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中国组织工程研究

中国组织工程研究杂志

Chinese Journal of Tissue Engineering Research 중국조직공정구여림상강복

统计源期刊
  • 主管单位: 中华人民共和国卫生部
  • 主办单位: 中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
  • 影响因子: 1.38
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 2095-4344
  • 国内刊号: 21-1581/R
  • 发行周期: 周刊
  • 邮发: 8-584
  • 曾用名: 现代康复;现代康复杂志;中国临床康复;中国组织工程研究与临床康复
  • 创刊时间: 1997
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《中国组织工程研究与临床康复》杂志编辑委员会
  • 出版地区: 辽宁
  • 主编: 王岩
  • 类 别: 临床医学
期刊荣誉:
  • 全瓷固定夹板的牙周组织生物相容性评价

    作者:唐震宇;张伟一

    背景: 全瓷修复体具有良好的生物相容性与耐腐蚀性,较之金属烤瓷修复体具有更好的美学效果等优点.目的: 评价IPS-Empress Ⅱ全瓷联冠固定夹板修复治疗前牙区牙周病时的生物相容性反应.设计、时间及地点: 病例观察,于2005-02/2006-12桂林市口腔医院完成.对象:选择门诊就诊患者15例,男6例,女9例,年龄为21~67岁.方法: 为15例成人慢性牙周炎患者制作了18件IPS-Empress Ⅱ全瓷固定夹板.主要观察指标: 分别于修复后即刻,3,6,12个月采用美国加利福尼亚牙科协会评价标准评价修复体效果.各观察时期基牙的菌斑控制指数、探诊后出血、牙周袋探诊深度、临床附着水平、固定夹板的松动度及牙槽骨支持指数.结果: 随访12个月,15例患者均进入结果分析.通过统计学分析,固定夹板修复治疗后不同观察时间的临床检查指标之间差异无显著性意义;基牙的牙周袋探诊深度的变化无显著性改变.固定义齿功能状态良好,无一例固定夹板出现松动现象.全部18件全瓷联冠式固定夹板均无修复体边缘变色、表面无明显磨损,患者牙龈无炎症水肿等过敏反应发生.修复体的满意率为93.3%.结论: IPS-Empress Ⅱ全瓷联冠固定夹板与宿主未发生特殊生物相容性不良反应,近期修复效果良好.

  • 构建人工涎腺样组织的脱细胞气管基质支架

    作者:黄桂林;李龙江;潘光华;王春宇;张霓霓

    背景: 目前还没有找到理想的构建组织工程化人工涎腺的支架材料,具有良好中空样结构的脱细胞气管基质材料有着良好的可应用的发展前景.目的: 将下颌下腺细胞与家兔及SD大鼠的脱细胞气管基质共培养,评价其生物相容性.设计、时间及地点: 随机对照动物实验,于2003-02/2005-05在四川大学华西医院的卫生部移植与免疫重点实验室完成.材料: 用改良去污和酶交联法,去除SD大鼠和家兔气管的细胞,制备脱细胞气管基质.方法: SD大鼠18只随机分为2组,一组颊部皮F植入SD大鼠的脱细胞气管,另一组植入家兔的脱细胞气管.将传至第3代的下颌下腺细胞接种到2种脱细胞气管和PGA膜上培养,对照组进行无材料12孔板单纯细胞接种,进行细胞/支架材料复合体培养.主要观察指标: 光镜、扫描电镜观察脱细胞气管基质的组织结构和内壁的拓扑结构.于1,4,12周,对埋置在颊部皮下脱细胞气管周围的组织进行炎症反应评估.在培养的1~7d,每天对各组细胞进行计数,并分别于培养第1,3,5,7天.以MTT法测定各组细胞的A值及其上清液中的淀粉酶活性.结果: 两种动物气管中的细胞被完全去除.在颊部皮下埋置的两种脱细胞气管周围的组织未见明显炎症反应.生长在2种脱细胞气管上的下颌下腺细胞数明显多于PGA膜(P<0.05),其上清液中淀粉酶活性及细胞的A值也高于PGA膜(P<0.05).结论: 自制的脱细胞气管基质保持了中空状,并有良好的组织相容性和细胞相容性.

  • H2O2浸渍处理对水牛角胎力学特性的影响

    作者:郭毅;郭琛琨

    背景: 前期实验数据证明,水牛角胎的形态结构、理化参数、生物性质、力学性能等方面具有良好的骨科生物材料的特征.目的: 拟观察脱蛋白处理水牛角胎后,其抗原性和生物力学强度与经30%H2O2处理的时间关系.设计、时间及地点: 测量实验,于2000-02/03在昆明理工大学力学试验室完成.材料: 水牛来源于云南省泸西县屠宰场,取水牛角胎制成公称尺寸试件.方法: 试件经热蒸馏水反复冲洗后,用氯仿-甲醇1:1浸渍48h,再用体积分数为0.3的H2O2浸渍,实验组分别处理24,48h,另设未经任何处理试件为对照组.主要观察指标: 电测试法测定弹性模量E;直接加压法测其抗压强度.结果: 各组间弹性模量相比,差异均无显著性意义(P>0.05).对照组的抗压强度明显高于实验组(P<0.01),24h实验组与48h实验组间抗压强度相比,差异无显著性意义(P>0.05).结论: 水牛角胎经H2O2浸渍48h处理,保留了较好的生物力学强度.

  • 转化生长因子β3诱导藻酸钠微球内骨髓间充质干细胞向软骨细胞定向分化过程中胰岛素样生长因子Ⅰ的协同效应

    作者:雷鸣;刘世清;刘宇兰;彭昊;汪喆

    背景: 近年来利用藻酸盐微球包被骨髓间充质干细胞进行软骨细胞定向诱导逐渐开展.目的: 采用体外藻酸钠微球三维立体培养骨髓间充质干细胞,观察转化生长因子β3在诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化过程中胰岛素样生长因子Ⅰ的作用.设计、时间及地点: 细胞组织工程体外实验,于2007-03/10在武汉大学口腔医学院口腔生物医学工程教育部重点实验室完成.材料: SPF级1月龄雄性Wistar大鼠7只用于制备骨髓间充质干细胞.藻酸钠盐、胰岛素样生长因子Ⅰ,转化生长因子β3均为Sigma公司产品.方法: 第5代骨髓间充质干细胞以3X109>L-1密度重悬于1.2%藻酸钠盐溶液中,用22号针头将该溶液缓慢滴加在100mmol/L氯化钙溶液中使其聚合形成凝胶,10min后洗涤微球2次,即为包被骨髓间充质干细胞的藻酸盐微球.联合组加入含100μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ、10μg/L转化生长因子β3的软骨诱导培养基,诱导3周.同时设立胰岛素样生长因子Ⅰ组、转化生长因子β3组、空白对照组.主要观察指标: 甲苯胺蓝染色检测细胞外基质的形成,RT-PCR法及免疫组织化学法检测Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达,Western blot检测Sox9蛋白表达及其与PCR产物的相关性.结果: 包被于藻酸盐微球的骨髓间充质干细胞经胰岛素样生长因子Ⅰ、转化生长因子β3联合诱导3周,细胞周围有大量均质蓝染物质.联合组Ⅱ型胶原和Aggrecan mRNA及蛋白表达水平高,转化生长因子β3组表达居中,胰岛素样生长因子Ⅰ组表达较弱,空白对照组几乎无表达(F=10.52,P<0.01).各组Sox9蛋白表达水平与上述指标类似(F=7.95,P<0.05),Sox9与Ⅱ型胶原、aggrecan的相关系数分别为0.95和0.91.结论: 体外定向诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的过程中,胰岛素样生长因子Ⅰ可能通过促进Sox-9的表达来起到与转化生长因子β3的协同效应.

  • 壳聚糖-聚羟基丁酸酯接枝共聚物的制备与表征

    作者:孟晓荣;杨晓光;张敏

    背景: 壳聚糖/聚羟基丁酸酯共混或共聚材料的研究因壳聚糖和聚羟基丁酸酯特殊的生物来源而倍受关注,但尚无合适的方法对二者进行有效的聚合.目的: 在均相条件下,以温和的引发剂引发获得壳聚糖/聚羟基丁酸酯接枝共聚物.设计、时间及地点: 单一样本试验,于2007-08/10在西安建筑科技大学化学实验研究中心完成.材料: 壳聚糖(DD=100%,Mη=123000,为日本Kyoto公司产品.聚-3-羟基丁酸酯由购自Aldrich chemicals的聚羟基丁酸酯树脂在醋酸中降解精制得到,Mr>10000.方法: 以过氧化二苯甲酰为引发剂,在醋酸-二甲基亚砜复合体系中进行聚-3-羟基丁酸酯与壳聚糖的接枝反应.反应温度为85℃,在氮气保护下反应5h.红外分析、核磁共振分析和元素分析证实了接枝反应的发生及接枝产物的化学结构.用广角X射线衍射和热重/差热分析分别表征了接枝产物的晶体形态和热稳定性.主要观察指标: 接枝产物的化学结构、晶体形态、热稳定性.结果: 产物经红外分析、核磁共振及元素分析证实了接枝反应的发生,广角X射线衍射和热重分析表明,接枝产物的结晶状态不同于壳聚糖和聚羟基丁酸酯,且具有一定的热稳定性.结论: 以过氧化二苯甲酰为引发剂,可以制备出性质稳定的壳聚糖/聚羟基丁酸酯接枝共聚物.

  • 壳聚糖微胶囊包埋肝细胞生理功能的维护

    作者:劳学军;曹明溶;龚瑾;梁忠平;朱建航

    背景: 乙酰化率15.3%的壳聚糖在细胞生理条件下的溶解性差,限制了细胞的微囊化过程.目的: 用乙酰化率15.3%的壳聚糖制备乙酰化率50%的壳聚糖,探讨其在细胞生理条件下与异丁烯酸-羟乙基异丁烯-甲基丙烯酸甲酯三元共聚物制备微胶囊包埋肝细胞的可行性.设计、时间及地点: 对照观察实验,于2006-01/10在暨南大学附属第一医院中心实验室完成.材料: 乙酰化率15.3%的壳聚糖由Sigma-Aldrich公司提供,肝细胞采用改良的两步原位胶原蛋白酶灌注法从体质量250~300g的雄性Wistar鼠中分离获取.方法: 微囊化肝细胞利用乙酰化率50%的壳聚糖和三元共聚物在25℃、无菌条件下凝聚制备.主要观察指标: 微胶囊的渗透性以空微胶囊中荧光葡聚糖(FITC-葡聚糖)的渗透率表示.微囊化肝细胞的稳定性通过机械剪切破碎实验测定.微囊化肝细胞白蛋白的合成能力采用ELISA测定.尿素合成能力采用检测试剂盒(Sigma Diagnostic)在540nm波长下比色测定.细胞色素P450活性使用共聚焦激光显微镜测定7-乙氧基试卤灵(细胞色素P450IA1的底物)O位脱烷基化产物的荧光强度来实现定量.测定均以肝细胞平面培养为对照.结果: ①随着乙酰化率50%的壳聚糖质量浓度的增加,Mr20000和40000荧光葡聚糖的渗透率呈下降趋势.Mr70000荧光葡聚糖渗透率很低,随乙酰化率50%的壳聚糖质量浓度变化不明显.②包埋肝细胞密度为2×109>L-1时,震荡24h的破碎率仅为6%左右,未包埋肝细胞微胶囊在相同震荡条件下,4h全部破碎.③培养第1天1×106个细胞中尿素合成达到30μmol/d,明显高于15μmol/d的平面培养实验结果.培养7d后,微囊化细胞和平面培养细胞尿素的合成能力比较接近.④培养前3d 1×106个细胞中白蛋白达到10μg/a左右,培养7d后为5μg/d左右,整个培养过程中均高于平面培养的结果.⑤培养第1天微囊化肝细胞的细胞色素P450活性比平面培养高出近8倍,且在培养1周后细胞色素P450活性仍可以保持第1天培养的50%以上.结论: 生理条件下基于乙酰化率50%的壳聚糖构建的微胶囊在培养过程中有较好的渗透性及结构稳定性.与体外表面培养实验相比,改性后的壳聚糖微胶囊有利于支持肝细胞的体外功能.

  • 新型生物材料聚丁二酸丁二醇酯体外水解性能

    作者:石峰晖;王晓青;季君晖;王进锋;刘伟;严庆

    背景: 聚丁二酸丁二醇酯类聚酯是一种新型脂肪族聚酯,因其具有良好的生物降解性、优异的力学性能和成型加工性而倍受青睐,是一种潜在的组织工程支架材料和缓释药物载体材料.目的: 验证新型可降解脂肪族聚酯聚丁二酸丁二醇酯的体外降解行为.设计、时间及地点: 单一样本观察,于2007-06/11在中科院理化所工程塑料国家工程研究中心完成.材料: 聚丁二酸丁二醇酯由丁二酸和丁二醇通过熔融缩聚制备,粗产品用氯仿溶解后乙醇沉淀提纯,60℃真空干燥48h后备用.方法: 用平板硫化机将样品压制成100μm薄膜,然后裁成1cm×1cm的小片.在pH值为7.4的磷酸盐缓冲液中进行体外水解实验.主要观察指标: 分析聚丁二酸丁二醇酯的质量、分子量、pH值和表面形态的变化.结果: ①聚丁二酸丁二醇酯薄膜在磷酸缓冲溶液中发生降解,降解基本分为两个阶段.0~9周为降解停滞阶段,质量基本保持不变,9~15周加速降解阶段,15周的质量保持率为46%.降解实验中分子量的直线下降,没有停滞阶段.②降解过程中产生的酸性物质导致缓冲溶液pH值有一定的升高,介于6.0~8.0之间.③聚丁二酸丁二醇酯薄膜表面首先变得粗糙,出现很多小裂纹.降解12周后,样品的表面均出现裂缝,随着降解时间的裂缝的数量增加、缝隙变大,降解15周后,样品的裂缝进一步加大,变多,与典型的本体降解特征一致.结论: 聚丁二酸丁二醇酯在模拟体液的磷酸缓冲溶液中可以发生降解,降解行为分为停滞阶段和加速降解阶段,降解中产生酸性物质.

  • GcFujiⅡ玻璃离子结合窝沟釉质成形封闭术防龋效果评价

    作者:黎淑芳;邓敏;何钢清;骆维宁

    背景: 窝沟封闭可预防年轻恒磨牙窝沟龋,窝沟封闭剂材料的生物相容性是获得良好治疗效果的关键.目的: 评价GcFuji Ⅱ玻璃离子材料结合窝沟釉质成形封闭术预防龋病的临床效果.设计、时间及地点: 随机对照观察,于2006-02/2008-02在右江民族医学院附属医院口腔科门诊完成.对象及材料: 从百色市3所小学中选出120名6~8岁儿童460颗健康的第一恒磨牙作为观察对象.窝沟封闭剂为日本GC公司GcFuji Ⅱ玻璃离子材料.方法: 120名儿童460颗健康第一恒磨牙随机分为3组:①窝沟釉质成形封闭组:40名156颗牙,应用GcFuji Ⅱ玻璃离子材料结合窝沟釉质形成术进行窝沟封闭.②普通窝沟封闭组:40名157颗牙,应用GcFuji Ⅱ玻璃离子材料结合普通窝沟封闭术进行窝沟封闭.③空白对照组:40名147颗牙,不作任何处理.主要观察指标: 治疗后1,2,3年复查,记录窝沟釉质成形封闭组和普通窝沟封闭组封闭剂保留情况及3组龋病发生率.结果: 3年合计失访22名,51颗牙.窝沟釉质成形封闭组治疗后1,2,3年复查时封闭剂的保留率高于普通窝沟封闭组(P<0.01),两组的龋病发生率均低于空白对照组(P<0.01),窝沟釉质成形封闭组治疗后3年的龋病发生率低于普通窝沟封闭组(P<0.05).结论: GcFuji Ⅱ玻璃离子是一种可靠的窝沟封闭剂,在临床应用时采用窝沟釉质成形封闭的效果优于传统普通封闭术.

  • 体外动态环境培育组织工程心血管补片的特点

    作者:杨超;杜静;周钧;罗滨;孟春营;李芸

    背景: 搏动性生物反应器可以提供体外动态培育环境,给血管组织补片以血流剪切力和培养液的波动灌流,模拟体内血流动力学环境.目的: 观察体外动态培育环境下肌成纤维细胞在组织工程心血管补片材料中的生长特点.设计、时间及地点: 对比观察实验,于2007-01/12在暨南大学第二临床医学院中心实验室完成.材料: 新生儿脐带组织为产妇自愿捐献,并对实验内容知情同意.聚-4-羟基丁酸酯为Tepha公司产品.方法: 应用液氮冷冻保存的人脐带血管壁肌成纤维细胞种植在聚-4-羟基丁酸酯材料构建的补片支架材料上,体外动态培育制备组织工程心血管补片.动态组织培育组:细胞-组织材料复合物先体外静态培育14d,再置入生物反应器中继续动态组织培育7d.静态组织培育组:细胞-组织材料复合物体外静态培育21d.主要观察指标: ①行苏木精-伊红染色对组织补片进行形态学分析.②补片组织扫描电镜观察其超微结构.③应用免疫组织化学对比分析样本中Ⅰ型胶原蛋白、alpha平滑肌肌动蛋白的合成情况.结果: 苏木精-伊红染色显示动态培育的聚合材料表面完全被有序的层状致密组织覆盖.静态培育的材料表面组织形成较少.扫描电镜检测显示,动态培育的补片材料表面组织致密平整,细胞、组织呈轴向性排列.而静态培育的材料表面组织均一性较差,细胞、组织轴向性排列差.免疫组织化学染色显示动态培育环境下补片材料中有更多的胶原蛋白、alpha平滑肌肌动蛋白合成.结论: 动态培育环境可显著促进肌成纤维细胞在补片材料中的增殖及合成细胞外基质.

  • 同轴静电纺丝法制备神经生长因子纳米纤维缓释载体

    作者:王建广;刘俊建;范存义;莫秀梅;何创龙;陈峰

    背景: 传统的缓释药物的制备过程,常需要把蛋白质类药物与有机溶剂混合,降低了蛋白质的活性,同轴静电纺丝法减少了蛋白质与有机溶剂的接触,有望提高蛋白质的活性,提供新型的缓释载体.目的: 探讨应用同轴静电纺丝技术制备蛋白质类药物神经生长因子"壳-芯"结构纳米纤维缓释载体的可行性.设计、时间及地点: 对比细胞学实验,于2007-07/12在东华大学生物科学与技术研究所完成.材料: 乳酸己内酯共聚物(50:50,Mw=378,839g/mol,Mw/Mn=2.7324)由东华大学生物科学与技术研究所提供;β-神经生长因子为R&DSystems公司产品;牛血清白蛋白为Sigma-Aldrich公司产品;大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞PC12细胞由中国科学院细胞库提供.方法: 应用同轴静电纺丝技术制备以乳酸己内酯共聚物为壳,神经生长因子和牛血清蛋白为芯的复合纳米纤维;然后进行体外缓释8周,将不同时间点缓释液加入到无血清RPMI培养基中,培养大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12细胞).根据芯层溶液流速的不同分为0.10,0.15,0.25mL/h3组纳米纤维.主要观察指标: 通过扫描电镜和透射电镜对纳米纤维形貌特征进行表征,应用图像分析软件Image-J计算纳米纤维的直径分布范围;PC12细胞在神经生长因子的诱导下可以向神经元细胞分化,通过观测其分化率检测神经生长因子的生物活性.结果: 成功制备了具有壳芯结构的乳酸己内酯共聚物/牛血清蛋白/神经生长因子纳米纤维,纳米纤维的平均直径和直径分布范围随着芯层溶液流速的增加而增大.当芯层溶液流速为0.10mL/h时或0.15mL/h,纺丝稳定,所得纤维平均直径较小,直径分布范围较窄,当芯层溶液流速为0.25mL/h,纺丝不稳定,有大量"串珠"出现.在各个时间点乳酸己内酯共聚物/牛血清蛋白/神经生长因子缓释上清液能够诱导PC12细胞分化神经元细胞,生长轴突,说明神经生长因子保持了一定程度的生物活性至少8周.结论: 应用同轴静电纺丝技术可制备蛋白质类药物神经生长因子"壳-芯"结构纳米纤维缓释载体.

  • 剪碎的神经片断和神经生长因子在生物套管小间隙桥接修复周围神经损伤中的作用

    作者:张培训;李剑;韩娜;张宏波;赵富强;姜保国

    背景: 生物套管小间隙桥接修复周围神经损伤的效果好于断端相对旋转的传统神经外膜缝合,但套管内添加促进神经再生的因素是否可以更加有效的促进神经再生还不清楚.目的: 观察剪碎的神经片断和神经生长因子在生物套管小间隙桥接修复周围神经损伤中的作用.设计、时间及地点: 随机对照动物实验,在体神经电生理学及组织学观察,于2006-08/2007-11在北京大学人民医院完成.材料: 健康成年雄性SD大鼠20只,体质量250~300g,在坐骨神经盆腔出口与胫腓神经分叉之间坐骨神经的中点处切断坐骨神经造成神经损伤.中空圆柱形套管为北京大学人民医院与中国纺织科学院共同发明的一种部分脱乙酰甲壳质生物套管.注射用神经生长因子由军事医学科学院基础医学研究所提供.方法: SD大鼠20只双腿40根坐骨神经随机分为4组,每组10根.正常对照组;未做处理;单纯套管组;切断坐骨神经,作单纯海洋生物套管小间隙桥接缝合;神经生长因子组;桥接后在管腔内注射神经生长因子;神经碎片组;套管中加入切碎的自体神经片断.主要观察指标: 术后6周计数单位视野有髓神经纤维,进行神经电生理检查,测量各组运动神经传导速度、感觉神经传导速度.以苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色观察单纯套管组再生神经纤维的形态变化.结果: 与正常对照组相比,其他3组单位视野有髓神经纤维数增多(P<0.01),运动神经传导速度和感觉神经传导速度均降低(P<0.01).苏木精-伊红染色可见单纯套管组套管轮廓仍然存在;套管内可见大量连续的组织通过.免疫组织化学染色显示再生神经纤维和髓鞘连续平直地通过管腔,远近端之间在纤维数量差别不大;神经组织之间以及与管壁之间出现大量血管组织.结论: 剪碎的神经片断和神经生长因子在生物套管小间隙桥接修复损伤周围神经过程中未发生作用.

  • 聚乙烯醇-海藻酸钙-透明质酸复合水凝胶材料的含水特性

    作者:余啟聪;李沁华;陈健苏

    背景: 聚乙烯醇和海藻酸钠均为亲水性的聚合物,互溶性好,但其单独使用在材料的弹性和含水率等性能方面不理想.目的: 制备聚乙烯醇-海藻酸钠-透明质酸组织工程支架,分析不同重均分子质量和醇解度的聚乙烯醇、不同质量分数的海藻酸钠、不同用量的透明质酸对材料含水率和膨胀率的影响.设计、时间及地点: 对比观察实验,于2006-10/2008-03在广州暨南大学生物材料省重点实验室,教育部再生医学研究中心重点实验室完成.材料: 聚乙烯醇,Mw14500, 61500,为BS Chemical Technology产品,聚乙烯醇,Mw88000, 95000,为ACROS ORGANICS产品,聚乙烯醇-124,Mw24000,为广州市医药公司产品,透明质酸为美国Sigma公司产品,NaOH、CaCl2、海藻酸钠为国产分析纯.方法: 将不同重均分子质量和醇解度的聚乙烯醇与不同质量分数的海藻酸钠、不同用量的透明质酸复合.主要观察指标: 测定其复合材料的含水率和膨胀率,用扫描电镜观察材料内部的组织形态.结果: 制备的聚乙烯醇-海藻酸钙-透明质酸复合材料平滑、柔韧,具有弹性.含水率为62.66%~86.64%,膨胀率为145.74%~324.45%.含水率和膨胀率随着聚乙烯醇重均分子质量和醇解度的增加而减小,随着海藻酸钠增加而增加,随着透明质酸的增加变化不太明显.扫描电镜结果提示材料随聚乙烯醇重均分子质量增加,材料中孔数减少.随醇解度增加,材料中孔数增多,分布均匀.随海藻酸钠增加,材料由片状结构变为蓬松的层状结构,孔洞逐渐增多.随透明质酸增加,材料孔洞数量增加,且孔径大小更均一,孔分布更均匀,材料由蓬松多孔结构转变为网状交织多孔结构.结论: 聚乙烯醇Mw14500,醇解度98%形成的孔形态结构好,含水率高,随海藻酸钠和透明质酸的加入,材料具有丰富的网状孔洞结构.

  • 简单快速制备壳聚糖支架导管的方法

    作者:陈刚;石文君

    背景: 乳液冷冻干燥法是近年来常用制备壳聚糖的方法,制备工艺复杂.目的: 介绍一种简单的壳聚糖支架导管制备方法并分析其生物特性.设计、时间及地点: 对比观察实验,于2007-04/12在中国医科大学附属第二医院中心实验室完成.材料: SPF级出生8周的Wistar大鼠10只.散装医用级壳聚糖粉,纯度99%,脱乙酰度为99%,为山东济南海洋生物制品有限公司产品.方法: 利用乙酸溶液制备8%壳聚糖乙酸水溶胶,溶胶放置1d,将硬塑料管浸入溶胶后迅速取出放入1mol/L氢氧化钠液内3min,见管外溶胶变白凝固成胶冻状,取出后晾到五分干后轻轻退下内管,晾干后即成为壳聚糖导管.取内径5mm壳聚糖管,切成段,长度2mm,将其植入大鼠右侧麦氏点皮下肌肉组织内,同时在大鼠左侧相当于麦氏点处切口,分离到肌肉层,不植入壳聚糖管,单纯缝合,作为对照.主要观察指标: 壳聚糖管的大体观察,壳聚糖管在大鼠肌肉组织中的降解百分比,苏木精-伊红染色观察壳聚糖管周组织炎症变化.结果: 制成的壳聚糖导管光滑、坚韧.肌内埋植实验显示,术后4,8周壳聚糖管可分别被组织吸收50%和90%以上,管周组织炎性反应逐渐减退.结论: 采用该方法制备壳聚糖管具有所需材料少,成本低廉,制作方法简单,制作时间短的特点,并证实所制备壳聚糖管具有良好的组织相容性和生物可降解性.

  • 明矾溶液对椎间盘髓核的凝固效应

    作者:刘宪义;朱天岳

    背景: 椎间盘突出的主要病理改变是髓核从断裂的纤维环中突出,因此可以设想,在髓核脱出前使其凝固成一个坚韧的整体是有可能阻止椎间盘突出发生的.目的: 观察明矾溶液对椎间盘髓核的凝固作用.设计、时间及地点: 随机对照动物实验,于2002-09/2003-04在北京大学第一医院动物实验部完成.材料: 成年健康杂种犬,离体实验9只犬,在体实验17只犬,体质量16~20kg,雌雄不限.方法: ①离体实验:从5只犬取20个离体椎间盘,分为4组,每组5个椎间盘,分别置于2.5%,5%,10%明矾溶液及生理盐水溶液中浸泡1d和10d.另从4只犬取16个离体椎间盘,包含L2/3、L3/4、L4/5、L5/6,将4种溶液0.15mL分别注入离体椎间盘标本中.②在体实验:另外从17只犬体中取68个活体椎间盘,分成空白对照组、生理盐水注入组、10%明矾溶液1点穿刺组、10%明矾溶液2点穿刺组,每组17个椎间盘.分别于术后3d、2周、1个月、3个月取材.主要观察指标: ①观察椎间盘髓核的凝固效果、组织学变化,初步筛选合适浓度的明矾溶液.②对椎间盘髓核进行大体观察、光镜、扫描电镜观察.结果: ①离体及在体实验中,生理盐水对椎间盘髓核无凝固作用,明矾溶液浸泡可以使离体椎间盘的髓核凝固,且随着明矾溶液的浓度增加,凝固的髓核体积逐渐变小.②离体椎间盘内注入明矾溶液后,髓核未产生凝固.在体椎间盘内注入10%明矾溶液后,椎间盘髓核发生凝固,术后1个月达到强的凝固效果,表现为以穿刺点为中心的凝集反应,2个穿刺点时可出现2个凝固的团块,凝固髓核的间质成分增多.③组织化学和扫描电镜检查证实间质中为大量增生的胶原纤维.结论: 明矾溶液可促使髓核产生以注射点为中心的凝固作用,其可能与明矾溶液刺激髓核继发产生的胶原增多及纤维化有关.

  • 316L不锈钢经丝素肽/壳聚糖聚合物涂层后的血液相容性

    作者:李晓燕;蒋容静;刘建平;曹梅讯;王彬尧;李胜;郑莺;江柳月

    背景: 选择组织相容性良好的聚合物材料作为心脏涂层支架的材料可以促进内皮细胞生长,抑制平滑肌细胞过度生长,减少局部炎症反应,有助于支架术后内皮损伤的早期修复,并减少支架局部血栓形成.目的: 实验拟观察316L不锈钢经丝素肽/壳聚糖聚合物涂层后的血液相容性.设计、时间及地点: 观察性实验,于2006-07/2007-07在中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所完成.材料: 医用316L不锈钢片为张家港先科医疗器械有限公司产品;丝素肽为中国科学院上海植物生态研究所产品;壳聚糖为浙江省玉环县海洋生物化学有限公司产品.方法: 通过静电自组装的方法,将丝素肽和壳聚糖涂在316L不锈钢表面形成聚合物膜.主要观察指标: 测定不锈钢涂层前后表面的动态凝血时间、扫描电镜观察涂层前后的不锈钢表面抗血小板作用、测定涂层不锈钢的溶血率.结果: ①不锈钢表面经过聚合物涂层后,凝血时间明显较未涂层的不锈钢时间延长.②裸316L不锈钢表面黏附的血小板数量较多,血小板变扁平,看不出明显的伪足状态,紧贴在材料的表面:丝素肽/壳聚糖聚合物不锈钢涂层表面也有一定数量的血小板黏附,血小板虽有伪足伸出,但是聚集密度和形态变化程度明显小于裸不锈钢表面黏附的血小板.③涂层不锈钢溶血率<5%,提示丝素肽,壳聚糖聚合物涂层不锈钢无溶血作用结论: 与裸316L不锈钢相比,丝素肽/壳聚糖聚合物涂层延长了动态凝血时间,减轻了血小板黏附和变形的程度,提高了316L不锈钢基体的血液相容性.

  • 海洋胶原肽对2型糖尿病大鼠过氧化应激标志物表达的影响

    作者:刘桂琴;朱翠凤;李艳飞;彭宏斌;陆红;郭松超;张帆;李勇

    背景: 海洋胶原肽是相对分子质量在1000以下的肽为主要成分的粉末状低聚肽产品,由2~6个氨基酸组成,体外实验证实其具有抗氧化等生物活性.目的: 观察海洋胶原肽对2型糖尿病大鼠血清中过氧化应激标志物表达的影响.设计、时间及地点: 随机对照动物实验,于2006-10/2007-06在深圳市疾病预防控制中心动物实验室完成.材料: 海洋胶原肽由中国食品发酵工业研究院赠送.雄性SD大鼠36只,随机取6只为正常对照组,给予基础饲料,其余30只高脂饲料喂养4周后再小剂量分次腹腔注射链脲佐菌素诱导2型糖尿病模型,26只造模成功.干预:取24只模型鼠随机分为4组,海洋胶原肽0.75,1.5,3.0g/(kg·d)组给予相应剂量的海洋胶原肽灌胃4周,糖尿病组给予消毒后的自来水作安慰剂灌胃4周.正常对照组也灌胃自来水4周.主要观察指标: 干预前及干预4周后各组大鼠的血糖水平,并检测干预4周后各组大鼠血清中超氧化物歧化酶、丙二醛、还原型谷胱甘肽及NO等过氧化应激指标变化.结果: 干预4周后,海洋胶原肽各剂量组血糖虽然低于糖尿病组,但差异无显著性意义(P>0.05).与正常对照组比较,各组血清超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽水平下降,丙二醛、NO浓度上升(P<0.01, 0.05);海洋胶原肽3.0,1.5g/(kg·d)组血清超氧化物歧化酶、还原型谷胱甘肽水平高于糖尿病组,丙二醛、NO浓度低于糖尿病组(P<0.01, 0.05).结论: 较高剂量[≥1.5g/(kg·d)]的海洋胶原肽可以改善高血糖和高脂膳食负荷的2型糖尿病大鼠体内过氧化应激标志的表达.其对于血糖的干预效果分析还需要加大样本量和干预时间作进一步的探讨.

  • 缓释碱性成纤维细胞生长因子微球在兔膝关节液内的降解和释药性质

    作者:胡隽宇;段宏;邹远文;李萍;樊瑜波

    背景: 聚乳酸-羟基乙酸共聚物包封碱性成纤维细胞生长因子制备的缓释微球在体外磷酸盐缓冲液中能持续释放活性碱性成纤维细胞生长因子.目的: 观察碱性成纤维细胞生长因子微球在兔关节不同功能状态下关节滑液内局部降解、释药动力学规律.设计、时间及地点: 完全随机分组设计的动物实验,于2006-04/2007-03在四川大学建筑与环境学院生物力学工程实验室完成.材料: 81只成年新西兰大白兔.采用复乳法优化处方制备碱性成纤维细胞生长因子-聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球.方法: 81只兔按随机数字表法分为4组,微球组(n=36),碱性成纤维细胞生长因子组(n=27),微球组兔双膝关节内注射150mg碱性成纤维细胞生长因子微球(含62.25μg碱性成纤维细胞生长因子)+0.6mL生理盐水,右膝半屈曲位固定,为微球固定组;左膝不固定,为微球活动组.碱性成纤维细胞生长因子组兔双膝关节内注射62.25μg游离碱性成纤维细胞生长因子+0.6mL生理盐水,右膝半屈曲位固定,为碱性成纤维细胞生长因子固定组;左膝不固定,为碱性成纤维细胞生长因子活动组.空白对照组9只,兔双膝关节内注射0.6mL生理盐水,不固定.空白微球组9只,兔双膝关节内注射150mg空白聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球+0.6mL生理盐水,不固定.主要观察指标: 于术后1,2,4,6,8,10,12,14,16d采集标本,观察关节液中碱性成纤维细胞生长因子微球形态变化及释药变化,聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球载体材料分子质量变化.结果: 微球组在关节液内可持续稳定释放碱性成纤维细胞生长因子10d以上,碱性成纤维细胞生长因子组4d后关节液内未检测到碱性成纤维细胞生长因子.降解14d后,微球活动组球形完全消失,已降解成为一些碎片;微球固定组部分降解成为无定形样物,部分微球的球形仍在.在降解过程中,聚乳酸-羟基乙酸共聚物的重均分子质量不断减小.微球活动组在各时相点重均分子质量均低于微球固定组,差异均有显著性意义(P<0.05).结论: 碱性成纤维细胞生长因子缓释微球在置于关节腔内后可稳定释药,关节运动可加快微球的降解和释药速度.

  • 镍铬合金烤瓷冠修复6个月及1年后血清镍铬元素含量变化:与健康对照者比较

    作者:刘春秀;李瑞平;安峰

    背景: 镍、铬虽人体必需元素,但其浓度过高将对人体产生许多不良影响,因此用于修复牙齿镍铬合金材料的生物安生性值得重视.目的: 观察镍铬合金烤瓷冠修复6个月及1年后血清中镍铬元素含量的变化,并与健康对照者比较探讨镍铬合金长期存在于口腔中的安全性.设计、时间和地点:病例对照观察,于2006-01/2007-12在河北北方学院附属第一医院完成.对象:选择2006-01/12在河北北方学院附属第一医院口腔修复科就诊的60例上颌前牙有3颗行镍铬合金烤瓷冠修复的患者为实验组,男28例,女32例,平均40岁,均无其他金属充填物和修复体者.以60名同期到院健康体检者为对照组,男30例,女30例,平均39岁.方法: 无菌抽取对照组健康者及实验组患者修复后0.5年,1年空腹静脉血,采用石墨炉原子吸收光谱法测定血清中镍、铬元素的含量.主要观察指标: 实验组与对照组血清镍、铬元素含量变化.结果: 纳入镍铬合金烤瓷冠修复患者60例及健康对照者60名均进入结果分析.实验组上颌前牙修复后0.5年血清镍含量与对照组比较差异无显著性意义(P>0.05),修复后1年血清镍含量明显高于对照组(P<0.05).实验组修复后0.5及1年血清铬含量与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05).结论: 上颌前牙行镍铬合金烤瓷冠修复后在口腔环境中释放一定的镍、铬.血清镍含量随修复时间延长有增高趋势,但量很微小,在人体生物安全范围内,是否会随修复时间延长而持续增加,需要长期随访评定.

  • 载万古霉素纳米羟基磷灰石对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌慢性骨髓炎兔骨缺损的修复

    作者:李云飞;方涛林;董健

    背景: 普通羟基磷灰石植入体内不能完全吸收重建,生物学效应较差,纳米羟基磷灰石更加接近人体骨组织成分,有更好的生物学性能,是良好的可吸收抗生素载体.目的: 评价载万古霉素纳米羟基磷灰石治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌慢性骨髓炎骨缺损的效果.设计、时间及地点: 配对分组实验,于2005-10/2006-10在复旦大学中山医院动物实验室完成.材料: 同一规格万古霉素纳米羟基磷灰石和单纯纳米羟基磷灰石为自制.30只新西兰大白兔采用髓腔注射耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法诱导骨髓炎.方法: 将30只慢性骨髓炎模型兔配对分为2组,行病灶清创,万古霉素组放入载万古霉素纳米羟基磷灰石,空白材料组放入单纯纳米羟基磷灰石.主要观察指标: 分别于1,2,3,6,12周对其进行大体观察,放射影像,细菌培养,病理解剖评价.结果: 30只兔均进入结果分析.6周后两组影像学差异明显,万古霉素组的髓内外反应消退,原有的骨干畸形重新正常塑形,空白材料组则出现新的骨内脓肿,骨干畸形加剧.万古霉素组细菌培养阴性,空白材料组阳性.病理切片观察万古霉素组炎症抑制良好,6周后开始恢复正常骨髓结构,纳米羟基磷灰石转化形成小梁结构.结论: 纳米羟基磷灰石是万古霉素的良好载体,在良好控制感染的同时,逐步转换成正常骨结构修复病灶骨缺损.

  • 聚羟基丁酸/羟基戊酸共聚酯构建引导骨组织再生膜

    作者:唐倩;陈建洪;粱焕友;吴坚;李源;陈晓峰;吴刚

    背景: 骨再生的形状与数量取决于膜下空间的存在及保持,膜下空间的塌陷、减少会严重妨碍骨再生,因此引导骨组织再生成功的关键在于膜材料的选择.目的: 探讨聚羟基丁酸/羟基戊酸共聚酯构建引导骨组织再生膜的可行性.设计、时间及地点: 同体对照动物实验,于2005-05/2006-10在中山大学附属第三医院动物实验中心完成.材料: 聚羟基丁酸/羟基戊酸共聚酯膜由华南理工大学材料科学与工程学院生物材料研究所提供,规格为(10×10×0.3)mm.1岁左右、体质量10~12kg的健康杂种家犬8只制备犬胫骨骨缺损模型.方法: 横型犬双侧胫骨共4个骨缺损区.左、右两侧近心端的骨缺损为对照组,不作任何处理,仅将骨膜瓣复位;左、右两侧远心端的骨缺损为实验组,缺损区覆盖聚羟基丁酸/羟基戊酸共聚酯膜.术后2,4,8,12周取材.主要观察指标: ①聚羟基丁酸/羟基戊酸共聚酯的体内降解性能和成骨能力.②骨缺损区X射线能谱分析及元素定量测定.结果: ①实验组8周时见聚羟基丁酸/羟基戊酸共聚酯膜逐步降解,膜表面形成大小不等空洞,形成的孔洞明显增大,12周时,该膜仍未能完全降解.②实验组8周时见骨缺损区表面平整光滑,X射线显示缺损区骨密度增高,12周时骨缺损区已与正常骨基本完全融合.③骨缺损区X射线能谱分析及元素定量测定显示实验组新生骨以Ca,P峰为主,杂质峰少;随着时间的延长,新生骨钙、磷浓度增加,钙化程度增强,Ca/P原子个数比接近正常骨,与对照组比较,差异有显著性(P<0.05).结论: 聚羟基丁酸/羟基戊酸共聚酯膜能引导骨组织再生,有可能成为一种较理想的引导骨组织再生的天然膜材料.

  • 骨髓间充质干细胞出现软骨细胞表型后与壳聚糖/胶原三维多孔支架的复合培养

    作者:张玉富;霍春月

    背景: 体外单层诱导骨髓间充质干细胞转化为软骨细胞后,但仍存在难以长期扩增培养,容易出现去极化的现象.目的: 观察体外诱导骨髓间充质干细胞出现软骨细胞表型后,在自制复合壳聚糖/胶原三维多孔支架上构建组织工程化软骨的特点.设计、时间及地点: 以细胞为对象的单一样本观察,于2006-12/2007-09在首都医科大学细胞与遗传实验室完成.材料: 1岁龄骨骼成熟的健康绵羊,雌雄不拘,体质量20~30kg.方法: 采用密度梯度离心法分离羊骨髓间充质干细胞,体外培养至第3代时,实验组以特定诱导液培养2周,以未经诱导培养的细胞为对照,两组均接种于自制的壳聚糖/胶原三维多孔支架中.主要观察指标: 在相差显微镜和扫描电镜下观察细胞形态、增殖和功能改变情况,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色鉴定形成软骨组织的特征.结果: 壳聚糖/胶原接种细胞悬液后,细胞迅速扩散到支架孔隙内,分布均匀,不易脱落,有较好的亲水性和黏附性.实验组细胞在三维立体诱导培养环境中,一直成球状聚集生长,生长旺盛,2周时肉眼即可隐约看见支架孔隙内的细胞团块,4周时则更加明显,甚至向支架表面外向生长.组织学检查发现诱导分化后的细胞分泌大量的细胞外基质,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性说明分泌的细胞外基质中含有软骨组织特有的Ⅱ型胶原,形成类似于正常软骨组织的组织工程化软骨.结论: 在壳聚糖/胶原三维立体诱导培养环境中,骨髓间充质干细胞能够很好的转化为软骨细胞,保持表型不变,继续增殖、代谢以及分泌细胞外基质,形成软骨组织.

  • 去抗原牛松质骨支架复合骨形态发生蛋白2基因在骨缺损修复过程中的血管化反应

    作者:于威;李建军

    背景: 体外建的组织工程骨是细胞与材料的复合体,再血管化是组织工程骨植入体内后关系其能否充分发挥成骨作用,有效修复骨缺损的关键环节.目的: 观察以去抗原牛松质骨支架复合骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2, BMP-2)基因修复大段骨缺损过程中对血管化的影响.设计、时间及地点: 随机分组设计、对照动物实验,于2003-09/2004-12在吉林大学中日联谊医院中心实验室完成.材料: 选用清洁级新西兰大耳白兔60只.选取市售新鲜牛肱骨上端松质骨制备去抗原牛松质骨支架(Bovine Cancellous Bone, BCB).携带人BMP-2和β-半乳糖酐酶基因的重组腺病毒(Ad-BMP-2和Ad-Lacz)及重组人BMP-2(rh-BMP-2)由美国Dr. Oliver及吉林大学病理教研室高航博士馈赠.方法: 新西兰大耳白兔60只分离培养兔骨髓基质干细胞,经BMP-2腺病毒载体转染后复合BCB移植修复兔双上肢桡骨1.5cm的缺损.按随机数字表法分为5组,每组12只,植入经不同处理的人工骨,Ad-BMP-2转染细胞+BCB组,未转染细胞+rh-BMP-2+BCB组,Ad-Lacz转染细胞+BCB组,未转染细胞+BCB组,单纯BCB组.通过紧密缝合肌膜和筋膜固定移植骨.主要观察指标: 术后4,8,12周x射线检查观察骨缺损区的新骨形成情况,微血管墨汁灌注观察血管分布情况,透射电镜观察成骨细胞和血管生成情况,苏木精-伊红染色、爱辛蓝染色和VonKossa染色观察微血管与骨形成关系,血管内皮生长因子免疫组织化学染色测定染色灰度值、CD34免疫组织化学染色特性标记血管内皮细胞,进行微血管计数.结果: 纳入兔60只均进入结果分析.X射线检查和组织学观察显示AD-BMP-2转染细胞+BCB组和未转染细胞+rh-BMP-2+BCB组骨形成及血管生成情况优于其他3组.微血管墨汁灌注显示术后4周,组每一个骨小梁孔隙中有一支新形成的小血管,骨间血管的密度在周边区域较高,随着向移植骨中央呈向心性少.透射电镜观察,组术后4周,可见较多功能活跃的成骨细胞及新生血管芽;术后12周,成熟的板层骨形成,新生血管结完好.血管内皮生长因子表检测和微血管计数测定显示AD-BMP-2转染细胞+BCB组血管内皮生长因子相对含量明显高于其他各组,差有显著性意义(P<0.01).微血管计数明显高于其他各组,差有显著性意义(P<0.01).结论: BMP-2基因可通过上调血管内皮生长因子表,间接诱导移植骨血管化,比应用rh-BMP-2更有优势.

  • 异种脱蛋白骨复合物修复大段骨缺损的血管化观察

    作者:简月奎;田晓滨;李波;周焯家;赵伟峰;张一;杨震;王远政

    背景: 异种骨修复动物大段骨缺损过程中血管化的报道较少.目的: 验证异种脱蛋白骨作为组织工程支架材料修复长骨大段缺损成骨过程中的血管化特点.设计、时间及地点: 随机对照动物实验,于2005-03/2007-02在解放军第三军医大学完成.材料: 山羊24只,体质量(22.5±2.5)kg,右侧胫骨中下段截除胫骨总长度20%形成节段性骨缺损.方法: 24只实验山羊随机分为2组,实验组16只动物植入异种脱蛋白骨+自体间充质干细胞+重组人骨形态发生蛋白2,用半环槽式外固定器固定;以另8只植入自体骨为对照.术后每隔4周进行股动脉墨汁灌注后,取新骨组织制成厚切片.主要观察指标: ①大体解剖及影像学观察新骨血管化情况.②厚切片观察新骨血管网,并用Image-proplus真彩图像分析软件测量血管数目和面积.结果: 所有实验山羊术后伤口无溃烂、流脓,无死亡.①动物肌肉和软组织已经被墨汁黑染,皮下、肌肉筋膜和骨膜可见血管大小、分支、走行方向及相互吻合呈网状.术后4周骨缺损区出现植入物边缘毛糙,8周出现大小不等、形状不规则的透光性骨吸收区.12周以后,两组骨缺损区两断端之间高密度钙化影,新生骨与两断端完全相连接.②术后4~24周,实验组与对照组血管表现数目逐渐增多,排列渐趋规则,血管大小、分布区域趋向均匀.两组血管数目和面积相比,差异均无显著性意义(P>0.05).结论: 异种脱蛋白骨复合物材料修复大动物大块骨缺损过程中血管化程度与自体骨相当.

  • 脱矿骨在免疫抑制大鼠体内的骨诱导活性

    作者:陈学英;李宝兴;李靖;殷少芳

    背景: 传统的脱矿骨骨诱导活性检测方法是在小鼠股部肌袋异位植入模型,通过异位成骨方式评价骨诱导物质活性的高低,但由于动物宿主对植入材料存在着免疫排斥,影响了骨诱导活性的表达.目的: 实验旨在建立以免疫抑制大鼠为实验动物骨诱导活性检测的新方法,降低动物对植入材料的免疫排斥,从而不影响其骨诱导活性的表达.设计、时间及地点: 独立样本观察实验,于2005-09/2006-04在山西省医用组织库完成.材料: 合格供体长骨皮质骨用于脱矿骨的制备,体质量200g左右的Wistar大鼠24只.方法: 采用超声条件下盐酸脱矿、冻干、辐照等方法,制备人类脱矿皮质骨,对照样品为经高温高压灭活的脱矿骨.Wistar大鼠腹腔注射地塞米松造成免疫抑制,手术形成双侧股部肌袋,分别植入试验样品与对照样品.主要观察指标: 术后3、4、5、6周取出植入材料行组织学观察与碱性磷酸酶的活性检测.结果: 组织学观察显示,术后3周实验组脱矿骨吸收腔内间充质细胞聚集,术后4周脱矿骨内开始形成软骨细胞与软骨基质,术后5周形成较多的软骨组织,术后6周时形成类骨质.对照组材料被纤维组织包裹,显示吸收,未见成骨迹象.实验组碱性磷酸酶活性显著高于对照组(P<0.05).结论: 采用腹腔注射地塞米松方法造成大鼠免疫抑制,降低了宿主大鼠对植入人脱矿骨基质的排斥,异位植入后,脱矿骨吸收腔隙内出现软骨细胞,形成软骨组织与类骨质.

  • 自体肌腱与人工韧带联合应用重建兔前交叉韧带

    作者:侯立刚;许建中

    背景: 自体肌腱与人工肌腱是目前治疗前交叉韧带断裂的主要移植物,两者各有优缺点.目的: 将自体肌腱与人工韧带联合重建兔前交叉韧带,观察其在不同时间段组织学反应及生物力学改变.设计、时间及地点: 同体对照观察,于2007-09/2008-02在郑州大学骨科实验室和郑州大学生物实验室力学中心完成.材料: SPF成年健康新西兰大白兔28只由郑州大学动物实验中心提供,体质量2.4~3.1kg,平均2.8kg,雌雄不限.MB66编织线为上海施乐辉医用产品国际贸易有限公司产品.方法: ①取兔的双下肢伸趾肌腱,一个伸趾肌腱完全包裹人工韧带,另一个伸趾肌腱单纯末端编织备用.②取兔双膝内侧髌旁切口暴露关节,切断并去除正常前交叉韧带,定位上下止点,分别钻股骨和胫骨骨道,一个膝关节穿入自体肌腱与人工韧带联合肌腱(联合肌腱组),另一个关节穿入单纯肌腱(单纯肌腱组),两端钻骨桥缝线固定.分别于术后第2,4,6,8周随机抽出的7只兔,麻醉后处死.主要观察指标: ①两组兔重建的前交叉韧带大体观察和组织学观察结果.②两组移植物的大拉断力.结果: 移植后第2,4周,移植物内细胞消失,呈坏死状;联合肌腱之间有炎症细胞浸润,边缘开始有细胞向中心长入.移植后第6周,移植物表面滑膜增生明显;单纯肌腱有少许变形和松弛;联合肌腱部分间隙被滑膜填充,浸润的炎症细胞减少,内部仍有界限.增生的细胞由周围向中心推进明显.移植后第8周,移植物大部分组织被新长入的细胞替代,人工韧带被滑膜完全包裹,浸润的炎症细胞基本消失,部分接触面已融合,但部分面仍有间隙;联合肌腱无变形和松弛,移植物内细胞形态,数量接近正常前交叉韧带,但纤维细胞排列杂乱,纤维有了一定的纵向性.生物力学测试结果联合肌腱大拉断力大于单纯肌腱(P<0.05).结论: 联合肌腱与单纯肌腱都经历坏死、再血管化、韧带化的改建过程,与其生物力学经历由强到弱再逐渐增强的过程相一致.联合肌腱硬度或韧性均可弥补单纯肌腱早期易松弛的缺点,晚期自体肌腱成活可弥补人工肌腱被永久性拉长或断裂的缺点.

  • 干扰素/聚乳酸-羟基乙酸共聚物及壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物复合膜防止椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的实验

    作者:苏云;孟祥俊;于小光;孙强;张新;景遐斌

    背景: 应用硬膜外阻隔材料是预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的一种方法,而制备既有机械阻隔能力,又有抑制成纤维细胞的能力的复合膜是其研究方向.目的: 制备壳聚糖/聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly (lactic-co-glycolic acid), FLGA]与干扰素/PLGA复合膜,观察其防止椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连的作用.设计、时间及地点: 2005-05/2007-04在中科院长春应用化学研究所完成材料制备,随机对照动物实验在解放军第〇八医院实验动物室完成.材料: PLGA膜、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜由中科院长春应用化学研究所制备.方法: 大耳白兔120只行L2及L4椎板切除,随机分为6组,每组20只,于椎板缺损区处理如下:①空白对照组:硬膜外不放任何物质.②自体游离脂肪组:取皮下脂肪贴于硬膜表面.③透明质酸钠组:透明质酸钠1mL涂于硬膜外.④PLGA膜组、壳聚糖/PLGA及干扰素/PLGA复合膜组:分别将各种膜修剪成合适大小植于硬膜外.主要观察指标: 术后2,4,6,8周处死动物,观察L2手术区硬膜外瘢痕形成及粘连程度并评分,然后完整取下L4节段脊柱,行苏木精-伊红染色及Masson染色,光镜下观察并行组织学评分.结果: 随着时间的延长,空白对照组形成较广泛的瘢痕;自体游离脂肪组和PLGA膜组的瘢痕量少于对照组,前两者比较差异无显著性;透明质酸组早期瘢痕形成量明显少于自体游离脂肪组和PLGA膜组,后期差异无显著性,但仍优于空白对照组:壳聚糖/PLGA膜组与干扰素/PLGA膜组硬膜外瘢痕的形成量少,与硬膜无或轻微粘连,明显优于其他各组,两种复合膜组间差异不明显.结论: 壳聚糖/PLGA与干扰素/PLGA复合膜均可预防椎板切除术后硬膜外瘢痕粘连,效果相近.

  • 富血小板凝胶的制备及骨修复作用

    作者:卢萌;陈伟辉;曲延征

    富血小板血浆是自体源性、浓缩的含血小板的血浆,由其聚合而成的富血小板凝胶的应用是口腔颌面外科颌骨缺损修复的热点课题.目前,对于富血小板凝胶促进骨缺损修复的机制尚未完全阐明.普遍的观点认为聚合过程中血小板脱颗粒释放多种高浓度生长因子的联合作用刺激成骨,加速了骨修复.另外,富血小板凝胶的应用还存在一些尚待解决的问题.因此,富血小板凝胶在组织工程领域得到广泛应用尚需进一步的研究工作.相信随着研究的不断深入,富血小板凝胶必将广泛应用与骨组织工程.

  • 以猪腹膜作为人硬脑膜缺损修复材料供体的特点

    作者:张友来;辛国华;曾元临

    硬脑膜是保护脑组织的一道重要屏障,创伤、肿瘤侵蚀及手术等因素均可造成硬脑膜缺损.目前应用于硬脑膜修复的替代材料较多,但均有其不足之处,因此更为理想的材料有待进一步研究.日前用于修复硬脑膜的材料主要有自体筋膜、同种异体材料、天然及人工合成材料、异种材料4类,前两类替代材料移植后效果相对较好,但其来源有限,从而限制了其临床中广泛应用.异种替代物取材方便可以有效地缓解同种供体移植材料的短缺.例如猪,其来源方便,易于繁育,与人体解剖和生理有很高的相似性,可作为一种很好的移植供体;猪腹膜因其自身的优点、经处理后移植较少发生感染及排斥反应等,被认为是一种较好的硬脑膜移植的供体组织.

  • 新型药物传递系统与喜树碱功能的发挥

    作者:董婧;郭盛磊;王洋

    喜树碱具有广谱抗癌活性,但其水溶性差和毒副作用大等缺点限制了其在临床上的使用.为使喜树碱类药物能够更好地应用于临床,除了喜树碱的结构修饰和改造,新型药物传递系统的应用使喜树碱的功能得以更好地发挥,亦成为研究热点之一.文章总结近年来喜树碱传递系统及功能发挥的研究进展,在增加药物水溶性、提高内酯环稳定性以及药物控释与靶向传递几个方面进行了文献综述.随着相关技术的不断完善和发展,喜树碱类药物将是极具发展前景的一类抗癌药物.

  • 组织工程血管的研究进展

    作者:邰菂;任为

    血管移植是常用的治疗心脏疾病及周围血管疾病的方法.虽然目前在人工血管的研究方面已经获得了一定的进展,但人工血管移植,尤其是在小口径人工血管(<6mm)移植后,常会因为种种原因(如早期的血栓形成、感染等)而导致移植失败.组织工程学是一门全新的学科,它为人工血管的研究提供了另一条潜力巨大的途径,它通过将自体细胞种植于可降解支架上而终得到血管代替品,有望能解决小口径人工血管移植的远期通畅率低下的问题.本文将就组织工程血管领域的主要研究进展作一综述,包括种子细胞的来源、生物可降解支架、组织工程血管的培养技术以及纳米技术的应用.

  • 透明质酸在临床医学中的应用

    作者:张文强;黄岳山;支晓兴

    透明质酸是广泛分布在软结缔组织细胞外基质中的主要蛋白多糖,具有良好的生物相容性和生物降解性,在临床医学中具有广泛的应用.在医药领域,透明质酸及其衍生物作为优良的药物载体,能够达到药物增稠、药物缓释、促进药物透皮能力及靶向性的目的.透明质酸作为眼用制剂的媒介,能够明显提高药物生物利用度,且具有保湿润滑、抗炎和促修复作用;作为药物缓释载体,能够延缓药物释放速度,且对一些生物大分子药物还具有生物黏附作用;作为抗肿瘤药物的靶向载体,能够增加抗肿瘤药在肿瘤和淋巴结中的吸收和滞留时间,提高药物的疗效.

  • 动物源性胶原的生产、应用及其免疫原性

    作者:杜晓丹;方玉;奚廷斐;郭婷婷

    胶原材料具有生物力学性能好,免疫原性低等特点,被制造成为各种生物医学材料,在医疗器械产品制造领域有着不可替代的优势和相当广泛的应用.不同加工方法可以生产不同种类的胶原,虽纯胶原免疫原性较低,但要通过对实际生产过程的严格控制才能达到动物源性胶原的人用标准.胶原材料应用范围极其广泛,优势明显,但也存在许多不足之处.介绍动物源性胶原的结构、来源、特点、生产、应用及免疫原性,后对现今胶原研究中存在的问题亦即发展方向予以指出.

  • 几种颅骨修补材料的性能比较

    作者:白如玉;刘福军;卢广宇;王晓东;雷志刚;张寻蒙

    不同种类颅骨修补材料性能及临床应用效果不尽相同.金属材料早被应用于颅骨修补,但后来发现大多数金属物质可被腐蚀、可导热;非金属骨替代物中有机玻璃曾经被普遍应用但生物相容性差皮下积液感染率高,现在已经很少应用;骨水泥组织相容性好但不易被吸收,只应用于部分颅骨的修补;医用硅胶价格便宜,疗效好,但局部感染、材料裸露,术后外观欠佳;经过对比发现钛因其良好的生物相容性可与颅骨结合,使其应用得到了进一步研究,具备较好的应用前景,但也存在很多不足之处.随着生物工程研究的不断深入,骨组织工程、软骨组织工程、角膜组织工程等研究的深入将会为颅骨修补材料的开拓提供更广阔的前景.本文通过对不同种类颅骨修补材料性能及临床应用的比较,寻找生物相容性良好,临床效果佳的颅骨修补材料.

  • 人工肺的应用与肺膜材料性能评价

    作者:古群英;陈添华;宋晓林;高雪萍

    人工肺是在膜两侧进行气体、血液之间交换的场所,一般中空纤维是人工肺的主要部件.膜式人工肺是一种接近人体生理状态,较为理想的人工肺.它以人工合成的高分子材料制备的微孔膜作血液和气体的交换场所,完成人体的生理氧和过程,因而可暂时代替人体肺进行气体交换,用以支持生命以争取心、肺病变治愈及功能恢复的机会.膜式人工肺因选用的高分子材料、微孔膜的形式、血液和气体的流动方式的不同可有多种类型.但是至今还存在着未能解决的问题是与血液相接触的膜材料血液相容性仍不理想.本文从肺的功能出发,分析膜式人工肺的特点,探讨改善膜式人工肺血液相容性的方法及其发展方向

  • 三种高分子材料防止肌腱粘连的有效性评价

    作者:王爱琴;利春叶;贾赛雄;李晓文;傅爱凤;农春花

    粘连是结缔组织纤维带与相邻的组织或器官结合在一起而形成的异常结构.粘连是引发组织损伤后并发症的主要原因之一.影响肌腱修复后粘连程度的因素很多,在目前预防粘连的诸多方法中,选用高分子材料包裹肌腱周围,作为屏障防止腱周结缔组织长入,从而减轻粘连的发生,这也是目前防止肌腱粘连的重要途径之一.近年来用于预防粘连的各种可吸收高分子材料包括壳聚糖、透明质酸钠、聚乳酸等.这些材料可以制成溶液、薄膜、凝胶等不同形式使用;而且既可以单独使用,也可与抗粘连药物结合使用.本文旨在分析几丁糖、透明质酸钠、聚乳酸在防止肌腱粘连中的作用,探讨3种材料对防止肌腱粘连的有效性.

  • 银汞及玻璃离子材料充填乳磨牙200颗1年随访

    作者:吴小利

    选择患有双侧同名乳磨牙浅龋和中龋的儿童100例.年龄4~6岁,男37例,女63例.一侧用银汞充填,一侧用玻璃离子充填.1年后复查,比较两种材料的充填效果,并观察副反应及材料的生物相容性.银汞充填成功率为89%,玻璃离子充填成功率为96%.银汞合金充填失败病例中5例为银汞脱落,4例为边缘有继发龋和牙体部分折断或银汞部分脱落,1例为银汞松动,1例充填物完好,但有根尖病变.玻璃离子充填失败病例中3例为玻璃离子脱落,1例为边缘有继发龋和玻璃离子部分脱落.失败病例复诊时银汞充填有2例,玻璃离子充填有1例有继发龋者去除旧充填物重新充填,其余病例均已发展成深龋或有牙髓症状,行根管治疗术后充填.充填乳磨牙时,使用玻璃离子更适合.

  • 自固化磷酸钙糊剂与氢氧化钙修复乳磨牙髓室底穿孔的材料性能比较

    作者:杨廷勇;郑新

    对比观察自固化磷酸钙糊剂与氢氧化钙糊剂修复乳磨牙髓底穿孔效果.选择乳磨牙髓底穿孔病例95例106颗牙,按随机数字表法分为氢氧化钙组和自固化磷酸钙组,每组53颗患牙.经根管预备和碘伏髓腔消毒后3~5d,自固化磷酸钙组用注射式糊剂对根管和髓底穿孔处充填封闭,氧化锌粘固粉暂封1周,无症状后做永久性封闭;氢氧化钙组用氢氧化钙1份,氧化锌1份,碘仿少许与丁香油调成糊剂,将该材料置于穿底处后,常规根管充填,再用氧化锌粘固粉暂封,观察1周,无症状后去除部分氧化锌,作永久性封闭.结果表明,自固化磷酸钙组治疗髓底穿孔的成功率高于氢氧化钙组.术后0.5,1,1.5年自固化磷酸钙组成功率分别为92.45%,90%及86.67%;氢氧化钙组成功率分别为77.36%、70.21%及68.18%.两组间差异有显著意义(P<0.05).可见采用自固化磷酸钙治疗乳磨牙髓底穿孔较氢氧化钙优越,是较为理想的髓底修复材料.

  • 羟丙基壳聚糖纳米微粒的制备

    作者:谢宇;尚晓娴;蒋丰兴;胡金刚

    将壳聚糖与环氧丙烷反应,通过控制反应条件制备出取代度为0.56的羟丙基壳聚糖.改性后的羟丙基壳聚糖水溶性增强,将其配制成适当质量浓度的水溶液,利用离子凝胶法,与一定质量浓度的多聚磷酸钠反应,形成了粒径在500~700nm的羟丙基壳聚糖纳米微粒,透射电镜图像显示制备出的纳米微粒形状规整.

  • 液态栓塞材料Onyx栓塞脑动静脉畸形32例

    作者:于晓波;李少一;喻博;唐涛;刁宏宇;王成林

    目的: 回顾性分析新型非黏附性液体栓塞材料Onyx栓塞脑动静脉畸形32例的效果.方法: 32例脑动静脉畸形患者为2005-08/2007-08中国医科大学附属盛京医院收治,应用美国MTI公司生产的Onyx液态剂栓塞进行了36次血管内栓塞,栓塞供血动脉56支.栓塞后进行了6个月~2年的随访,了解病灶的闭塞情况,是否出现再出血、抽搐以及材料宿主反应.结果: 32例脑动静脉畸形栓塞后,病巢全部栓塞为8例(25%),栓塞>90%10例(31%),栓塞70%~90%9例(28%),栓塞50%~69%5例(16%).完成随访31例,1例失访,栓塞后死亡1例,再出血2例,1例微导留置,栓塞后仍有癫痫发作2例.结论: Onyx血管内栓塞脑动静脉畸形是完全、永久地闭塞病灶,其治疗周期短、微创、安全、并发症少.

  • 导航精确定位下经皮注入骨水泥椎体成形的特点

    作者:孙辉;白波;钱东阳;廖壮文;刘国强

    椎体骨质疏松压缩性骨折26例(31个椎体)应用导航技术行经皮椎体后凸成形术注入骨水泥,观察导航精确定位下骨水泥注入后的生物相容性反应.计算Beck值和Cobb值及手术前后目测类比评分的变化.结果表明,31个椎体注入骨水泥后椎体成形,无骨水泥向椎体前方和侧方渗漏,无椎体后方(椎管内)渗漏.无术中死亡及心脑血管系统急性不良反应发生,无脊髓和神经根急性损伤等副作用.术后疼痛减轻.可见导航技术定位准确,行经皮椎体后凸成形术注入骨水泥可行.

  • 胶原蛋白海绵作为多孔羟基磷灰石义眼台眶内植入包裹材料的可行性

    作者:廖洪斐;高桂平;刘静;张向荣

    选择本院行多孔羟基磷灰石义眼台植入的患者62例(62只眼),右眼33例,左眼29例;男41例,女21例;年龄10~55岁.分别用胶原蛋白海绵包裹多孔羟基磷灰石义眼台行Ⅰ期或Ⅱ期多孔羟基磷灰石义眼台眶内植入.所有患者均在植入后出现眼睑轻度肿胀,球结膜水肿,眼眶区胀痛症状.全部患者除1例失访外,其余随访时间大于6个月,1例在植入后早期出现小范围义眼台暴露,经低功率半导体激光照射后痊愈,其他患者均无感染、义眼台暴露、移位,且义眼活动度良好,外观满意.

  • 烤瓷冠材料粉尘颗粒分布的测试

    作者:刘睿;高宁;战德松;卫芳

    随着全瓷材料在口腔临床上的广泛应用,与瓷冠接触的技师及医师长期受到调磨瓷冠所产生粉尘的危害,粉尘中的微小颗粒将成为引起硅肺的可能.分析在调磨烤瓷牙中产生粉尘的颗粒大小,探讨接触烤瓷牙的医师及技师产生硅肺的可能性.将常规金刚砂车针调磨的烤瓷粉25g进行颗粒分布测试,以确定可能引起硅肺的颗粒所占百分比.结果表明,瓷粉粒度分布范围较宽,覆盖设备的检测范围为0.3~300μm.1.95μm以下占8.49%,2.28μm以下占9.95%,2μm以下占9%左右.可见调磨烤瓷牙的瓷粉颗粒有引起硅肺的可能.

  • 永磁性材料固位体基牙修复重度牙周病1年随访牙周组织状态

    作者:卫芳;战德松;王丁

    背景: 近年永磁性材料固位体已较多地用于上下颌多数牙缺失的固位中,可显著提高义齿的固位力,但用于重度牙周病与牙周组织的生物相容性还有待于进一步观察.目的: 观察重度牙周病全口覆盖义齿磁性材料固位体基牙,修复牙周组织1年后的组织相容性的状况.设计、时间及地点: 对比病例观察,于2007-01/2008-01在中国医科大学口腔医学院和民航总医院完成.对象:重度牙周病伴牙列缺损患者18例.采用日本生产的Magfit EX400磁性固位体和注射型寒天琼脂印模材;美国生产的齿科钴铬合金.方法: 患者上颌或下颌仅余留1~4个磨牙,选择1~2颗基牙安置磁性固位体,余牙作为覆盖基牙,共选择基牙32颗.患者先进行根管治疗,再经1~2个月的牙周治疗,使患牙情况相对稳定后行修复治疗.主要观察指标: 牙周治疗后3个月及磁性固位体修复后12个月观测基牙的菌斑指数、牙龈指数、牙周袋探诊深度、附着丧失的变化.结果: 磁性固位体修复后12个月菌斑指数和牙龈指数均低于牙周治疗后3个月,差异有显著性意义(P<0.05),牙周袋探诊深度和附着丧失比较差异无显著性意义(P>0.05).18例患者中1例义齿在磁性固位体设置处折裂,4例覆盖基牙龈缘处有炎症.无继发龋发生.结论: 重度牙周病伴牙列缺损患者全口覆盖义齿可以使用磁性固位体进行固位,1年后牙周组织状态良好,未发生生物相容性不良反应.

中国组织工程研究分期目录
期数
2019 01 02 03 04 05 06 07 08 17
2018 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36
2017 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36
2016 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
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2014 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 z1
2013 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
2010 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
2009 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
2008 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53
2007 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
2006 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48
2005 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48
2004 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36
2003 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32
2002 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
2001 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
2000 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
1999 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
1998 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
1997 01 02 03 04 05 06

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