中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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肢体缺血预处理对兔腰段脊髓急性缺血再灌注损伤的保护作用
目的:观察肢体缺血预处理对脊髓急性缺血再灌注损伤能否产生保护性,并通过电生理学、组织病理学等检测评估其效用.方法:实验于2003-07/2004-03在解放军总医院骨科实验室完成.①造模:将20只新西兰白兔随机分为3组,假手术组4只,缺血再灌注组与预处理组各8只,后2组兔采用肾下腹主动脉阻断40 min-开放法建立腰段脊髓急性缺血再灌注模型,假手术组仅开腹,不阻断腹主动脉.②肢体缺血预处理方法:预处理组兔在阻断前,先对左下肢进行预处理,以止血带在大腿根部绑扎,阻断血管5 min,再灌注10 min,共反复4次.③功能评估指标:对比各组兔在再灌注后2,8,24 h、7 d时后肢功能(0~4级,0级为后肢完全瘫痪,4级为正常行走)、皮质体感诱发电位消失和再现时间以及组织病理学上的差异.结果:20只进入结果分析.①假手术组兔后肢神经功能正常;预处理组兔各时间点后肢神经功能评级高于缺血再灌注组(F=17.37,P=0.001 6),与假手术组比较无差异(P=0.071 9).②再灌注7 d时,缺血再灌注组组织病理学上有严重改变,表现为神经元细胞水肿、脱失,白质脱髓鞘;预处理组病理改变轻微;对照组无明显改变.③预处理组动脉夹闭后皮质体感诱发电位消失时间长于缺血再灌注组[(27.2±1.7),(13.6±2.2)min,t=13.79,P=0.00];预处理组再灌注后皮质体感诱发电位再现时间短于缺血再灌注组[(2.1±1.8),(7.1±5.0)min,t=-2.65,P=0.02].结论:肢体缺血预处理能减轻脊髓缺血再灌注引起的组织病理变化和神经功能缺陷,对急性脊髓缺血后的再灌注损伤起到明显的保护作用.
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七氟醚预处理中谷氨酸转运体的激活触发对脑缺血的保护作用
目的:观察谷氨酸转运体是否参与七氟醚预处理对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用.方法:实验于2006-01/06在徐州医学院江苏省麻醉学重点实验室电生理研究室进行.清洁级SD幼年大鼠若干只,低温分离海马,沿矢状面切成300~400 μm厚脑片.脑片分为8组,即缺氧无糖组、苏-羟天冬氨酸250,500,1 000 μmol/L苏-羟天冬氨酸组、40 mL/L七氟醚预处理组、苏-羟天冬氨酸250,500,1 000 μmol/L分别+40 mL/L七氟醚预处理组,每组8张脑片.将海马脑片放于34℃的正常的人工脑脊液中孵2 h之后,平衡灌注,双脉冲方波刺激电极置于海马CA3区的Schaffer侧支,记录电极置于海马CA1区锥体细胞层.各组药物预处理30 min,进行冲洗15 min后,观察缺氧无糖14 min、复氧供糖1 h各组海马脑片顺向群峰电位的变化.实验结束后各组取海马脑片四五片用TTC染色,酶标仪测定A490值,分析脑片活性.结果:①40 mL/L七氟醚预处理组较缺氧无糖组缺氧所致的诱发顺向群峰电位的消失时间明显延迟,顺向群峰电位恢复程度和顺向群峰电位恢复率显著改善,差异有统计学意义[(5.4±0.7),(2.5±0.6)min;65.6±18.4,8.4±18.2;0.75%;P<0.01].苏-羟天冬氨酸250,500,1 000 μmol/L组顺向群峰电位消失时间和恢复率与缺氧无糖组差异无显著性意义(P>0.05).②250 μmol/L苏-羟天冬氨酸+七氟醚预处理组缺氧所致的诱发顺向群峰电位的消失时间明显延迟,顺向群峰电位恢复程度显著改善(P<0.01),恢复率与40 mL/L七氟醚预处理组差异无显著性意义.而500 μmol/L苏-羟天冬氨酸+七氟醚预处理组,1 000 μmol/L苏-羟天冬氨酸+七氟醚预处理组七氟醚预处理顺向群峰电位的消失时间明显加速,顺向群峰电位的恢复程度减弱(P<0.05,0.01),恢复率差异有显著性意义(P<0.05,0.01).③海马脑片A490正常值是1.04±0.04.复氧供糖1 h,缺氧无糖损伤会明显降低海马脑片TTC染色A490值(0.36±0.07),组织损伤率严重.40 mL/L七氟醚预处理组、250 μmol/L苏-羟天冬氨酸+七氟醚预处理组细胞损伤率低于缺氧无糖组(P<0.01,0.05);500 μmol/L苏-羟天冬氨酸+七氟醚预处理组,1 000μmol/L苏-羟天冬氨酸+七氟醚预处理组组织损伤百分率较40 mL/L七氟醚预处理组严重(P<0.05,0.01).结论:七氟醚预处理对海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用有可能谷氨酸转运体参与,并与抑制剂成剂量依赖性.
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悬雍垂腭咽成形术中扩大咽峡和鼻咽峡的特点
背景:传统悬雍垂腭咽成形术式切除部分软腭、悬雍垂和多余的咽侧壁软组织,虽然改善了症状,但部分患者出现腭咽关闭不全、咽腔瘢痕挛缩等并发症,且远期疗效欠佳.目的:观察悬雍垂腭咽成形术中扩大咽峡和鼻咽峡的特点,分析治疗阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的疗效.设计:病例观察.单位:青岛大学医学院附属市立医院.对象:选择2001-07/2006-02以睡眠时打鼾、呼吸暂停、憋气、白天嗜睡等症状来青岛大学医学院附属市立医院睡眠呼吸障碍诊疗中心就诊,经多导睡眠图确诊为阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者216例.术前均确定阻塞部位在口咽部,其鼻咽峡较小及舌根无肥大.呼吸暂停和低通气指数≥5次/h.年龄≥25岁,其中男159例,女57例.方法:改良传统悬雍垂腭咽成形术手术方法,维持咽腔正常生理解剖形态,保留悬雍垂,沿腭舌弓切口向软腭方向做斜行直切口,避免倒"U"型切口.对软腭和咽侧壁进行成形,以充分扩大咽峡和鼻咽峡.主要观察指标:①近期效果观察:术后不需要镇痛药物者为轻度疼痛,需使用镇痛药物者为重度疼痛.口腔侧壁在愈合后能保持咽腔设计形态者为愈合好,反之为愈合差.②远期效果观察:根据患者自述来确定患者有无鼻腔返流、咽部异物感等并发症.根据患者家属的观察及多导睡眠监测,来确定患者有无睡眠呼吸暂停症状.经口咽部检查以确定咽腔形态是否接近正常生理结构.结果:216患者均进入结果分析.①216例患者术后不需镇痛药156例(72%),需要镇痛药者60例(28%);咽侧壁光滑者136例(63%),部分裂开者80例(37%).术后均无憋气及鼻腔返流等并发症.②216例均随访6个月以上,均无吞咽返呛、开放性鼻音等并发症;84例(39%)患者有咽部异物感;169例(78%)睡眠呼吸暂停症状消失,47例(22%)仍有症状,但均较术前改善.术后口腔形态满意203例(94%),13例(6%)不满意.③术前与术后多导睡眠监测结果各项指标比较差异有显著性[呼吸暂停指数:35.45±16.42,12.75±9.62;低通气指数:19.39±9.86,17.43±10.15;呼吸暂停低通气指数:54.2g±18.13,28.31±16.23;平均低血氧饱和度:(83.58±7.96)%,(85.53±8.18)%;平均血氧饱和度:(91.98±3.29)%,(93.01±3.02)%,P均<0.05].结论:改良传统悬雍垂腭咽成形术式可充分扩大咽腔空间,避免了并发症,患者症状得到明显改善
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中药癌痛克对人肝癌细胞HepG2增殖、凋亡及Rb基因表达的影响
目的:通过观察不同浓度癌痛克对肝癌细胞株HepG2增殖及凋亡的作用,以及在相应状态下细胞内Rb基因表达量的改变,探讨中药癌痛克抗肝癌的可能作用机制.方法:实验于2005-09/2006-03在广州医学院中心实验室完成.取对数生长期的HepG2细胞,使细胞静止于G0/G1期.随机分为癌痛克2,10,50 mg/L组和对照组,癌痛克2,10,50 mg/L组分别加入对应浓度癌痛克(购自河南省肿瘤研究所,由金蝎、土元、九香虫、大黄、人参、灵芝、黄芪等纯中药组成的粉状制剂,功能:消癌肿、消癌痛、消积水、升白排毒),对照组不加药物,每组设4个复孔.MTT法检测各组细胞24,48,72 h增殖率,细胞增殖率=[(A570癌痛克组-A570对照组)/A570对照组]×100%;以流式细胞术检测各组细胞24,48,72 h凋亡率;RT-PCR方法检测各组细胞24,48,72 h细胞内Rb基因mRNA表达量.结果:①2~50 mg/L癌痛克具有明显的增殖抑制作用,癌痛克2,10,50 mg/L组在24,48,72 h与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.05);3组各时点两两之间比较差异有显著性意义(P<0.05);同组各时点之间比较差异有显著性意义(P<0.05).②2~50 mg/L癌痛克组可诱导HepG2细胞凋亡,相同作用时间癌痛克2,10,50 mg/L组与对照组比较差异有显著性意义(P<0.001);同一时点各组比较差异有显著性意义(P<0.05);同组不同作用时间点比较差异有显著性意义(P<0.001).③2~50 mg/L癌痛克可上调Rb基因的表达,各浓度组在各时点与对照组比较,差异均有显著性意义(P<0.05);24,48,72 h癌痛克2,10,50 mg/L组之间比较差异无显著性意义(P>0.05);3组各时点比较差异有显著性意义(P<0.05).结论:中药癌痛克可通过抑制HepG2细胞增殖或诱导其凋亡,而发挥抗肝癌作用;且其诱导细胞凋亡的机制之一可能为通过增加Rb基因的表达而实现.
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内源性醛固酮与受体结合对肾性高血压大鼠血浆神经肽Y的调控
目的:观察在"一肾一夹"肾性高血压大鼠模型中,血浆神经肽Y含量的变化.方法:实验于2003-08/12在解放军总医院老年病研究所实验室完成.选用健康雄性Wistar大鼠21只,随机分为3组(n=7),分别为对照组和高血压组及螺内酯组.①分组干预:对照组:行假手术,10 g/L盐水饮用,连续14 d;高血压组:通过"一肾一夹"法(用直径0.2 mm的银夹钳夹左侧肾动脉,使其部分狭窄,并切除右侧肾脏)复制肾性高血压大鼠模型,10 g/L盐水饮用,连续14 d;螺内酯组:造模同高血压组,螺内酯20 mg/(kg·d)灌胃,连续14 d.②14 d后通过尾动脉法测量大鼠平均动脉压,取心脏组织称重后测量左心室质量/体质量比值.③用放射免疫的方法测定血浆神经肽Y、血管紧张素Ⅱ、醛固酮水平.结果:大鼠21只均进入结果分析.①平均动脉压水平:高血压组和螺内酯组均明显高于对照组[(187.14±28.56),(159.29±27.75),(127.14±8.59)mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa,P<0.05].②心肌左心室质量/体质量比值:螺内酯组明显低于高血压组[(2.36±0.31),(3.02±0.64),P<0.05].③血浆醛固酮水平:螺内酯组明显高于高血压组[(1.33±0.83),(0.54±0.26)ng/L,P<0.05].④血浆神经肽Y水平:螺内酯组明显高于高血压组[(48 222±33 217),(5 375±2 916)ng/L,P<0.05].结论:内源性醛固酮通过与受体结合可负性调控神经肽Y的分泌.
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米帕明对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性的影响
目的:观察米帕明对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织中含一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性的影响.方法:实验于2005-03/12在解放军总医院老年心血管病研究所生化药理实验室进行.①选用健康Wistar大鼠96只,随机分成假手术组、模型组、尼莫地平组和米帕明组4组,每组24只.②米帕明组腹腔注射米帕明10 mg/kg,尼莫地平组腹腔注射尼莫地平2 mg/kg,假手术组和模型组腹腔注射等容积生理盐水;60 min后用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤模型,假手术组尼龙线的头端不插入颈内动脉.③于缺血2 h再灌注2,12和24 h每组随机取6只大鼠断头,测定脑组织中一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性.每组剩余6只再灌注2 h处死取脑,光镜下观察脑组织病理变化.结果:96只大鼠进入结果分析.①一氧化氮浓度:模型组、尼莫地平组和米帕明组再灌注2,12和24 h均高于假手术组(P<0.05);尼莫地平组再灌注2,12和24 h均低于模型组[(45.99±8.13),(40.63±3.13),(36.72±4.38)μmol/L;(65.54±6.01),(57.08±4.79),(48.13±5.12)μmol/L;P均<0.05];米帕明组再灌注2 h和24 h也低于同期模型组[(55.98±6.89),(39.42±4.28)μmol/L;P均<0.05].②一氧化氮合酶活性:模型组、尼莫地平组和米帕明组再灌注2,12和24 h均高于假手术组(P<0.05);尼莫地平组和米帕明组各个时间点均低于模型组(P<0.05).③脑组织病理变化:尼莫地平组和米帕明组神经元损伤较模型组轻.结论:米帕明可降低局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织中一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性,从而对大鼠脑缺血再灌注有保护作用,其效果与尼莫地平相似.
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葡萄糖酸锌对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用
目的:观察心肌缺血再灌注损伤过程中血清中一氧化氮的浓度,一氧化氮合酶及铜锌-超氧化物歧化酶的活性,分析葡萄糖酸锌对心肌的保护作用及其可能机制.方法:实验于2005-10/2006-05在锦州医学院药理学实验室进行,50只SD大鼠随机分为5组,即假手术组,缺血再灌注模型组,葡萄糖酸锌167,250,357 mg/kg剂量组.采用左冠状动脉下穿线,拉紧丝线引起心肌缺血,放松丝线给予再灌注的方法建立心肌缺血再灌注损伤动物模型,假手术组,完成模型全部操作,只穿线不结扎.葡萄糖酸锌167,250,357 mg/kg剂量组,分别以相应剂量葡萄糖酸锌(溶于蒸馏水中,2 mL)灌胃,每次2 mL,上下午各1次,两次灌胃给药间隔时间为2.5 h.于末次灌胃1 h后行冠状动脉左前降支结扎30 min,再灌注60 min.缺血再灌注模型组,给予等容量的生理盐水灌胃,其他处理同上.采用硝酸还原酶化学比色法测定血清中一氧化氮浓度及一氧化氮合酶活性,抽提法测定血清中铜锌超氧化物歧化酶活性.结果:50只大鼠进入结果分析.①模型组大鼠血清中一氧化氮浓度、血清中总一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶及铜锌超氧化物歧化酶的活性较假手术组升高,结构型一氧化氮合酶的活性降低(P<0.01~0.05).②葡萄糖酸锌250,357 mg/kg组大鼠血清一氧化氮浓度较模型组升高(P<0.05,0.01);葡萄糖酸锌167,250,357 mg/kg组大鼠血清中总一氧化氮合酶的活性及血清中结构型一氧化氮合酶的活性较模型组升高(P<0.01,0.05),血清中诱导型一氧化氮合酶的活性降低(P<0.01,P<0.05);葡萄糖酸锌357 mg/kg组大鼠血清中铜锌-超氧化物歧化酶的活性升高(P<0.01).③血清中铜锌-超氧化物歧化酶活性与一氧化氮浓度呈正相关(r=0.92,P<0.01).结论:葡萄糖酸锌对缺血再灌注心肌具有保护作用,作用途径可能为:①通过降低诱导型一氧化氮合酶的活性,增强结构型一氧化氮合酶的活性而提高一氧化氮水平.②参与构成铜锌-超氧化物歧化酶,清除自由基.
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β肾上腺素能受体基因多态性与原发性高血压的关系
目的:β肾上腺素能受体包括β1,β2和β3三种亚型,分析其基因多态性与原发性高血压的关系.方法:试验于2003-02/2005-09在重庆医科大学生物医学工程研究室进行.选择在清华大学第一附属医院和重庆医科大学第二附属医院就诊和体检的150例原发性高血压患者,男80例,女70例,年龄(56.53±5.60)岁;130例正常对照者,男70例,女60例,年龄(55.62±8.63)岁,对试验均知情同意.测试受试者坐位血压.用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术和等位基因特异性聚合酶链反应法分析β1-肾上腺素能受体的Ser49Gly和Arg389Gly,β2-肾上腺素能受体的Arg16Gly和Gln27Glu,β3-肾上腺素能受体的Trp64Arg基因多态性,并分析其基因多态性与原发性高血压的相关性.结果:①β1-389原发性高血压组和对照组的Arg/Arg,Arg/Gly和Gly/Gly基因型频率分别为:0.56,0.32,0.12和0.74,0.22,0.04(P<0.05),Arg和Gly的等位基因频率在原发性高血压组和对照组分别为0.72,0.28和0.85,0.15,两组间差异显著(P<0.05)(OR=0.45,95%可信区间:0.30-0.69).②β2-16原发性高血压组和对照组的Arg/Arg,Arg/Gly和Gly/Gly基因型频率分别为:0.17,0.67,0.16和0.27,0.69,0.04(P<0.05).Arg和Gly的等位基因频率在原发性高血压组和对照组分别为0.51,0.49和0.62,0.38,两组间差异显著(P<0.05)(OR=0.64,95%可信区间:0.46~0.90).③β1-肾上腺素能受体的Ser49Gly,β2-肾上腺素能受体的Gln27Glu,β3-肾上腺素能受体的Trp64Arg的基因型频率和等位基因频率在原发性高血压组和对照组之间差异无显著性(P>0.05).所有组的基因多态性分布均符合Hardy-Weinberg定律.结论:在所研究的中国人群中,β1-389Arg/Gly和β2-16Arg/Gly基因多态性与原发性高血压的发病有联系.
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舒血宁注射液干预急性心肌梗死介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3β水平的变化
目的:观察急性心肌梗死经皮冠脉内介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3β及脂质过氧化反应水平变化及舒血宁注射液的干预作用.方法:选取2004-11/2005-09在解放军总医院行急诊经皮冠脉内介入治疗的急性心肌梗死患者45例.随机数字表法分为舒血宁组23例,男15例,女8例,平均年龄(56.8±10.3)岁.在经皮冠脉内介入治疗基础上加用舒血宁注射液40 mL静脉注射,1次/d,共7 d.对照组22例,男13例,女9例;平均年龄(55.3±11.5)岁.行经皮冠脉内介入治疗,另取15例健康人血浆为正常对照,平均年龄(52.3±8.3)岁.分别应用ELISA法、分光光度计法、聚合酶链反应法和western blotting法,检测患者入院时及术后第1,3,7天的血浆糖原合成酶激酶3β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、超氧化物歧化酶、丙二醛水平.结果:45例患者、15名正常人全部进入结果分析.①血浆糖原合成酶激酶3β mRNA及糖原合成酶激酶3β蛋白含量:舒血宁组和对照组患者入院时、术后1 d较正常组升高;术后3 d和7 d舒血宁组低于对照组(3 d:0.224±0.023比0.321±0.036,0.401±0.044比0.524±0.054;7 d:0.186±0.021比0.245±0.033,0.154±0.025比0.215±0.022,P<0.01).②血浆超氧化物歧化酶、丙二醛及肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平:舒血宁组和对照组患者入院时、术后1 d血浆白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、丙二醛水平均高于正常组;术后3 d和7 d患者血浆白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、丙二醛水平显著降低,舒血宁组低于对照组,超氧化物歧化酶活性高于对照组.结论:心肌梗死经皮冠脉内介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3β mRNA及蛋白水平呈先上升后下降的趋势,舒血宁注射液能减轻再灌注损伤,具有心肌保护作用,该作用可能与血浆糖原合成酶激酶3β mRNA及蛋白调节有关.
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脉压水平与经皮冠状动脉介入术患者的危险分层及预后评价
目的:通过对接受经皮冠状动脉介入治疗患者的临床特征,围手术期并发症和远期的疗效分析,了解脉压水平与经皮冠状动脉介入术患者的危险分层和预后关系.方法:选择2003-10/2005-10就诊于解放军第三○五医院心脏介入中心符合冠心病诊断标准并接受经皮冠状动脉介入治疗的631例患者.外周肱动脉压力测定收缩压、舒张压,脉压水平通过收缩压与舒张压差表示,冠状动脉病变的严重程度用冠脉病变积分表示.采用横断面前瞻性多变量观察研究,根据脉压>65 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和≤65 mm Hg进行分组,其中脉压>65 mm Hg组154例,男110例,女44例;脉压≤65 mm Hg组477例,男288例,女189例.观察患者临床特征,随访[随访时间(18.6±4.3)个月]主要心血管事件发生率.结果:631例患者均进入结果分析.①与脉压≤65 mm Hg组比较,脉压>65 mm Hg组年龄偏大,男性多见,高血压病史和糖尿病史多,C型病变和三支病变常见,冠脉病变积分高.②脉压>65 mm Hg组围手术期并发症发生率、住院期非致死性心肌梗死发生率和远期心源性死亡发生率显著高于脉压≤65 mm Hg组(16.8%,8.8%;5.2%,2.3%;1.3%,0.8%,P均<0.05).③多因素logistic分析冠脉病变严重程度与脉压、年龄、糖尿病有正相关,OR分别为1.181(95%CI 1.120~1.321),1.012(95%CI 1.009~1.213),1.273(95%CI 1.042~1.359).结论:脉压与冠状动脉病变的严重程度密切相关,与经皮冠状动脉介入术围手术期及远期不良心血管事件发生率增加密切相关,可作为全身心血管疾病的一个危险信号,指导早期干预.
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单纯肥胖者与代谢综合征患者血管内皮功能的比较
目的:比较单纯肥胖者与代谢综合征患者的血管内皮功能.方法:观察对象来自石家庄市2000-09/2001-06参加社区健康体检者.①体质量指数≥25 kg/m2的超重/肥胖者中,单纯肥胖组295例,代谢综合征组219例,另选172例体质量指数<25 kg/m2的健康人作为对照.②将肥胖者按体质量指数分为轻度肥胖(25~29.9 kg/m2)和重度肥胖(≥30 kg/m2),按腰围分为腹部脂肪轻度堆积(男<104 cm,女<88 cm)和重度堆积(男≥104 cm,女≥88 cm).③血管内皮舒张功能测定:所有受试者采用NAS-1000HF彩超诊断系统测定反应性充血时及含服硝酸甘油后肱动脉内径的变化.结果:686例受试者全部进入结果分析.①单纯肥胖组和代谢综合征组体质量指数、腰围、臀围和腰臀比均高于对照组(P<0.01~0.001),其中体质量指数和臀围在男女间比较差异不显著,腰围和腰臀比男性高于女性(P<0.05),而男性代谢综合征组又高于男性单纯肥胖组(P<0.05).②血管内皮舒张功能检测显示,反应性充血时,单纯肥胖组和代谢综合征组相对于基础血管内径变化的百分率均低于对照组[(7.79±3.93)%,(5.54±4.46)%,(11.25±3.98)%,P<0.05~0.01];代谢综合征组男性低于单纯肥胖组男性(P<0.05);男性代谢综合征组重度肥胖者低于轻度肥胖者(P<0.05);单纯肥胖组男性重度脂肪堆积低于男性轻度脂肪堆积者(P<0.05),代谢综合征组无论男女,重度脂肪堆积均低于轻度脂肪堆积者(P<0.05).结论:①单纯肥胖者已存在血管内皮功能异常,而代谢综合征患者中内皮功能损伤程度更显著,并且与腹部脂肪堆积密切相关.②代谢综合征患者中男性血管内皮功能损伤较女性更明显.
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NOD鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素水平变化与吡格列酮的干预效应
目的:观察含0.02%吡格列酮的饲料对NOD鼠糖尿病发病率的影响,分析巨噬细胞在吡格列酮预防NOD鼠糖尿病中的作用.方法:实验于2003-01/2005-01在中南大学湘雅二医院动物实验室及中心实验室完成.4周龄NOD雌鼠56只,随机数字表法分为吡格列酮组(n=25)和对照组(n=26),分别摄食含0.02%吡格列酮的混合饲料和普通营养饲料.自10周龄开始,每周测尿糖1次,尿糖阳性后用血糖仪测血糖,连续两次血糖≥16.7 mmol/L即诊断为糖尿病.两组各取12周龄NOD雌鼠15只,处死前4 d腹腔注射30 g/L的硫代乙醇酸钠2 mL,麻醉后摘除眼球法处死小鼠后腹腔灌洗收集巨噬细胞,加入脂多糖共同培养24 d后收集上清,ELISA法测细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平.结果:小鼠56只全部进入糖尿病发病率分析;进入腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的水平结果分析20只.①30周龄时,对照组25只小鼠有20只发生了糖尿病,发病率80.0%,平均发病时间为(139.2±38.2)d;吡格列酮组26只中有14只发生了糖尿病,发病率为53.8%,平均发病时间为(153.0±28.1)d,与对照组相比,吡格列酮组发病率明显降低(P<0.05).②12周龄时对照组NOD鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平与吡格列酮组差异无显著性意义[(537.4±112.49),(448.9±92.18)ng//L;(551.2±108.23),(461.7±80.49)nq/L,P>0.05].结论:吡格列酮在一定程度上预防和延缓NOD鼠糖尿病的发生;吡格列酮对NOD鼠糖尿病和胰岛炎的预防作用可能与巨噬细胞无明显关系.
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6-羟基多巴胺和MK-801抑制脊髓水肿的效应
背景:脊髓遭受急性损伤后,脊髓水肿是引发和加重脊髓组织病理改变的重要因素.去甲肾上腺素在损伤后立即引起微血管的收缩、内皮损伤、动脉通透性的增加,被认为是参与水肿.近年来许多研究发现,兴奋性氨基酸与细胞水肿有关.目的:观察选择性酚胺能神经元破坏剂、6-羟基多巴胺和天门冬氨酸的竞争性拮抗剂对脊髓急性损伤后发生水肿时的作用及其机制.设计:随机对照实验研究.单位:河北医科大学第三医院脊柱外科.材料:实验于2003-03/09在河北医科大学第三医院实验动物中心完成.实验选用Wistar大鼠160只,体质量300~350 g,雌雄不限,将所有大鼠随机分为3组,6-羟基多巴胺组60只,MK-801(5-甲基二氢二苯并环庚烯亚胺马来酸)组50只,对照组50只.方法:采用静力加载技术在Wistar大鼠T13椎体水平造成急性脊髓损伤.6-羟基多巴胺组在蛛网膜下腔注射6-羟基多巴胺,MK-801组在尾静脉注射MK-801治疗,对照组大鼠不给予治疗.应用神经学功能评分、组织含水量测定及光镜、电镜观察,比较各组间的水肿程度.主要观察指标:神经学功能评分及脊髓组织含水量.结果:160只大鼠纳入结果分析.①6-羟基多巴胺组伤后髓内去甲肾上腺素含量明显下降,由(217.45±4.26)ng/g降到(29.37±2.61)ng/g,差异有显著性意义(P<0.01).对脊髓组织水肿的有效抑制达24 h,伤后12 h可观察到明显的功能恢复,血管源性水肿表现轻.②MK-801组伤后24 h才表现为对水肿的抑制,神经功能在伤后早期恢复较对照组差异不显著(P>0.05),伤后24 h有明显的功能恢复(P<0.05),细胞毒性水肿表现轻.结论:去甲肾上腺素可以抑制脊髓损伤后早期发生的血管源性水肿,兴奋性氨基酸可以抑制稍后发生的细胞毒性水肿.
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大鼠抗组胺药敏感性细胞色素P450基因的克隆及其反转录病毒载体的构建和鉴定
目的:构建反转录病毒表达载体pLXSN-HP450.方法:实验于2004-12/2006-05在广西医科大学生化药理实验室完成.提取正常的Wistar大鼠肝组织的总RNA,反转录-聚合酶链反应技术扩增出抗组胺药敏感性细胞色素P450(HP450)基因.并克隆到pMD18-T载体,经蓝白斑筛选后进行聚合酶链反应,酶切,测序鉴定.BamHI,EcoRI双酶切构建好的重组质粒和反转录病毒载体pLXSN在16℃下经T4连接酶连接过夜,并转化到感受态细胞DH5α,以菌液为模板做聚合酶链反应,结合酶切筛选及鉴定阳性重组反转录病毒载体pLXSN-HP450.结果:反转录-聚合酶链反应扩增出HP450基因.重组质粒pMD18-HP450经双酶切后得到1 461 bp的酶切产物.测序的结果用Clustal W在线与Genebank对比,此目的基因与基因库中的H1基因100%同源.阳性重组载体pLXSN用其菌液聚合酶链反应扩增出目的条带.对重组体pLXSN-HP450进行双酶切得到1 461 bp和5 900 bp两条特异性条带.结论:克隆了HP450基因,并成功构建了重组反转录病毒载体pLXSN-HP450,为进一步研究肝癌的基因治疗奠定了基础.
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尿酸影响大鼠脊髓损伤后半胱氨酸蛋白酶3的表达及神经细胞凋亡
目的:观察尿酸对大鼠脊髓损伤后损伤段半胱氨酸蛋白酶3的表达及神经细胞凋亡的影响.方法:实验于2005-07/12在同济医院矫形外科实验室完成.选用雌性SD大鼠55只,按随机数字表法分为3组,空白对照组5只,脊髓损伤组和尿酸处理组各25只.脊髓损伤组和尿酸处理组大鼠用改良的Allen's打击法造脊髓损伤模型.空白对照组大鼠单纯切除椎板,不打击脊髓.脊髓损伤组和尿酸处理组大鼠分别于术后8 h,24 h,72 h,7 d,14 d取材,每时点处死5只大鼠;空白对照组大鼠于术后8 h处死取材.对损伤部位脊髓进行病理形态学观察;采用原位末端标记法标记凋亡细胞,计算凋亡细胞指数=凋亡细胞核数/总细胞核数;用免疫组化染色检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞.结果:纳入55只大鼠,全部进入结果分析,无脱失.①各组大鼠脊髓组织学检查结果比较:空白对照组大鼠脊髓未见出血、组织变性坏死等表现.与脊髓损伤组相比,尿酸处理组大鼠损伤脊髓出血坏死减少,炎性细胞浸润减轻.②各组大鼠脊髓组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞数及神经细胞凋亡指数比较:相同时点尿酸处理组大鼠的神经细胞凋亡指数和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3阳性细胞数均显著低于脊髓损伤组(t=3.057~6.965,P<0.05).结论:尿酸可以抑制脊髓神经细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3表达,对损伤脊髓组织具有保护作用.
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痹肿消汤对类风湿关节炎患者日常生活能力的影响
目的:观察痹肿消汤治疗前后类风湿关节炎患者主动活动度及日常生活能力的改变,论证痹肿消汤的临床疗效.方法:选择于2004-10/2006-05在中南大学湘雅医院中西医结合科治疗的活动期类风湿关节炎患者86例,痹肿消汤组44例和甲氨喋呤组42例.痹肿消汤组用痹肿消汤(白花蛇舌草15 g,丹参15 g,苡米30 g,骨碎补15 g,络石藤20 g,肿节风30 g等共16味药,购自湘雅医院中药房;常规煎汤,药液浓度为1.038 g/mL)治疗,2次/d口服,每日1剂.甲氨喋呤组选用甲氨喋呤(20 mg,1次/周,配以等量叶酸口服)和尼美舒利片(0.1 g,2次/d)联合用药,均治疗3个月为1疗程.比较两组患者关节疼痛指数、关节压痛指数、关节肿胀指数、晨僵时间、握力以及日常生活能力等指标.关节肿胀指数、关节疼痛指数,关节压痛指数评定按美国风湿病协会制订标准.采用改良Barthe1指数分别评定患者治疗前和治疗后的日常生活能力.评估内容10项,包括洗澡、修饰各5分,进餐、穿衣、用厕、可控制大便、可控制小便、上下楼梯各10分,床椅转移、平地行走45 m各15分.结果:纳入类风湿关节炎患者86例全部进入结果分析.痹肿消汤组的患者其晨僵时间、关节疼痛、关节肿胀、关节压痛、关节功能障碍指数及双手平均握力以及日常生活能力评分各项指标均较治疗前均显著改善(P<0.01),甲氨喋呤组较治疗前亦有显著改善(P<0.01,0.05),但痹肿消汤组明显优于甲氨喋呤组(P<0.01~0.05).结论:痹肿消汤和传统的非类固醇抗炎药和慢作用药物联合应用均能改善类风湿关节炎患者关节主动活动度及提高患者日常生活能力,但痹肿消汤效果更为明显.
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LARS人工韧带关节镜下移植治疗膝关节后交叉韧带损伤的随访效果分析
目的:观察经关节镜下行LARS(ligament advanced reinforcement system)人工韧带移植重建膝关节后交叉韧带损伤患者膝关节功能的治疗结果.方法:选择2004-08/2006-01在上海长征医院骨科关节外科因膝关节后交叉韧带损伤行关节镜下LARS人工韧带重建手术的患者15例,均为运动损伤,所有患者均知情同意.全部病例予以LARS人工韧带(法国LARS公司制造,型号:PPLY 110)进行后交叉韧带重建或加强手术,LARS人工韧带的主要材料为高韧性的聚酯纤维(聚对苯二甲酸乙二醇脂),组织相容性好,由于其特殊的编制方式,胶原纤维和血管内皮细胞可长入其中.术后静脉常规使用抗生素1 d,返回病房后即开始使用CPM机予以被动活动,术后3 d扶拐下地行走,2个月时恢复正常的活动或体育训练.术后1,2,6,12,24个月随访,检查膝关节的稳定程度、活动范围及疼痛部位.按Lysholm膝关节评分系统评估膝关节功能,满分为100分,84分以上为膝关节功能正常,66~84分为尚可,低于65分较差.结果:15例患者全部进入结果分析,无脱落.①15例患者随访6~24个月,其中6~12个月10例,12~18个月2例,18~24个月3例,平均11个月.所有患膝不稳定症状消失,关节功能良好,伸屈度0°~(130±10.2)°.所有病例均于术后2个月左右恢复正常体育活动,无急慢性滑膜炎出现.②患者术后末次随访时的Lysholm膝关节评分显著高于术前(85.5±2.33,45.2±1.23,t=9.547,P<0.01).结论:LARS人工韧带具有以下特点:①适用于术后早期康复干预,早期自主运动者.②术后膝关节功能恢复快.③无并发症出现,组织相容性好.④为运动性损伤膝关节后交叉韧带损伤重建较为理想和安全的移植材料.
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分离纯化牛嗜铬细胞方法改进
目的:建立一种稳定、经济、简单的牛肾上腺髓质嗜铬细胞体外分离、纯化方法,为临床移植提供充足、健康的细胞来源.方法:实验于2004-01/2005-12在中科院大连化学物理研究所生物医学材料工程组实验室完成.将胶原酶消化法和机械分离法结合,分离新生牛嗜铬细胞;采用Percoll非连续密度梯度离心法纯化新生牛嗜铬细胞.采用相差显微镜观察牛嗜铬细胞形态,椎虫蓝排斥染色观察牛嗜铬细胞活性,组织化学染色鉴定牛嗜铬细胞属性和纯度,免疫组化染色观察牛嗜铬细胞的功能活性.结果:①健康的牛嗜铬细胞集中在一定密度的两层分离介质之间,红细胞完全沉降于离心管底部,而皮质细胞和细胞碎屑则分散在特定密度的分离介质中.②平均每个牛肾上腺可分离得到(0.7~3.1)×108个牛嗜铬细胞.③将分离得到的牛嗜铬细胞进行椎虫蓝排斥染色,显示新鲜分离的牛嗜铬细胞存活率大于99%,具有合成儿茶酚胺的功能活性.结论:机械分离结合胶原酶灌注消化法分离牛嗜铬细胞后,经Percoll非连续等密度梯度离心可以有效纯化牛嗜铬细胞,分离的细胞数量多,纯度高,有合成儿茶酚胺的功能活性.
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基因转染猪皮在老年顽固性皮肤溃疡自体皮片移植中的应用
目的:观察基因转染猪皮在老年顽固性皮肤溃疡自体皮片移植中的干预效果.方法:选择2002-01/2006-10在成都医学院第一附属医院应用基因转染猪皮处理的老年顽固性皮肤溃疡患者20例,均知情同意.简单清创后应用基因转染猪皮(购自重庆宗申军辉生物技术有限公司,为新鲜制备全厚猪皮,然后冻存于液氮中备用,厚度为2.0~3.0 mm,规格分为100 mm×100 mm,100 mm×20 mm,200 mm×400 mm等,存储和运输均在液氮中进行,使用前用40℃水复温)覆盖创面,培养新鲜肉芽组织,创造手术条件,后期行自体皮片移植术治疗.结果:患者全部治愈出院,其中4例出院后植皮区破溃,门诊换药数次后愈合.所有患者在治疗过程中未发生严重并发症,供皮区愈合良好,未遗留瘢痕.20例患者有16例用转基因猪皮处理创面1次,4例患者用转基因猪皮处理两次后行自体游离皮片移植,皮片成活率为90%~100%.结论:应用基因转染猪皮处理顽固性皮肤溃疡创面能有效提高自体皮移植成活率,可以提高老年顽固性皮肤溃疡的治愈率.
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经紫外线预照射移植猪皮片覆盖烧伤创面时间的观察
目的:观察经紫外线预照射移植猪皮片对烧伤创面覆盖时间的影响.方法:选择2004-01/2005-12四川攀枝花钢铁有限责任公司职工总医院烧伤科收治的需要植皮的烧伤患者35例,患者均知情同意.按随机数字表法分为2组,紫外线预照射组18例,对照组17例.紫外线预照射组使用的猪皮片经过40 W紫外线预照射,波长为253.7 nm,灯管距猪皮30 cm,照射时间2 h;对照组使用的移植猪皮片未做紫外线预照射.将移植猪皮片真皮面覆盖于切削痂创面上,加压包扎,用手术刀片打洞以利引流.观察整体猪皮片的存活时间,在术后5,10,15 d取0.2 cm×0.3 cm大小的整层猪皮制成匀浆,检测相关生化因子水平:应用双抗体夹心酶联免疫吸附法测肿瘤坏死因子α含量,应用鲎法测内毒素含量,应用黄嘌呤氧化酶法测超氧化物歧化酶活性,应用硫代戊巴比妥酸法测丙二醛含量.移植猪皮片出现外观苍白,与创面分离,融解脱落均视为失效.结果:35例烧伤患者全部进入结果分析,无脱落.①紫外线预照射组猪皮平均烧伤创面覆盖时间为(18.3±2.4)d,显著高于对照组(13.7±3.1)d(P<0.05).覆盖猪皮术后15 d,紫外线预照射组有3例移植猪皮片失效,对照组有9例移植猪皮片失效.②随时间延长,两组患者覆盖猪皮片局部组织匀浆肿瘤坏死因子α、内毒素、丙二醛含量均呈升高趋势,术后10 d和15 d紫外线预照射组显著低于对照组(P<0.01).两组患者覆盖移植猪皮片局部组织匀浆超氧化物歧化酶活性随时间延长均呈下降趋势,术后10 d和15 d紫外线预照射组显著高于对照组(P<0.01).结论:紫外线预照射新鲜猪皮用于覆盖烧伤创面能明显延长创面保护时间,其作用途径可能与减轻局部组织脂质过氧化反应程度及炎性因子水平有关.
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大鼠胰岛细胞的分离提纯及移植效果观察
背景:胰岛细胞移植已成为治疗1型和部分2型糖尿病的有效途径,但供体不足的问题限制了其发展.目的:改进胰岛细胞的分离和纯化方法,并观察其移植效果.设计:实验方法改进.单位:中国医科大学实验动物部和细胞生物研究室.材料:实验于2006-01/10在中国医科大学实验动物部和细胞生物研究室完成.供体为普通级封闭群Wistar大鼠,雌雄不限,体质量250~300 g;受体为普通级封闭群SD大鼠,雄性,体质量180~220 g,两种大鼠均购自中国医科大学实验动物部(许可证号:SYXK(LIAO)2003-0013).方法:①胰岛细胞的分离纯化及胰岛功能评估:取未禁食的Wistar大鼠,麻醉后处死.于胆总管起始处剪一小口,将连着装有胶原酶的注射器的1 mm直径的腰麻管顺行插入,将冷的胶原酶溶液(1.5 g/L)注入胰管内,使胰腺充分膨胀.切取胰腺,将装有胰腺的离心管水浴消化,水浴期间间断加入1 mol/L的NaOH使消化液的pH值保持在7.8±1.0,经Ficoll密度梯度离心法纯化胰岛.应用双硫腙法评估胰岛的纯度,应用丫啶橙/碘丙啶法评估胰岛的存活率,存活率=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%.通过胰岛素释放实验检测胰岛活性:胰岛素释放指数=第3小时(高糖环境)的胰岛素含量/第2小时(低糖环境)的胰岛素含量.②胰岛移植效果的观察:受体SD大鼠腹腔内注射链脲霉素,非禁食状态下2次血糖>16.7 mmol/L确定为糖尿病大鼠.将糖尿病大鼠按随机数字表法分为两组,即胰岛移植组和糖尿病组,每组8只.胰岛移植组于肾被膜下注射约1 000个胰岛,糖尿病组注射相应体积的1640培养液,再随机取8只血糖浓度≤5.5 mmol/L的SD大鼠作为正常对照组.术后每天检测大鼠血糖,以非禁食血糖小于11.1 mmol/L者视为胰岛移植存活.胰岛移植组大鼠血糖正常3 d后对胰岛移植组、糖尿病组和正常对照组大鼠分别进行静脉糖耐量试验,测定0,15,30,60,90及120min血糖.主要观察指标:胰岛的纯度、存活率及活性.结果:纳入受体SD大鼠24只,全部进入结果分析,无脱失.①平均每只大鼠胰腺可获得(1150±141)个胰岛,纯度>95%,存活率>98%,胰岛形态完好.②体外胰岛素释放实验低、高糖组的胰岛素释放量为(70.5±6.9)mlU/L,(321.4±11.6)mlU/L,胰岛素释放指数为4.60±0.52,提示所提取的胰岛β细胞有良好的功能.③胰岛移植组大鼠胰岛移植当天血糖既开始下降,3 d后血糖下降至正常,维持正常血糖水平(6±2)d;而糖尿病组大鼠血糖均在16.7 mmol/L以上.胰岛移植组静脉葡萄糖耐量试验曲线与正常对照组相似.结论:经原位灌注法分离、Ficoll密度梯度离心纯化的胰岛制备技术可以获得高纯度和活力良好的大鼠胰岛细胞.
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前路与后路腰椎间盘切除后Cage植入治疗与射频治疗改善椎间盘源性下腰痛的效果比较
目的:比较采用射频疗法与前路和后路椎体间融合术治疗椎间盘源性下腰痛疗效差别.方法:①于1999-01/2005-08在解放军总医院骨科、北京大学第三医院骨科有完整临床资料的椎间盘源性腰痛患者53例,男33例,女20例;年龄33~58岁.纳入对象影像学检查显示无明显神经根受压、腰椎不稳等其他腰椎疾病;符合国际疼痛学会1988年制定的椎间盘造影阳性标准;均对治疗方案知情同意.②所有入选病例依据治疗方法不同分为3组:射频组21例:行经皮穿刺射频汽化成型术;前路椎体间融合组14例:行腹膜外椎间盘切除、Cage植入、结合后路经椎板关节突螺钉固定、髂骨取骨植骨融合术;后路椎体间融合组18例:行后路椎间盘切除、椎间Cage植入结合椎弓根螺钉内固定后外侧植骨融合术.③统计手术时间和出血量,术后1年进行放射学评估融合情况.采用目测类比评分评估患者疼痛程度(无痛为0分,腰痛到无法忍受的大程度为10分).参照Oswestry功能障碍指数评估患者腰部功能恢复程度(分值越高表示功能受限程度越重).分别于术前、术后1年进行评分.改善率=[(术前评分-术后评分)/术前评分]×100%.分级标准,优:改善率≥75%.良:改善率50%~75%;可:改善率25%~50%;差:改善率<25%.④计量资料差异比较采用连续型重复测量资料的方差分析.结果:椎间盘性下腰痛患者53例均进入结果分析.①手术时间和出血量比较:后路椎体间融合组手术时间和手术出血量明显长于/高于其他2组(P<0.05),射频组明显短于/小于前路椎体间融合组(P<0.05).②术后疼痛改善情况:射频组良9例,可10例,差2例;前路椎体间融合组和后路椎体间融合组疼痛评分改善均为优.射频组目测类比评分改善率明显低于其他2组(P<0.05).③术后功能改善情况:射频组良5例,可13例,差3例;前路椎体间融合组优12例,良2例;后路椎体间融合组优6例,良12例.射频组Oswestry功能障碍指数改善率明显低于前、后路椎体间融合组(P<0.05),前路椎体间融合组Oswestry功能障碍指数改善率明显高于后路椎体间融合组(P<0.05).④椎体融合情况:前、后路椎体间融合组术后1年椎体融合率均为100%.结论:射频治疗创伤小但疗效差,前路椎间盘切除Cage植入结合后路经椎板关节突螺钉固定与后路椎间盘切除椎间融合结合椎弓根固定可明显改善疼痛,前者创伤相对小,功能恢复更好,是治疗椎间盘源性腰痛的佳选择.
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采用非骨水泥及骨水泥型假体经微创双切口全髋关节置换术后近期效果与常规手术的比较
目的:对比传统全髋关节置换术和微创双切口全髋关节置换术的临床应用结果,并分析骨水泥型假体在微创手术应用中的可行性.方法:以2003-05/2006-05南京医科大学附属南京第一医院骨科行全髋关节置换术的患者82例为观察对象.经知情同意,分为微创手术组32例,常规手术组50例.微创手术组接受微创双切口髋关节置换,采用Zimmer HG非骨水泥假体22例,Zimmer Versys非骨水泥假体5例,北京普鲁斯钢研公司Müller骨水泥假体5例.采用Berger提出的方法,①前侧切口:采用Watson-Jones入路的近侧部,在髋关节前方,平行股骨颈纵轴线外下段投影作一长约7 cm的斜切口,"T"型切开关节囊,于小转子上方1 cm处截骨,按常规步骤置入髋臼假体.②后外侧切口:长约2.5 cm,术者于大转子处经皮插入克氏针1枚,穿透臀大肌在臀中肌和梨状肌间作-软组织隧道,插入皮肤保护套管作一切口,放置股骨假体,于前方切口置入合适颈长的股骨头.常规手术组接受常规全髋关节置换术,采用LINK RIB非骨水泥假体22例,CLASSIC骨水泥假体13例,北京普鲁斯钢研公司Müllr骨水泥假体15例.所用假体均经过厂家的生物相容性、生物力学特性检测,及三期临床认证后使用.比较两组手术切口长度、手术时间、术中、术后的出血量、术后开始下床活动的时间、及术后1周、6周、3个月、6个月的髋关节Harris评分等.结果:患者82例全部进入结果分析.全部病例随访6~12月,平均8个月.①微创手术组前、后方切口分别为61(5.4~7.5),3.6(3.0~4.5)cm,常规手术组为12.0(9.0~14.0)cm,两组比较差异有显著性意义(P<0.05).②微创手术组手术时间长于常规手术组[100(90~220),80(60~150)min,P<0.05].③术后出血量微创手术组少于常规组[(119±48),(227±153)mL,P<0.05];但术中出血量差异无显著性意义[(252±97),(280±107)mL,P>0.05].④微创手术的患者在术后主动直腿抬高时间短于常规组,术后开始下床活动时间明显缩短(P<0.05),但弃拐时间两组比较差异无显著性意义(P>0.05);微创手术组术后1周、6周髋关节Harris评分高于常规手术组但术后3个月、6个月的评分差异无显著性(P<0.05).⑤骨水泥型假体用于全髋关节置换术时,股骨骨水泥比较难以清除,常需切除前方关节囊方能彻底清除.结论:微创双切口全髋关节置换术的近期术后恢复明显优于常规手术组,但远期疗效尚无明确优势;骨水泥型假体应用于微创手术是需掌握好适应症.
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不同结构松质骨填充植入股骨头负重区缺损的有限元分析
目的:应用三维有限元分析法比较松质骨粒和结构性松质骨块植骨重建股骨头负重区缺损对股骨近段应力分布的影响.方法:实验于2005-06/2006-03在解放军总医院骨科研究所完成.采用Taddei的基于连续CT断层构建的人股骨三维有限元模型,在ANSYS 5.7分析软件中划分52 350个四面体单元,模拟单腿站立时髋臼在股骨头表面负重区施加的面载荷,合力指向股骨头形心,与股骨干长轴的夹角成25°,大小2 100 N,分别在正常状态时、股骨头负重区缺损时及原位松质骨植入、异位松质骨植入和松质骨粒植入时计算股骨近段的应力分布.结果:①正常股骨近段的应力峰值集中在股骨颈上下方,股骨头表面的应力峰值为2.12 MPa,深部应力高于表面应力峰值为6.37 MPa.②负重区缺损模型下,股骨头表面应力增高,峰值达10.39 MPa,股骨头内部应力低于表面.③在松质骨粒植入后,表面应力有所下降,但仍然高于内部,应力峰值达8 55 MPa.④异位结构性松质骨植入后表面应力峰值为2.43 MPa,与正常时差别不大;而原位松质骨块植入后的应力曲线几乎与正常应力曲线重合.结论:结构性松质骨块的植入对恢复股骨头表面及内部的应力水平要优于松质骨粒.
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不同成分灌注液对超声乳化术中兔角膜内皮细胞形态结构的影响
背景:灌注液的成分与其保护角膜内皮功能之间的联系一直是眼科界和制药业研究的热点课题.目的:观察超声乳化术中使用不同灌注液对兔眼角膜内皮细胞结构及功能的影响.设计:随机分组对照动物实验.单位:锦州医学院实验动物中心室,一所市级医院实验动物手术中心实验室.材料:实验于2004-09/2005-03在锦州医学院实验动物中心实验室和锦州市亚东眼科医院实验动物手术中心实验室进行.清洁级3.5月龄纯种日本大耳白兔16只,随机分为4组:正常对照组、生理盐水组、世可组和平衡盐液组,每组4只.灌注液世可(沈阳齐兴制药有限责任公司生产);平衡盐液(美国Alcon公司生产).方法:用100 mL/L水合氯醛(3 mL/kg)腹腔麻醉,眼部用4%盐酸奥布卡因滴眼液表面麻醉.行双眼手术.使用美国Alcon超声乳化仪,常规显微手术器械,于上方巩膜缘后2 mm作长约3.5 mm的巩膜隧道切口,穿刺入前房,注入粘弹剂Viscoat(Alcon公司生产)0.25mL;环行撕囊,直径约5 mm;超声乳化头置于中央区乳化吸出晶体核及皮质;术毕关闭切口.于术前和术后6 h采用接触性角膜内皮显微镜进行角膜内皮细胞形态学定量测定:角膜内皮细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率和变异系数.术后6 h应用锥蓝-茜素红活性染色,光镜下观察各组角膜内皮细胞微细结构的变化.主要观察指标:①角膜内皮细胞形态学定量分析(角膜内皮细胞密度、细胞平均面积、变异系数和六边形细胞百分率).②角膜内皮细胞形态结构特征.结果:16只大耳白兔均进入结果分析.①术前各组间各项指标比较差异均无显著性.②细胞密度、细胞面积、六边形细胞百分率、变异系数:术后6 h生理盐水组、世可组和平衡盐液组均低于正常对照组(P<0.05),世可组和平衡盐液组对比差异无显著性(P>0.05).③光镜显示生理盐水组角膜内皮细胞形态改变明显,世可组和平衡盐液组角膜内皮细胞改变轻微,无细胞坏死.结论:在超声乳化术中,灌注液对角膜内皮的损伤为化学性损伤,在相同手术条件下,国产灌注液世可对角膜内皮细胞具有良好的保护作用.
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原发性高血压的基因治疗前瞻
目的:综合分析目前原发性高血压基因治疗的前景及其面临的主要问题.资料来源:应用计算机检索Pubmed数据库1996-01/2006-01有关原发性高血压基因治疗的文章,检索词"hypertension,gene therapy",限定文章种类为"English".同时检索万方数据2000-01/2006-01有关原发性高血压基因治疗的文章,检索词"原发性高血压,基因治疗/疗法".资料选择:纳入标准:①关于原发性高血压基因治疗策略的研究.②关于基因治疗正义及反义基因的研究.③关于原发性高血压基因治疗载体的研究.排除标准:陈旧或重复性研究及综述.资料提炼:共收集到195篇与原发性高血压基因治疗相关的文献,其中30篇符合纳入标准.资料综合:①原发性高血压基因治疗目前有两种策略,即反义抑制策略和过度表达策略.反义抑制策略减少原发性高血压和心血管病理生理相关的基因转录和翻译;过度表达策略使血压降低相关基因的表达都增加,从而增加舒血管物质的生成使血管舒张.②原发性高血压基因治疗要选择高效转染分裂和非分裂细胞,易于大量制造,无免疫原性,无毒副作用,可载入大分子DNA,能整合进入宿主基因组,且不影响其他基因的载体.③目前面临着原发性高血压靶基因的界定、载体的选择等问题.结论:靶基因的界定,载体的构建和基因转移法是原发性高血压基因治疗的关键,基因治疗可减少传统药物治疗带来的副作用,降低原发性高血压的发病率,甚至治愈原发性高血压.
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基因治疗与心力衰竭
目的:探讨基因治疗方案的有效性和安全性.资料来源:应用计算机检索PUBMED1980-01/2006-10和EMCC 1994-10/2006-10与心力衰竭的基因治疗相关文章,检索词"Gen TheraPY,Heart Failure",并限定文章语言种类为"English";同时计算机检索CMCC1994-01/2006-10的相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词"基因治疗、心力衰竭".资料选择:对资料进行初审,选取试验包括上述治疗组和对照组的文献,然后筛除明显不随机临床试验的研究,对剩余的文献开始查找全文,进一步判断是否为RCT.纳入标准为:①试验包含平行对照组,即一般药物治疗.②治疗组为转基因治疗.资料提炼:共收集到49篇相关的随机和未随机试验,31个试验符合纳入标准.其余的排除.资料综合:31个试验包括478例动物模型,分别对应用不同靶点的转基因或基因敲除等方案进行治疗者予以评价.31篇文章中有10篇未达到预期的治疗目标,主要是在目的基因的选择及转染载体的选择方面出现了偏差.结论:虽动物试验取得了一定的成果,但尚无人体基因治疗的文献报道,随着基因技术的进步,基因治疗有望成为治疗心力衰竭的新途径.
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糖尿病足的治疗及进展
目的:对糖尿病足治疗的现状及进展进行综述,了解其治疗的有效措施.资料来源:应用计算机检索Medline 2003-01/2005-12期间的有关糖尿病足治疗的文献,检索词"diabetic foot,diet therapy,drug therapy,radiotherapy"等,限制语种为"English".同时计算机检索中国生物医学文献数据库CBM2003-01/2005-12期间的相关文献,检索词"糖尿病足,治疗",限定语种为中文.资料选择:选取包括具有神经、血管或感染情况的糖尿病足治疗的相关文献,进行初审,纳入随机对照临床试验、Meta分析和临床分析的文章.排除综述、个案报道.质量评价主要考察资料的真实性、严密性、实施过程是否严格及统计学处理的合理性.资料提炼:共收集义献91篇,纳入文献31篇.资料综合:糖尿病足是周围神经病变、缺血、足部畸形和感染共同作用的结果,是糖尿病发展后期的严重并发症,明确其发病机制对探讨疾病的发生发展有重要意义,诊断糖尿病足时应该明确其神经、血管、感染等情况.治疗方案也应根据溃疡的严重程度(Wagner分级)、血管状况、感染和神经病变的情况进行有针对性的治疗.结论:糖尿病足的短期效果通常比较理想,远期效果欠佳,只有明确糖尿病足的神经、血管、感染等情况,有针对性地治疗才能提高保肢率和降低死亡率.
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糖尿病患者的细胞移植治疗
目的:回顾近年细胞移植治疗糖尿病的现状,认识细胞移植治疗糖尿病的新进展及大规模应用尚需解决的难题.资料来源:应用计算机检索Pubmed 1998-01/2006-09有关细胞移植治疗糖尿病的文献,检索词为"Cells transplantation,Stem cell,Diabetes",并限定文章语言种类为English.同时检索中国全文期刊数据库2000-01/2006-10有关细胞移植治疗糖尿病的文献,检索词为"胰岛素细胞,干细胞,糖尿病",限定文章语言种类为中文.资料选择:对资料进行初审,选取包括细胞移植与糖尿病的相关文献,开始查找全文.纳入标准:①胰岛细胞移植在糖尿病中的应用.②干细胞移植与糖尿病.排除标准:综述文献、重复研究及Meta分析类文章.资料提炼:共收集到134篇关于细胞移植与糖尿病的英文文献,纳入33篇;另外收集到16篇中文文献,纳入3篇进行综合分析.资料综合:细胞移植治疗糖尿病的主要细胞来源有成人及胎儿胰岛细胞、异种胰岛细胞,潜在来源有肝干细胞、神经干细胞、骨髓干细胞等成体于细胞和胚胎干细胞.其临床应用前仍存在许多难题,如移植物的来源、免疫排斥、远期疗效、干细胞诱导分化等.随着这些基础研究和临床应用难题的解决,细胞移植必将成为治疗糖尿病有希望的方法.结论:除胰岛细胞外,干细胞移植尤其是胚胎干细胞的应用,将为糖尿病的治疗提供新的途径.
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缺血后适应的研究与进展
目的:缺血后适应即冠状动脉再灌注开始时对冠脉进行短暂、重复的开通及再闭过程,随后恢复冠状动脉血流,对缺血再灌注心脏有显著保护作用.总结并分析缺血后适应对缺血再灌注心脏的保护作用及其机制.资料来源:应用计算机检索Medline 1986-01/2006-05关于缺血后适应的文章.检索词"myocardial protection,Ischemic postconditioning,Ischemia-reperfusion injury"并限定文章的语种类为English.资料选择:对资料进行初审,纳入标准:关于缺血后适应机制及心脏保护作用的研究.排除标准:重复性研究.资料提炼:共收集到符合上述要求的文献51篇,排除21篇重复性研究.30篇符合纳入标准:其中26篇关于缺血后适应的研究,4篇关于缺血后适应的综述.资料综合:缺血后适应对心脏的保护作用包括缩小心肌梗死面积、对抗心律失常等.缺血后适应对心脏的保护作用的机制涉及腺苷、一氧化氮、线粒体ATP敏感K通道、再灌注损伤存活激酶通路、线粒体可渗透转运孔隙等许多方面和信号传导途径.结论:缺血后适应现象已经被许多独立的实验室应用大、小动物在体和体外模型及细胞培养模型所观察.与缺血预适应相比,缺血后适应可能会有更广阔的临床应用前景,其机制需进一步研究.
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低氧训练对心血管系统形态结构和功能的影响
目的:探讨低氧刺激和低氧训练对机体心肌、红细胞、微血管、血流变和心血管系统机能的影响.资料来源:应用计算机检索Medline数据库和中国期刊全文数据库1995-01/2005-06有关缺氧对心血管系统形态、结构、机能的影响以及低氧训练的作用及其机制的相关文献,检索词为"缺氧,低氧训练,心血管系统".资料选择:纳入标准:①选取针对性强的文献.②保留近期和发表在权威杂志的文献.③同一领域的文献则选择近期发表或权威杂志的文献.排除标准:综述文献、重复研究、Meta分析类文章.资料提炼:共检索到74篇相关文献,其中32篇文献符合要求,排除42篇.资料综合:缺氧刺激和低氧训练对机体心肌、红细胞、微血管、血流变和心血管系统机能都有一定的影响;合理有效的低氧训练和适宜低氧刺激可以引起心血管系统产生良好的适应性变化,机能能力提高,进而提高机体的健康水平和运动能力;低氧训练或低氧刺激选择不当,可能会导致心血管系统的形态、结构出现损伤或病理变化.结论:低氧训练、低氧适应或急性低氧对机体的心脏、血管和血液等的结构形态、生理生化指标、功能的影响非常复杂,合理利用低氧训练或低氧适应措施,对机体有良好的影响.
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肾移植术后重症肺炎12例报道
目的:分析总结12例肾移植术后肺炎患者的诊疗方法及预后.方法:选择2004-05/2006-10广东省中医院收治的肾移植术后肺炎患者12例,均知情同意.肺炎发病于肾移植术后3个月者7例,3.5个月者1例,4个月者3例,5个月者1例.主要治疗措施为早期撤除免疫抑制剂,以面罩给氧、双水平气道正压通气或气管插管,及时纠正低氧血症;采取多种手段检测致病原,根据药敏试验给予针对性治疗;选择鼻胃管给予胃肠营养,部分患者静脉营养,强化营养支持.治疗过程中每两三天行肺部影像学检查和血气分析,评估疗效;每两三天检测移植肾功能,以早期诊断急性排斥反应.结果:12例患者全部进入结果分析,无脱落.病原检测结果:真菌性肺炎3例;巨细胞病毒肺炎4例;细菌性肺炎3例,含混合性感染1例;2例病原未明确.2例巨细胞病毒肺炎患者入院1周内迅速进展至急性呼吸窘迫,呼吸衰竭死亡;余10例患者痊愈,其中1例发生肺间质纤维化,影响生活质量.结论:及早调整免疫抑制方案、及时明确病原和有效纠正低氧血症是治疗移植受者严重肺部感染的关键.
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肾移植术后肺部感染特征
目的 观察肾移植术后患者肺部感染的特点及预后.方法 选择2003-01/2006-06郑州市第三人民医院血液科收治的肾移植术后肺部感染患者27例,患者及家属均知情同意.总结其感染发生时期、病原菌检出情况、临床表现、抗感染药物应用情况等,分析各因素对肾移植术后肺部感染特征及预后的影响.抗感染治疗2~4周(平均3周)后进行疗效评估.结果 27例患者全部进入结果分析.①肺部感染发生在肾移植后6个月内者25例,其中3个月内者18例,4~6个月者7例.②病原菌阳性率7.8%.③发生成人呼吸窘迫综合征者病死率35.7%(5/14).④治疗有效21例,死亡6例,总病死率22.2%,死亡者在治疗过程中均未加用糖皮质激素.2005年元月之后收治的患者对新一代抗真菌药物更敏感.结论 肾移植术后6个月内发生肺部感染风险大,病原菌检出率低,发生成人呼吸窘迫综合征者预后差.适当选择糖皮质激素可改善肾移植术后肺部感染患者预后,抗真菌药物的研发应用可降低肺部感染病死率.
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长期使用免疫抑制剂致卡氏肺孢子虫肺炎大鼠细胞免疫应答改变及苦参合剂的干预作用
目的:观察长期使用免疫抑制剂致卡氏肺孢子虫肺炎大鼠灌胃苦参合剂后细胞免疫功能的变化情况,探讨中药在器官移植后免疫调节及防治感染中的作用.方法:实验于2005-05/2006-03在吉林医药学院基础部病原学教研室完成.选用成年健康雌性SD大白鼠40只,由哈尔滨医科大学提供(合格证号:02473146).每鼠皮下注射醋酸可的松25mg/次,2次/周,建立卡氏肺孢子虫肺炎大鼠模型.按随机数字表法分为2组,苦参合剂组和模型组各20只.苦参合剂组用苦参合剂3 mL/kg灌胃,由苦参、秦皮、黄柏、麦芽、黄芪及丹参等组成,2次/d.给药6周后麻醉大鼠,采集肺泡灌洗液.①将肺泡灌洗液用冰冻真空抽干法浓缩10倍后,用双抗体夹心法ELISA法测定可溶性白细胞介素2受体水平.②大鼠经摘眼球取血,进行淋巴细胞分类计数.③应用冻干抗体致敏的红细胞花环试剂盒检测CD3+,CD4+亚群.结果:40只大鼠全部进入结果,无脱失.①苦参合剂组大鼠外周血的淋巴细胞分类计数显著高于模型组(5.1±1.3)%,(0.8±0.3)%(P<0.01).②苦参合剂组大鼠的CD3+,CD4+细胞百分率均显著高于模型组[(46.8±1.9)%,(26.1±2.1)%(P<0.01);(38.4±2.6)%,(17.3±2.0)%(P<0.01)].③苦参合剂组大鼠可溶性白细胞介素2受体水平低于模型组低(331.7±27.8)U/mL,(474.5土34.4)U/mL(P<0.05).结论:苦参合剂可以增强卡氏肺孢子虫肺炎模型大鼠的细胞免疫功能,可作为器官移植后长期使用免疫抑制剂致卡氏肺孢子虫肺炎治疗的辅助用药.
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沙土鼠脑缺血后再灌注神经细胞凋亡与参附注射液联合尼卡地平预处理的影响
目的:检测经参附注射液和尼卡地平联合预处理后的沙土鼠脑组织中抑凋亡基因bcl-2的表达,探讨参附注射液联合尼卡地平预处理对脑缺血后再灌注神经细胞凋亡的影响.方法:实验于2005-07/09在河南大学麻醉与危重病医学研究所完成.50只健康成年沙土鼠随机分成5组,每组10只.①假手术对照组:只进行分离颈部血管,不夹闭双侧颈总动脉.②脑缺血对照组:夹闭沙土鼠双侧颈总动脉造成脑缺血模型.全脑缺血5 min后再灌注72 h.③尼卡地平预处理组:缺血前30 min静脉给予尼卡地平0.2 mg/kg.④参附注射液预处理组:缺血前30 min腹腔注射参附注射液10 mL/kg.参附注射液主要成份为人参皂甙和乌头碱,分别为红参和黑附片的提取物.⑤参附注射液联合尼卡地平预处理组:缺血前30 min腹腔注射参附注射液10 mL/kg,同时静脉给予尼卡地平0.2 mg/kg.后3组缺血5 min后分别再灌注72 h.实验结束后快速断头取脑,石蜡切片,采用DNA末端标记技术(TUNEL法)观察各组脑细胞凋亡的变化情况并采用免疫组化染色评定bcl-2蛋白反应强度.结果:实验沙土鼠50只全部进入结果分析.①凋亡细胞所占比例:参附注射液联合尼卡地平组低于参附注射液组、尼卡地平组和脑缺血对照组,差异有显著性意义[(18.7±3.1)%,(42.4±3.6)%,(38.0±1.9)%,(72.4±2.2)%,P<0.05],参附注射液组和尼卡地平组相比差异无显著性意义(P>0.05).②皮层细胞bcl-2蛋白免疫反应强度:参附注射液联合尼卡地平预处理组高于参附注射液预处理组、尼卡地平预处理组和脑缺血对照组,差异有显著性意义(2.70±0.39,1.30±0.78,1.70±0.33,0.90±0.54,P<0.05),参附注射液预处理组与尼卡地平预处理组相比,差异无显著性意义(P>0.05).结论:脑缺血前经参附注射液联合尼卡地平顽处理后,能明显减少细胞凋亡的发生,可能与bcl-2蛋白表达增强有关.
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中药天年饮对衰老大鼠脾淋巴细胞增殖转化能力的影响
目的:观察中药天年饮对衰老大鼠抗氧化能力、脾淋巴细胞增殖转化能力及免疫器官指数的影响.方法:实验于2006-04/07在承德医学院基础医学研究所完成.选择清洁级4月龄雄性SD大鼠40只,按随机数字表法分为4组:正常对照组、衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组,每组10只.正常对照组大鼠常规饲养,自由摄食、饮水.衰老模型组、天年饮用药组和阴性对照组大鼠均采用D-半乳糖连续腹腔注射制备亚急性衰老的大鼠模型.衰老模型组大鼠造模成功后不再做任何处理;天年饮用药组大鼠造模成功后每天用天年饮(由炙何首乌、怀牛膝、肉从蓉、淫羊藿、丹参、茯苓等6味中药组成,经熬制后含生药1.5 g/mL,购自承德医学院附属肛肠医院)灌胃(8.1 g/kg),共30 d;阴性对照组大鼠在造模成功后每天用同等剂量的生理盐水灌胃,时间同天年饮用药组大鼠.造模后30 d采用噻唑蓝法检测脾淋巴细胞的增殖转化能力,同时分别检测大鼠血清超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量以及大鼠的胸腺指数和脾脏指数.结果:纳入动物40只,均进入结果分析.①衰老模型组大鼠血清超氧化物歧化酶活性低于正常对照组、丙二醛含量高于正常对照组,差异有显著性意义[分别为(1.77±0.16),(2.48±022)mkat/L,t=2.613,P<0.05;(447.70±31.20),(267.54±40.82)nmol/L,t=11.088,P<0.01];天年饮用药组大鼠血清超氧化物歧化酶活性高于衰老模型组、丙二醛含量低于衰老模型组,差异有显著性意义[分别为(2.33±0.26),(1.77±0.16)mkat/L,t=-2.258,P<0.05;(276.32±23.30),(447.70±31.20)nmol/L,t=13.917,P<0.01].②衰老模型组大鼠胸腺指数、脾脏指数和脾淋巴细胞的增殖转化能力(A)低于正常对照组,差异有显著性意义(分别为0.077 5±0.030 9,0.123 9±0.043 6,t=2.745,P<0.05;0.347±0.099,0.466±0.108,t=2.568,P<0.05;0.388±0.054,0.470±0.063,t=3.125,P<0.01);天年饮用药组大鼠胸腺指数、脾脏指数和脾淋巴细胞的增殖转化能力(A)高于衰老模型组,差异有显著性意义(分别为0.113 0±0.045 6,0.077 5±0.030 9,t=2.238,P<0.05;0.451±0.111,0.347±0.099,t=2.211,P<0.05;0.447±0.061,0.388±0.054,t=2.290 2,P<0.05).结论:中药天年饮可提高机体的抗氧化能力及免疫功能,具有延缓衰老的作用.
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血清补体C3水平与冠状动脉病变的严重程度
目的:观察补体C3与冠状动脉病变程度的关系,为冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)防治提供应用基础、实验依据.方法:选择2003-09/2004-12清华大学第一附属医院心脏中心的胸痛患者178例,男110例,女68例,平均年龄(65±10)岁.纳入标准:均通过冠状动脉造影确定血管狭窄程度,均对检测项目知情同意.排除标准:有严重感染、结缔组织疾病的患者.①通过冠状动脉造影确定冠状动脉病变严重程度,病变血管分为冠状动脉左主干、前降支、回旋支、右冠状动脉4支,同一血管多处病变以狭窄严重处计算.冠状动脉病变严重程度的分级根据国外文献的标准,冠状动脉内径狭窄程度小于50%视为正常,评分为0分,1支冠状动脉狭窄程度大于或等于50%评为1分,依次如果有2支、3支或4支冠状动脉内径狭窄大于或等于50%则评为2分、3分或4分.②所有患者于住院后3 d内清晨空腹采取静脉血,采用免疫沉淀法测定患者血清补体C3浓度,同时调查其他可能的危险因素,根据本院正常值水平补体C3>1.20 g/L视为高补体C3.根据血清补体C3的水平分为高C3组和正常C3组,其中高C3组56例,正常C3组122例.③计量资料如果符合正态分布则以x±s表示,采用t检验,如果不符合正态分布则采用M、max、min表示,采用秩和检验.采用Pearson相关分析,将两支以上冠状动脉病变视为严重病变,赋值为1,将无明显冠状动脉病变赋值为0,采用Iogistic回归分析进行危险度分析,计算比值比和95%可信区间.结果:胸痛患者178例,均进入结果分析,无脱落者.①单因素分析显示高补体C3患者血清C反应蛋白值和冠状动脉病变严重程度均显著低于正常补体C3患者.②相关分析显示:补体C3与冠状动脉病变严重程度呈负相关,具有统计学意义;补体C3与血清总胆固醇、三酰甘油及低密度脂蛋白呈正相关.③Logistic回归分析显示补体C3对于严重冠状动脉病变比值比为0.197,无统计学意义(P>0.05),未能进入回归方程,吸烟、年龄和C反应蛋白对于严重冠状动脉病变的比值比分别为21.301、1.211和1.112,且P<0.05,有统计学意义.结论:补体C3与冠状动脉病变严重程度相关,但可能不是独立危险因素.
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中药复方制剂对大脑中动脉闭塞大鼠脑酪氨酸激酶受体B表达的影响
目的:观察中药复方对大脑中动脉闭塞模型大鼠脑内酪氨酸激酶受体B的影响,分析其促进神经发生的作用.方法:实验于2004-02/2004-04在山东省医学科学院病理实验室完成.普通级健康Wistar大鼠3C只,12周龄,体质量(300±20)g,雌雄不限.采用随机数字表分为药物组、模型组、假手术组,每组10只.模型组和药物组制作大脑中动脉闭塞模型,假手术组大鼠行同样开颅术,但不凝闭大脑中动脉,其余操作同模型组.大脑中动脉闭塞模型制作按Tamura方法稍加改进,行右侧近端大脑中动脉电凝术.麻醉醒后24 h内出现:①左侧肢体痛刺激收缩现象消失.②向左侧倾倒或转圈.③提尾时左上肢不能向前伸直.具备以上3项为大脑中动脉闭塞模型复制成功.药物组灌胃给予复健片(由山东鲁信药业有限公司生产,主要成分为何首乌、草决明、桑寄生、海马、淫羊藿等)水溶液10 g/kg,余二组分别灌胃给予同等量生理盐水,1次/d,共2周,于造模成功后6 d给药.免疫组化法观察大脑中动脉闭塞大鼠脑内酪氨酸激酶受体B的表达.采用Leica QwinV3图像分析系统对免疫组化切片进行图像分析,测定染色平均灰度.结果:30只大鼠均进入结果分析.模型组和药物组的酪氨酸激酶受体B表达染色平均灰度在给药一二周后较假手术组增加,给药2周后药物组的酪氩酸激酶受体B表达染色平均灰度高于模型组[模型组:给药1周后:107.29±4.29,给药2周后:109.60±6.38;药物组:给药1周后:113.18±12.67,给药2周后:123.51±2.82,假手术组:96.48±3.58,P<0.01,P<0.05].结论:中药复方复健片可显著增强大脑中动脉闭塞大鼠脑内神经生长因子正性调控因子酪氨酸激酶受体B的表达.
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终末期肾脏疾病患者透析治疗的相关因素分析
目的:回顾性分析终末期肾脏疾病透析患者病因、年龄、性别与选择血液透析和全部腹膜透析的关系.方法:收集2003-01/2004-05中南大学湘雅二医院病案统计室、血液净化中心及腹透中心终末期肾脏疾病透析患者资料356例,血液透析患者307例,全部腹膜透析患者49例.血液透析患者采用日本东丽公司,美国百特公司,德国费森-尤斯公司和贝朗公司的血液透析机,采用双醋酸纤维膜、血仿膜和合成膜;空心纤维透析器,透析液为碳酸氢盐透析液,采用肝素(普通肝素或低分子肝素)抗凝,透析时血流量为200~280 mL/min,透析液流量为500 mL/min,患者透析频率及时间为每周两三次,每次4~4.5 h.全部腹膜透析患者采用解剖法置入腹膜透析导管,腹膜透析方法为持续不卧床腹膜透析,腹膜透析外管连接方式为美国百特公司双联系统,腹膜透析液使用含葡萄糖的透析液.分别记录患者姓名、性别、年龄、原发疾病、血尿素氮,肌酐(取患者第一次透析前清晨空腹采血所测数值)、透析的方式等资料,进行统计和分析,分析其病因及其与年龄、性别、透析方式选择的关系.结果:透析患者356例全部进入结果分析.①终末期肾脏疾病透析患者主要病因为慢性肾小球肾炎(52.0%),其次为糖尿病肾病(16.0%),高血压肾病(13.2%),梗阻性肾病(9.0%);男女之比为1.87:1,平均年龄为(51±16)岁.②腹膜透析患者的平均年龄明显高于血液透析患者[(59±15),(50±16)岁,P<0.05].86.2%的患者选择血液透析,13.4%选择腹膜透析;糖尿病肾病患者选择腹腹膜透析高于血液透析(P<0.01).③结缔组织病、慢性肾小球肾炎组患者年龄较小,狼疮平均年龄仅40岁;高血压肾病、糖尿病肾病、梗阻性肾病、痛风、多发性骨髓瘤患者年龄较大,40岁以上患者约95.0%,平均年龄约60岁,与慢性肾炎、狼疮比较,差异有显著性意义(P<0.05).结论:本组患者以中老年为主,男性多见;终末期肾脏疾病透析患者主要病因为慢性肾小球肾炎,其次为糖尿病肾病;糖尿病肾病首选腹膜透析.
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不同性别与静息心率健康体检者腰围、血压、血糖及血脂的差异
目的:比较不同性别及不同静息心率的健康体检者腰围、血压水平、空腹血糖和餐后2 h血糖、三酰甘油及高密度脂蛋白胆固醇水平的差异.方法:①选择2003-06/2005-10在广西医科大学第五附属医院干部保健中心进行健康体检者1 014名,男658名,女356名,年龄35~50岁.均对检测指标知情同意.按静息心率水平将纳入对象分为3组:静息心率<70次/min组(n=305),70次/min≤静息心率<79次/min组(n=437),静息心率≥80次/min组(n=272).②测量纳入对象血压、腰围、血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、餐后2 h血糖水平.以5.60 mmol/L≤空腹血糖<7.0 mmol/L为空腹血糖异常;以7.8 mmol/L≤餐后2 h 血糖<11.1 mmol/L为糖耐量低减;以非同日2次空腹血糖≥7.0 mmol/L和/或餐后2 h血糖≥11.1 mmol/L为糖尿病.③分别采用t检验和χ2检验对计量资料和计数资料进行统计学处理.结果:健康体检者1 014名均进入结果分析.①血压变化:男性静息心率高和低组血压比较,静息心率≥80次/min组与70次/min≤静息心率<79次/min组男性舒张压比较,差异明显(t=2.01~2.44,P<0.05);静息心率<70次/min组与其他2个静息心率组女性收缩压比较,静息心率高和低组舒张压比较,差异明显(t=1.98~2.63,P<0.05~0.01).②血糖水平变化:男女性空腹血糖均随静息心率增加而逐渐增高.静息心率≥80次/min组男女性餐后2 h血糖水平均明显高于其他2个静息心率组(t=2.15~2.59,P<0.05~0.01),其中女性体检者餐后2 h血糖水平随静息心率的增加而逐渐增高.③血清三酰甘油水平变化:男女性三酰甘油水平均随静息心率增加而逐渐增高,其中静息心率≥80次/min组男性明显高于其他2个静息心率组(t=2.72,2.00,P<0.01,0.05).④血清高密度脂蛋白胆固醇水平变化:男性血清高密度脂蛋白胆固醇水平随静息心率增加而逐渐降低.⑤胺围:各静息心率组间差异不明显.结论:不同静息心率男性体检者间血清高密度脂蛋白胆固醇水平存在明显差异;男女性血压水平、空腹血糖、血清三酰甘油水平存在明显差别;女性体检者餐后2 h血糖也存在明显差异.
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膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其机制
目的:观察中药复方膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞增殖的抑制及其相关机制.方法:实验于2005-09/2006-07在南方医科大学细胞生物实验室完成.膈下逐瘀汤(按<医林改错>方组成:五灵脂6 g,当归9 g,川芎6 g,桃仁9 g,丹皮6 g,赤芍6 g,乌药6 g,延胡索3 g,甘草9 g,香附5 g,红花9 g,枳壳5 g.均购自南方医院中药房)经研粉、煮沸、离心、过滤配成质量浓度为25,50,100,200 mg/L的药液;顺铂配制成质量浓度为0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L的药液(作为阳性对照),均作用于Bel-7402细胞,并设空白对照(未加任何药物).采用甲基噻唑基四唑(methyl thiazolyltetrazolium,MTT)比色法检测膈下逐瘀汤各组对Bel-7402细胞生长的影响,用酶标仪测定培养细胞在600 nm处吸光度值,并计算细胞抑制率,抑制率(%)=(实验组吸光度值-对照组吸光度值/对照组吸光度值)×100%.用蛋白印迹试验检测不同质量浓度药物作用48,72 h时第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达水平.结果:①中药复方膈下逐瘀汤对Bel-7402细胞增殖的影响:膈下逐瘀汤对肝癌Bel-7402细胞有明显的生长抑制作用,呈良好的剂量-效应关系.膈下逐瘀汤质量浓度在200 mg/L时其48 h细胞生长抑制率介于0.5 mg/L顺铂组与1.0 mg/L顺铂组之间(分别为41.27%,34.01%,47.49%);膈下逐瘀汤质量浓度在50,25 mg/L时,其细胞抑制率明显低于顺铂组,72 h细胞抑制率结果基本相同.②药物作用肝癌Bel-7402细胞48 h后第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达:第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因蛋白的表达增多,200 mg/L膈下逐瘀汤组介于0.5 mg/L顺铂组和1.0 mg/L顺铂组之间.结论:中药复方膈下逐瘀汤抑制Bel-7402细胞的增殖机制可能是第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因表达增多的原因.
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肺源性心脏病急性发作期免疫功能的改变
目的:观察肺源性心脏病(简称肺心病)急性发作期患者免疫功能的变化.方法:选择南华大学附属第一医院2004-11/2006-01收治慢性肺心病急性发作期患者60例为肺心病组,于急性加重期入院第2天7:00,空腹抽取静脉血,采用流式细胞仪检测T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+及自然杀伤细胞活性,免疫浊度法检测体液免疫指标(lgG,IgM,IgA及补体C3).以同期60例健康体检者为对照.结果:120例是否受试者均进入结果分析.①T细胞亚群:肺心病组CD3+,CD4+水平低于对照组(0.52±0.06,0.62±0.04;0.32±0.06,0.41±0.06;P均<0.05),CD4+/CD8+高于对照组(1.96±0.26,1.84±0.78,P<0.05).②免疫血清指标:肺心病组IgA、补体C3及自然杀伤细胞活性低于对照组[(1.26±0.74),(2.45±0.85)g/L;(6 200±217),(9 960±302)mg/L;0.34±0.08,0.57±0.07;P均<0.05].结论:肺源性心脏病急性发作期患者的细胞免疫和体液免疫功能均受损,尤以细胞免疫功能受损更突出,且与病情呈平行关系.
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严重烧伤延迟复苏大鼠远隔脏器的能量代谢紊乱
目的:观察延迟复苏大鼠远隔脏器的能量代谢情况.方法:实验于2001-05/2004-08在长海医院烧伤中心实验室完成.取24只SD大鼠随机分为假烫组、烧伤组、早期复苏组、延迟复苏组4组,每组6只.①除假烫组外,其他3组大鼠用恒温水烫仪100℃水烫12 s,制成体表面积30%Ⅲ度烧伤模型(病理证实),假烫组于37℃水中假烫12 s.②伤后假烫组和烧伤组不液体复苏,早期复苏组在伤后30,90 min分别用30 mL/kg乳酸林格氏液腹腔注射液体复苏;延迟复苏组大鼠在伤后6,7 h分别用40 mL/kg乳酸林格氏液腹腔注射液体复苏.③所有大鼠伤后9 h取材,测定肺、心、肝、肾组织Na+-K+-ATP酶活性,Ca2+-Mg2+-ATP酶活性,髓过氧化物酶活性,一氧化氮代谢产物量.结果:24只大鼠进入结果分析.①烧伤后9 h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾组织的Na+-K+-ATP酶活性分别为(0.16±0.03),(2.82±0.41),(1.96±0.29),(3.94±0.40)μkat/g,明显低于烧伤组和烧伤后早期复苏组(P<0.05或0.01).②烧伤后9 h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾组织的Ca2+-Mg2+-ATP酶活性分别为(0.40±0.08),(3.71±0.70),(2.44±0.56),(2.39±0.57)μkat/g,也明显低于烧伤组和烧伤后早期复苏组(P<0.05或0.01).③烧伤后9 h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾组织的髓过氧化物酶活性分别为(9.91±1.13),(0.80±0.09),(0.75±0.08),(0.76±0.09)μkat/g,明显高于烧伤组和烧伤后早期复苏组(P<0.05或0.01).④烧伤后9 h延迟复苏组大鼠肺、心、肝、肾组织中一氧化氮代谢产物量明显少于烧伤组和烧伤后早期复苏组(P<0.01).结论:烧伤延迟复苏大鼠远隔脏器存在能量代谢紊乱,中性粒细胞积聚和一氧化氮产生减少可能是其重要机制.
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辨证施治经典方剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠细胞因子及Th1/Th2失衡的干预效应
目的:采用经典方剂对慢性阻塞性肺疾病大鼠进行辨证施治,观察大鼠白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4、γ-干扰素、γ-干扰素/白细胞介素4水平的变化.方法:实验于2005-04/10在山东中医药大学附属医院中心实验室进行.①选择健康雄性SPF级Wistar大鼠264只,按随机数字表法分为11组:空白对照组,寒痰蕴肺模型组和治疗组,痰热阻肺模型组和治疗组,肺气虚模型组和治疗组,脾气虚模型组和治疗组,肾气虚模型组和治疗组,每组24只.②采用改良烟熏加气管滴加脂多糖方法制备慢性阻塞性肺疾病模型,并根据分型,分别给予不同干预,进行二次造模.③第30天起各治疗组分别灌服相应证型的干预治疗中药合剂,连续14 d.寒痰蕴肺治疗组灌服小青龙汤煎剂;痰热阻肺治疗组大鼠灌服麻杏石甘汤煎剂;肺气虚治疗组灌服玉屏风散煎剂;脾气虚治疗组灌服六君子汤煎剂;肾气虚治疗组灌服人参蛤蚧散煎剂,2 mL/d.以上饮片由山东中医药大学附属医院中药房提供.模型组大鼠每天灌胃生理盐水2 mL.空白对照组不做任何干预,相同室内环境下自由饮食饮水.④放射免疫法测定肺组织匀浆中白细胞介素8、白细胞介素4、肿瘤坏死因子α含量;酶联免疫法测定肺组织匀浆γ-干扰素含量,计算γ-干扰素和白细胞介素4的比值(Th1/Th2).结果:纳入动物264只,242只进入结果分析,脱落22只,其中寒痰蕴肺模型组4只,寒痰蕴肺治疗组、肾气虚模型组各1只,痰热阻肺模型组、肺气虚治疗组、脾气虚模型组、脾气虚治疗组、肾气虚治疗组各2只,痰热阻肺治疗组、肺气虚模型组各3只.①各组大鼠一般状态:空白对照组大鼠活泼好动,毛发有光泽,体质量逐渐增加,呼吸平稳,无任何特殊表现.模型组大鼠活动量减少,拱背蜷卧,体质量增幅减轻,呼吸急促,咳嗽频作,撮毛,食量减少,行动迟缓.治疗组大鼠治疗前症状与模型组相似,咳嗽明显,造模完成后,各治疗组经喂药症状明显减轻.②各组大鼠肺组织匀浆中细胞因子变化:各模型组白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4明显高于空白对照组,γ-干扰素、γ-干扰素/白细胞介素4的比值(Th1/Th2)明显低于空白对照组,差异有显著性意义[以寒痰蕴肺模型组为例,分别为(526.10±88.94),(318.63±40.01)ng/L;(132.43±25.31),(100.29±24.20)ng/L;(107.66±22.69),(82.41±14.66)ng/L;(176.10±44.39),(328.08±50.57)ng/L;1.69±0.52,4.09±0.91,P<0.01].经过对证治疗后,各治疗组白细胞介素8、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4明显低于各模型组,γ-干扰素、γ-干扰素/白细胞介素4的比值(Th1/Th2)明显高于模型组,差异有显著性意义[以寒痰蕴肺治疗组为例,分别为(435.91±68.44),(526.10±88.94)ng/L;(115.79±24.75),(132.43±25.31)ng/L;(95.67±20.36),(107.66±22.69)ng/L;(296.09±47.54),(176.10±44.39)ng/L;3.26±0.98,1.69±0.52,P<0.05,0.01].结论:辨证施治的各经典方剂均可调节慢性阻塞性肺疾病大鼠多种细胞因子水平,起到抗炎和提高机体免疫水平的作用.
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中药复方制剂消可宁对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响
目的:观察中药复方制剂消可宁对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用.方法:实验于2004-04/11在南京医科大学第一附属医院内分泌代谢研究中心细胞培养研究室完成.①中药复方制剂消可宁(由制大黄、制附子、生黄芪组成,南京军区南京总医院制剂科生产,药品批号:院临(2003)第01017号,规格为90 mL/袋).大鼠系膜细胞株HBZY-1购自武汉大学中周典型培养物保藏中心.②将购入的系膜细胞株消化培养,取培养4~8代的细胞,吸去培养瓶中的上清液,消化离心后混匀,锥虫蓝染色观察细胞活性.③不同刺激时间系膜细胞增殖实验设立3组,正常糖浓度组每孔加入5.6 mmol/L葡萄糖溶液200 μL,高糖对照组每孔加入30 mmol/L葡萄糖溶液200 μL,高糖+消可宁组每孔加入30 mmol/L葡萄糖与0.06 g/mL消可宁混合液200 μL,6孔/组.各组分别于培养24,48,72 h后向板孔中加5 g/L的4-甲基偶氮四唑蓝20 μL,于酶标仪492 nm波长处检测吸光度值.④不同浓度消可宁刺激高糖环境下系膜细胞增殖实验设立7组,高糖对照组每孔加入30 mmol/L葡萄糖溶液200 μL,消可宁20,40,60,80,120,200 g/L组每孔加入30 mmol/L葡萄糖+对应浓度的消可宁混合液200 μL,6孔/组.培养72 h后各组向板孔中加5 g/L的4-甲基偶氮四唑蓝20 μL,同法检测吸光度值.结果:①系膜细胞活性观察:原代培养的4~8代系膜细胞,经锥虫蓝染色,着色的死亡细胞数<5%,未着色活细胞数>95%.②不同刺激时间各组系膜细胞增殖情况的比较:与正常糖浓度组比较,高糖对照组于高糖刺激24 h即可促进系膜细胞的增殖,且这种作用在刺激48 h时为明显,至72 h细胞数量开始减少,但仍明显高于正常糖浓度组(0.527±0.047,0.659±0.018,P<0.05).与高糖对照组比较,高糖+消可宁组在24 h内并未表现出抑制系膜细胞增殖的作用,而刺激48h后显示出抑制趋势,但差异无显著性意义,于72 h后表现出较强的抑制系膜细胞增殖的效应(0.659±0.018,0.538±0.023,P<0.05).③不同浓度消可宁刺激对高糖环境下系膜细胞增殖的影响:刺激72 h后与高糖对照组比较,20,40 g/L的消可宁能够部分阻止系膜细胞的增殖;60,80 g/L的消可宁则表现出明显阻止高糖对系膜细胞的过度刺激作用,且随着浓度的增加,抑制作用逐渐增强;浓度升至120 g/L时出现细胞脱落死亡,高达200 g/L时则不见存活的细胞.结论:消可宁能够有效抑制高糖诱导的系膜细胞增殖,可能是其早期防治糖尿病肾病的细胞学基础.