中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子： 1.38
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 2095-4344
- 国内刊号： 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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控制体质量对运动员机体组织的影响及其饮食对策
目的:分析运动员控制体质量对其机体组织的影响,并提出饮食对策,为运动员科学控制体质量提供理论根据.方法:手工查阅与运动员控制体质量相关的书籍和文献,纳入的均为以运动员为观察对象的资料,应用文献资料法进行综合分析.结果:严格限制食物和液体的摄入,会引起脱水、心血管的风险、体蛋白质和无机盐及维生素的丢失、体温调节失衡、肾功能改变、肌肉和肝糖原储备耗损等,故减体质量要循序渐进地进行.可以分为3个阶段:第1阶段为准备适应期,食物供热量为需要量的80%～90%;第2阶段为降体质量期,食物供热量为需要量的60%～70%;第3阶段为巩固期.减体质量期应保持高维生素、低糖、低脂,并供给必需的无机盐,适当加强蛋白质营养,加强医务监督,有时还需调整运动量和食谱.结论:控制体质量对运动员机体组织的影响是多方面的,各种影响是相互关联的,减重要循序渐进,并保证充足的睡眠、蛋白质和维生素.
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未来5年北京市卫生事业机构对康复治疗技术岗位需求的预测
目的:预测未来五年北京市卫生事业机构对康复治疗技术岗位的需求量.方法:①文献检索法:系统了解北京市康复治疗技术人员的配置情况及其优劣势.②采用定量研究来预测北京市2007年和2010年所需的康复治疗师人数.结果:①文献检索法结果:1997,2001年两次调查结果显示,三级医院康复医学科建立有了较大幅度提高(康复治疗师数字平均为4左右),但仍有近1/3未建科,达标数为57.6%,二级医院建科数仅为23.5%;基层、农村的一级医院康复医疗几乎为空白.2002年调查结果三级医院康复治疗师数平均每所为7.6人;二级医院为0.1人;一级医院为0.3人.②医院床位数/康复治疗师比值法计算结果:根据卫生部文件推算,未来5年每100张病床大约需要康复治疗师人数两三名,2007年和2010年北京市康复治疗师需要量分别是1 480～1 619人和2 239～2 524人.结论:北京市综合医院康复医学科的人力资源配置和培养在未来5年内急需增加和进一步改进.
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Brunel平衡量表:一种新型的脑卒中平衡量表
目的:介绍一种新型的脑卒中平衡量表-Brunel平衡量表,为促进脑卒中患者平衡功能的恢复、推动康复治疗的发展,寻找一种理想的评价方法.方法:检索和参考相关文献,介绍Brunel平衡量表的具体内容和使用方法,分析和归纳其实用性、可信性和有效性.结果:Brunel平衡量表具有快速、简便、测试灵活的特点,耗时少、测量工具简单;具有高度的敏感性,能对平衡水平的细微改变做出反应;该量表相比于过去的量表,未包含主观的、不够精确的内容,从而具有100%的可靠性;同时,具有很高的有效性,与许多常用量表中平衡部分的相关系数都具有统计学意义.结论:Brunel平衡量表作为目前新型的脑卒中平衡评价量表,按残损程度分级衡量,具有简便、可靠、有效、敏感的特点,克服了通用量表的不敏感性和一般的行为功能测评的狭窄性,完全符合临床和科研的需要,适用于广泛的脑卒中患者和康复治疗室.
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腰椎间盘突出症患者术后残留麻木的发生率及影响因素
目的分析腰椎间盘突出症患者术后下肢残留麻木的发生率和影响因素.方法于2001-01/2005-02选择南通大学第二附属医院脊柱外科收治的腰椎间盘突出症患者80例为研究对象,所有患者行后路髓核摘除术,术后常规应用美洛西林6 g预防感染,地塞米松10 mg和速尿20 mg脱水,止血敏3 g和止血芳酸400 mg止血.术后3 d开始直腿抬高锻炼以减轻术后神经根粘连,1周后用五点支撑法锻炼腰背肌,3周后在腰围保护下下地活动,腰围使用1个月,术后3个月恢复轻工作,半年恢复原工作.所有患者术前均行腰椎间盘CT扫描,根据日本骨科学会腰椎29分评分法(JOA)进行评分,术中记录受压神经根直径.术后10 d,1,3,12个月进行随访,记录下肢麻木发生率.结果纳入患者80例,均进入结果分析.术前腰椎间盘突出症患者下肢麻木发生率76%,术后10 d,1,3,12个月下肢残留麻木率分别为34%,25%,22%,21%.术后12个月旁侧型突出、中央型突出、极外侧型突出的患者下肢残留麻木发生率分别为21%,9%,67%.术后12个月椎间盘钙化的患者下肢残留麻木发生率为65%.术后下肢残留麻木与手术年龄、受累神经根直径有关,与病程和术前JOA评分无关.结论腰椎间盘突出症术后部分患者残留下肢麻木,术后12个月麻木发生率为21%,推测神经组织的潜在恢复能力影响下肢麻木的发生率.
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糖尿病患者周围神经病变的检测及其危险因素分析
目的应用肌电图对糖尿病患者周围神经的传导速度进行检测,并分析糖尿病周围神经病变的危险因素.方法选择大连市中心医院2002-06/2003-10住院的糖尿病患者54例.肌电图测定其正中神经、尺神经、腓总神经和胫神经的运动神经传导速度及正中神经、尺神经和胫后神经的感觉神经传导速度.当正中神经、尺神经的感觉、运动神经传导速度＜50 m/s,胫神经运动神经传导速度＜40 m/s确诊为糖尿病周围神经病变.以周围神经病变为因变量,以性别、年龄、病程、体质量指数、腰臀比、空腹血糖、血脂、高血压、吸烟、饮酒等因素为自变量进行t检验及多因素逐步回归分析.以50例正常人为正常对照组.结果①54例糖尿病患者全部进入结果分析,其中74%存在周围神经病变,正中神经、尺神经、胫后神经的感觉神经传导速度均低于正常对照组(P＜0.05,0.01),下肢比上肢更加明显;运动神经传导速度仅正中神经低于正常对照组(P＜0.05).②有神经病变者的病程、高血压、空腹血糖、胆固醇、高、低密度脂蛋白胆固醇与无神经病变组有明显差异.③多因素逐步回归分析结果表明危险因素依次为病程、空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇.结论肌电图检测感觉神经传导速度较运动神经传导速度对糖尿病周围神经病变的评估更为敏感.病程、空腹血糖、低密度脂蛋白胆固醇可影响糖尿病周围神经病变的发生、发展.
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应用自制缝合器在关节镜辅助下修复髌骨脱位
背景:急性创伤性髌骨脱位为常见的并发损伤是髌骨内侧支持带复合体的损伤,但多数急性髌骨脱位系瞬间损伤,能够"自然复位",早期临床常应用石膏固定.由于患者多无法坚持长时间固定,结果损伤的韧带处于松弛状态下愈合,潜伏着外伤性习惯性脱位的隐患.应用关节镜辅助治疗急性髌骨脱位日益广泛,但多局限为外侧支持带松解和对膝关节其他结构损伤的处理.
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高速钢轮结合铁皮刷打磨治疗浅表瘢痕
目的观察高速钢轮结合铁皮刷打磨等综合措施治疗面部浅表瘢痕的疗效.方法于2001-10/2004-12选择解放军第二军医大学长海医院整形科收治面部浅表瘢痕患者257例,首先应用大力士-D4牙钻机及橄榄形不锈钢小磨头,转速为12 000 r/min,磨去瘢痕区域及周围部分表皮层,再用铁皮刷[刷齿短(1 mm左右)、密(左右间距1.5 mm)、利(一次使用),剪成3 cm×5 cm,2 cm×3 cm不等椭圆形片状]顺皮纹方向,或与瘢痕长轴垂直方向反复打磨,直至瘢痕界限不明显为止.术后效果的评定以1 m左右以外不易看清面部瘢痕,或患者满意为佳.判定方法采用术前术后照片及双人(患者与医师)目测法.结果纳入患者257例,均进入结果分析.一次磨削术后效果满意者244例(95%),13例患者半年后再次进行磨削术后获满意效果.随访6个月,暂时性(6个月内自动消退)色素沉着171例(66.5%),粟丘疹与代偿性皮脂溢出61例(22.5%),瘢痕增生1例(0.45%),经得宝松治疗后症状消退,无感染及色素脱失减退.结论高速钢轮结合铁皮刷打磨方法治疗面部浅表瘢痕,方法简便,效果满意,并发症少.
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太极拳运动对冠心病患者的抗氧化作用
目的观察分析太极拳有氧健身运动对老年人冠心病患者的抗脂质过氧化及抗氧自由基的作用.方法选择2004-09/2005-02烟台师范学院校医院心内科、山东工商学院校医院心内科、烟台市毓璜顶医院心内科收治冠心病患者38例,分为太极拳组20例,病例对照组18例.健康体检者20例作为健康对照组.太极拳组患者有氧健身锻炼并加以常规药物治疗(维拉帕米80 mg,3次/d,或缓释剂240 mg/d),每天早晨和晚上由专业武术教师指导太极拳锻炼,＞6次/周,＞40 min/次,持续6个月,主要练习24式简化太极拳和48式太极拳.病例对照组不经常锻炼,仅给予常规药物治疗,剂量、用法同上述.两组分别于给药前后空腹取静脉血检测全血谷胱甘肽过氧化物酶活性、全血超氧化物歧化酶活性、脂质过氧化物、氧化低密度脂蛋白、血清自身化学发光及鲁米诺诱导化学发光.健康对照组的检测方法同上.结果纳入患者38例和健康体检者20例,均进入结果分析.①冠心病患者在实验前脂质过氧化物、氧化低密度脂蛋白、自身化学发光脉冲数、鲁米诺诱导化学发光脉冲数较健康对照组显著升高(P＜0.01),谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶较健康对照组显著降低(P＜0.01).②实验后太极拳组患者的超氧化物歧化酶、氧化低密度脂蛋白、自身化学发光脉冲数、鲁米诺诱导化学发光脉冲数与病例对照组比较差异显著(P＜0.01,P＜0.05).③实验后太极拳组患者的谷胱甘肽过氧化物酶、脂质过氧化物、氧化低密度脂蛋白、自身化学发光脉冲数与健康对照组比较差异无显著性(P＞0.05),即恢复正常;而病例对照组只有谷胱甘肽过氧化物酶、脂质过氧化物与健康对照组比较差异无显著性(P＞0.05).④实验后太极拳组患者的超氧化物歧化酶活力较健康对照组虽有升高,但差异无显著性(P＞0.05),即恢复正常.太极拳组和病例对照组患者的鲁米诺诱导化学发光脉冲数都有所降低,但仍高于健康对照组(P＜0.05,P＜0.01).结论太极拳运动对冠心病患者具有良好的抗氧化作用,对冠心病患者的预防和康复切实可行,疗效尤佳.
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皮内注射地塞米松用于下肢长骨手术后的镇痛
目的:观察皮内注射地塞米松在下肢长骨手术后的镇痛效果.方法:选取2003/04-2004/12在连云港市第一人民医院确诊为患有下肢长骨骨折的择期手术患者40例.随机分地塞米松组、布比卡因组、生理盐水组和空白对照组四组,每组10例.在手术范围内的脊神经的皮肤分布区给药,距手术切口5 cm以上,进针深度约0.1cm,每个皮丘注入1～1.5 mL药液,直径为1.5～2 cm苍白桔皮样皮丘,皮丘间隔1.5 cm.如手术超过4 h,即放弃这一实验.所有患者均采用目测类比评分法(VAS)评分(0～10刻度,0为无痛,10为剧痛.术后2 h开始评分,2 h/次,共4次)评估镇痛效果.结果:因手术超时放弃5例,又因手术后疼痛难忍,放弃4例,终进入结果分析31例.地塞米松组患者的目测类比评分法(VAS)评分均低于布比卡因组、生理盐水组、空白对照组(2.30±1.04,4.76±1.78,5.47±0.99,6.03±1.48,t=-3.531 2,-6.173 8,-5.932 0,P＜0.05).结论:皮内注射小剂量地塞米松对下肢长骨手术后有显著镇痛效果.
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儿童及青少年脊柱脊髓损伤特征
目的:了解儿童及青少年脊柱脊髓损伤的特殊性,分析受伤原因及诊治要点.方法:调查分析于1992/2002在北京博爱医院脊柱脊髓外科完成.统计实验期间所收治的儿童及青少年脊柱脊髓损伤患者50例.颈椎损伤13例,胸椎损伤9例,胸腰椎损伤12例,腰椎损伤4例;无骨折脱位型脊髓损伤12例(颈髓3例,胸髓8例,不详1例);其中无脊髓损伤的颈椎损伤1例.在神经系统损伤的49例中,颈髓14例,胸髓20例,圆锥及(或)马尾神经14例,不详1例;完全性损伤23例,完全性损伤转变为不完全性损伤2例,不完全性损伤23例,不详1例.结果:50例脊柱脊髓损伤患者纳入结果分析.脊髓完全性损伤的23例中,有改善的7例,无明显改善的16例;在不完全性损伤的23例中,有改善的14例,无明显改善的9例.在前路手术治疗中,颈椎7例,胸腰椎3例;后路手术中,颈椎3例,胸椎7例,胸腰椎9例,腰骶椎2例.在手术的31例中,神经功能有改善9例,无明显改善22例;在未手术19例中,神经功能有改善9例,无明显改善8例,不详2例.与汽车有关的交通肇事伤17例.受伤原因中因交通事故、坠落伤和运动损伤较其他原因有显著性差异(P＜0.05).脊髓损伤功能恢复上,完全性与不完全性损伤无显著性差异(P＞0.05);手术与非手术对脊髓损伤恢复上,差异无显著性意义(P＞0.05).结论:儿童及青少年脊柱脊髓损伤受伤原因以交通事故、坠落伤和运动损伤为主,脊髓功能恢复也有其特殊性.
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绍兴市区9 929名健康体检人群血脂水平分类及分型的统计
目的:分析绍兴市区人群血脂水平分类及分型特征.方法:收集2004-01/2005-12在绍兴文理学院附属第一医院接受健康体检的绍兴市区人群9929名的血脂资料(男/女=5 314/4 615,年龄20～96岁),按年龄分为青年组(20～39岁)、中年组(40～49岁)、老年前期(50～59岁)及老年(60岁以上)4组.按中国"血脂异常防治建议"并参考美国"ATPⅢ指南"将所有数据进行血脂分类及分型并分析,具体标准:总胆固醇以5.2～5.69 mmol/L为边缘性增高,＞5.7 mmol/L为高总胆固醇血症;三酰甘油以1.7～2.26 mmol/L为边缘性增高,＞2.26 mmol/L为高三酰甘油血症;高密度脂蛋白胆固醇以＜1.03 mmol/L为低水平、1.03～1.54 mmol/L为合适水平,1.55 mmol/L以上为高水平.结果:①总胆固醇水平:4个年龄组中超过合适水平者基本都在30%以下,只有老年女性达到了34%.他们中约15%可以诊断为高胆固醇血症,老年女性高胆固醇血症者比例达到19.2%.②三酰甘油的分布:在0.56 mmol/L以下者约为5%;在1.13 mmol/L以下者约为35%,在1.69 mmol/L以上者各组约为35%,＞2.26 mmol/L者约为17%.③总胆固醇、三酰甘油都在合适范围者青年组为49%,中年组和老年前期组约为47%,老年组约为44%;从高血脂分型来说,不论是边缘性增高或明确的高血脂都是高三酰甘油略多与高总胆固醇.④高密度脂蛋白胆固醇:低水平的分布频率在各组中大致为4%,在60岁以下人群中女性(4.3%)略高于男性(3.9%),而在老年人中则相反(男性4.1%,女性3.1%);高水平者在各组男性和女性人群中约为60%,但在老年女性中高达71.5%;高高密度脂蛋白胆固醇多见于高三酰甘油者(男性16.1%,女性15.2%),而低高密度脂蛋白胆固醇则多见于三酰甘油边缘性增高型(男性15.0%,女性13.1%).结论:绍兴市城区人群血脂异常处于一个较高的水平(异常者已达1/2),并且有年轻化的趋势(青年人中也达到了约50%).
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低铅暴露对学龄前儿童神经行为的影响
背景:环境铅污染日趋严重,铅致中枢神经系统发育的毒性较为突出.目的:观察低血铅水平对学龄前儿童神经行为的影响,为预防儿童行为问题提供依据.设计:抽样调查.单位:中山大学公共卫生学院儿少卫生教研室.对象:于2004-09/10随机整群抽取珠海市某居民区幼儿园211名4～6岁儿童为研究对象,其中男109名,女102名.方法:采指端末梢血20 μL,原子吸收石墨炉法测定血铅,以血铅水平100μg/L为界,分为高血铅组(＞100μg/L),低血铅组(＜100 μg/L),又以不同血铅水平再分为＜50 μg/L组、50μg/L～组、100μg/L～组、150～μg/L组、250μg/L～组.采用Achenbach儿童行为量表和自拟调查表(包括可能影响儿童神经行为的因素,如年龄、性别、抚养方式和家庭文化背景等)进行问卷调查,在专业人员指导下,由家长填写.结果与血铅值进行简单相关和多元逐步回归分析.主要观察指标:①血铅水平和Achenbach儿童行为量表各因子分.②血铅值与行为因子分相关分析.结果:发放问卷211份,回收211份,有效211份,有效率100%.①高血铅组外向行为得分及行为异常率(13.28±6.26,18.26%)显著高于低血铅组(9.98±5.46,7.29%)(t=4.0677,χ2=5.470,P＜0.05),Achenbach儿童行为量表内向得分及总分两组差异无显著性意义.②不同组别血铅水平行为异常率差异有显著性(χ2=13.695,P＜0.01),进一步两两比较,血铅≥150μg/L行为异常率显著高于前3组(χ2分别为4.727,6.261,5.168;4.503,5.911,4.928,P均＜0.05),表明血铅≥150 μg/L时,儿童行为异常率显著增多.③血铅对数值与多动、攻击、违纪因子分显著正相关(r=0.316 4,0.282 8,0.188 6,P＜0.05).与肥胖、分裂、残忍、性问卷无相关性(r=0.102 4,0.094 2,0.118 3,0.092 6,P＞0.05).④经逐步回归分析,多动、攻击及违纪因子分列入回归方程,这表明在控制家庭,社会等混杂因素后,铅对儿童外向行为的影响依然存在,有统计学意义.结论:低水平铅暴露对幼儿外向行为具有负性影响.
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新疆维吾尔族2型糖尿病家系成员体质量指数与糖代谢、血脂、血压的关系
目的:分析新疆维吾尔族2型糖尿病家系成员体质量指数与糖代谢、血压、血脂的关系,借以探讨家系成员体质量指数的适宜切点.方法:抽取新疆和田地区维吾尔族2型糖尿病家系21个,16岁以上家系成员365人,按体质量指数分为6组,比较各组血糖、胰岛素抵抗、血压及血脂的情况.非条件Logistic回归分析不同体质量指数切点作为独立因素与2型糖尿病的相关联系.结果:365例成员纳入结果分析.①随体质量指数水平的升高,服糖后2 h血糖、空腹及服糖后2 h胰岛素、收缩压和舒张压、总胆固醇、三酰甘油、稳态模式胰岛素抵抗指数均呈上升趋势,各体质量指数组间比较差异有显著性意义(P＜0.001).②体质量指数＜23 kg/m2的两组,空腹血糖和服糖后2 h血糖分别为(5.93±2.97)mmol/L和(775±6.02)mmol/L,接近空腹血糖及糖耐量异常标准.③体质量指数≥25 kg/m2和体质量指数≥27 kg/m2时,分别出现空腹糖耐量受损和糖耐量异常.④非条件Logistic回归分析显示体质量指数≥23 kg/m2,糖代谢异常OR=2.05,P=0.047 7暴露组归因危险百分比为51.22%.结论:随体质量指数增高,新疆维吾尔族2型糖尿病家系成员的血糖、血脂、血压增高,体质量指数≥23 kg/m2后,糖代谢异常的危险性增加.
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中国6城市中老年人群颈椎骨关节炎患病危险因素的非条件Logistic回归分析
背景:中老年人的颈椎骨关节炎发病率较高,国外对引起颈椎骨关节炎的危险因素已进行了一些研究,但大多数因素尚在讨论之中.目的:调查国内不同地区间中老年人群颈椎骨关节炎的患病危险因素,为颈椎骨关节炎的社区预防干预提供依据.设计:横断面调查.单位:卫生部北京医院联合西安交通大学第二医院、河北医科大学中西医结合研究所、上海华东医院、南方医院、哈尔滨医科大学第二附属医院、四川大学华西医院共同完成.对象:调查于2005-07/08完成.采用分层多阶段整群抽样方法,选择西安、石家庄、上海、广州、哈尔滨市及成都6城市40岁及以上具有正式户口的常住居民6 218人,均自愿参加调查.其中男2 916人,女3 302人,年龄男性40～94岁,女性40～86岁.方法:对调查人群进行颈椎骨关节炎的流行病学问卷调查,对有临床症状者行X射线摄片.本次调查的基本抽样单位是居委会(城市)和村委会(农村).抽样方法以各城市为总体,分为城市和农村两层,第一阶段抽取区(县),第二阶段抽取街道(乡),第三阶段抽取居委会(村委会).颈椎骨关节炎诊断标准为颈椎骨关节炎临床症状阳性加X射线Kellgren&Lawrence分级2级及以上.问卷调查内容包括6个方面:包括一般情况、现病史、既往史、体格检查、X射线片检查情况及疾病诊断情况,共计94个问题141个变量指标.分析颈椎骨关节炎患病率的影响因素应用多因素非条件Logistic回归法,表示疾病与暴露因素之间联系强度的指标用比值比(OR),若OR＞1,说明疾病发生与暴露因素呈正关联;若OR＜1,说明疾病发生与暴露因素呈负关联.主要观察指标:各城市颈椎骨关节炎的患病率和OR.结果:纳入调查对象6 218人,全部进入结果分析,无脱落.①国内6城市40岁及以上人群颈椎骨关节炎总患病率为23.6%,各城市患病率相比差异有显著性意义(P＜0.01).②Logistic回归分析结果:年龄(OR=1.010～1.058)、使用蹲坑排便(OR=1.024～1.997)和高血压病史(OR=1.815～3.078)为大部分地区共同危险因素;北方地区的共同危险因素有日常爬楼梯或爬坡(OR=1.018～1.020);而喝色酒(OR=3.451,西安)、父亲骨关节炎史(OR=2.491,西安)、糖尿病史(OR=5.013,石家庄)、母亲骨关节炎史(OR=2.045,上海)、吸烟(OR=6.857,广州)、开始饮酒年龄(OR=3.044,广州)及专职体育运动(OR=9.020,哈尔滨)等危险因素分别在不同地区出现.结论:国内6地区颈椎骨关节炎发病具有共同的危险因素,不同地区主要危险因素又有一定差异,可为今后颈椎骨关节炎的防治提供参考数据,减少医疗资源浪费.
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东莞地区公众脑卒中防治知识水平的相关调查
背景:针对高血压、糖尿病、高脂血症等发病原因或危险因素及治疗知识在公众中进行健康教育,提高公众脑卒中防治知识水平,是降低脑卒中发病率有效的途径及经济的方法.目的:调查东莞地区公众对脑卒中防治知识的认知状况.设计:整群抽样与单纯随机抽样.单位:中山大学附属第五医院神经内科,中山大学附属东华医院神经内科.对象:于2001-03/06采取整群抽样与单纯随机抽样相结合的方法,对2001-03已居住于广东省东莞市城区及郊区的机关团体、企事业、各种经营形式工厂、东莞理工学院、各高级中学和郊区自然行政村,年龄满17周岁的常住居民及外来居民,随机抽取2 500名进行调查.方法:参照相关文献设计修改调查表,包括人口学资料、脑卒中的一般知识、预防知识、识别知识、处理知识及获取脑卒中防治知识途径.脑卒中防治知识每项计1～4.5分,总分为60分,获取脑卒中防治知识途径不计分.每次调查1个被选单位,每次发放调查表300～600份,有500份问卷随机向来东华医院健康体检的人员发放.主要观察指标:调查表回答正确率,每类脑卒中防治知识总分,分层亚组的每类知识总分,获取防治脑卒中知识途径.结果:回收完整有效调查表2 320份.①全表问题回答正确率平均为49.8%,以识别知识和处理知识较低;总分＜60%者占48.2%.②每类脑卒中防治知识水平男性均高于女性(P＜0.05),中老年组高于青年组(P＜0.05),各类公务员、自由职业者、工人、农民、学生依次递减(P＜0.05),学生与自由职业者相比差异显著(P＜0.01);高、中、低文化程度也依次递减(P＜0.05);有脑卒中史者高于未患者(P＜0.05).③以性别、年龄、职业及文化程度分层各亚组获取脑卒中防治知识的途径依次是阅读报刊杂志、收看广播电视、阅读科普手册、亲人朋友影响、医务人员宣教.结论:调查期间东莞地区公众脑卒中防治知识水平较低,尤其是识别知识和处理知识;应采取适当的措施进一步开展脑卒中防治知识教育.
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不同类型延长器在胫骨延长术治疗双小腿不等长及身材矮小症的效果比较
目的:观察不同类型延长器在胫骨上端截骨延长术中治疗双小腿不等长及身材矮小的效果,并分析各种延长器的优劣.方法:选择1998-02/2003-06清华大学玉泉医院骨科和北京骨外固定技术研究所及西安交通大学第二医院骨科收治的双小腿不等长患者4例和身材矮小患者27例为观察对象.对双下肢不等长患者采用Hoffman单臂外固定延长器;27例身材矮小患者中3例采用半环延长器延长,5例采用全环延长器延长,19例采用夏和桃内外结合系统延长器进行胫骨延长.①Hoffman单臂延长器:在截骨断端上、下交叉穿2组5 mm骨圆针,在小腿前内侧安装单臂延长器.②Ilizarov全环延长器及半环延长器:截骨近端穿2组2 mm克氏针,远端穿2组针,一组在距小腿(踝)关节上方10 cm处;另一组靠近距小腿(踝)关节,其中1根针应穿过腓骨.③夏和桃内外结合系统延长器:带锁髓内钉手术入路--微创截骨--安放髓内钉--安装动态同步延长器.术后第8天开始延长,速度0.5～1.0 mm/d,平均0.65 mm/d,分4～6次进行延长.术后2周酌情要求患者扶助行器下床部分负重行走锻炼以及器械上的功能运动,为新骨提供应力刺激.每隔15天拍X射线片1次,3次以后,每隔1个月拍片1次,观察延长情况及并发症的严重程度等指标,治疗时间8～15个月.解除外固定时临床和X射线标准为骨痂形态成熟、骨痂填塞完全、没有缺损的钙化、髓腔贯通及新形成骨强度能支持行走而无骨折危险.结果:随访时间3～8年,31例患者全部获得连续随访,随访率100%.①采用单臂延长器延长,皮肤瘫痕大,并发症严重,大延长幅度不超过4 cm.②半环形延长器延长超过4 cm将产生严重的足下垂.③Ilizarov全环延长器延长幅度可达10 cm,易发生足下垂.④夏和桃内外结合系统延长器延长幅度可超过10 cm,并发症较轻.结论:单臂延长器的延长效果差,不宜用于下肢延长.半环延长器、Ilizarov全环延长器在延长过程中易发生足下垂,不宜做大幅度延长.夏和桃内外结合系统延长器是具有跟键同步延长的全环延长器,稳定性好、延长操作简单,适宜做大幅度肢体延长.
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膝关节夜间痛患儿相关骨代谢指标及阿法D3的干预效应
背景:临床上常见3～15岁少儿不明原因的膝关节夜间痛,且反复发作.大多数称之为"生长痛".目的:分析少儿膝关节夜间痛的相关因素,观察阿法D3的干预效应.设计:病例-对照分析,自身前后对照分析.单位:上海复旦大学附属金山医院骨科.对象:选择1998-06/2002-08在上海复旦大学附属金山医院门诊治疗的反复发作的不明原因膝关节夜间痛患儿22例,为膝关节夜间痛组,年龄3～15岁.以同期创伤骨折愈合半年之后的患儿20例为对照组.方法:对膝关节夜间痛组患儿采用骨矿化剂阿法D3 0.25 μg口服,1次/d,连续1周,停药观察3周,4周为1个疗程.如仍有夜间痛或酸痛停止后又出现者,再继续1个疗程,直至夜间痛消失.测定常有膝关节夜间痛组与对照组患儿的骨钙素、血钙、磷、镁及碱性磷酸酶和骨密度,并观察膝关节夜间痛组采用阿法D3治疗前和治疗后1,3,6个月骨钙素的指标和夜间膝痛的变化.1个疗程结束后,复查血钙、磷、镁、碱性磷酸酶、骨钙素、降钙素、尿常规和膝关节X射线平片,6个月复查骨密度.主要观察指标:①膝关节夜间痛患儿治疗前后检测血钙、磷、镁、血碱性磷酸酶.②膝关节夜间痛患儿治疗前和治疗后1,3,6个月骨钙素水平,治疗前和治疗后6个月查骨密度;对照组在骨折愈合后6个月和1年时查上述指标.③阿法D3治疗的疗效.结果:42例全部进入结果分析.①膝关节夜间痛患儿治疗前后检测血钙、磷、镁、血碱性磷酸酶均正常.②对照组患儿骨折愈合后1年骨钙素明显低于骨折愈合后6个月[(7.06±0.74),(7.44±1.16)μg/L,P＜0.01];膝关节夜间痛组患儿治疗前为15.98μg/L,显著高于对照组,治疗后1,3,6个月分别为(12.12±2.2),(10.6±81.31),(7.60±0.95)μg/L,治疗前后比较差异显著(P＜0.05).③两组患儿骨密度比较差异无显著性意义(P＞0.05).④膝夜间酸痛夜间疼痛在采用阿法D3治疗后症状改善或消失,时间为9～83 d.结论:膝关节夜间痛少儿虽然够不上佝偻病的诊断标准,但仍然与骨的矿化不足有一定的相关性;临床上对于不明原因的少儿膝关节夜间痛可以骨钙素测定作为监测手段;运用骨矿化剂阿法D3治疗少儿膝关节夜间痛有明显疗效.
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从髓核成形术临床应用结果重新评价椎间盘内减压术98例的适应证
目的:选择应用椎间盘内减压术治疗腰腿痛患者的佳适应证.方法:实验于2001-03/2003-11在解放军总医院骨科完成.应用髓核成形术治疗98例腰腿痛住院患者,男68例,女30例,年龄16～46岁,平均34岁,病程3个月～5年,平均3.6年,其中腰痛伴有下肢及臀部放散痛72例,单纯腰痛26例.术后随访时间3～32个月,平均16个月.手术先进行椎间盘造影,然后行髓核成形术治疗.对比手术前后疼痛症状的变化进行疗效评定.优:症状基本消失;良:症状明显减轻,能恢复正常工作;无效:症状无任何改善;差:症状加重.结果:98例腰腿痛患者中,优良率为79%(77/98);站或坐时腰痛伴有下肢及臀部放散痛者优良率为85%(61/72);单纯下腰痛为62%(16/26);椎间盘突出类型无突出优良率为81%(17/21),中央型为53%(17/32),一侧突出为95%(43/45);椎间盘造影阳性者优良率为90%(71/79),阴性者优良率为21%(4/19).无效17例,症状复发2例,术后加重2例.结论:髓核成形术如能选择以神经根刺激为主要症状、较小的包容性椎间盘突出患者作为治疗对象将能获得更好的临床疗效.
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家庭康复干预对脑卒中患者日常生活活动及认知能力的影响
目的:观察社区家庭康复干预对脑卒中患者认知能力及日常生活活动能力的影响.方法:于2003/2005期间选择生活在郑州大学医院二院附近社区符合全国第四届脑血管病会议制定的脑卒中诊断标准的脑卒中患者45名,随机分为康复组25例和对照组20例.所有患者一般药物治疗相同,康复组进行社区家庭康复干预3个月.对患者瘫痪类型进行康复评估,制定相应康复治疗方案,采取运动功能训练、日常生活能力训练,同时进行心理康复和社会适应能力训练.运动功能训练包括患侧肢体各关节的被动运动、健患侧翻身练习、平衡功能训练(包括坐、站平衡训练)、体位转移(床-椅转移,坐-站转移)训练、步态训练(行走、上下楼梯)及腕踝关节背伸的牵张练习.日常生活活动能力训练包括进食、穿衣、个人卫生处理等.心理康复治疗和社会适应能力训练主要包括与患者建立良好的医患关系,帮助其增强信心、缓解负性情绪、指导和鼓励患者表达情感.干预频率2次/周.干预后运用简易智力状态检查评定患者认知能力,采用Barthel指数评定患者日常生活活动能力,由同一位医师在康复干预前后测评.结果:45例患者均进入结果分析.①康复干预前两组Barthel指数评分、简易智力状态检查量表评分差异无显著性意义(P＞0.05).康复干预后康复组Barthel指数评分、简易智力状态检查量表评分明显高于对照组,差异有显著性意义[(56.9±9.89),(49.8±9.87),t=2.413,P＜0.05];[(26.6±4.60),(22.9±6.70),t=2.105,P＜0.05].②病程小于6个月的康复组患者康复后Barthel指数明显高于病程6～12个月及病程大于12个月患者的Barthel指数,差异有显著意义[(67.6±8.90),(59.1±7.20),t=2.397,P＜0.05];[(67.6±8.90),(55.7±8.20),t=2.487,P＜0.05].结论:社区家庭康复能明显提高脑卒中患者的认知能力及日常生活活动能力,6个月内是脑卒中患者康复治疗的关键时期,及早康复有望使神经功能缺损减少到小程度.
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改良四条水平肌超常量后退术矫正先天性眼球震颤
目的:评价改良四条水平肌超常量后退术矫正先天性眼球震颤、斜视以及视力恢复.方法:实验于1999-01/2004-06在解放军第四军医大学唐都医院眼科完成.选取在院就诊的先天性眼球震颤患者26例,行悬吊缝线式四条水平肌超常量后退术,眼球震颤手术量每条水平肌肌肉包括缝线在内后退10～14 mm基础上,有代偿头位或斜视者,将其手术量计算在内,加减得出后手术量.术前术后所有患者详细行眼部、视功能、异常头位和眼震电图检查.随访6～24个月,平均随访14.6个月.结果:26例先天性眼球震颤患者全部纳入结果分析.术后眼球各方向运动不受限,术前22例有异常头位者,术后消失18例(82%),改善4例(18%),双眼视力提高2行以上者13例(50%),12例(46%)在正前方眼震基本消失,10例(39%)眼震明显减轻,4例(15%)眼震无变化.术前并发斜视16例,术后12例(75%)斜视矫正,无复视等并发症.患者满意度为92%.结论:悬挂缝线式四条水平肌超常量后退术能有效治疗先天性眼球震颤,消除或改善异常头位,矫正合并的斜视,并发症较少.
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头影测量技术在小颌畸形、颞下颌关节强直继发阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征评估中的应用
目的:分析小颌畸形、颞下颌关节强直继发阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者头影软硬组织的测量特征,为其诊疗方法的选择提供依据.方法:选择2003-05/2005-05在商丘市第三人民医院口腔颌面外科睡眠呼吸障碍诊疗中心就诊和住院的阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征男性患者12例,另外选择健康同龄男性18例作为对照组,均自愿参加观察.采用上海九院口腔科研发的计算机头影测量分析系统,对阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者和对照组头影软硬组织进行测量比较,并分析患者多导睡眠监测结果及头影测量结果的相关性.结果:30例观察对象全部进入结果分析,无脱落.①阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者的头影硬组织测量特征为:以下颌改变为显著的颅颌面硬组织结构向后上缩进和舌骨至下颌平面距离明显地增加.其头影软组织测量特征为:与对照组比较,小矢状咽径减小(P＜0.01);舌和软腭占口咽腔矢状面积比显著增加(P＜0.01).②睡眠呼吸暂停低通气指数与小矢状咽径呈显著负相关(P＜0.01);睡眠呼吸暂停低通气指数与(舌体+软腭)面积/口咽腔面积呈显著正相关(P＜0.01);低血氧饱和度与(舌体+软腭)面积/口咽腔面积呈显著正相关(P＜0.01).结论:舌和软腭占口咽腔矢状面积比不但能提示睡眠呼吸暂停低通气指数水平,也与睡眠时血氧饱和度低值呈明显负相关关系,说明扩展口咽通气道是治疗小颌畸形、颞下颌关节强直继发阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征和控制睡眠时血氧饱和度的关键措施.
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足球运动中单纯性膝关节后十字韧带断裂损伤非手术性康复疗效的跟踪分析
目的:报道1例足球训练比赛中发生单纯性膝关节后十字韧带断裂损伤病例非手术性康复过程和效果.方法:患者2001-08-27在一次足球训练比赛中进行倒地铲球动作时左膝胫骨结节部受到来自前方的撞击,撞击后膝关节变形,经X射线片,MRI检查及临床病理试验诊断为单纯性膝关节后十字韧带断裂损伤.运用负荷逐步增加非手术性5阶段康复方案进行治疗:①第1阶段(伤后1～5 d):伤者连续5 d使用拐杖和膝关节固定装置,膝关节不负重.在此期间使用冰敷,局部压迫,下肢抬高,休息.②第2阶段(伤后6～19 d):交替冷热敷,被动无痛全范围活动,直腿上抬,腘旁腱牵伸,蹲推练习,股四头肌练习,在不影响愈合的情况下西贝斯奥托托隆KT2(美国产)上进行的力量训练.③第3阶段(伤后20～25 d):着重功能活动,活动以半速进行,包括蹲推练习,腘旁腱牵伸,股四头肌练习,无负荷游泳动作和滑雪动作练习,奥托托隆上进行耐力训练等.④第4阶段(伤后26～29 d):继续加强股四头肌和腘旁腱的训练,增加功能训练.⑤第5阶段:从患者伤后第4周开始,允许患者参加球队训练,但要逐渐增加活动量,专注其体力维持.伤后38,77 d进行两次随访西贝斯奥托托隆KT2测试,测试其左右腿股四头肌的应力水平.结果:患者重新参加足球运动训练的时候(伤后38 d),他的损伤腿股四头肌力量已经增加到另一侧的102%,第1次测验(伤后11d)损伤膝关节和对侧膝力量的比率为0.51,两周之后比率增加到0.95.患者回队后参加训练比赛,取得了满意的效果,至今没有显著的膝关节症状.结论:用负荷逐步增加的非手术性康复治疗方案治疗单纯性膝关节后十字韧带断裂损伤,膝关节功能恢复满意,没有显著的膝关节症状.
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运动与营养疗法干预单纯性肥胖儿童的效果
目的:观察比较单纯运动、单纯营养及运动+营养3种方法干预单纯性肥胖儿童的效果.方法:选择2005-03/05盐城市4所小学1-5年级单纯性肥胖儿童131名,年龄8～12岁,单纯性肥胖标准以体质量超过WHO推荐的身高标准体质量值20%以上,随机分为4组,对照组31名、运动(干预)组33名、营养(干预)组32名、运动+营养(干预)组35名.实验前各组的基本情况无显著性差异.①各干预组分别进行12周的运动、营养、运动+营养的干预措施.运动处方内容:运动强度,每个儿童大氧消耗50%或大心率65%.运动频度,1 h/d,5 d/周.营养控制方案:确定减重速率,0.3～0.5 kg/周.3餐热量分配:营养组早餐25%,中餐50%,晚餐25%;运动+营养组早餐25%,中餐45%,晚餐30%.食物类别比例:脂肪25%～30%;蛋白质20%～25%;主食糖类(碳水化物)50%.对照组不加任何干预控制.②实验前后分别测定体质量、肺活量等及心电图、B超、心率、血压、血清葡萄糖、血清总胆固醇、血清三酰甘油、血清高密度脂蛋白胆固醇、血清低密度脂蛋白胆固醇.结果:131名肥胖儿童全部进入结果分析.①单纯运动与运动+营养调控能使肥胖儿童体质量减轻,改进身体组成成分,其中运动组体质量下降平均达3.1kg,运动+营养组平均下降2.2 kg.②运动组、运动+营养组儿童身体素质(肺活量、握力、坐位体前屈、仰卧起坐、立定跳远、台阶实验指数)较对照组与营养组有明显提高.③运动组、运动+营养组B超异常百分率比实验前明显减低;营养组实验后心电图和B超异常百分率均比实验前明显减低(P＜0.01).④运动能有效降低血清中的葡萄糖、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量,显著增加高密度脂蛋白胆固醇含量.结论:①运动与运动+营养组在调控肥胖儿童体质量和形态方面具有较好效果,其中运动+营养组效果更好.②肥胖儿童应采用综合运动处方,在传统的减去体质量、增加心肺功能的同时,要考虑到增强肥胖儿童的力量素质和整体活动能力,养成良好的体育锻炼习惯.
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严重脊柱侧弯Marfan综合征患者躯干平衡功能的重建
背景:Marfan综合征脊柱侧弯患者一般年龄较小,多处于生长发育阶段,侧弯畸形进展较快,相当一部分患者需要手术治疗.由于许多患者往往伴有严重的心肺功能障碍,这又给手术治疗带来很大的困难.目的:观察CD矫正法重建Marfan综合征患者脊柱功能效果.设计:患者自身前后对照观察.单位:上海交通大学医学院(原上海第二医科大学)附属仁济医院骨科.对象:选择1999-05/2003-07上海交通大学医学院(原上海第二医科大学)附属仁济医院骨科收治严重脊柱侧弯的Marfan综合征患者8例.单侧弯2例,双侧弯6例,Cobb角平均为88°,4例心肺功能轻度不全,2例心肺功能中度不全.方法:患者全麻下采取俯卧位,定位后取后路正中切口,骨膜下剥离椎旁肌显露棘突椎板直至横突根部,应用CD矫正法(如CD,CD-Horison,TSRH,USS等),在脊椎的多个节段置钩或钉.主要观察指标:患者术后Cobb角、身高、植骨融合和心肺功能变化的情况结果:随访12个月,8例患者均进入结果分析.8例患者的切口愈合良好,无一例发生感染.脊柱侧弯均得到了有效矫治,身高增加5～8 cm,患者术后心肺功能恢复满意,植骨均得以融合,校正后丢失的Cobb角度少于25°.结论:CD矫正法在矫正侧弯的同时可有效矫正合并有旋转畸形者,而且撑开力大,为多节段框架式固定,撑开张力较平均分布,不易发生脱钩,折棒等并发症.采用了选择性的多节段固定和去旋转力,三维纠正效果好,可满意重建躯干平衡、防止术后失偿、并发症少、融合率高、纠正丢失少、术后不需外固定、有利于患者早期康复.
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实验性屈光参差眼视力对立体视锐度的影响
目的:检测实验性近视和远视性屈光参差离焦眼视力,探讨其对立体视锐度的影响.方法:于2003-04/08选择青岛大学医学院附属医院学生及职工32人,年龄26～32岁.在眼前放置正负透镜诱导单纯近视和远视性屈光参差.范围+1.00D～+3.00D、-1.00D～-3.00D.运用双屏视力及随机点立体视检查系统,检测实验性近视和远视性屈光参差离焦眼视力,观察屈光参差大小和屈光参差离焦眼视力对立体视锐度的影响.结果:测试对象32人,均纳入结果分析,无缺失.①在1.00D、1.50D、2.00D和2.50D屈光参差度情况下,近视性屈光参差眼的视力比远视性屈光参差眼视力低,经统计学分析差异有显著性意义(P＜0.05);屈光参差绝对值在1.50～3.00D时,近视性屈光参差对立体视的影响大于远视性屈光参差,差异有显著性意义(P＜0.05).②诱导单纯近视和远视性屈光参差后在右眼视力相同的情况下,对立体视锐度进行比较,视力低于4.8时,立体视锐度差异有显著性意义(P＜0.05).结论:相同屈光参差度的近视性屈光参差对视力的影响大于远视性屈光参差;相同视力的实验性近视性屈光参差对立体视的影响大于远视.
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鸡尾酒疗法对缺血性脑卒中患者运动功能的影响
目的:观察鸡尾酒疗法对缺血性脑卒中患者运动功能的影响.方法:选择2004-01/2005-03在昆明医学院第一附属医院神经内科住院的颈内动脉系统急性缺血性卒中患者80例.①按住院时间顺序每3例分在1组的方法随机分为对照组39例,治疗组41例.对照组给予常规治疗(对症、抗血小板聚集、脱水降颅压、神经营养剂、防治并发症等治疗),治疗组在常规治疗基础上加鸡尾酒疗法(三七总皂苷、康复训练、电针及高压氧治疗).②分别于入组时及治疗3周后进行功能评估.日常生活活动能力评分,采用修订Barthel指数评分,评分越高,依赖程度越低;肢体功能缺失评分,采用欧洲卒中量表评分,总分100分,得分越高,说明神经功能受损越少.结果:对照组退出治疗2例,进入结果分析78例.①欧洲脑卒中量表评分结果:对照组和治疗组治疗后评分均明显高于治疗前(对照组:56.58±16.13,42.53±12.02,P=0.000;治疗组:70.72±18.07,44.17±14.63,P=0.000);治疗组治疗后评分显著高于对照组(P=0.000).②Barthel指数评分结果:对照组和治疗组治疗后评分均明显高于治疗前(对照组:58.37±14.66,48.37±13.37,P=0.000;治疗组:75.34±15.36,51.66±11.56,P=0.000);治疗组治疗后评分显著高于对照组(P=0.000).结论:鸡尾酒疗法可以促进缺血性卒中患者运动功能的改善.
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Office的快乐
常有人问我,在你无休止的工作中可有乐趣?也随手可拈朋友们的类似短信:早点离开办公室,精彩不止在工作!
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糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及氨基胍的作用
目的:观察糖尿病大鼠视网膜组织学变化、神经细胞凋亡现象以及氨基胍的治疗作用.方法:实验于2003-09/2004-06在青岛大学医学院附属医院眼科病理室进行.①取健康成年Wistar大鼠60只单纯随机分为正常对照组和糖尿病组各30只.糖尿病组30只大鼠一次性左下腹腔内注射60 mg/kg链脲佐菌素建立糖尿病模型,有24只大鼠模型建立成功并随机均分为糖尿病末治疗组和氨基胍治疗组(造模后氨基胍按1 g/L加入大鼠饮水中,给药量150 mg/(kg·d)).②于饲养1,3,6个月时,随机选取糖尿病未治疗组、氨基胍治疗组各4只和对照组大鼠10只处死,光镜下观察视网膜厚度和神经节细胞数目变化.以TUNEL法荧光显微镜下观察进行视网膜神经细胞凋亡的原位检测.结果:54只大鼠进入结果分析.①视网膜厚度:饲养1个月时3组差异不显著(P＞0.05),饲养3,6个月时,糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组视网膜变薄,但氨基胍治疗组好于糖尿病未治疗组(P＜0.001).②神经节细胞数目:饲养1个月时3组差异不显著(P＞0.05),饲养3,6个月时,糖尿病未治疗组和氨基胍治疗组细胞数目少,但氨基胍治疗组好于糖尿病未治疗组[3个月:(273.88±1.28),(261.83±1.34)个/mm2;6个月:(231.95±1.36),(207.40±1.57)个/mm2,P＜0.001].③TUNEL阳性细胞数:饲养1个月时3组未发现有凋亡细胞的阳性表达.饲养3,6个月时,糖尿病未治疔组和氨基胍治疗组阳性细胞数增加,但氨基胍治疗组少于糖尿病未治疗组[3个月:(60.13±0.40),(67.95±0.50)个/mm2;6个月:(105.15±0.43),(125.08±0.27)个/mm2;P＜0.001].结论:早期糖尿病大鼠视网膜出现光镜组织学改变,细胞凋亡是糖尿病大鼠视网膜病变神经细胞丧失的主要方式,氨基胍可抑制神经细胞的凋亡.
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2型糖尿病大鼠大网膜和皮下脂肪组织抵抗素基因的表达
目的:观察实验性2型糖尿病大鼠大网膜与皮下脂肪组织抵抗素基因的表达,探讨抵抗素与胰岛素抵抗的关系.方法:实验于2003-09/2004-06在郑州大学第一附属医院内分泌实验室完成.选择雌性Wistar大鼠30只,随机抽签法分为普通饲料组(8只)和高脂饲料组(22只),高脂饲料组大鼠采用0.1 mol/L链脲佐菌素尾静脉注射加高脂喂养的方法建立2型糖尿病模型15只,随机抽取8只作为糖尿病组,普通饲料组为正常对照组.检测两组大鼠的空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感性指数、血清胆固醇及三酰甘油.采用反转录-聚合酶链反应检测两组大鼠大网膜和皮下脂肪组织中抵抗素基因的表达.结果:纳入动物16只,均进入结果分析.①糖尿病组大鼠胰岛素敏感性指数与正常对照组大鼠相比明显降低(分别为-4.89±0.20,-2 63±0.42,P＜0.01),空腹血糖、胰岛素、三酰甘油和胆固醇明显升高[空腹血糖分别为(12.89±1.18),(4.86±0.68)mmol/L;胰岛素分别为(10.51±1.93),(3.07±1.15)μU/L;三酰甘油分别为(2.63±0.71),(1.13±0.17)mmol/L;胆固醇分别为(1.73±0.15),(1.25±0.17)mmol/L,P＜0.01].②以A值比表示,糖尿病组大网膜脂肪组织的抵抗素基因表达与正常对照组皮下和大网膜脂肪组织、糖尿病组皮下脂肪组织比较明显升高(分别为0.27±0.03,0.15±0.02,0.15±0.03,0.17±0.02,P＜0.01),而后三者间相比差异无显著性(P＞0.01).结论:抵抗素基因在2型糖尿病大鼠大网膜脂肪组织中表达升高,可能是腹型肥胖更易导致胰岛素抵抗的重要原因之一.
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冬泳和游泳运动对糖尿病大鼠病情影响的实验对比
目的:探讨冬泳运动和游泳运动对糖尿病病情影响的差别,为糖尿病患者选择科学的健身手段提供理论依据.方法:实验于2003-03/06在华北煤炭医学院动物实验中心完成.选用雄性SD大鼠48只,随机分为正常对照组、糖尿病非运动组、糖尿病冬泳组和糖尿病游泳组,每组12只.采用腹腔注射链脲佐菌素40 mg/kg的剂量制备糖尿病大鼠模型,第4天开始,对糖尿病冬泳组和糖尿病游泳组动物进行适应性运动训练,每周训练5天,水温(34±2)℃,水深50 cm.糖尿病游泳组大鼠第1,2周每天游泳40 min,从第3周开始每天游泳60 min.糖尿病冬泳组起始运动时水温及单次运动时间与糖尿病游泳组相同,从第2天开始水温每天降低2℃,运动时间每天缩短3 min,持续2周.从第3周起保持水温在(6±2)℃,时间为7 min的水平,训练6周.正常对照组和糖尿病非运动组大鼠为正常笼内生活,不进行任何专门的训练.各组动物饲养条件完全相同,每周对所有实验动物检测体质量,并测量日摄水量,记录所得数据.后一次运动训练结束24 h后,所有实验动物禁食过夜,将除正常对照组以外的各组大鼠麻醉后断颈处死取血,离心、制备血清,测量血糖、胰岛素、C肽值.结果:48只大鼠全部进入结果分析.①糖尿病非运动组与正常对照组相比,大鼠日体质量增加量降低57.20%;糖尿病冬泳组、糖尿病游泳组与糖尿病非运动组比较,大鼠的日体质量增加量是65.42%和80.37%.②糖尿病非运动组大鼠的日摄水量比正常对照组增加196.32%;经过训练后,糖尿病冬泳组和糖尿病游泳组大鼠的日摄水量比糖尿病非运动组分别降低29.76%和37.13%.③与正常对照组相比,糖尿病非运动组大鼠血糖水平显著增加274.82%,胰岛素的浓度和血清C肽的浓度显著降低49.97%和37.50%,三项指标差异均非常显著,出现了典型的糖尿病症状.训练以后,与糖尿病非运动组大鼠相比,糖尿病冬泳组和糖尿病游泳组大鼠的血糖水平分别降低19.45%和22.67%,血清C肽的浓度升高15.00%和30.00%.胰岛素水平在糖尿病非运动组和糖尿病冬泳组实验动物中未出现显著性变化(P＞0.05),但在糖尿病非运动组和糖尿病游泳组间存在显著性差异.④糖尿病冬泳组与糖尿病游泳组比较,除日摄水量以外,其他指标均有显著性差异.提示游泳运动在改善糖尿病大鼠的病情上效果优于冬泳运动.结论:通过对糖尿病大鼠进行冬泳和游泳训练,糖尿病冬泳组和糖尿病游泳组大鼠的病情均得到了有效控制,游泳运动在改善糖尿病大鼠的病情上效果优于冬泳运动.
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2型糖尿病大鼠肝脏骨形成蛋白9基因表达的变化及意义
目的:观察2型糖尿病大鼠肝细胞中糖、脂代谢调节因子骨形成蛋白9基因转录及表达的变化.方法:实验于2004年在解放军第三军医大学附属新桥医院中心实验室进行.取20只Wistar大鼠单纯随机分为模型组(n=15)与正常对照组(n=5)2组,模型组又按处死时间分为5,10,20 d 3个时间点,每个时间点5只.①模型组大鼠以高热量饲料喂养4周后,以30mg/kg剂量左下腹腹腔注射链脲佐菌素,继续饲以高热量饲料4周制备2型糖尿病模型,以随机血糖＞11.1 mmol/L作为糖尿病模型成功的标志;正常对照组则腹腔注射相同剂量的生理盐水,饲以普通饲料.②模型组于相应时间点处死,正常对照组与20 d处死组同时处死,取肝组织,以反转录-聚合酶链反应及Western-blot技术对骨形成蛋白基因转录及蛋白表达水平进行了检测与分析.结果:20只大鼠全部进入结果分析.①反转录-聚合酶链反应产物的凝胶扫描分析定量结果显示模型组中5,10,20 d处死大鼠肝骨形成蛋白9基因转录水平均低于正常对照组(0.767±0.004,0.445±0.012,0.426±0.007,0.909±0.006,t=22.016,45.417,68.364,P＜0.05).②Western-blot结果显示正常组提取的蛋白在Mr13 000处可见一条清晰的骨形成蛋白9特异性杂交带,而在5,10,20 d处死大鼠肝中骨形成蛋白9表达明显减弱或几乎未见表达.结论:2型糖尿病大鼠体内骨形成蛋白9基因转录及蛋白表达水平较正常均显著降低,这一变化可能与糖尿病的发生、发展有着紧密的联系.
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阿伐他汀调节大鼠脊髓损伤后白细胞介素1β及半胱氨酸蛋白酶3基因的表达
目的:观察阿伐他汀对脊髓损伤后SD大鼠白细胞介素1β及半胱氨酸蛋白酶3基因表达的影响.方法:实验于2005-05/09在华中科技大学同济医学院附属同济医院矫形外科实验室完成.选择健康成年雌性SD大鼠78只,随机数字表法分为假手术组6只.阿伐他汀治疗组36只和生理盐水对照组36只,后两组每组又分损伤后1,4,12 h,1,3,7 d 6个时相点,每个时相点6只.阿伐他汀治疗组于损伤前7 d开始用阿伐他汀加生理盐水经口给药(5 mg/kg,1次/d)直至处死,生理盐水对照组用相同体积的生理盐水代替.采用Allen打击法造成大鼠脊髓损伤,于术后不同时相点取伤段脊髓组织,用反转录-聚合酶链反应分析脊髓受损部位白细胞介素1β及半胱氨酸蛋白酶3 mRNA表达.结果:纳入动物78只,均进入结果分析.①阿伐他汀治疗组大鼠脊髓损伤后4 h白细胞介素1β mRNA表达(A)低于生理盐水对照组(分别为0.480±0.100,2.610±0.330,P＜0.01).②阿伐他汀治疗组大鼠脊髓损伤后1 d半胱氨酸蛋白酶3 mRNA表达(A)低于生理盐水对照组(分别为0.589±0.056,0.676±0.072,P＜0.05).结论:阿伐他汀能降低大鼠脊髓损伤后炎性细胞因子白细胞介素1β及半胱氨酸蛋白酶3的基因表达.
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神经丝蛋白在猪胸腰段脊髓火器贯通伤后的早期表达
目的:建立家猪胸腰段脊髓火器贯通伤模型和改良Allen's打击伤后全瘫模型,观察伤后神经丝蛋白的早期表达.方法:实验于2005-05/08在解放军第一七五医院实验室完成.取健康雄性家猪20只,单纯随机分为3组:①火器伤组(n=9):在全麻状态下制作胸腰段(L1～L2)脊髓火器伤模型,分为伤后1,3,6 h 3个时间处死(n=3).②打击伤组(n=9):L1节段脊髓行改良Allen's打击,致伤力为500 g·cm,处死时间同前.③空白对照组(n=2):只麻醉,不造模,伤后6 h处死.各组在伤后相应时间点取脊髓标本(火器伤组取近伤段,打击伤组取伤点),进行神经丝蛋白的免疫组化染色,观察其阳性表达的吸光度(A)值;在伤后6 h火器伤组和打击伤组分别在脊髓伤点、近伤段(距伤点1～3 cm脊髓)、中伤段(距伤点3～7 cm脊髓)及远伤段(距伤点近头侧10～12 cm处的胸髓)取材,观察神经丝蛋白的A值.结果:经补充20只猪进入结果分析.①空白对照组神经丝蛋白的A值为91.1±3.01,打击伤组脊髓损伤后1,3,6 h神经丝蛋白的A值均高于火器伤组(45.7±2.59,39.5±2.48,34.6±4.06;31.8±2.66,27.4±1.99,20.8±1.69),且两组神经丝蛋白的表达随着时间延长而下调(P＜0.001).②伤后6 h打击伤组仅在伤点和近伤段神经丝蛋白的A值低于空白对照组(P＜0.05),而火器伤组各部位神经丝蛋白的A值低于空白对照组(P＜0.05).结论:和脊髓打击伤相似,脊髓火器伤后神经细胞的破坏与修复并存,有一定的时空性,且与损伤程度有关.受伤后1 h即可发现神经元细胞的破坏、崩解,但脊髓火器伤的波及范围较打击伤更为广泛.
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坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠脊髓背角内5-羟色胺4-7受体亚型mRNAs的表达变化
目的:观察坐骨神经分支选择性损伤模型大鼠脊髓背角内5-羟色胺4-7受体亚型mRNAs的表达变化.方法:实验于2004-10/2005-06在第四军医大学解剖学教研室进行.①取SD大鼠27只,随机分为正常对照组3只;手术组24只.②手术组大鼠在戍巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔麻醉下,切开左侧后肢皮肤暴露并钝性分离腓肠肌两头,暴露坐骨神经,在邻近坐骨神经分叉处结扎胫神经和腓总神经,于结扎远端0.5 cm处切断神经,建立坐骨神经分支选择性损伤大鼠模型,全过程中注意勿伤及腓肠神经;右侧为假手术对照,只暴露不结扎切断坐骨神经,其余过程同手术侧.③分别在术后1,2,3,4,7,14,21,28 d,取L3～L6节段脊髓背角,采用反转录-聚合酶链式反应技术检测脊髓背角内5-羟色胺4-7受体亚型mRNAs的表达变化.结果:27只大鼠进入结果分析.①正常大鼠脊髓背角检测到5-羟色胺4、5-羟色胺5A、5-羟色胺7受体亚型mRNAs的表达,但未检测到5-羟色胺5B、5-羟色胺6受体亚型mRNAs的表达.②手术组手术侧检测到5-羟色胺4、5-羟色胺5A和5-羟色胺7受体亚型mRNAs的表达上调.其中,5-羟色胺4受体亚型mRNA的表达在术后4 d明显升高,21 d达高峰后下降,28 d趋于正常.5-羟色胺5A受体亚型mRNA的表达在术后3 d开始升高,持续升高至28 d.5-羟色胺7受体亚型mRNA的表达变化同5-羟色胺5A受体亚型.假手术侧的脊髓背角,各受体亚型mRNAs的表达未出现明显变化.在脊髓背角未检测到5-羟色胺5B和5-羟色胺6受体亚型mRNAs的表达.结论:5-羟色胺受体亚型mRNA在坐骨神经分支选择性损伤模型脊髓背角中的表达具有不同的时程变化特点,提示它们在坐骨神经分支选择性损伤所致的神经病理性痛中发挥不同作用.
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大鼠脊髓损伤后肾上腺髓质素的表达及重组人红细胞生成素的干预作用
目的:观察肾上腺髓质素在大鼠脊髓损伤组织中的表达,并分析重组人红细胞生成素的干预作用.方法:实验于2005-06/10在协和医院骨科中心实验室完成.选择70 d健康SD大鼠54只,随机数字法分为假手术组、脊髓损伤模型组、重组人红细胞生成素组3组.采用Allen's WD法-自制圆柱状金属棒沿细玻璃导管垂直自由落下,制成大鼠急性脊髓损伤动物模型,金属棒重量8.5 g,高度5 cm,损伤能量8.5×5(g·cm).重组人红细胞生成素组损伤后1,3,5,7,9 d分别给予600U/kg重组人红细胞生成素尾静脉注射.脊髓损伤模型组损伤后相同时间点给予等量的生理盐水.假手术组只切除椎板暴露脊髓.损伤动物模型以摆尾反射,双下肢对称性抽搐为成功标志.分别在术后3,6和11d采用改良Tarlov评分并改良Rivlin与Tator斜板法评分进行运动功能评定,每个时间点6只.苏木精-伊红染色观察脊髓损伤情况.免疫组化染色观察肾上腺髓质素的表达.结果:54只大鼠均进入结果分析.①各组大鼠脊髓损伤情况:假手术组各时间点取材无明显异常.脊髓损伤模型组伤后3 d,灰质内出现大量红细胞,神经元细胞肿胀呈圆形,大量核固缩、核碎裂,灰白质交界消失,灰质内空洞形成;伤后6 d,红细胞融合成团,灰白质交界较清楚,残存神经元明显减少,轻微肿胀,仍见少量中性粒细胞,11d灰白质交界清楚,残存神经元形态基本正常.重组人红细胞生成素组各时间点病理变化明显轻于脊髓损伤模型组.②肾上腺髓质素的表达:肾上腺髓质素表达主要位于神经元中,假手术组各时间点肾上腺髓质素低表达,各时间点灰度值差异无显著性意义;脊髓损伤模型组、重组人红细胞生成素组神经元数量较假手术组减少,肾上腺髓质素表达增强,重组人红细胞生成素组强.伤后6,11d均恢复到正常表达.脊髓损伤模型组、重组人红细胞生成素组3 d的灰度值均高于假手术组,重组人红细胞生成素组灰度值高于脊髓损伤模型组,差异均有非常显著性意义(P＜0.01).③改良Tarlov评分结果:脊髓损伤模型组及重组人红细胞生成素组3,6,11d的改良Tarlov评分均显著低于假手术组相同时间点评分(P＜0.01);重组人红细胞生成素组3,6,11d改良Tarlov评分均高于脊髓损伤模型组相同时间点的评分(P＜0.05).④改良Rivlin与Tator法评分结果:脊髓损伤模型组、重组人红细胞生成素组3,6,11d改良Rivlin与Tator法评分均显著低于假手术组相同时间点评分,差异有非常显著性意义(P＜0.01);重组人红细胞生成素组3,6,11d改良Rivlin与Tator法评分均高于脊髓损伤模型组相同时间点的评分,差异有非常显著性意义(P＜0.01)结论:急性脊髓损伤后肾上腺髓质素表达代偿性增高,肾上腺髓质素参与了脊髓损伤的发生发展过程并在其中起着抗氧化作用,重组人红细胞生成素能够减轻脊髓的继发性损伤,其治疗作用的机制之一可能是通过促进肾上腺髓质素表达增高而实现的.
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脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白表达的变化
目的:观察大鼠脊髓损伤后运动功能恢复过程中酪氨酸硝基化蛋白的表达变化情况.方法:实验于2004-07/2005-09在解放军第二军医大学神经生物实验室完成.选择SD雄性大鼠44只,采用随机数字表法分成3组:正常对照组8只,假手术组12只,脊髓损伤组24只.改良Allen法致大鼠脊髓中等程度损伤.①进行改良Tarlov评分,分为0～6级,级别越高下肢运动功能越佳.②进行改良Rivlin斜板实验,将大鼠身体轴线与斜板纵轴垂直放置,斜板每次升高5°,以大鼠能够停留5 s的大角度为其功能值.③免疫荧光染色:术后分别于1,3,7,14 d取假手术组(每次2只)和脊髓损伤组(每次5只)大鼠损伤区脊髓进行免疫荧光染色测定酪氨酸硝基化蛋白的表达.④Western blot印迹:假手术组和脊髓损伤1 d组分别取4只大鼠损伤区脊髓进行Western blot印迹进一步验证.结果:纳入动物44只,均进入结果分析.①Tarlov评分比较:正常对照组为6级,假手术组伤后1,3,7,14 d分别为5.2,5.4,5.8,6.0级,与正常对照组相比差异无显著性(P＞0.05);脊髓损伤组伤后1,3 d降至低点(1.4,2.0级),第7天时明显上升(3.1级),至伤后14 d开始缓慢上升(3.5级),但仍未达到正常水平.②Rivlin斜板实验比较:假手术组伤后1,3,7,14 d爬坡角度分别为73.5°,73.8°,74.4°,75.8°,差异无显著性(P＞0.05),每一时相点与正常对照组比较差异无显著性(P＞0.05);脊髓损伤组损伤后即刻出现明显障碍,爬坡角度减小(伤后1,3,7,14 d分别为35.4°,36.2°,38.4°,41.4°),与假手术组各时相点比较差异显著(P＜0.01),随时间延续均有不同程度恢复,14 d功能恢复较损伤后1 d有明显提高(P＜0.01).③免疫荧光染色:显示硝基化酪氨酸蛋白位于脊髓前角运动神经元,胶质细胞以及脊髓中央管的室管膜细胞中.正常脊髓中无酪氨酸硝基化蛋白阳性细胞.脊髓损伤组中酪氨酸硝基化蛋白呈阳性反应的脊髓细胞随着脊髓损伤后时程的延长而逐渐减少.在脊髓损伤后1,3 d时高,脊髓损伤后7 d时明显减少,14 d后降至更低,但仍有少量表达.脊髓损伤各组与相应时相点的假手术组相比差异显著(P＜0.05).④Western blot印迹:假手术组脊髓组织中酪氨酸硝基化蛋白的表达极低,而脊髓损伤1 d组酪氨酸硝基化蛋白表达量很高,与免疫荧光染色的结果相一致.结论:脊髓损伤导致运动功能障碍,可能与脊髓支配运动相关的神经细胞蛋白质的酪氨酸残基发生硝基化有关.
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氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞损伤的作用
背景:氯胺酮是临床常用的静脉全麻药,静脉或硬脊膜外腔用药都有镇痛作用,它是N-甲基-D-天冬氨酸受体非竞争性拮抗剂,可拮抗兴奋性氨基酸的毒性作用.目的:观察氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸受体过度激活诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞凋亡的影响,探讨其可能的作用机制.设计:随机对照观察.单位:郧阳医学院附属太和医院麻醉科.材料:实验于2003-09/2005-01在郧阳医学院基础医学研究所细胞生物学实验室完成.由武汉大学动物实验中心提供新生两三天Wistar大鼠.方法:取Wistar大鼠T11～L6脊髓背角星形胶质细胞原代纯化培养.胶质纤维酸性蛋白鉴定星形胶质细胞纯度达98%后用于实验.将培养细胞24孔板随机分为6组(每组9份):①对照组加Hanks液50μL.②N-甲基-D-天冬氨酸组加药浓度为100μmol/L.③氯胺酮组加药浓度为1 mmol/L.④100μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+0.1 mmol/L氯胺酮组.⑤100μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+0.5 mmol/L氯胺酮组.⑥100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+1mmol/L氯胺酮组.1 mmol/L氯胺酮为临床镇痛剂量.培养24 h后检测超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量,免疫细胞化学观察Bcl-2蛋白和形态学变化,流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率.主要观察指标:①Bcl-2蛋白免疫组织化学苏木精-伊红复染细胞着色及形态学变化.②流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率.③丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性变化.结果:①Bcl-2平均吸光度值(A)作为半定量测量Bcl-2蛋白表达水平:100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸组低于对照组,差异显著[分别为0.054±0.021,0.108±0.039,P＜0.01],100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+1 mmol/L氯胺酮组高于100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸组,差异显著[分别为0.148±0.045,0.054±0.021,P＜0.01].②流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率:100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸组高于对照组,差异显著[分别为(25.26±6.13)%,(5.66±2.24)%,P＜0.01],100μmol/LN-甲基-D-天冬氨酸+1 mmol/L氯胺酮组低于100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸组,差异显著[分别为(24.41±4.82)%,(25.26±6.13)%,P＜0.01].③丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性变化:100 μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸使星形胶质细胞内丙二醛含量显著升高,而超氧化物歧化酶活性明显降低;1 mmol/L氯胺酮明显降低丙二醛含量,显著增强超氧化物歧化酶活性,该效应在临床镇痛剂量以内有明显量效关系,与N-甲基-D-天冬氨酸组相比差异显著(P＜0.01).1 mmol/L氯胺酮组与对照组相比、100μmol/L N-甲基-D-天冬氨酸+0.1 mmol/L氯胺酮组与N-甲基-D-天冬氨酸组相比差异均无显著性.结论:N-甲基-D-天冬氨酸受体过度激活可诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞大量凋亡,适量氯胺酮显著抑制细胞凋亡,其机制可能增强星形胶质细胞Bcl-2蛋白表达,同时抑制自由基的产生和增强超氧化物歧化酶活性.
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大黄素干预鹌鹑脂肪肝病变的效果
目的:观察大黄素对鹌鹑脂肪肝模型肝系数、肝脏病理形态、血脂水平的影响,分析其量效关系,并与降脂药吉非罗齐和抗氧化剂维生素E作用效果进行比较.方法:实验于2005-03/09在怀化医学高等专科学校机能实验中心完成.①选用日本种雄性鹌鹑70只,20 d龄.鹌鹑在普通饲料喂养1周后用随机抽签法分为7组,每组10只:正常对照组:饲喂普通饲料.高脂饲料组:饲喂高脂饲料(100 g普通饲料中加入猪油15 g,蛋黄5 g,胆固醇1 g);20,40,80 mg/kg大黄素组:分别饲喂高脂饲料+大黄素20,40,80 mg/kg(洪江市光华生物制品有限公司提供,粉剂,批号041226);吉非罗齐组:饲喂高脂饲料+吉非罗齐20 mg/kg(湖南康普制药有限公司生产,批号040102);维生素E组:饲喂高脂饲料+维生素E 5 mg/kg(江西天海药业股份有限公司生产,批号040627).各组均以灌胃法喂药,1次/d,连续8周.②给药结束后,采用CHO-PAP双试剂法检测血清总胆固醇水平,采用GPO-PAP双试剂法检测三酰甘油水平,采用PTA-Mg2+沉淀法检测高密度脂蛋白胆固醇水平.将鹌鹑处死,称肝质量和体质量,计算肝系数(肝质量/体质量).肉眼观察肝脏的外观形态变化.经苏木精-伊红染色后,采用德国产莱卡光学摄像显微镜(×640)观察肝脏病理形态学变化.③计量资料差异比较采用t检验.结果:鹌鹑70只均进入结果分析.①大体观察:正常对照组鹌鹑肝脏外观正常.高脂饲料组鹌鹑肝脏明显肿大,呈脂肪肝表现.各用药组外观接近正常.②肝脏病理形态:正常对照组肝脏形态正常.高脂饲料组整个肝小叶的肝细胞内出现脂肪空泡,肝细胞索排列紊乱.各用药组肝脂肪病变程度轻于高脂饲料组.80 mg/kg大黄素组作用佳.③肝系数:高脂饲料组明显高于正常对照组,20,40,80 mg/kg大黄素组,吉非罗齐组,维生素E组(2.34±0.30,1.73±0.34,2.06±0.62,1.73±0.15,1.55±0.48,1.73±0.34,1.83±0.11,P＜0.05),且随着大黄素剂量增高,肝系数逐渐降低.④血脂水平:高脂饲料组鹌鹑血清三酰甘油和总胆固醇水平明显高于其他6组(P＜0.05),高密度脂蛋白胆固醇/总胆固醇明显低于其他6组(P＜0.05),随着大黄素剂量增高,三酰甘油和总胆固醇水平逐渐降低,高密度脂蛋白胆固醇/总胆固醇逐渐升高.结论:大黄素具有抑制肝脂肪病变、改善血脂的作用,该作用有剂量依赖性,且与吉非罗齐和维生素E作用效果相近.
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盐酸吡格列酮对大鼠高脂饮食性脂肪肝的预防和治疗作用
目的:观察吡格列酮对大鼠高脂饮食性脂肪肝的预防和治疗作用,并对其预防和治疗的效果进行比较.方法:实验于2005-01/07在河南省实验动物中心和河南省肿瘤病理重点实验室进行.取36只SD大鼠单纯随机分为2个系列6组:①预防系列分为10周处死正常组(n=6)、10周处死模型组(n=6)和吡格列酮预防组(n=7)3个组,10周处死正常组给予标准饲料,其他2组给予高脂饮食(标准饲料的基础上加13%的猪油、2%的胆固醇),饲养3周时吡格列酮预防组给予盐酸吡格列酮(杭州中美华东制药有限公司生产)20 mg/(kg·d)灌胃,其他2组等量蒸馏水灌胃,饲养10周均处死.②治疗系列分为17周处死正常组(n=5)、17周处死模型组(n=5)和吡格列酮治疗组(n=7)3个组,17周处死正常组给予标准饲料,其他2组给予高脂饮食,饲养10周时吡格列酮治疗组给予盐酸吡格列酮20 mg/(kg·d)灌胃,其他2组等量蒸馏水灌胃,饲养17周均处死.观测各组动物终末体质量、血清转氨酶、血脂、血糖、胰岛素、肝内脂质含量及病理组织学改变.结果:32只大鼠进入结果分析.①预防系列组结果:吡格列酮预防组肝指数(肝质量/体质量)、血清和肝脏三酰甘油、HOMA胰岛素抵抗指数和肝脂变程度均显著低于10周处死模型组(P＜0.01或P＜0.05),与10周处死正常组比较差异不显著(P＞0.05).三组之间血清及肝内胆固醇浓度比较差异不显著(P＞0.05).②治疗系列组结果:吡格列酮治疗组肝指数、血清转氨酶、胰岛素、三酰甘油、肝脏三酰甘油、HOMA胰岛素抵抗指数和肝脂变程度均明显低于17周处死模型组(P＜0.01或0.05),但与17周处死正常组比较仍有显著差异(P＜0.01或P＜0.05).吡格列酮治疗组和17周处死模型组血清及肝内总胆固醇浓度高于17周处死正常组(P＜0.01),但前2组间比较差异不显著(P＞0.05).结论:吡格列酮通过降脂和改善胰岛素敏感性,具有预防和治疗大鼠高脂饮食性脂肪肝的作用,但早期预防效果更佳.
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过氧化体增殖物激活型受体γ对肥厚心肌炎症反应的调控
背景:过氧化体增殖物激活型受体γ可以通过抑制白细胞介素6、环氧合酶、内皮素1、一氧化氮合酶、基质金属蛋白酶9、明胶酶、黏附分子等的表达,抑制心肌肥厚中炎性反应.目的:观察压力负荷所致心肌肥厚过程中,过氧化体增殖物激活型受体γ配体-罗格列酮钠对肥厚心肌中炎性因子的影响.设计:随机对照动物实验.单位:解放军第三军医大学新桥医院心血管外科.材料:纯种S.P.F.级雄性SD大鼠50只,体质量(220±22)g.方法:实验于2004-08/2005-10在解放军第三军医大学野战外科研究所完成.SD大鼠50只随机分为对照组、假手术-生理盐水组、假手术-罗格列酮组、心肌肥厚-生理盐水组、心肌肥厚-罗格列酮组,各10只.采用腹主动脉缩窄法复制压力超负荷大鼠心肌肥厚模型,罗格列酮组:于术后4周用罗格列酮钠生理盐水溶液4 mg/(kg·d)腹腔注射1周;生理盐水组:于术后4周用生理盐水腹腔注射1周[1 mL/(kg·d)].术后5周测定心肌肥厚指数及血液动力学指标;放免法检测左心室肌肿瘤坏死因子α、血小板活化因子含量,以及髓过氧化物酶含量;逆转录聚合酶链反应法检测心肌中过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA的表达;EMSA法检测核因子κB活性.主要观察指标:动物模型大鼠血流动力学和心室重塑指标,心肌炎性指标检测.结果:实验动物50只,对照组中1只在饲养3周后因撕咬外伤造成死亡,49只进入结果分析.①在主动脉缩窄术后心肌肥厚-罗格列酮组肥厚心肌中瘤坏死因子α、血小板活化因子、髓过氧化物酶的含量比心肌肥厚-生理盐水组显著降低(P＜0.01～0.05),但仍高于对照组水平(P＜0.01).②心肌肥厚-罗格列酮组、心肌肥厚-生理盐水组心肌组织中过氧化体增殖物激活型受体γ mRNA表达均明显高于对照组(P＜0.01),且心肌肥厚-罗格列酮组高于心肌肥厚-生理盐水组(P＜0.01).③心肌肥厚-生理盐水组、心肌肥厚-罗格列酮组心肌细胞核因子κB的DNA结合活性明显高于对照组(P＜0.01),且心肌肥厚-罗格列酮组明显低于心肌肥厚-生理盐水组(P＜0.01).结论:压力负荷增加引起心肌肥厚,肥厚心肌组织中核因子-κB激活明显增强,肿瘤坏死因子α、PAF、髓过氧化物酶表达升高,这一炎症反应能被过氧化体增殖物激活型受体γ人工合成配体罗格列酮钠所抑制.
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老年原发性高血压患者颈动脉内中膜增厚与C-反应蛋白水平的关系
目的:检测老年原发性高血压患者血清中C-反应蛋白水平及颈动脉内中膜厚度的变化,分析老年高血压患者颈动脉粥样硬化与C-反应蛋白水平的关系.方法:选择2004-03/2005-08在山东泰安市中心医院门诊就诊或住院的老年原发性高血压患者85例为观察对象,其中高血压1,2,3级分别为35,30,20例;选择同期健康老年体检者45例为对照组.用免疫浊度法测定C-反应蛋白水平,应用B型超声检测颈动脉内膜中层厚度及粥样斑块,分析C-反应蛋白水平变化与高血压患者收缩压及舒张压的关系,C-反应蛋白水平与颈动脉内膜中层厚度的关系.结果:130例受试者全部进入结果分析.①高血压1,2,3级组颈动脉内中膜厚度均大于对照组[(0.67±0.19),(0.86±0.24),(0.98±0 18),(0.59±0.13)mm,P＜0.01],高血压级别越高,颈动脉内中膜厚度越大(P＜0.05).②高血压1,2,3级组C-反应蛋白水平均高于对照组[(7.48±1.35),(8.45±1.41),(10.59±1.95),(4.57±1.02)mg/L,P＜0.01],高血压级别越高,颈动脉内中膜厚度越大(P＜0.05).③颈动脉内中膜厚度为0.8～1.0 mm和＞1.0 mm者C-反应蛋白水平高于＜0.8 mm者[(8.15±1.58),(10.63±2.15),(5.67±1.65)mg/L,P＜0.05].④高血压组中血清C-反应蛋白水平高于对照组,C-反应蛋白水平随收缩压、舒张压水平的增高而增加,高血压3级高于1,2级(P＜0.05).结论:①老年原发性高血压患者血清中C-反应蛋白水平增高与颈动脉内中膜厚度关系密切,随着颈动脉内中膜增厚,C-反应蛋白亦增高.②C-反应蛋白水平随着高血压级别增大有增高的趋势,炎症反应可能参与了高血压病的发生、发展.
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辛伐他汀抑制兔腹主动脉支架植入后α-平滑肌肌动蛋白的转化
目的:观察辛伐他汀对支架植入术后兔腹主动脉平滑肌细胞增殖、移动和凋亡的影响.方法:实验于2003-02/12在河南省人民医院心内科实验室及河南省分子医学重点学科开放实验室进行.取15只健康的新西兰雄性大白兔,数字表法随机分为正常饮食组、对照组和辛伐他汀组3组(n=5).正常饮食组饲以正常饲料,其他2组饲以含15g/L胆固醇的高脂饲料,高脂喂养3 d后行腹主动脉内皮剥脱术.术后第10周高脂饮食的10只兔行腹主动脉二维超声、彩色多普勒、脉冲多普勒观察.一旦超声检查证实腹主动脉形成≥50%狭窄,辛伐他汀组即开始服用辛伐他汀(商品名舒降之,杭州默沙东制药有限公司)5 mg/d,15 d后对照组和辛伐他汀组在数字减影引导下在狭窄部位植入支架.行支架植入术30 d后取腹主动脉含支架段血管,做Western blot分析,检测收缩型平滑肌细胞分化标志物α-平滑肌肌动蛋白在3组表达的变化.结果:经补充后15只兔进入结果分析.Western blot结果显示腹主动脉α-平滑肌肌动蛋白的表达对照组比正常饮食组低55.4%,辛伐他汀组比对照组低28.7%(P＜0.05).结论:辛伐他汀可能对平滑肌细胞的表型转化有干预作用,阻止或减少支架植入术后收缩型平滑肌细胞向合成型平滑肌细胞的转化,从分子生物学的一个侧面支持了辛伐他汀对新生内膜平滑肌细胞有抑制作用.
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高脂饮食对大鼠非酒精性脂肪肝中解偶联蛋白2的诱导作用
背景:至今非酒精性脂肪肝的发病机制不十分清楚,而线粒体膜上的解偶联蛋白可使线粒体氧化磷酸化解偶联,导致线粒体合成ATP效率降低,通过能量代谢的改变,参与脂肪肝的发生.目的:观察解偶联蛋白2在大鼠非酒精性脂肪肝动物模型各时相点的表达规律.设计:随机对照动物实验.单位:解放军第三军医大学大平医院野战外科研究所消化科.材料:实验于2004-11/2005-12在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所国家重点实验室进行.取清洁级Wistar成年雄性大鼠64只,普通饲料正常喂养1周后,随机分为模型组和正常对照组2组,每组32只,每组又分饲养2,4,8,12周4个时间点,每个时间点8只.方法:模型组大鼠喂高脂饮食(基础饲料88%、猪油10%、胆固醇2%)饲养12周,正常对照组普通饲料喂养,分笼(每笼6只)饲养.主要观察指标:两组于相应时间点麻醉后采血,处死动物,迅速取出肝脏.①免疫组织化学和Western blot技术检测肝组织中解偶联蛋白2表达变化.②生化检测大鼠血清三酰甘油、游离脂肪酸和丙氨酸氨基转移酶活性.③检测肝组织丙二醛含量.结果:64只大鼠全部进入结果分析.①血清生化指标:模型组饲养4,8,12周时血清三酰甘油、游离脂肪酸和丙氨酸氨基转移酶水平明显高于正常对照组,以8,12周显著(P＜0.01).②模型组解偶联蛋白2蛋白表达随脂肪肝程度的加重,其表达逐渐增强,而正常对照组几乎阴性表达.③肝组织丙二醛含量:模型组饲养4,8,12周明显高于正常对照组,以8,12周显著[(4.07±0.15),(4.93±0.14),(5.20±0.20)μmol/g;(3.14±0.20),(3.12±0.18),(3.13±0.16)μmol/g,P＜0.01].结论:随着非酒精性脂肪的形成和程度加重,血清三酰甘油、游离脂肪酸和丙氨酸氨基转移酶及肝组织丙二醛含量增加,解偶联蛋白2表达也逐渐增强,提示高脂饮食可诱导肝细胞表达解偶联蛋白2,使细胞内ATP生成减少,促进脂肪肝的形成和发展.
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长期口服别嘌呤醇改善心力衰竭大鼠的心肌收缩力
目的:观察活化的黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇对慢性充血性心力衰竭大鼠心肌收缩力及细胞内钙含量的影响.方法:实验于2005-07/2006-02在南方医科大学南方医院心血管内科实验室进行.取34只雄性Wistar大鼠,单纯随机分成3组:①对照组(n=10):只做开胸手术,不结扎动脉.②模型组(n=12):结扎左冠状动脉的前降支,制备大面积心肌梗死后心力衰竭动物模型.③别嘌呤醇组(n=12):结扎冠状动脉后灌胃给予别嘌呤醇20 mg/(kg·d).梗死4周后麻醉状态下迅速剪下心脏,取心肌记录不同细胞外钙浓度[Ca2+]情况下细胞内钙[Ca2+]i含量和心肌收缩力的变化.用western blot观察肌钙蛋白Ⅰ降解的情况.结果:23只大鼠进入结果分析.①收缩期模型组心肌收缩力低于对照组和别嘌呤醇组[(21 7±2.1),(46.9±4.9),(42.9±4.2)mN/mm2,P＜0.05],后2组间差异不显著(P＞0.05).②收缩期模型组细胞内钙低于对照组和别嘌呤醇组[(0.31±0.02),(0.44±0.04),(0.38±0.04)μmol/L,P＜0.05],后2组间差异不显著(P＞0.05).③舒张末期模型组心肌收缩力和细胞内钙较正常对照组和别嘌呤醇组略有增加,但是差异不显著(P＞0.05).④别嘌呤醇可抑制肌钙蛋白Ⅰ降解.结论:①黄嘌呤氧化酶抑制剂别嘌呤醇能改善心衰心肌钙分布的不平衡状态,使细胞内钙水平恢复接近正常水平,增加心肌的收缩力.②别嘌呤醇的强心作用在于它不但能够改善心衰心肌钙分布的不平衡状态,而且能够增加肌丝蛋白对钙的敏感性,改善异常的兴奋收缩耦联.
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帕米膦酸二钠抑制骨巨细胞瘤细胞生长和诱导其凋亡
目的:观察第2代二膦酸盐药物--帕米膦酸二钠是否能够抑制骨巨细胞瘤细胞生长以及诱导其凋亡.方法:实验于2004-03/2005-11在北京大学第三医院完成.①标本来源:10例骨巨细胞瘤新鲜手术标本来源于北京大学第三医院骨科和北京积水潭医院骨肿瘤科,均经病理切片确诊.②取肿瘤组织,体外培养原代骨巨细胞瘤细胞.肿瘤细胞贴壁后,分别于培养皿、培养瓶和96孔板内加入帕米膦酸二钠作为用药组,使其终浓度为5,25,50,100,200μmol/L,以磷酸盐缓冲液作为空白对照组,观察骨巨细胞瘤的生长是否受到抑制.③TUNEL法检测骨巨细胞瘤细胞凋亡,以细胞核内出现蓝紫色颗粒为凋亡阳性表现.采用流式细胞仪检测骨巨细胞瘤细胞凋亡率,同时检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白活性的表达情况.结果:①骨巨细胞瘤细胞的培养情况:空白对照组细胞形态正常,胞膜完整;帕米膦酸二钠各浓度组细胞发生皱缩,细胞伪足减少,轮廓不清晰,胞膜不完整,甚至细胞形态消失,发生崩解.②骨巨细胞瘤细胞生长抑制情况:帕米膦酸二钠可抑制骨巨细胞瘤细胞的生长,并且随着作用时间的延长和药物浓度的增加,这种抑制作用增强.③骨巨细胞瘤细胞凋亡TUNEL染色结果:帕米膦酸二钠各浓度组光镜下可见蓝紫色颗粒,空白对照组未见有阳性染色.④流式细胞仪检测骨巨细胞瘤细胞凋亡率结果:帕米膦酸二钠5,50,200μmol/L浓度组作用48 h后,细胞凋亡率均明显高于空白对照组[(20.48±6.02)%,(42.39±12.41)%,(54.67±15.38)%,(10.13±3.45)%,P＜0.05].⑤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性检测结果:帕米膦酸二钠5,50,200μmol/L浓度组作用48h后骨巨细胞瘤细胞内的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白活性均明显高于空白对照组[(14.93±5.04)%,(25.13±7.60)%,(26.07±7.49)%,(2.73±0.81)%,P＜0.05].结论:帕米膦酸二钠可以抑制骨巨细胞瘤细胞生长,诱导半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3蛋白表达,从而导致骨巨细胞瘤细胞发生凋亡,帕米膦酸二钠对骨巨细胞瘤的作用表现为时间和浓度依赖性.提示应用帕米膦酸二钠治疗和预防骨巨细胞瘤复发具有一定的可行性.
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血管内皮生长因子在脑复发胶质瘤中的表达
背景:脑胶质瘤病灶介质中富含新生血管,血管内皮生长因子表达不同可能与其病理表现和复发存在一定的相关性.目的:分析血管内皮生长因子在复发脑胶质瘤中表达的特征.设计:对照实验.单位:四川大学华西医院神经外科.对象:从华西医院1996-06/2001-06手术切除且病理证实为脑胶质瘤143例石蜡标本中,收集临床资料完整且相同的个体复发前、后脑胶质瘤标本44例(22对).取首次手术及第1次复发手术标本.其中Kernohan评分Ⅰ级8例;Ⅱ级10例;Ⅲ级14例;Ⅳ级12例.分为初发和复发2组,每组22例.方法:采用免疫组织化学SP法,一抗羊抗人血管内皮生长因子IgG(单抗)、二抗兔抗羊IgG,工作度1:50,阴性对照为磷酸盐缓冲液置换一抗染色.检测44例复发前、后的脑胶质瘤病理组织中血管内皮生长因子蛋白表达水平,结合病理分级作对照分析.①胞浆内呈棕黄色颗粒为阳性信号.②在MPIAS-500型多媒体彩色病理图文分析系统上,对肿瘤细胞进行表达强度PU值(阳性单位)和细胞数测定.③PU值95%临界值,分别计数阳性细胞率.④常规苏木精-伊红染色Kernohan病理分级.主要观察指标:①脑胶质瘤复发前、后标本血管内皮生长因子表达强度PU值.②脑胶质瘤复发前、后组病理分级.结果:①脑胶质瘤血管内皮生长因子表达强度PU值:初发组为21.927 3±6.607,复发组为33.054 5±6.684.②病理分级:初发Ⅰ级8例,复发Ⅱ级2例、Ⅲ级5例、Ⅳ级1例;初发Ⅱ级6例,复发Ⅱ级2例、Ⅲ级1例、Ⅳ级3例;初发Ⅲ级6例,复发Ⅲ级2例、Ⅳ级4例;初发Ⅳ级2例,复发Ⅳ级2例.③脑胶质瘤复发前、后标本血管内皮生长因子蛋白表达PU值和肿瘤复发前、后病理分级各自对比检验差异均有显著性(P＜0.05).结论:血管内皮生长因子表达强度在脑胶质瘤复发较初发时增加明显,复发肿瘤恶化趋势与血管内皮生长因子的高表达在胶质瘤的复发中呈一致性.
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丝裂霉素诱导的肝癌细胞凋亡致敏树突状细胞
目的:建立丝裂霉素诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞的方法.设计:以癌细胞凋亡致敏树突状细胞为观察对象的随机对照实验.单位:解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所,解放军军事医学科学院放射医学研究所.材料:实验于1998-04/1999-05在解放军军事医学科学院放射医学研究所完成.细胞株为QBC939胆管癌细胞株,药物为抗肿瘤药物丝裂霉素.方法:从正常人外周血分离获得单核细胞,加入50μg/L重组人粒细胞集落刺激因子,1 000 U/mL白细胞介素4,隔天一次,共4次,培养第3天,加入丝裂霉素诱导凋亡的胆管癌细胞,再继续体外培养4 d后,用树突细胞富集柱收集树突状细胞.主要观察指标:①培养的树突状细胞的鉴定.②树突状细胞和坏死胆管癌细胞以及正常培养的胆管癌细胞共培养,观察其吞噬凋亡小体负载抗原.③检测不同密度的树突状细胞(1×103/孔,5×103/孔,1×104/孔)的免疫刺激活性及负载抗原后的免疫刺激活性,以单核细胞作对照组.结果:①培养、扩增得到的树突状细胞高表达共刺激分子B7和CDla,表面具有典型不规则突起.②丝裂霉素诱导癌细胞凋亡形成的凋亡小体被树突状细胞捕捉、吞噬.③负载抗原的树突状细胞其激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力进一步增强.结论:丝裂霉素诱导癌细胞凋亡可以致敏重组人粒细胞集落刺激因子加重组人白细胞介素4从人外周血单核细胞诱导、扩增出的树突状细胞,树突状细胞可以有效提呈凋亡胆管癌细胞的抗原,可望成为有效的肿瘤抗原致敏树突状细胞的新途径.
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缺氧与氧化损伤后肾小管上皮细胞能量代谢及细胞骨架的改变
目的:观察缺氧、氧化损伤后培养的人肾小管上皮细胞能量代谢及细胞骨架改变之间的关系.方法:实验于2002-09/2003-09在解放军第三军医大学西南医院实验动物中心完成.①将人肾小管上皮细胞株HK-2细胞分为正常组、缺氧组、氧化损伤组3组:正常组中加入无血清RMPI1640培养液;缺氧组加入含0.1μmol/L抗霉素A的无血清无底物RMPI1640培养液;氧化损伤组加入含0.1 mmol/L H2O2的无血清RMPI1640培养液.②观察各组细胞生长状况和形态及细胞存活率;测定细胞外液乳酸脱氢酶比活性代表肾小管上皮细胞膜通透性变化;采用ATP酶(Na+,K+和Ca2+-ATP)试剂盒直接测定各组细胞能量代谢改变,采用细胞免疫荧光化学方法检测各组细胞细胞骨架改变.结果:①正常组细胞生长状况良好,折光性强;缺氧、氧化损伤组细胞皱缩、突起减少,细胞存活率明显低于正常组[(56.2±2.3)%,(62.5±2.6)%,(96.5±3.2)%,P＜0.01].②缺氧、氧化损伤组乳酸脱氢酶比活性显著高于正常组(P＜0.01).③Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性正常组明显高于缺氧、氧化损伤组[(9.61±0.53),(3.68±0.27),(5.10±0.19)nkat/g;(7.97±0.66),(3.12±0.24),(4.56±0.32)nkat/g,P＜0.01],而缺氧组、氧化损伤组之间比较差异不显著(P＞0.05).④免疫荧光标记细胞内细胞骨架(微管、微丝、中间丝)显示正常TEC微管、微丝、中间丝表达丰富,在胞浆内呈均匀一致分布;缺氧、氧化损伤后细胞骨架破坏、塌陷,网络结构和支架作用消失.结论:缺氧、氧化损伤能量代谢障碍可造成细胞骨架破坏,终导致肾小管上皮细胞的坏死和凋亡.
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环形精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽的核素标记及在健康动物体内的实验
目的:探讨99Tcm直接标记环形RGD-4CK九肽的可行性,观察99Tcm-RGD-4CK在健康动物体内的药代动力学、生物分布特点及显像表现.方法:实验于2004-10/2005-11在解放军第三军医大学西南医院核医学中心完成.①采用预锡化法99Tcm直接标记RGD-4CK,3 MM色谱纸层析测定标记率,通过HPLC分析、Sep Pak C18柱层析、体外稳定性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验,评价99Tcm-RGD-4CK的放射化学性质.②选取雄性日本大耳兔9只,每只静脉注射37 MBq99Tcm-RGD-4CK,分别于1.5,3.0,5.0,10,30,60,90,120,180,240 min采血、称重并测定血样品放射性计数,结果经参考源校正后以MBq/L表示,所得数据应用DAS软件处理,结合αvβ3受体在正常体内实际表达情况判断室模型.③选取小鼠40只,随机分为8组(n=5),每只静脉注射0.74 MBq99Tcm-RGD-4CK,分别于1,5,20,60,90,120,180,240 min处死小鼠,采集血液、心、肺、肝、肾、肠、肌肉、骨、脑,称重并测定放射性计数,结果经参考源校正后以每克组织百分注入剂量(%ID/g)表示.④选取雄性日本大耳兔3只,每只静脉注射37 MBq99Tcm-RGD-4CK,应用SPECT进行显像,结合感兴趣时间-放射性曲线分析,观察家兔体内放射性的动态分布变化.结果:40只小鼠和12只兔全部进入结果分析.①99Tcm-RGD-4CK标记率为(97.8±0.4)%,比活度为(11.90±0.05)PBq/mol;HPLC保留时间与洗脱液放射峰值时间基本一致,室温放置6 h的放射化学纯度仍＞95%:Sep Pak C18柱层析游离99Tcm仅比纸层析高0.5%;与300mmol/L半胱氨酸37℃温育1 h,游离99Tcm仅增加1.88%;99Tcm-RGD-4CK与血清蛋白无明显结合.②99Tcm-RGD-4CK在健康家兔体内的药代动力学符合权重数为1/C的二室模型,分布相半衰期为(4.18±2.17)min,消除相半衰期为(69.32±0.00)min.③小鼠血液放射性清除迅速,通过肾脏排泄且快,其余组织器官放射性均随时间逐渐降低,而脑始终呈低放射水平.④家兔SPECT显像示:各组织器官T-A曲线均随时间逐渐下降,与肾、心、肝相比,肺、胃、肌肉曲线呈低水平;1 min双肾即显影,5 min心、肝影开始减弱,肺放射性分布均匀,强度低于肝脏,膀胱显影;5 min后膀胱影持续增强,20 min后软组织影逐渐减弱;胆囊未显影,腹部呈持续低放射分布,胃区始终呈放射性缺损,颈部未见明显核素浓聚.结论:99Tcm-RGD-4CK制备方法简便,标记率高(＞95%),具有良好的放射化学性质,体内稳定性好,具有比较理想的体内动力学.
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热休克蛋白27对人晶状体上皮细胞氧化损伤的保护作用及其机制
目的:观察热休克预处理诱导的热休克蛋白27对晶状体上皮细胞的保护作用.方法:实验于2004-01/12在中国医科大学卫生部小儿先天畸形重点实验室完成.体外培养人晶状体上皮细胞系HLB-C3细胞,随机分为4组:①正常对照组.②氧化损伤组:细胞中加入200 μmol/L H2O2作用6 h.③热休克处理组:42℃预热30 min后,37℃恢复2 h,处理同氧化损伤组.④放线菌酮组:预热前30 min加入放线菌酮(25 mg/L),其余处理同热休克处理组.观察各组细胞存活率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性;DNA ladder和Annexin V-FITC流式细胞仪检测晶状体上皮细胞凋亡率;免疫印迹法检测各组中热休克蛋白27和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达.结果:①细胞活力:氧化损伤组低于正常对照组(0.24±0.02,0.28±0.04,P＜0.01),热休克处理组高于氧化损伤组(0.27±0.04,P＜0.05),放线菌酮组低于热休克处理组(0.23±0.01,P＜0.01).②细胞凋亡率:氧化损伤组高于正常对照组[(15.69±1.54)%,(4.17±0.83)%,P＜0.01];热休克处理组低于氧化损伤组[(8.34±1.19)%,P＜0.01];放线菌酮组高于热休克处理组[(13.58±1.21)%,P＜0.01].③超氧化物岐化酶和过氧化氢酶活性:氧化损伤组低于正常对照组(P＜0.01),热休克处理组高于氧化损伤组(P＜0.05),放线菌酮组低于热休克处理组(P＜0.01).④热休克蛋白27表达:正常对照组细胞中略有表达,氧化损伤组表达稍有增加,热休克处理组表达明显增多,放线菌酮组未见表达.⑤半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达:正常对照组细胞表达较弱,氧化损伤组表达增多,热休克处理组的表达少于氧化损伤组.结论:热休克预处理诱导的热休克蛋白27对氧化损伤的晶状体上皮细胞起着保护作用.其保护机制可能是:①对与晶状体抗氧化有关的酶防御系统的影响:②小分子热休克蛋白对抗细胞凋亡.
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去除神经支配大鼠骨骼肌中钠钾三磷酸腺苷酶表达的变化
背景:胰岛素诱导的离子运输改变可影响代谢调节,并且胰岛素抵抗条件下钠钾三磷酸腺苷酶活性的降低导致高血压以及糖原合成、葡萄糖氧化和ATP产生的减少.目的:观察钠钾三磷酸腺苷酶在胰岛素抵抗模型中的表达调控.设计:对照实验.单位:英国邓迪大学生命科学学院分子生理学系.材料:实验于1999-10/2000-02完成.使用15只体质量200～250 g的清洁级成年雄性Sprague Dawley大鼠.每次实验使用5只,相同实验重复3次.方法:去除大鼠一侧后肢神经支配,4 d后将骨骼肌从去除神经支配的后肢和对侧对照后肢中解剖并分离,从红色肌肉(比目鱼与红色腓肠肌)和白色腓肠肌中分离粗制细胞膜.应用免疫印迹法和Northern杂交分析法分别检测蛋白质和mRNA的表达.使用Bio-Rad GS-670图像密度仪对蛋白质和mRNA的信号强度进行定量.主要观察指标:对照侧和去除神经支配后肢骨骼肌中钠钾三磷酸腺苷各亚基蛋白质和mRNA表达水平的比较.结果:15只大鼠全部进入结果分析.与对照侧相比,去除神经支配的后肢中:①红色骨骼肌中α2和β1亚基的蛋白质表达分别下降46%和77%.在红色和白色骨骼肌中,α1亚基的蛋白质表达分别增加了20%和15%.β2亚基的蛋白质表达在红色和白色骨骼肌中均未发生显著变化.②在红色腓肠肌和比目鱼肌中,α2亚基的mRNA水平分别下降了29%和39%,β1亚基的mRNA水平分别下降了80%和52%.在红色和白色腓肠肌中,α1亚基的mRNA水平分别增加了9倍和1.3倍.β2亚基的mRNA水平在红色腓肠肌中无显著变化,但在白色腓肠肌中减少了59%.结论:①在去除神经支配的大鼠骨骼肌中,钠钾三磷酸腺苷酶各亚基的表达受转录和转录后双重调控.②α2和β1亚基的蛋白质表达显著下降的结果提示,在大鼠骨骼肌中,去除神经支配造成的胰岛素抵抗使原本受胰岛素调节的钠钾三磷酸腺苷酶亚基的表达机制被破坏.
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促红细胞生成素预处理对肢体缺血再灌注损伤的影响
目的:观察促红细胞生成素预处理对骨骼肌缺血再灌注损伤的影响.方法:实验于2004-08/2005-01在解放军第二五二医院中心实验室完成.①采用大鼠右后肢缺血再灌注模型,将30只实验大鼠随机分为3组,每组10只.假手术组:仅显露股血管鞘,不做缺血再灌注,经腹腔注射同体积生理盐水;对照组:经腹腔注射同体积生理盐水,持续缺血4 h,再灌注1 h.促红细胞生成素预处理组(预处理组):经腹腔注射5000 u/kg人重组促红细胞生成素,24 h后持续缺血4 h,再灌注1 h.②测定各组血清磷酸激酶,乳酸脱氢酶丙二醛和腓肠肌99Tcm亚甲基二磷酸钠吸收量变化.③电镜观察腓肠肌超微结构变化.结果:30只大鼠全部进入结果分析.①对照组和预处理组血清磷酸激酶[(121.627±18.112),(84.417±14.594)μkat/L]、乳酸脱氢酶[(20.065±4.676),(13.354±5.229)μkat/L]明显高于假手术组[(50.247±16.066),(7.732±1.256)μkat/L](P＜0.05);对照组和预处理组丙二醛[(10.36±2.65),(6.55.±2.19)nmol/L]及99Tcm亚甲基二磷酸钠吸收量[(16.69±3.14),(11.66±3.87)%/(g·min)]均明显高于假手术组[(3.54±1.89)nmol/L,(9.12±1.96)%/(g·min)(P＜0.05)].②预处理组各指标与对照组相比显著降低(P＜0.05).结论:促红细胞生成素对肢体骨骼肌缺血再灌注损伤具有保护作用.
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糖皮质激素性骨质疏松骨保护素表达与骨密度的相关性
目的:探讨糖皮质激素性骨质疏松大鼠骨保护素在骨骼局部的表达,及其对骨密度变化的影响.方法:实验于2005-01/2006-03在解放军总医院骨科实验室完成.选择6月龄雄性Wistar大鼠48只,随机数字表法分为实验组和对照组,各24只.实验组大鼠给予地塞米松1 mg/kg肌肉注射,1次/d;对照组大鼠给予等量生理盐水肌注.两组大鼠给药后2,4,8,12周各处死6只,取松质骨(腰椎)和皮质骨(股骨干),进行骨密度值测量、骨组织形态学观察及骨保护素免疫组织化学染色,并进行图像处理和统计分析.结果:纳入动物48只,均进入结果分析.①实验组大鼠腰椎骨密度给药后2,4,8,12周与对照组相比均明显下降[分别为(0.175±0.013),(0.212±0.018)g/cm2;(0.152±0.021),(0.211±0.019)g/cm2;(0.129±0.014),(0.213±0.015)g/cm2;(0.113±0.016),(0.212±0.015)g/cm2,P＜0.01],给药后12周较2周下降更为显著(P＜0.01);股骨干骨密度给药后2周无明显差异(P＞0.05),给药后4周开始下降[分别为(0.226±0.013),(0.244±0.015)g/cm2,P＜0.05],给药后8,12周均明显下降[分别为(0.204±0.014),(0.238±0.015)g/cm2;(0.186±0.016),(0.240±0.013)g/cm2,P＜0.01].②实验组骨小梁排列稀疏,数目减少,小梁明显变细、间距加宽,股骨干中段骨皮质厚度变薄,12周多视野计数可见破骨细胞增多(P＜0.01).③实验组给药后2周腰椎的骨保护素组织化学染色明显减低,4周股骨干内亦明显减低,并且随着给药时间的延长逐渐减低.结论:糖皮质激素抑制骨骼局部骨保护素表达,并且与局部破骨细胞的增多、骨密度降低密切相关,继发了渐进性骨质丢失,可能参与并促进了骨质疏松的形成.
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几丁糖对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用
目的:增生性瘢痕的成因来源于成纤维细胞的生物学特性异常,观察几丁糖对增生性瘢痕成纤维细胞生物学活性的影响.方法:正常皮肤、增生性瘢痕各3例,供者均系第二军医大学长海医院整形科门诊患者,均知情同意.以增生性瘢痕成纤维细胞为观察对象,正常皮肤成纤维细胞为对照,用组织块法进行不同标本成纤维细胞体外培养.根据成纤维细胞来源不同,分为正常皮肤,增生性瘢痕2组,每组再按添加几丁糖的浓度不同,分为0,0.1,0.2,0.4,0.8,1.6,2.4,4.8g/L8组.四唑盐比色检测几丁糖对两组成纤维细胞生长增殖的影响(吸光度值变化率);光镜与透射电镜观察几丁糖对两组成纤维细胞的形态结构的影响;3H-脯氨酸掺入法检测几丁糖对两组成纤维细胞合成及分泌胶原功能的影响.结果:①几丁糖对两组成纤维细胞生长增殖的影响:几丁糖能减少增生性瘢痕成纤维细胞的吸光度值;几丁糖的浓度和吸光度值改变之间存在剂量-效应关系.相同条件下增生性瘢痕组的成纤维细胞的吸光度值大于正常皮肤组(P＜0.05);几丁糖对2组吸光度值变化率影响无显著差异(P＞0.05).②几丁糖对两组成纤维细胞形态结构的影响:光学显微镜下,各组细胞均呈梭型,胞体较大,界限清楚,呈放射状行走.两组无明显细胞形态区别.透射电镜下,随几丁糖浓度增加,细胞内胶原、核糖体、高尔基体等减少,线粒体脊低、少.细胞功能明显受抑制,凋亡细胞增加,两组细胞形态上差异不明显.③几丁糖对两组成纤维细胞合成及分泌胶原功能的影响:随几丁糖质量浓度的增加,各组3H-脯氨酸掺入量均逐渐减少;几丁糖相同浓度下增生性瘢痕组与正常皮肤组有非常显著性差异(P＜0.01).增生性瘢痕组的减少率与正常皮肤组的减少率有显著性差异(P＜0.05).结论:几丁糖可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞的生长、增殖、合成及分泌功能,有望在增生性瘢痕的防治中发挥重要作用.
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褪黑激素对严重烧伤大鼠迟发型超敏反应的影响
目的:观察褪黑激素对30%Ⅲ度烧伤大鼠迟发型超敏反应的影响,估计它在严重烧伤中的免疫调节作用.方法:实验于2005-07/12在青岛大学医学院完成.24只SD大鼠数字表法随机分为对照组、烧伤组及褪黑激素组,每组8只.烧伤组及褪黑激素组麻醉状态下将动物背部皮肤置于沸水中15 s制备烧伤模型,对照组大鼠背部皮肤置于37℃水中15 s.对照组和烧伤组伤后立即腹腔注射溶剂(体积分数为0.01的乙醇生理盐水),而褪黑激素组注射剂量为10 mg/kg的褪黑激素,烧伤当天下午4点补充注射一次药物或溶剂,此后按同法每天注射一次至伤后第7天.末次注射后立即将5g/L二硝基氟苯溶液100μL涂抹于大鼠腹部,次日同法强化一次,以诱导迟发型超敏反应.致敏后第5天,测定大鼠右耳肿胀百分率(对照组定义为100%)代表迟发型超敏反应强度.此外,还测定烧伤前后外周血白细胞计数,估计动物的一般免疫反应状态.结果:24只大鼠全部进入结果分析.①右耳肿胀百分率:烧伤组大鼠显著低于对照组[(41.2±8.2)%,(100±7.6)%,P＜0.001],褪黑激素组高于烧伤组[(73.0±10.1)%,P＜0.01],但仍低于对照组水平(P＜0.05).②外周血白细胞计数:烧伤组及褪黑激素组大鼠在烧伤后12 h内均明显升高(P＜0.05),伤后72 h和120 h,两实验组白细胞再次出现升高(P＜0.05),褪黑激素组白细胞数值在这两个时间点均明显低于烧伤组水平(P＜0.05,0.01).结论:褪黑激素治疗能明显改善烧伤大鼠严重受抑的迟发型超敏反应,提示它在烧伤中可能具有免疫调节作用.
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反义转化生长因子β1抑制兔耳增生性瘢痕的生物学作用
背景:目前认为转化生长因子β与瘢痕形成关系密切,是关键的活性分子,可影响瘢痕形成的各个阶段.抑制转化生长因子β的生物学作用,在理论上可减少瘢痕的形成.目的:探讨反义转化生长因子β1脱氧寡核苷酸对增生性瘢痕动物模型伤口愈合中瘢痕生成的抑制作用,观察使用反义转化生长因子β1的有效给药途径.设计:自身对照,动物实验.单位:解放军兰州军区总医院安宁分院整形科.材料:实验于2002-09/2003-07在兰州医学院解剖实验室完成.选择日本大耳白兔20只.方法:在每只兔耳腹侧面沿长轴避开可见血管,作两个1.0 cm×2.5 cm的长方形全层皮肤缺损创面,创面间隔1.5 cm,深达软骨表面,共80个,建立兔耳腹侧面增生性瘢痕模型.待兔耳创面上皮化后(平均20 d),在每只白兔左耳每个创面的上皮下用微量注射器局部封闭注射反义转化生长因子β1脱氧寡核苷酸5μL(1g/L),为转化生长因子β1组;右耳每个创面下注射生理盐水5 μL,为生理盐水对照组.注药后3,7,11,20,30 d 5个时相点切取瘢痕组织,每个时相点4只.采用苏木精-伊红染色、Masson染色及转化生长因子β1 mRNA、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的原位杂交组织化学染色.主要观察指标:苏木精-伊红染色、Masson染色和原位杂交组织化学染色结果.结果:纳入动物20只,均进入结果分析.①苏木精-伊红染色显示各组中的右耳增生性瘢痕内均可见有炎性细胞浸润并有明显的白细胞浸润带,而左耳的增生性瘢痕经反义转化生长因子β1干预后虽也有炎性细胞浸润,但未见白细胞浸润带.②Masson染色见右侧耳的增生性瘢痕从伤后3周起均可见蓝染较深的胶原纤维,至第7周时仍可见蓝染的胶原纤维,外形粗大(宽度约为8～10μm),排列杂乱无章.而左耳经反义转化生长因子β1干预的兔耳增生性瘢痕在伤后3周时,虽然亦可见蓝染的胶原纤维,但到第6,7周时胶原纤维蓝染变浅并且纤细(宽度为3～5 μm),排列整齐有序.③原位杂交显示转化生长因子β1 mRNA、Ⅰ型胶原mRNA、Ⅲ型胶原mRNA阳性细胞表达率明显降低.结论:反义转化生长因子β1能抑制兔耳增生性瘢痕的增殖过程,使瘢痕组织纤维化程度明显减轻.局部注射裸DNA治疗瘢痕的给药途径是可行的.
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病理性瘢痕中S100蛋白基因的差异表达
目的:探讨S100蛋白基因的表达情况与病理性瘢痕形成的相关性.方法:实验于2003-05/2005-01在南方医科大学分子生物学研究所完成.病理性瘢痕标本来源于南方医院整形外科手术患者,正常皮肤组织来源于无瘢痕体质趋势及无免疫性疾病的包皮手术标本,患者均知情同意.增生性瘢痕组3例,瘢痕疙瘩组3例,正常皮肤组10例.抽提增生性瘢痕和瘢痕疙瘩与正常皮肤组织的总RNA,反转录并双色荧光标记,与含11个S100蛋白基因的人类基因表达谱芯片杂交,经荧光扫描和数据处理,进一步进行统计学分析,检测S100蛋白基因在3组组织中的表达变化.结果:与正常皮肤组织相比,11个S100蛋白基因在增生性瘢痕组织中差异表达具有显著性意义的基因有3个,S100A7,S100A8和S100A9均为上调表达;而瘢痕疙瘩组织中仅有S100A2基因的下调表达具有显著性意义.结论:①S100蛋白基因的差异表达与病理性瘢痕的形成密切相关.②S100蛋白基因成员在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的差异表达有助于两者的鉴别诊断.③S100A2在瘢痕疙瘩中低表达而在增生性瘢痕中正常表达,可能与瘢痕疙瘩的恶性度高于增生性瘢痕,且能向周边正常组织浸润有关.
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P27基因转染对瘢痕成纤维细胞超微结构的影响
目的:观察P27基因转染对体外培养增生性瘢痕成纤维细胞超微结构的影响,探讨P27基因抑制瘢痕的作用.方法:实验于2001-06/2002-01在第四军医大学烧伤科实验室,第四军医大学电镜中心完成.pcDNA-p273真核表达质粒由第一作者构建,应用基因转染技术将所构建的pcDNA3-p27载体转染成纤维细胞,培养的增生性瘢痕成纤维细胞分为空白对照组(即未经转染的增生性瘢痕成纤维细胞)、转pcDNA3空载体组、转pcDNA3-P27组.获得稳定的P27表达后,用透射电镜观察成纤维细胞内细胞器形态和数量的变化.结果:①空白对照组成纤维细胞核大而呈圆形,核仁明显,胞浆内具有较丰富的粗面内质网,较发达的高尔基复合体,较多的线粒体、微丝、微管,细胞表面微绒毛及突起较多.②转pcDNA3空载体组粗面内质网、线粒体较丰富.③转pcDNA3-P27组细胞胞浆内粗面内质网、线粒体、微丝、微管明显减少,大部分细胞出现染色体边聚,粗面内质网上的核糖体明显减少,部分细胞呈现凋亡,大部分细胞呈典型的生长抑制像.④P27明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的合成功能.结论:P27可能通过抑制成纤维细胞的细胞合成、增殖功能来抑制瘢痕形成.
