中国组织工程研究杂志
Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복
- 主管单位: 中华人民共和国卫生部
- 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
- 影响因子: 1.38
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 2095-4344
- 国内刊号: 21-1581/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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Spine Decide软件在脊柱外科临床实习教学中的应用
背景:脊柱,因其复杂的结构和其特殊的功能,一直以来是临床教学的难点和重点,如何将现代化软件应用于脊柱外科临床教学是目前研究的热点。目的:探索Spine Decide软件在脊柱外科临床教学中的应用。方法:通过Spine Decide软件,带教教师可以主动引导实习生自己学习脊柱疾病的诊断,设计手术方案,通过实际手术的参与,充分理解脊柱外科疾病的诊疗过程和疾病发生发展过程。结果与结论:学员通过主动的学习以及与Spine Decide软件的积极互动,能够在短时间内系统化、条理化的理解脊柱疾病的发生机理、诊断、治疗以及预后。Spine Decide应用于教学后,实习生的临床思维能力、自学能力等明显提高,学生学习脊柱相关疾病的主动性和积极性显著优于传统教学方法,创新性和探索性也有了突破性的提高,切实提高了教学质量。
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器官获取组织质量管理的实践与思考
背景:随着人体捐献器官获取与分配相关政策的出台,器官获取、获取标准及器官如何分配都有了明确化的操作标准,但器官获取组织的工作流程、组织定位还不够精细化、规范化。目的:分析解放军广州军区广州总医院器官获取组织质量管理经验,及时审视工作进展并探讨需要改进的方面,为进一步加强器官获取组织质量管理和建立高效专业的器官获取组织提出相应对策。方法:通过关键词“器官捐献,器官移植,器官获取组织,质量管理;organ donation,organ transplantation, Organ Procurement Organization,quality management”,在CNKI 和PubMed等数据库中综合分析来源于核心期刊的文章。结果与结论:根据有关法律法规,解放军广州军区广州总医院制定了评价标准与检查标准,并成立了有关小组,实现职责与权力的统一和明确。同时,完善有关的器官捐献、获取、保存、登记等环节,根据这些不同环节制定针对性的质量管理计划。另外,定期举行协调员培训班,进行规范化培训。通过一系列质量管理措施,该院器官获取组织已逐步正规化,取得了一定成果,并且建议进一步强化科研研究,实现效率和效益的统一;提高院领导重视度,完善器官获取机制;重视人才培养,提高器官获取组织成员的专业素质;加强信息化管理,实现多学科协作;建立质量评价体系,实现全过程质量管理;重视医学伦理,实现医患和谐。
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乳腺癌改良根治术后即刻背阔肌肌皮瓣移植重建乳房:42例分析
背景:在根治肿瘤的同时如何保持女性乳房的形态完美这一问题得到了越来越多医生及患者的关注,乳房再造由此而产生、发展,逐渐成为乳腺癌治疗的重要组成部分。目的:探讨乳腺癌改良根治术后即刻背阔肌肌皮瓣移植重建乳房的可行性及疗效。方法:纳入42例女性单侧乳腺癌患者,均进行保留乳头乳晕或保留乳房的改良根治术,术后即刻自体背阔肌皮瓣或扩大背阔肌肌皮瓣移植重建乳房,根据客观标准及主观标准评价重建效果。结果与结论:42例中,33例行保留乳头乳晕的乳腺癌改良根治术、9例行保留皮肤的乳腺癌改良根治术,背阔肌乳房重建24例、扩大背阔肌乳房重建18例。转移皮瓣及重建的乳房全部成活,无严重并发症发生。客观评价美容效果优良39例,一般3例;主观评价优良者40例,尚可者2例。随访9-41个月,所有患者无肿瘤局部复发,1例出现骨转移。表明乳腺癌改良根治术后即刻采用背阔肌移植重建乳房操作简单、易行,整形效果好,安全性高,成活率高。
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三氟拉嗪干预兔耳增生性瘢痕模型:降低瘢痕厚度的作用
背景:增生性瘢痕常规的治疗手段包括手术切除、类固醇激素、抗代谢药、免疫抑制剂和放射疗法等,大多容易重复发作或有较严重的反应而限制了其在临床方面的使用。近年来应用钙离子阻断剂治疗增生性瘢痕取得了较为理想的进展,且不良反应小。目的:观察钙通道阻滞剂三氟拉嗪对兔耳增生性瘢痕产生的影响。方法:选取大耳白兔24只为实验对象,适应性饲养1周后,参照Morris和李荟元等方法建立兔耳瘢痕模型,按照随机数字表法分为3组,每组8只。造模后30 d瘢痕形成后,三氟拉嗪组、曲安奈德组分别给予三氟拉嗪、曲安奈德注射液,空白对照组不做处理。对比观察各组瘢痕增生变化情况,瘢痕增生指数,瘢痕基质金属蛋白酶2、金属蛋白酶抑制因子2、转化生长因子β1、α-平滑肌肌动蛋白及增殖细胞核抗原水平。结果与结论:分别用药10,20 d后,3组兔耳都有肉眼可见的皮肤隆起,且无兔毛生长。三氟拉嗪组兔耳较曲安奈德组发生明显软化,颜色偏暗红;空白对照组兔耳瘢痕明显,颜色偏红。三氟拉嗪组与曲安奈德组在用药20 d后,瘢痕厚度、瘢痕指数均低于空白对照组;与空白对照组比较,三氟拉嗪组、曲安奈德组基质金属蛋白酶2的表达明显升高;金属蛋白酶抑制因子2、增殖细胞核抗原以及转化生长因子β1的表达明显降低。提示三氟拉嗪治疗兔耳瘢痕增生效果良好,有降低瘢痕厚度的作用。
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重组人γ-干扰素联合白消安诱导建立小鼠重型再生障碍性贫血模型
背景:建立理想的重型再生障碍性贫血动物模型对探究再生障碍性贫血发病机制及筛选有效防治药物尤为重要。目的:应用注射用重组人γ-干扰素联合白消安建立小鼠重型再生障碍性贫血模型。方法:选择健康雌性昆明小鼠60只,随机分为再生障碍性贫血造模组(n=50)和对照组(n=10)。再生障碍性贫血造模组予重组人γ-干扰素1×104 U/d腹腔注射,以白消安18 mg/(kg?d)灌胃,均连续用药7 d;对照组给予同等容量生理盐水灌胃及腹腔注射。比较两组间一般情况、体质量及血细胞计数,并观察再生障碍性贫血造模组小鼠骨髓细胞形态学及骨髓活组织病理学的变化。结果与结论:给药第7天时,再生障碍性贫血造模组小鼠体质量、白细胞、血红蛋白、血小板及网织红细胞计数均较对照组明显下降,差异有显著性意义(P<0.05);骨髓细胞形态学及骨髓活组织病理学检查显示再生障碍性贫血造模组小鼠骨髓增生极度减低,非造血细胞团相对易见,油滴明显增多,脂肪空泡明显。提示联合应用重组人γ-干扰素和白消安能成功建立小鼠再生障碍性贫血模型,该造模方法操作简便,费用低,稳定性好。
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白细胞介素1受体相关激酶4活性在皮瓣缺血再灌注损伤中的作用
背景:白细胞介素1受体相关激酶4活性引发炎症及感染的作用已得到广泛认可,但其对皮瓣缺血再灌注损伤是否有影响尚无文献报道。目的:探讨白细胞介素1受体相关激酶4活性在皮瓣缺血再灌注损伤中的意义。方法:将36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注损伤组、白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组,每组12只。制备右下腹岛状皮瓣缺血再灌注损伤模型,白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂处理组于再灌注前腹腔注射1 mL白细胞介素1受体相关激酶1/4抑制剂(100μmol/L),分别采集缺血再灌注后1,2,4,6 h的皮瓣行组织病理学观察,取缺血再灌注后1 h的皮瓣组织行白细胞介素1受体相关激酶4的蛋白表达量,并于术后7d计算皮瓣存活比例。结果与结论:组织病理学观察显示,与缺血再灌注损伤组相比,白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组中性粒细胞浸润及组织水肿程度明显改善,白细胞介素1受体相关激酶4的蛋白表达量逐渐降低。术后7d缺血再灌注损伤组皮瓣存活比例为(51.70±7.62)%,白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组皮瓣存活比例高达(86.56±12.23)%,两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。提示大鼠皮瓣缺血再灌注损伤后,可以通过抑制白细胞介素1受体相关激酶4活化提高移植皮瓣的成活率。
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胃扩张模型大鼠迷走神经背核胃相关神经元对不同针刺穴位的反应
背景:课题组的前期工作主要围绕孤束核在接受胃伤害性刺激和针刺穴位反应中所扮演的角色展开研究,而迷走神经背核与孤束核、后区一起作为迷走神经复合体中不可或缺的组成部分,在调节胃功能中发挥了重要的作用。目的:观察针刺“足三里”、“内关”、“脾俞”、“肾俞”等不同神经节段穴位对胃扩张模型大鼠迷走神经背核胃相关神经元的影响。方法:在成功构建大鼠胃扩张造模的基础上,采用神经电生理学的方法,运用细胞外记录技术,找出迷走神经背核胃相关神经元,予以手针刺激“足三里”、“内关”、“脾俞”、“肾俞”等不同神经节段穴位各15 s,记录来自体表的刺激对迷走神经背核胃相关神经元的影响。结果与结论:24只大鼠共记录到90个神经元放电,90个下丘脑室旁核神经元中与胃扩张相关的神经元有54个,54个胃扩张相关神经元中,对针刺足三里、内关、脾俞、肾俞有反应的神经元个数分别为44,39,38,27,有反应的神经元出现比例分别为82%,72%,70%,50%。提示针刺不同神经节段穴位均能不同程度地激活迷走神经背核参与调节胃运动。
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脊髓全横断模型大鼠的行为学与病理学对照
背景:理想的脊髓损伤模型应既能模拟人类脊髓损伤,又能排除影响疗效的干扰因素,并具有广泛可重复性,脊髓全横断模型是目前较理想的选择。但由于操作方法的多样性致使疗效差异较大,各研究结果之间缺乏可比较性。目的:通过建立标准化的大鼠脊髓全横断模型,对比分析脊髓全横断大鼠后肢行为学改变和病理学特征。方法:成年雌性SD大鼠60只,随机分为假手术组(n=12)、常规脊髓横断组(n=24)和显微脊髓横断组(n=24),每组再随机分为造模后7,14,28 d组。以T9椎体为中心,假手术组行椎板切除;其他两组行脊髓全横断,造成脊髓急性损伤模型,其中常规脊髓横断组采用常规外科方法造模,显微脊髓横断组采用标准化显微操作技术造模。各组于造模后7,14和28 d行后肢运动功能BBB评分及横断处脊髓的组织病理学观察,观测脊髓横断处瘢痕组织厚度、脊髓残端间距、空洞横径和脑脊液囊腔形成情况,计算瘢痕指数、残端间距指数和空洞指数。结果与结论:假手术组术前、术后BBB 评分和脊髓病理无明显变化。常规脊髓横断组和显微脊髓横断组大鼠造模后后肢完全性瘫痪,其中常规脊髓横断组大鼠后肢功能无恢复。造模后一至二周,显微脊髓横断组大鼠开始出现后肢运动功能自发性恢复,脊髓病理学检测指标值均明显低于常规脊髓横断组,差异有非常显著性意义(P <0.01)。各组病理学观测指标与 BBB 评分之间无相关关系。提示标准化脊髓全横断造模方法有利于消除个体差异,更有利于对治疗效果的量化分析和研究比较。
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虎纹捕鸟蛛毒素对脑缺血模型大鼠海马肿瘤坏死因子凋亡通路的影响
背景:虎纹捕鸟蛛毒素经离子通道分析技术证明是一种作用于突触前膜的N型钙离子通道阻断剂。目的:观察新型钙通道拮抗剂虎纹捕鸟蛛毒素对全脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马组织肿瘤坏死因子凋亡通路中肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8表达的影响。方法:采用Pulsinel i“四血管阻断法”构建全脑缺血结合蛛网膜下腔置管大鼠模型,通过留置的PE10管注入虎纹捕鸟蛛毒素或生理盐水。应用电镜、RT-PCR实验技术检测全脑缺血再灌注损伤大鼠海马CA1区锥体细胞超微结构和胞内线粒体形态变化及对海马组织中肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8等肿瘤坏死因子凋亡通路相关因子基因表达。结果与结论:虎纹捕鸟蛛毒素能维持全脑缺血再灌注脑损伤大鼠线粒体基本形态且能不同程度降低肿瘤坏死因子凋亡通路中促凋亡因子肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8 mRNA表达。提示天然活性多肽虎纹捕鸟蛛毒素作为一种新型N-型电压依赖性钙通道阻断剂,能有效阻断胞外Ca2+的大量内流,使细胞内游离钙降低,减少由于细胞内钙超载而引起的一系列病理损害,从而保护神经细胞,减轻缺血缺氧海马神经细胞的损伤。
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PC机上基于CT、MRI图像构建的颌面部三维数字模型
背景:近年来国内外学者对个人 PC 机上重建颌面部骨组织、皮肤、肌肉三维可视化模型进行了大量研究,但对于建立颌面部骨骼、皮肤、肌肉、血管的整体三维可视化模型尚无报道。目的:利用螺旋 CT、MRI 数据及三维重建软件,在普通 PC 机建立颌面部整体的三维可视化模型。方法:选择1名健康成年男性作为建模对象,分别通过螺旋CT、核磁共振扫描,得到样本的DICOM标准图像。将所有CT、MRI图像导入Mimics,建立颌面部骨骼、部分咀嚼肌、三叉神经池、颈内动脉、颈内静脉的三维可视化模型。选择颌面部骨骼三维模型为基准,将由MRI图像建立的肌肉、血管、三叉神经池模型导入,进行三维模型空间配准。终得到颌面部整体的三维可视化模型。结果与结论:成功建立了颌面部骨骼、肌肉、皮肤、三叉神经池、血管的整体三维模型,准确反映了颌面部复杂的解剖结构,可为临床诊断提供可靠的解剖资料,并为今后的模拟手术打下良好的基础。
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血管性痴呆模型大鼠接受沙棘总黄酮后血清肿瘤坏死因子α及白细胞介素1β的表达
背景:研究表明沙棘所含沙棘总黄酮对免疫系统的多环节都具有不同程度的调节能力,但有关沙棘总黄酮对血管性痴呆炎症因子影响的研究还鲜有报道。目的:观察沙棘总黄酮对血管性痴呆模型大鼠血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β水平的影响,探讨其对血管性痴呆的干预机制。方法:取Wistar大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、对照组、沙棘总黄酮高剂量组、沙棘总黄酮中剂量组、沙棘总黄酮低剂量组,后5组采用改进的“血管阻断法”建立血管性痴呆模型,假手术组仅切开分离双侧颈总动脉而不结扎。造模后1 d,对照组灌胃给予银杏提取物48 mg/(kg?d),沙棘总黄酮高、中、低剂量组分别灌胃给予沙棘总黄酮200,100,50 mg/(kg?d),模型组与假手术组灌胃给予等量生理盐水,连续灌胃30 d后进行Morris水迷宫行为学测试,并检测血清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β水平。结果与结论:与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力下降,血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β水平增加(P<0.05);经银杏叶提取物、沙棘总黄酮干预后,大鼠学习记忆能力得到改善,血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β水平下降(P <0.05)。表明沙棘总黄酮能减少血管性痴呆模型大鼠血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β水平,这可能是其干预血管性痴呆的主要作用机制之一。
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构建创伤性股骨头塌陷坏死大鼠模型及阿仑膦酸钠预防的机制
背景:临床随访研究表明阿仑膦酸钠对于预防股骨头坏死塌陷有效,但尚缺乏其预防塌陷作用的机制研究。目的:分析阿仑膦酸钠预防股骨头坏死塌陷的效果及其作用机制。方法:将45只SD大鼠随机分成3组,每组15只。安慰剂组在建立股骨头坏死模型后给予生理盐水治疗;阿仑膦酸钠组建立股骨头坏死模型后给予药物阿仑膦酸钠治疗;假手术组给予同样剂量的生理盐水治疗。造模后5周处死大鼠,取造模侧股骨标本分别行大体标本观察,X射线、Micro-CT及组织学检测。结果与结论:大体标本观察安慰剂组股骨头明显塌陷畸形,阿仑膦酸钠组股骨头轻度变形。股骨头高度与宽度的比值假手术组>阿仑膦酸钠组>安慰剂组,差异均有显著性意义。Micro-CT扫描结果显示阿仑膦酸钠组骨小梁平均数量多于安慰剂组,少于假手术组,差异均有显著性意义。阿仑膦酸钠组骨小梁平均厚度小于安慰剂组,但和假手术组比差异无显著性意义。阿仑膦酸钠组骨小梁平均间距小于安慰剂组,但大于假手术组,差异均有显著性意义。阿仑膦酸钠组股骨头骨组织体积、骨表面积、骨矿盐密度均大于安慰剂组,小于假手术组,差异均有显著性意义。组织学检测结果显示,阿仑膦酸钠组存在明显的死骨,破骨细胞明显受到抑制,破骨细胞数量较安慰剂组明显减少,成骨细胞和新生血管也受到了一定程度的抑制。结果表明阿仑膦酸钠可通过全面抑制破骨细胞、成骨细胞及血管新生而抑制骨坏死的修复反应,减慢坏死骨的吸收,保存骨量及股骨头形态,对大鼠创伤性股骨头坏死早期塌陷具有一定的预防作用。
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川芎嗪纳米喷雾剂对抗实验性腹腔粘连模型大鼠的佳有效剂量
背景:临床应用川芎嗪防治外科治疗后腹腔粘连和粘连性肠梗阻时取得明显疗效。目的:为了达到缓释性并且提高临床疗效,将川芎嗪同纳米技术结合制备成川芎嗪纳米喷雾剂,探讨其抗大鼠实验性腹腔粘连的佳有效剂量。方法:将80只大鼠随机分为5组:模型组、透明质酸钠组、川芎嗪纳米喷雾剂低、中、高剂量组,每组16只。以锉刀法建立腹腔粘连大鼠模型,模型组直接关腹,其余各组大鼠分别于造模后腹腔涂抹透明质酸钠凝胶、喷涂川芎嗪纳米喷雾剂2.5,5,10 mg/kg。分别于造模后1,2周处死,观察粘连情况,记录粘连得分,粘连组织切片进行苏木精-伊红染色,观察粘连组织病理改变,Elisa法测定大鼠腹腔液转化生长因子β1的水平。结果与结论:川芎嗪纳米喷雾剂具有缓释作用,延长了药物的作用时间,从而达到了更好的抗术后粘连的作用。其中以川芎嗪纳米喷雾剂中、高剂量抗粘连效果好;川芎嗪纳米喷雾剂中、高剂量组可以对粘连模型大鼠腹腔液转化生长因子β1水平的升高有较好的改善作用。综合考虑到药物的浓度较低,给药方式为腹腔喷雾给药,因给药总量的限制,选择5 mg/kg为佳有效的剂量。
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断肢再植后肢体缺血再灌注损伤模型大鼠与补阳还五汤的干预影响
背景:近年来,中医药在缺血再灌注损伤的临床诊疗中发挥着独特作用。目的:探讨补阳还五汤在大鼠下肢断肢再植后缺血再灌注损伤中的影响,评估其对缺血组织的保护作用及机制。方法:将120只Wistar大鼠随机均分为4组,正常对照组仅麻醉及灌胃给予生理盐水,其余3组建立下肢断肢再植后缺血再灌注损伤动物模型,补阳还五汤组再灌注即刻灌胃给予补阳还五汤10 mL/kg,依达拉奉组再灌注即刻尾静脉注射依达拉奉10 mL/kg,空白对照组灌胃给予生理盐水。再灌注24 h后,测定血液髓过氧化酶、乳酸脱氢酶、总一氧化氮合酶、诱导型一氧化氮合酶、结构型一氧化氮合酶水平;再灌注1周后,检测腓肠肌组织中超氧化物歧化酶活性、一氧化氮及丙二浓度、钙离子负载,采用RT-PCR半定量分析腓肠肌组织中bcl-2 mRNA和bax mRNA转录水平。结果与结论:与空白对照组、依达拉奉组相比,补阳还五汤可有效降低肢体缺血-再灌注后氧自由基的产生,增强超氧化物歧化酶活性,减轻钙超载,减少血浆一氧化氮的大量生成,增强抗凋亡基因bcl-2的表达,减弱促进凋亡基因bax的表达,减轻肢体缺血再灌注后骨骼肌损伤程度。结果表明补阳还五汤对大鼠断肢再植后下肢缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,能有效清除自由基,抑制骨骼肌细胞凋亡,减轻再灌注损伤。
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脉络宁对体外模拟体内生理环境寄养断肢系统缺血/再灌注损伤模型的作用
背景:减少体外模拟体内生理环境寄养断肢系统的缺血再灌注损伤,可以延长断肢的保存时间,提高断肢的再植成功率。目的:观察脉络宁对体外模拟体内生理环境寄养断肢系统缺血再灌注损伤的影响。方法:健康成年雄性巴马小型猪18只,随机分成冷藏组、血液灌注组和脉络宁联合血液灌注组,每组6只。将每只猪的左后肢离断室温保存3h后,冷藏组置于4℃冷藏,血液灌注组用血液灌注、脉络宁联合血液灌注组用脉络宁联合血液灌注。灌注6h后,采用透射电镜分别观察各组离断肢体骨骼肌形态学变化;实时定量RT-PCR检测离断肢体骨骼肌Caspase3和白细胞介素1βmRNA表达。结果与结论:透射电镜结果显示,血液灌注组、脉络宁联合血液灌注组均较冷藏组肌纤维整齐、肌节完整、线粒体肿胀程度轻,且脉络宁联合血液灌注组情况优于血液灌注组;实时定量RT-PCR检测结果显示,3组的caspase3和白细胞介素1β的表达均高于正常,同时血液灌注组和脉络宁联合血液灌注组的caspase3和白细胞介素1β的表达水平明显低于冷藏组,且脉络宁联合血液灌注组表达水平低于血液灌注组。结果提示在体外模拟体内生理环境寄养断肢系统中,脉络宁可显著减轻断肢骨骼肌细胞的缺血再灌注损伤,延长断肢的保存时间。
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肺缺血再灌注损伤模型犬接受去氢骆驼蓬碱干预后无明显肺保护作用
背景:炎性细胞活化、氧自由基的产生是肺缺血再灌注损伤发生的重要因素。在常用的肺保护液中增加可能具有抑制炎症、抗氧化作用的药物,使保护液进行一定的改良,对肺缺血再灌注损伤的研究及保护移植肺的功能具有重要的意义。目的:探讨去氢骆驼蓬碱对犬肺缺血再灌注损伤的作用。方法:将12只健康杂交犬随机分为两组,每组6只。建立犬肺缺血再灌注损伤模型,采用顺灌方式行保护液肺灌注,实验组给予低钾右旋糖苷保护液+去氢骆驼蓬碱溶液灌注,对照组给予低钾右旋糖苷保护液。缺血2h后,恢复左肺循环,两组于再灌注后采集左肺组织及血液标本,检测细胞因子水平,计算肺湿/干质量比;收集支气管肺泡灌洗液,观察各项病理指标;连续测量记录主肺动脉压、左肺动脉压和右肺动脉压。结果与结论:两组于再灌注2,4 h时左肺组织及血液中的白细胞介素17、肿瘤坏死因子α及内皮素1水平差异均无显著性意义(P>0.05),两组再灌注4 h后的支气管肺泡灌洗液中性粒细胞数目、淋巴细胞数目、肺泡损伤指数及血管壁水肿程度差异均无显著性意义(P >0.05),两组肺湿/干质量比差异均无显著性意义(P >0.05),经方差分析,两组主肺动脉压、左肺动脉压及右肺动脉压差异均无显著性意义(P>0.05)。结果可见通过对细胞因子、病理指标、肺组织湿/干质量比及肺动脉压力分析,去氢骆驼蓬碱在犬肺原位常温缺血再灌注损伤模型中没有明显的肺保护作用。
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红藻氨酸诱导内质网应激模型的途径
背景:前期研究表明,海马内注射红藻氨酸海可诱发兴奋性红藻氨酸受体KA1亚受体在海马神经元的表达明显上调,内质网应激标志物磷酸化真核翻译起始因子2α表达增加并伴随细胞死亡。目的:探讨红藻氨酸海马内注射后内质网应激发生的机制。方法:取昆明小鼠32只,将0.15 nmol 红藻氨酸注入海马CA1区域,注射时间为60 s。分别于红藻氨酸注射后第1,2,3,4,5,6,8,12小时灌注取脑,灌注取脑前进行Bederson体征评分,然后行全脑切片FJB染色分析与免疫荧光双标记观察。结果与结论:①红藻氨酸注射后第3,4,5,6,8小时,Bederson 体征评分表明中枢神经功能出现明显损伤,FJB染色示小鼠海马内神经元死亡明显;注射后第1,2,12小时,Bederson体征评分中枢神经功能未见明显损伤,FJB染色小鼠海马神经元死亡结果不明显。②根据FJB结果,取第3,8小时的脑片做免疫组化。海马内注射红藻氨酸后导致海马神经元中KA1和磷酸化真核翻译起始因子2α在相同的时间点表达明显上调,将KA1与磷酸化真核翻译起始因子2α图片结果进行叠加处理,两者完全重合,表明KA1的表达和内质网应激发生在同一个神经细胞内。结果表明红藻氨酸首先诱导了兴奋性膜上受体KA1表达的上调,其KA1的表达上调可能引起细胞内质网功能紊乱,导致内质网应激反应,并进一步促进了神经细胞的死亡。
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结肠癌肝转移模型构建方法的优化
背景:结肠癌转移途径主要有血行转移、腹膜转移和淋巴结转移等,常转移的器官是肝脏,建立一个简单、合适的动物模型对于研究结肠癌肝转移的生物学行为、癌细胞的异质性、肿瘤转移机制至关重要。目的:通过切脾注射法建立结肠癌肝转移的动物模型。方法:将人结肠癌细胞株HT29孵育培养,通过建立BALB/c小鼠皮下移植瘤与脾脏注射并切除脾脏相结合的方法建立结肠癌肝转移瘤模型,观察肿瘤生长及转移情况,肝转移瘤组织病理学变化,以及肝转移瘤DNA含量和细胞周期。结果与结论:实验采用背侧正中线旁切口进行脾脏注射切脾法成功建立了人结肠癌肝转移瘤模型,成瘤率达8/8(100%)。移植瘤组织切片观察显示肿瘤为腺癌I-Ⅱ级。流式细胞术检查分析DNA倍体为异倍体。该模型为结肠癌转移的生物学研究提供了一个良好的技术平台。
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急性力竭运动模型大鼠鱼腥草素干预后的肾滤过屏障变化
背景:大强度急性力竭运动过程中,机体既要承受由于运动强度的增加内脏血流急骤下降的“运动性缺血”,同时随着运动进行,能源物质耗蝎、代谢产物堆积及氧化应激等因素致使机体出现病理损伤,导致机体运动能力下降,那么,其对肾滤过屏障有何影响?肾组织将如何适应其变化?鱼腥草具有清热解毒、利尿通淋、止血、祛痰止咳、镇痛等多种功能,是否对急性力竭运动引起的肾损伤有保护作用及其机制尚未见有文献报道。目的:探索急性力竭运动对大鼠肾滤过屏障的影响及鱼腥草素的干预作用。方法:SD大鼠静养与观察3 d,在速度为10 m/min坡度为0°的跑台上进行适应性跑15 min,筛选出24只能完成跑的大鼠,按体质量分层随机分为正常对照组,力竭运动组和运动给药组,各8只。力竭运动组和运动给药组在坡度为10°的动物跑台上进行的一次性力竭运动;运动给药组在运动前30 min腹腔注射鱼腥草素10 mL/kg;正常对照组大鼠不运动。结果与结论:与正常对照组比,力竭运动组大鼠血清尿素氮、血清肌酐、尿蛋白含量、丙二醛浓度、肾细胞凋亡率及凋亡指数显著增加,肾组织一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性明显下降(P <0.05或0.01),肾小球滤过上皮细胞、基膜及足细胞的肾滤过屏障损害明显,见大量细胞凋亡,偶见坏死;与力竭运动组比,运动给药组大鼠尿蛋白含量、血清肌酐、丙二醛浓度、肾细胞凋亡率及凋亡指数显著下降,肾组织一氧化氮含量和一氧化氮合酶活性明显增加(P<0.05),肾组织未见明显病理改变,可见细胞凋亡。提示鱼腥草素可使力竭运动诱导的肾细胞损伤减少,考虑可能与凋亡显著减少;并可使一氧化氮合酶含量增加、丙二醛下降及超氧化物歧化酶明显增高有关,从而对力竭运动诱导大鼠肾组织损伤起保护作用。
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恒河猴肝移植模型移植后急性排斥反应时肿瘤坏死因子α的变化
背景:肿瘤坏死因子α是一种炎性细胞因子,参与移植免疫反应并增加移植物抗原表达,并在其中发挥着重要作用。目的:分析恒河猴肝移植后肝组织中肿瘤坏死因子α的变化与急性排斥反应的关系。方法:采用改良血管袖套+胆道支撑管+动脉吻合法建立稳定的恒河猴肝移植模型,将其随机分为实验组(围手术期不给予免疫抑制治疗)和对照组(围手术期给予免疫抑制治疗)。分别在移植后6,12,24和72 h 4个时间点分别收集血清及肝脏组织,检测肝功指标变化,通过苏木精-伊红染色Banff评分评定其移植排斥反应情况,并终应用免疫组织化学技术、蛋白印迹分析分别检测肿瘤坏死因子α的表达水平。结果与结论:实验组和对照组肿瘤坏死因子α的表达在移植后6 h即开始增高,至12 h时达到高峰,24-72 h降低,并且实验组变化明显。移植后6,12,24和72 h 4个时间点组实验组肿瘤坏死因子α蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),此变化早于肝组织病理学及肝功能的改变。提示肝移植后肝组织肿瘤坏死因子α的表达水平变化,对肝移植后急性排斥反应的早期诊断具有重要意义。
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恒河猴肝移植模型急性排斥反应中白细胞介素6的表达
背景:白细胞介素6是免疫炎症反应中一种重要的细胞因子,它与移植排斥反应具有密切的关系,在移植排斥反应诊断和抗排斥疗效评价中发挥着重要作用。目的:检测白细胞介素6在恒河猴肝移植后急性排斥反应中的表达水平,以评价其作为肝移植后急性排斥反应早期诊断指标的价值。方法:以16只恒河猴为研究对象,将其随机分为实验组(围手术期不给予免疫抑制治疗)和对照组(围手术期给予免疫抑制治疗),然后建立恒河猴同种异体原位肝移植模型;分别在移植后6,12,24,72 h时间点收集血清及肝脏组织,通过检测肝功指标和移植肝组织苏木精-伊红染色Banff评分反映其移植排斥反应情况,并应用酶联免疫吸附法、免疫组织化学技术分别检测白细胞介素6的表达水平。结果与结论:肝移植后12,24,72 h实验组均有急性排斥反应发生,其中实验组丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素在24 h和72 h表达水平明显高于对照组(P<0.05);实验组72 h组织学表现重于对照组,Banff评分高于对照组(P<0.05);实验组中血清、肝组织的白细胞介素6水平在肝移植后12,24,72 h明显高于对照组(P <0.05),并以72 h为明显。结果表明白细胞介素6可能参与肝移植后排斥反应的发生,其表达可能在恒河猴原位肝移植后急性排斥反应的早期诊断中有一定意义。
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Exendin-4对不同热缺血时间心死亡供体大鼠胰岛功能的影响
背景:心死亡供体大鼠供胰的利用不可避免地经过热缺血损伤,因此热缺血时间的长短对获得的胰岛数量及功能有重要影响。目的:观察Exendin-4对不同热缺血时间心死亡供体大鼠胰岛功能的影响。方法:大鼠胰岛细胞体外培养,根据实验条件随机分为3大组:热缺血0,30和45 min组,每组又分为2亚组,其中对照组为胰岛细胞培养24 h;实验组为10 nmol/L Exendin-4与胰岛细胞培养24 h。应用双硫踪染色来计算分离胰岛数目并判断所提胰岛的纯度;丫啶橙/溴乙啶染色检测胰岛存活,胰岛素释放实验检测胰岛功能。结果与结论:随着热缺血时间的延长各组获得胰岛细胞的数量、纯度、存活率及功能逐渐降低。热缺血0 min组、30 min组、45 min组加入10 nmol/L Exendin-4培养24 h后分离、纯化的胰岛数量及纯度、活性均比未加入Exendin-4培养的对照组有所提高,热缺血30 min及热缺血45 min组中的实验组与对照组相比差异均有显著性意义(P<0.05)。提示Exendin-4对不同热缺血时间心死亡供体大鼠胰岛细胞具有保护作用,能减少胰岛细胞凋亡,改善胰岛的存活与功能;Exendin-4的使用可能成为胰岛移植早期缺血的边缘供体预处理的有效方法。
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多模式镇痛对肾移植后免疫功能的影响
背景:多模式镇痛模式应用于肾移植受者可有效减轻疼痛,并有利于移植肾功能恢复。目的:观察地佐辛多模式镇痛对肾移植后患者免疫功能的影响,并探讨合适的移植后镇痛药物及方式。方法:40例肾移植患者随机分为两组,均行硬膜外阻滞复合全身麻醉。对照组间断肌注镇痛药物,地佐辛多模式镇痛组给予地佐辛超前镇痛+术后硬膜外患者自控镇痛。记录麻醉前,移植后12,24,48 h的心率、动脉平均血压、血氧饱和度;抽取静脉血检测T淋巴细胞亚群含量和白细胞介素2、白细胞介素6和白细胞介素10水平。结果与结论:与麻醉前比较,对照组移植后CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、白细胞介素2和白细胞介素6水平均明显下降(P<0.05),白细胞介素10水平明显升高(P<0.05)。地佐辛多模式镇痛组CD4+、白细胞介素2、白细胞介素6水平在移植后12 h低于麻醉前(P<0.05),移植后24 h则恢复至麻醉前水平。CD8+、CD4+/CD8+与移植前比较变化不明显。白细胞介素10水平在移植后48 h明显高于移植前,但低于对照组(P<0.05)。结果可见地佐辛多模式镇痛对肾移植后免疫功能有一定的保护作用,对患者移植肾肾功能短期转归和移植物的长期存活起积极作用。
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生物免疫诱导治疗对肾移植患者机体免疫状态的影响
背景:目前生物制剂参与的免疫诱导治疗逐渐成为肾移植免疫抑制治疗方案的重要组成部分,既能有效预防急性排斥反应的发生,又能避免并发症的发生。目的:探讨不同生物制剂在肾移植免疫诱导治疗中对机体免疫状态及移植肾功能状态的影响。方法:回顾分析110例肾移植受者临床资料,根据应用生物免疫诱导治疗情况分组,单克隆抗体组(n=35)肾移植受者接受巴昔利单克隆抗体治疗,多克隆抗体组(n=43)肾移植受者接受兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白治疗,对照组(n=32)肾移植受者未接受生物制剂免疫诱导治疗。对比分析3组受者在肾移植后1,4,12周的淋巴细胞绝对值、外周血CD4+T淋巴细胞亚群数量,并评价移植后12周内移植肾功能状态和感染并发症发生情况。结果与结论:单克隆抗体组、多克隆抗体组急性排斥反应发生率低于对照组(P<0.05),多克隆抗体组感染并发症发生率高于单克隆抗体组、对照组(P<0.05)。单克隆抗体组、多克隆抗体组移植后1,4,12周淋巴细胞绝对值均低于对照组(P<0.05)。多克隆抗体组移植后1,4,12周外周血CD4+T淋巴细胞亚群数量低于单克隆抗体组、对照组(P<0.05)。表明生物制剂参与的肾移植免疫诱导治疗方案可有效抑制移植受者活化T淋巴细胞功能状态,降低移植肾早期急性排斥反应的发生,但应用兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白的感染并发症发生率较高。
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撤除糖皮质激素对肾移植受者发生尿微量蛋白的影响
背景:肾移植后长期使用糖皮质激素(以下简称激素)可导致明显的不良反应,少用和不用激素的免疫抑制方案已成为国内外众多肾移植工作者研究的热点。但是,激素减量或撤除存在一定的风险,目前尚未有统一的方案。由于尿微量蛋白在肾小管损伤后可以立刻被检测出来,对肾移植受者而言,监测尿微量蛋白能及早发现移植后肾功能异常,为临床治疗争取时间。目的:探讨撤除激素(以泼尼松为代表)对肾移植受者发生尿微量蛋白的影响。方法:35例撤除泼尼松肾移植受者均采用环孢素A或他克莫司+吗替麦考酚酯二联免疫抑制方案,泼尼松开始剂量为30 mg/d,以后逐渐减量(每周减量5 mg),肾移植后1个月停用。其中环孢素A组16例,他克莫司组19例。分别对两组患者肾移植后3,6,12,24个月和加服泼尼松后3,6,12个月进行尿微量蛋白测定与尿蛋白定性测定,同时记录肾移植后2年血肌酐、空腹血糖、体质量增加、急性排斥率、感染、人/肾存活率与加服激素前后24 h尿蛋白定量情况。结果与结论:两组撤除泼尼松后6个月,尿α1-微球蛋白开始升高;12个月,尿微量白蛋白、尿α1-微球蛋白、尿转铁蛋白明显升高,其中尿蛋白阳性:环孢素A组5例,他克莫司组3例;24个月时,尿微量白蛋白、尿α1-微球蛋白、尿转铁蛋白、尿免疫球蛋白(Ig)G均明显升高,其中尿蛋白阳性:环孢素A组11例,他克莫司组10例,其24 h尿蛋白定量均大于1 g。在此基础上两组加服激素后6个月,尿α1-微球蛋白、尿微量白蛋白开始下降,各1例尿蛋白转阴;12个月,尿微量白蛋白、尿α1-微球蛋白、尿转铁蛋白均下降,尿蛋白转阴:环孢素A组2例,他克莫司组3例,24 h尿蛋白定量在0.7 g左右。肾移植后2年时,环孢素A组血肌酐、急性排斥率高于他克莫司组(P<0.05),空腹血糖、体质量增加、感染、人/肾存活率两组均无明显差异。结果表明撤除泼尼松对肾移植受者尿微量蛋白的出现影响较大,尤其在肾移植后2年,尿微量白蛋白、尿α1-微球蛋白、尿转铁蛋白、尿免疫球蛋白(Ig)G均明显升高,其安全性有待进一步探讨。
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急性肝功能衰竭急诊肝移植围术期治疗的单中心经验探讨
背景:急性肝衰竭行急诊肝移植患者围手术期治疗的病情复杂,风险大,并发症多,死亡率高,与普通肝脏移植有着明显不同。目的:总结急诊肝移植治疗急性肝功能衰竭的围手术期治疗经验,以提高急性肝功能衰竭的治疗成功率。方法:回顾性分析38例因急性肝功能衰竭行急诊肝移植患者的临床资料,男21例,女17例,年龄15-69岁。其中乙型肝炎病毒性肝炎23例(其中乙型合并丁型肝炎2例),Wilsons病7例,3例为毒蕈中毒,2例不明原因药物肝脏损害,1例雷公藤多甙中毒,1例为外伤行肝脏部分切除后失代偿,1例尸体肝移植后患者。结果与结论:38例患者生存时间为13-1740 d,中位生存时间为634 d。患者的围手术期存活率为76%,1年存活率为63%,2年存活率为58%。9例围手术期死亡原因包括脑水肿及颅内高压、肾功能衰竭、严重肺部感染、多脏器功能衰竭、凝血功能障碍(颅内出血、上消化道出血等)、急性成人呼吸窘迫综合征、移植物原发性无功能。目前急诊肝移植仍是治疗急性肝功能衰竭有效的方法,出血、感染、排异反应是死亡的主要原因,肝移植围手术期间每一环节的处理,对于肝移植的成功和患者长期存活具有重要意义。