中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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穿透性角膜移植后糖皮质激素眼液对植片慢性失功的影响
背景:穿透性角膜移植后即使没有发生免疫排斥反应,植片内皮细胞密度也会以超生理的速度进行性下降,即发生植片内皮细胞慢性失功.目的:评价穿透性角膜移植后局部糖皮质激素眼液对植片内皮细胞慢性失功的影响.设计、时间及地点:临床对比分析,于2004-05/2009-05在同济大学附属同济医院眼科内实施.对象:穿透性角膜移植患者54例(54只眼).方法:对穿透性角膜移植病例术后以妥布霉素地塞米松眼液治疗:6次/d,1个月;4次/d,2个月;2次/d,1个月,之后分为停药组和长期组.长期组以2次,d,再持续治疗直到术后12个月,停药组停止以任何激素或免疫抑制药物眼局部或全身治疗.主要观察指标:对患者内皮细胞密度进行随访,随访时间(3.12±0.28)年.结果:停药组和长期组在穿透性角膜移植后36个月内植片内皮细胞密度均有显著降低,内皮细胞密度在各随访时间点与前次随访结果相比均显著卜降(P均＜0.01),停药组内皮细胞密度由术前的(2 438±211)个/mm~2降低到术后的(1 424±124)个/mm~2;长期组由术前的(2 791±229)个/mm~2降低到术后的(1 614±114)个/mm~2.停药组和长期组在术前和术后各时间点组间比较时,差异有显著性意义(P＜0.01),但2条曲线的变化趋势基本一致,即穿透性角膜移植后糖皮质激素眼液治疗并不能对内皮细胞密度的减少造成影响(P＞0.05).结论:局部糖皮质激素眼液治疗不能缓解植片内皮细胞慢性失功的进展速度.
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黑睛排斥汤治疗角膜移植后排斥反应26例
选择山东施尔明眼科医院2003-04/2008-04接诊的同种异体穿透性角膜移植后发生排斥反应病例26例,男16例,女10例,反复发作病毒性角膜炎9例,创伤性后角膜白斑8例,各种内眼手术引起角膜失代偿5例,先天性角膜白斑2例,其他2例,上皮型免疫排斥反应、基质型免疫排斥反应、内皮型免疫排斥反应均有,排斥反应发生在术后2个月～2.5年,其中19例是外院西药治疗无效而转入山东施尔明眼科医院要求加用中医治疗.所有病例均局部使用激素和类固醇类抗炎眼药水,部分病例全身应用糖皮质激素等免疫抑制药,中药以黑睛排斥汤为主方治疗,1付/d,2次/d,平均用药时间为11～42 d.以临床症状为观察指标,26例患者全部有效,表现为球结膜充血和水肿减轻,角膜混浊变淡,其中排斥反应完全消退9例,其中因外院西药治疗无效而转入山东施尔明眼科医院要求加用中医治疗的19例患者中的5例排斥反应完全消退,免予手术,视力平均提高3行.另外在临床上发现清肝利湿复方中药还能迅速减轻前房炎症反应,回退角膜新生血管.
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新型移植诱导剂阿来佐单抗临床应用中的护理程序
将阿来佐单抗成功应用于尸体肾移植前免疫诱导21例、单纯胰岛细胞移植围手术期免疫诱导7例、尸体肾移植联合胰岛细胞和间充质干细胞移植前免疫诱导1例.通过严格、及时、正确的病房管理,肺部、会阴部、皮肤、饮食、心理等护理,以上病例术前用药过程顺利,未出现不良反应者11例占38%,高血压者18例占62%,寒战3例占10%,高热3例占10%,支气管痉挛1例占3%.经应对症处理后,29例患者全部病情平稳,完成用药计划且术后均未发生急件排斥反应,出院后随访长时间为2年,短时间为6个月,结果亦未有移植物排斥指征.但是,阿来佐单抗在移植前免疫诱导的长远疗效,还有待通过患者长期随访,以进一步观察阿来佐单抗的诱导治疗效果,并观察长期T淋巴细胞减少所致的相关不良作用.
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C_(57)BL小鼠survivin基因miRNA表达载体的构建
背景:Survivin在多种肿瘤组织中的高表达,具有调节细胞增殖分裂和强大的抗凋亡功能.目的:利用RNA干扰技术,构建具有特异性阻断C_(57)BL小鼠survivin基因的微小RNA(micro RNA,miRNA)表达载体.设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-06/11在重庆医科大学附属第一医院神经内科实验中心完成.材料:环形pcDNA~(TM)6.2-GW/EmGFPmiR和BLOCK-iT~(TM) Pol II miR RNA干扰 Expression Vector Kit with EmGFP为Invitrogen公司产品;DH5a大肠杆菌为实验室保存;xho I和BamH I酶、壮观霉素均为上海生工生物工程有限公司产品.方法:应用设计软件在C_(57)BL小鼠survivin基因的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列,并设计合成4对寡核苷酸序列,经退火后形成双链DNA片段,采用基因克隆技术,将其克隆到pcDNA~(TM)6.2-GW/EmGFPmiR的载体中,转化DH5a大肠杆菌,挑单菌落种于含有壮观霉素LB液体培养基中,提取质粒.主要观察指标:应用测序法和琼脂糖电泳检测对重组体进行鉴定.结果:测序结果显示插入片段与线性载体连接正确,无碱基突变、缺失、插入等异常.双酶切处理pcDNA~(TM)6.2-GW/EmGFP-miR重组质粒结果显示片段大小与预期相符.结论:实验结果表明成功构建了C_(57)BL小鼠survivin基因的微小RNA表达载体.
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AG490对人淋巴细胞增殖过程中白细胞介素2,6及γ-干扰素分泌的影响:与环孢素A和他克莫司作用等同吗?
背景:AG490是新近发现的一种JAK激酶抑制剂,可以和受体酪氨酸激酶竞争结合位点,从而通过阻断JAK/STAT通路达到抑制γ-干扰素等器官移植排斥反应相关细胞因子活化,进而抑制器官抑制排斥反应.目的:验证AG490作为免疫抑制剂的可能性及其基本作用途径,并与环孢素A及他克莫司相比较. 设计、时间及地点:对照观察,于2007-10/2008-04在福建省协和医院泌尿外科研究所完成.材料:AG490购自美国SIGMA公司.方法:取8位健康成年人外周静脉血,密度梯度法分离淋巴细胞,分别应用植物血凝素、白细胞介素2、淋巴细胞混合培养诱导人淋巴细胞产生增殖. 主要观察指标:分别采用酶联免疫吸附法检测在AG490、环孢素A、他克莫司作用下人淋巴细胞(T,B混合存在)增殖过程中细胞因子白细胞介素2、白细胞介素6、γ-干扰素的质量浓度.结果:在体外实验中,AG490对于植物血凝素、白细胞介素2刺激及淋巴细胞混合培养引起的人淋巴细胞增殖反应中白细胞介素2、γ-干扰素的分泌可以起到抑制作用(P < 0.05),但对于白细胞介素6分泌无抑制作用(P < 0.05),此作用与临床常用免疫抑制剂环孢素A、他克莫司相类似.结论:AG490有可能是一种潜在的免疫抑制剂.
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肾-骨髓联合移植诱导免疫耐受:能够促进移植后嵌合体的形成吗?
背景:特异性的供者骨髓造血干细胞输注促进了嵌合体的形成,可以诱导器官移植免疫耐受.然而为达到细胞嵌合进行骨髓移植的预处理毒性大,发生移植物抗宿主反应的风险较高,人们开始寻找一些毒性更小的方案,其中包括免疫抑制剂联合骨髓输注等,尽管动物实验中已有诱导成功的耐受模型,但临床实用的诱导耐受方法则难以突破.目的:以嵌合体理论为基础,分析肾-骨髓联合移植诱导嵌合体形成与免疫耐受的相关性及安全性. 设计、时间及地点:对比观察,于1998-01/2005-12在郑州市第三人民医院泌尿外科完成.对象:根据ABO/Rh血型相同及HLA配型原则,将同期等待肾移植的96例女性慢性肾功能衰竭患者分为2组,每组48例.联合移植组患者接受尸体肾、骨髓联合移植;同期接受上述同一供者另一肾脏的尿毒症患者作为对照组.供者为48例健康男性.方法:供者在取肾的同时,采集骨髓加入细胞冷冻保养液,经细胞程序降温至-198 ℃液氮罐保存.移植后应用大剂量抗人T淋巴细胞免疫球蛋白诱导治疗2周,于肾脏移植后2周实施骨髓细胞回输,输注的单个核细胞数为(0.9～2.5)×10~8/kg.采用聚合酶链反应方法检测人性别决定基因SRY.抽血检测CD3,CD4,CD8,CD25,以酶联免疫吸附法测定血白细胞介素10、肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子β等血细胞因子质量浓度.主要观察指标:移植后于不同时间点对受体进行嵌合体、淋巴细胞亚群及细胞因子检测.随访观察两组受者的临床移植效果及并发症发生情况.结果:联合移植组嵌合体阳性率显著高于对照组(P < 0.05).随访3年,嵌合体阳性受者和嵌合体阴性受者排斥发生率差异具有显著性意义(13%,35%,P < 0.05).联合移植组呈现免疫抑制状态,未见移植物抗宿主病发生.结论:肾-骨髓联合移植能促进移植后嵌合体的形成,显著降低排斥反应发生率,是一种安全有效的诱导免疫耐受的方法.
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异基因T淋巴细胞诱导血管内皮细胞组织因子的表达
背景:血管内皮细胞是移植物抗宿主病中异基因T淋巴细胞的重要靶组织,而血管内皮细胞损伤、活化后组织因子表达显著增高.因此血管内皮细胞组织因子表达可能在移植物抗宿主病引起的组织损伤中发挥重要作用.目的:探讨异基因T淋巴细胞能否诱导血管内皮细胞组织因子表达及其分子机制.设计、时间及地点:细胞观察实验,于2008-03/10在华中科技大学同济医学院免疫学实验室完成.材料:人原代脐静脉内皮细胞来源于美国Sciencecell公司.方法:密度梯度离心法分离健康志愿者外周血单个核细胞,分别用结合CD4和CD8抗体的磁珠阳性分选CD4~+T细胞和CD8~+T淋巴细胞.脐静脉内皮细胞经PBS充分洗涤后,异基因CD4~+和CD8~+T淋巴细胞以10∶1的比例加入脐静脉内皮细胞,以未与T淋巴细胞混合培养组为对照.将脐静脉内皮细胞分别与细胞通路阻滞剂-特异性Jun氨基末端激酶抑制剂、特异性p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂、特异性细胞外信号调节激酶抑制剂提前温育1 h,然后再与异基因CD4~+和CD8~+T淋巴细胞共培养,以未加入细胞通路阻滞剂为对照组.主要观察指标:实时定量PCR和流式细胞术检测异基因T淋巴细胞作用后脐静脉内皮细胞中组织因子在基因和蛋白水平的表达.Western blot方法检测脐静脉内皮细胞中丝裂原活化蛋白激酶的表达.结果:异基因CD4~+T淋巴细胞作用6,12,24 h后,脐静脉内皮细胞膜表面组织因子表达率及mRNA表达水平较对照组显著增高(P < 0.05).异基因CD8~+T淋巴细胞作用6,12,24 h后,脐静脉内皮细胞膜表面组织因子表达率及mRNA表达水平较对照组亦显著增高(P < 0.05).异基因CD4~+T淋巴细胞诱导12,24 h的脐静脉内皮细胞膜表面组织因子阳性表达率显著高于异基因CD8~+T淋巴细胞(P < 0.05).异基因T淋巴细胞作用后,脐静脉内皮细胞内磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶和Jun氨基末端激酶表达增强,而磷酸化细胞外信号调节激酶表达无变化.特异性p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂和特异性Jun氨基末端激酶抑制剂可显著下调异基因T淋巴细胞诱导的组织因子表达,两者合用可完全阻滞组织因子的表达.结论:异基因T淋巴细胞通过Jun氨基末端激酶和p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路诱导血管内皮细胞组织因子表达.
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转化生长因子β_1对坐骨神经移植后免疫耐受的影响
背景:转化生长因子β_1是一种强效细胞生长增殖调节蛋白,在移植免疫的抗排斥反应、移植物血管病发展中扮演重要角色.目的:观察经冷冻处理异体神经移植后,局部注射转化生长因子β_1对移植免疫排斥反应的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-06/2008-06在哈尔滨医科大学动物实验中心完成.材料:受体为清洁级SD大鼠60只,分为3组:自体神经移植组、异体神经移植组、转化生长因子β_1质粒+异体神经移植组,每组20只.供体为40只Wistar雄性大鼠.pAdTrack-CMV-TGF-β_1质粒、pAdEasy-1-Bj51833细胞由哈尔滨医科大学附属四院骨科实验室惠赠.方法:取供体大鼠40只作双侧股后外侧纵切口,分离显露坐骨神经,切取双侧整段坐骨神经,置于无菌冷冻管中保存1周,备用.手术显微镜下将受体鼠自骨二头肌与半腱肌和半膜肌间隙剪开结缔组织,显露坐骨神经,从犁状肌孔下0.5 cm处整齐剪下长约1 cm的坐骨神经.自体神经移植组、异体神经移植组选择粗细相等、已预制冷冻的自体及异体神经移植;转化生长因子β_1质粒+异体神经移植组异体神经移植后于大鼠局部肌肉及神经两断端内注射pAdTrack-CMV-TGF-β_1质粒40 μg/只.主要观察指标:术后3,6,9周各组大鼠运动神经传导速度、病理学和轴突计数检查.结果:转化生长因子β_1质粒+异体神经移植组运动神经传导速度高于新鲜异体神经移植组(P < 0.01),与自体神经移植组比较差异无显著性意义.自体神经移植组、转化生长因子β_1质粒+异体神经移植组术后9周轴突计数较新鲜异体神经移植组高(P < 0.01).转化生长因子β_1质粒+异体神经移植组光镜及电镜可见神经纤维走行正常,排列完好,神经纤维可见血管增生,髓鞘结构较好,神经纤维内见有大量再生髓鞘,许旺细胞明显增多,胞质较发达,大量粗面内质网,线粒体结构清晰,再生的轴突内微丝密集排列,与自体神经移植组接近.异体神经移植组光镜及电镜可见神经纤维数量少、排列紊乱,髓鞘轴突变性明显,大部分神经纤维脱髓鞘崩解,轴突消失,未见再生的神经纤维.结论:局部注射转化生长因子β_1质粒联合冷冻处理的冷藏异体神经移植可以协同减轻移植后产生的免疫排斥反应.
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免疫清零驯化治疗免疫性肌炎的动物模型
背景:根据现有理论及治疗经验,创新性提出自身免疫性疾病时体内细胞变异是永久存在的,且这些变异体细胞是引起自身免疫性疾病的原因或者同时伴有免疫细胞的变异,使用免疫清零耐受诱导新生的免疫系统对变异体细胞产生耐受,即能治愈除干细胞病变以外自身免疫性疾病的假设.目的:拟验证免疫清零驯化治疗免疫性肌炎动物模型的疗效.设计、时间及地点:随机分组、对比观察动物实验,于2008-12/2009-04在南方医院动物实验中心完成.材料:雌性成年新西兰兔1只,体质量4.1 kg;雌性清洁级英格兰短毛豚鼠36只,体质量400～500 g.方法:用新西兰兔肌肉匀浆混合完全弗氏佐剂对豚鼠进行免疫注射制作免疫性肌炎豚鼠模型.造模后,28只豚鼠抽签法随机分为:超大剂量清零驯化组,白消安1 mg/kg,12 h/次,8次,白消安给药结束后腹腔注射环磷酰胺40 mg/kg,1次/d,4次,环磷酰胺给药结束后腹腔注射环孢素A 3 mg/kg,1次/d,持续至动物死亡;环磷酰胺组,腹腔注射环磷酰胺10 mg/kg,1次/d,3次;免疫清零驯化组,白消安0.8 mg/kg, 环磷酰胺30 mg/kg,环孢素A 3 mg/kg,给药次数及方式同超大剂量清零驯化组;对照组为空白对照.主要观察指标:给药前后进行全血细胞检查及生化检测,记录动物给药后生存时间,观察各组肌肉组织病理变化.结果:与对照组比较,其他组免疫后白细胞均明显降低,给药后造血功能逐渐恢复,免疫清零驯化组白细胞计数增高明显,横纹肌病理检查发现肌肉组织病理改变以骨骼肌多发性炎症为特点.给药后超大剂量免疫清零驯化组及免疫清零驯化组谷草转氨酶、肌酸激酶较给药前明显下降(P < 0.05,P < 0.01),但横纹肌病理检查未见明显改变;环磷酰胺组与对照组谷草转氨酶、肌酸激酶、乳酸脱氢酶均无明显变化.超大剂量清零驯化组动物生存时间短,环磷酰胺组与对照组无差异,免疫清零驯化组动物生存时间明显优于其他各组.结论:免疫清零驯化治疗免疫性肌炎动物模型有显著疗效,且效果优于超大剂量清零驯化治疗及常规剂量免疫抑制剂治疗.
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髓芯减压自体髂骨移植治疗狗股骨头缺血性坏死
背景:对液氮冷冻法制造的狗股骨头坏死模型髓芯减压后移植自体髂骨,观察股骨头和移植骨的修复的病理变化过程.以期对坏死股骨头内移植自体松质骨的转归有一个具体认识.目的:通过动物模型,观察髓芯减压自体髂骨移植治疗狗股骨头缺血性坏死的疗效.设计、时间及单位:动物实验观察,于2006-04/2007-09桂林医学院附属医院骨科完成.材料:选用健康成年杂种犬9只,使用液氮冷冻法制造股骨头坏死模型.方法:暴露股骨头以股骨大转子为中心向上下做长约10 cm弧形切口,分开臀大肌和臀深肌,切开髋关节关节囊,切断圆韧带并使股骨头脱位.橡胶手套套住股骨头,用丝线结扎于股骨头颈交界处,并把其他几个指套也结扎,然后用一玻璃漏斗从手套袖口直插到股骨头表面.通过髓芯减压钻隧道至股骨头坏死区软骨下骨,然后取自体髂后上棘松质骨,剪成短火柴棒样骨条,沿隧道植入股骨头骨板下.术后分期处死,取标本观察相关指标.主要观察指标:观察术后3,6,12周实验侧股骨头及移植骨的组织学改变.结果:术后未发生股骨头塌陷,术后3周:镜下所见为股骨头内移植骨及周围区域内均呈坏死表现,骨细胞陷窝大多空虚.坏死骨小梁之间为见纤维肉芽组织,有血管间叶组织长入,周边有少量散在成骨细胞.术后6周:时骨小梁表面广泛出现嗜碱性蓝染区及新生的成骨细胞,新生软骨和软骨细胞带.术后12周:坏死骨小梁周围呈爬行替代重建表现,透明软骨岛和软骨细胞带消失.组织学观察显示术后坏死股骨头得以逐步重建,植入的松质骨条逐步爬行替代,并改建、修复、替代股骨头内坏死的骨组织.结论:髓芯减压后自体髂骨移植能促进坏死股骨头的修复重建,延缓、阻止股骨头坏死的发展.
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肾切除联合阿霉素诱导建立家兔局灶节段性肾小球硬化模型
背景:单侧肾切除联合阿霉素诱导的大鼠肾小球硬化模型常用于抗肾小球硬化药物的筛选和评价,但目前很少有此方法诱导兔肾小球硬化模型的报道.目的:建立家兔肾小球硬化动物模型,并观察造模过程中动物的肾脏功能和组织病理学变化.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-12/2009-05在解放军成都军区昆明总医院实验动物中心完成.材料:日本大耳家兔25只,雌雄各半,体质量1.75～2.25 kg,用于建立家兔肾小球硬化动物模型,并随机分为正常组10只和模型组15只.方法:模型组30 g/L戊巴比妥钠生理盐水溶液(1 mL/kg)麻醉,开腹摘除左肾.正常组行假手术,不摘除肾脏,余与上同.手术1周后,模型组注射阿霉素5 mg/kg,2 周后注射阿霉素3 mg/kg.正常组同步注射生理盐水.主要观察指标:于实验前、造模后4,6,8周对两组兔进行肾功能相关血液生化指标检测,并留尿液测24 h尿蛋白量.于第2次注药后8周分别两组随机各取1只兔肾组织,进行病理观察.结果:①模型组肾脏略白,质地略韧,表面尚光滑.②模型组光镜下可见细胞外基质增生明显,系膜区扩张,肾球囊壁与肾小球毛细血管拌粘连,小管上皮变性甚至萎缩出现肾间质纤维化,间质炎细胞浸润,呈现弥漫性节段性肾小球硬化等病理特征.③与正常组家兔比较,模型组家兔总蛋白及白蛋白明显下降,三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、尿素氮、肌酐均显著升高,模型组家兔尿蛋白含量于实验第4周开始明显升高,在实验期间明显高于对照组,但在第8周逐渐趋向平台.④SPECT示:正常组肾小球总滤过率为92.6 mL/min,模型组为33 mL/min;可见模型组右侧肾脏肾小球滤过率明显下降.结论:单侧肾切除联合阿霉素导致家兔的肾小球硬化形成,并且肾功能及24 h尿蛋白定量有较明显的阶段性变化.
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γδT细胞在移植排斥反应中具有专职抗原提呈细胞的特性
背景:新研究表明,γ~δT淋巴细胞与微生物产物接触后,可表达树突状细胞的特征性标志同时表现出专职抗原提呈细胞的功能,引发CD4~+ CD8~+αβT细胞强烈的免疫应答.目的:初步验证γ~δT细胞在移植排斥反应中具有专职抗原提呈细胞的特性,摸索一种体外大量扩增γ~δT细胞的简便方法,并利用基因修饰方法转染FasL 至γ~δT细胞.设计、时间及地点:动物观察实验,于2007-08/2008-08在解放军第四军医大学第一附属医院中心实验室完成.材料:节段性异位小肠移植模型供、受体大鼠分别为清洁级成年健康封闭群雄性Wistar大鼠及SD大鼠,共60只,体质量200～320 g.方法:采用三袖套血管吻合法建立大鼠节段性异位小肠移植模型.利用流式细胞仪获取受体大鼠血液中γ~δT细胞,并初步验证其功能.常规分离获取SD大鼠单个核细胞,以Mtb-Ag进行体外诱导扩增.主要观察指标:观察细胞增殖情况,以TCRγ~δ磁珠分选试剂盒进行阳性分选,并进行淋巴细胞中γ~δT细胞所占比例的检测.建立pLXSN FasL反转录病毒转移体系,检测转染后的γ~δT细胞.结果:活化γ~δT细胞表现出与树突状细胞相似的细胞黏附功能,在移植排斥反应中γ~δT细胞具有专职抗原递呈细胞的特性.新鲜分离的单个核细胞中γ~δT 细胞仅占4.5%,Mtb-Ag 刺激培养10 d 后,γ~δT 细胞所占比例可高达72.2%.经免疫磁珠阳性分选,γ~δT 细胞比例高达99.1%.获得的285 bp FasL片段,证明PA317细胞中有FasL基因整合.以pLXSN FasL反转录病毒转移体系转染的γ~δT细胞FasL~+细胞占97.3%.结论:实验验证了γ~δT细胞在移植排斥反应中发挥专职抗原提呈细胞的功能,实现了γ~δT细胞的体外大量扩增;成功构建了PA317/pLXSN2FasL~+病毒上清转染体系,并以Fas配体基因修饰γ~δT细胞.
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新生大鼠肝细胞分离及体外培养方法
背景:新生大鼠肝细胞是中度分化细胞,兼具肝祖细胞和成熟肝细胞的特性和功能,是研究肝细胞特性的理想细胞来源.目的:探讨新生大鼠肝细胞分离及体外培养方法.设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2008-03/08 在解放军总医院普通外科研究所完成.材料:SD新生大鼠,雌雄不限,3月龄.方法:采用组织块-胰酶冷消化法和多步低速离心获取新生大鼠肝细胞,给予含体积分数10%胎牛血清的HepatoZYME-SFM培养基体外二维培养.采用相差显微镜观察、MTT分析、PAS染色和脲酶法对培养的肝细胞生长及功能进行检测和分析.主要观察指标:肝细胞形态、活性,糖原水平,培养上清中的尿素浓度.结果:分离纯化的新生大鼠肝细胞总数1.0×10~6～2×10~6/肝,活力在90%以上, 光镜下肝细胞呈圆形或卵圆形,核大而圆,胞体较成熟肝细胞小.通过多步低速离心可去除红细胞、其他非实质细胞和死亡的肝细胞,其纯度可达95%以上.肝细胞活性在培养初期即缓慢上升,至第3天时开始快速增殖,第11天时达到高峰,与第1天相比差异有显著性意义(P=0),但随后又缓慢降低,到15天时与第11天相比差异有显著性意义(P=0)培养的肝细胞贴壁生长,并保持肝细胞特异细胞形态.培养至第7天的肝细胞PAS染色呈强阳性,之后阳性细胞逐渐减少,至15 d时可见少量阳性细胞.培养上清中尿素在培养初期基本没有变化,培养至第7天时显著下降.结论:组织块-胰酶冷消化法和HepatoZYME-SFM培养基二维培养为种简单有效的新生大鼠肝细胞分离培养方法.
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肾移植患者群体反应性抗体水平与移植肾急性排斥的关系
背景:目前众多实例和资料证实,群体反应性抗体的存在与否及该抗体的致敏程度对于是否发生排斥反应及移植物存活率的高低、移植后器官功能的实现都有着重要意义.目的:检测肾移植受者术前、术后群体反应性抗体水平,并结合患者临床排异情况,分析肾移植患者术前、术后群体反应性抗体水平与急性排斥反应的关系.设计、时间及地点:回顾性病例分析,于1998-09/2000-05在北京首都医科大学附属北京友谊医院泌尿科肾移植研究室完成.对象:选择在北京友谊医院接受肾移植的633例患者,男348例,女285例,年龄16～67岁.方法:采用美国One Lambda 公司和德国Biotest公司淋巴细胞冷冻板,检测患者术前和术后一两个月内血清中的群体反应性抗体.主要观察指标:术前及术后患者群体反应性抗体水平、临床排斥反应发生情况.结果:移植前群体反应性抗体阴性591例,移植后群体反应性抗体阳性164例,61例术后发生急性排斥反应,占10.3%;移植前群体反应性抗体阳性42例,移植后30例发生了急性排斥反应,占71.4%,12例未发生急性排斥反应.肾移植术前群体反应性抗体阴性与阳性术后发生排斥反应比较差异有非常显著性意义(P < 0.001);肾移植前后群体反应性抗体均为阴性患者427例,术后24例发生了急性排斥反应,占5.6%;肾移植后群体反应性抗体阳性164例,70例发生了急性排斥反应,占42.7%.肾移植前群体反应性抗体阴性与术后群体反应性抗体阳性并发生排斥反应的比较差异有非常显著性意义(P < 0.001).术前群体反应性抗体阴性和阳性与术后排异与否的相关系数为0.612,术后群体反应性抗体阴性和阳性与术后排异与否的相关系数为0.685,二者在P=0.01水平有明显相关性.结论:群体反应抗体对预测移植肾的急性排斥反应具有重要的意义.术前、术后群体反应性抗体阳性患者,术后发生急性排斥的概率较高;而术前、术后群体反应抗体阴性的患者发生急性排斥的概率较低.
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湘赣地区汉族人群人类白细胞抗原与肾移植后糖尿病的相关性
背景:移植后糖尿病也具有2型糖尿病的高度遗传异质性的特点,湘赣地区汉族人群人类白细胞抗原(HLA)与移植后糖尿病相关性研究领域尚属空白.目的:分析湘赣地区肾移植患者HLA与移植后糖尿病的相关性,确定该地区人群移植后糖尿病的易感基因和保护基因,并为肾移植后个体化用药提供参考数据. 设计、时间及地点:调查分析,于2007-05/2008-07在中南大学湘雅二医院泌外器官移植科完成.对象:收集中南大学湘雅二医院泌外器官移植科2003/2008接受肾移植患者的个人信息资料、移植前后各项检查结果、配型资料等,并进行随访登记.共收集得符合条件的患者共195例,其中移植后糖尿病患者22例,非移植后糖尿病移植受者173例.方法:使用χ~2检验对移植后糖尿病组与非移植后糖尿病组患者各HLA抗原的出现频率进行比较分析;根据移植后使用的钙调神经蛋白抑制药物类药物不同将195例患者分成环孢素A组和他克莫司组,通过χ~2检验对这两组患者移植后糖尿病的发生率进行比较;根据患者年龄,将其分为高龄组(≥ 40岁)和非高龄组(< 40岁),通过χ~2检验对这两组患者移植后糖尿病的发病率进行比较.主要观察指标:所有患者定期随访,随访项目为年龄、血压、尿量、血尿常规、肝肾功能、血糖及血药浓度.结果:HLA-A30和HLA-DR7可能是湘赣地区汉族人群移植后糖尿病的易感基因,未发现对移植后糖尿病具有明显保护作用的基因.在使用小剂量、低血药浓度钙调神经蛋白抑制药物类药物预防排斥反应情况下,环孢素A组患者和他克莫司组患者移植后糖尿病的发病率差异无显著性意义(P > 0.05);高龄移植受者移植后糖尿病的发生率显著高于低龄移植受者(P < 0.05).结论:HLA-A30和HLA-DR7可能是湖南和江西部分地区汉族人群移植后糖尿病的易感基因,对于携带这两种基因的移植受者,有必要在移植后密切监测血糖、尿糖,适时调整免疫抑制药物的种类和用量;在小剂量低浓度的使用原则下,他克莫司并不明显增加移植后糖尿病的发生率;高龄患者移植后糖尿病发生率显著增加,加之高龄患者本身已有的基础性心脑血管疾病的发病率升高,罹患移植后糖尿病更易导致心脑血管事件的发生,因此,对高龄移植受者进行常规的血糖和尿糖的监测和控制,并建立个体化的免疫抑制方案就显得更为重要.
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不同冷保存时间热缺血供肝在肝移植中的应用
背景:目前国内临床肝移植供肝的主要来源仍然是无心跳供体供肝,国外近年来也越来越多地使用无心跳供体供肝,但无心跳供体供肝这类经历了热缺血的供肝能够耐受冷保存的安全时限尚没有统一标准,也鲜有这方面的临床报道.目的:评价不同冷保存时间的热缺血供肝在临床肝移植中的应用安全性及疗效.设计、时间及地点:随机对照观察,于2006-01/2007-12在中山大学附属第一医院器官移植中心完成.对象:无心跳供体供肝热缺血时间在10 min内的肝移植病例154例.方法:根据冷保存时间不同分为3组,8 h内组58例,8～2 h组62例,13～16 h组34例.供肝按供体分配原则按随机数字表法分配给3组患者,移植后采用相同的免疫抑制方案.主要观察指标:比较3组患者肝移植后谷丙转氨酶峰值、原发性移植肝无功能、急性排斥反应、胆道并发症、血管并发症、感染,以及移植肝存活和受体存活情况的差异.结果:随访8～32个月,3组患者移植后均未发生原发性移植肝无功能.8～12 h组患者移植后仅谷丙转氨酶峰值高于8 h内组(P＜0.05),其余治疗两组比较差异均无显著性意义(P＞0.05).与8 h内组患者比较,13～16 h组患者的移植后谷丙转氨酶峰值、感染发生率和胆道并发症发生率显著升高(P＜0.05),移植肝存活率和受体存活率显著降低(P＜0.05).结论:热缺血时间在10 min内的无心跳供体供肝能够耐受12 h的冷保存损伤,超过此时限,移植后胆道并发症和感染的发生率明显升高,移植肝存活率和受体存活率明显降低.
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同种异体气管移植后长段气管的再血管化
背景:移植气管再血管化是气管移植外科需要解决的首要问题.目的:观察同种异体气管移植后长段气管再血管化过程中气管软骨支架的生长情况,以实现长段气管的在血管化.设计、时间及地点:动物实验观察,于2007-06/2008-06在山东省胸科医院胸外科完成.材料:健康新西兰兔20只,由山东大学医学院实验动物中心提供,随机抽取10只家兔做供体,剩余10只家兔作为受体.方法:将同种异体供体家兔气管去除气管黏膜及膜部平滑肌,形成仅余气管软骨及部分环状韧带的气管支架,在气管软骨环之间将环状韧带剪开或密集打孔,使气管软骨支架裂隙化或网孔化,但要保留气管软骨环两端及正中部环状韧带,以保持气管软骨支架的完整连接状态.受体游离并切取带血管蒂的空肠,其长度略长于备用供体的软骨支架的长度,将大网膜环绕贴附于备用供体的气管软骨环外面充当外膜.将构建好的模拟气管置于腹腔中.主要观察指标:气管外膜的网膜及气管软骨的生长情况.结果:2周后打开腹腔,大体及病理切片观察:重建的气管替代物管腔无塌陷,按压管壁弹性良好,夹裹气管软骨的肠黏膜与大网膜血运好,异体气管软骨无坏死及吸收.结论:实验在受体腹腔内成功完成了一期气管替代物重建,实现了同种异体气管移植长段气管的再血管化.受体带蒂肠黏膜、大网膜夹裹供体网孔化或裂隙化的气管支架使移植体不再受长度的限制,是实现长段气管再血管化的关键.
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移植肾急性排斥反应彩色多普勒超声诊断的临床价值
背景:应用彩色多普勒超声检查,可以直观地了解移植肾的大小、形态、结构、血流分布情况.通过血流显像技术,可以及时而准确地了解移植肾血流灌注情况,为移植肾后并发症的诊断和鉴别诊断提供帮助.目的:观察移植肾急性排斥反应的血流动力学特征,总结移植肾急性排斥反应期二维及彩色多普勒血流显像的特异性表现,以期得到超声诊断移植肾急性排斥反应的有效指标.设计、时间及地点:对比观察,于2003-01/2007-01在暨南大学和深圳大学第一医院完成.对象:纳入实施肾移植的患者299例,根据移植肾功能分成2组,肾功能稳定组236例,急性排斥反应组63例.方法:对236例移植肾功能稳定期与63例移植肾急性排斥反应期患者的主肾动脉及弓状动脉的收缩期大峰值流速、舒张末期流速、平均流速、阻力指数、搏动指数结果进行比较分析.主要观察指标:两组移植肾动脉内径与血流动力学结果.结果:与移植肾功能稳定组相比,移植肾发生急性排斥反应时肾内血流灌注减少,达不到皮质边缘处,肾动脉血流速度舒张期明显下降,搏动指数、阻力指数明显增高(P < 0.05).结论:彩色多普勒超声作为一种简便、经济的无创性技术,移植肾锥体回声减低、舒张期肾动脉血流速度下降、肾血流阻力指数、搏动指数升高对诊断移植肾急性排斥反应有特异性,对移植肾急性排斥反应的早期诊断有较高的评估价值.
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他克莫司用于中国肾移植患者远期疗效的Meta分析
目的:他克莫司在器官移植方面已得到较为广泛的应用,但该药用于亚洲人特别是中国人肾移植远期疗效的报道较少,而且相关研究均为小样本、临床随机对照研究,缺乏有效的说服力.因此文章评估国内肾移植患者长期应用他克莫司进行免疫抑制治疗的有效性和安全性.资料来源:采用电子检索和手工检索进行文献初检,电子检索数据库有Medline database (1980/2008)、中国期刊全文数据库(CNKI:1980/2008)、中国循证医学ΠCochrane 中心数据库(CEBM/CCD)、Cochrane图书馆,检索无语种限制.手工检索主要专业期刊以免出现检索遗漏.资料选择:纳入国内外关于他克莫司用于国内肾移植后患者免疫抑制治疗的随机对照研究文献,要求对照组应用环孢素A,其余干预措施相同.排除非随机对照试验及多器官联合移植文章.对结果进行统计荟萃分析(Meta分析),统计学分析采用Stata软件,评价比较疗效及差异的指标采用优势比(OR)及95%可信区间(95%CI).结局评价指标:①肾移植后1年人/肾存活率.②肾移植后3 年人/肾存活率.③肾移植后3 年排斥反应发生率.④肾移植后3年感染发生率.⑤肾移植后3年肝功能异常发生率.⑥肾移植后3年血糖异常发生率.结果:共收集国内外3个随机对照研究,其中国内3篇,国外0篇.Meta分析结果显示,他克莫司用于国内肾移植患者移植后3年内排斥反应的发生率优于环孢素A对照组(OR值为0.40,95%CI为0.27～0.61,P < 0.000 1),他克莫司组患者肾移植后3年内肝功能异常的发生率低于环孢素A对照组(OR值为0.28,95%CI为0.15～0.52,P < 0.000 1);他克莫司组患者肾移植后1,3年人/肾存活率与环孢素A对照组比较差异无显著性意义;与环孢素A对照组相比,他克莫司组肾移植后3年的血糖异常发生率升高(OR值为2.39,95%CI为1.41～4.05,P=0.001).结论:选择近20年国内外重要期刊发表的他克莫司用于肾移植后排斥反应的随机对照文章,分析结果显示,国内肾移植患者应用他克莫司与环孢素A相比,移植后3年内排斥反应及肝功能异常的发生率明显降低,对患者移植后1,3年人/肾脏存活率无不良影响,但其不良反应主要表现为血糖升高.
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嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床研究现状
目的:对嗅鞘细胞生物学特性、培养纯化、嗅鞘细胞移植的可能机制及嗅鞘细胞移植在临床的应用等方面进行分析,介绍嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状.资料来源:以olfactory ensheathing cells,spinal cord injury,嗅鞘细胞,脊髓损伤为检索词检索PubMed数据库(2000/2009),中国期刊全文数据库(2000/2009).资料选择:纳入标准:①文章所述内容应与嗅鞘细胞及脊髓损伤密切相关.②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章.排除标准:①重复性研究.②Meta分析.结局评价指标:嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展.结果:嗅鞘细胞具有与许旺细胞和星形胶质细胞相似的特征.目前嗅鞘细胞移植的动物实验主要致力于提高轴突再生能力、替代细胞成分、阻止脱髓鞘病变和促进髓鞘再生等方面,移植的嗅鞘细胞具有促进感觉及运动功能恢复的客观结果,有些移植研究甚至已经进入了临床试验阶段.不过嗅鞘细胞移植由动物实验转化到临床应用还受到很多因素的影响,诸如移植剂量、细胞生长因子的活力,细胞移植的风险等,尤其是嗅鞘细胞移植后的近期及远期效果还需要进一步深入研究、评价,并且需要长时间的随访.有研究已经把用基因转染的嗅鞘细胞用于移植,在动物试验身上已经取得了满意的效果.结论:随着基因工程技术发展以及嗅鞘细胞移植修复神经机制的深入研究,嗅鞘细胞移植必将为临床治疗脊髓损伤的患者带来康复的希望.
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生物人工肝的研究与进展
目的:分析近些年来生物人工肝相关的研究,对生物人工肝的发展作一总结.资料来源:以bioartificial liver, liver cell, hepatocyte culture, bioreactor为检索词,检索Ovid、SpringerLink数据库(1990-09/2008-09);以生物人工肝、肝细胞、细胞培养、生物反应器为检索词,检索维普数据库、中国期刊网及万方数据库(1990-09/2008-09).文献检索语种限制为英文和中文.资料选择:纳入有关生物人工肝肝细胞、反应器及辅助装置的研究,排除生物人工肝免疫和动物传染的研究.结局评价指标:①生物人工肝肝细胞的来源、数量及培养方式.②生物反应器的类型及主要结构膜的性质及类别.③生物人工肝供氧及温控装置的构成.结果:计算机初检得到3 898篇文献,根据纳入排除标准,对29篇进行分析.生物人工肝是在体外生物反应器中培养肝细胞,当患者的血液流经生物反应器时,通过半透膜或直接接触的方式与培养的肝细胞进行物质交换,使其中的肝细胞发挥解毒、合成、生物转化等功能,以达到支持和治疗目的.它不但具有解毒功能,而且还能参与3大营养物质代谢,分泌促进肝细胞生长的物质等,可有效替代肝脏的解毒功能和合成功能,并可较好地预防肝性脑病、肝昏迷和脑水肿,临床上可作为肝衰竭患者肝移植前的过渡辅助措施.结论:生物人工肝研究虽然取得了重大进展,但仍然面临寻找理想肝细胞来源,长期维持肝细胞的活性和功能,进一步优化反应器设计等问题.
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CD4~+辅助性T细胞及其细胞因子与肝移植后的免疫
目的:就CD4~+辅助性T细胞(Th)及其细胞因子与移植免疫状态的关系及研究现状作一综述.资料来源:由第一作者进行检索.检索时限及数据库:Medline数据库1970-01/2008-12,万方医学网1998-01/2008-12,中国医院知识仓库1998-01/2008-12.英文检索词为"liver transplantation, rejection,immune tolerance,T helper lymphocytes, Th1 cells, Th2 cells";中文检索词为"肝移植,排斥反应,免疫耐受,辅助性T淋巴细胞,Th1细胞,Th2细胞".资料选择:纳入描述肝移植后免疫状态及辅助性T细胞及其细胞因子作用的文献,排除综述文献及重复研究类文章.结局评价指标:对资料进行初审,选取相关文献查找全文,纳入36篇.其中有关辅助性T细胞及移植后免疫状态研究背景的文献3篇,有关Th细胞及其细胞因子在移植免疫中作用的文献22篇,有关Th细胞及其细胞因子与移植免疫关系的文献11篇.结果:Th细胞是调节机体免疫应答的一类重要调节性细胞,具有辅助体液和细胞免疫的功能,Th细胞及其细胞因子在肝移植免疫中起十分重要的作用,Th1/Th2的平衡与肝移植后免疫反应密切相关,Th1细胞因子分泌增加可致肝脏排斥反应,当Th1/Th2向Th2偏移,易发生免疫耐受反应.结论:迄今为止,Th1/Th2转换与移植免疫关系的研究只停留在实验水平,如何将其学说应用于临床实践,通过检测和调整细胞因子等方法来确定机体的免疫状态,调节Th1/Th2的分化,从而诱导宿主的特异性免疫耐受应该成为下一步研究的重点.
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免疫耐受性树突状细胞在移植免疫中的作用及其分子机制
新的研究发现一种半成熟树突状细胞亚群,其高表达主要组织相容性复合体II、中等表达CD40、CD80和CD86等分子,在自身免疫性疾病中表现出诱导免疫耐受的潜能,其与未成熟树突状细胞一道被认为是致耐受细胞.这使过去将树突状细胞分为未成熟和成熟两种类型的概念受到挑战.但是,它们在移植免疫中的具体作用和机制仍未完全明了.文章对致耐受树突状细胞的体内迁移过程、在移植免疫中分子机制和体外获得等方面的新进展进行综合分析和热点追踪,为进一步理解和研究致耐受树突状细胞在移植免疫反应中的作用拓宽视野.
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蛋白A免疫吸附防治高致敏肾移植受者急性排斥12例
为探讨蛋白A免疫吸附治疗对高致敏肾移植受者急性排斥反应的防治作用,选择2006-01/2008-01郑州人民医院器官移植科收治的肾移植高致敏受者12例.对12例群体反应性抗体> 50%的肾移植受者术前行蛋白A免疫吸附治疗4～6次,平均每周1次,术前1 d行蛋白A免疫吸附1次,术后发生急性排斥反应则立即给予蛋白A免疫吸附治疗,观察其急性排斥反应的发生情况及不良反应.12例高致敏患者移植后均未发生超急性排斥反应,有2例患者均在移植后数日内突发少尿,血肌酐迅速上升.经病理提示间质炎性细胞浸润,伴有水肿,肾小管周围淋巴细胞积聚,毛细血管有单核细胞浸润及动脉内膜炎和小血管坏死,诊为急性排斥反应,再次查群体反应性抗体,此2例患者群体反应性抗体均再度明显升高,Ⅰ类平均3.8%,Ⅱ类平均19.2%,立即行蛋白A免疫吸附结合大量甲泼尼松龙冲击治疗,成功逆转排斥反应,肾功恢复正常,复查群体反应性抗体Ⅰ类平均降至8.3%,Ⅱ类降至5.2%.所有患者均随访1年以上,移植肾功能良好.提示蛋白A免疫吸附能迅速清除患者体内的抗体,降低群体反应性抗体水平,预防急性排斥反应发生.
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HLA新等位基因A~*9217家系调查分析
背景:目前所发现的HLA等位基因是在人类进化过程中,为了适应某种外界环境过程中逐渐产生的,新近产生而不曾被人们发现的为新等位基因,这些新的等位基因产生诱因千变万化,在诱发因素消除之后这些突变是否持续存在,尚需进一步观察.目的:采用DNA测序技术确认聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸分型检测中的可疑结果,确认新的HLA等位基因,分析新等位基因HLA-A~*9217(WHO注册号:WHS10004629)的遗传方式.设计、时间及地点:以DNA为观察对象的开放性试验.其中常规初检聚合酶链反应-寡核苷酸探针分型反向杂交荧光微珠法于2007-11在河南省红十字血液中心中华骨髓库河南分库人类白细胞抗原组织配型实验室完成,测序实验于2008-02在戴诺生物技术(北京)有限公司人类白细胞抗原实验室完成.材料:中华骨髓库志愿捐献者(编号:371xxxxx)及其直系3代亲属血样,受试者共9人在实验室逐个登记,采集静脉血5 mL,EDTA抗凝.方法:用聚合酶链反应-序列特异性寡核苷酸流式荧光微珠HLA分型方法、SBT测序分型方法,对A~*9217携带者家庭成员进行中低分辨,DNA测序高分辨检测分析,血清学方法检测ABO,MN,Rh血型系统,分析新基因的发现及遗传方式.主要观察指标:HLA新等位基因A~*9217携带者A位点外显子3序列对比.结果:通过受检者HLA分型结果和红细胞系统ABO,MN,Rh血型分析,先证者A~*9217应来自父方,但父方并没有检出A~*9217,而是检出了与之序列相近的A~*020301,与A~*9217在处显子3有3处碱基改变391 T>G,414 C>G,418 T >G,A~*9217携带者的2个孩子均检出A~*9217.结论:新基因A~*9217先证者父方产生突变所致,该突变能正常遗传给后代,该基因是否能稳定遗传下去有待进一步观察研究.
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同一医院5年期间活体供肾摘取后供者孤肾功能变化117例分析
目的:通过在活体供肾摘取后对供者孤肾功能进行全面性、规律性、连续性地评估,了解供者孤肾在活体供肾摘取后的功能变化,从而分析活体供肾摘取的临床可行性.方法:选择亲属活体肾移植供者117例,肾摘取后通过连续监测血清肌酐水平、肾小球滤过率、尿常规及血压水平等各项指标,并在出院后坚持随访,全面评估供者孤肾在活体供肾摘取后的变化及供者的全身健康状况.结果:117例活体供肾患者均顺利接受手术,其中2例肾摘取后围手术期出现药物过敏反应;8例肾摘取后尿常规镜检有红细胞;5例出现微量蛋白尿;15例出现尿路感染;3例围手术期出现情绪焦虑,对自身健康状况表示担心;22例围手术期出现切口疼痛或不适;19例出现血压轻度增高,但均在正常血压范围内.所有供者肾摘取后均出现肾小球滤过率的下降,下降4～25 mL/min,平均(9.4±4.7) mL/min,均未超出正常肾小球滤过率范围.所有供者肾摘取后均出现血清肌酐升高,43例在供肾后2个月时仍超过正常水平;在肌酐增长水平与肾小球滤过率下降程度的比较中,左侧与右侧孤肾、男性与女性供者间差异均无显著性意义;但50岁以上供者肌酐水平高于50岁以下供者(P < 0.01).所有患者经对症治疗后各项指标均恢复正常,除外5例肌酐水平至今仍异常,但均稳定在135 μmol/L以内.结论:供者孤肾在活体供肾摘取后各项监测指标均有不同程度变化,甚至在短期内超出正常水平,但这些指标变化并不影响孤肾的整体功能,不影响供者的整体健康状况,从临床角度分析,活体供肾移植是安全可行的.
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广东省佛山市2007年度透析移植登记报告
目的:了解佛山地区各医院透析移植治疗现状.方法:佛山市所有开展透析单位共18家医院参加了登记工作,填写<佛山市医学会肾脏病分会透析移植登记表>,调查项目包括:医院情况、肾内科人员编制情况、血液净化开展情况、血液净化设备及管理状况、血液透析患者情况、腹膜透析患者情况、急性肾功能衰竭情况等.登记时间为2007-01-01/12-31,对资料进行汇总和统计分析.结果:18家医院均开展了血液透析,同时开展血液透析和腹膜透析6家,单纯开展血液透析12家.全市共有血液透析机155台,CRRT机6台,透析器复用机15台.透析器复用方式中,采用复用机、人工冲洗复用和未复用分别占61.1%、33.3%和5.6%.全年共有透析患者1 718例,血液透析、腹膜透析各占93.60%、6.40%.2007年新增加透析治疗患者866例,新增加血液透析、腹膜透析患者各占91.7%、8.3%.至2007-12-31尚有透析患者1011例,血液透析、腹膜透析患者各占90.60%、9.40%.血液透析患者原发病因中,原发性肾小球肾炎、糖尿病肾病、动脉硬化性肾病和梗阻性肾病分别占52.4%、18.9%、10.8%和6.4%.腹膜透析患者原发病因中,原发性肾小球肾炎、糖尿病肾病、梗阻性肾病和动脉硬化性肾病分别占47.3%、28%、9.7%和3.2%.全年有743例血液透析患者退出治疗,其中死亡、好转或痊愈、改腹膜透析、肾移植、转院透析、经济原因停透、失访等分别占20.3%、20.1%、7.2%、4.1%、21.5%、20.2%和6.6%;死亡原因中,脑血管疾病、心血管疾病、感染、营养不良、因透析剂量不足死于尿毒症综合因素、其他等分别占16.6%、28%、17.2%、3.2%、18.4%、16.6%.全年有16例腹膜透析患者退出治疗,其中死亡、好转或痊愈、改血液透析、失访等分别占68.7%、18.7%、6.3%和6.3%;死亡原因中,脑血管疾病、心血管疾病、感染、其他等分别占21.4%、7.1%、28.6%和42.9%.结论:目前佛山地区开展透析治疗的医院已达18家,同时开展了血液透析和腹膜透析.不管是血液透析患者还是腹膜透析患者中,原发性肾小球肾炎、糖尿病肾病、动脉硬化性肾病、梗阻性肾病是原发病因中前4位原因.心脑血管疾病和感染为死亡的主要原因.
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氯沙坦及氨氯地平对肾移植患者24 h尿蛋白及血、尿转化生长因子β_1的影响
目的:观察氯沙坦和氨氯地平对肾移植患者24 h尿蛋白及血、尿转化生长因子β_1的影响.方法:选择佛山市第一人民医院初次肾移植后伴轻、中度高血压(收缩压140～170 mm Hg,舒张压85～100 mm Hg, 1 mm Hg=0.133 kPa)患者40例,男23例,女17例,年龄(38.6±19.2)岁,随机数字表法分为氯沙坦组和氨氯地平组,每组20例.氯沙坦组口服氯沙坦50 mg/d治疗,氨氯地平组口服氨氯地平5 mg/d治疗,要求患者血压控制在130/80 mm Hg以下,治疗6个月后检测血压、肾功能、24 h蛋白尿与血、尿转化生长因子β_1水平.结果:40例患者均进入结果分析.患者用药后收缩压、舒张压均显著下降(P < 0.05),治疗6个月后,收缩压、舒张压均降至正常水平 (P < 0.01).治疗期间,2组血压下降值及平均动脉压比较差异无显著性意义 (P > 0.05).2组治疗总有效率比较差异无显著性意义 (P > 0.05).2组患者治疗前后血尿素氮、肌酐和血尿酸差异无显著性意义 (P > 0.05).治疗6个月后,氯沙坦组24 h尿蛋白与血、尿转化生长因子β_1水平较治疗前显著下降 (P < 0.05),氨氯地平组24 h尿蛋白与血、尿转化生长因子β_1水平无明显变化 (P > 0.05).氯沙坦组24 h尿蛋白与血、尿转化生长因子β_1水平均低于氨氯地平组 (P < 0.05).结论:氯沙坦与氨氯地平均可有效地控制肾移植患者的高血压状态,但氯沙坦可明显降低肾移植患者24 h尿蛋白与血、尿中转化生长因子β_1水平,氨氯地平的作用不明显.
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溶解性CD30水平检测在肾移植中的应用
背景:体外实验数据表明了在同种异体移植免疫反应中存在CD30阳性的T细胞.目的:通过对肾移植手术前后患者血清溶解性CD30分子的检测,结合临床排斥反应的发生情况,分析其对于评估受者术后免疫状态、监测急性排斥反应发生以及预后判断中的价值.设计、时间及地点:临床病例分析,于2004-04/2007-03在江苏省人民医院完成.对象:肾移植患者153例,男103例,女50例,平均年龄37岁.方法:分别采集移植前 (未使用免疫抑制剂)和移植后第0,1,3,5,7,14,21,28天移植受者外周血3 mL,分离血清-20 °C保存,使用由BenderMedSystems提供的溶解性CD30 细胞因子ELISA 检测试剂盒,检测各样本溶解性CD30水平.主要观察指标:移植前后溶解性CD30与排斥反应的相关性.结果:对17例发生急性排斥患者与136例未发生排斥患者的术前溶解性CD30水平进行比较,排斥组平均113.2 U/mL,未排斥组83.2 U/mL,两组间差异有显著性意义(P < 0.01);术后5 d内两组间无明显差异(P > 0.05);而从术后5 d开始,排斥组与未排斥组具有明显差异(P < 0.01).急性排斥反应发生和排斥缓解的时间与溶解性CD30水平之间无相关性(P > 0.05).ROC曲线分析结果表明,术后5 d溶解性CD30水平可以很好的诊断急性排斥反应,曲线下面积为0.850,理想的临界值为100 U/mL,其特异性为85.0%,敏感性为83.6%.预后结果显示,术前溶解性CD30阳性患者移植肾存活率明显低于阴性患者(P < 0.01).结论:肾移植患者溶解性CD30水平对于预测急性排斥反应及对预后的判断均有一定的价值.
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社会心理因素对终末期肾病行腹膜透析患者康复结局的影响
目的:分析社会心理因素对终末期肾病行腹膜透析患者康复结局的影响.方法:选择2005-08/2007-03北京大学第一医院肾内科腹膜透析中心确诊的终末期肾病接受腹膜透析治疗患者171例,男66例,女 105例,年龄(60±13)岁,平均透析时间22.8个月.采用问卷调查与访谈相结合方法对患者的康复结局进行评定:主要利用Karnofsky活力指数评估活动状况;采用社会功能缺陷筛选表评估社会参与状况.评估患者的心理社会因素主要采用Hamilton抑郁、焦虑等级量表、医学应对方式问卷和社会支持评定量表.结果:共发放问卷200份,回收有效问卷171份,占85.5%.本组患者活动正常者134例,占78.4%;存在参与受限者129例,占75.4%;焦虑症状的发生率为24.5%(42例),抑郁症状的发生率为8.2%(15例).本组患者对疾病在采取"屈服"应对方式方面的得分显著高于其他慢性病患者,而"面对"和"回避"两种应对方式的采用与其他患者无统计学差异.将反映康复结局的活动、参与指标作为因变量,社会心理因素中的抑郁焦虑水平、应对方式、社会支持等作为自变量,用多元逐步标准回归篩除法,找出影响康复结局的相关因素,后进入回归模型的因素为患者的抑郁程度、对疾病采取面对或屈服应对方式、对社会支持的利用程度.结论:社会因素中患者对社会支持的利用程度、心理因素中患者的抑郁状况及对疾病所采取的应对方式等因素对终末期肾病患者的康复结局有重要影响.
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肝移植后肾功能不全37例
背景:肝移植后,由于手术创伤和免疫抑制剂的应用极易造成急性肾功能不全,其诊断和治疗,目前尚无统一诊断标准.目的:分析肝移植后肾功能不全的相关因素和诊治经验.设计、时间及地点:2004-01/2006-12在解放军第四五八医院完成.对象:肝移植37例,男35例,女2例,年龄37～67岁,平均(48.5±8.9)岁.根据原发病分为肝硬化组21例,包括乙型肝炎后肝硬化16例,丙型肝炎后肝硬化4例,酒精性肝硬化1例,均为肝硬化失代偿期;肝癌组16例.移植后均经病理检查确诊.方法:按背驮式改进方法实施供肝和病肝病切除及肝脏血液流出道重建.移植后每天查血和引流物细菌培养1次,每天查动脉血气分析、血常规、肾功能及肝功能检查2次以上.肝移植患者术后常规应用三代头孢雷素、大扶康及更昔洛韦或并用万古霉素等药5～7 d预防细菌、霉菌及病毒感染.主要观察指标:急性肾功能不全发生率、患者的临床特征、尿量变化、治疗转归情况等.结果:肝移植后发生急性肾功能不全19例,死亡5例,14例患者于术后两三周内肾功能恢复正常.肝移植相关肾功能不全的发生与感染、失血性休克,呼吸衰竭和急性呼吸窘迫综合征有关(P < 0.05).结论:肝移植相关肾功能不全的发生率高为51.35%.死亡率为26.32%,早期诊断和治疗肝移植相关肾功能不全是提高肝移植后急性肾功能不全患者治疗成功率的关键.
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畸形肾血管体外重建在肾移植中的应用:2年随访结果
目的:供肾肾动脉常存在解剖学变异,应用这些血管畸形肾进行移植的临床效果尚无统一意见.观察体外重建畸形供肾血管对肾移植临床效果的影响.方法:选择解放军兰州军区总医院全军泌尿外科中心2006-06/2009-05行尸体供肾伴血管畸形患者27例为实验组,其中17例具有副肾动脉,另10例肾动脉为两三支畸形,均无法直接进行血管吻合.以同期进行正常尸体供肾肾移植患者22例作为对照组.体外血管重建的方法包括动脉端端吻合11例、端侧吻合6例、侧侧共干吻合6例、利用供体或受体髂动脉及其分支合并及延长供肾动脉4例.术后随访观察出血、新出现高血压(或高血压加重)、肾动脉狭窄、移植肾肾功能延迟恢复、急性排斥反应的发生率以及血肌酐水平.结果:移植后平均随访2年,两组患者49例均存活.实验组2例,对照组3例移植后出现高血压或高血压加重,两组间差异无显著性意义(P=0.673),但未发现移植肾动脉狭窄;实验组和对照组移植后肾功能延迟恢复发生率分别为20%和14%,急性排斥反应发生率分别为13%和5%,血肌酐水平分别为(119±11),(127±8) μmol/L,两组间差异均无显著性意义(P=0.179,0.385,0.658).结论:选择适当方法进行供肾畸形血管的重建不影响肾移植效果,可提高供体器官的利用率.
