人工肝支持系统并同种异体肝移植治疗重症肝炎5例

背景:由于肝移植的特殊性,目前面临的大的问题是能否及时获得供体进行肝移植治疗,另外寻找合适的肝移植前过渡支持方法,以提高手术成功率,改善患者预后也是目前该领域的重点之一.目的:观察在人工肝支持系统支持下行同种异体肝移植治疗重症肝炎的效果.设计:回顾性病例分析.单位:安徽医科大学第三附属医院普外科器官移植中心.对象:选择2004-06/2005-05安徽医科大学第三附属医院器官移植中心在人工肝支持系统支持下行同种异体肝移植治疗重症肝炎5例,均为男性,年龄25～48岁.纳入患者均符合2000-09西安全国传染病与寄生虫学术会议关于重症肝炎的诊断和分期标准;符合常规肝移植指征;患者和家属均对治疗知情同意.治疗方案经医院伦理委员会批准.方法:全部患者在肝移植前采用非生物型人工肝行血浆置换和持续静脉血液滤过的方式行人工肝支持治疗.取来自于20～38岁男性成人的供肝,肝移植前均取得本人及其直系亲属的许可,并签署器官捐献同意书.5例肝移植受者均行经典非转流原位肝移植.主要观察指标:肝移植后随访31～38个月,每个月回院复查肝肾功能.结果:5例肝移植均获得成功,其中1例患者在肝移植后出现肾功能衰竭及肺部感染,于肝移植后2周死亡;另外4例在随访期间未出现排异反应,乙型肝炎复发等不良并发症,4例患者生活工作正常.结论:同种异体肝移植是治疗重症肝炎有效方法,人工肝支持系统可作为肝移植前过渡支持治疗的有效手段.

小鼠骨髓来源树突状细胞吲哚胺2,3-过氧化酶表达对T细胞增殖的影响

目的:诱导树突状细胞产生吲哚胺2,3-过氧化酶,从而调节T细胞反应,可能是诱导器官移植免疫耐受的理想途径.观察小鼠骨髓来源的树突状细胞本身及其在多种因素刺激活化状态下吲哚胺2,3-过氧化酶的表达变化,分析其对T细胞增殖的影响.方法:实验于2005-01/08在解放军第二军医大学免疫研究所完成,动物实验方法符合动物伦理学要求.①培养C57BL/6小鼠骨髓来源的树突状细胞,并分别利用脂多糖80 μg/L、CD40L500 μg/L、γ-干扰素50 μg/L及三者联合作用于培养7 d的上述细胞,利用反转录聚合酶链反应检测各组树突状细胞中吲哚胺2,3-过氧化酶mRNA的表达.②培养BALB/C小鼠脾脏来源的T淋巴细胞做为静息T淋巴细胞,并采用抗CD3单抗及抗CD28单抗各1 mg/L刺激T淋巴细胞作为活化T淋巴细胞.将树突状细胞及γ–干扰素作用下的树突状细胞与静息T淋巴细胞及活化T淋巴细胞共同培养,利用混合淋巴细胞反应法测定其刺激T细胞增殖的能力.结果:①培养7 d的树突状细胞及在脂多糖、CD40L刺激下的树突状细胞均未见吲哚胺2,3-过氧化酶mRNA的表达,而γ–干扰素及γ–干扰素+脂多糖+CD40L三者联合刺激下的树突状细胞可检测到吲哚胺2,3-过氧化酶 mRNA的表达.②与树突状细胞相比,γ–干扰素活化的树突状细胞可明显抑制T细胞增殖(P < 0.01),加入色氨酸可使对T细胞增殖的抑制作用有所恢复,同树突状细胞比较差异亦具有显著性意义(P < 0.01).结论:活化的树突状细胞可以产生吲哚胺2,3-过氧化酶,通过降解色氨酸发挥抑制T细胞增殖的作用,可能在移植排斥反应中发挥效应.

体外循环状态下血液肿瘤坏死因子α、白细胞介素8、白细胞介素10水平的变化

目的:心脏移植、心脏直视手术过程中的体外循环状态可导致各种炎症介质含量升高,强烈的炎症反应可引起肺损伤.肺开放策略可改善体外循环后肺损伤,观察肺开放策略对体外循环术后呼吸功能及肿瘤坏死因子α、白细胞介素8、白细胞介素10水平的影响.方法:①选择2005-10/2007-10于南通大学第二附属医院心胸外科在全麻、低温、体外循环下行心内直视手术的患者60例,所有患者对实验及治疗方案均知情同意.②将60例患者按随机数字表法分为常规机械通气组、早期肺开放组及晚期肺开放组,每组20例.早期肺开放组在气管插管后实施肺开放策略,晚期肺开放组到达ICU后30 min实施肺开放策略.③应用酶联免疫吸附反应技术于术前、体外循环后及到达ICU后3,5,24,48 h测定血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素8、白细胞介素10水平.结果:患者60例全部进入结果分析.①体外循环后各组患者血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素8、白细胞介素10水平均较术前显著升高(P < 0.01).②体外循环后早期肺开放组肿瘤坏死因子α水平上升幅度低于晚期肺开放、常规机械通气组(P < 0.01);体外循环后早期肺开放组肿瘤坏死因子α水平逐渐下降,晚期肺开放、常规机械通气组肿瘤坏死因子α水平进一步上升.③血清白细胞介素8水平在期肺开放组、晚期肺开放组呈下降趋势,但常规机械通气组血清白细胞介素8水平各时点均高于术前(P < 0.01).④白细胞介素10水平只在早期肺开放组呈下降趋势.结论:肺开放策略可减少体外循环后炎性细胞因子的释放,从而减轻体外循环相关肺损伤,早期实施肺开放策略优于晚期实施.

大剂量咪唑立宾联合环孢素预防肾移植术后巨细胞病毒感染:随机对照

目的:体外研究显示大剂量咪唑立宾具有抑制巨细胞病毒复制的作用.文章拟验证大剂量咪唑立宾联合环孢素对肾移植术后巨细胞病毒感染的预防作用及其安全性.方法:①实验对象:选择2006-06/2007-02于解放军总医院第三○九临床部泌尿外科首次行肾移植的受者30例,对实验及治疗方案均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准.②实验分组及方法:将30例受者按随机数字表法分成2组,咪唑立宾组(n=15):环孢素+咪唑立宾+醋酸泼尼松;对照组(n=15):环孢素+麦考酚酸酯+醋酸泼尼松.③实验评估:观察肾移植术后90 d两组受者巨细胞病毒感染、排斥反应、骨髓抑制和高尿酸血症发生情况.结果:30例受者全部进入结果分析.术后90 d咪唑立宾组受者的巨细胞病毒感染率低于对照组(P=0.047),两组急性排斥反应、骨髓抑制、高尿酸血症发生率差异无显著性意义(P > 0.05).结论:使用剂量为3 mg/(kg·d)的咪唑立宾可以降低巨细胞病毒感染率,同时能有效预防急性排斥反应发生,且不会加重咪唑立宾的毒副作用.

免疫抑制剂在肾移植术后肺部感染中的应用

目的:肾移植术后肺部感染治疗难度较大,如何有效的保护或者替代移植肾功能,又不能使患者的机体免疫状态极度低下,免疫抑制剂的调整使用至关重要.文章旨在探讨肾移植术后肺部感染患者免疫抑制剂的应用方案.方法:选择解放军空军总医院2002-01/2006-12收治的同种异体肾移植术后肺部感染患者20例,其中重症肺部感染13例.症状较轻的患者,给予免疫抑制剂调整及减量、抗感染等综合治疗;重症肺部感染立即停用所有免疫抑制剂,给予抗感染治疗,并根据肺部感染治疗效果,逐渐加用常规免疫抑制剂.观察20例肾移植术后肺部感染病例的治疗转归.结果:7例症状较轻的患者全部治愈.13例重症肺部感染患者中治愈9例,死亡2例,放弃治疗2例,治愈的9例中仅有1例发生移植肾急性排斥反应1次,经抗胸腺细胞球蛋白治疗逆转.治愈病例移植肾功能正常.结论:早期诊断、及时治疗并调整免疫抑制剂方案有利于提高肾移植术后肺部感染的治愈率.

小鼠气管异位移植后模拟肺移植慢性排斥反应模型的建立

目的:闭塞性细支气管炎是引起肺移植后移植物功能异常的主要并发症,原位肺移植动物模型技术难度高且费时,限制了其在闭塞性细支气管炎研究中的应用.通过小鼠的气管异位移植来建立模拟肺移植慢性排斥反应模型,以期为国内的闭塞性细支气管炎研究提供一种新的模型选择.方法:①实验材料及分组:实验于2007-07/08在上海市肺科医院动物实验室完成,动物实验方法符合动物伦理学要求.实验组采用10只C57BL/6小鼠为供体,10只BALB/c小鼠为受体;对照组10只供体、10只受体均采用BALB/c小鼠.②实验方法:取供体小鼠的气管、左右主支气管连续气道作为供体,两端结扎后异位移植到受体小鼠背部皮下.③实验评估:移植28 d后获取移植气管标本,石蜡包埋,行苏木精-伊红染色观察移植气管病理变化;比较两组小鼠的移植气管闭塞性细支气管炎发生率.结果:20例模型动物全部存活,无感染.①模型动物手术时间(12±2)min.②苏木精-伊红染色病理切片示实验组小鼠移植气管管腔闭塞,慢性炎细胞浸润广泛,气管上皮完全脱落,纤维组织增生明显,呈现闭塞性细支气管炎表现;对照组小鼠移植气管的组织形态未见明显异常.③实验组小鼠移植气管闭塞性细支气管炎发生率高于对照组(P=0.000).结论:小鼠气管异位移植后模拟肺移植慢性排斥反应模型作为研究闭塞性细支气管炎的动物模型具有诸多优点.

高危角膜移植后免疫排斥反应与颈淋巴结切除

背景:颈淋巴结是角膜的引流区淋巴结.角膜移植后,抗原提呈细胞随着房水经由脉络膜巩膜外途径引流至颈淋巴结而诱发角膜免疫排斥反应.目的:观察在碱烧伤的角膜植床上行角膜移植后的免疫排斥反应现象,认识颈淋巴结切除抑制角膜移植后免疫排斥的效应.设计:随机对照动物实验.单位:中山大学中山眼科中心.材料:实验于2005-05/2007-02在中山大学中山眼科中心完成(眼科学国家重点试验室.实验室编号2006DA105054).选用SD大鼠104只, Wistar大鼠40只,均为雄性,鼠龄1～2个月,均由中山大学实验动物中心提供.实验所用的白细胞介素2 和干扰素γ ELISA试剂盒由美国Biource International公司提供.实验过程对动物的处置符合在眼科研究使用动物的ARVO声明.方法:以SD鼠为受体,Wistar鼠为供体,所有受体大鼠均行同种异体角膜移植.受体鼠被随机分为4组:正常对照组:行正常角膜移植;B组为颈淋巴结切除组:正常大鼠切除双侧颈淋巴结;碱烧伤后角膜移植组:角膜碱烧伤后21 d时行角膜移植;碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组:角膜碱烧伤后立即行双侧颈淋巴结切除,21 d后再行角膜移植;每组20只.应用ELISA法检测角膜移植后各组植片中干扰素γ、白细胞介素-2蛋白的表达,记录角膜排斥反应发生的时间并比较各组植片平均存活时间.其余24只受体鼠用于在裂隙灯下及组织切片后显微镜下观察碱烧伤后角膜炎症及新生血管的动态变化.结果: ①病理组织学:正常角膜无炎症及新生血管.碱烧伤后3天时,角膜基质中存在着大量的炎症细胞浸润.3周末时无明显的炎症征象,但角膜新生血管达到高峰.碱烧伤后8周时,角膜新生血管已完全消退.②植片平均存活时间: 正常对照组、颈淋巴结切除组、碱烧伤后角膜移植组、碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组分别为(10.40±1.14),(46.30±9.46),(7.00±1.58)和(15.00±3.39)d;颈淋巴结切除组较正常对照组明显延长(P < 0.05),而碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组较碱烧伤后角膜移植组明显延长,差异具有显著性意义 (P < 0.05).③移植后角膜中干扰素γ及白细胞介素2蛋白的表达:角膜移植后颈淋巴结切除组植片中无干扰素γ及白细胞介素2蛋白的表达.在角膜移植后3,7,10,14 d,碱烧伤后角膜移植合并颈淋巴结切除组干扰素γ和白细胞介素-2的表达均明显下降,与碱烧伤后角膜移植组比较,差异有显著性意义(P < 0.05).结论:颈淋巴结切除能有效抑制正常及碱烧伤后角膜移植术后的免疫排斥反应.

肝肾器官移植供体切取及修整实践

目的:供体切取技术是器官移植的重要步骤,拟在实践中总结出一套较为合理的供体切取及修整方法,以供参考.方法:①实验对象:2000-01/2006-12解放军总医院第二附属医院器官移植中心共完成无心跳肝肾供体切取100例,手术过程符合医学伦理学要求.采用原位肝肾分开切取24例,原位腹主动脉、门静脉双路灌注肝肾联合快速切取法切取供肝肾76例.②实验方法:对门静脉插管灌注方式进行改进,采用盆腔内引流,供肝修整顺序为下腔静脉、门静脉、肝动脉、胆道;供肾修整顺序为输尿管、肾动脉、肾静脉.③实验评估:术中观察器官色泽、张力及完整度,并记录手术操作时间.结果:①全组供体平均热缺血时间为5 min;切取时间:肝肾分取平均为肝12 min、肾5 min,联合切取平均为15 min;保存时间平均为8 h.②全组供体均成功移植.结论:本组开展的肝肾切取与修整技术经过长期大量的实践,逐步改进,形成了在插管、引流、手术、灌注、修整等多方面具有特点的一套方法,其大特点是快速、实用,在临床实际应用中取得了较为满意的效果.

止血带引起肢体缺血再灌注损伤与七叶皂苷钠的预处理

目的:七叶皂苷钠能够清除机体内自由基,起到保护血管壁的作用,实验拟进一步观察七叶皂苷钠预处理对止血带引起的肢体缺血再灌注损伤的保护作用.方法:选取南京中医药大学附属医院2006-08/2007-02期间择期骨科下肢手术患者40 例.分为对照组20例,给药组20例.给药组在上止血带前30 min静脉滴注含有5 mg七叶皂苷钠的注射液100 mL;对照组在相同时间点给予等量生理盐水.在上止血带前以及松止血带后5,10,20 min抽取静脉血4 mL分别测量血乳酸、超氧化物歧化酶、丙二醛和一氧化氮的含量变化,并观察患者在4个时间点的血压及脉搏的变化.结果:40例患者均进入结果分析.①与放气前比较,对照组舒张压在放气后5,10 min均下降(P < 0.05),乳酸在放气后5,10 min升高(P < 0.05).②与放气前比较,两组乳酸水平在放气后5 min,10 min,20 min均升高(P < 0.05).③与对照组比较,给药组超氧化物歧化酶值在放气后5,10,20 min均升高(P < 0.05),舒张压在放气后5 min升高(P < 0.05),乳酸在放气后10 min升高(P < 0.05),收缩压、丙二醛、一氧化氮值均无变化.结论:七叶皂苷钠预处理对止血带引起的肢体缺血再灌注损伤有一定的保护作用,它可能是通过提高超氧化物歧化酶的活性来实现,对乳酸,丙二醛和一氧化氮变化无明显影响.

一种可延长术后生存期的大鼠左肺原位移植模型制备方法

目的:目前袖套技术已广泛应用于肺移植的制备,但其远期效果不能肯定.实验拟改进大鼠左肺原位移植模型,重点解决动物移植术后存活时间的延长.方法:①实验时间:实验于2007-03/07在上海市肺科医院动物实验室完成,动物实验方法符合医学伦理学要求.②实验材料及方法:取SD大鼠40只,沿用套管技术吻合肺动静脉,8/0带针锦纶丝线连续缝合支气管,建立20例同种异体大鼠左肺原位移植模型.③实验评估:术后监测动物胸部X射线及存活情况.麻醉处死动物后取出供体肺,制成4 μm厚切片并行苏木精–伊红染色,观察肺组织结构及细胞浸润情况.结果:①共完成20例大鼠左肺原位移植手术,成功18例,失败2例,术后动物存活时间均超过3个月.②大鼠移植肺病理切片显示肺组织结构基本正常.结论:该模型动物术后存活时间长,肺呼吸功能正常,适用于需长期存活的大鼠左肺原位移植实验研究.

肝移植术后不同通气模式对血流动力学和氧动力学影响的差异

目的:肝移植患者术后常需短期机械通气辅助支持,对比分析不同机械通气方式对肝移植术后患者血流动力学及氧动力学指标的影响.方法:选择 2006-01/12于解放军第四五八医院行背驮式肝移植的患者11例,患者对实验及治疗方案均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准.经漂浮导管、桡动脉导管进行持续心输出量、肺动脉压及动脉血压监测.随机交替使用容量控制通气和同步间歇指令通气加压力支持通气,观察两种通气模式下血流动力学指标及氧动力学指标的变化.结果:11例患者全部进入结果分析.同步间歇指令通气加压力支持通气模式下患者的气道停顿压明显低于容量控制通气模式(P < 0.05),两组通气模式下患者其他血流动力学指标及氧动力学指标差异并无显著性意义(P > 0.05).结论:同步间歇指令通气加压力支持通气模式可作为肝移植术后患者呼吸支持和脱机过渡较为理想的通气模式.

肾移植术后血清铁参数与患者贫血的关系

目的:微量元素铁作为红细胞生成的原料之一,对肾移植术后患者贫血的纠正有着重要的影响.通过对肾移植术后早期患者铁参数的连续监测,观察肾移植后血清铁的变化规律,分析其与贫血的关系.方法:①实验对象:共收集于2005-05/12在湘雅三医院移植中心行肾移植的患者20例,所有患者对治疗方案及实验均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准.②实验方法:根据血清铁蛋白值将20例肾移植患者分为两组,铁正常组(血清铁蛋白≥ 100 μg/L)11例及低铁组(血清铁蛋白< 100 μg/L)9例.所有患者在术后1个月内未予铁剂治疗.③实验评估:术后3,5,7 d,2,3,4周测定两组患者血清铁蛋白、血清转铁蛋白、血清铁和血红蛋白含量.结果:20例患者全部进入结果分析.①低铁组患者肾移植术后3 d,2,3,4周血清铁、血清铁蛋白含量均显著低于铁正常组(P < 0.05～0.01).低铁组患者肾移植术后4周血红蛋白含量显著低于铁正常组(P < 0.01).②低铁组患者血红蛋白纠正时间显著长于铁正常组[(11.6±1.5,4.8±1.2)周(P < 0.01)].结论:铁是影响肾移植术后贫血改善的重要因素,铁缺乏会延迟肾移植术后患者贫血的纠正.

肝脏单独与肝肾整块快速获取方法的比较

目的:目前器官移植尸体供体来源仍占相当的比例,多器官来源于同一供体的需求增多,快速整块获取的技术发展迅速.比较肝脏单独与肝肾整块快速获取的技术特点与脏器损伤情况的差异. 方法:①回顾分析2004-03/2006-07解放军第二军医大学东方肝胆外科医院单个手术组获取并应用于移植的74例供肝资料.②使用快速肝脏获取方法,不进行热解剖,开腹先进行腹主动脉联合门静脉原位冷灌注.肝脏单独切取方法:肾静脉上缘离断腔静脉,胰颈下方离断肠系膜上血管;腹主动脉前解剖法剥离肠系膜上动脉至根部,与肾动脉之间离断腹主动脉,游离胰腺体尾、腹主动脉后方,取下肝脏.肝肾整块获取方法:肝周韧带游离后,游离结肠、输尿管、肾及脾脏,离断肠系膜上血管,横断腹主动脉、腔静脉,游离血管、肝胰脾肾后方,整块切取肝肾.离体腹主动脉后解剖法显露分离肝肾动脉,离断下腔静脉,完全分离肝肾.③记录两种方法的肝脏热缺血、肝脏获取、冷缺血时间,统计肝肾主要部位的获取损伤率并进行比较. 结果:①完成肝脏单独获取28例,肝肾整块获取46例,两组中分别有1例同时获取心脏.未发生因器官获取原因导致的器官损失,获取肝脏全部用于移植,无原发性器官无功能发生,无肝动脉血栓形成.②单独获取患者肝脏获取时间短于肝肾整块获取患者(P < 0.01).③肝肾整块获取患者的腹腔动脉和肠系膜上动脉的Carrel袖片损伤率低于肝脏单独获取患者(P < 0.05). 结论:快速肝脏单独和快速肝肾整块获取方法的主要技术差别在于分离肝肾血管的先后顺序及解剖显露肝肾动脉的方法;快速肝脏单独获取在手术耗时上少于快速肝肾整块获取,但更容易出现腹腔动脉和肠系膜上动脉Carrel袖片的损伤.

改良背驮式肝移植术中应用Swan-Ganz漂浮导管的意义

目的:原位肝移植围术期维持血流动力学平稳是手术成功的基本保证,通过置入漂浮导管检测改良背驮式肝移植患者围手术期的中心静脉压、肺动脉压、肺毛细血管楔压变化,以减少肺损伤及术后并发症.方法:①实验对象:选择 2004-02 /2007-08于广西壮族自治区人民医院行肝移植手术的终末期肝病患者6例.②实验方法:入室后行桡动脉穿刺监测平均动脉压、心率,并行血氧饱和度及心电图监护,采用气管内静吸复合全麻.术中吸入异氟醚和间断静脉注射芬太尼+维库溴铵维持麻醉,选择经右侧颈内静脉置入Swan-Ganz漂浮导管.③实验评估:右心置入导管后监测术前、无肝前5 min、无肝即时、无肝10 min、无肝30 min、新肝即时、新肝5 min、新肝30 min时中心静脉压、肺动脉压、肺毛细血管楔压.结果:6例患者全部进入结果分析.与术前相比,6例患者在无肝即时中心静脉压下降(Q=3.64,P < 0.05);在新肝即时,肺动脉压升高(Q=4.30,P < 0.05),肺毛细血管楔压升高(Q=5.34,P < 0.01).结论:肝移植围术期中心静脉压、肺动脉压、肺毛细血管楔压的变化通过置入Swan-Ganz导管加强监测,可以及时调控得到基本纠正.

肝移植术后胆道并发症33例分析

目的:胆道并发症是肝移植术后常见的并发症,严重影响肝移植患者的生存率和生活质量.课题拟进一步明晰认识肝移植术后胆道并发症的病因并确立早期防治措施.方法:①对象:解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心于2002-04/2007-09完成的254例原位肝移植患者中,术后发生胆道并发症者33例,回顾分析患者的临床资料.②方法:胆管重建方式为胆总管端端吻合术.并发胆漏者,予置管充分引流;吻合口狭窄者经皮肝穿刺胆道造影或经内镜逆行胰胆管造影球囊扩张术,必要时放置胆道支架;非吻合口狭窄者行经皮肝穿刺胆道造影联合胆道镜治疗,严重者行二次肝移植术.结果:18例胆漏患者均通过腹腔引流、鼻胆管引流治愈;9例吻合口狭窄患者经内镜逆行胰胆管造影或经皮肝穿刺胆道造影球囊扩张术治愈,其中3例放置了胆道支架;6例非吻合口狭窄患者中,2例经皮肝穿刺胆道造影联合胆道镜治疗后痊愈,2例接受了二次肝移植,2例恢复不佳.结论:改进手术方法、缩短移植物冷热缺血时间及保护胆管血供可降低肝移植术后胆道并发症的发生,治疗的关键在于早期诊断、合理选择治疗方法,处理得当患者可长期存活.

犬活体肝移植模型的建立及评价

目的:犬活体肝移植接近于临床实际,能模拟临床活体肝移植的全部过程.应用非体外转流和分流方法建立犬活体肝脏移植模型,以期为开展临床活体肝移植提供实验数据.方法:①实验材料:实验于2006-05/2007-04在南方医科大学南方医院动物研究所完成,选用健康本地杂种犬36只,动物实验方法符合动物伦理学要求.②实验方法:将36只犬按随机数字表法分为供体组和受体组,共行非转流条件下犬活体肝脏移植手术18对次.活体供肝组行标准Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ叶左半肝切取术.受体组先行左侧Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ叶肝脏组织切除,在新肝植入后,再切除原肝残留Ⅵ,Ⅶ叶肝组织.③实验评估:检测动物手术时间、术中失血量、输血量及存活期;犬死后当天行尸体解剖明确死亡原因.结果:成功建立非转流犬活体肝移植模型14只.①活体供肝组手术结果:供体术中死亡1只,术后第1天因出血死亡1只,术后5 d存活率为88.2%.手术时间(183.7±32.4)min,失血量为(78.5±12.8)mL,输血量0 mL,供肝的热缺血时间几乎为零,冷缺血时间(146.7±24.4)min.②受体组手术结果:术中死亡4只,其中创面出血2只,左肝静脉吻合口出血1只,1只死于急性肺水肿.术后存活14只,术后5 h存活率为85.7%;受体犬手术时间(276.7±34.1)min,无肝期0 min;失血量为(242.5±25.6)mL,输血量(230.6±47.3)mL.结论:犬是理想的活体肝移植动物模型,受体肝脏分两步切除,新肝植入期,可有效维持受体血循环稳定,免除了体外转流或门腔分流的操作,为临床开展活体肝移植提供了技术和经验的参考.

新鲜羊膜及几种保存羊膜移植治疗角膜碱烧伤

目的:近年来羊膜移植成为治疗角膜碱烧伤较为有效的手段之一,但其生物学基础尚不完全清楚.观察不同活性羊膜移植对兔眼角膜碱烧伤的治疗效果,并分析其生物活性成分作用.方法:实验于2004-01/07于重庆医科大学动物实验中心实验室完成,动物实验方法符合动物伦理学要求.①实验材料及分组:健康产妇剖宫产胎盘由重庆医科大学附属第一医院产科提供.选用新西兰大白兔45只,按随机数字表法分为5组(n =9):新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组、乙醇保存羊膜组、真空干燥羊膜组及对照组.②实验方法:于新鲜羊膜制备后24 h内,保存羊膜保存1个月后行羊膜移植.③实验评估:术后2～21 d每日、21 d后每3日观察眼表角膜透明度及新生血管生长情况;术后14,30,60 d行荧光素染色,观察角膜上皮的修复情况;术后2周、1个月、2个月行组织病理和透射电镜观察.结果:白兔43只进入结果分析.①在角膜透明性及角膜上皮修复速度上新鲜羊膜组、甘油保存羊膜组和真空干燥羊膜组无明显差异,均明显优于乙醇保存羊膜组和对照组,乙醇保存羊膜组与对照组无明显差异.②在抑制新生血管方面,新鲜羊膜组明显优于甘油保存羊膜组及真空干燥羊膜组.结论:真空干燥羊膜、甘油保存羊膜和新鲜羊膜移植后均能减轻眼表碱烧伤的炎症反应,促进角膜上皮修复.其中新鲜羊膜效果好,可能与其较其他羊膜含有更多的生物活性物质有关.

浆细胞聚集性浸润在移植肾丢失中的作用:40例切除移植肾标本中CD138的表达

目的:CD138是浆细胞表面特有的细胞标记,移植肾中浸润的浆细胞群是否分泌抗体参与体液排斥反应导致移植肾预后效果不佳?检测切除移植肾组织中CD138的表达,分析浆细胞在移植肾组织中聚集性浸润与移植肾存活时间的关系. 方法:选择1989-06/2006-12解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心收治的因难治性排斥致移植肾切除患者40例作为移植肾切除组,移植术后因移植肾功能异常行常规穿刺活检患者20例为对照组,所有患者对治疗及实验方案均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准.应用CD138多克隆抗体对肾组织标本石蜡切片行免疫组织化学染色,检测CD138在两组中的表达情况;同时记录移植肾切除组患者移植肾的存活时间,分析CD138的表达与移植肾存活时间的关系.结果:①移植肾切除组的移植肾组织中CD138阳性23例,占57.5%;对照组穿刺移植肾标本中CD138阳性3例,占15.0%,两组CD138阳性率差异存在显著性意义(P= 0.004 3).②移植肾切除组中CD138阳性患者的移植肾存活时间低于CD138阴性患者(P= 0.033 8).结论:浆细胞在移植肾组织中聚集性浸润是影响移植物长期存活的危险因素.

定量罂粟碱不同给药途径对移植皮瓣血管阻力的影响

目的:临床上常用罂粟碱等血管舒张药预防和解除带血管蒂游离皮瓣移植吻合口及其附近血管痉挛,减少血管阻力,提高皮瓣成活率.观察在带血管蒂皮瓣移植中,定量罂粟碱(1.5 mg/kg)的不同给药途径对皮瓣移植后血管阻力的影响.方法:①实验于2007-03/05在广州市第一人民医院动物实验中心完成.②选用雄性新西兰兔24只,实验方法符合动物伦理学要求.采用随机区组设计,按给药途径把24只兔分成4组(n=6),即皮瓣蒂部皮下注射组、皮瓣中央皮下注射组、臀部肌肉注射组及对照组(静脉推注).建立下腹部腹壁浅动脉皮瓣模型,术后1 h～7 d每组定量注射罂粟碱,剂量为1.5 mg/kg,1次/d.③利用彩色多普勒超声测量术前、术后1周内每天注药后1 h的皮瓣血流阻力指数.结果:24只兔全部进入结果分析.①术后各组移植皮瓣的血流阻力指数均高于术前(P < 0.05).②术后第1天注药后1 h皮瓣中央皮下注射组的血流阻力指数低于臀部肌肉注射组(P < 0.01),与其他两组差异无显著性意义(P > 0.05).术后第4天注药后1 h皮瓣中央皮下注射组的血流阻力指数低于其他3 组(P < 0.05).术后第5天注药后1 h除臀部肌肉注射组血流阻力指数略高于手术前外,其他各组的血流阻力指数均略低于手术前,3组之间差异无显著性意义(P > 0.05).结论:皮瓣移植术后经皮瓣中央皮下注射罂粟碱扩血管效果好,能改善皮瓣的成活能力;静脉注射与皮瓣蒂部皮下注射效果相近;臀部肌肉注射效果差.

原位回肠与乙状结肠尿流改道再造膀胱:10年资料回顾

背景:长期随访结果发现,原位回肠尿流改道再造膀胱方法可致酸碱平衡及营养代谢障碍,另外回肠位置较高,必须有较长的系膜方可使膀胱位于盆腔且与尿道吻合处的张力不致过高.而乙状结肠位置靠近尿道,且原位乙状结肠尿流改道再造膀胱具有对电解质酸碱平衡及营养代谢影响较小,分泌黏液较少等特点.目的:采用长期随访形式比较膀胱癌患者采用回肠和乙状结肠再造膀胱的优劣.设计:回顾性分析.单位:昆明医学院第二附属医院泌尿外科.对象:选择1995-01/2005-03昆明医学院第二附属医院泌尿外科住院的膀胱癌患者164例.行原位回肠尿流改道再造膀胱96例(回肠组),男74例,女22例,年龄43～74岁;行原位乙状结肠尿流改道再造膀胱68例(乙状结肠组),男64例,女4例,年龄51～72岁.所有患者均经病理检查确诊;患者及家属均对治疗方案知情同意.治疗方案经医院伦理委员会批准.方法:①原位回肠尿流改道再造膀胱:膀胱全切后,距回盲瓣15～20 cm处截取40～60 cm长带蒂回肠袢制作储尿囊,双侧输尿管吻合于两端预留肠管,储尿囊低部与尿道残端吻合.②原位乙状结肠尿流改道再造膀胱:膀胱全切后,截取30～40 cm长带蒂乙状结肠制作储尿囊.双侧输尿管同上法吻合于近端预留肠管.主要观察指标:观察手术时间、术中失血量、下床活动时间、术后留置单J管及尿管时间.以定期复诊的方式进行随访,观察患者控尿排尿能力、尿动力学分析结果以及术后早期与晚期膀胱相关并发症.结果:164例患者失访12例(7.3%).回肠组平均随访46个月,乙状结肠组为42个月.两组术中失血量、术后控尿效果相近(P >0.05),原位回肠尿流改道组手术耗时较长,术后恢复较慢,新膀胱容量较大(t =2.56～3.08,P < 0.05～0.01).原位回肠尿流改道组术后早期及晚期膀胱相关并发症发生率分别为16.7%,29.2%,均高于乙状结肠组(9%,16%),其中晚期并发症发生率比较,差异有显著性意义(χ2 = 5.426,P < 0.05).结论:原位乙状结肠尿流改道再造膀胱耗时短、恢复快、术后并发症发生率低.

应用无创血流动力学监测仪评估肾移植患者手术前后血流动力学改变

目的:终末期肾功能衰竭患者均存在不同程度血流动力学异常,拟采用无创血流动力学检测仪,检测肾移植术后患者血流动力学改变情况.方法:①实验对象:采集2006-04/2007-09就诊于解放军总医院第二附属医院移植中心的肾移植患者16例,围手术期移植肾功能都完全恢复正常,术后定期随访.②实验方法及评估:应用美国BioZ.Com无创血流动力学监测仪,测定15种血流动力学参数进行血流动力学定量评估,包括心率、收缩压、舒张压、平均动脉压、心输出量/心脏指数、每搏输出量/每搏指数、速度指数、加速指数、预射血期、收缩时间比率、液体水平及外周血管阻力/阻力指数.结果:16例肾移植患者全部进入结果分析.伴随着肾移植术后肾功能的改善,患者心率、血压、预射血期、收缩时间比率、外周血管阻力/阻力指数均较术前下降(P < 0.05),心输出量/心脏指数、每搏输出量/每搏指数、速度指数、加速指数较术前提高(P < 0.05),胸腔液体水平(前负荷)下降不明显(P > 0.05).结论:肾移植术后随着尿毒症状态的纠正,患者血流动力学得到明显改善.

γ-干扰素、白细胞介素4与CD25在角膜移植免疫排斥反应中的作用

目的:角膜移植免疫排斥反应是一个多因素参与的调节过程,近年来研究表明细胞因子在角膜移植免疫中起重要作用.实验拟验证γ-干扰素、白细胞介素4及CD25在大鼠角膜移植免疫排斥反应中的作用.方法:①实验于2006-10/2007-05在南方医科大学南方医院实验动物中心完成.选用Wistar大鼠24只,SD大鼠54只,实验方法符合动物伦理学要求.②将54只SD大鼠按随机数字表法分为3组,正常组6只,角膜移植组及地塞米松组均24只.后两组制备Wistar→SD角膜移植大鼠模型,受体选择右眼手术,供体提供双眼角膜.③用裂隙灯观察移植排斥情况;利用反转录-聚合酶链反应检测植片内γ-干扰素、CD25 mRNA的表达;应用酶联免疫吸附实验检测房水和血清中γ-干扰素、白细胞介素4含量;应用流式细胞术检测移植前后不同时相外周血淋巴细胞CD25的表达;术后第11天,应用免疫组织化学方法检测角膜CD4+,CD8+和CD25+ T细胞的表达.结果:54只SD大鼠全部进入结果分析.①地塞米松组大鼠发生角膜移植排斥反应的时间长于角膜移植组(P=0.000).②正常角膜植片无CD25、γ-干扰素mRNA表达,角膜移植组术后第11天角膜植片内γ-干扰素、CD25 mRNA的表达较地塞米松组增强(P < 0.05).③角膜移植组角膜移植术后6,11 d血清γ-干扰素含量高于正常组(P < 0.05);术后11 d含量高于术后6,24 d(P < 0.01);地塞米松组术后6,11 d低于同期角膜移植组(P < 0.05).④角膜移植组角膜移植术后6,11,24 d房水γ-干扰素、白细胞介素4含量均高于正常组(P < 0.05);地塞米松组术后6,11 d均低于同期角膜移植组(P < 0.05～0.01).⑤地塞米松组术后6,11 d外周血CD3+CD25+T/CD3+T比值低于同期角膜移植组(P < 0.05).⑥术后第11天角膜移植组植片内CD4,CD8及CD25明显表达,地塞米松组CD4,CD8及CD25表达明显减弱.结论:CD25、γ-干扰素和白细胞介素4在角膜移植免疫排斥反应过程中发挥重要的作用;促进白细胞介素4表达,抑制γ-干扰素及CD25产生,对降低角膜移植免疫排斥反应具有积极的作用.术后动态检测外周血CD25和γ-干扰素的表达有助于临床了解局部免疫反应程度并预测角膜移植排斥反应的发生.

双侧供肾大鼠肾移植模型的建立

目的:大鼠肾移植动物模型是免疫和移植相关研究的重要实验工具,但即往的大鼠肾移植模型大多以单侧肾脏为供肾,手术时间较长,实验经济性不高.拟建立双侧供肾大鼠肾移植模型,并进行改良,以期缩短手术时间及实验费用.方法:①实验于2007-05/08于大坪医院实验动物中心完成,实验方法符合医学伦理学要求.②共选用大鼠90只,按随机数字表法分为2组,双侧供肾组Wistar供体大鼠18只,SD受体大鼠36只,采用原位低温灌洗,同时取供者双肾作为供肾;单侧供肾组Wistar供体大鼠18只,SD受体大鼠18只,取供者左侧肾脏为供肾.③以硬膜外导管为支架行供肾静脉与受者肾静脉端端吻合,供肾动脉带腹主脉瓣与受者腹主动脉行端侧吻合,供肾输尿管膀胱瓣与受者的膀胱吻合.受者术中预置右侧肾脏血管体外结扎线,术后3 d结扎.④术后1,5,7 d由受体大鼠尾静脉分别抽取静脉血1 mL测肌酐.结果:①双侧供肾组手术成功率为91.7%,大鼠死亡的原因主要为血管吻合口出血、感染、休克、血栓形成以及膀胱漏尿致弥漫性腹膜炎等;单侧供肾组手术成功率为88.9%.②除取肾时间外两组其余手术耗时差异无显著性意义(P > 0.05).③两组受体大鼠组内比较术后血肌酐含量均持续升高(P < 0.01),两组差异无显著性意义(P > 0.05).结论:双侧供肾大鼠同种异体肾移植模型建立方法可靠、稳定,并能降低实验成本,缩短手术时间.

他克莫司替换环孢素A对慢性移植肾肾病进展的影响

背景:环孢素A的应用显著提高了移植肾的早期存活率,但远期移植物失功并未得到明显改善.他克莫司能否延缓慢性移植肾肾病进展,从而延长移植物的存活时间?目的:观察他克莫司替换环孢素A治疗慢性移植肾肾病的有效性及安全性.设计:观察对比实验.单位:中南大学湘雅二医院器官移植中心泌外器官移植科.对象:选择2001-04/2005-10在中南大学湘雅二医院器官移植中心泌外器官移植科接受同种异体肾移植术后发生慢性移植肾肾病的73例患者,均经移植肾穿刺活检证实.男42例,女31例,年龄19～69岁,所有患者均对治疗项目知情同意,实验经过医院伦理委员会批准许可.环孢素A软胶囊为杭州中美华东制药有限公司或华北制药有限公司产品,吗替麦考酚酸酯胶囊购自上海罗氏制药有限公司,醋酸泼尼松片为中南大学湘雅二医院提供,他克莫司胶囊为藤泽药品中国有限公司产品.方法:根据患者治疗意愿将患者分为环孢素A组(n =30)和他克莫司组(n =43),两组患者性别、年龄及一般情况差异无统计学意义(P > 0.05).环孢素A组患者维持原免疫抑制方案进行治疗,即环孢素A、霉酚酸酯及泼尼松联用.他克莫司组将环孢素A转换成他克莫司, 他克莫司转换方案为停服环孢素A 24 h后开始服用他克莫司,其起始剂量为0.08～0.1 mg/(kg·d),早晚餐后2 h口服,服药3 d后测其谷值浓度,要求其血药浓度维持在5～8μg/L,并根据血药浓度、血清肌酐及其毒副作用调整剂量,其他用药同环孢素A组,两组均治疗12个月. 主要观察指标:①治疗12个月后监测两组患者血清肌酐、肾小球滤过率、24 h尿蛋白定量、血脂(包括总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇等生化指标)变化情况;②观察药物毒副作用(震颤、高血糖及高血压等发生情况).结果:患者73例均进入结果分析.①生化指标检测结果:转换治疗12个月后,他克莫司组血清肌酐及24 h尿蛋白定量显著低于环孢素A组,差异有统计学意义(P < 0.01);肾小球滤过率显著高于环孢素A组,差异有统计学意义(P < 0.01);总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇均显著低于环孢素A组,差异有统计学意义(P < 0.01).②毒副作用:他克莫司组震颤发生率为,高于环孢素A组[30% (9/30),5%(2/43),(P < 0.01)],差异有显著性意义,高血压发生率为,显著低于环孢素A组[56%(24/43),83%,(25/30),(P < 0.05)],差异有显著性意义.结论:他克莫司转换治疗后,肾功能减退得到延缓,蛋白尿减少,血脂代谢得到改善,他克莫司可以有效延缓慢性移植肾肾病进展.

供肝冷保存再灌注过程中肝细胞、肝窦内皮细胞及枯否细胞损伤的比较

目的:冷保存及再灌注损伤是决定移植物功能及受者存活率的重要因素之一,这与供肝冷保存再灌注过程中枯否细胞的活化及肝窦内皮细胞的损伤密切相关.建立大鼠同种异体原位肝脏移植模型,比较不同冷保存再灌注时间下供肝肝细胞、肝窦内皮细胞及枯否细胞的损伤情况.方法:①实验于2005-12/2006-12在河南省实验动物中心及郑州大学第一附属医院肝移植实验室完成,实验方法符合动物伦理学要求.②选用Wistar大鼠63只,采用随机数字表法取7只大鼠为正常对照组,另外56只平分为供体组与受体组,两两配对后再分为供肝冷保存3 h,6 h,8 h和12 h组(每组供、受体各7只).各冷保存组用4 ℃ Euro-collins液灌注和保存供肝,之后行同种异体原位肝移植.③于受体门脉复流后15,30,60 min检测各组大鼠肝窦内皮细胞损伤指标血清透明质酸、枯否细胞激活指标肿瘤坏死因子α含量及肝细胞损伤指标丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活性;观察受体门脉复流后60 min移植肝肝细胞、肝窦内皮细胞及枯否细胞的超微结构变化.结果:63只大鼠均顺利完成模型建立,术中无异常死亡.①各冷保存组在门脉复流后15,30,60 min血清透明质酸、肿瘤坏死因子α含量均高于正常对照组(P < 0.05),并且随冷保存时间延长依次升高.②各冷保存组在门脉复流后15 min血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活性与正常对照组无显著性意义(P > 0.05);在门脉复流30 min后血清丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶活性高于正常对照组(P < 0.05).③冷保存3 h及6 h组肝细胞结构基本正常,冷保存8及12 h组出现结构变化;而各冷保存组中,肝窦内皮细胞均有损伤并较肝细胞为重,枯否细胞均有激活表现.结论:供肝冷保存再灌注过程中,肝窦内皮细胞的损伤及枯否细胞的激活明显早于并重于肝细胞损伤.

肾脏移植物血管内皮细胞替代现象

目的:移植受者来源的内皮细胞出现在供者移植物中,替代原有的细胞,称为内皮替代,也称内皮嵌合.使用X,Y染色体探针通过荧光原位杂交法观察移植肾中血管内皮细胞被受体内皮细胞替代的情况,并分析内皮细胞替代的影响因素.方法:①收集解放军总医院第二附属医院病理科和北京大学医学部病理系1996-01/2005-12归档的移植肾穿刺活检符合男性供者、女性受者的石蜡包埋标本34例.②选择Y染色体长臂Yq12区域(异染色质区)DNA片段作为探针,同时选择X染色体着丝粒区(α卫星DNA探针作为对照,通过在石蜡切片标本上进行间期细胞双色荧光原位杂交法,观察移植肾穿刺活检标本的内皮替代现象,分析其与排斥反应及冷缺血时间的关系. 结果:①肾脏移植物中血管内皮细胞替代现象存在较为普遍,17例移植肾出现内皮细胞替代.②血管内皮细胞替代的发生与排斥反应无明显相关性(P > 0.05).③发生内皮细胞替代的移植肾冷缺血时间长于无替代移植肾(P < 0.05).结论:内皮细胞替代与排斥反应的发生无明显关系,移植肾冷缺血时间延长可促进血管内皮细胞替代的发生.

膀胱无细胞基质移植物重建兔阴茎白膜的动态观察

背景:目前膀胱无细胞基质移植物已成功用于替代动物膀胱、尿道和修复尿道下裂,但膀胱无细胞基质移植物重建阴茎白膜有待观察.目的: 采用同种异体膀胱无细胞移植物替代兔阴茎白膜,观察重建修复效果. 设计:随机对照观察.单位:四川大学华西医学实验动物中心、华西组织工程实验室及贵阳医学院组织工程实验室.材料:选用50只雄性健康封闭新西兰兔,动物级别3级,体质量为2.6～3.0 kg,均无包茎及阴茎发育不良,注射生理盐水后无阴茎弯曲,由四川大学华西实验动物中心提供.方法:实验于2005-12/2007-06在四川大学华西实验动物中心、四川大学组织工程实验室及贵阳医学院组织工程实验室完成.①取10只实验兔膀胱制备膀胱无细胞基质移植物.随机数字表法将40只新西兰兔分为对照组和膀胱无细胞基质移植物组,分别在阴茎背侧切除白膜10 mm×5 mm造成缺损,分别采用白膜原位缝合及膀胱无细胞基质移植物修复,每组20只.②分别于术后2,6,12及24周对2组动物进行阴茎海绵体内快速注射生理盐水诱导阴茎勃起,观察阴茎弯曲情况;于上述时间点分别处死实验兔,于术区取材进行苏木精-伊红、Masson染色观察修复部位组织结构变化;Stirus 染色检测检测Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维阳性面积,免疫组化染色检测炎性标志因子诱导型一氧化氮合酶和促纤维化因子转化生长因子β1的表达.主要观察指标:①阴茎弯曲情况.②修复部位组织结构变化.③炎性标志因子诱导型一氧化氮合酶和促纤维化因子转化生长因子β1的表达.④Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维阳性面积.结果:纳入重建阴茎白膜术实验兔40只,2只死于麻醉药物过量,2只死于急性肠炎,其余36只均进入结果分析.①术后6周时弯曲发生率高,对照组2例,膀胱无细胞基质移植物组1例;术后12周对照组及膀胱无细胞基质移植物组各1例发生弯曲;术后24周对照组1例发生弯曲,膀胱无细胞基质移植物组无弯曲发生.②修复部位组织结构变化:术后2周两组修复部位结构欠清,炎性细胞浸润明显,膀胱无细胞基质移植物组移植部位可见膀胱无细胞基质移植物内细胞生长,Masson染色显示术区白膜纤维纤细,排列欠规律.术后6周时白膜恢复完整性,膀胱无细胞基质移植物不能辨别,两组间无明显差异.术后24周移植部位白膜完整均匀,纤维恢复内环外纵排列,和正常白膜不能区别.③两组术后诱导型一氧化氮合酶及转化生长因子β1,2周表达强,术后6周只有少数纤维细胞和血管内皮细胞有表达,术后12,24周仅有极少的血管内皮细胞表达诱导型一氧化氮合酶和转化生长因子β1,同时间点2组诱导型一氧化氮合酶和转化生长因子β1没有差别.④术后2周两组Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维共同存在,比例相当.以后Ⅰ型胶原纤维逐渐增加,而Ⅲ型胶原纤维逐渐减少,术后24周以Ⅰ型胶原纤维为主,Ⅲ型胶原纤维已不明显.结论:膀胱无细胞基质移植物修复新西兰兔阴茎白膜无明显的炎症反应和纤维化,是较为理想的阴茎白膜修复材料.

彩色多普勒超声及超声造影检测移植肝血流动力学变化及其并发症

目的:肝移植术后移植肝的血流动力学变化明显,检测其变化规律可及时发现移植术后并发症.利用彩色多普勒超声及超声造影检测移植肝血流动力学参数变化,用以评估移植肝脏功能,早期发现并发症.方法:①选择1998-07/2006-12华中科技大学同济医学院附属同济医院收治的肝移植患者75例,另外选择同期于本院体检的健康人30例作为正常对照组.所有观察对象对实验均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准.②利用彩色多普勒超声检测不同时期肝动、静脉及门静脉峰值血流速度、时间平均血流速度、阻力指数、肝动脉血流灌注指数.11例肝移植患者进行了静脉超声造影检查,观察肝内病灶在动脉期、门脉期及实质期的超声增强变化.结果:75例肝移植患者全部进入结果分析,无脱落.①肝移植术后28例无明显并发症患者术后15 d内门静脉时间平均血流速度增高,高于正常对照组(P < 0.05);肝动脉峰值血流速度、血流量术后7 d内低于7 d之后(P < 0.05),阻力指数在7 d内高于7 d之后(P < 0.05).②肝动脉血栓形成时,肝动脉峰值血流速度明显降低直至消失,门静脉时间平均血流速度明显增高呈锯齿波,肝动脉血流灌注指数明显降低.③肝移植排斥反应时,门静脉时间平均血流速度降低、肝动脉峰值血流速度降低、阻力指数升高、肝静脉三相波消失呈锯齿波等.④移植肝肝动脉血流灌注指数降低时,移植肝胆道并发症容易发生.⑤超声造影示7例患者移植肝术后出现肝癌复发病灶,其动脉期病灶回声增强,门脉期开始回声减低至实质期病灶呈低回声,2例肝动脉栓塞病例动脉期未显示肝动脉,门脉期及实质期显示肝内回声增强.结论:彩色多普勒超声及超声造影检测的移植肝脏门静脉、肝动脉及肝静脉血流动力学参数变化可以用来评估正常及出现并发症的移植肝脏.

分子吸附循环系统在肝移植等待期急性肝功能衰竭治疗中的作用

学术背景:肝移植是目前治疗肝功能衰竭的有效手段,但此法受到了急性肝功能衰竭发病迅速和供体短缺的限制.目的:充分认识分子吸附循环系统在肝移植等待期急性肝功能衰竭治疗中的作用.检索策略:由第一作者应用计算机检索Pubmed数据库及ISI Web of Knowledge数据库1993-01/2007-12有关分子吸附循环系统治疗肝移植等待期急性肝功能衰竭的文献,检索词为"acute liver failure,molecular adsorbent recycling system,artificial liver",并限定文章语言种类为English.同时检索中国期刊全文数据库1993-01/2007-12有关分子吸附循环系统治疗肝移植等待期急性肝功能衰竭的文献,检索词为"急性肝功能衰竭,分子吸附循环系统,人工肝",并限定文章语言种类为中文.此外手工检索人工肝相关中文文献.对资料进行初审,纳入标准:细胞因子、肝性脑病、肝肾综合征、生存率等相关研究文献.排除标准:明显不随机、研究目的与课题无关的文献及重复性文献.文献评价:初检得到467篇文献,阅读鉴定纳入32篇满足全部纳入标准,其中9篇中文,23篇英文;有关分子吸附循环系统治疗急性肝功能衰竭学术背景的文献4篇,有关急性肝功能衰竭定义及治疗的文献5篇,有关分子吸附循环系统的应用及其对急性肝功能衰竭治疗效果的文献23篇.资料综合:传统人工肝治疗急性肝功能衰竭各有利弊,分子吸附循环系统结合以往人工肝的优点,突破各自的局限性,可同时清除水溶性和脂溶性毒素,清除致病因子,减轻脑水肿,维护血流动力学的稳定,改善肝肾功能,提高生存率.结论:分子吸附循环系统是治疗肝功能衰竭安全而有效的辅助方法,可帮助急性肝功能衰竭患者顺利渡过肝移植等待期.

同种异体气管移植的研究及展望

学术背景:同种异体气管移植是气管移植研究的热点,新观点、新进展不断涌现.目的:总结分析近年来气管移植的现状及进展,介绍气管移植研究的新方法、新观点.检索策略:作者应用计算机检索,以网络数据库资源为主,查询 Science Direct,Pubmed,Springer等数据库 1990-01/2007-07有关同种异体气管移植方面的文章,检索词为"tracheal,allotransplantation,allograft",并限定文章语言种类为English.同时应用计算机检索CNKI数据库1994-01/2007-07有关同种异体气管移植方面的文章,限定文章种类为中文,检索词"同种异体,气管,移植".初检得到328篇文献,140篇符合纳入标准,取其中有关气管移植的30篇文献进行归纳总结.纳入标准:文章所述重点与气管移植相关.排除标准:重复性文章.文献评价:30篇文献中7个实验分析了移植气管的血运建立问题;17个实验分析了气管的免疫排斥问题;6个实验分析了移植气管组织细胞的再生与组织诱导因子问题.资料综合:通过文献回顾,发现决定同种异体气管移植成败的关键集中于以下3方面:①移植气管的血运建立.②移植气管的免疫原性及免疫反应强度.③移植气管组织细胞的再生.结论:在同种异体气管移植中各种相关因素的重要性及相互间的影响还需要进行深入分析.期望将来通过对各种组织诱导因子及局部应用的免疫抑制缓释剂的研究,在同种异体气管移植的研究领域中取得新突破.

肾移植术后巨细胞病毒感染的临床分析

学术背景:巨细胞病毒感染是肾移植术后常见并发症和主要死亡原因,除具有器官特异性损害外,也可增加移植物排斥危险,进一步影响移植肾的长期存活.了解巨细胞病毒感染的特点、危险因素及目前常见防治手段十分重要.目的:就肾移植术后巨细胞病毒感染的危险因素及防治进行综合分析.检索策略:应用计算机检索Pubmed数据库1987-01/2004-12有关肾移植术后巨细胞病毒感染的文章,检索词为"Kidney transplantation, CMV, infection",限定文章语言种类为英语.对资料进行初选,纳入标准:①有关肾移植术后巨细胞病毒感染病因的研究.②有关肾移植术后巨细胞病毒感染临床防治的研究.排除标准:重复研究.文献评价:共收集98篇文章,排除重复或类似研究,19篇符合要求被选为参考文献.其中5篇文章研究了肾移植术后巨细胞病毒的感染特征,6篇文章研究了巨细胞病毒感染的危险因素,8篇文章研究了巨细胞病毒感染的防治问题.资料综合:①肾移植术后巨细胞病毒感染的特征:巨细胞病毒感染是由于巨细胞大量复制达到较高的病毒载量引起,移植肾提供了复制的理想场所.②肾移植术后巨细胞病毒感染的危险因素:D+/R-是术后巨细胞病毒感染的极高危险因素;肾移植术后排斥反应、使用免疫抑制剂、肾移植手术时间均是巨细胞病毒感染的危险因素.③巨细胞病毒感染的防治:避免感染、重视术前供受双方血清检测及筛选血制品是预防巨细胞病毒感染的有效方法.结论:重视肾移植术前供受双方血清检测,慎重选择血制品是预防肾移植术后巨细胞病毒感染的有效方法.调整免疫抑制剂,选用适当抗病毒治疗方法,不仅能有效抗巨细胞病毒感染,在防止急性排斥反应和肾功能损害方面也表现出其优异特性.

糖皮质激素与免疫功能的关系及在运动免疫学中的作用

学术背景:长期以来,糖皮质激素作为一种免疫抑制剂,一直被认为对免疫功能只有抑制作用;然而运动免疫学中的许多研究结果却难以用糖皮质激素的抑制理论作解释.目的:分析糖皮质激素与免疫功能的关系及其在运动免疫学中的作用.检索策略:应用计算机检索Medline1970-01/2007-12有关糖皮质激素与免疫功能及运动免疫学关系方面的文章,检索词为"glucocorticoid(GC),immunity,exercise",限定语言种类为English.同时检索中国期刊网1990-01/2007-12有关糖皮质激素与免疫功能以及运动免疫学关系方面的文章,检索词为"糖皮质激素,免疫,运动",并限定语言种类为中文.同时查阅相关的教材书.对资料进行初审,选择有关糖皮质激素与免疫功能关系的文献,特别是糖皮质激素提高免疫功能,以及运动与上呼吸道疾病关系的文献.排除综述类及重复文献.共检索到75篇文献,30篇文献符合纳入标准,排除45篇;同时参考了3本教材中的相关内容.文献评价:纳入的33篇文献中有关糖皮质激素调节免疫功能经典理论的文献12篇,有关糖皮质激素调节免疫功能新观点的文献14篇,有关应用糖皮质激素调节免疫功能的新观点分析运动免疫学中两个基本理论的文献7篇.资料综合:近年来发现糖皮质激素与免疫功能的关系比较复杂,在一定的条件下,它对免疫功能具有加强作用.在运动与健康的关系中,现在比较一致的观点是,中等强度的运动有益于身体健康,而在大强度的运动后运动员抵抗力下降,更易患急性上呼吸道疾病,上呼吸道疾病主要是由病毒引起的一种疾病,运用糖皮质激素对免疫功能的作用可以比较合理的解释运动中有机体产生这些变化的原因.结论:低浓度的糖皮质激素对免疫功能具有增强作用,高浓度的糖皮质激素抑制细胞免疫增强体液免疫;大强度的训练后运动员抵抗力下降,更易患急性上呼吸道疾病是由于大强度的训练后运动员细胞免疫功能下降,体液免疫增强的结果.

肾移植前后实施维持性血液透析患者抑郁状态的特征

学术背景:血液透析是终末期肾功能衰竭患者进行肾移植前后的重要治疗和支持措施,可使之生存期延长.抑郁是维持性血液透析患者常见的一种心理障碍,心理干预是临床上常用的治疗措施.目的:综合分析维持性血液透析患者抑郁状态的发病机制、相关因素、临床影响以及心理干预方法.检索策略:由心理学及心身疾病研究人员应用计算机检索PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez)1980-01/2007-10有关维持性血液透析患者抑郁状态的文献,检索词为"Maintained hemodialysis,End-stage renal disease,Depression,Intervention,Treatment"等,限定语言种类为English.同时检索中国科技期刊全文数据库(http://www.edu.cnki.net)1990-01/2007-10有关维持性血液透析患者抑郁状态的文献,检索词为"维持性血液透析,终末期肾脏疾病,心理干预",限定语言种类为中文.初步检索的文献量为外文1 519篇,中文21篇.对资料进行初审,纳入标准:维持性血液透析患者抑郁状态的流行病学调查结果、临床表现、发病机制、相关因素、临床影响以及心理干预方法.排除标准:重复性研究.文献评价:根据以上标准筛选,共收集到文献46篇,其中英文35篇,中文11篇;2篇为综述,其余均为临床与实验研究.资料综合:抑郁是维持性血液透析患者常见的一种心理障碍.临床特征包括抑郁心境、兴趣减退、易激惹、极易疲劳、躯体方面的主诉增多、自我评价下降、注意力集中困难及社交退缩等.维持性血液透析患者体内毒素过量累积,损害了大脑功能,破坏了去甲肾上腺素和5-羟色胺能神经元及其通路,导致抑郁出现.维持性血液透析患者抑郁的相关因素包括人口统计学因素、社会因素、临床相关因素及行为及人格特点等.抑郁对患者的透析充分性、生理功能、治疗依从性及生活质量等方面都有负面影响.常用的心理干预方法包括个体心理干预方法及集体心理治疗.结论:抑郁对维持性血液透析患者的生理功能、治疗依从性和生活质量等方面都有明显影响,心理干预能减轻患者的抑郁水平,增强其对疾病的适应能力和治疗依从性,提高生活质量.但维持性血液透析患者抑郁状态的心理干预研究,在取样、实验设计和实验方法等方面还存着一些不足之处.

环孢素A在器官移植中的免疫抑制作用

学术背景:研究表明环孢素A具有强免疫抑制作用,目前已被广泛应用于临床器官移植领域.目的:综合分析近年来环孢素A的免疫抑制作用及其途径.检索策略:应用计算机检索,以北京大学医学图书馆网络数据库资源为主,查询 ScienceDirect Onsite,ProQuest,Springer, Ovid 等数据库 1990-01/2006-12有关环孢素A免疫抑制机制方面的文章,检索词为"cyclosporine A,mechanism/action,immunosuppression",并限定文章语言种类为English.初检得到68篇文献,阅读标题和摘要进行初筛.纳入标准:文章所述重点与环孢素A的免疫抑制机制相关.排除标准:重复研究.共50篇文章符合纳入标准,取其中有关气管移植的46篇文献进一步查找全文归纳总结.文献评价:46篇文献中6篇涉及环孢素A已知的临床应用和效果,40篇涉及环孢素A的分子生物学机制.资料综合:通过文献回顾,发现环孢素A免疫抑制机制集中于以下方面:①钙神经蛋白/活化的T细胞核因子途径方面的作用.②对JNK与P38信号通路的作用.③其他作用.结论:环孢素A一方面选择性地调节淋巴细胞亚群的功能;另一方面抑制T毒性细胞的活化,还可能抑制T记忆细胞的形成或反应.但它不影响T抑制细胞亚群的活化与增殖,对T抑制细胞表达白细胞介素2受体无影响,从而导致了选择性的免疫抑制.

肾移植患者的心理状态及其干预措施

目的:了解肾移植患者的心理健康状况及影响患者心理状态的因素,分析肾移植患者手术前后实施心理干预的有效性.方法:由本文第一作者检索Pubmed数据库和中国期刊全文数据库有关肾移植患者心理健康状况的相关文献,共检索到52篇文献,对资料进行初审.纳入标准:①肾移植患者心理健康状况及其影响因素.②肾移植患者的心理干预措施.排除标准:Meta分析类文章.终纳入21篇文献进行分析讨论.结果:①肾移植患者手术前后的心理健康状况:肾移植围手术期患者常有不同程度的心理障碍,表现为焦虑、忧郁、不顺从医疗等.肾移植患者术后主要表现为紧张、烦躁、心理排斥、主观感觉异常及绝望心理.患者接受器官移植手术前后将出现一系列心理反应,导致心理上的排异反应,影响疾病的发展过程及预后.②影响肾移植患者心理状态的因素:肾移植患者的心理问题受移植肾在体内功能的影响很大,社会家庭的支持以及患者社会功能的恢复对患者的心理状态有极其重要的影响,同时由于免疫抑制剂的毒副作用和不良反应降低了患者的抵抗力,长期使用使患者承受巨大经济负担, 从而引发心理问题.③心理干预措施:在肾移植术前对患者进行精神医学方面的评估及心理健康教育,可预防术后不良后果的发生,提高患者的治疗信心及手术成功率.于肾移植术后对患者进行个别心理指导,可减少不良心理反应的发生.结论:肾移植患者手术前后存在严重的心理问题,针对患者的心理问题及其成因为患者提供个性化的心理干预,有利于改善患者的心理状态,提高生活质量.

胫后动脉穿支筋膜蒂皮瓣移植修复小腿皮肤软组织缺损

选择 2003-02/2007-02于福州总医院骨科应用胫后动脉穿支筋膜蒂皮瓣移植修复小腿皮肤软组织缺损的患者16例,在解剖学基础上,设计胫后动脉穿支筋膜蒂皮瓣,轴线在胫骨内侧髁后与内踝、跟腱间中点的连线,旋转点在邻近创面、其蒂部在有胫后动脉穿支的轴线上.根据术前超声多普勒血流仪穿支探测,要求皮瓣、蒂部及穿支表面有良好的皮肤.顺行设计皮瓣修复小腿上段,逆行设计修复小腿中下段,其中小腿下段9例,小腿中段3例,小腿上段4例.皮肤软组织缺损范围为2.0 cm×1.5 cm～12.5 cm×7.5 cm,胫后动脉穿支筋膜蒂皮瓣大面积为15.0 cm×10.0 cm,小为4.0 cm×2.5 cm.观察其修复效果.术后皮瓣均成活.有2例远端部分皮肤坏死,但其皮下有肉芽生长,其中1例经换药愈合,1例用中厚皮植皮愈合.所有病例均随访半年以上,患肢正常步态行走,有痛觉.应用胫后动脉穿支筋膜蒂皮瓣移植修复小腿皮肤软组织缺损,供区在小腿内后侧,损伤后蒂部保存良好,切取便利,不损伤主要血管,血供可靠,成活率高,是修复小腿皮肤软组织缺损的首选术式之一.

亲属活体肾移植过程中非清髓同源造血干细胞序列移植术的护理技术:1例报告

解放军第一五三中心医院于2000-04对1例慢性肾功能衰竭患者实施了序列式亲属活体肾移植/非清髓同源造血干细胞移植,患者为男性,23岁,供体为其母亲.肾移植术后在非清髓治疗前提下一次性输注同源造血干细胞,检测受体内微嵌合体,观察排斥反应、感染、移植物抗宿主反应的发生情况,统计免疫抑制剂的使用量并与未进行造血干细胞移植者对比;在不同的治疗过程中制定不同的护理计划并实施.受者于术后3个月内可查到与供者相同的新增HLA-DR位点,术后3年持续存在,免疫抑制剂使用量仅为未进行造血干细胞移植者的一半,术后随访7年,无排斥反应发生.活体肾移植术后延迟性非清髓造血干细胞移植可使受者产生微嵌合体,有可能产生免疫耐受.

浸蜡脱水盒再利用处理方法的改进

组织包埋以后,必须对脱水盒上黏附的凝固石蜡进行处理.如果对该凝固在脱水盒上的石蜡不做处理,会影响下批次对脱水盒的正常使用.对于浸蜡后脱水盒的再利用处理方式传统的做法是热水冲洗法,但该方法的缺点是热水冲洗法容易造成下水道被凝固的石蜡堵塞,同时造成石蜡的浪费和废弃的石蜡污染环境.关于浸蜡后脱水盒的再利用处理方式的改进鲜见相关报道,为解决上述缺陷,作者利用石蜡的遇热融化、遇冷凝固这一物理性质原理,设计一种装置,对浸蜡后脱水盒再利用的处理在传统方法基础上进行改进.此改进方法适用性强,解决了石蜡凝固后堵塞下水道的后患,既环保又经济,普遍适用于组织切片制作单位.

亲属活体肾移植68例的相关技术配合

选择 2004-04/2007-08于中山大学附属第一医院行活体亲属肾移植术的受者68例,供、受者对实验及治疗方案均知情同意.回顾性总结活体肾移植手术配合的临床资料:包括术前手术间空气消毒,器械、一次性用物及药品准备;术中供体体位摆置,肾灌洗与修整的配合,药物的管理及使用方法;器械护士术中配合步骤.结果示手术器械及物品准备充分,护士熟悉手术步骤,与术者配合默契.68例供体肾热缺血时间1～6 min,冷缺血时间10～118 min.供受体患者术程顺利,各例次均历时三四小时,出血量< 200 mL,术中生命体症平稳,未出现并发症.做好术前准备、加强参加手术人员管理、技能培训是手术配合的前提;严格无菌管理及正确脏器保存是活体肾移植手术配合的关键;缩短供肾热缺血时间和冷缺血时间对保证手术成功及肾移植受者长期存活具有重要意义.

异体巩膜移植在眼睑再造中的应用

选择 1996-08/2004-10滨州医学院附属医院眼科收治的异体巩膜移植治疗上眼睑恶性肿瘤切除后眼睑全缺损患者22例(22眼).采用乙醇保存的异体巩膜代替睑板,对上眼睑恶性肿瘤切除术后眼睑全缺损患者行眼睑再造术.残留的穹隆部结膜移行覆盖于异体巩膜内侧面,左右两侧缝线固定于睑板残端或内外眦韧带处,眼轮匝肌和皮肤一起向睑缘部牵拉覆盖于异体巩膜表面,行睑裂缝合,半年后睑缘部切开.术后所有患者均得到随访,随访时间平均28.8个月.均未见排斥反应,眼睑闭合良好,外观满意.异体巩膜移植代替睑板行眼睑再造术,能保持眼睑良好的功能和外观.

肾移植术后重症肺部感染45例回顾性分析

目的:肾移植患者术后长期服用免疫抑制剂,机体免疫功能低下,感染发病率高,肺是常见的靶器官.回顾性分析肾移植术后重症肺部感染的病原体检出情况及治疗转归.方法:①收集2003-10/2007-05解放军总医院第二附属医院全军器官移植中心收治的45例肾移植术后重症肺部感染患者资料,44例为尸体供肾,1例为活体亲属供肾.②采用降阶梯综合疗法治疗肾移植术后重症肺部感染.检验患者体液、分泌物中的致病病原菌,对症治疗;根据情况及时调整免疫治疗方案;纠正贫血、低蛋白血症,持续大量应用免疫球蛋白提高抗感染能力;应用乌司他丁稳定溶酶体膜;使用血必净抗内毒素.结果:①45例患者中感染发生在术后2个月内者占33 %(14/45),发生在术后2～4个月者占47%(21/45),发生在术后4～6个月者占13%(6/45),发生在术后6个月以上者占9%(4/45).②检出细菌46例次(48.4%),主要为G-性菌;真菌感染20例次(21.1%);其他感染29例次(30.5%),包括巨细胞病毒28例次及结核分枝杆菌1例次.③45例患者中22例并发急性呼吸窘迫综合征,6例放弃治疗,其余39例中32例经积极抢救治愈,7例死亡.结论:肾移植术后肺部感染多发生于术后6个月内,病原体呈多样性.早期发现病原体,综合治疗,及时调整免疫治疗方案,加强全身支持,使用大剂量免疫球蛋白、细胞膜稳定药物及抗内毒素药物是治疗成功的关键.

肾移植前后维持性血液透析患者发生抑郁与社会支持及应对方式的关系

目的:肾移植是治疗慢性肾功能衰竭的终疗法.在等待肾源过程中及移植术后血液透析是常用的替代疗法,而长期行血液透析患者易产生抑郁情绪.调查新疆维吾尔自治区石河子地区行维持性血液透析患者抑郁的发生情况与社会支持及应对方式的关系.方法:①选择于2007-01/10在石河子大学医学院第一附属医院和第三附属医院肾病科行血液透析治疗的90例患者作为调查对象,调查方案符合医学伦理学要求.②采用问卷调查方式,包括Zung抑郁自评量表、社会支持评定量表及应对方式问卷.③调查维持性血液透析患者抑郁的发生情况,并对血液透析非抑郁与抑郁患者的社会支持、应对方式进行比较分析.结果:发放问卷90份,回收有效问卷84份,有效率93.3%.①维持性血液透析患者抑郁的发生率为69%,非抑郁患者的月人均收入高于抑郁患者(P < 0.05).②血液透析抑郁与非抑郁患者在社会支持方面差异无显著性意义(P > 0.05);在应对方式中,抑郁与非抑郁患者解决问题倾向性、求助的倾向性、解决问题的有效性、求助的有效性、自责的倾向性、幻想的倾向性、退避的倾向性因子均分差异均具有显著性意义(P < 0.05).结论:维持性血液透析患者抑郁的发生率高,经济状况对透析患者抑郁的产生有重要影响."自责"、"退避"等消极的应对方式可能是血液透析患者发生抑郁的原因之一.

本刊2008年的工作重点

张玉顺教授科研成果报告