中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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3D打印钛合金孔隙支架骨长入影响因素的分析
背景:随着3D打印技术的发展,3D打印孔隙钛合金支架作为骨替代物成为当今研究的热点。目的:介绍并讨论3D打印孔隙钛合金支架各项参数对骨长入效果的影响,总结出适于骨长入支架的参数特点。方法:作者以“Three-dimensional(3D)printing,Scaffold,Titanium,Bone ingrowth”为关键词,检索2006至2016年期间PubMed、Springerlink、Medline数据库中相关文献。初检文章125篇,筛选后对42篇文章进行分析。结果与结论:3D打印钛合金支架的孔隙尺寸、孔隙率、孔隙形状和表面处理方式等参数,对于骨长入效果或体外支架内成骨细胞表现都有着重要的影响。合适的孔隙尺寸和孔隙率对于支架内组织的氧供和血管生成有着促进作用;孔隙形状和表面处理方式则主要对于支架内成骨细胞有着调控作用,影响细胞的黏附、增殖、分化等行为。综合适于骨长入几项参数,通过3D打印技术可制造适宜的支架,以达到佳的骨长入效果,获得高强度的骨-支架界面的稳定性。
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颅骨修补材料研究现状及3D打印技术应用前景
背景:应用颅骨修补材料不仅能恢复正常的颅骨形态,而且对恢复脑功能有重要意义。目的:对聚醚醚酮、钛合金和组织工程技术在颅骨修补方面的研究现状以及与3D打印技术联合应用的前景做一个总结。方法:检索中国知网数据库、和PubMed数据库1995至2016年发表的有关颅骨修复材料的文献,英文检索词为“bone regeneration material in calvarial,3d printing bone scaffold ”,中文检索词为“颅骨修补材料,3D打印骨支架”。结果与结论:钛合金和聚醚醚酮材料虽已在临床上使用,但钛合金有导电性、导热性,聚醚醚酮不参与缺损部位骨整合,有脱落或移位的可能。组织工程技术参与颅骨组织重建,修复效果满意,但支架材料选择和制备问题、种子细胞获取问题及生长因子缓释问题需要克服。3D打印技术可个性化打印形状,精确吻合缺损,但对原材料要求高,需要有良好的生物相容性及良好的生物力学性能。组织工程与3D打印技术相结合应用于颅骨修补应用前景广阔。
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结合3D打印技术构建聚己内酯-骨细胞外基质复合支架及体外骨诱导性能
背景:骨组织工程学者们仍在寻找理想的骨组织工程支架,3D打印技术为支架的构建提供了新的方法,同时骨细胞外基质在成骨诱导中的作用也越来越受到关注。目的:采用3D细胞-支架共培养的方式获取聚己内酯-骨细胞外基质复合支架,检测其成骨性能。方法:将216枚3D打印聚己内酯支架分为A组(与96孔板匹配,n=72)、B组(与48孔板匹配,n=144)。①第1轮三维培养:将第5代SD大鼠骨髓间充质干细胞分别接种于两组支架上,接种1,2,3周,A组进行茜素红染色、Masson染色,B组进行胶原、糖胺多糖检测;②第2轮三维培养:将第1轮三维培养1,2,3周的支架进行脱细胞处理,分别记为AE1、AE2、AE3、BE1、BE2、BE3,将第5代SD大鼠骨髓间充质干细胞再次接种于6组支架上,接种1,2,3周,AE1、AE2、AE3组进行茜素红染色,BE1、BE2、BE3组进行钙定量、碱性磷酸酶活性及DNA定量分分析。结果与结论:①Masson染色及糖胺多糖、羟脯氨酸定量分析结果提示,随着培养时间延长,复合支架表面的细胞外基质成分逐渐增加;②碱性磷酸酶活性检测结果提示,聚己内酯-骨细胞外基质复合支架的细胞成骨分化程度显著高于普通聚己内酯支架(P<0.05);③茜素红染色分析及钙定量分析结果提示,复合支架的矿化程度显著高于普通聚己内酯支架(P<0.05),复合支架的DNA总量相对于普通样本并没有显著升高;④结果表明,通过3D细胞-支架共培养的方式可以获得带有细胞外基质的复合支架,该复合支架具备更好的成骨诱导性能。
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3D打印羊椎骨粉/聚乙烯醇支架、纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇支架、羊椎骨粉/聚乙烯醇无孔骨板的性能比较
背景:随着3D打印技术的推广,3D打印组织工程骨支架成为颌骨缺损修复的新方向。目的:对比3D打印羊椎骨粉/聚乙烯醇支架、纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇支架、羊椎骨粉/聚乙烯醇无孔骨板的理化与生物性能。方法:利用3D打印技术,分别打印出羊椎骨粉/聚乙烯醇支架、纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇支架、羊椎骨粉/聚乙烯醇无孔骨板,进行孔隙率、扫描电镜、吸水率及压缩力学性能测定;将3种支架分别与骨髓间充质干细胞共培养1,4,7 d,采用CCK-8法检测细胞增殖。结果与结论:①扫描电镜观察:纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇支架、羊椎骨粉/聚乙烯醇支架孔隙规则,网状结构清晰,孔隙间存在广泛交通,连续性好;羊椎骨粉/聚乙烯醇无孔骨板没有明显孔隙,但表面有大小不一微孔,材料致密,分布均匀;②孔隙率:纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇支架孔隙率低于羊椎骨粉/聚乙烯醇支架(P<0.05);③吸水率:在不同时间点,纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇支架>羊椎骨粉/聚乙烯醇支架>羊椎骨粉/聚乙烯醇无孔骨板(P<0.05);④压缩力学性能:羊椎骨粉/聚乙烯醇支架的韧性高于纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇支架,低于羊椎骨粉/聚乙烯醇无孔骨板;⑤细胞毒性:羊椎骨粉/聚乙烯醇支架的细胞增殖活性高于其余两组支架(P<0.05);⑥结果表明:3D打印羊椎骨粉/聚乙烯醇支架具有良好的物理及化学性能。
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骨填充网袋与球囊椎体后凸成形修复骨质疏松性椎体压缩性骨折
背景:目前国内外的学者对骨填充网袋与球囊椎体后凸成形临床特点研究资料较少,在缓解疼痛、纠正后凸畸形和恢复椎体高度等方面的疗效以及骨水泥渗漏的发生率方面存在较大的争议。目的:比较骨填充网袋与球囊椎体后凸成形治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折的临床特点。方法:将90例骨质疏松性椎体压缩性骨折患者随机分成2组:椎体后凸成形组45例,采用球囊椎体成形治疗;骨填充网袋组45例,采用骨填充网袋治疗。术后随访时间均大于3个月,观察两组之间在缓解疼痛、纠正后凸畸形及恢复椎体高度等方面的疗效,以及骨水泥渗漏的发生率。结果与结论:①缓解疼痛、纠正后凸畸形及恢复椎体高度:所有患者术后24 h内疼痛均明显缓解,两组在缓解疼痛方面效果相似(P>0.05),在恢复椎体高度方面椎体后凸成形优于骨填充网袋(P<0.05);在骨水泥渗漏方面骨填充网袋组优于椎体后凸成形组(P<0.05)。②结果说明:骨填充网袋与球囊椎体后凸成形治疗骨质疏松性椎体压缩性骨折各有优势,但镇痛效果相似。
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可注射聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙骨水泥的体外生物活性及其降解性
背景:聚富马酸丙二醇酯具有室温固化特性,β-磷酸三钙具有良好的生物相容性,但是目前缺乏聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙复合骨水泥的系统研究。目的:制备聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙复合骨水泥,考察其体外生物活性和降解性。方法:采用液相沉淀法制备β-磷酸三钙,两步法合成聚富马酸丙二醇酯高分子,制备可注射聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙复合骨水泥。①体外矿化:将聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙复合骨水泥、聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥分别浸泡于模拟体液中7 d,检测材料表面羟基磷灰石沉积。②体外降解:将聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙复合骨水泥浸泡于PBS中,在相应的时间点检测吸水率、失重率、体系pH值、压缩强度及表面和断面形貌变化。结果与结论:①体外矿化:可注射聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙复合骨水泥表面能够沉积羟基磷灰石,聚甲基丙烯酸甲酯骨水泥表面未沉积羟基磷灰石;②体外降解:聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙在PBS中63 d内体系pH值稳定,材料降解温和;84 d材料失重率为13.5%;扫描电镜显示聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙表面为溶蚀降解,压缩强度随着降解时间延长逐渐降低,有利于降解过程中力学性能的完整性和持续性;③结果表明:聚富马酸丙二醇酯/β-磷酸三钙复合骨水泥是一种具备体外矿化和降解能力的材料。
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复合N-乙酰半胱氨酸丝素蛋白磷酸钙骨水泥的理化性能及细胞毒性
背景:磷酸钙骨水泥具有骨传导性、可降解等显著优点,其水化产物羟基磷灰石为骨骼主要无机成分,然而其力学性能不足限制了在负重区域骨缺损修复的应用。目的:研制具有良好生物力学性能及生物相容性的磷酸钙复合骨水泥。方法:①配置含有不同浓度(0,10,25 mmol/L)N-乙酰半胱氨酸的6%丝素蛋白溶液,作为固化液;以α-磷酸三钙粉末为固体,按液固比0.4 mL:1 g制备含有不同浓度N-乙酰半胱氨酸的丝素蛋白磷酸钙骨水泥,同时设置α-磷酸三钙粉末与ddH2O混合为对照组。测定复合骨水泥的抗压强度、凝固时间,通过X射线衍射仪检测骨水泥晶体成分,扫描电镜观察骨水泥微观形貌;②将MC3T3-E1细胞接种于各组材料表面,24 h后扫描电镜观察细胞形态;③以各组材料浸提液培养MC3T3-E1细胞,1,3,5,7 d后检测细胞增殖,1,3 d后检测细胞培养基中乳酸脱氢酶含量。结果与结论:①X射线衍射和扫描电镜检测结果表明,各组材料中α-磷酸三钙的水化反应产物均为羟基磷灰石;②当N-乙酰半胱氨酸浓度为25 mmol/L时,材料的抗压强度大,达(49.39±1.68) MPa,材料的初凝时间为(21.77±1.07) min,终凝时间为(31.88±1.69) min;③细胞在含有不同浓度N-乙酰半胱氨酸的丝素蛋白磷酸钙骨水泥表面的形态无明显差异;④含有不同浓度N-乙酰半胱氨酸的丝素蛋白磷酸钙骨水泥可促进细胞增殖,抑制乳酸脱氢酶分泌;⑤结果表明,N-乙酰半胱氨酸可显著提高丝素蛋白磷酸钙骨水泥的力学强度,具有良好的细胞相容性。
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磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料填充桡骨缺损的生物相容性
背景:磷酸钙骨水泥与人体自身骨矿物的化学组成和结构相似,能够填充因骨折造成的骨质塌陷,具有诱导成骨作用,但其降解速度较慢。目的:评估磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料的生物相容性及修复桡骨缺损的可行性。方法:①体外细胞毒性实验:分别以磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液、苯酚溶液,含体积分数为10%胎牛血清 RPMI1640培养液培养小鼠成纤维细胞,检测细胞毒性分级;②血液相容性实验:在兔抗凝血中分别加入磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液、生理盐水及双蒸水,检测溶血率;③取45只新西兰大白兔,制备双侧桡骨缺损模型,随机分3组,空白对照组不进行任何干预,实验组与骨缺损处植入磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料,对照组植入自体桡骨。术后4,8,16周,进行X射线、组织学、骨密度及生物力学检测。结果与结论:①细胞毒性:磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料浸提液的毒性为0至1级;②血液相容性:磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶材料的溶血率为3.15%;③体内修复实验:术后16周,X射线显示,实验组和对照组骨折线完全消失,髓腔复通,塑性完全;组织学显示,对照组骨小梁重建较明显,板层骨较成熟,髓腔再通,实验组有大量新生编织骨成网格状长入材料中,材料降解明显,降解与骨长入同步;实验组与对照组骨密度、大负荷、大应力和破坏能量均明显高于空白对照组(P <0.05),实验组与对照组各指标比较差异无显著性意义;④结果表明:磷酸钙骨水泥/纤维蛋白胶复合材料具有良好的生物相容性,修复骨缺损可促进骨组织再生,获得与自体骨移植基本相当的治疗效果。
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亚油酸乙酯抑制钛颗粒诱导的炎症反应及其作用机制
背景:有研究证实,亚油酸乙酯可减轻细菌脂多糖诱导的炎性因子释放,但其能否抑制钛颗粒诱导的炎性骨溶解及其作用机制尚不清楚。目的:观察亚油酸乙酯对钛颗粒诱导炎性因子表达的影响及其作用机制。方法:将48只昆明小鼠随机分为正常组、钛颗粒组、DMSO组及实验组,正常组不做任何处理;其余3组均建立小鼠钛颗粒背部气囊炎症模型,12 h后,DMSO组向气囊中注入溶媒0.5%二甲基亚砜200μL;实验组向气囊中注入5%亚油酸乙酯200μL。14 d后,苏木精-伊红染色观察各组皮肤组织炎症细胞浸润程度,采用Western blot检测各组抑制性卡巴蛋白、核转录因子κB、诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶2、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的表达,以及MAPK通路中ERK、p-erk、JNK、p-JNK、p38与p-p38的表达。结果与结论:①皮肤组织炎症细胞浸润:钛颗粒组真皮层毛囊陷窝处与皮下疏松结缔组织可见大量炎性细胞浸润及空泡坏死组织;DMSO组与钛颗粒组基本相似;与钛颗粒组比较,实验组真皮层毛囊陷窝处及皮下疏松结缔组织炎性细胞浸润明显减少,空泡坏死组织也有所减少;②Western blot检测结果:与正常组比较,钛颗粒组、DMSO组诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶2、核转录因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、p38、JNK及ERK表达升高(P<0.05),抑制性卡巴蛋白降低(P<0.05);与钛颗粒组及DMSO组比较,实验组诱导型一氧化氮合酶、环氧化酶2、核转录因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、p38、JNK及ERK表达降低(P<0.05),抑制性卡巴蛋白表达升高(P<0.05);③结果表明:亚油酸乙酯可能通过抑制MAPK和核转录因子κB信号通路的激活,显著抑制钛颗粒诱导下炎性因子的表达。
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复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架的体外实验
背景:目前已研制出复合左旋聚乳酸可降解性胆肠支架。目的:研究复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架的溶解性及生物相容性。方法:①溶解性:将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架置于人工胃酸中,12周内检测溶解率;②热源性:将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液经耳缘静脉注入兔体内,检测体温变化;③溶血性:将复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液、生理盐水及蒸馏水分别加入兔抗凝血中,检测溶血率;④细胞相容性:分别以含体积分数10%胎牛血清的DMEM高汤培养基、橡胶材料浸提液、复合左旋聚乳酸胆肠溶解支架浸提液培养结肠癌Caco-2细胞,12,24,36,48 h后,检测细胞增殖;2 d后,检测细胞乳酸脱氢酶释放量。结果与结论:复合左旋聚乳酸胆肠支架的体内稳定性时间长,在20周左右可以溶解近80%以上;复合左旋聚乳酸胆肠支架不具有热源性及溶血性;复合左旋聚乳酸胆肠支架对Caco-2细胞的增殖及乳酸脱氢酶释放无影响,无明显细胞毒性;结果表明,复合左旋聚乳酸材料具有良好的溶解性及细胞相容性。
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单晶硅材料微型圆柱体直径及其排列间距对神经干细胞分化的影响
背景:研究表明,不同结构类型的矩阵模型(例如条纹、空洞及圆柱体等)对神经干细胞分化有不同的影响。目的:探讨微型圆柱体直径及其排列间距等物理信号对神经干细胞分化的影响。方法:采用光刻法在单晶硅表面刻蚀出不同直径和间距的微型圆柱体(直径与间距各有2.5,5,10,20μm 4个规格),将纯化的原代神经干细胞种植在16种微型圆柱体上,体外培养7 d后,运用免疫荧光及实时定量PCR等技术观察神经干细胞分化为神经元样细胞的情况。结果与结论:①在直径固定的情况下:微型圆柱体间距在2.5-10μm范围内变化时,随着间距的增大,神经干细胞分化率有增大的趋势;②在间距固定的情况下:微型圆柱体直径在2.5-20μm范围内变化时,随着圆柱体直径的增大,神经干细胞的分化率越来越小;③对比各组发现,直径为2.5μm、间距为10μm的微型圆柱体对于神经干细胞分化为神经元样细胞的促进作用明显;④结果表明:在特定规格的微型圆柱体(圆柱体直径较小并其间距较大)上培养神经干细胞能促进其分化为神经元样细胞,这对于研发组织工程支架材料有着重要的提示作用。
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建立科研工作者学术诚信学术创新系列电子档案
学术诚信对一个科研工作者一生的学术信誉有多么重要?
学术创新对一个科研工作者一生的学术成绩有多么重要?
那么,有谁能够客观的证明这些清白和这些事实的真实情况呢?关键词: -
吸入上转换纳米颗粒对小鼠肺肝均有一过性损害
背景:有体外实验对上转换纳米颗粒的毒性进行了研究,但有关上转换纳米颗粒体内毒性的研究不多。目的:观察吸入上转换纳米颗粒对小鼠各脏器的毒性作用。方法:切开36只气管Balb/c小鼠后,随机分为3组,实验组经气管滴入上转换纳米颗粒28 mg/kg,对照组经气管滴入等量生理盐水,假手术组不滴入任何物质。术后1d、1周、2周,检测肺、肝及肾功能,观察肺、肝、肾、心组织形态学变化。结果与结论:①肺、肝、肾功能功能:术后1 d,实验组酸碱度值低于对照组和假手术组(P<0.05),谷丙转氨酶水平高于对照组和假手术组(P<0.05);假手术组术后1 d的氧分压高于实验组和对照组(P<0.05)。3组间术后1,2周的氧分压、谷丙转氨酶水平比较差异无显著性意义。3组间术后不同时间点的二氧化碳分压、肾功能比较差异无显著性意义;②肺组织病理:术后1 d,实验组增生和炎症反应严重,肺泡腔变形,血管充血;对照组增生和炎症反应明显,肺泡腔受挤压,肺泡间隔增宽;假手术组小鼠肺泡结构和形态正常,无炎症细胞浸润。术后1,2周时,实验组和对照组肺部病变随时间延长逐渐减轻;③肝组织病理:术后1 d,实验组肝细胞肿胀,空泡变性现象较重;对照组肝细胞中度水肿,有空泡变性出现;假手术组肝细胞轻度水肿,少量空泡变性;术后2周时,各组小鼠肝脏形态均恢复正常;④肾、心组织病理:各组心、肾组织结构未发生明显变化;⑤结果表明:表明上转换纳米颗粒对小鼠肺、肝均有一过性的损害。
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玻璃酸钠壳聚糖纳米粒对烧伤角膜新生血管生长的影响
背景:将玻璃酸钠制作成由壳聚糖纳米粒包裹而成的药物,可以使药物更好地作用于烧伤角膜。目的:验证玻璃酸钠壳聚糖纳米粒对烧伤角膜新生血管生长的影响。方法:将30只SD大鼠随机分为3组,模型组、实验组制备碱烧伤角膜模型,正常对照组不造模,实验组在造模后2周后滴注玻璃酸钠壳聚糖纳米粒悬液治疗,1次/d,10μL/次,正常对照组与模型组给予等量生理盐水,持续4周。4周后,裂隙灯观察眼角膜新生血管动态生长情况;ELISA法测定白细胞介素6和肿瘤坏死因子α含量;苏木精-伊红染色观察角膜病理学变化;聚合酶链式反应实时荧光定量PCR检测检测血管内皮因子和环氧化酶2 mRNA表达量。结果与结论:①与正常对照组比较,模型组角膜新生血管面积、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、血管内皮生长因子、环氧化酶2水平显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,实验组角膜新生血管面积、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、血管内皮生长因子、环氧化酶2水平显著降低(P<0.05);②模型组眼角组织有大量炎性细胞及新生血管产生,实验组仅有少量炎性细胞存在;③结果表明,玻璃酸钠壳聚糖纳米粒可抑制烧伤角膜新生血管的生长。
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Fe3O4纳米粒子的组织相容性及组织分布研究
背景:Fe3O4纳米粒子是目前研究较多的靶向性纳米药物递呈系统,它可与抗肿瘤药物结合在一起,在外界磁场作用下,运载抗肿瘤药物靶向性到达肿瘤部位发挥抗肿瘤作用,其亚微粒可以到达远离磁源数厘米的肿瘤部位。目的:分析Fe3O4纳米粒子的组织相容性及在机体内的药物分布,及其在骨肉瘤化疗中作为药物载体的应用前景和存在问题。方法:使用Wistar大鼠,按10.0 mg/kg剂量,Fe3O4纳米粒子经鼠尾静脉推注后15,60,120 min处死,取各组织(肺、脑、心、肝脏、肾脏、后肢骨、骨骼肌),采用原子吸收光谱仪分析各组织单位质量的铁离子含量。将各时间点的各种组织作苏木精-伊红染色以观察组织形态变化。结果与结论:①在肝和肾组织Fe3O4纳米粒子浓度于15 min时达到峰值,给药后60 min和120 min检测到的肝和肾组织纳米粒子浓度虽呈下降趋势但仍然维持在较高水平,3个时间点Fe3O4纳米粒子浓度与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),提示Fe3O4纳米粒子在肝和肾中快速浓集并能较长时间存留;②在心、肺、骨骼肌和骨组织中Fe3O4纳米粒子浓度于15 min时达到峰值,但随后迅速下降。15 min时Fe3O4纳米粒子浓度与对照组比较差异有显著性意义(P<0.05),仅在骨组织代谢较慢,在60 min时与对照组比较差异仍有显著性意义(P<0.05),表明Fe3O4纳米粒子在这些血流灌注高的组织中虽能达到高浓度但存留时间短。唯有骨组织可以较长时间的维持Fe3O4纳米粒子的高浓度;③在脑组织中各时间点Fe3O4纳米粒子浓度与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05),提示Wistar大鼠的血脑屏障可能对Fe3O4纳米粒子的穿透具有阻碍作用;④所有的组织通过苏木精-伊红染色后均未发现明显的改变;⑤结果表明,偶联油酸钠Fe3O4纳米粒子在机体组织中的分布受组织血流灌注和单核巨噬细胞系统的影响,且不能穿透血脑屏障。对各种组织均未发现有显著的影响。偶联油酸钠Fe3O4纳米粒子在肝、肾和骨组织内可以维持较长较高浓度,作为磁靶向热化疗载体治疗上述脏器的恶性肿瘤有重要的理论意义。
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超微超顺磁性纳米氧化铁标记犬口腔黏膜上皮细胞与磁共振成像实验
背景:上皮细胞是组织工程常用的种子细胞类型,但如何无创性地对其进行体内示踪仍缺乏有效手段。目的:探讨超微超顺磁性纳米氧化铁标记犬口腔黏膜上皮细胞及其体外磁共振成像的可行性。方法:原代培养比格犬口腔黏膜上皮细胞,分别予以0,5,10,25,50,100 mg/L超微超顺磁性纳米氧化铁联合0.75 mg/L多聚赖氨酸标记犬口腔黏膜上皮细胞,普鲁士蓝染色鉴定不同质量浓度梯度下细胞内铁表达情况,CCK-8试剂盒检测各组细胞增殖情况,确定佳标记质量浓度。后,将2×105个标记上皮细胞置于1 mL PBS缓冲液中重悬,行3.0 T MR T2*WI序列扫描,测量不同标记质量浓度下MRI灰度值。结果与结论:①超微超顺磁性纳米氧化铁联合0.75 mg/L多聚赖氨酸成功标记口腔黏膜上皮细胞,普鲁士蓝染色显示细胞内存在蓝染铁颗粒,且随质量浓度增加,蓝染颗粒增加,至25 mg/L时蓝染率达到饱和;②CCK-8法检测结果表明超微超顺磁性纳米氧化铁质量浓度低于25 mg/L时,细胞增殖不受影响;③磁共振扫描显示,随着转染质量浓度增加,超微超顺磁性纳米氧化铁标记细胞磁共振信号降低;④结果表明,超微超顺磁性纳米氧化铁联合多聚赖氨酸能有效标记犬口腔黏膜细胞,且当转染质量浓度在25 mg/L以下时,不影响细胞增殖,体外磁共振成像显影良好。
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去细胞化全肝生物支架修复肝损伤
背景:去细胞化支架是一类特殊的支架,它保留了组织中的管道结构,解决了细胞生长营养输送问题,并且能为细胞提供近似体内的生长环境,具有其他修复材料无法比拟的优势。目的:研究去细胞化全肝生物支架的制备方法,探讨去细胞化全肝生物支架修复肝损伤的效果。方法:取SD大鼠12只,采用化学去垢剂-酶联合去细胞化技术制备去细胞化全肝生物支架。另取SD大鼠24只,建立肝损伤模型,随机分为2组,实验组肝损伤部位置入去细胞化全肝生物支架,对照组于肝损伤部位注射生理盐水。术后30 d,检测血清丙氨酸转氨酶及谷草转氨酶水平,取肝脏组织进行苏木精-伊红染色观察。结果与结论:①去细胞化全肝生物支架的结构:苏木精-伊红染色可见细胞外基质样结构存在;电镜下可见肝脏内细胞成分被完全去除,支架胶原纤维排列整齐,未出现溶解现象;②血清丙氨酸转氨酶及谷草转氨酶水平:实验组丙氨酸转氨酶及谷草转氨酶水平显著低于对照组(P<0.05);③肝脏组织苏木精-伊红染色:对照组可见大量蓝染并密集分布的细胞核及粉红色分布结构,纤维胶原之间并未出现明显断裂;实验组可见粉红色且分布密集结构;④结果表明:采用化学去垢剂-酶联合去细胞化技术制备去细胞化全肝生物支架方法相对简单,去细胞化全肝生物支架可促进肝损伤的修复。
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烷基化壳聚糖的制备及止血效果
背景:新研究表明,壳聚糖的C2位上引入一定数量的十八烷基苯基团进行疏水改性后,可显著提高壳聚糖的凝血性能。目的:在壳聚糖分子引入烷基,改善材料与伤口的黏附力。方法:采用还原氨化法在壳聚糖分子上引入烷基,制备不同取代度的烷基化壳聚糖(7%、16%、26%、40%),检测壳聚糖与不同取代度烷基化壳聚糖的结构、黏度、孔隙率、吸水率、接触角及体外凝血性能。取30只新西兰白兔,均建立左侧股动脉出血模型,随机分6组,实验4组分别以不同取代度烷基化壳聚糖止血海绵止血,阳性对照组以可吸收止血纱布止血,对照组以壳聚糖止血海绵止血,观察出血量与止血时间。结果与结论:①随着取代度的增加,烷基化壳聚糖的黏度呈先增加后减小的趋势,孔隙率、吸水率逐渐下降,接触角逐渐增大;②与壳聚糖相比,不同取代度取代度烷基化壳聚糖均具有较好的体外止血效果,其中以16%烷基化壳聚糖的体外止血效果好;③体内实验显示,取代度16%、26%、40%烷基化壳聚糖组的止血时间与出血量均少于对照组(P<0.05),40%烷基化壳聚糖组的出血量少于阳性对照组(P<0.05);④结果表明,取代度40%烷基化壳聚糖用于体内止血时,止血效果佳。
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钛离子对T淋巴细胞体外增殖及活化的影响
背景:已有研究证实,钛离子可以刺激T淋巴细胞分泌骨改建相关因子,然而尚无文献报道钛离子对T淋巴细胞早期活化、中期活化及细胞周期的作用。目的:观察钛离子对T淋巴细胞体外增殖和活化的影响。方法:①细胞增殖与周期实验:取对数生长期Jurkat E6-1 T淋巴细胞,分组培养,对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组分别加入含0,25,50,100μmol/L钛离子的培养基培养,24 h后,检测细胞相对增殖率与细胞周期;②细胞活化实验:先将Jurkat E6-1 T淋巴细胞分为两大组,一组预先进行植物血凝素刺激,另一组不进行植物血凝素刺激,两组再分别分为对照组、低浓度组、中浓度组、高浓度组4个亚组,24 h后,检测细胞早期活化抗原CD69和中期活化抗原CD25的表达。结果与结论:①细胞增殖:钛离子呈浓度依赖性促进T淋巴细胞的增殖(P<0.05);②细胞周期:与对照组比较,低浓度组、中浓度组、高浓度组G0/G1期细胞比例降低(P<0.05),S期、G2/M期细胞比例明显升高(P<0.05);高浓度组G0/G1期细胞比例低于低、中浓度组(P<0.05),G2/M期细胞比例高于低、中浓度组(P<0.05);③细胞活化实验:植物血凝素刺激预先刺激下,高浓度组CD69表达高于对照组、低浓度组、中浓度组(P<0.05),4组间CD25表达比较差异无显著性意义;无植物血凝素刺激预先刺激下,钛离子呈浓度依赖性促进CD69的表达(P<0.05),各组均无CD25表达;④结果表明:钛离子能促进T淋巴细胞体外增殖及早期活化,同时能诱导T淋巴细胞进入S期、G2/M期。