中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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循环纤维细胞与慢性创面愈合
背景:循环纤维细胞是近些年来在外周血液发现的具有成纤维细胞特性的一种白细胞亚群,由于具有合成多种细胞外基质蛋白、细胞因子以及递呈抗原、收缩创面、促进新生血管形成的能力,因此被认为可以促进创伤的修复。但其促进慢性创面修复的潜在作用研究尚少。目的:通过文献检索,对循环纤维细胞的生物学特性及其在慢性创面修复中的潜在作用进行文献综述。方法:分别以“循环纤维细胞、慢性创面、糖尿病足、创面愈合、细胞治疗”和“circulating fibrocytes、An-healing wounds、diabetic foot ulcer、wound healing、cel therapy”为关键词进行检索,CNKI数据库的检索时限为2000至2014年,PubMed数据库的检索时限为1994至2015年,西文生物医学期刊文献数据的检索时限为2000至2015年,检索内容为循环纤维细胞、慢性创面的难愈机制以及细胞治疗在慢性创面愈合中的应用。保留符合纳入标准的54篇文献进行总结分析。结果与结论:循环纤维细胞因其安全、有效并能较好的发挥促进创面愈合的作用,细胞治疗已开始应用于创面修复。循环纤维细胞是在外周血发现的具有成纤维细胞特性的一个新型白细胞亚群,具有合成多种细胞外基质蛋白、细胞因子以及递呈抗原、收缩创面、促进新生血管形成的能力并在伤后早期进入损伤部位,在创伤修复过程中发挥着积极作用。动物研究证实,应用循环纤维细胞可改善慢性创面尤其是糖尿病慢性创面的修复。
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下颌支矢状骨劈开矫治下颌前突:相关下颌支的形态学特征
背景:下颌支矢状骨劈开是矫治下颌骨畸形应用为广泛的一种方法,初提出的改进方法大多是依据临床的观察和经验,可用于下颌支矢状骨劈开借鉴的解剖数据非常有限,近20年来,此类解剖学研究日渐增多。目的:全面了解与下颌支矢状骨劈开相关的下颌支的形态学研究的方法,明确目前下颌支矢状骨劈开术相关研究的进展。方法:电子检索中国生物医学文献数据库和计算机Medline数据库1991至2011年收录相关综述和论文报告,并分析下颌支矢状骨劈开相关研究的进展。结果与结论:共纳入下颌支矢状骨劈开相关文章共计26篇。与下颌支矢状骨劈开骨切开位置密切相关的下颌小舌区域骨松质的分布情况、与劈开过程相关的下颌管与颊侧骨皮质之间骨松质的分布以及与固定过程相关的下颌管在角部及角前部的定位和走向,是下颌支矢状骨劈开避免并发症的关键问题。针对下颌支矢状骨劈开手术过程,制定出术前 CT 检查的具体项目,依据所测量的数值指导临床操作,有助于手术的顺利进行并减少并发症的发生,使解剖学测量的基础研究能更大程度地应用于临床。
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肾移植后1年存活者空腹血糖变化及预后
背景:肾移植后糖尿病是移植脏器的重要代谢并发症,严重影响患者生活质量与长期生存率,是移植肾失功能、心血管疾病的危险因素。目的:观察肾移植后存活1年以上患者空腹血糖变化规律以及对预后的影响。方法:选取2003年1月至2013年1月接受过肾移植后来仙桃市第一人民医院就诊的患者42例,其中移植前糖尿病患者7例、空腹血糖受损组11例和空腹血糖正常患者24例,观察各组患者移植后1,7,14 d以及1,3,6,12个月空腹血糖变化,并比较各组移植后生存情况,采用Cox比例风险模型分析影响肾移植患者生存的因素。结果与结论:糖尿病组患者移植前及移植后各时间段空腹血糖明显高于空腹血糖受损和空腹血糖正常组患者(P <0.05),糖尿病、空腹血糖受损和空腹血糖正常组患者空腹血糖在移植后第1天均升高(P <0.05),各组空腹血糖在移植后3个月趋于平稳;空腹血糖正常组生存率明显高于糖尿病组和空腹血糖受损组(P<0.05)。Cox 比例风险模型分析结果显示,移植前空腹血糖、年龄、移植后肿瘤和感染是肾移植患者死亡的独立危险因素,其中移植后发生肿瘤的死亡危险比高,为2.376。结果证实,移植前糖尿病对肾移植后存活1年以上患者生存率有一定的影响,移植后糖尿病对患者生存率的无明显影响。
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三种手部创面移植皮瓣修复效果的评价
背景:手部软组织缺损皮瓣移植必须考虑供区、受区和完成操作的术者3方面因素,如何根据“受区修复重建好,供区破坏损失少,成活可靠,操作简单易行”的原则选择皮瓣值得探讨。目的:比较带蒂皮神经营养血管筋膜皮瓣,腹部皮瓣及游离皮瓣的修复效果,为临床选用提供参考。方法:对应用带蒂皮神经营养血管筋膜皮瓣,腹部皮瓣和游离皮瓣修复手部创面的28例患者进行随访,比较分析DASH( disablity of the arm,shoulder and hand)分数,损伤的部位,触觉压觉(Semme-Weinstein单丝法),动态和静态两点辨别觉(m2PD,s2PD),温度觉,臃肿程度和供区瘢痕挛缩程度。结果与结论:3种皮瓣的瘢痕挛缩程度,温度觉,触觉和两点辨别觉结果,差异均没有显著性意义;腹部皮瓣的 DASH 评分,臃肿程度,触压觉(Semmes-Weinstein 单丝法)与其他两种皮瓣比较差异有显著性意义。结果表明3种皮瓣各有特点,临床选择应根据各种客观要求,不要先行臆断。
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自体软骨细胞移植和微骨折术修复膝关节软骨缺损的Meta分析
背景:现有一些文献报道证实,自体软骨细胞移植治疗膝关节软骨缺损在某些方面较微骨折术好,但关于两种术式优劣比较,尚缺乏循证医学方面证据。目的:整合现有临床研究的数据进行系统和科学的分析,明确自体软骨细胞移植是否在提高临床功能方面优越于微骨折术。方法:文章检索了电子数据库MEDLINE,EMBASE,CINAHL和 Cochrane Register数据库,万方数据库、中国知识资源总库和维普数据库,检索时间从1979年到2015年1月。收集自体软骨细胞移植和微骨折术治疗膝关节软骨缺损疗效的相关文献,按纳入与排除标准筛选文献并对其进行质量评价,运用 RevMan 5.2软件进行Meta分析。结果与结论:共纳入8篇文献。在比较终随访的 IKDC 评分(WMD=-9.93;95%CI:-13.16至-5.43;P<0.00001)和5年随访的各项评分(SMD=-0.30;95%CI:-0.55至-0.05;P=0.02)方面,自体软骨细胞移植比微骨折术能更好的改善患者的临床功能。在终随访的Tegner评分(WMD=0.44;95%CI:0.04至0.84;P=0.03),终随访的Lysholm评分(WMD=-10.21;95%CI:-33.68至13.26;P=0.39)和2年随访的各项评分(SMD=-0.25;95%CI:-0.92至0.43;P=0.47)的对比中,未发现微骨折术的优越性。结果证实,自体软骨细胞移植能带来更稳定更长久的临床功能,并且在一定程度上比微骨折术更能达到缓解疼痛、提高功能的目的。但是在一般情况下,自体软骨细胞移植是否都优越于微骨折术需要更多的临床研究来支持。
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人肠三叶因子串联亲和层析表达载体的构建与表达
背景:人肠三叶因子为新型的生长因子,可促进细胞生长与迁移,并使细胞具有很强抗凋亡能力,在维持胃肠黏膜完整性、黏膜保护与损伤修复发挥着重要作用,与胃肠道等多个肿瘤的发生发展密切相关。人肠三叶因子(三叶因子3)在黏膜修复及作为肿瘤标志物有着广阔的临床应用前景,但其相互作用蛋白及具体分子机制不明确。目的:构建和表达带串联StrepII和6×His两个蛋白标签的三叶因子3重组蛋白,以进一步利用研究体内蛋白质相互作用的串联亲和层析技术纯化获得三叶因子3相互作用蛋白。方法:化学合成用于串联亲和层析的标签(StrepII-TEV-6×His)基因序列,并以三叶因子3表达载体为模板, PCR扩增三叶因子3基因序列,通过Xba I位点实现标签与三叶因子3基因序列的融合,并将标签置于三叶因子3蛋白的C端,融合基因通过EcoR I+Hind III酶切,克隆于表达载体pCDNA3.0,构建了三叶因子3串联亲和层析表达载体pTFF3-C-StH。表过载体通过脂质体瞬时转染胃癌细胞AGS,采用Western Blot检测重组蛋白的表达。结果与结论:成功构建了三叶因子3串联亲和层析表达载体pTFF3-C-StH,经酶切和测序鉴定载体构建完全正确。表达载体成功转染胃癌细胞株,并获得重组蛋白的表达,通过Western Blot检测证明表达产物具有很好的抗原性和特异性,为串联亲和层析纯化三叶因子3相互作用蛋白提供重要的实验基础和工具。
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制备转基因模型小鼠的基础:人白细胞抗原A*0206基因慢病毒载体构建及鉴定
背景:有研究表明人白细胞抗原-A*0206亚型与鼻咽癌的发生正相关,但目前还没有相应的转基因动物模型,以用于从整体水平评价HLA-A*0206与鼻咽癌的关系及进一步研究免疫和基因疗法。目的:构建 pLVX-CMV-人白细胞抗原-A*0206-HA-mCMV-ZsGreen 载体,并进行病毒包装,以用于HLA-A*0206转基因小鼠制作。方法:合成HLA-A*0206序列,利用聚合酶链式反应在5’端引入Eco RⅠ酶切位点,在3’端引入Bam HⅠ酶切位点和流感病毒血凝素标签,Eco RⅠ和Bam HⅠ双酶切目的片段及pLVX-CMV-mCMV-ZsGreen质粒,连接酶切产物,转化到大肠杆菌 JM109感受态细胞,双酶切及测序鉴定阳性重组质粒,阳性重组质粒与四质粒包装系统共转染表达SV40大T抗原的人肾上皮细胞系293T细胞,产生含目的基因的慢病毒。结果与结论:凝胶电泳及测序证实人白细胞抗原A*0206基因成功导入pLVX-CMV-mCMV-ZsGreen骨架质粒,转染293T细胞48 h后的转染率为92%。荧光法测定病毒滴度,获得病毒滴度约为5×108。结果证实,实验成功构建了含巨细胞病毒启动子、HLA-A*0206、流感病毒血凝素标签以及ZsGreen报告基因的慢病毒。
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卒中后抑郁模型大鼠与miR-137抑制下的Grin2A表达
背景:卒中后抑郁是脑血管病后常见的心理行为障碍并发症,其发病机制目前尚未明确。目前研究表明, microRNA与神经发生和突触形成有关,可能在精神疾病中扮演至关重要的作用。目的:分析卒中后抑郁大鼠模型脑内和外周血中的miR-137的表达以及其对模型行为学的影响。方法:将36只大鼠分为6组,每组各6只。对照组不做任何处理,卒中后抑郁组大鼠经大脑中动脉阻塞后慢性温和刺激建立卒中后抑郁模型,agomir-137组、agomir-NC组、agomir-137+Grin2A组和agomir-137+vector组大鼠在建立卒中后抑郁模型的基础上分别给予脑室内注射agomir-137、agomir-NC、agomir-137和Grin2A过表达质粒以及agomir-137和空白质粒。结果与结论:实时定量 PCR检测显示卒中后抑郁模型大鼠脑内和外周血中 miR-137表达水平均明显低于对照组正常大鼠。行为学结果显示,在脑缺血第3周,agomir-137组大鼠垂直得分以及水平得分均显著高于agomir-NC组大鼠以及卒中后抑郁组大鼠。糖水消耗实验结果显示,在脑缺血后第2周末起,agomir-137组大鼠糖水消耗百分比即显著高于agomir-NC组大鼠以及卒中后抑郁组大鼠。进一步研究发现,miR-137可以与Grin2A的3’UTR端结合,抑制Grin2A mRNA的翻译从而下调其蛋白的表达。并且在卒中后抑郁大鼠模型的脑内过表达Grin2A基因后,miR-137抗卒中后抑郁的作用被显著减弱。提示miR-137可通过与Grin2A mRNA结合抑制其蛋白表达,从而发挥抗卒中后抑郁的作用,为卒中后抑郁提供新的临床治疗靶点。
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神经轴突导向因子1裸质粒转染对5/6肾切除模型大鼠肾脏管周毛细血管网的影响
背景:神经轴突导向因子1作为血管内皮细胞的促有丝分裂原,能够促进血管内皮细胞的迁移和增殖,发挥诱导血管新生的作用。目的:观察神经轴突导向因子1裸质粒转染对5/6肾切除大鼠模型残余肾功能的保护及对肾小管周围毛细血管网的影响。方法:将30只SD大鼠随机等分为假手术组、模型组和治疗组。模型组和治疗组大鼠切除左侧肾脏上、下极各1/3,1周后切除右肾,建立残肾模型。模型组和治疗组大鼠于切除右肾的同时在左肾静脉分别注射空质粒IRES2-EGFP和pCMV6-XL5-Netrin-1-IRES2-EGFP。结果与结论:与模型组相比,治疗组大鼠血尿素氮、血肌酐水平降低,肾间质纤维化程度减轻,肾小管周围毛细血管网的密度增加,肾小管胞浆中神经轴突导向因子1蛋白表达增加。提示神经轴突导向因子1裸质粒转染能明显改善5/6肾切除模型大鼠的肾功能,减轻残肾组织的病理损害和肾间质纤维化面积,增加肾小管周围毛细血管网密度、降低缺氧诱导因子1α表达,从而改善肾间质小管缺氧状态。
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补肾方药有效成分不同比例配伍对成骨细胞增殖和分化的影响
背景:补肾方药的动物及细胞实验研究提示具有防治骨质疏松及改善骨代谢作用,但补肾方药研究具有相当的复杂性,目前复方中药研究多采用的血清药物代谢动力学的方法却具有局限性,使有效作用成分及药物物质基础尚不确定。目的:通过采用补肾方药有效成分配伍,在不同浓度和时间下,对新生 SD 大鼠成骨细胞进行干预性培养,并对其增殖与分化情况进行测定,从而确定补肾方药对成骨细胞时效和量效关系,为补肾方药防治骨质疏松症提供实验依据。方法:体外培养原代新生24 h的SD大鼠成骨细胞,采用补肾方药的“补药”和“泻药”有效化学成分不同比例配伍,实验分3组,即补>泻组、补<泻组和对照组,补>泻组、补<泻组分别加入质量浓度10,20,30μg/L的补肾方药无血清培养基干预成骨细胞培养,在培养24,48,72 h分别检测细胞的增殖,在培养48,72 h测定成骨细胞的碱性磷酸酶分泌。结果与结论:质量浓度为10μg/L,在培养48 h,补>泻组具有明显促增殖作用(P<0.05);质量浓度为20μg/L时,各时间点补>泻组、补<泻组无明显差别,但与对照组比较具有明显增殖作用;质量浓度为30μg/L,在培养48 h,补>泻组具有明显促增殖作用强(P<0.05),72 h时增殖作用减弱;质量浓度为10μg/L,在培养72 h测得补>泻组具有促碱性磷酸酶分泌作用,质量浓度为20μg/L,在培养24 h以补<泻组明显(P<0.05);质量浓度为30μg/L,在培养72 h补>泻组促明显的促碱性磷酸酶分泌作用佳(P<0.05)。结果证实,补肾方药有效成分按补>泻组配伍比例对成骨细胞增殖、分化作用强,且存在时-效及量-效关系。
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胰岛素样因子、睾酮及骨代谢指标预测老年男性骨质疏松性骨折的意义
背景:老年男性骨质疏松的发病率随着国内人口老龄化趋势的加剧逐年提升,骨质疏松患者容易发生骨折,对患者的生命安全造成严重威胁,但目前临床上仍缺少有效的筛选措施预防骨质疏松的发生。目的:探究胰岛素样因子、睾酮及骨代谢指标水平在预测老年男性骨质疏松性骨折中的临床意义。方法:选取骨质疏松症男性患者120例作为观察组,另选择同时期收治的非骨质疏松症体检健康的男性人群120例作为对照组,两组受试者在年龄及体质量指数等方面比较差异无显著性意义,具有可比性。对两组受试者抽血检测胰岛素样因子、血清睾酮及骨代谢指标的水平。结果与结论:观察组患者腰椎侧位骨密度和左股骨颈骨密度均显著低于对照组(P <0.05);观察组患者血液中胰岛素样因子和血清睾酮水平显著低于对照组(P <0.05);观察组患者Ⅰ型胶原C端异物肽和Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)水平也显著高于对照组(P<0.05);两组患者骨钙素(BGP)、血清钙、血清磷水平相比差异无显著意义(P>0.05)。结果提示,通过检测老年男性血清中睾酮、胰岛素样因子及部分骨代谢指标的水平,可早期预测骨密度,为筛查老年男性骨质疏松症的高危状态起到一定的预测作用,具有一定的参考价值。
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软骨Ⅱ型胶原和蛋白多糖变化与温阳益髓方干预的影响
背景:骨关节炎发病过程中软骨破坏以Ⅱ型胶原和蛋白多糖破坏丢失明显,而软骨基质中的主要成分Ⅱ型胶原和蛋白多糖的质和量的改变是导致骨关节软骨退变继而发生骨关节炎的直接原因。如何逆转或者阻止此进程的发展,成为当今医学的研究重点。目的:观察温阳益髓方对兔膝骨关节炎软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达的影响,探讨其保护软骨细胞的作用机制。方法:选取9月龄新西兰大白兔96只,雌雄各半,采用伸直位石膏管型制动法进行骨关节炎造模,采用信封隐藏随机方法,分为4组:空白组(不做处理)、模型组(单纯造模)、中药组(每日灌胃“温阳益髓方”方药提取液)和西药组(每日灌胃“盐酸氨基葡萄糖”),中药组每日灌胃方药提取液24 mL/(kg·d),西药组每日灌胃24 mL/(kg·d),1次/d,持续6周。通过运用反转录聚合酶链技术,观察温阳益髓方对软骨Ⅱ型胶原和蛋白多糖的影响,并通过病理切片观察Ⅱ型胶原和蛋白多糖的染色结果。结果与结论:空白组及中药组软骨表面平整,甲苯胺蓝染色染色均匀,未见明显失染,模型组及西药组软骨表面不规则,甲苯胺蓝染色染色极度不均,表、中层失染明显;模型组蛋白多糖及Ⅱ型胶原模型组显著低于空白组(P<0.01);中药组蛋白多糖及西药组蛋白多糖高于模型组(P<0.05或P<0.05);中药组Ⅱ型胶原及西药组Ⅱ型胶原高于模型组(P <0.05);中药组蛋白多糖比西药组蛋白多糖高(P <0.05);中药组Ⅱ型胶原比西药组Ⅱ型胶原高(P<0.05)。结果说明,温阳益髓方能增加兔膝骨关节炎软骨中Ⅱ型胶原表达及蛋白多糖的水平,对维持正常胶原表型、保护关节软骨有一定的作用。
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酪氨酸激酶抑制化合物干预胶原诱导关节炎模型炎性细胞浸润及软骨破坏
背景:脾酪氨酸激酶是目前研究治疗类风湿关节炎的新靶点。目的:研究小分子酪氨酸激酶抑制化合物HL131078对胶原诱导型关节炎小鼠膝关节炎性细胞浸润、软骨破坏的影响。方法:将40只DBA/1系小鼠随机等分为空白组、模型组、阳性组和实验组。后3组小鼠尾部注射CⅡ型胶原溶液与弗氏完全佐剂(含结核杆菌)建立胶原诱导型关节炎小鼠模型。第1次免疫注射2周后,阳性组小鼠灌胃10 mg/kg R406,1次/d,连续28 d;实验组灌胃10 mg/kg小分子化合物HL131078,1次/d,连续28 d。结果与结论:与模型组相比,实验组和阳性组小鼠平均关节炎指数分别于第29和26天时开始下降,且实验组小鼠膝关节的软骨破坏情况明显减轻,仍维持较好的完整性,膝关节腔内炎性细胞的浸润明显减轻,与阳性药物R406效果接近。说明小分子酪氨酸激酶抑制化合物HL131078可以有效缓解胶原诱导型关节炎小鼠膝关节腔内炎性细胞的浸润,减轻软骨破坏情况。
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关节镜下Fast-Fix联合玻璃酸钠注射修复半月板损伤
背景:玻璃酸钠是一种高分子多糖类生物材料,许多研究认为其有一定的修复软骨表面、减少炎症递质释放、促进半月板修复的作用。目的:观察关节镜下Fast-Fix系统联合玻璃酸钠注射修复半月板损伤的疗效。方法:选取中国石油中心医院骨科2008年3月至2014年3月收治的半月板损伤患者86例,平均年龄25.5岁;病程平均1.5个月,表现为膝关节活动时疼痛、肿胀、旋转挤压试验阳性,MRI 示半月板撕裂。均采用关节镜下Fast-Fix系统进行半月板缝合,在手术结束时沿套管通道注入玻璃酸钠注射液2.5 mL,术后隔1周关节腔内注射1次玻璃酸钠,共3次。采用膝关节Lysholm 评分进行膝关节功能评价。结果与结论:81例获得随访,失访5例,平均随访1.5年。81例患者中79例关节交锁、显著压痛和活动障碍等症状消失,1年内复查MRI均见半月板愈合,Lysholm评分大于75分,优良率98%;2例在修复后1年仍存在肿胀和压痛,蹲起动作稍受限。提示关节镜下Fast-Fix联合玻璃酸钠注射修复半月板损效果良好,膝关节功能恢复满意。
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细胞因子抑制剂吡非尼酮对体外培养人瘢痕成纤维细胞增殖的影响
背景:有研究表明细胞因子抑制剂吡非尼酮通过调控多种细胞因子,抑制成纤维细胞的生物学活性,其在内脏器官的抗纤维化作用的研究和应用取得了良好的进展,但对于皮肤增生性瘢痕及成纤维细胞是否有影响及其机制尚不清楚。目的:观察细胞因子抑制剂吡非尼酮对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响。方法:采用组织块法培养人增生性瘢痕成纤维细胞,实验取第3-6代生长状态良好的对数生长期细胞。根据吡非尼酮不同质量浓度分为对照组(吡非尼酮0 g/L),吡非尼酮0.15,0.3,1 g/L组,共干预12,36,48 h。结果与结论:MTT,反转录-聚合酶链式反应和酶链免疫吸附实验结果显示,与对照组相比,吡非尼酮0.15,0.3,1 g/L组细胞增殖情况、转化生长因子β1 mRNA的表达、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的分泌量均降低(P<0.05),其中吡非尼酮1 g/L组降低明显(P <0.05)。干预24,48,72 h后,吡非尼酮0.15,0.3,1 g/L组间细胞增殖抑制率、Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的分泌量均差异有显著性意义(P<0.05)。结果证实,细胞因子抑制剂吡非尼酮对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞胶原蛋白的分泌、转化生长因子β1的表达及细胞增殖活性有明显的抑制作用。
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部分肝切除肝再生过程中肝细胞生长因子激活因子抑制因子1,2的表达
背景:有研究表明肝硬化个体在行肝部分切除后肝再生较健康肝脏缓慢的原因可能与其肝再生过程中的肝细胞生长因子的合成分泌延迟及活性降低有关,但导致这一现象的原因尚不明确,近年来发现的肝细胞生长因子激活因子的抑制因子(hepatocyte growth factor activator inhibitor,HAI)能够间接地抑制肝细胞生长因子的激活,但是鲜有研究探索HAI的抑制因子在肝硬化肝脏行部分肝切除后肝再生过程中的表达情况及其与肝再生的关系。目的:通过建立肝硬化大鼠部分肝切除模型来研究HAI的抑制因子1,2(HAI-1,HAI-2)在硬化和正常肝脏再生中的表达情况,探讨HAI-1,HAI-2在硬化肝脏部分肝切除后的生物学效应及其与肝再生的关系。方法:采用体积分数40%四氯化碳油溶液背部皮下注射法建立大鼠肝硬化模型,对实验组进行70%肝脏切除术建立再生模型,对照组大鼠仅给予普通饲料饮水喂养并行70%肝脏切除。分别于术前及术后3,6,12,24,48 h麻醉处死大鼠并留取脾脏标本检测。采用RT-PCR技术检测脾源性HAI-1,HAI-2 mRNA的表达情况。结果与结论:两组大鼠部分肝切除后HAI-1 mRNA的表达均呈现出先升高后降低的趋势,而肝硬化大鼠HAI-1 mRNA表达量持续高于对照组(P<0.05),两组大鼠之间HAI-2 mRNA表达量差异无显著性意义(P>0.05)。说明肝硬化大鼠部分肝切除后再生过程中HAI-1 mRNA的表达持续高于健康大鼠,这可能导致了肝硬化大鼠肝细胞生长因子激活因子合成分泌不足,从而使得肝细胞生长因子前体活化不足,终引起肝再生缓慢。HAI-2并没有参与肝脏的损伤修复进程。
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树突状细胞共刺激分子表达与免疫抑制剂的干预
背景:以往关于器官移植免疫抑制和抗排斥反应的研究,多关注T淋巴细胞介导的免疫反应及免疫抑制剂对T 淋巴细胞的作用,树突状细胞作用尚不清楚,且对于免疫抑制剂对树突状细胞影响的表现及机制亦不尽相同。目的:比较不同免疫抑制剂对树突状细胞共刺激分子表达及功能的影响,探讨其免疫抑制作用机制。方法:在诱导C57BL/6小鼠骨髓细胞定向分化为树突状细胞时分别加入20μg/L雷帕霉素、0.04 mg/L霉酚酸酯、10μg/L他克莫司和1 mg/L环孢霉素A。结果与结论:流式细胞仪检测结果显示,各组CD40表达为:雷帕霉素<他克莫司<环孢霉素A<霉酚酸酯(P<0.01);CD86表达分别为:雷帕霉素<他克莫司<环孢霉素A=霉酚酸酯(P<0.01);CD80、CD11c及主要组织相容性复合体Ⅱ的表达各组差异无显著性意义(P>0.05)。单向混合淋巴细胞反应结果显示,各组树突状细胞共刺激T细胞增殖能力表现为:雷帕霉素<霉酚酸酯<他克莫司=环孢霉素A (P<0.05)。结果证实,雷帕霉素、他克莫司、环孢霉素A、霉酚酸酯均通过抑制树突状细胞共刺激分子CD40及CD86表达而发挥免疫抑制作用,以雷帕霉素为显著;虽然以上药物对树突状细胞抗原递呈能力主要组织相容性复合体Ⅱ的表达均无明显抑制性,但均能抑制树突状细胞刺激T细胞增殖的能力,雷帕霉素的抑增殖能力强。
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自制KYL器官保存液对恒河猴肝脏的保存作用
背景:目前肝脏移植是治疗终末期肝病的佳方法,UW 液是公认的肝脏保存液,但是其价格昂贵,并且细胞外液高K+状态,与人的生理不符,常会导致患者瞬时高钾血症,引起心跳停止,因此研发新的器官保存液已经刻不容缓。目的:观察自制KYL液对恒河猴肝脏缺血再灌注后的保存效果。方法:实验选受体猴和供体猴各8只,每组分别包括KYL液组和UW液组各4例供体肝脏灌注并冷保存4 h,行同种异体原位肝移植。分别于移植后30 min、6 h,记录胆汁分泌量,采血检测谷草转氨酶、谷丙转氨酶、一氧化氮、内皮素1、肿瘤坏死因子α浓度,切取肝组织行光学显微镜检测。结果与结论:两组移植后均有胆汁分泌,随时间延长胆汁分泌量增加(P <0.05)。移植后30 min、6 h,KYL液组血清谷草转氨酶和谷丙转氨酶浓度均低于UW液组(P<0.05),两组血清一氧化氮、内皮素1、肿瘤坏死因子α浓度差异无显著性意义(P >0.05)。光学显微镜下肝组织形态学观察显示,UW液组较KYL液组肝细胞水肿明显。结果证实,KYL液在预防缺血再灌注损伤效果与UW液总体相当,部分效果略优于UW液。
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脂多糖激活基质金属蛋白酶表达诱导MC3T3-E1细胞的增殖
背景:基质金属蛋白酶及其抑制剂是一种含 Zn+的蛋白水解酶,参与了多种组织的细胞外基质降解与组织重塑过程。目的:观察基质金属蛋白酶在脂多糖诱导的MC3T3-E1细胞增殖中的参与作用。方法:MC3T3-E1细胞随机分为4组:对照组、脂多糖低剂量组(1μmol/L)、脂多糖中剂量组(10μmol/L)和脂多糖高剂量组(100μmol/L)。分析各组细胞的细胞增殖率,并检测基质金属蛋白酶2,3,9及基质金属蛋白酶组织抑制因子1,2的表达。结果与结论:脂多糖处理MC3T3细胞后细胞的增殖率明显增强,且具有时间依赖性和浓度依赖性,且处理后基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达均明显增强,差异有显著性意义。结果提示,基质金属蛋白酶表达的增强参与了脂多糖诱导的MC3T3-E1细胞增殖过程。
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不同浓度Dlll4调节绒毛外滋养细胞的生物学功能
背景:早孕时期绒毛外滋养细胞功能的正常发挥对妊娠有着至关重要的影响,绒毛外滋养细胞功能异常时将导致子痫前期、胎儿生长受限及胎盘植入等多种妊娠期疾病。目的:探讨Notch信号家族配体Dl 4对绒毛外滋养细胞的生物学功能的影响。方法:以不同质量浓度外源性Dl 4(0,0.125,0.25,0.5,1.0 mg/L)处理人绒毛外滋养细胞系HTR-8/SVneo,以CCK-8试验检测细胞活性,Transwel 实验检测细胞迁移、侵袭能力的改变。结果与结论:Dl 4可明显促进绒毛外滋养细胞迁移与侵袭能力,而对细胞活性不产生显著影响;Dl l4对绒毛外滋养细胞侵袭功能的影响具有浓度依赖性。结果提示Dl 4可通过调节绒毛外滋养细胞生物学功能,在妊娠过程很中发挥重要作用。
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高表达衔接蛋白Src羧基端激酶结合蛋白对Jurkat细胞形态及功能的影响
背景:衔接蛋白分子的联动和协同有效调控 T 细胞的信号转导,形成级联放大或限制,终实现 T 细胞复杂的免疫功能。蛋白分子 Src 羧基端激酶结合蛋白正是衔接蛋白的一种,其主要是通过负反馈调节Src家族激酶活性。而这种负反馈调节作用依赖于Src羧基端激酶结合蛋白的Y317,可能涉及Src羧基端激酶的SH2结构域。目的:探索衔接蛋白Cbp对Jurkat细胞形态及功能的作用。方法:构建仅表达增强绿色荧光蛋白的融合蛋白和 Src 羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白的融合蛋白的病毒颗粒。将Jurkat细胞分为未转染组、阴性对照组和Src羧基端激酶结合蛋白组,后2组转染仅表达增强绿色荧光蛋白的病毒和转染Src 羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白的病毒。结果与结论:细胞转染效率大于95%,Src羧基端激酶结合蛋白定位于细胞膜上。转染Src 羧基端激酶结合蛋白-增强绿色荧光蛋白病毒的 Jurkat 细胞,皱缩细胞增多,大小均一性较差,细胞坏死凋亡的数量增加,细胞中 Src 羧基端激酶结合蛋白基因表达上调,Src羧基端激酶表达下降,而酪氨酸蛋白激酶表达增加。提示 Jurkat 细胞转染Src羧基端激酶结合蛋白后,可使细胞存活率下降,细胞信号转导功能减弱。
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二甲基亚砜充当保护剂灌注兔离段肢体局部药物浓度的相对回收率
背景:二甲基亚砜冷冻保护剂的效果在低温医学应用中得到了大量验证,目前尚无利用微透析技术对二甲基亚砜进行检测的文献报道。目的:考察不同浓度断肢再植冷冻保护剂二甲基亚砜微透析的相对回收率。方法:应用增量法及减量法检测体外不同浓度(2%、5%、8%)二甲基亚砜微透析线性探针的相对回收率,并进行体内校正实验,以减量法估算二甲基亚砜在兔离断肢体的相对回收率。结果与结论:增量法检测2%、5%、8%浓度二甲基亚砜的相对回收率分别为(49.49±3.56)%,(46.30±1.48)%,(52.66±2.54)%,平均回收率为(49.48±3.18)%;减量法检测2%、5%、8%浓度二甲基亚砜的相对回收率分别为(50.99±6.89)%,(43.86±1.35)%,(50.67±0.75)%,平均回收率为(48.51±4.03)%,两种方法检测的二甲基亚砜微透析探针相对回收率基本相同。体内校正实验显示回收率随二甲基亚砜浓度的变化较小,平均回收率为(15.45±4.80)%。结果表明不同浓度二甲基亚砜的微透析探针相对回收率无明显差异。
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优秀青少年男子篮球运动员腰腹屈伸肌群生物力学特征
背景:目前,等速测试系统在评定各专项运动员肌肉功能的应用越来越受到重视,但运用等速肌力测试技术研究优秀青少年男子篮球运动员腰腹肌力特征的报道较少。目的:研究优秀青少年男子篮球运动员腰腹屈伸肌群生物力学特征,为篮球项目的腰腹力量训练、科学选材和预防腰腹损伤提供依据。方法:采用Cybex-Norm等速肌力测试系统,对广州男子篮球队运动员18人测定腰腹屈伸肌群在慢速60(°)/s和快速180(°)/s的肌力和做功情况。结果与结论:受试者腰腹屈伸肌群的峰力矩和相对峰力矩在同一测试速度下,伸肌群大于屈肌群(P<0.01);腰腹屈伸肌群的峰力矩、相对峰力矩、总功均随着测试速度的增加呈减小趋势(P<0.05),伸肌群的峰力矩和相对峰力矩减少更显著(P <0.01);腰腹屈伸肌群的相对功率随着测试速度的增加而呈上升趋势(P <0.01);外线球员腰腹屈伸肌群各测试指标成绩优于内线球员;在等速向心收缩时,随测试速度加快,腰腹屈伸肌群的峰力矩屈伸比呈递减趋势,躯干稳定性减弱。结果提示,优秀青少年男子篮球运动员腰腹伸肌群肌力大于屈肌群;外线球员腰腹屈伸肌群的肌力优于内线球员;等速快速运动时,腰腹屈伸肌群力量减小,腰腹关节屈伸肌力平衡性减弱,应加强青少年男子篮球运动员腰腹核心肌群快速力量训练。
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正常青年人三维步态:时空及运动学和运动力学参数分析
背景:三维步态分析作为一种客观步态评估方法越来越广泛应用于临床检测。但尚缺乏统一的标准来衡量正常人的步态特征。目的:检测中国正常青年人自然行走步态数据,为临床上异常步态的分析提供参考依据。方法:应用英国Vicon三维运动捕捉系统,对100名正常青年人进行步态测试,得到时空参数、运动学参数、运动力学参数。结果与结论:正常青年人左右侧(髋、膝、踝关节的活动角度和垂直地板反力)曲线分布规律基本一致;髋、膝、踝关节活动角度(初着地角度、大屈曲角度、大伸展角度、矢状面大活动范围)和垂直地板反力参数(第1波峰值、谷值、第2波峰值)的左右侧相比,差异无显著性意义(P>0.05)。说明建立的中国正常人步态数据,可供临床步态分析参考使用。