或P＜0.05),其中平肝熄风汤组治疗前后差值大于其他各组(P＜0.01或P＜0.05).③脑出血患者血清神经元特异性烯醇化酶水平与神经功能缺损评分呈正相关(r=0.752,P＜0.01).结论:①采取平肝熄风,清热凉血,涤痰开窍,活血化瘀等治法均能降低脑出血患者血清神经元特异性烯醇化酶水平,提示对脑出血神经元损伤均有保护作用,以风火痰瘀同治(平肝熄风汤)疗效佳.②血清神经元特异性烯醇化酶水平能较好地反映脑出血后的脑损伤程度和预后.
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针刺真、假穴位不同脑区激活效应的功能性磁共振成像评估
背景:人们从大脑的不同功能区着手,试着用功能性磁共振来阐释其与经络穴位的相关性.目的:运用功能性磁共振观察针刺真、假穴位与大脑功能区的关系,以及针刺真、假穴位不同脑区激活效应的差异.设计:随机对照的验证性观察.单位:成都中医药大学附属医院,弗莱堡大学医学院环境和自然医学系针灸科以及放射医疗中心.对象:本实验于2000-10在弗莱堡大学医学院放射医疗中心完成.以视力正常的健康志愿者(弗莱堡大学医学院医学生)18人作为受试对象,随机分为2组:针刺假穴+有治疗作用穴位组和针刺假穴+无治疗作用穴位组,每组9人.均签定知情同意书.方法:两组先接受浅刺(假穴)后观测出针.然后针刺假穴+有治疗作用穴位组针刺双侧光明穴和太冲穴,针刺假穴+无治疗作用穴位组针刺双侧丰隆穴和陷谷穴.为得到强烈的针感(酸麻胀重的感觉),每30 s进行捻转(每穴先左后右),每次持续10 s,持续4 min后静息2 min为1个周期,共持续4个周期25 min后出针.采用1.5 T磁共振扫描仪(西门子Erlangen)进行功能成像检测.并对所有的受试者及单个受试者交叉关系分析.主要观察指标:①针刺假穴以及针刺有治疗作用穴位组对象视皮质的反应.②针刺对两组对象不同脑区的激活情况.结果:因刺激程序的错误运用,2例受试者(两组各1例)在进一步的数据分析时被剔除.①针刺与视觉有关的穴位对视皮质无确切影响,但在实验过程中,而在其他皮质区(如脑岛、外侧沟、顶颢皮质等与疼痛及躯体感觉刺激有关的皮质)有轻微血氧合水平依赖性成像法信号转换,即在这些皮质区针刺真穴及假穴均有激活反应.②针刺具有治疗视力障碍作用与不具有治疗视力障碍作用的穴位,其激活类型无明显差异.③单个受试者交叉关系分析(CC＞0.3)发现,针刺假穴过程中仅2/8的受试者出现了丘脑的激活.两组均出现了丘脑、红核、大脑外侧沟的激活.针刺假穴+有治疗作用穴位组3/8和针刺假穴+无治疗作用穴位组4/8的受试者出现可观察到后外侧中脑导水管周围灰质的激活反应,两组还出现了顶颢皮质的激活.说明针刺真穴与假穴在激活类型上有显著差异.结论:①通过针刺与视觉有关的穴位发现针刺对于视皮质无确切影响,但对其他皮质区,如脑岛、外侧沟、顶颞皮质等与疼痛及躯体感觉刺激有关的皮质有激活作用.②针刺真穴与假穴在激活类型上有显著差异,但针刺具有治疗视力障碍作用与不具有治疗视力障碍作用的穴位激活类型差异则不明显.
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不同中医证型及维生素D受体基因BsmⅠ多态性与绝经后骨质疏松症患者骨密度的关系
目的:观察维生素D受体基因BsmⅠ多态性及中医证型与绝经后骨质疏松症患者骨密度的相关性,分析影响骨密度的自身因素.方法:①选择2003-01/2004-04福建省中医药研究院骨科门诊绝经后骨质疏松症患者180例,年龄45～70岁,绝经年龄40～58岁.均对检测项目知情同意.肾阴虚118例、肾阳虚42例、肾阴阳两虚20例.②用美国Hologic(4500W)型双能X线骨密度仪检测正位第2～4腰椎、左侧股骨颈、大转子和Ward's区骨密度.③记录患者自身因素:年龄、绝经年龄、绝经年限、身高、体质量和体质量指数.④应用聚合酶链反应检测维生素D受体基因BsmⅠ多态性.⑤计量资料两组比较正态分布用t检验,非正态分布用Wilcoxon秩和检验,用Bivariate分析患者自身因素与骨密度的相关关系.结果:纳入绝经后骨质疏松症者180例,均进入结果分析.①不同维生素D受体基因型与不同中医证型骨质疏松症患者骨密度比较,3种维生素D受体基因型骨质疏松症患者骨密度差异不明显(P＞0.05);3种中医证型骨质疏松症患者骨密度差异也不明显(P＞0.05).②在维生素D受体基因bb型中,肾阴阳两虚患者第2～4腰椎骨密度明显低于肾阴虚型(P＜0.05),其他证型间差异不明显(P＞0.05).③在肾阴虚型骨质疏松症患者中,bb型与Bb型骨密度相近(P＞0.05).④在相关性因素中,年龄和绝经年限与4个部位的骨密度呈显著负相关(r=-0.206～-0.441,P＜0.05～0.01);身高与腰椎、股骨颈、大转子的骨密度呈显著正相关(r=0.171～0.222,P＜0.05～0.01);体质量与股骨颈呈显著正相关(r=0.188,P＜0.05);绝经年龄、体质量指数与骨密度无明显相关性(r=.032～0.158,P＞0.05);年龄与腰椎、股骨颈骨密度均呈显著负相关(r=-0.345,-0.427,P＜0.05),而绝经年龄、绝经年限、身高、体质量、体质量指数与骨密度无明显相关性(r=-0.018～-0.246,P＞0.05).结论:①维生素D受体基因BsmⅠ多态性及中医证型分类与绝经后骨质疏松症骨密度存在相关性.②年龄、绝经年限、身高、体质量是影响维生素D受体基因bb型患者骨密度的因素.年龄是影响维生素D受体基因Bb型患者骨密度的因素.
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乌灵菌粉治疗青少年适应障碍的效果及安全性
目的:观察乌灵菌粉治疗青少年适应障碍的临床疗效和安全性.方法:选择2004-09/2005-06连续就诊于郑州大学第一附属医院心理门诊的青少年适应障碍的患者34例,均符合《中国精神疾病分类方案与诊断标准》第3版适应障碍诊断标准,进行为期6周的开放性乌灵胶囊治疗,其主要成分为乌灵菌干粉,是从珍烯药用真菌乌灵参中分离获得的菌种,经现代生物工程技术精制而成的纯中药制剂,服药方法为3粒/次,3次/d.以抑郁自评量表、焦虑自评量表和临床疗效总评量表为评估疗效的工具.结果:34例青少年适应障碍患者参加了实验,中途2例脱落,分别在治疗后2周、4周病情缓解而未复诊,其余32例患者完成了6周观察.①34例患者中有20例(59%)发病前存在2个或2个以上的应激事件,14例(41%)存在1个重要的生活变化事件.②32例患者完成6周研究,治疗结束时,抑郁自评量表、焦虑自评量表评分较治疗前明显下降(30.1±8.7,56.2±5.9;31.6±7.4,58.2±5.3),差异具有非常显著性意义(P＜0.01).③治疗后病情严重程度、疗效总评和疗效指数较治疗前明显下降(2.0±0.9,5.3±1.2;1.6±1.0,5.7±1.1;1.6±1.4,14.3±1.4),差异具有非常显著性意义(P＜0.01).④全部患者无明显副反应.结论:乌灵菌粉治疗青少年适应障碍安全、有效.
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应用生活质量标准评估中西医结合疗法治疗糖尿病的效应
目的:探讨用生活质量来评价糖尿病临床疗效的必要性及中西医结合疗法改善糖尿病患者生活质量的优越性.方法:检索和参考相关文献,结合祖国医学理论、现代医学的诊疗特点及中西医结合医学的优势等对资料进行分析和归纳.结果:由于糖尿病是一种心身性疾病,其病情的严重程度和治疗效果与患者的心理和情绪密切相关且相互影响.同时由于糖尿病治疗过程的复杂性、治疗效果的不确切性、极易发生药物副作用、及糖尿病的慢性并发症对患者的身体健康危害严重等原因,以现有的以实验室指标为主要标准的评价体系不能全面地评价治疗方法的效果、不能正确指导临床治疗的方向、不能表达健康的全部内涵.并且由于中医学及西医学各有优缺点,如在诊断学方面,西医偏重于病因和生化,诊断精准,中医偏重于病机和证候、比较模糊;在病理学方面,西医对局部病变有细致而深入的研究,中医对整体的变化及趋势有较全面的认识;在治疗学方面,西医对代谢紊乱有较强的针对性,中医则从整体观念出发,强调阴平阳秘、预防传变的理论和思路,关注的是整个人体的健康发展等.在理论上运用中西医结合疗法提高糖尿病患者的生活质量的疗效,一定比单纯运用中医或单纯运用西医疗法要显著.结论:用生活质量来评价糖尿病的临床疗效、优化治疗方案及评估糖尿病患者的健康状况十分必要.运用中西医结合疗法提高糖尿病患者的生活质量具有优越性.
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推拿治疗急性腰扭伤临床手法选取的文献统计分析
目的通过对关于推拿治疗急性腰扭伤近10年文献的查阅,对推拿手法进行分析,以期筛选出优化手法.方法用计算机检索中国期刊全文数据库1995-01/2004-12的相关文章,检索词"推拿、按摩、手法、急性腰扭伤",手工统计文中推拿时所采用的方法,按其出现的频次排序.结果①共检索到与推拿、按摩、手法、急性腰扭伤有关的文献163篇,单纯选用推拿治疗的有124篇,占76.1%,推拿并针刺治疗的25篇,占153%,推拿配合理疗的4篇,占2.5%,推拿配合中药的4篇,占2.5%,推拿配合封闭的2篇,占1.2%,推拿配合其他4篇,占2.5%.②近10年推拿治疗急性腰扭伤均为复合手法,复合手法中频次位居前3位的分别是斜扳法、按揉法和弹拨法(118/72.4%,112/68.7%,72/44.2%).结论推拿是治疗急性腰扭伤的主要方法之一,推拿手法多为复合手法,其中以斜扳法、按揉法、弹拨法等为主,斜扳法是常用的手法.
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早期介入温经活血针灸法治疗急性期面神经炎200例
目的观察温经活血针灸法早期介入治疗急性期面神经炎患者面神经功能和肌电图的变化.方法①选择2004-01/2005-10连云港市中医院中西医结合脑血管病科门诊的面神经炎患者200例.随机分为2组:针灸治疗组和对照组,各100例.②两组均口服抗炎西药治疗.针灸治疗组加用点刺放血(用CE0297型采血器5.0深度点刺穴位,每穴三四次,然后局部拔罐使之出血1～3 mL.1次/d,10次为1疗程,疗程间休息3 d,治疗2个疗程)加隔药灸(将以牵正散配方全虫、白芥子、白附子为主自己加工中药细末水调,做成药饼,用大灸柱隔药饼灸,每穴灸5壮,治疗取穴,次数,疗程同点刺放血).③于患者初诊时,治疗1,2,3周后评估患者面神经功能.④于患者治疗10 d后采用英国牛津HYNEIGY(5CH)型肌电图经皮测试评估治疗效果.⑤计量及计数资料差异比较分别采用t和x2检验.结果面神经炎患者200例均进入结果分析.①针灸治疗组患者治疗1,2,3周后面神经功能评分明显高于对照组(t=11.87,8.51,14.75,P＜0.01).②针灸治疗组面神经肌电图检查结果明显优于对照组(x2=27.49,P＜0.01).结论温经活血针灸法早期介入可改善面神经炎患者面神经功能,提高疗效.
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苍龟探穴针法治疗颈型颈椎病36例
目的苍龟探穴针法出自于《金针赋》,作者将之用于现代颈椎病临床,取得良好效果,并进行临床观察苍龟探穴针法对于颈型颈椎病的疗效及其安全性.方法纳入2005-04/2005-11广东省中医院针灸科住院或门诊颈型颈椎病患者74例,随机分为苍龟探穴针法组36例,常规电针组38例,苍龟探穴治疗组采用苍龟探穴针法:①取穴:百劳(双侧),肩井(双侧),阿是穴.②操作:选用1寸毫针,进针得气后退至皮下,更换针法方向,分别向前后左右多向斜刺,渐渐加深,操作完毕后不留针.常规电针组取穴同苍龟探穴组,调针至"得气"后接G6805Ⅱ型电针机,选连续波,频率1.5～3 Hz,强度以患者能耐受为度.持续电针30 min.以上两组均隔天进行治疗,5次治疗为1疗程.1疗程结束后观察疗效.采用疼痛分级指数(含有11个感觉性词与4个情绪性词,程度分无、轻、中、重4级,分别记0,1,2,3分)进行量化计分,结合临床症状、体征进行疗效观察,在1个疗程结束后进行近期疗效观察,在1个疗程结束后4周后进行远期疗效观察.结果所有患者均完成近期疗效观察;在远期疗效观察中,因患者联系电话变更或不愿配合苍龟探穴组脱落2例,常规电针组脱落病例3例,实际共完成观察69例.①近期疗效评估:苍龟探穴针法组痊愈率与常规电针组比较,差异无显著性意义(50.0%,39.5%,P=0.50);苍龟探穴组疼痛分级指数评分显著低于电针治疗组(2.44±0.55,5.41±3.12,P＜0.05).②远期疗效评估:苍龟探穴针法组痊愈率和疼痛分级指数评分均明显高于电针治疗组(67.7%,40.0%;3.16±0.55,8.91±3.22;P＜0.05).③苍龟探穴组和常规电针组均未发现明显不良事件.结论苍龟探穴针法对于颈型颈椎病具有良好的近期疗效,远期疗效优于电针法.
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健脾和胃中药方对功能性消化不良患者胃动力的影响
目的观察中药"健脾和胃,理气化积"汤对功能性消化不良患者胃动力的影响.方法①选择2004-09/2005-09河南商丘医专附院消化内科收治的功能性消化不良患者129例,按随机数字表法分为3组:中药治疗组,中西药治疗组,西药治疗组,每组43例.均对干预方案知情同意.②中药治疗组:给予自拟"健脾和胃,理气化积"汤治疗,药物组成:黄芪30g,党参15 g,砂仁12 g,炒白术12 g,陈皮12 g,枳壳12 g,茯苓12 g,甘草6 g,焦三仙各12 g.该中药由本院中药房提供,1剂/d,水煎2次,取汁600mL,分3次饭前1 h温服,7 d为1个疗程.③中西药治疗组:给予上述中药,剂量、用法、疗程同上.西药给予维生素B1,维生素B6,均20 mg/次,3次/d;多潘立酮10 mg/次,3次/d.多酶片,3片/次,3次/d.7 d为1个疗程.④西药治疗组:给予上述西药,剂量、用法、疗程同上.各组均干预14 d.⑤治疗前及治疗14 d后进行胃部B超检查,计算半排空时间;采用多道胃肠电生理仪进行检测,记录指标为主频、慢波频率.⑥计量资料差异比较采用t检验.结果功能性消化不良患者129例均进入结果分析.①中药治疗组和中西药治疗组治疗后胃半排空时间、振幅、频率和运动指数均较治疗前有明显好转(t=3.21～17.71,P＜0.05),西药治疗组各项指标与治疗前相近(P＞0.05).②治疗后中药治疗组和中西药治疗组胃电图的主频、慢波频率明显快于治疗前(t=24.03～48.15,P＜0.01),西药治疗组胃电图的主频、慢波频率与治疗前比较无明显变化(P＞0.05).结论中药"健脾和胃,理气化积"汤能明显改善功能性消化不良患者胃动力.
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五十六载从医,愿为中国临床康复医学事业鞠躬尽瘁
1我的从医经历我于1946年考入国立长春大学医学院,1949年东北解放学校并入中国医科大学医疗系.1951年初中国医科大学毕业,由东北军区卫生部分配到汤岗子医院任内科医师,当时医院为战勤服务,主要由3个后方医院抽调的医务人员组成,为抗美援朝志愿军的伤病员进行抢救治疗.1952年末,我到大连医学院内科进修,1953年8月返院,继续做内科主治医师兼高干病房主治医师,1954年加入中国共产党.
